Uredba o sprostitvi amilin iz kultivirani zajcev želodčnih fundic celic sluznice

Uredba o sprostitvi amilin iz kultivirani zajcev želodčnih fundic celic sluznice
Abstract
Ozadje
amilin (otoček amiloid polipeptidne) je hormon, s predlaganimi vlogo pri urejanju homeostaze glukoze, želodčne motorjem in sekretorni funkcijo in prebavila. V želodčne sluznice amilin je dalo sočasno lokalizirano z somatostatin D-celicah. Dejavniki, ki urejajo želodčne javnost amilin niso znani. V tej študiji smo raziskovali ureditev sproščanja amilin iz želodčne sluznice celic v primarni kulturi. Kunec fundic celice sluznice obogatene za D-celic z nasprotnim elutracijo smo gojili 40 ur. ocenil amilin and somatostatina sprostitev v 2 urah v odgovor na agonisti.
Rezultati
amilin sprostitvi je znatno povečala z aktivacijo protein kinaze C z phorbol-12-miristat-13-acetat, adenilat ciklaze z forskolina in dvig medceličnega kalcija pri A23187. Holecistokinin (CCK), adrenalin in glukagonu podoben peptid-1 (GLP-1) vsakokrat stimulira sproščanje amilin na način, odvisen od doze. je maksimalna CCK-spodbudila javnost večja od obeh adrenalin ali GLP-1, tudi če so bili učinki slednjih okrepiti z isobutylmethylxanthine. Stimulira sproščanje amilin signifikantno inhibira karbahol (za 51-59%) in oktreotid (za 33-42%). Somatostatina javnost vzporedno da amilin.
Sklepe
model kultivirani D-cell zagotavlja sredstva za študij javnost amilin. Amilin izločanje je spodbudila receptor-odvisni in -independent aktiviranje Ca 2 + /protein kinaze C in adenilat ciklaze poteh. Zaviranje vključuje aktiviranje muskarinskih receptorjev in auto-predpis somatostatina.
Ozadje
amilin (otoček amiloid polipeptidne) je peptid 37 aminokislin izraženi predvsem v trebušne slinavke Langerhansovih otočkih [1, 2]. Amilin je bil lokaliziran tudi v celotnem prebavnem traktu [3] in v možganih [4]. Veliko nedavno delo je osredotočeno na fiziologijo trebušne slinavke amilin; Zdi peptid treba hkrati shranjujejo in sočasno izloča z insulinom pri pankreatičnih celic B [5, 6], manjši delež co-lokalizirani s somatostatin v pankreatičnih D-celic [7].
amilin se verjame, da delujejo kot homeostaze glukoze hormon za regulacijo. Amilin zavira bazalno insulina spodbudila sintezo glikogena v podganji skeletne mišice [8, 9]; zavira insulin, somatostatin in izločanje glukagona iz izoliranih trebušne slinavke otočkov in neokrnjeno prežetega trebušne slinavke in zmanjšuje po prandialne glukagona in izločanje insulina [10-12]. Amilin lahko prispeva tudi k urejenosti glikemije tako, da upočasni praznjenje želodca [13]. Da poleg teh fizioloških vlogah je amilin verjeli, da igrajo pomembno vlogo v patogenezi diabetesa. To je glavna sestavina amiloidnimi depoziti v otočkih bolnikih s sladkorno od insulina bolezni [1, 2] in pomanjkanje amilin lahko prispeva neuspeh glikemičnega nadzora tipično insulina neodvisna sladkorna bolezen [14] in v študijah na živalih amilin sama Zdi se, da inducira odpornost na inzulin [15].
A različne fiziološke učinke na prebavilih tudi že opisan. Parenteralno amilin ima anorectant učinek [13], poleg tega, da znatno zmanjša praznjenje želodca [16]. Akcijski Zaščita proti reserpine-, in serotoninski inducirane gastropatije bila opisana [17]. Intravensko amilin je močan zaviralec bazalne, pentagastrin in 2-deoksi-D-glukoze stimulirano izločanje želodčne kisline pri podganah [18] in amilin zmanjša izločanje kisline v izolirani priprave miške želodcu [19]. Poročali je tudi stimulans učinek na serumsko gastrina, čeprav to lahko bil sekundarni inhibicijo izločanja želodčne kisline [20]. V skladu s temi ukrepi so bili amilina veže mesta odkrili pri podganjih želodčne fundic sluznice [21]. Znotraj pojavi trakt amilin prebavil, da sodelujejo lokalizirati z drugimi prebavil peptidi. Uporaba situ
hibridizacije, imunofluorescenco in imunocitokemija, Mulder et al
je pokazala, da amilin pretežno co-lokalizirani s somatostatina v D-celice podgane in miške antralnih sluznice in pri podganah fundic sluznice [22]. Manjšina amilin co-lokalizirani ločenih populacij celic, ki vsebujejo gastrina v antruma in celic, ki vsebujejo PYY v fundusa. Študije na miših pomanjkljivo PDX-1 (ki ne razvijejo G-celice) niso pokazale spremembe v želodcu amilin izražanja, ki potrjuje prevladujočo izražanje amilin v D-celice [23]. Ti podatki, ki kažejo na prisotnost amilin in amilin receptorjev, skupaj z farmakoloških učinkov, je predlagal, da bi lahko imela amilin je parakrin in /ali endokrine regulativno in patofiziološko vlogo pri želodčne sluznice. Vendar pa obstajajo študije, ki preučujejo procese v želodcu izločanje amilin. Takšni podatki so predpogoj za nadaljnje razumevanje želodca amilin fiziologije. Primarne kulture želodčnih in črevesnih žlez z notranjim izločanjem celice so bile uporabljene, da preuči fiziološko in patofiziološko nadzor nad več prebavil peptidov, vključno gastrina, somatostatina, glukagon podobnega peptida-1 (GLP-1) in holecistokinin (CCK) [24-30]. Co-lokalizacija amilin z somatostatina naredi želodca pripravka fundic D-Cell koristen model preučiti nadzor izločanja amilin na celičnem nivoju.
V tej raziskavi smo pregledali receptor odvisna in receptor-neodvisna regulacija amilin izločanje iz kultivirani zajcev želodčnih fundic celice sluznice. Holecistokinin, glukagonu podoben peptid-1 in adrenalin stimulira sproščanje amilin na način, odvisen od doze in muskarinski agonist receptorja karbahola in somatostatinski receptorski agonist, oktreotid inhibira sproščanje amilin. Somatostatin in sprostitev amilin vzporedno dogajale.
Rezultati
receptorjev neodvisen stimulacijo peptid sproščanja
Za najprej oceniti, ali bi se lahko javnost amilin zaznal iz kultur zajcev fundic celic, so bili uporabljeni močni dražljaji receptorjev neodvisen [ ,,,0],26] vsebnost skupna celica (TCC) amilin v pripravi kultivirani celic (801 ± 151 fmol /jamico) je približno 4 do 5-krat manjša od tiste, ki somatostatina (3 768 ± 1325 fmol /jamico). Pomembnejša stimulacijo sproščanja amilin pojavila z aktivnim forbol estra (forbol-12-miristat-13-acetat, PMA), ki se aktivira protein kinazo C (PKC), aktivacijo adenilat ciklaze z forskolina in zvišanje intraceličnega kalcija z ionofornega A23187 (Slika 1). Phorbol ester je bil najbolj močan stimulans, ki vodijo do 8,5-kratno povečanje sproščanja amilin (bazalni javnost 2,14 ± 0,8% povečal na 18,5 ± 1,4% od TCC). Forskolin povečala za javnost 3,3-krat (maksimalno sproščanje 7,2 ± 1,4% od TCC) in A23187 za 1,8-krat (3,8 ± 0,5% TCC), so bili precej manj močan kot PMA. Ni bilo bistvenih razlik med vzorci somatostatinski in amilin sproščanja (sl. 1). Slika 1 receptor neodvisna stimulacija amilin (zgoraj) in somatostatinski (spodaj) iz kultiviranih D-celic. Celice smo stimulirali z forbol-12-miristat-13-acetat 100 nm (PMA), forskolin 10 uM (FSK) in A23187 1 um 2 uri. Rezultati so izraženi kot% vsebnosti celic peptida sprosti, pomeni ± SEM, ** P
< 0,01 vs. nadzora, * P
< 0.05 v primerjavi z nadzorom.
Receptor odvisna od stimulacija
so Prejšnje študije so pokazale, da je CCK močan spodbujevalec sproščanja somatostatinski [26]. To je bilo potrjeno tukaj. CCK odmerka odvisno stimulirano sproščanje amilin iz kultivirane celice (slika 2). Maksimalno stimulacijo, poveča 2,75-krat, 2,1 ± 0,7% bazalnih javnost povečala za 5,9 ± 0,8% TCC, prišlo z CCK 10 nm. Podoben odziv na dozo vzorec smo videli, CCK stimulirano sproščanje somatostatinski čeprav je bilo maksimalno sproščanje relativno višji za somatostatina (4,4-krat, 1,1 ± 0,1% na 5,2 ± 0,7% TCC) od amilin (slika 2). Slika 2-CCK spodbudila amilin (zgoraj) in somatostatina (spodaj) izpustitev iz kultiviranih D-celice. Kultivirane celice sluznice smo stimulirali s CCK 2 uri. Rezultati so izraženi kot% vsebnosti celic peptida sprosti, pomeni ± SEM, * P
< 0,05 proti kontroli.
Aktivira adenilat ciklazo povezan receptorjev z obeh adrenalin ali glukagon-podobnega peptida-1 povzročila odvisnosti od odmerka majhno povečanje tako somatostatinski (maksimalno povečanje 1,44 in 1,35 krat) in sprostitev amilin (1,36 in 1.25 in krat) (sliki 3 in 4). Slika 3 Vpliv adrenalin na amilin (vrh) in somatostatinski (spodaj) izpustitvi iz kultiviranih D-celice. Celice smo stimulirali z naraščajočimi koncentracijami adrenalin (EPI) v prisotnosti ali odsotnosti isobutylmethylxanthine 100 um (IBMX) za 2 uri. Rezultati so izraženi kot% vsebnosti celic peptida sprosti, pomeni ± SEM, * P
< 0.05 v primerjavi z nadzorom.
Slika 4 Učinek glukagon podobnega peptida-1 o amilin (zgoraj) in somatostatinski (spodaj) izpustitvi iz kultiviranih D-celice. Celice smo stimulirali z naraščajočimi koncentracijami glukagon podobnega peptida-1 (GLP), v prisotnosti ali odsotnosti isobutylmethylxanthine 100 uM (IBMX) za 2 uri. Rezultati so izraženi kot% vsebnosti celic peptida sprosti, pomeni ± SEM, * P
< 0.05 v primerjavi z nadzorom.
Sodelujoči adrenalin in GLP-1, in sicer s povečanjem sočasni uporabi z isobutylmethylxanthine zaviralcev fosfodiesteraze (IBMX) (100 uM). Bazalno javnost amilin je bil 2,0 ± 0,2% TCC in največja IBMX izboljšano sprostitev 3,2 ± 0,2% TCC z adrenalin na 100 mikrometrov in 3,2 ± 0,3% TCC z GLP-1 pri 10 nM. Basal somatostatin sprostitev (1,1 ± 0,1% TCC) se je povečala za 2,7 ± 0,1% TCC z adrenalin + IBMX in 2,1 ± 0,4% TCC z GLP-1 + IBMX. To so bili še vedno precej manj kot-CCK stimulira sproščanje. Ni bilo razlike v vzorcu ali razmerje somatostatina in amilin odgovorov (sliki 3 in 4).
Zaviralni ureditev sproščanja amilin
Zdravljenje z somatostatina analognega oktreotid proizvaja majhne, ​​vendar ne znatno zmanjšanje tako bazalnega amilin ( 14%) in bazalni somatostatina (18%) izločanje (slika 5). Karbahola ni imela očitnega vpliva na obeh bazalni amilin ali izločanja somatostatinski (slika 5). CCK-spodbudila javnost amilin je bistveno zavira oktreotid (za 42%) in muskarinskega agonisti karbahol (za 51%). Podobno epinefrina (s IBMX) -stimulated amilin sproščanje bil inhibiran s 33% po oktreotid in 59% glede na karbahol (tako P
< 0,05). Kot je prikazano na sliki 6, je bil podoben vzorec viden s sprostitvijo somatostatinski. Slika 5 Vpliv oktreotid in karbahol na bazalni amilin in somatostatinski izpustitvi iz kultiviranih D-celice. D-celice smo stimulirali z obeh oktreotid 10 nm (okt) ali karbahol 100 mikrometrov (CBH) za 2 uri in sprostitev amilin in somatostatin ocenjene. Rezultati izražena kot% vsebnosti celic peptida sprosti, srednja vrednost ± SEM.
Slika 6 Inhibitorne učinke oktreotid in karbahol on-agonisti spodbudila amilin (zgoraj) in somatostatinski (spodaj) javnost. D-celice smo stimulirali z obeh CCK 10 nm ali adrenalin z isobutylmethylxanthine obeh 100 uM (epi) v kombinaciji z oktreotid 10 nM (ČDO) ali karbahol 100 uM (CBH) za 2 uri. Rezultati so izraženi kot% vsebnosti celic peptida sprosti, pomeni ± SEM, * P
< Razprava 0,05 vs. posamezne agonistov stimulirani za javnost.
To je prva študija, naj preuči sproščanje amilin iz želodčne sluznice na celičnem nivoju. Rezultati so pokazale, da amilin ni bil shranjen le v želodčnih celicah sluznice, ampak tudi, da domnevni fizioloških agonistov urejeno sproščanje peptida. Prejšnje študije so lokalizirani amilin v želodec uporabo Northern blot [31, 32], imunocitokemija [33], radioimunski [3] in situ
hibridizacije [22], vendar je sproščanje želodčne amilin še ni bila dokazana.
večina želodca fundic amilin zdi, da je lokaliziran s somatostatina v D-celic [22], zato jih uporabljamo model kultivirani zajec D-celično raziskati agente nadzorujejo celično sproščanje amilin in primerjati to somatostatinskih izločanje.
Začetne študije so bile izvedene z močnimi zdravili je znano, da se neposredno aktivira izločanje peptidov iz endokrinih celic na način receptorja neodvisen [26] forbol estri (tak PMA) neposredno aktivira protein kinaze C v notranjo plast celične membrane; to pa aktivira celične procese, potrebne za eksocitoze. PMA je močan spodbujevalec tako somatostatinski in amilin izločanja. kalcijev ionofornega A23187, ki povečuje raven znotrajcelične kalcija ([Ca 2 +] i]), prav tako stimulira amilin javnost, čeprav je bilo precej manj močan kot PMA. To je podobno odgovorov videli v človeški antralnih [26] in udarci fundic D-celic [30], v katerem je verjamemo dvig [Ca 2 +] i je predvsem lajšanju, namesto neposredno spodbuja izločanje. Neposredno aktiviranje adenilat ciklaze z forskolina spodbudila tudi sproščanje amilin. Zato začetne študije so pokazale, da je mogoče sproščanje amilin stimulirane z aktivacijo ene od dveh glavnih znotrajceličnih signalnih poti znano, za povečanje izločanja peptid. Ko so ugotovili, da so bile te poti aktiven, smo raziskali kar bi fiziološke sredstva stimulira izločanje amilin na način receptorja odvisni.
Holecistokinin-8 proizvaja povečanje doze odvisno amilin in somatostatinski izločanja. CCK je znano, da je močan in vitro
stimulant sproščanja somatostatinski iz antralnih in fundic D celic [26, 30, 34]. Podoben odziv odmerka so opazili amilin, čeprav je skupni prirastek nekoliko večje pri somatostatina kot amilin. Nadaljnje raziskave bodo potrebne, da se ugotovi, ali to predstavlja poseben bazen somatostatina posebej izloča po stimulaciji z CCK. pojavijo Fundic D-celice izraziti tako CCK-1 (CCK A) in CCK-2 (gastrin /CCK B) receptorje [35]. Aktiviranje teh receptorjev sproži aktivacijo fosfolipaze C, sprostitev diacylglerol in inozitol 1,4,5-trisphosphate in poznejše zvišanje [Ca 2 +] i in aktiviranje PKC, ki vodi do peptidov za javnost [36 ]. Ti rezultati so skladni z rezultati za A23187 in PMA stimulacijo. Zato se zdi, da lahko CCK deluje kot fiziološki stimulans za sprostitev amilin.
Adrenalina in GLP-1 proizvaja majhno povečanje odvisno od velikosti odmerka amilin in izločanje somatostatinski. Ta učinek se lahko poveča s sočasnim zdravljenjem z fosfodiesteraze zaviralec IBMX, ki zavira razgradnjo cAMP in ojača odzivov, ki nastanejo adenilat ciklaznih sklopljenih receptorjev. Vendar pa so odzivi so bili še vedno bistveno manj, kot tistim z aktivacijo Ca 2 + /PKC poti, ki jo bodisi CCK ali PMA. Podobne razlike v občutljivosti so opisani v človeški antralnih [26] in pasje fundic [30] D-celice.
Prevladujoči zaviralni vplivi doslej opisane na fundic D-celice so muskarinskih agonistov [37, 38] in avtoregulacijo po somatostatinske sama [39, 40]. Odzivi tukaj poročali, so v skladu s podatki o sprostitvi somatostatinski pred udarci fundic D-celic [30, 37]. V nasprotju s tem, muskarinskih receptorjev so stimulacijski za antralnih D-celice [41], kar verjetno odraža določeno razliko v funkciji. Sedanja študija je potrdila zaviralne ukrepe tako somatostatina-analogni oktreotid in muskarinskega agonisti karbahol proti izpustitvi somatostatinski. Podoben zaviranje stimulirane sproščanja amilin opazili. To kaže, da vivo
zaviranje sproščanja amilin vključuje parasimpatičnega vhod in avtokrin uredbo s somatostatina.
V vseh pogojih študiral somatostatin in amilin so izloča vzporedno, saj je mogoče pričakovati, če so co-shranjena v izločevalnih zrncih. Insulin in amilin so sočasno izločajo iz pankreatičnih celic beta, izločanje običajno zgodi v vzporednem [42-44], vendar razlika izločanje so poročali v eksperimentalnih modelih sladkorne bolezni [45, 46]. Nadaljnje raziskave bodo potrebne za dodatno opredeliti odnos med izločanjem in ukrepih želodca amilin in somatostatina. V posameznih pankreatičnih otočkov zdi, da so kooperativno vlogo pri uravnavanju izločanja peptid dve peptidi: kombinirana imunoneutralisation amilin in somatostatina povzročilo večje izboljšanje insulina in glukagona izločanje kot nevtralizacijo posamični [10]. To bo zanimivo, da preveri, ali so podobne rezultate kot pri želodčnih funkcij.
Post-prandialne sproščanje črevesnih CCK in GLP-1 zaporo praznjenje želodca in izločanje kisline [13, 47]. Ti učinki so, čeprav se meditiral vsaj delno preko vmesne sproščajo iz D-celice namesto neposredno inhibicijo kislinsko izločajo parietalnih celic [48]. Bilo je verjel, da je bil somatostatina edini vmesni vendar rezultati raziskave kažejo, da lahko ECL- in druge endokrine celice imajo parakrin regulacije z amilin v parietalnih vlogo v integrativnih odzivov na obroke. Zaviranje-amilin povzroča histamina izpuščen iz podganjih fundic segmentov sluznice in vitro je bila
posredovana preko povečanega sproščanja somatostatinski [19], vendar s pomočjo antagonist selektivno somatostatina receptorja Rossowski et al
pokazala in vivo
pri podganah, da je del kislinsko inhibitornih dejanj tako amilin in sorodnih peptidov adrenomedulin bili somatostatinski neodvisni [49]. Posebne vloge amilin v želodca fiziologiji zahtevajo nadaljnjo pojasnitev, vendar ti podatki kažejo, da je lokalno sprosti amilin neposredno sposoben regulirati funkcije sluznice.
Odzive na adrenalin in karbahol kažejo, da lahko avtonomno oživčenje uravnavajo izločanje amilin. Skupna bilanca vivo
bi potem odvisen od relativne vhod inhibicije muskarinskih in spodbujevalnih adrenergične sistemov, skupaj s kroženjem endokrine in lokalno parakrin in morebiti luminalno dejavnikov.
Zaključek
Ta študija opisuje začetno opredelitev dejavniki, ki urejajo želodca javnost amilin. Pokazali smo, da se javnost amilin mogoče spodbuditi s stimulacijo receptorjev odvisen od ene od Ca 2 + /PKC in adenilat ciklaze /cAMP poti in da se fiziološko lahko ustrezne peptide in nevronske mediatorji izboljšanje javnost amilin. To podpira hipotezo, da amilin lahko modul delovanje želodčne sluznice. Ta študija potrjuje, da bodo kratkoročne kulture celic, ki jih elutracijo obogatenih zgled za raziskovanje patofiziološko sproščanje želodčne amilin in zagotavlja pot za nadaljnje razumevanje vloge amilin pri urejanju želodca motorja in sekretorni funkcijo.
Metode
Materiali
Študiie smo dobili od Universal Biologicals (London, UK), oktreotid od Novartis (Surrey, Velika Britanija) in Ham je F12 /Dulbeccovem spremenjenim Eagle je gojišča (50:50, proti: proti), glutamin, Hanks uravnotežen soli rešitev in fetalni telečji serum bili kupljeni od Gipco (Paisley, UK). Sulfatnega holecistokinin-8 (CCK), človeško GLP-1 in vsi drugi reagenti so bili pridobljeni iz Sigma (Poole, Združeno kraljestvo).
Cell izolacijo in gojenje
primarne kulture zajcev želodca fundic celic sluznice, obogaten za D-celice so bile dobljeni kot je opisano predhodno [39, 48]. Na kratko, je zajec fundic sluznica podvržemo sekvenčni EDTA in kolagenaze prebavo. Nastalo suspenzijo Celica je bila obogatena za D-celic s protitočno elutatriation uporabo standardnega rotor Beckman JE 5,0, kot smo že prej opisali. obogaten frakcija D celic resuspendiramo v popolnem mediju kulture (Ham je F12 /Dulbeccov modificiran Eaglov gojišča (50:50, v: v), ki vsebuje 2 mM glutamina, 10 mM HEPES pH 7,4, 0,22% NaHCO 3, 10% fetalni telečji serum, 1 mg /l hidrokortizon, 8 mg /l inzulin, 100 mg /l penicilina, 100 mg /l gentamicin, 100 mg /l streptomicin) in kultiviramo na Študiie prevlečenih 24 tudi tkivne kulture ploščah [50] z gostoto 1 x 10 6 celic /tudi za 40 ur v atmosferi 5% CO 2, 95% zraka pri 37 ° C.
objava študije
gojenih celic izperemo 3 krat v izpust medija (uravnoteženi raztopini soli Earl je vseboval 0,1% bovinega serumskega albumina, 10 mM HEPES pH 7,4), da odstranite odmrle in brez prilepljenih celic. Dodamo še 1 ml sproščanje medija, ki vsebuje testne agonistov in celice inkubiramo 2 uri pri 37 ° C v atmosferi s 5% CO 2, 95% zraka. Po obdobju sproščanja, je pogojen mediji odsesamo in centrifugirajo, da se odstranijo brez prilepljenih celic. Skupna celični vsebnost peptida smo ekstrahirali z vrenjem v 1 ml v destilirani vodi. Pogojene mediji in celične ekstrakte smo hranili pri -70 ° C, dokler testiramo za vsebnost peptida [30]. Merjenje
Peptid
koncentracije somatostatinskih bili ocenjeni z radioimunsko (RIA) s antiseruma K2, kot je bilo prej [39] opisano. Pol maksimalno inhibicijo vezave prišlo pri 2 fmol /cev in znotraj testom in med testom sprememba je bila 7% in 8% odstotkov oz. Koncentracije amilina smo izmerili z neposrednim ELISA (polotoku Laboratories, Belmont, CA, USA) po navodilih proizvajalca. Analizni ima vrsto 0.04-2 ng /ml, in znotraj testom in variacije med vsebnosti < 5% in < 14% oz. Protitelo uporabili ima 100% navzkrižno reaktivnost s amilin in amilin-amid a < 1% navzkrižno reaktivnost s CGRP in zanemarljivim reakcijo z ostalimi biološko aktivnih peptidov. Vse eksperimentalne vzorce iz ene same priprave živalskega smo testirali v isti RIA ali ELISA.
Statistična analiza
peptid sprostitvi v času 2 ur, je bila izražena kot odstotek celotne vsebnosti celic (TCC) tega peptida. Vsak eksperimentalni pogoj smo testirali v dvojniku in rezultati iz enega pripravka živalskega šteli kot so N = 1. Rezultati izraženi kot povprečje ± SEM od 3-6 ločenih pripravkov živali. Vsak 24 tudi plošča vedno vključen nadzor (bazalni) vrtin in pozitivne stimulansov. Sprostitev peptida s stimulansi je bil v primerjavi z bazalnega javnost na zadevnem 24 vdolbinami. Enosmerne analize variance in Studentovim paru t-test smo uporabili za določanje pomen. U D
vrednost < 0.05 je bil obravnavan kot pomemben
Seznam kratic
CCK.
Holecistokinin
ECL-:
enterokromafinu kot


GLP-1:
glukagon podobnega peptida-1
IAPP:
otoček amylioid polipeptid
IBMX:
isobutylmethylxanthine
PKC:
protein kinaza C
PMA:
phorbol-12-miristat -13-acetat, TCC, skupna vsebnost celic.
deklaracij
Priznanja
to delo je bilo podprto v delu, ki ga je Svet za medicinske raziskave štipendijo za usposabljanje ILPB.
Nekatere izmed podatki so bili predstavljeni v abstraktni obliki v Združenih Evropski gastroenterologijo tedna v Birminghamu 1997.
avtorjev originalnih predloženi datoteke za slike
Spodaj so povezave do avtorjev izvirnih predloženih spisov za slike. "Izvirno datoteko na sliki 1 12899_2003_47_MOESM2_ESM.jpeg avtorjev 12899_2003_47_MOESM1_ESM.jpeg avtorjev prvotni datoteki Slika 2 12899_2003_47_MOESM3_ESM.jpeg avtorjev prvotni datoteki Slika 3 12899_2003_47_MOESM4_ESM.jpeg avtorjev prvotne datoteke za izvirno datoteko Slika 4 12899_2003_47_MOESM5_ESM.jpeg avtorjev za sliki 5 "izvirno datoteko na sliki 6 avtorjev 12899_2003_47_MOESM6_ESM.jpeg avtorjev prispevkov
ILPB zasnovanih študij, ki se izvaja na celično izolacije, kulture, poskusov sproščanja, imunskima in napisal osnutek in končne verzije rokopisa. Pozno JC zasnovan študijo in co-napisal prvo rokopisno osnutek.

• Dejavniki tveganja za globino infiltracije v diferenciranih depresivni zgodnjega raka želodca: predhodno dejavniki analysis
• Razlika izražanje genov v mišje želodčnega fundusa primanjkuje vmesne celice Cajal