consistência imunohistoquímica entre tumores primários e metástases em linfonodos de neuroendócrino gástrica carcinoma

consistência imunohistoquímica entre tumores primários e metástases em linfonodos do carcinoma neuroendócrino gástrica da arte abstracta
Fundo
carcinoma neuroendócrino gástrica (G-NEC) é uma doença rara, altamente tumor maligno que apresenta crescimento agressivo levando a invasão vascular, metástases à distância e extremamente mau prognóstico. Foram estudados os achados clínico-patológicos de sete pacientes em nosso instituto para melhor sob esta doença.
Métodos
Sete casos de G-NEC foram identificados entre 1.027 casos de carcinoma gástrico submetidos à gastrectomia em Kansai Rousai Hospital entre 2002 e 2010. Foram estudados os aspectos patológicos e imuno-histoquímico de carcinomas neuroendócrinos gástricos, tanto o site principal e gânglios linfáticos metastáticos.

resultados a idade média dos pacientes era de 73 anos (variação de 63 a 86 anos). Não houve fêmeas desta série. O estadiamento final foi de Fase I em um caso, Fase II em dois, Fase III em dois e Stage IV em dois. Um total de 31 linfonodos metastáticos foram encontrados nestes pacientes. Este estudo revelou que a proporção de células neuroendócrinas foi semelhante entre os sítios primários e metastáticos, que tendiam a mostrar os mesmos padrões de marcadores neuroendócrinos de expressão.
Conclusões
gânglios linfáticos metastáticos mostraram padrões de expressão imuno-histoquímica heterogêneos semelhantes aos sítios primários . G-NEC é muito avançada no momento do diagnóstico e rapidamente atinge os gânglios linfáticos mantendo a sua heterogeneidade, carregando um prognóstico pior do que câncer gástrico comum.
Mini abstrato
G-NEC cresce rapidamente e metástase para os linfonodos, mantendo o seu patológica ea heterogeneidade imuno-histoquímica, mesmo nos locais metastáticos.
Palavras-chave
Ki67 imunohistoquímica heterogeneidade fundo
gástrica carcinoma neuroendócrino (G-NEC) é um tumor raro (0,1 a 0,2% de todos os carcinomas gástricos) com comportamento biológico altamente maligno exibindo crescimento agressivo que leva a invasão vascular, metástases à distância e extremamente mau prognóstico. A classificação da OMS 2010 define bem diferenciados endócrinas tumores /carcinomas como tumores neuroendócrinos (NETS), e carcinomas endócrinos pouco diferenciados como carcinomas neuroendócrinos (CNE). Em comparação com redes gástricas bem diferenciados, G-NECs têm um comportamento altamente maligno e mau prognóstico, mas os seus marcadores prognósticos e estratégias terapêuticas ainda não foram definidos.
Um diagnóstico definitivo de G-NEC é fornecido pelo exame imuno-histoquímica com marcadores neuroendócrinos , como sinaptofisina (SYN), cromogranina A (CGA), CD56 e enolase específica de neurónios (NSE). Foi proposto que o cuidado deve ser exercido no diagnóstico por causa da variação apresentada pelo G-NECs tanto em morfologia histológica e expressão imuno-histoquímica. No entanto, não há relatos investigaram a relação entre o padrão de expressão no sítio primário e que nos locais metastáticos como para tanto morfologia histológica e imuno-histoquímica expressão. Neste estudo, foram examinados os tumores primários e todos os gânglios linfáticos metastáticos, e revisto a associação de padrões de expressão por meio de exame imuno-histoquímico.
Métodos
Pacientes e espécimes
Sete casos de G-NEC foram identificados entre 1.027 casos de carcinoma gástrico submetidos à gastrectomia em Kansai Rousai Hospital entre 2002 e 2010 (0,68%). Todos os pacientes deram consentimento informado por escrito para avaliação clínico-patológico.
Tabela 1 apresenta as características clinicopatológicas desses pacientes. A idade média foi de 73 anos (variação de 63 a 86 anos). Não houve fêmeas desta série. Todos os pacientes foram submetidos a gastrectomia com dissecção de linfonodos regionais, e no caso 4, a ressecção hepática adicional foi realizado para metastasis.Table fígado síncrona 1 Características dos pacientes
No. Paciente
Idade
Localização tipo
Gross
tamanho do tumor (cm)
diagnóstico pré-operatório
Operação
R
1
63
L Sims 3
13
tub2
gastrectomia distal
R2 Página 2
71
M Página 2 Página 2
por1 > tub2
gastrectomia total
R0 Sims 3
71
M Sims 3
13
NEC
gastrectomia distal
R1 4
86
M
2 Sims 3
tub2 > por1 > por2
gastrectomia distal + hepatectomia
R1
5
74
M Página 2
9
NEC
gastrectomia distal
R0
6
69
L Sims 3 Sims 3
tub2
gastrectomia distal
R0
7
77
M
5
6
NEC
gastrectomia distal
R0
NEC, carcinoma neuroendócrino; por1, adenocarcinoma pouco diferenciado, tipo sólido; por2. mal adenocarcinoma diferenciado, tipo não-sólidos; R, ressecabilidade; tub2, adenocarcinoma moderadamente diferenciado tubular.
coloração imuno-histoquímica
Todos os estômagos ressecados e nódulos linfáticos foram fixados em formalina neutra a 10%, e, em seguida, todo o tumor foi passo de corte com uma largura de 4 a 5 mm. As amostras foram embebidas em parafina, cortadas em secções de 4-um e coradas com hematoxilina e eosina. Um procedimento imuno-histoquímica utilizando o sistema EnVision (DakoCytomation, Glostrup, Dinamarca) foi utilizada como estabelecido anteriormente. coloração imuno-histoquímica foi examinada em todos os blocos da superfície máxima dividida do sítio primário e todos os blocos dos linfonodos metastáticos em cada caso. Nós revisamos a histologia do tumor em hematoxilina e eosina manchas e avaliada a expressão de SYN, CGA, CD56 e NSE. Foram examinados não só os tumores primários, mas também 236 linfonodos, dos quais foram identificados 31 gânglios linfáticos metastáticos derivados de cinco pacientes. A expressão de imuno-histoquímica para cada anticorpo foi definido como se segue: - (< 5%), 1+ (5-9%), 2+ (10 a 49%) e 3+ (mais de 50%). A relação da área de tumor com positividade de cada marcador foi avaliada ao longo da maior dimensão dos tumores primários e linfonodos metastáticos. A positividade foi definida como uma proporção de expressão dimensão superior a 10% (mais de 2+). Foram utilizados os seguintes anticorpos: anti-sinaptofisina e anti-CD56 comprado de Novocastra Laboratories Ltd. (Newcastle upon Tyne, UK), e anti-cromogranina A e anti-NSE comprado de DakoCytomation (Glostrup, Dinamarca). O índice de marcação Ki67 também foi estimada no bloco incluindo a parte mais profunda do tumor primário.
Resultados
resultados brutos e estadiamento
cinco tumores estavam localizados no meio do estômago, e os dois restantes estavam em a parte inferior do estômago (Tabela 1). Um caso era um (submucosa) tumor T1b, quatro casos foram T3 (subserosa), um era T4a (penetração da serosa) e uma era T4b (invasão de estruturas adjacentes) (Tabela 2). Metástase linfática foi encontrado em cinco casos. O estadiamento final foi Estágio IA em um caso, Estágio IIA em um, Fase IIB em um, Estágio IIIA em um, Stage IIIB em um e Stage IV em dois, de acordo com o sétimo Comité Misto Americana do Câncer (AJCC) classificação TNM . Os tumores tinham atingido um tamanho médio de 6 cm (intervalo de 2 a 13 cm) na sua maior dimensão. Manifestamente, o tumor era do tipo 3 em três casos, Tipo 2 em três e tipo 5 em one.Table 2 achados clínico-patológicos do tumor primário e ressecção dos linfonodos
Pt Sem
Patológica Stage

relação metastático de linfonodos dissecados
Histologia de metástases linfáticas




Ad
concomitante Ad e NEC
NEC
n
(%)
n
(%)
n
(%)
n
(%)
1
T4b
N3a
M0
H0
P0
CY1
IV
8/16
(50)
0
(0)
0
(0)
8
(100)
2
T3
N2
M0
H0
P0
CY0
IIIA
5/26
(19)
0
(0)
0
(0)
5
(100)
3
T3
N0
M0
H0
P0
CY0
IIA
0/42
(0)
-
-
4
T3
N1
M0
H1
P0
CY0
IV
1/31
(3)
0
(0)
0
(0)
1
(100)
5
T3
N1
M0
H0
P0
CY0
IIB
2/52
(4)
0
(0)
0
(0)
2
(100)
6
T4a
N3b
M0
H0
P0
CY0
IIIC
15/25
(60)
12
(80)
3
(20)
0
(0)
7
T1b
N0
M0
H0
P0
CY0
IA
0/44
(0)
-
-
-
Expressão de coloração imuno-histoquímica entre os locais primários e metastáticos
Apenas três casos foram corretamente diagnosticados como G-NEC no pré-operatório. Nós resumimos os padrões histológicos variados dos tumores primários e linfonodos na Tabela 3. De acordo com a classificação da OMS, cinco dos sete tumores eram subtipos de células grandes e os outros eram os subtipos de células pequenas. Eles foram classificados em cinco carcinomas neuroendócrinos puros e dois tumores combinados com adenocarcinoma. Foram examinados um total de 236 nódulos linfáticos obtidos a partir de sete pacientes. Entre eles, 31 linfonodos positivos incluídos 12 nós mostrando adenocarcinoma pura, 3, mostrando tanto o adenocarcinoma eo carcinoma neuroendócrino, e 16 que mostram carcinoma neuroendócrino puro. Enquanto os casos com pura NEC tinha metástases em linfonodos de pura NEC (por exemplo, Caso 1 mostrado nas Figuras 1 e 2), os dois casos restantes com ambas as células de adenocarcinoma e células de carcinoma neuroendócrino variaram linfonodo metástases. Caso 4 teve pura NEC, e caso 6 tiveram ambos os nós de adenocarcinoma puros e nós concomitantes. Além disso, verificou-se os subtipos nó primário e linfáticos através da coloração para os marcadores neuroendócrinos, e todos os tumores primários foram fortemente coradas por SYN e CD56. A maioria dos casos mostrou padrões de expressão variados que foram semelhantes em ambos os locais primários e metastáticos. O acordo de positividade entre os locais primários e linfonodos foi extremamente elevada: 80% na SYN, 100% na CGA, 60% em CD56 e 80% na NSE. Além disso, o índice de marcação de Ki67 foi elevado, mais de 20% em todas as cases.Table 3 Histologia e imuno-histoquímica conclusões de ambos tumor primário e linfonodos metastáticos
paciente já.
Tumor primário
metástases linfáticas
Ki-6 índice 7 rotulagem (%)
contagens mitótico (/10HPF)
Histologia
Rácio de células neuroendócrinas (%)
expressão de marcadores neuroendócrinos
Histlogy
expressão de marcadores neuroendócrinos


SYN
CGA
CD56
NSE
SYN
CGA
CD56

NSE
1 | SC
100
3+
- 3+
3+
SC
3+
- 3+
3+
60
60 a 70
2
LC
100
3+
3+
2+
1+
LC
1+
3+
1+
2+
20
20
3
LC
100
3+
-
2+
3+
80
80 a 90 4
LC > tub2
90
3+
3+
3+
- LC
3+
3+
2+
- 30
80 a 90
5
LC
100
3+
- 3+
- LC
3+ viajantes -
3+
- 70
100 a LC >110
6
; tub2 > por1
60
3+
3+
3+
1+
pura Ad
2+
- -
- 70
20
LC + Ad
3+
2+
1+
- 7
SC
100
3+
-
2+ 3+

80
100-110
positividade expressão foi definida da seguinte forma; - (≪ 5%), 1+ (5-9%), 2+ (10 a 49%), e 3+ (mais de 50%). Ad, adenocarcinoma; CGA, cromogranina A; HPF, campos de alta potência; LC, célula grande; NSE, enolase neurônio-específica; SC, de células pequenas; SYN, sinaptofisina.
Figura 1 Expressão imuno-histoquímica de marcadores neuroendócrinos em tumor primário (Processo 1). a) Sinaptofisina, b) cromogranina A, c) CD56, d) enolase neurônio-específica. As células tumorais expressa variavelmente marcadores neuroendócrinos.
Figura 2 Expressão imuno-histoquímica de marcadores neuroendócrinos em células tumorais metastáticas em linfonodos (caso 1). a) Sinaptofisina, b) cromogranina A, c) CD56, d) enolase neurônio-específica. padrões neuroendócrinas expressão de marcadores em tumores metastáticos foram semelhantes aos do tumor primário.
curso clínico
quimioterapia adjuvante, incluindo S-1, foi introduzido para todos os casos, mas um em uma fase precoce. A duração média do tratamento foi de 8,1 meses (intervalo de 0,9 a 24,5 meses). Durante o curso do tratamento, houve duas recidivas (casos 1 e 4) e um óbito três meses após a cirurgia incurative (caso 1). O principal local de recidiva era o fígado, seguido pela peritoneu. A quimioterapia foi introduzido após o retorno do fígado no processo 4. O paciente respondeu bem à terapia e alcançado, a sobrevida global de longo, de 21 meses, apesar de seu estágio avançado. A taxa de sobrevida livre de doença em três anos foi de 64,3%, ea taxa de sobrevida global em três anos foi de 83,8% após a cirurgia.
Discussão
NECs são classificados em tumores puros e tumores compostas mistura adenocarcinomatous diferenciação [1, 2 ]. Critérios de classificação em categorias NEC é que mais de 30% das células exibir as características de diferenciação neuroendócrina [2]. NECs têm um comportamento biológico agressivo e apresentam rápida proliferação [1-7].
Estudamos as características do G-NECs por meio de exame patológico e imuno-histoquímica de ambos os sítios primários e dos gânglios linfáticos metastáticos. Neste estudo, verificou-se uma população misturada de células neuroendócrinas puros, células de adenocarcinoma e suas células intermediárias que têm as características morfológicas de adenocarcinoma com positividade para marcadores neuroendócrinos. Outros estudos têm relatado que a NEC mostra forte coloração para marcadores neuroendócrinos, tais como CGA, SYN, NSE e CD56 [1-3, 5, 7]. Em nossa série, a taxa de positividade para CGA, SYN, NSE e CD56 foi de 42,9%, 100%, 85,7% e 72,7%, respectivamente. Entre estes marcadores, tumores apresentou a maior positividade para SYN e menor positividade para CGA. CGA é um marcador de grânulos neuroendócrinos e um factor indicativo de diferenciação para células neuroendócrinas. O pobre diferenciação nos nossos casos impedido expressão suficiente de grânulos.
Descobrimos que os tumores variou de expressão imuno-histoquímica. Em um tumor, enquanto algumas células com expressão alta CGA mostrou negatividade para outros marcadores, algumas células sem expressão CGA mostrou difusa alta positividade para outros marcadores. Além disso, além de células neuroendócrinas positivos para SYN, algumas células de adenocarcinoma mostraram positividade para SYN entre os tumores do tipo composto. Isso indica histológica e continuidade imunofenotípica entre o componente adenocarcinoma eo componente NEC.
Além disso, concentrando-se em gânglios linfáticos, descobrimos que casos com sítios primários neuroendócrinos puros tinha gânglios linfáticos metastáticos com células neuroendócrinas puros (Tabela 3). A variação nos padrões de expressão imuno-histoquímica do local primário foi mantida mesmo nas células endócrinas puros metastáticos. No caso 6, um dos dois casos com tumores primários combinados, metástase composta da NEC e adenocarcinoma foi visto em alguns gânglios linfáticos, e pura metástase adenocarcinoma foi visto em outros nós. O tumor mostrou consistência em ambas tipo histológico e expressão imuno-histoquímica entre o site primário e os gânglios linfáticos metastáticos. Este resultado levou a uma hipótese quanto ao modo de metástases. Isto é, as células agrupadas, incluindo adenocarcinoma e células neuroendócrinas com imunofenótipos variadas, se espalhar para os nódulos linfáticos e coexistiram lá. Além disso, os nódulos linfáticos de tumores do tipo compósito expressa um padrão de coloração ligeiramente diferente. As células não submetidos a diferenciação suficientemente maduro em sites primários podem diferenciar-se em células neuroendócrinas ou desenvolver expressão imuno-histoquímica variada. Nesta série, não houve associação clara entre a expressão imuno-histoquímica e evolução clínica. Casos com índices de rotulagem baixos Ki67 teve um bom prognóstico. Por exemplo, caso 2, para o qual o índice de marcação de Ki67 foi de 20%, atingido o prazo mais longo de sobrevivência, 55 meses. Caso 4, para o qual o índice de marcação de Ki67 foi de 30%, foi tratada com sucesso com cirurgia e quimioterapia e sobreviveu por 21 meses, apesar de metástases à distância. As limitações deste estudo incluem a curta duração de follow-up e pequeno tamanho da amostra na sua maioria composta de tipos puros. Portanto, estudos em larga escala e de longo prazo são necessários para tirar uma conclusão definitiva.
Conclusão
Em resumo, nós relatamos as características patológicas e imuno-histoquímico de carcinomas neuroendócrinos em ambos os sítios primários e dos gânglios linfáticos metastáticos. As células crescem rapidamente e metástase para os linfonodos mantendo a sua heterogeneidade, mesmo nos locais metastáticos
abreviações
G-NEC:.
Carcinoma neuroendócrino gástrica
redes: tumores neuroendócrinos

NECs:
carcinomas neuroendócrinos
SYN:
sinaptofisina


CGA:
cromogranina A
NSE:
enolase específica dos neurónios
por1:
adenocarcinoma pouco diferenciado, tipo sólido
por2: adenocarcinoma
pouco diferenciado, tipo não-sólida
R:
ressecabilidade
tub2:
moderadamente diferenciado adenocarcinoma tubular
AJCC:
Comité Misto americana do Cancro

anúncio:
adenocarcinoma
HPF: campos de energia
altas
LC:
grandes celular
SC:.
pequenas células
Declarações
Autores 'original apresentada arquivos para imagens
Abaixo estão os links para o originais dos autores apresentados arquivos de imagens. 'arquivo original para a figura 1 12957_2012_1057_MOESM2_ESM.tiff Autores' 12957_2012_1057_MOESM1_ESM.tiff Autores arquivo original para a figura 2 Conflito de interesses
Os autores declaram que não têm interesses conflitantes. contribuições
dos autores
CU e ST concebidos por acção do estude. ST e SN supervisionou a redação do manuscrito. SN realizou a avaliação e pontuação patológico e imuno-histoquímica. AT, HM, TK, SN, RS, KN, YT e TK recolheu os casos e informação clínica. CU realizada a revisão da literatura e escreveu o manuscrito. AT e SN realizada a análise estatística. Todos os autores leram e aprovaram o manuscrito final.

• absorção de glicose e esvaziamento gástrico na doença crítica
• Um estudo de caso-controle sobre o efeito da apolipoproteína E genótipos sobre o risco de câncer de estômago e progression