Immunhistochemische Konsistenz zwischen Primärtumoren und Lymphknotenmetastasen von Magen neuroendokrinen carcinoma

immunhistochemischen Konsistenz zwischen Primärtumoren und Lymphknotenmetastasen von Magen neuroendokrinen Karzinomen
Zusammenfassung
Hintergrund
Gastric neuroendokrinen Karzinomen (G-NEC) ist eine seltene, hoch bösartiger Tumor, der ein aggressives Wachstum führt zu Gefäßinvasion, Metastasierung und extrem schlechte Prognose aufweist. Wir untersuchten die klinisch-pathologischen Befunde von sieben Patienten an unserem Institut besser unter dieser Krankheit.
Methoden
Sieben Fälle von G-NEC wurden unter 1.027 Fälle von Magenkarzinom identifiziert, die zwischen 2002 und 2010 Gastrektomie bei Kansai Rousai Krankenhaus unterzog. Wir untersuchten die pathologischen und immunhistochemischen Eigenschaften von Magen-neuroendokrinen Karzinomen sowohl am primären Standort und metastatischen Lymphknoten.
Ergebnisse | die mittlere Alter der Patienten betrug 73 Jahre (Bereich 63-86 Jahre). Es gab in dieser Reihe keine Frauen. Die letzte Inszenierung war der Stufe I in einem Fall, Stufe II in zwei, Stufe III in zwei und Stufe IV in zwei Teile. Insgesamt 31 metastatische Lymphknoten wurden bei diesen Patienten gefunden. Diese Studie ergab, dass das Verhältnis von neuroendokrinen Zellen war ähnlich zwischen den primären und metastatischen Stellen, die die gleichen Expressionsmuster von neuroendokrinen Marker zu zeigen pflegen.
Schlussfolgerungen
Metastasiertem Lymphknoten zeigte heterogene immunhistochemischen Expressionsmuster ähnlich den primären Standorten . G-NEC ist weit fortgeschritten bei der Diagnose und erreicht schnell die Lymphknoten ihre Heterogenität beibehalten, eine schlechtere Prognose als gemeinsame Magenkrebs tragen.
Mini abstrakte
G-NEC wächst schnell und metastasiert in die Lymphknoten, Beibehaltung seiner pathologischen und immunhistochemischen Heterogenität auch bei den Metastasen.
Schlüsselwörter Ki67 Immunhistochemie Heterogene Hintergrund
Gastric neuroendokrinen Karzinomen (G-NEC) ist ein seltener Tumor (0,1 bis 0,2% aller Magenkarzinome) mit hoch malignen biologischen Verhalten ausstellenden aggressive Wachstum, das zu Gefäßinvasion, Fernmetastasen führt und extrem schlechte Prognose. Die 2010 WHO-Klassifikation definiert gut differenzierten endokrinen Tumoren /Karzinome als neuroendokrinen Tumoren (NETs) und schlecht differenzierten endokrinen Karzinomen als neuroendokrinen Karzinomen (NECs). Im Vergleich mit gut differenzierten Magen-NETs, ​​G-NECs haben sehr bösartige Verhalten und einer schlechten Prognose, aber ihre prognostische Marker und therapeutische Strategien sind noch nicht definiert.
Eine definitive Diagnose von G-NEC wird durch immunhistochemische Untersuchung mit neuroendokrinen Markern versehen wie Synaptophysin (SYN), Chromogranin A (CGA), CD56 und Neuron-spezifische Enolase (NSE). dargestellt durch G-NECs in sowohl histologische Morphologie und immunhistochemische Expression Es wurde vorgeschlagen, dass Sorgfalt sollte wegen der Variation in der Diagnose ausgeübt werden. Es wurden jedoch keine Berichte über die Beziehung zwischen dem Expressionsmuster am primären Standort und dass an den Metastasen untersucht, wie sowohl die histologische Morphologie und immunhistochemischen Ausdruck. In dieser Studie untersuchten wir die Primärtumoren und alle metastatischen Lymphknoten und überprüft die Zuordnung von Expressionsmustern mittels der immunhistochemischen Untersuchung.
Methoden
Patienten und Proben
Sieben Fälle von G-NEC unter identifiziert wurden 1027 Fälle von Magenkarzinom, die zwischen 2002 und 2010 (0,68%) Gastrektomie bei Kansai Rousai Krankenhaus unterzog. Alle Patienten gaben für klinisch-pathologischen Auswertung informierte Zustimmung geschrieben.
Tabelle 1 sind die klinisch-pathologischen Merkmale dieser Patienten. Das mittlere Alter betrug 73 Jahre (Bereich 63-86 Jahre). Es gab in dieser Reihe keine Frauen. Alle Patienten wurden Gastrektomie mit regionalen Lymphknotendissektion, und in Fall 4, zusätzliche Leberresektion wurde für synchrone Leber metastasis.Table 1 Patientencharakteristika
Patient Nr
Alter
Ort durchgeführt
Gross Typ
Tumorgröße (cm)
präoperative Diagnose

Betrieb
R
1
63
L
3
13
tub2
Distal gastrectomy
R2 2
71
M 2
2
POR1 > tub2
Gastrektomie
R0
3
71
M
3
13
NEC
Distal gastrectomy
R1
4 86
M
2
3
tub2 > POR1 > por2
Distal Gastrektomie + Hepatektomie
R1
5
74
M 2
9
NEC
Distal gastrectomy
R0
6
69
L
3
3
tub2
Distal gastrectomy
R0
7
77
M
5
6
NEC
Distal gastrectomy
R0
NEC, neuroendokrinen Karzinom; POR1, schlecht differenzierten Adenokarzinom, fest Typ; por2. schlecht differenzierten Adenokarzinom, nicht festen Typ; R, Resektabilität; tub2, mäßig röhrenförmige Adenocarcinom unterschieden.
Immunhistochemische Färbung
Alle reseziert Mägen und Lymphknoten in 10% neutralem Formalin fixiert wurden, und dann wurde die gesamte Tumorstufengeschnittenem auf eine Breite von 4 bis 5 mm. Die Proben wurden in Paraffin eingebettet, geschnitten in 4-um-Schnitte und gefärbt mit Hämatoxylin und Eosin. Ein immunhistochemischen Verfahren das EnVision System (DakoCytomation, Glostrup, Dänemark) wurde unter Verwendung eingesetzt, der vorher ermittelt. Immunhistochemische Färbung wurde in allen Blöcken der maximalen geteilten Oberfläche der primären Standort und alle Blöcke der metastatischen Lymphknoten jeweils untersucht. Wir haben die Histologie des Tumors auf Hämatoxylin und Eosin-Färbung und ausgewertet, um die Expression von SYN, CGA, CD56 und NSE. Wir untersuchten nicht nur den Primärtumor, sondern auch 236 Lymphknoten, von dem wir 31 metastatische Lymphknoten von fünf Patienten abgeleitet identifiziert. Die immunhistochemische Ausdruck für jeden Antikörper wurde wie folgt definiert: - (< 5%), 1+ (5 bis 9%), 2+ (10 bis 49%) und 3- (über 50%). Das Verhältnis des Tumorbereich mit Positivität jeder Markierung wurde während der maximalen Abmessung der primären Tumoren und metastatischen Lymphknoten ausgewertet. Positivität wurde als Dimension Verhältnis von Ausdruck definiert, die 10% (über 2 +). Die folgenden Antikörper wurden verwendet: anti-Synaptophysin und anti-CD56 erworben von Novocastra Laboratories Ltd. (Newcastle upon Tyne, Großbritannien) und anti-Chromogranin A und anti-NSE erworben von DakoCytomation (Glostrup, Dänemark). Der Markierungsindex Ki67 wurde auch im Block mit dem tiefsten Teil des Primärtumors geschätzt.
Ergebnisse
Gross Ergebnisse und Inszenierung
Fünf Tumoren wurden in der Mitte des Magens, und die restlichen zwei waren in der untere Magen (Tabelle 1). Ein Fall war ein T1b (Submukosa) Tumor, vier Fälle waren T3 (Subserosa), war T4a (das Eindringen von Serosa) und man war T4b (Invasion auf benachbarte Strukturen) (Tabelle 2). Lymphknotenmetastasen wurde in fünf Fällen. Die letzte Inszenierung war Stadium IA in einem Fall, Bühne IIA in einem, Stadium IIB in einem, Stufe IIIA in einem, Stufe IIIB in ein und Stufe IV in zwei, nach dem siebten American Joint Committee on Cancer (AJCC) TNM-Klassifizierung . Die Tumoren waren auf eine mittlere Größe von 6 cm (Bereich von 2 bis 13 cm) in der größten Dimension gewachsen. Grossly, war der Tumor Typ 3 in drei Fällen, Typ 2 in drei und Typ 5 in one.Table 2 Clinicopathological Ergebnisse der Primärtumor und Lymphknoten reseziert
Pt No
Pathologische Bühne

Metastasiertem Verhältnis von sezierten Lymphknoten
Histologie von Lymphknotenmetastasen




Ad
gleichzeitige Anzeige und NEC
NEC
n
(%)
n
(%)
n
(%)
n
(%)
1
T4b
N3a
M0
H0
P0
CY1
IV
8/16
(50)
0
(0)
0
(0)
8
(100)
2
T3
N2
M0
H0
P0
CY0
IIIA
5/26
(19)
0
(0)
0
(0)
5
(100)
3
T3
N0
M0
H0
P0
CY0
IIA
0/42
(0)
-
-
4
T3
N1
M0
H1
P0
CY0
IV
1/31
(3)
0
(0)
0
(0)
1
(100)
5
T3
N1
M0
H0
P0
CY0
IIB
2/52
(4)
0
(0)
0
(0)
2
(100)
6
T4a
N3b
M0
H0
P0
CY0
IIIC
15/25
(60)
12
(80)
3
(20)
0
(0)
7
T1b
N0
M0
H0
P0
CY0
IA
0/44
(0)
-
-
-
Die Expression von immunhistochemischen Färbung zwischen der primären und metastatischen Stellen
Nur drei Fälle korrekt als G-NEC präoperativ diagnostiziert wurden. Wir fassten die verschiedensten histologischen Muster der Primärtumoren und Lymphknoten in Tabelle 3 Nach Angaben der WHO-Klassifikation, fünf der sieben Tumoren waren großzelligen Subtypen und die anderen waren kleinzelligen Subtypen. Sie wurden in fünf reine neuroendokrinen Karzinomen klassifiziert und zwei mit einem Adenokarzinom kombiniert Tumoren. Wir untersuchten insgesamt 236 Lymphknoten von sieben Patienten erhalten. Unter ihnen sind 31 positive Knoten enthalten 12 Knoten zeigt reines Adenokarzinom, 3 zeigt beide Adenokarzinom und neuroendokrinen Karzinomen und 16 zeigt reines neuroendokrinen Karzinomen. Während die Fälle mit reinem NEC Lymphknotenmetastase reinen NEC hatte (zum Beispiel 1 Fall 1 in den Figuren und 2), wobei die beiden übrigen Fällen mit beiden Adenokarzinom-Zellen und Zellen neuroendokrinen Karzinomen war Lymphknotenmetastase variiert. Fall 4 hatte rein NEC und Fall 6 hatten beide reine Adenokarzinom Knoten und die gleichzeitige Knoten. Darüber hinaus überprüft wir die primären und Lymphknoten-Subtypen durch für neuroendokrine Marker Färbung, und alle wurden Primärtumoren von SYN und CD56 stark gefärbt. Die meisten Fälle zeigten vielfältige Expressionsmuster, die beide ähnlich waren in den primären und metastatischen Stellen. Die Übereinstimmung der Positivität zwischen den primären Standorten und Lymphknoten war extrem hoch: 80% in SYN 100% in CGA, 60% in CD56 und 80% in NSE. Darüber hinaus war der Ki67 Markierungsindex hoch, über 20% in allen cases.Table 3 Histologie und immunhistochemischen Ergebnisse der beiden Primärtumor und Lymphknotenmetastasen
kein Patient.
Primärtumor
Lymphknotenmetastasen

Ki-6 7 Labeling-Index (%)
mitotischen zählt (/10HPF)
Histologie
Verhältnis von neuroendokrinen Zell (%)
Expression von neuroendokrinen Marker
Histlogy
Expression von neuroendokrinen Marker


SYN
CGA
CD56
NSE
SYN
CGA
CD56

NSE
1 | SC
100
3+
- 3+
3+
SC
3 +
- 3+
3+
60
60 bis 70
2
LC
100
3+
3+
2+
1+
LC
1+
3+
1+
2+
20
20
3
LC
100
3+
-
2+
3+
80
80 bis 90
4 LC > tub2
90
3+
3+
3+
- LC
3+
3+
2+
- 30
80 bis 90
5
LC
100
3+
- 3+
- LC
3+
-
3+
- 70
100 bis 110
6 LC > tub2 > POR1
60
3+
3+
3+
1+
reinen Ad
2+
- -
- 70
20
LC + Ad
3+
2+
1+
- 7
SC
100
3+
-
2+
3+
80
100 bis 110
Expression Positivität wurde wie folgt definiert; - (≪ 5%), 1+ (5 bis 9%), 2+ (10 bis 49%) und 3- (über 50%). Ad, Adenokarzinom; CGA, Chromogranin A; HPF, hohe Leistung Felder; LC, große Zelle; NSE, neuronenspezifische Enolase; SC, kleine Zelle; SYN, Synaptophysin.
Abbildung 1 immunhistochemischen Ausdruck für neuroendokrine Marker in Primärtumor (Fall 1). a) Synaptophysin, b) Chromogranin A, c) CD56, d) neuronenspezifische Enolase. Die Tumorzellen variabel neuroendokrinen Marker ausgedrückt.
2 immunhistochemischen Ausdruck für neuroendokrine Marker in metastatischen Tumorzellen in Lymphknoten (Fall 1) Figur. a) Synaptophysin, b) Chromogranin A, c) CD56, d) neuronenspezifische Enolase. Expressionsmuster von neuroendokrinen Markern in metastatischen Tumoren waren ähnlich denen in dem Primärtumor.
Klinischer Verlauf
Adjuvante Chemotherapie, einschließlich S-1, wurde in allen Fällen eingeführt, aber man in einem frühen Stadium. Die mediane Behandlungsdauer betrug 8,1 Monate (Bereich: 0,9-24,5 Monate). Während der Behandlung gab es natürlich zwei Rezidive (Fälle 1 und 4) und ein Tod von drei Monaten nach der Operation incurative (Fall 1). Die Hauptstelle der Rückfall war die Leber, durch das Peritoneum gefolgt. Die Chemotherapie wurde nach einer Leber Wiederholung eingeführt in Fall 4. Der Patient gut auf die Therapie und erreicht lang, Gesamtüberlebenszeit, 21 Monate trotz seines fortgeschrittenen Stadium. Die Drei-Jahres krankheitsfreie Überlebensrate betrug 64,3%, und die Drei-Jahres-Überlebensrate betrug 83,8% nach der Operation.
Diskussion
NECs klassifiziert werden in reine Tumoren und Tumoren Verbund Beimischen adenocarcinomatous Differenzierung [1, 2 ]. Kriterien für die Einstufung in NEC Kategorien ist, dass mehr als 30% der Zellen die Eigenschaften von neuroendokrinen Differenzierung [2] angezeigt werden soll. NECs haben aggressive biologische Verhalten und zeigen schnelle Verbreitung [1-7].
Wir die Eigenschaften von G-NECs studierte durch pathologische und immunhistochemische Untersuchung der beiden primären Standorten und metastatischen Lymphknoten. In dieser Studie fanden wir eine Population von vermischten reinen neuroendokrinen Zellen, Adenokarzinomzellen und deren Zwischen Zellen, die die morphologischen Merkmale des Adenokarzinoms mit Positivität neuroendokrinen Marker aufweisen. Andere Studien haben berichtet, dass NEC starke Färbung für neuroendokrine Marker zeigt, wie CGA, SYN, NSE und CD56 [1-3, 5, 7]. In unserer Serie war die Positivitätsrate für CGA, SYN, NSE und CD56 42,9%, 100%, 85,7% und 72,7%, respectively. Unter diesen Markern zeigte Tumoren die höchste Positivität für SYN und niedrigste Positivität für CGA. CGA ist ein Marker für neuroendokrine Granulat und ein indikatives Faktor Differenzierung zu neuroendokrinen Zellen. Die schlechte Differenzierung in unseren Fällen verhindert eine ausreichende Expression von Granulaten.
Wir fanden, dass die Tumoren in immunhistochemischen Ausdruck variiert. In einem Tumor, während einige Zellen mit hoher CGA Ausdruck Negativität für andere Marker zeigte, zeigten einige Zellen ohne CGA Ausdruck diffuser hohe Positivität für andere Marker. Darüber hinaus neben neuroendokrinen Zellen positiv für SYN, zeigten einige Adenokarzinomzellen Positivität für SYN unter Verbundtyp-Tumoren. Dies zeigt, histologische und immunophenotypical Kontinuität zwischen der Adenokarzinom-Komponente und der NEC-Komponente.
Des Weiteren konzentriert sich auf Lymphknoten, fanden wir, dass die Fälle mit reinem neuroendokrinen primären Standorten metastatischen Lymphknoten mit reinem neuroendokrinen Zellen (Tabelle 3) hatte. Die Variation in immunhistochemischen Expressionsmuster der primären Standort wurde auch in den metastatischen reinen endokrinen Zellen gehalten. In der Rechtssache 6, einem der beiden Fälle mit kombinierten primären Tumoren, Composite Metastasierung von NEC und Adenokarzinom wurde in einigen Lymphknoten und reine Adenokarzinom Metastase wurde in anderen Knoten gesehen. Der Tumor zeigte in der Konsistenz histologischen Typ und immunhistochemischen Ausdruck zwischen dem primären Standort und den metastatischen Lymphknoten. Dieses Ergebnis führte zu einer Hypothese über die Art und Weise der Metastasierung. Das heißt, gruppierten Zellen, einschließlich Adenokarzinom und neuroendokrinen Zellen mit unterschiedlichen Immunphänotypen, verteilt auf die Lymphknoten und koexistiert dort. Zusätzlich Lymphknoten von Verbundtyp-Tumoren exprimiert eine etwas andere Färbung Muster. Die Zellen nicht genügend ausgereift Differenzierung in primären Standorten unterziehen kann in neuroendokrinen Zellen differenzieren oder variiert immunhistochemischen Ausdruck entwickeln. In dieser Serie gab es keinen klaren Zusammenhang zwischen der immunhistochemischen Expression und dem klinischen Ergebnis. Fälle mit niedrigen Ki67 Kennzeichnung Indizes hatten eine gute Prognose. Zum Beispiel, Fall 2, für die der Ki67 Labeling-Index lag bei 20%, erreicht die längste Überlebensperiode, 55 Monate. Fall 4, für die das Ki67 Markierungsindex 30% war, wurde erfolgreich mit Chirurgie und Chemotherapie behandelt und überlebte 21 Monate trotz Fernmetastasen. Einschränkungen dieser Studie sind kurze Dauer der Follow-up und kleinen Stichprobengröße meist aus reinen Typen zusammen. Daher werden große und langfristige Studien erforderlich, um eine endgültige Schlussfolgerung zu ziehen.
Fazit
Zusammenfassend berichteten wir die pathologischen und immunhistochemischen Eigenschaften von neuroendokrinen Karzinomen bei den beiden primären Standorten und metastatischen Lymphknoten. Die Zellen wachsen schnell und metastasieren in die Lymphknoten ihre Heterogenität auch an den Metastasen Halte
Abkürzungen
G-NEC.
Gastric neuroendokrinen Karzinomen
NETs:
neuroendokrinen Tumoren
NECs:
neuroendokrinen Karzinomen
SYN:
synaptophysin


CGA:
Chromogranin A
NSE:
Neuron-spezifische Enolase
POR1:
schlecht differenzierten Adenokarzinom, solide Art
por2:
schlecht differenzierten Adenokarzinom, nicht festen Typ
R:
Resektabilität
tub2:
mäßig differenzierten Adenokarzinom Rohr
AJCC:
American Joint Committee on Cancer

Anzeige:
Adenokarzinom
HPF:
Hochleistungsfelder
LC:
groß Zelle
SC:.
kleinzelligen
Erklärungen
Autoren Original vorgelegt Dateien für Bilder
Unten sind die Links zu den Autoren Original vorgelegt Dateien für Bilder. 12957_2012_1057_MOESM1_ESM.tiff Autoren Originaldatei für Abbildung 1 12957_2012_1057_MOESM2_ESM.tiff Autoren Originaldatei für Abbildung 2 Konkurrierende Interessen
Die Autoren erklären, dass sie keine Interessenkonflikte haben.
Beiträge der Autoren
CU und ST des konzipiert Studie. ST und SN überwacht das Manuskript Schreiben. SN geführt, um die pathologischen und immunhistochemischen Auswertung und Scoring. AT, HM, TK, SN, RS, KN, YT und TK gesammelt, die Fälle und klinische Informationen. CU ausgeführt, um die Literatur und schrieb das Manuskript. AT und SN geführt, um die statistische Analyse. Alle Autoren gelesen und genehmigt haben das endgültige Manuskript.

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