Immunohistochemische consistentie tussen primaire tumoren en lymfekliermetastasen van maag neuro-endocriene carcinoma

Immunohistochemische consistentie tussen primaire tumoren en lymfekliermetastasen van maag neuro-endocriene carcinoma
Abstracte achtergrond
Gastric neuro-endocriene carcinoom (G-NEC) is een zeldzame, zeer kwaadaardige tumor die agressieve groei leidt tot vasculaire invasie, metastasen op afstand vertoont en zeer slechte prognose. We bestudeerden de klinisch-pathologische bevindingen van de zeven patiënten in ons instituut om beter in het kader van deze ziekte.
Methods
Zeven gevallen van G-NEC werden geïdentificeerd onder de 1027 gevallen van maagcarcinoom die gastrectomie ondergingen bij Kansai Rousai Hospital tussen 2002 en 2010. we bestudeerden de pathologische en immunohistochemische kenmerken van maag-neuro-endocriene carcinomen op zowel de primaire plaats en metastatische lymfeklieren.
Resultaten
de gemiddelde leeftijd van de patiënten was 73 jaar (range 63-86 jaar). Er waren geen vrouwen in deze serie. De laatste enscenering was Fase I in het ene geval, fase II in twee fase III in twee en Stage IV in twee. Een totaal van 31 metastatische lymfeknopen bleken bij deze patiënten. Deze studie toonde aan dat de verhouding van neuroendocriene cellen was vergelijkbaar tussen de primaire en metastasen, die neiging om dezelfde expressiepatronen van neuro-endocriene markers vertonen.
Conclusies
metastatische lymfeknopen lieten heterogene immunohistochemische expressiepatronen vergelijkbaar met de primaire locaties . G-NEC is ver gevorderd bij de diagnose en snel bereikt de lymfeknopen met behoud van zijn heterogeniteit, met een slechtere prognose dan gewone maagkanker.
Mini abstract
G-NEC groeit snel en metastasizes naar de lymfeklieren, met behoud van zijn pathologische en immunohistochemische heterogeniteit zelfs ten metastasen.
Sleutelwoorden
Ki67 Immunohistochemie heterogeniteit Achtergrond
Gastric neuroendocriene carcinoom (G-NEC) is een zeldzame tumor (0,1 tot 0,2% van maagcarcinomen) met zeer kwaadaardige biologisch gedrag vertonen agressieve groei die leidt tot vasculaire invasie, metastasen op afstand en extreem slechte prognose. De 2010 WHO-classificatie definieert goed gedifferentieerde endocriene tumoren /carcinomen als neuro-endocriene tumoren (NET), en slecht gedifferentieerde endocriene carcinomen als neuro-endocriene carcinomen (NEC). Vergeleken met goed gedifferentieerde NET maag, G-NEM hebben zeer kwaadaardige gedrag en slechte prognose, maar hun prognostische merkers en therapeutische strategieën zijn nog niet gedefinieerd.
Een definitieve diagnose van G-NEC wordt door immunohistochemisch onderzoek met endocriene markers zoals synaptofysine (SYN), chromogranine A (CGA), CD56 en neuron-specifiek enolase (NSE). Er is voorgesteld dat de zorg moet worden betracht bij de diagnose als gevolg van de getoond door G-NEC's in zowel histologische morfologie en immunohistochemische expressie variatie. Echter geen rapporten de relatie tussen het expressiepatroon op de primaire locatie en de metastasen als zowel histologische morfologie en immunohistochemische expressie onderzocht. In deze studie hebben we gekeken naar de primaire tumoren en al gemetastaseerde lymfeklieren, en de vereniging van expressiepatronen beoordeeld door middel van immunohistochemische onderzoek.
Methoden
Patiënten en monsters
Zeven gevallen van G-NEC werden geïdentificeerd onder 1027 gevallen van maagcarcinoom die gastrectomie ondergingen bij Kansai Rousai Hospital tussen 2002 en 2010 (0,68%). Alle patiënten gaven schriftelijk toestemming voor klinisch-pathologische evaluatie.
Tabel 1 geeft de klinisch-pathologische kenmerken van deze patiënten. De mediane leeftijd was 73 jaar (range 63-86 jaar). Er waren geen vrouwen in deze serie. Alle patiënten ondergingen gastrectomie met regionale lymfklierdissectie, en in de zaak 4, werd extra lever resectie uitgevoerd voor synchrone lever metastasis.Table 1 kenmerken van patiënten
Patient No.
Leeftijd
Locatie
Gross soort
Tumor grootte (cm)
preoperatieve diagnostiek
Operation
R
1
63
L
3
13
tub2
distale gastrectomie
R2 2
71
M-verhuur 2 2
por1 > tub2
Totaal gastrectomy
R0
3
71
M
3
13
NEC
distale gastrectomie
R1 verhuur 4
86
M 2
3
tub2 > por1 > por2
distale gastrectomie + hepatectomy
R1
5
74
M 2
9
NEC
distale gastrectomie
R0
6
69
L
3
3
tub2
distale gastrectomie
R0
7
77
M
5
6
NEC
distale gastrectomie
R0
NEC, neuro-endocriene carcinoma; por1, slecht gedifferentieerd adenocarcinoom, stevige soort; por2. slecht gedifferentieerd adenocarcinoom, niet-vaste soort; R, resectabiliteit; tub2, matig gedifferentieerd adenocarcinoom buisvormig.
Immunohistochemische kleuring Leer Alle uitgesneden magen en lymfeklieren in 10% neutrale formaline werden gefixeerd en vervolgens de gehele tumor stap gesneden tot een breedte van 4-5 mm. Monsters werden ingebed in paraffine, gesneden in 4-um secties en gekleurd met hematoxyline en eosine. Een immunohistochemische procedure met behulp van het EnVision systeem (DakoCytomation, Glostrup, Denemarken) was werkzaam als eerder is vastgesteld. Immunohistochemische kleuring werd in alle blokken van de maximale verdeelde oppervlak van de primaire plaats en alle blokken van de metastatische lymfeknopen telkens onderzocht. Hebben we de histologie van de tumor op hematoxyline en eosine vlekken en evalueerde de uitdrukking van SYN, CGA, CD56 en NSE. We onderzochten niet alleen de primaire tumor maar ook 236 lymfeknopen, waaruit identificeerden we 31 metastatische lymfeknopen afgeleid uit vijf patiënten. De immunohistochemische expressie van elk antilichaam werd als volgt gedefinieerd: - (< 5%), 1+ (5-9%), 2+ (10 tot 49%) + 3 (meer dan 50%). De verhouding van de tumor met positiviteit van iedere merker werd geëvalueerd gedurende de maximale afmeting van de primaire tumoren en metastatische lymfeknopen. Positiviteit werd gedefinieerd als een dimensie verhouding van expressie van meer dan 10% (meer dan 2+). De volgende antilichamen werden gebruikt: anti-synaptofysine en anti-CD56 gekocht bij Novocastra Laboratories Ltd. (Newcastle upon Tyne, VK), en anti-chromogranine A en anti-NSE gekocht bij DakoCytomation (Glostrup, Denemarken). De Ki67 labeling index werd ook geschat in het blok met inbegrip van het diepste deel van de primaire tumor.
Resultaten
Gross bevindingen en staging
Vijf tumoren werden in het midden van de maag, en de overige twee waren in de onderbuik (tabel 1). Eén geval was T1b (submucosa) tumor, vier gevallen waren T3 (subserosa), was T4a (penetratie van serosa) en was T4b (invasie van aangrenzende structuren) (tabel 2). Lymfeklier metastase werd gevonden in vijf gevallen. De laatste enscenering was Stage IA in één geval, Stage IIA in een, Stage IIB in een, Stage IIIA in een, Stage IIIB in één en fase IV in twee, volgens de zevende Amerikaanse Joint Committee on Cancer (AJCC) TNM staging classificatie . De tumoren gegroeid tot een gemiddelde grootte van 6 cm (bereik 2 tot 13 cm) in de grootste afmeting. In grote trekken, de tumor was Type 3 in drie gevallen, Type 2 in drie en Type 5 in one.Table 2 clinicopathologische bevindingen van de primaire tumor en gereseceerd lymfeklieren
Pt Geen
pathologisch stadium

uitgezaaide verhouding van ontleed lymfeklieren
histologie van lymfekliermetastasen




Ad
Gelijktijdig Ad en NEC Gids NEC
n
(%)
n
(%)
n
(%)
n
(%)
1
T4b
N3a
M0
H0
P0
CY1
IV
8/16
(50)
0
(0)
0
(0)
8
(100)
2
T3
N2
M0
H0
P0
CY0
IIIA
5/26
(19)
0
(0)
0
(0)
5
(100)
3
T3
N0
M0
H0
P0
CY0
IIA
0/42
(0)
-
-
4
T3
N1
M0
H1
P0
CY0
IV
1/31
(3)
0
(0)
0
(0)
1
(100)
5
T3
N1
M0
H0
P0
CY0
IIB
2/52
(4)
0
(0)
0
(0)
2
(100)
6
T4a
N3b
M0
H0
P0
CY0
IIIC
15/25
(60)
12
(80)
3
(20)
0
(0)
7
T1b
N0
M0
H0
P0
CY0
IA
0/44
(0)
-
-
-
Expressie van immunohistochemische kleuring tussen de primaire en metastatische plaatsen
Slechts drie gevallen correct werden preoperatief gediagnosticeerd als G-NEC. We samengevat de verschillende histologische patronen van de primaire tumoren en lymfeklieren in Tabel 3. Volgens de WHO classificatie, vijf van de zeven tumoren waren grootcellig subtypes en anderen waren kleincellig subtypes. Zij werden ingedeeld in vijf zuivere neuroendocriene carcinomen en twee tumoren gecombineerd met adenocarcinoom. We onderzochten in totaal 236 lymfeklieren verkregen van zeven patiënten. Onder hen, 31 positieve klieren opgenomen 12 nodes tonen pure adenocarcinoom, 3 toont zowel adenocarcinoom en neuro-endocriene carcinoma en 16 tonen pure neuro-endocriene carcinoom. Terwijl de gevallen zuivere NEC had lymfeklier zuivere NEC (bijvoorbeeld Case 1 getoond in figuren 1 en 2) waren de twee overige gevallen zowel adenocarcinoma cellen en endocriene carcinoomcellen lymfeklier gevarieerd. Case 4 had pure NEC en Case 6 had zowel pure adenocarcinoom knooppunten en gelijktijdig nodes. Daarnaast wordt geverifieerd we de primaire en lymfeklieren subtypen door kleuring voor neuro-endocriene markers, en alle primaire tumoren waren sterk gekleurd door SYN en CD56. Meestal vertoonden verschillende expressiepatronen die vergelijkbaar zijn in zowel de primaire als metastatische plekken waren. De toekenning van positiviteit tussen de primaire locaties en lymfeknopen was zeer hoog: 80% in SYN, 100% in CGA, 60% voor CD56 en 80% in NSE. Bovendien is de Ki67 etikettering index was hoog, meer dan 20% in alle cases.Table 3 histologie en immunohistochemische bevindingen van zowel de primaire tumor en metastatische lymfeklieren
patiënt niet.
Primaire tumor
lymfkliermetastasen
Ki-6 7 labeling index (%)
Mitotische tellingen (/10HPF)
histologie
Ratio van neuro-endocriene cel (%)
Expressie van neuro-endocriene markers
Histlogy
Expressie van neuro-endocriene markers


SYN
CGA
CD56
NSE
SYN
CGA
CD56

NSE
1
SC
100
3+
- 3+
3+
SC
3+
- 3+
3+
60
60 tot 70
2
LC
100
3+
3+
2+
1+
LC
1+
3+
1+
2+
20
20
3
LC
100
3+
-
2+
3+
80
80-90 verhuur 4
LC > tub2
90
3+
3+
3+
- LC
3+
3+
2+
- 30
80-90
5
LC
100
3+
- 3+
- LC
3+
-
3+
- 70
100-110
6
LC > tub2 > por1
60
3+
3+
3+
1+
pure Ad
2+
- - -
70
20
LC + Ad
3+
2+
1+
- 7
SC
100
3+
-
2+
3+
80
100-110
Expression positiviteit werd als volgt gedefinieerd; - (≪ 5%), 1+ (5-9%), 2+ (10-49%), en 3+ (meer dan 50%). Ad, adenocarcinoom; CGA, chromogranine A; HPF, hoog vermogen velden; LC, grote cel; NSE, neuron-specifiek enolase; SC, kleincellige; SYN, synaptofysine.
Figuur 1 Immunohistochemische uitdrukking voor neuro-endocriene markers in primaire tumor (Geval 1). a) synaptofysine, b) chromogranine A, c) CD56, d), neuron-specifiek enolase. Tumorcellen variabel uitgedrukt neuro-endocriene markers.
Figuur 2 Immunohistochemische uitdrukking voor neuro-endocriene markers in uitgezaaide tumorcellen in lymfeklieren (Geval 1). a) synaptofysine, b) chromogranine A, c) CD56, d), neuron-specifiek enolase. Expressiepatronen van metastatische merkers in neuroendocriene tumoren waren gelijk aan die in de primaire tumor.
Beloop
adjuvante chemotherapie, waaronder S-1, werd aan elk geval maar één in een vroeg stadium. De mediane behandelingsduur was 8,1 maanden (range 0,9-24,5 maanden). Tijdens de kuur, waren er twee herhalingen (zaken 1 en 4) en één dode drie maanden na incurative chirurgie (Geval 1). De belangrijkste plaats van terugval was de lever, gevolgd door het peritoneum. Chemotherapie werd ingevoerd na levertransplantatie herhaling in zaak 4. De patiënt goed gereageerd op de behandeling en behaalde lang, de totale overleving, 21 maanden, ondanks zijn vergevorderd stadium. De drie-jaars ziektevrije overleving was 64,3%, en de drie-jaars totale overleving bedroeg 83,8% na de operatie.
Discussie
NEC's worden ingedeeld in pure tumoren en composite tumoren vermengen adenocarcinomatous differentiatie [1, 2 ]. Criteria voor de indeling in categorieën NEC is dat meer dan 30% van de cellen weer te geven van de kenmerken van neuro-endocriene differentiatie [2]. NEC's hebben agressief biologisch gedrag vertonen en snelle verspreiding [1-7].
We bestudeerden de kenmerken van G-NEC's door middel van pathologisch en immunohistochemisch onderzoek van zowel de primaire locaties en metastatische lymfeklieren. In deze studie hebben wij een gemengd populatie van zuivere neuroendocriene cellen, adenocarcinoma cellen en hun tussenliggende cellen die de morfologische kenmerken van adenocarcinoom hebben positiviteit te neuroendocriene markers. Andere studies hebben gemeld dat NEC: sterke kleuring voor neuro-endocriene markers, zoals CGA, SYN, NSE en CD56 [1-3, 5, 7]. In onze serie, de positiviteit tarief voor CGA, SYN, NSE en CD56 was 42,9%, 100%, 85,7% en 72,7% respectievelijk. Onder deze markers, tumoren toonde de hoogste positiviteit voor SYN en laagste positiviteit voor CGA. CGA is een marker voor neuro-endocriene korrels en een indicatieve factor van differentiatie aan neuro-endocriene cellen. De armen differentiatie in ons geval voorkomen voldoende expressie van granules.
Wij vonden dat de tumoren varieerden in immunohistochemische expressie. In een tumor, terwijl sommige cellen met een hoge CGA expressie toonde negativiteit voor andere markers, sommige cellen zonder CGA expressie toonde diffuse hoge positiviteit voor andere markers. Bovendien, naast neuroendocriene cellen positief voor SYN sommige adenocarcinoma cellen vertoonden positiviteit voor SYN onder composiet-type tumoren. Dit geeft histologische en immuunfenotypische continuïteit tussen adenocarcinoom component en de component NEC.
Bovendien gericht op lymfklieren, vonden we dat gevallen pure neuroendocriene primaire locaties hadden metastatische lymfeknopen met zuiver endocriene cellen (Tabel 3). De variatie in immunohistochemische expressiepatronen van de primaire plaats is zelfs in de metastatische zuivere endocrine cellen gehandhaafd. In zaak 6, een van de twee gevallen met gecombineerde primaire tumoren samengestelde metastase van NEC en adenocarcinoom werd waargenomen in lymfklieren en zuivere metastase adenocarcinoom werd gezien in andere knooppunten. De tumor bleek consistentie in zowel histologische type en immunohistochemische expressie tussen de primaire site en de metastatische lymfeklieren. Dit resultaat leidde tot een hypothese over de wijze van metastase. Dat wil zeggen, geclusterd cellen, met inbegrip van adenocarcinoom en neuroendocriene cellen met gevarieerde immunofenotypes, verspreid naar de lymfeklieren en coëxisteerden daar. Bovendien lymfeknopen van composiet-type tumoren expressie een iets ander kleurpatroon. Cellen die niet volwassen genoeg differentiatie in primaire locaties ondergaan kunnen differentiëren in neuro-endocriene cellen of gevarieerd immunohistochemische expressie te ontwikkelen. In deze serie was er geen duidelijk verband tussen immunohistochemische expressie en klinische uitkomst. Gevallen met lage Ki67 labeling indices had een goede prognose. Bijvoorbeeld, Case 2, waarvoor de Ki67 etikettering index was 20%, bereikte de langste overleving termijn 55 maanden. Case 4, waarbij het etiket Ki67 index was 30%, werd met succes behandeld met chirurgie en chemotherapie en overleefde 21 maanden ondanks metastases. Beperkingen van deze studie omvatten korte duur van de follow-up en kleine steekproef voornamelijk samengesteld uit pure types. Daarom worden op grote schaal en lange termijn studies nodig zijn om een ​​definitieve conclusie te trekken.
Conclusie
Kortom, we meldde de pathologische en immunohistochemische kenmerken van de neuro-endocriene carcinomen bij zowel de primaire locaties en metastatische lymfeklieren. De cellen groeien snel en uitzaaiingen naar de lymfeklieren behoud van hun heterogeniteit zelfs op het metastatische locaties
Afkortingen
G-NEC:.
Gastric neuro-endocriene carcinoma
NET's:
neuro-endocriene tumoren
NEC:
neuro-endocriene carcinomen
SYN:
synaptophysine


CGA:
chromogranine A
NSE:
neuron enolase
por1:
slecht gedifferentieerd adenocarcinoom, stevige soort
por2:
slecht gedifferentieerd adenocarcinoom, niet-vaste soort
R:
resectabiliteit
tub2:
matig gedifferentieerd buisvormige adenocarcinoom
AJCC: of American Paritair Comité voor de Cancer

Ad:
adenocarcinoom
HPF:
high power velden
LC:
large cel
SC:.
kleincellig
verklaringen
Authors 'originele ingediende dossiers voor afbeeldingen
Hieronder staan ​​de links naar de oorspronkelijke auteurs 'ingediende dossiers voor afbeeldingen. 'Originele bestand voor figuur 1 12957_2012_1057_MOESM2_ESM.tiff Authors' 12957_2012_1057_MOESM1_ESM.tiff Auteurs originele bestand voor figuur 2 Concurrerende belangen Ondernemingen De auteurs verklaren dat ze geen concurrerende belangen. Bijdragen
Authors '
CU en ST bedacht van de studie. ST en SN toezicht het manuscript schrijven. SN voerde de pathologische en immunohistochemische evaluatie en scoren. AT, HM, TK, SN, RS, KN, YT en TK verzamelde de gevallen en klinische informatie. CU verricht de literatuurstudie en schreef het manuscript. AT en SN voerde de statistische analyse. Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.

• De opname van glucose en maaglediging in kritieke ziekte
• Een case-control studie naar het effect van apolipoproteïne E genotypes op maagkanker het risico en progressie