Immunhistokemisk överensstämmelse mellan primära tumörer och lymfkörtelmetastaser av gastric neuroendokrin carcinoma

immunhistokemisk överensstämmelse mellan primära tumörer och lymfkörtelmetastaser av gastric neuroendokrin cancer Bild Sammanfattning
Bakgrund
Gastric neuroendokrina cancer (G-NEC) är en sällsynt, mycket elakartad tumör som uppvisar aggressiva tillväxt som leder till vaskulär invasion, fjärrmetastaser och extremt dålig prognos. Vi studerade de kliniskt patologiska fynd av sju patienter vid vårt institut att bättre i denna sjukdom.
Metoder
Sju fall av G-NEC identifierades bland 1,027 fall av magsäckscancer som genomgick gastrektomi på Kansai Rousai sjukhus mellan 2002 och 2010. vi studerade de patologiska och immunhistokemiska egenskaper hos gastriska neuroendokrina karcinom både den primära platsen och metastaserande lymfkörtlar.
Resultat
medel~~POS=TRUNC patientens ålder var 73 år (intervall 63 till 86 år). Det fanns inga kvinnor i denna serie. Den slutliga staging var Steg I i det ena fallet, steg II i två, steg III i två och steg IV i två. Sammanlagt 31 metastatiska lymfkörtlar hittades i dessa patienter. Denna studie visade att förhållandet mellan neuroendokrina celler var likartad mellan de primära och metastaser, som tenderade att visa samma uttrycksmönster neuroendokrina markörer.
Slutsatser
metastatiska lymfkörtlar visade heterogena immunhistokemiska uttrycksmönster liknar de primära platserna . G-NEC långt framme vid diagnos och snabbt når lymfkörtlarna behåller sin heterogenitet, som bär en sämre prognos än vanligt magsäckscancer.
Mini abstrakt
G-NEC växer snabbt och sprider sig till lymfkörtlarna, behåller sin patologiska och immunhistokemisk heterogenitet även på metastaser.
Nyckelord
Ki67 Immunohistokemi heterogenitet bakgrund
Gastric neuroendokrina cancer (G-NEC) är en sällsynt tumör (0,1 till 0,2% av alla gastriska karcinom) med högmaligna biologiska beteende uppvisar aggressiva tillväxt som leder till vaskulär invasion, fjärrmetastaser och extremt dålig prognos. 2010 WHO: s klassificering definierar väl differentierade endokrina tumörer /karcinom som neuroendokrina tumörer (NET), och dåligt differentierade endokrina karcinom som neuroendokrina karcinom (Pass). Jämfört med väl differentierade gastric NET, G-NEC har mycket malignt beteende och dålig prognos, men deras prognostiska markörer och terapeutiska strategier har ännu inte definierats. Review, en definitiv diagnos av G-NEC tillhandahålls av immunhistokemisk undersökning med neuroendokrina markörer , såsom synaptofysin (SYN), kromogranin A (CGA), CD56 och neuronspecifikt enolas (NSE). Det har föreslagits att försiktighet bör iakttas vid diagnos på grund av variationen visas av G-NEC både histologiska morfologi och immunhistokemisk uttryck. Emellertid har inga rapporter undersökt förhållandet mellan uttrycksmönstret vid den primära platsen och att vid metastaserande platser som både histologisk morfologi och immunhistokemisk uttryck. I denna studie undersökte vi de primära tumörer och alla metastaserande lymfkörtlar, och granskade sammanslutning av uttrycksmönster med hjälp av immunohistokemisk undersökning.
Metoder
Patienter och prover
Sju fall av G-NEC identifierades bland 1,027 fall av magsäckscancer som genomgick gastrektomi på Kansai Rousai sjukhus mellan 2002 och 2010 (0,68%). Alla patienter gav skriftligt informerat samtycke för klinisk-patologisk utvärdering.
Tabell 1 visar de kliniskt patologiska egenskaper hos dessa patienter. Medianåldern var 73 år (intervall 63 till 86 år). Det fanns inga kvinnor i denna serie. Samtliga patienter genomgick gastrektomi med regional lymfkörtel dissekering och i mål 4, ytterligare leverresektion utförs för synkron lever metastasis.Table en Patienternas egenskaper
Patient nr
Ålder
Läge
Brutto typ
Tumörstorlek storlek~~POS=HEADCOMP (cm)
Preoperativ diagnos
Operation
R
en
63
L
3
13
tub2
Distal gastrektomi
R2 2
71
M 2
2 Review por1 > tub2
Total gastrektomi
R0
3
71
M
3
13
NEC
Distal gastrektomi
R1 4
86
M
2 3
tub2 > por1 > por2
Distal gastrektomi + hepatektomi
R1
5
74
M 2
9
NEC
Distal gastrektomi
R0
6
69
L
3
3
tub2
Distal gastrektomi
R0
7
77
M
5
6
NEC
Distal gastrektomi
R0
NEC, neuroendokrina cancer; por1, dåligt differentierade adenokarcinom, fast typ; por2. dåligt differentierad adenokarcinom, icke-fast typ; R, Resectability; tub2, måttligt differentierad rörformiga adenokarcinom.
Immunhistokemisk färgning
Alla utskurna magar och lymfkörtlar fixerades i 10% neutral formalin, och sedan, hela tumören steg-cut till en bredd av 4-5 mm. Prover inbäddades i paraffin, skars i 4 | im sektioner och färgades med hematoxylin och eosin. En immunhistokemisk procedur med hjälp av EnVision systemet (DakoCytomation, Glostrup, Danmark) användes som tidigare fastställts. Immunhistokemisk färgning undersöktes i alla block av den maximala uppdelad ytan av den primära platsen och alla block av metastaserande lymfkörtlar i varje enskilt fall. Vi gick igenom den histologi av tumören på hematoxylin och eosin fläckar och utvärderat ett uttryck för SYN, CGA, CD56 och NSE. Vi undersökte inte bara primära tumörer, men även 236 lymfkörtlar, som vi identifierat 31 metastatiska lymfkörtlar som härrör från fem patienter. Den immunhistokemiska uttryck för varje antikropp definierades enligt följande: - (< 5%), 1+ (5 till 9%), 2+ (10 till 49%) och 3+ (över 50%). Förhållandet av tumörområdet med positivitet för varje markör utvärderades under hela den maximala dimensionen av de primära tumörer och metastatiska lymfkörtlar. Positivitet definierades som en dimension förhållande uttrycks överstiger 10% (över 2+). Följande antikroppar användes: anti-synaptophysin och anti-CD56 köptes från Novocastra Laboratories Ltd. (Newcastle upon Tyne, UK), och anti-kromogranin A och anti-NSE köptes från Dako (Glostrup, Danmark). Den Ki67 märkning index också uppskattade i blocket inklusive den djupaste delen av primärtumören.
Resultat
Brutto resultat och mellan
Fem tumörer som ligger i mitten av magen, och de återstående två var i den undre magen (Tabell 1). Ett fall var en T1b (submucosa) tumör, var fyra fall T3 (subserosa), en var T4A (penetration av serosa) och en var T4B (invasion till närliggande strukturer) (tabell 2). Lymfkörtel metastas hittades i fem fall. Den slutliga iscensättning var Stage IA i ett fall, steg III A i ett, Stage IIB i en, Steg IIIA i ett, Stage IIIB i ett och steg IV i två, enligt den sjunde amerikanska kommittén för cancer (AJCC) TNM staging klassificering . Tumörerna hade växt till en medianstorlek av 6 cm (intervall 2 till 13 cm) i den största dimensionen. Grovt, tumören var typ tre i tre fall, typ 2 i tre och typ 5 i one.Table 2 kliniskt patologiska fynd av primärtumör och opererande lymfkörtel
Pt Ingen
patologiska Stage

Metastatisk förhållandet mellan dissekerade lymfkörtlar
histologi av lymfkörtelmetastaser



vid Ad
Samtidig Ad och NEC
NEC
n
(%) Review n
(%) Review n
(%) Review n
(%)
1
T4b
N3a
M0
H0
P0
CY1
IV
8/16
(50)
0
(0)
0
(0)
8
(100)
2
T3
N2
M0
H0
P0
CY0
IIIA
5/26
(19)
0
(0)
0
(0)
5
(100)
3
T3
N0
M0
H0
P0
CY0
IIA
0/42
(0)
-
-
4
T3
N1
M0
H1
P0
CY0
IV
1/31
(3)
0
(0)
0
(0)
1
(100)
5
T3
N1
M0
H0
P0
CY0
IIB
2/52
(4)
0
(0)
0
(0)
2
(100)
6
T4a
N3b
M0
H0
P0
CY0
IIIC
15/25
(60)
12
(80)
3
(20)
0
(0)
7
T1b
N0
M0
H0
P0
CY0
IA
0/44
(0)
-
-
-
Expression av immunhistokemisk färgning mellan de primära och metastatiska platser
Endast tre fall var korrekt diagnosen G-NEC preoperativt. Vi sammanfattade de olika histologiska mönster av primära tumörer och lymfkörtlar i tabell 3. Enligt WHO klassificering, fem av de sju tumörerna var stora celltyper och de andra var småcellig subtyper. De delas in i fem rena neuroendokrina karcinom och två tumörer i kombination med adenocarcinom. Vi undersökte totalt 236 lymfkörtlar erhölls från sju patienter. Bland dem, 31 positiva noder ingår 12 noder som visar ren adenokarcinom, 3 visar både adenokarcinom och neuroendokrina cancer, och 16 visar ren neuroendokrina cancer. Medan fallen med ren NEC hade lymfkörtel metastas av ren NEC (exempelvis fall 1 visas i figurerna 1 och 2), hade de två återstående fallen med både adenokarcinomceller och neuroendokrina karcinomceller varie lymfkörtel metastas. Fall 4 hade ren NEC, och mål 6 hade både rena adenokarcinom noder och samtidig noder. Dessutom kontrolleras vi de primära och lymfkörtel subtyper genom färgning för neuroendokrina markörer, och alla primära tumörer var starkt färgade av SYN och CD56. De flesta fall visade olika uttrycksmönster som liknade i både de primära och metastaser. Den enlighet med positivitet mellan de primära platserna och lymfkörtlar var extremt hög: 80% i SYN, 100% i CGA, 60% i CD56 och 80% i NSE. Dessutom var märkningsindex Ki67 hög, över 20% i alla cases.Table 3 histologi och immunhistokemiska resultaten av både primärtumören och metastaserande lymfkörtlar
patienten inte.
Primärtumör
lymfkörtelmetastaser
Ki-6 7 märkningsindex (%)
Mitotiska räkningar (/10HPF)
histologi
Förhållandet mellan neuroendokrin cell (%)
Expression av neuroendokrina markörer
Histlogy
Expression av neuroendokrina markörer


SYN
CGA
CD56
NSE
SYN
CGA
CD56

NSE
en
SC
100
3+ -
3+
3+
SC
3+ -
3+
3+
60
60 till 70
2
LC
100
3+
3+
2+
1+
LC
1+
3+
1+
2+
20
20
3
LC
100
3+
-
2+
3+

80 80-90 4
LC > tub2
90
3+
3+
3+ -
LC
3+
3+
2+ -

30 80-90
5
LC
100
3+ -
3+ -
LC
3+ Omdömen -
3+ -
70
100-110
6
LC > tub2 > por1
60
3+
3+
3+
1+
ren Ad
2+ -
- -
70
20
LC + Ad
3+
2+
1+ -
7
SC
100
3+
-
2+
3+
80
100-110
Expression positivitet definierades enligt följande; - (≪ 5%), 1+ (5-9%), 2+ (10-49%), och 3+ (över 50%). Ad, adenokarcinom; CGA, kromogranin A; HPF, hög effekt fält; LC, stor cell; NSE, neuronspecifikt enolas; SC, småcellig; SYN, synaptofysin.
Figur 1 Immunhistokemisk uttryck för neuroendokrina markörer i primärtumör (mål 1). a) synaptophysin, b) kromogranin A, c) CD56, d) neuronspecifikt enolas. Tumörceller variabelt uttryckt neuroendokrina markörer.
Figur 2 Immunhistokemisk uttryck för neuroendokrina markörer i metastaserande tumörceller i lymfkörtlarna (fall 1). a) synaptophysin, b) kromogranin A, c) CD56, d) neuronspecifikt enolas. Uttrycksmönster av neuroendokrina markörer i metastatiska tumörer liknade de i den primära tumören.
Klinisk kurs
Adjuvant kemoterapi, inklusive S-1, infördes på alla fall, men en i ett tidigt skede. Median behandlingstiden var 8,1 månader (intervall 0,9 till 24,5 månader). Under behandlingsförloppet, det fanns två upprepningar (mål 1 och 4) och en död tre månader efter incurative kirurgi (Fall 1). Huvudstället för återfall var levern, följt av peritoneum. Kemoterapi infördes efter lever återfall i mål 4. Patienten svarade bra på behandlingen och uppnått lång, total överlevnad, 21 månader, trots sin framskridet stadium. Den treåriga sjukdomsfri överlevnad var 64,3%, och den treåriga totala överlevnaden var 83,8% efter operationen.
Diskussionen
NEC indelas i rena tumörer och komposit tumörer blanda adenocarcinomatous differentiering [1, 2 ]. Kriterier för klassificering i NEC kategorier är att över 30% av cellerna visa funktionerna i neuroendokrin differentiering [2]. NEC har aggressiva biologiska beteende och uppvisar snabb spridning [1-7].
Vi studerade egenskaperna hos G-NEC genom patologisk och immunohistokemisk undersökning av både de primära platserna och metastatiska lymfkörtlar. I denna studie fann vi en blandad population av rena neuroendokrina celler, adenokarcinom celler och deras mellan celler som har de morfologiska egenskaperna hos adenocarcinom med positivitet för neuroendokrina markörer. Andra studier har rapporterat att NEC visar stark färgning för neuroendokrina markörer, såsom CGA, SYN, NSE och CD56 [1-3, 5, 7]. I vår serie, positivitet hastigheten för CGA, SYN, NSE och CD56 var 42,9%, 100%, 85,7% och 72,7%, respektive. Bland dessa markörer, tumörer uppvisade den högsta positivitet för SYN och lägsta positivitet för CGA. CGA är en markör för neuroendokrina granulat och en vägledande faktor av differentiering till neuroendokrina celler. Den dåliga differentiering i våra fall förhindrat tillräcklig expression av granulat.
Vi fann att tumörerna varierade i immunohistokemisk uttryck. I en tumör, medan vissa celler med hög CGA uttryck visade negativitet för andra markörer, vissa celler utan CGA uttryck visade diffus hög positivitet för andra markörer. Dessutom, förutom neuroendokrina celler positiva för SYN vissa adenokarcinomceller uppvisade positivitet för SYN bland komposit-typ tumörer. Detta tyder på histologiska och immunophenotypical kontinuitet mellan adenocarcinom komponenten och NEC komponenten.
Dessutom, med fokus på lymfkörtlar, fann vi att fall med rena neuroendokrina primära platser hade metastatiska lymfkörtlar med rena neuroendokrina celler (tabell 3). Variationen i immunohistokemiska uttrycksmönster i den primära platsen hölls även i metastaserande rena endokrina celler. I mål 6, en av de två fallen med kombinerade primära tumörer, sammansatt metastas av NEC och adenokarcinom ses i vissa lymfkörtlar, och rent adenocarcinom metastaser sågs i andra noder. Tumören visade konsekvens i både histologiska typ och immunhistokemisk uttryck mellan den primära platsen och metastaserande lymfkörtlar. Detta resultat ledde till en hypotes att det sätt på metastaser. Det vill säga, klustrade celler, inklusive adenokarcinom och neuroendokrina celler med olika immunfenotyper, spridit sig till lymfkörtlarna och samexisterat där. Dessutom, lymfknutor komposit-typ tumörer uttryckte en något annorlunda färgningsmönster. Celler som inte genomgår tillräckligt mogen differentiering i primära platser kan differentiera till neuroendokrina celler eller utveckla varierande immunhistokemisk uttryck. I denna serie, det fanns inget klart samband mellan immunhistokemisk uttryck och kliniskt utfall. Fall med låga märkningsindex Ki67 hade en god prognos. Till exempel i mål 2, för vilka märkningen index Ki67 var 20%, uppnått den längsta överlevnads sikt 55 månader. Fall 4, för vilka märkningen index Ki67 var 30%, framgångsrikt behandlats med kirurgi och kemoterapi och överlevde i 21 månader trots fjärrmetastaser. Begränsningar av denna studie inkluderar korta uppföljning och små provmängder mestadels består av rena typer. Därför behövs stora och långsiktiga studier för att dra en definitiv slutsats.
Slutsats
Sammanfattningsvis rapporterade vi de patologiska och immunhistokemiska egenskaper hos neuroendokrina karcinom både de primära platserna och metastatiska lymfkörtlar. Cellerna växer snabbt och metastasera till lymfkörtlar behåller sin heterogenitet även vid metastaserande platser
Förkortningar
G-NEC.
Gastric neuroendokrina cancer
NET:
neuroendokrina tumörer
NEC:
neuroendokrina karcinom
SYN:
synaptophysin


CGA:
kromogranin A
NSE:
neuronspecifikt enolas
por1:
dåligt differentierad adenokarcinom, fast typ
por2
dåligt differentierade adenokarcinom, icke-solid typ
R:
Resectability
tub2
måttligt differentierad rörformiga adenokarcinom
AJCC
amerikanska kommittén för cancer

Annons:
adenocarcinom
HPF:
hög effekt fält
LC:
stora cell
SC.
småcellig
förklaringar
författar~~POS=TRUNC original lämnat filer för Images of Nedan finns länkar till författarnas original lämnat filer för bilder. 12957_2012_1057_MOESM1_ESM.tiff Författaroriginalfilen för figur 1 12957_2012_1057_MOESM2_ESM.tiff Författaroriginalfilen för figur 2 Konkurrerande intressen
Författarna förklarar att de inte har några konkurrerande intressen.
Författarnas bidrag
CU och ST utformades av läsa på. ST och SN övervakade manuskriptet skrift. SN utförde patologiska och immunohistokemisk utvärdering och poängsättning. AT, HM, TK, SN, RS, KN, YT och TK samlade fall och klinisk information. CU utfört litteraturgenomgången och skrev manuskriptet. AT och SN utförde den statistiska analysen. Alla författare läst och godkänt den slutliga manuskriptet.

• Glukosabsorption och magtömning i kritisk sjukdom
• Ett fall-kontrollstudie på effekten av apolipoprotein E-genotyper på magcancer risk och progression