Immunhistokjemisk konsistens mellom primærsvulster og lymfeknutemetastaser av mage nevroendokrine carcinoma

Immunhistokjemisk konsistens mellom primærsvulster og lymfeknutemetastaser av mage nevroendokrin kreft
Abstract
Bakgrunn
Gastric nevroendokrin carcinom (G-NEC) er en sjelden, høyt ondartet svulst som viser aggressiv vekst fører til vaskulær invasjon, fjernmetastaser og ekstremt dårlig prognose. Vi studerte clinicopathological resultatene av syv pasienter ved vårt institutt til bedre under denne sykdommen.
Metoder
Syv tilfeller av G-NEC ble identifisert blant 1,027 tilfeller av magekreft som gjennomgikk gastrektomi ved Kansai Rousai Hospital mellom 2002 og 2010. Vi studerte de patologiske og immunhistokjemiske funksjoner i mage nevroendokrine karsinomer på både det primære stedet og metastatiske lymfeknuter.
Resultater
gjennomsnitts pasientens alder var 73 år (63 til 86 år). Det var ingen kvinner i denne serien. Den endelige staging var Stage jeg i ett tilfelle, trinn II i to, trinn III i to og Stage IV i to. Hele 31 metastatiske lymfeknuter ble funnet hos disse pasientene. Denne studien viste at forholdet mellom nevroendokrine cellene var lik mellom primær- og metastaser, som hadde en tendens til å vise de samme uttrykk mønstre av nevroendokrine markører.
Konklusjoner
Metastatisk lymfeknuter viste heterogene immunhistokjemiske uttrykk mønstre som ligner på de primære områder . G-NEC er langt fremme på diagnose og raskt når lymfeknutene beholde sin heterogenitet, bærende på en dårligere prognose enn vanlig magekreft.
Mini abstrakt
G-NEC vokser raskt og metastasizes til lymfeknutene, beholdt sin patologisk og immunhistokjemisk heterogenitet selv ved metastaser.
nøkkelord
Ki67 Immunohistochemistry heterogenitet Bakgrunn
Gastric nevroendokrin carcinom (G-NEC) er en sjelden tumor (0,1 til 0,2% av alle gastrisk karsinom) med svært ondartet biologisk atferd utviser aggressiv vekst som fører til vaskulær invasjon, fjernmetastaser og ekstremt dårlig prognose. Den 2010 WHO klassifisering definerer godt differensierte endokrine svulster /karsinomer som nevroendokrine svulster (nett), og dårlig differensierte endokrine karsinomer som nevroendokrine karsinomer (NEC). Sammenlignet med godt differensiert mage NET, G-NEC har svært ondartet oppførsel og dårlig prognose, men deres prognostiske markører og terapeutiske strategier har ennå ikke definert., En sikker diagnose av G-NEC er levert av immunhistokjemisk undersøkelse med nevroendokrine markører , slik som synaptophysin (SYN), kromogranin A (CGA), CD56 og neuron-spesifikk enolase (NSE). Det har blitt foreslått at forsiktighet bør utvises ved diagnostisering grunn av variasjonen vist av G-NEC i både histologiske morfologi og immunhistokjemisk uttrykk. Imidlertid har ingen rapporter undersøkt forholdet mellom uttrykket mønsteret på det primære stedet og at de metastaser som både histologiske morfologi og immunhistokjemisk uttrykk. I denne studien undersøkte vi de primære svulster og alle metastatiske lymfeknuter, og anmeldt foreningen av uttrykk mønstre ved hjelp av immunhistokjemisk undersøkelse.
Metoder
Pasienter og prøver
Syv tilfeller av G-NEC ble identifisert blant 1,027 tilfeller av magekreft som gjennomgikk gastrektomi ved Kansai Rousai Hospital mellom 2002 og 2010 (0,68%). Alle pasienter ga skriftlig informert samtykke for clinicopathological evaluering.
Tabell 1 viser de clinicopathological egenskapene til disse pasientene. Median alder var 73 år (63 til 86 år). Det var ingen kvinner i denne serien. Alle pasientene gjennomgikk gastrektomi med regional lymfeknute disseksjon, og i sak 4, ble ytterligere leverreseksjon utført for synkron leveren metastasis.Table en pasientegenskaper
Pasient nr
Age
Location
Gross typen
Tumor størrelse (cm)
Preoperativ diagnose
Operation
R
en
63
L
3
13
tub2
Distal gastrektomi
R2
2
71
M
2
2
por1 > tub2
Total gastrektomi
R0
3
71
M
3
13
NEC
Distal gastrektomi
R1
4
86
M
2
3
tub2 > por1 > por2
Distal gastrektomi + hepatectomy
R1
5
74
M
2
9
NEC
Distal gastrektomi
R0
6
69
L
3
3
tub2
Distal gastrektomi
R0
7
77
M
5
6
NEC
Distal gastrektomi
R0
NEC, nevroendokrin kreft; por1, dårlig differensiert adenokarsinom, solid type; por2. dårlig differensiert adenokarsinom, ikke-solid type; R, resectability; tub2, moderat differensierte rørformet adenocarcinoma.
Immunohistokjemisk farging
Alle resekterte magene og lymfeknuter ble fiksert i 10% nøytralt formalin, og deretter, hele tumoren ble trinn kuttet til en bredde på 4 til 5 mm. Prøvene ble dyppet i parafin, skåret i 4-mikrometer seksjoner og farget med hematoxylin og eosin. En immunhistokjemisk prosedyren med EnVision system (DakoCytomation, Glostrup, Danmark) ble ansatt som tidligere er etablert. Immunhistokjemisk farging ble undersøkt i alle blokker av den maksimale delt overflaten av det primære område og alle blokkene av de metastatiske lymfeknuter i hvert tilfelle. Vi evaluerte histologi av svulsten på hematoxylin og eosin flekker og evaluert uttrykk for SYN, CGA, CD56 og NSE. Vi undersøkte ikke bare de primære svulster, men også 236 lymfeknuter, som vi identifiserte 31 metastatiske lymfeknuter som stammer fra fem pasienter. Immunhistokjemisk uttrykk for hvert antistoff ble definert som følger: - (mindre enn 5%), 1+ (5 til 9%), 2 + (10 til 49%) og 3+ (over 50%). Forholdet av tumorområdet med positivitet av hver markør ble evaluert i hele den maksimale dimensjon av de primære tumorer og metastatiske lymfeknuter. Positivitet ble definert som en dimensjon forholdet mellom uttrykk som overstiger 10% (i løpet av 2 +). Følgende antistoffer ble brukt: anti-synaptophysin og anti-CD56 kjøpt fra Novocastra Laboratories Ltd (Newcastle upon Tyne, UK), og anti-kromogranin A og anti-NSE kjøpt fra DakoCytomation (Glostrup, Danmark). staging
fem svulster ble plassert i midten av magen den Ki67 merking indeksen ble også anslått i blokken, inkludert den dypeste delen av primærtumor.
Resultater
Brutto funn og, og de resterende to var i den nedre del av magen (tabell 1). Ett tilfelle var en T1b (submucosa) svulst, fire tilfeller var T3 (subserosa), en var T4a (penetrasjon av serosa) og en var T4B (invasjon til tilstøtende strukturer) (tabell 2). Lymfeknutemetastaser ble funnet i fem tilfeller. Den endelige staging var Stage IA i ett tilfelle, Stage IIA i ett, Stage IIB i ett, Stage IIIA i ett, Stage IIIB i ett og Stage IV i to, ifølge den syvende amerikanske Joint Committee on Cancer (AJCC) TNM staging klassifisering . Tumorene hadde vokst til en median størrelse på 6 cm (fra 2 til 13 cm) i den største dimensjon. Grovt, svulsten var Type 3 i tre tilfeller, type 2 i tre og Type 5 i one.Table 2 Clinicopathological funn av primærtumor og resected lymfeknute
Pt Ingen
Patologisk Stage

Metastatisk forholdet mellom dissekerte lymfeknuter Book Histologi av lymfeknutemetastaser




annonse
Samtidig Ad og NEC

NEC
n product: (%)
n product: (%)
n
(%)
n product: (%)
1
T4b
N3a
M0
H0
P0
CY1
IV
8/16
(50)
0
(0)
0
(0)
8
(100)
2
T3
N2
M0
H0
P0
CY0
IIIA
5/26
(19)
0
(0)
0
(0)
5
(100)
3
T3
N0
M0
H0
P0
CY0
IIA
0/42
(0)
-
-
4
T3
N1
M0
H1
P0
CY0
IV
1/31
(3)
0
(0)
0
(0)
1
(100)
5
T3
N1
M0
H0
P0
CY0
IIB
2/52
(4)
0
(0)
0
(0)
2
(100)
6
T4a
N3b
M0
H0
P0
CY0
IIIC
15/25
(60)
12
(80)
3
(20)
0
(0)
7
T1b
N0
M0
H0
P0
CY0
IA
0/44
(0)
-
-
-
Uttrykk for immunhistokjemisk farging mellom primær- og metastaser
Bare tre tilfeller ble korrekt diagnostisert som G-NEC preoperativt. Vi oppsummert de ulike histologiske mønstre av de primære svulster og lymfeknuter i tabell 3. I følge WHO klassifisering, fem av de syv svulstene var store celle subtyper og de andre var små-celle subtyper. De ble inndelt i fem rene nevroendokrine karsinomer og to svulster kombinert med adenokarsinom. Vi undersøkte totalt 236 lymfeknuter innhentet fra syv pasienter. Blant dem, 31 lymfeknuter inkludert 12 noder som viser ren adenokarsinom, 3 viser både adenokarsinom og nevroendokrin kreft, og 16 som viser ren nevroendokrin kreft. Mens de tilfeller med ren NEC hadde lymfeknutemetastase av rent NEC (for eksempel, Eksempel 1 vist i figurene 1 og 2), de to resterende tilfellene med både adenokarsinomceller og neuroendokrine carcinoma celler hadde variert lymfeknutemetastase. Sak 4 hadde rent NEC, og saken 6 hadde både rene adenokarsinom noder og samtidige noder. I tillegg bekreftet vi primære og lymfeknute subtyper ved farging for nevroendokrine markører, og alle primære tumorer var sterkt farget av SYN og CD56. De fleste tilfellene viste varierte uttrykk mønstre som var lik i både primære og metastaser. Den henhold positivitet mellom primærsider og lymfeknuter var ekstremt høy: 80% i SYN, 100% i CGA, 60% i CD56 og 80% i NSE. Videre Ki67 merking indeksen var høy, over 20% i alle cases.Table 3 histologi og immunhistokjemiske funn av både primærtumor og metastatiske lymfeknuter
Pasient nr.
Primær tumor
lymfeknutemetastaser Book Ki-6 7 merking indeks (%)
Mitotiske teller (/10HPF)
Histologi
forhold av nevroendokrine celle (%)
uttrykk for nevroendokrine markører
Histlogy
uttrykk for nevroendokrine markører


SYN
CGA
CD56
NSE
SYN
CGA
CD56

NSE
en
SC
100
3+ -
3+
3+
SC
3+ -
3+
3+
60
60 til 70
2
LC
100
3+
3+
2+
1+
LC
1+
3+
1+
2+
20
20
3
LC
100
3+
-
2+
3+
80
80-90
4
LC > tub2
90
3+
3+
3+ -
LC
3+
3+
2+ -
30
80-90
5
LC
100
3+ -
3+ -
LC
3+
-
3+ -
70
100-110
6
LC > tub2 > por1
60
3+
3+
3+
1+
ren annonse
2+ -
- -
70
20
LC + Ad
3+
2+
1+ -
7
SC
100
3+
-
2+
3+
80
100-110
Expression positivitet ble definert som følger; - (Mindre enn 5%), 1+ (5 til 9%), 2 + (10 til 49%), og 3+ (over 50%). Annonse, adenokarsinom; CGA, kromogranin A; HPF, høy effekt felt; LC, stor celle; NSE, neuron-spesifikk enolase; SC, småcellet; SYN, synaptophysin.
Figur 1 Immunhistokjemisk uttrykk for nevroendokrine markører i primærtumor (sak 1). a) synaptophysin, b) kromogranin A, c) CD56, d) nevron-enolase. Tumorceller variabelt uttrykt nevroendokrine markører.
Figur 2 Immunhistokjemisk uttrykk for nevroendokrine markører i metastatiske tumorceller i lymfeknuter (Sak 1). a) synaptophysin, b) kromogranin A, c) CD56, d) nevron-enolase. Expression mønstre av nevroendokrine markører i metastatiske svulster var lik de i primærtumor.
Klinisk forløp
Adjuvant kjemoterapi, inkludert S-1, ble introdusert for alle tilfeller, men en på et tidlig stadium. Median behandlingsvarighet var 8,1 måneder (variasjon 0,9 til 24,5 måneder). I løpet av behandlingsforløpet, var det to tilbakefall (bæreveske 1 og 4) og en død tre måneder etter incurative kirurgi (Tilfelle 1). Det store området av tilbakefall var leveren, etterfulgt av peritoneum. Kjemoterapi ble innført etter lever tilbakefall i sak 4. Pasienten responderte godt på behandlingen og oppnådde lang, total overlevelse, 21 måneder, til tross for sin avansert stadium. Den treårige sykdomsfri overlevelse var 64,3%, og den tre år samlet overlevelse var 83,8% etter operasjonen.
Diskusjons
NEC er klassifisert i rene svulster og sammensatte svulster ved at man til adenocarcinomatous differensiering [1, 2 ]. Kriterier for klassifisering i NEC kategorier er at over 30% av cellene viser funksjonene til nevroendokrin differensiering [2]. NEC skal ha aggressiv biologisk atferd og viser rask spredning [1-7].
Vi studerte egenskapene til G-NEC ved patologisk og immunhistokjemisk undersøkelse av både primære områder og metastatiske lymfeknuter. I denne studien fant vi en blandet befolkning av rene nevroendokrine celler, adenokarsinom celler og deres mellomliggende celler som har de morfologiske trekk ved adenokarsinom med positivitet til nevroendokrine markører. Andre studier har rapportert at NEC viser sterk farging for nevroendokrine markører, slik som CGA, SYN, NSE og CD56 [1-3, 5, 7]. I serien, det positive hastighet for CGA, SYN, NSE og CD56 var 42,9%, 100%, 85,7% og 72,7%, respektivt. Blant disse markørene, svulster viste den høyeste positivitet for SYN og laveste positivitet for CGA. CGA er en markør for nevroendokrine granulater og en veiledende faktor for differensiering i nevroendokrine celler. De fattige differensiering i våre tilfeller hindret tilstrekkelig uttrykk for granulat.
Vi fant at svulstene variert i immunhistokjemisk uttrykk. I en svulst, mens noen celler med høy CGA uttrykk viste negativitet for andre markører, noen celler uten CGA uttrykk viste diffus høy positivitet for andre markører. I tillegg, i tillegg til nevroendokrine celler som var positive for SYN, enkelte adenokarsinomceller viste positivitet for SYN blant kompositt-type tumorer. Dette indikerer histologiske og immunophenotypical kontinuitet mellom adenokarsinom komponent og NEC komponenten.
Videre fokus på lymfeknuter, fant vi at saker med rene nevroendokrine primære områder hadde metastatiske lymfeknuter med rene nevroendokrine celler (Tabell 3). Variasjonen i immunhistokjemiske uttrykk mønstre av det primære stedet ble opprettholdt selv i de metastatiske rene endokrine celler. I sak 6, ble en av de to tilfellene med kombinert primære svulster, kompositt metastaser fra NEC og adenokarsinom sett i noen lymfeknuter, og ren adenokarsinom metastaser ble sett i andre noder. Svulsten viste konsistens i både histologisk type og immunhistokjemisk uttrykk mellom primær nettstedet og metastatiske lymfeknuter. Dette resultat førte til en hypotese med hensyn til måten for metastasering. Det vil si, gruppert celler, inkludert adenokarsinom og nevroendokrine celler med varierte immunophenotypes, spre seg til lymfeknuter og coexisted der. I tillegg, lymfeknuter kompositt-type tumorer uttrykte en litt annen fargemønster. Celler som ikke får tilstrekkelig modne differensiering i grunnskolen nettsteder kan differensiere i nevroendokrine celler eller utvikle variert immunhistokjemisk uttrykk. I denne serien var det ingen klar sammenheng mellom immunhistokjemisk ekspresjon og klinisk utfall. Tilfeller med lave Ki67 merking indeksene hadde en god prognose. For eksempel, tilfelle 2, hvor Ki67-merkeindeksen var 20%, oppnås den lengste overlevelse sikt, 55 måneder. Tilfelle 4, hvor Ki67-merkeindeksen var 30%, ble behandlet med kirurgi og kjemoterapi og overlevde etter 21 måneder til tross for fjernmetastaser. Begrensninger av denne studien omfatter kort varighet av oppfølging og liten utvalgsstørrelse for det meste består av rene typer. Derfor er store og langvarige studier for å trekke en endelig konklusjon.
Konklusjon
Oppsummert rapporterte vi de patologiske og immunhistokjemiske funksjoner i nevroendokrine karsinomer på både primære områder og metastatiske lymfeknuter. Cellene vokser raskt og metastaserer til lymfeknutene beholde sin heterogenitet selv ved metastaser
Forkortelser
G-NEC.
Gastric nevroendokrin kreft
NET:
nevroendokrine svulster
NEC:
nevroendokrine karsinomer
SYN:
synaptophysin


CGA:
kromogranin A
NSE:
neuron-spesifikk enolase
por1:
dårlig differensiert adenokarsinom, solid typen
por2:
dårlig differensiert adenokarsinom, ikke-solid typen
R:
resectability
tub2:
moderat differensiert rørformet adenokarsinom
AJCC:
amerikanske Joint Committee on Cancer

Annonse:
adenokarsinom
HPF:
høye kraft felt
LC:
store celle
SC.
småcellet
Erklæringer
Forfatter opprinnelige legges filer for Images Nedenfor er linkene til forfatternes originale legges filer for bilder. 12957_2012_1057_MOESM1_ESM.tiff Forfatteroriginalfilen for figur 1 12957_2012_1057_MOESM2_ESM.tiff Forfatteroriginalfilen for figur 2 konkurrerende interesser
Forfatterne hevder at de ikke har noen konkurrerende interesser.
Forfatternes bidrag
CU og ST unnfanget av studere. ST og SN overvåket manuskriptet skriving. SN utført den patologiske og immunhistokjemisk evaluering og scoring. AT, HM, TK, SN, RS, KN, YT og TK samlet sakene og klinisk informasjon. CU utførte litteraturgjennomgang og skrev manuskriptet. AT og SN utført den statistiske analysen. Alle forfattere lese og godkjent den endelige manuskriptet.

• Glukose absorpsjon og magetømmingen i kritisk sykdom
• En case-control studie på effekten av Apolipoprotein E genotyper på magekreftrisiko og progression