Regulacija Amylin puštanje iz kulturan zečjih želučanih fundusnih stanica sluznice

Regulacija Amylin puštanje iz kulturan zečjih želučanih fundusnih stanica sluznice pregled apstraktne pregled Pozadina pregled Amylin (otočić amiloid polipeptida) je hormon s predloženim uloge u regulaciji homeostaze glukoze, želuca motora i sekretorni funkciji i gastroprotection. U želučanoj sluznici amilina pronađena lokalizirani sa somatostatin u D-stanica. Čimbenici koji reguliraju želučanu Amylin oslobađanje su nepoznati. U ovoj studiji smo istraživali regulaciju Amylin oslobađanja od želučanih stanica sluznice u primarnoj kulturi. Kunića fundusa mukozne stanice obogaćen D-stanica protustruji ispiranja su kultivirane tijekom 40 sata. Amilina i somatostatina oslobađanje tijekom 2 sata kao odgovor na agonista procjenjuje. Pregled Rezultati
amilina oslobađanje značajno povećana aktivacija protein kinaze C s forbol-12-miristat-13-acetat, adenilatciklaze s forskolinom a povećava unutarstanični kalcij sa A23187. Kolecistokinina (CCK), epinefrin i glukagon-sličan peptid-1 (GLP-1), svaki stimulirano amilina otpuštanje na način ovisan o dozi. Maksimalna CCK stimulirano otpuštanje bila veća nego bilo epinefrina ili GLP-1, čak i kada su učinci druga dva su poboljšana izobutilmetilksantina. Stimulirano otpuštanje amilin bila signifikantno inhibirana sa karbakolom (do 51-59%) i somatostatina (za 33-42%). Somatostatin izdanje paralelno onoj Amylin.
Zaključci pregled Model kulturan D-stanica osigurava sredstva za proučavanje Amylin izdanje. sekrecija amilin se stimulira receptor ovisnim ili neovisnim aktivaciju Ca 2 + /protein kinaze C i ciklaze putovima. Inhibicija uključuje aktiviranje muskarinskih receptora i auto-regulaciju somatostatina. Pregled Pozadina pregled Amylin (otočić amiloid polipeptida) je 37-amino peptida kiseline pretežno je izražena u Langerhansovih otočića pankreasa [1, 2]. Amilin također je lokalizirana u gastrointestinalnom traktu [3] i [4] mozga. Mnogo nedavni rad je usmjeren na fiziologiji gušterače Amylin; peptid Čini se da je ko-skladištiti i ko-izlučuje inzulin u pankreasa B-stanica [5, 6], a manji udio je lokalizirani sa somatostatina u pankreasa D-stanice [7].
Amylin se smatra da su funkcioniraju kao hormon koji regulira homeostazi glukoze. Amilin inhibira bazalnu i inzulinom stimulirano sintezu glikogena u skeletnim mišićima štakora [8, 9]; inhibira inzulin, somatostatin i lučenje glukagona od izoliranih otočića gušterače i netaknuta struji gušterače i smanjuje nakon obroka glukagon i izlučivanje inzulina [10-12]. Amylin također mogu pridonijeti kontroli glikemije tako usporavaju pražnjenje želuca [13]. Je dodatak fiziološka uloga, amilin vjeruje se, igra važnu ulogu u patogenezi šećerne bolesti. To je glavni sastojak amiloidnih naslaga u otočića pacijenata s dijabetesom ovisi o inzulinu melitus [1, 2] i nedostatak amilina mogu doprinijeti neuspjeh kontrole glikemije tipičan za inzulin-ovisni dijabetes [14] i u studijama na životinjama sama amilin izgleda da inducira otpornost na inzulin [15].
mnoštvo fizioloških učinaka na gastrointestinalni trakt su također opisane. Parenteralno davanje amilina ima anorectant učinak [13], uz značajno smanjenje pražnjenja želuca [16]. Protectant djelovanje protiv reserpine- i serotonin inducirane gastropatije je opisano u [17]. Intravenska amilin je potentni inhibitor bazalnih, pentagastrina i 2-deoksi-D-glukoza poticano izlučivanje želučane kiseline kod štakora [18] i amilin smanjuje lučenje kiseline u izoliranom pripravi miša želuca [19]. Stimulans učinak na serumske gastrina također je objavljeno, premda to može biti sekundaran u odnosu na inhibiciju sekrecije kiseline [20]. U skladu s tim radnjama amilina vežu web stranice su otkrivena u štakora želučane sluznice fundusa [21]. Unutar pojavi amilin gastrointestinalni trakt co-lokaliziranje s drugim gastrointestinalnim peptida. Korištenje in situ hibridizacije pregled, imunofluorescencije i imunocitokemiju, Mulder i sur
pokazali da amilin uglavnom lokalizirani sa somatostatina u D-stanica miša i štakora antralnog sluznice i štakora fundusa sluznice [22]. Manjina Amylin lokalizirani na odvojene populacije stanica gastrina koje sadrže u antruma i stanice PYY koji sadržava fundusa. Studije u PDX-1 miševa sa nedostatkom (koji ne uspijevaju razviti G-stanice) nije pokazala promjenu u želučanom Amylin izražavanja, potvrđujući prevladavajući izraz Amylin unutar D-stanicama [23]. Ovi podaci pokazuju prisutnost amilina i amilina receptora, zajedno s farmakološkim učincima, sugerira da amilin mogli imati parakrino i /ili endokrini regulatorni i patofiziološku ulogu u sluznicu želuca. Međutim ne postoje studije istražuju procese koji su uključeni u želučanom Amylin sekreta. Takvi podaci su preduvjet za daljnje razumijevanje želučane Amylin fiziologije. Primarne kulture želučanog i endokrinih stanica su bili korišteni za ispitivanje fizioloških i patofizioloških kontrolu nekoliko gastrointestinalnih peptida uključuje gastrina, somatostatin, glukagonu sličan peptid-1 (GLP-1) i kolecistokinina (CCK) [24-30]. Ko-lokalizacija Amylin s somatostatina čini pripremu želučane fundusa D-stanica koristan model za ispitivanje kontrolu izlučivanja Amylin na staničnom nivou.
U ovom istraživanju smo ispitali receptor ovisan i receptora neovisan regulacija Amylin iscjedak iz kulturan zečjih želučanih fundusnih stanica sluznice. Kolecistokinin, glukagonu sličan peptid-1 i epinefrin stimulirano amilina otpuštanje na način ovisan o dozi, a muskarinski agonist karbakol i somatostatin receptor agonist oktreotid inhibirana amilina oslobađanje. Somatostatin i amilin izdanje je došlo paralelno. Pregled Rezultati
receptora neovisan stimulacije oslobađanja peptida Netlogu Za prvo procijeniti da li amilin puštanje na slobodu moglo se otkriti sa kulturama zec fundusnih stanica, korišteni su jaki receptora neovisan podražaja [ ,,,0],26] sadržaj ukupnog stanica (TCC) od amilina priređivanje kultiviranih stanica (801 ± 151 fmol /jažica) je bio približno 4 do 5 puta niža nego somatostatina (3 768 ± 1325 fmol /well). Značajne stimulacije amilina otpuštanja došlo aktivnim forbol esterom (forbol 12-miristat-13-acetat, PMA), koji aktivira protein kinazu C (PKC), aktivacije adenilatciklaze s forskolinom i povišenja intracelularnog kalcija s ionoforom A23187 (Slika 1). Forbol ester bio najmoćniji stimulans, što je dovelo do 8,5 puta povećanja Amylin izdanju (bazalni objaviti 2,14 ± 0,8% povećanje na 18,5 ± 1,4% od TCC). Forskolin povećao izdanje 3.3 puta (maksimalno oslobađanje 7,2 ± 1,4% od TCC) i A23187 za 1,8 puta (3,8 ± 0,5% TCC), to su bili znatno manji nego uvjerljiv PMA. Nije bilo značajne razlike između uzoraka somatostatina i Amylin izdanju (Sl. 1). Slika 1 receptor neovisno stimuliranje amilina (gore) i somatostatina (dno) od uzgojenih D-stanica. Stanice su stimulirane forbol-12-miristat-13-acetata (PMA 100 nM), forskolin 10 uM (FSK) i A23187 1 uM 2 sata. Rezultati su izraženi kao% sadržaja stanica peptida oslobođenog srednja vrijednost ± SEM, ** P pregled < 0.01 vs kontrola, * P izvoznici < 0.05 vs kontrola. Pregled receptora ovisna stimulacija pregled Prethodna ispitivanja su pokazala da je za CCK je snažan stimulans somatostatina otpuštanja [26]. To je potvrđeno i ovdje. CCK ovisno o dozi stimulirano otpuštanje amilina iz kultiviranih stanica (slika 2). Maksimalna stimulacija, povećanje od 2,75 puta, 2,1 ± 0,7% bazalni izdanje porasla na 5,9 ± 0,8% TCC, došlo CCK 10 nm. Sličan obrazac odgovora na dozu koja je viđena na CCK-stimulirana somatostatina otpuštanja iako je maksimalno otpuštanje je razmjerno veći za somatostatina (4,4 puta, 1,1 ± 0,1% na 5,2 ± 0,7% TCC) nego Amylin (Slika 2). Slika 2 CCK-stimulirane amilin (gore) i somatostatin (dolje) otpuštanje iz kulture D-stanica. Uzgojene mukozne stanice su stimulirane CCK 2 sata. Rezultati su izraženi kao% sadržaja stanica peptida pušten, srednja vrijednost ± SEM, * P izvoznici < 0.05 vs kontrola. Pregled aktivacije adenilat ciklaze receptora spojenih s bilo epinefrina ili glukagon-sličan peptid-1, doveli su do malog povećanja ovisan o dozi kod obje somatostatina (maksimalno povećanje 1,44 i 1,35 saviti redom) i amilina otpuštanja (1,36 i 1.25 preklapanja pojedinačno) (Slika 3 i 4). Slika 3 Učinak epinefrina na amilina (gore) i somatostatina (dolje) oslobađanje od uzgojenih D-stanica. Stanice su stimulirane s rastućim koncentracijama adrenalina (EPI) u prisutnosti ili odsutnosti izobutilmetilksantina 100 uM (IBMX) tijekom 2 sata. Rezultati su izraženi kao% sadržaja stanica peptida pušten, srednja vrijednost ± SEM, * P izvoznici < 0.05 vs kontrola.
Slika 4. Utjecaj glukagonu sličan peptid-1 na amilina (gore) i somatostatina (dolje) oslobađanje od uzgojenih D-stanica. Stanice su stimulirane s rastućim koncentracijama glukagon-sličan peptid-1 (GLP), u prisustvu ili odsustvu izobutilmetilksantina 100 uM (IBMX) 2 sata. Rezultati su izraženi kao% sadržaja stanica peptida pušten, srednja vrijednost ± SEM, * P izvoznici < 0.05 vs kontrola.
Odgovora na epinefrina i GLP-1 se povećati istovremenim davanjem s izobutilmetilksantina inhibitora fosfodiesteraze (IBMX) (100 uM). Bazalna amilin izdanje je 2,0 ± 0,2% TCC i maksimalna IBMX poboljšane izdanje 3,2 ± 0,2% TCC sa adrenalin na 100 uM i 3,2 ± 0,3% TCC s GLP-1 na 10 nM. Bazalna somatostatin otpuštanje (1,1 ± 0,1% TCC) povećana je na 2,7 ± 0,1% TCC s adrenalina + IBMX i 2,1 ± 0,4% TCC s GLP-1 + IBMX. To su još uvijek znatno manje od CCK-stimulira oslobađanje. Nije bilo razlike u uzorku ili omjer somatostatina i amilina odgovora (slike 3 i 4). Pregled Inhibitorski reguliranje otpuštanja amilina
tretman s analog somatostatina ostreotide proizvesti mala, ali bez značajnog smanjenja i bazalna amilina ( za 14%) i bazalnog somatostatina (18%) sekrecija (Slika 5). Karbakol nema vidljiv učinak na bilo bazalnih amilin ili lučenja somatostatina (Slika 5). CCK stimulirano otpuštanje amilin značajno inhibirana za somatostatina (42%), a muskarinski agonist karbakol (za 51%). Slično epinefrina (s IBMX) -stimulated amilin otpuštanje inhibirana za 33% po somatostatina i 59% po karbakola (oba P
< 0,05). Kao što je prikazano na slici 6, sličan uzorak je viđen s somatostatina izdanje. Slika 5 Učinak somatostatina i karbahola na osnovnoj Amylin i somatostatina puštanje iz uzgojenih D-stanica. D-stanice su stimulirane bilo ostreotide 10 nM (OCT) ili karbahola 100 uM (CBH) tijekom 2 sata, a oslobađanje amilina i somatostatina procjenjuje. Rezultati izraženi kao% sadržaja stanica peptida oslobođenog srednja vrijednost ± SEM.
Slika 6 inhibitorske efekte somatostatina i karbakola na stimuliranog agonistom amilina (gore) i somatostatina (dolje) oslobađanje. D-stanice su stimulirane bilo CCK 10 nM ili epinefrin s izobutilmetilksantin obje 100 uM (EPI) u kombinaciji sa ostreotide 10 nM (OCT) ili karbahola 100 uM (CBH) 2 sata. Rezultati su izraženi kao% sadržaja stanica peptida pušten, srednja vrijednost ± SEM, * P izvoznici < 0,05 prema nadležnom agonist-stimulirano puštanje. Pregled Rasprava pregled Ovo je prva studija koja ispituje otpuštanje Amylin iz želučane sluznice na staničnoj razini. Rezultati su pokazali da ne samo amilin je pohranjena u želučanim stanica sluznice ali da pretpostavljenih fiziološka agonista regulira oslobađanje peptida. Prethodne studije su lokalizirani amilin do želuca upotrebom Sjeverna upijajući [31, 32], fosforilacija [33], radioimunotestom [3] i in situ hibridizacije pregled, [22], ali oslobađanje želučanih Amylin ranije nije bio pokazao.
većina želučane fundusa Amylin Čini se da je lokalizirana sa somatostatina u D-stanicama [22] Stoga smo koristili kulturni modela zec D-stanica istražiti sredstva koja kontroliraju staničnu oslobađanje Amylin i usporediti to somatostatinske sekrecije.
Početne studije su provedene sa snažnim sredstvima poznatim direktno aktivirati peptidne izlučevine endokrinih stanica na način receptora neovisan [26] esteri forbola (kao što je PMA) izravno aktivira protein kinaze C u unutarnji sloj stanične membrane; ovaj zauzvrat aktivira stanične procese potrebne za eksocitozu. PMA je moćan stimulans oba somatostatina i Amylin sekreta. Kalcij ionofora A23187, što povećava razine međustaničnog kalcija ([Ca 2 +] i]) je također stimulirana amilin izdanje, iako je znatno manje nego uvjerljiv PMA. To je slično odgovorima vidjeti u ljudskoj sekundarnom [26] i pseće fundusnih D-stanicama [30] gdje je vjerovati porast [Ca 2 +] i uglavnom moderiranju umjesto izravno stimulirajući lučenje. Izravno aktiviranje adenilatciklaze s forskolinom također stimulira Amylin izdanje. Stoga su početne studije pokazale da amilin otpuštanje može se stimulirati aktiviranjem jedne od dviju glavnih unutarstaničnih signalnih puteva, koji su poznati pojačaju izlučivanje peptida. Ustanovi da su ovi putovi su aktivni istraživali smo koji fiziološki sredstva mogu stimulirati amilin izlučivanja u način receptora ovisnog.
Kolecistokinin 8- proizvedene dozi ovisno povećanje u amilina i somatostatinske sekrecije. CCK je poznato da je moćan in vitro pregled stimulans somatostatina otpuštanja iz antralnim i fundusnih D-stanica [26, 30, 34]. Sličan odgovor doza je vidio Amylin, iako je ukupni prirast bio je nešto veći kod somatostatina od Amylin. Daljnja istraživanja će biti potrebna kako bi se utvrdilo da li to predstavlja poseban bazen somatostatina posebno luči nakon stimulacije s CCK. Fundusa D-stanice pojavljuju izraziti obje CCK-1 (CCK A) i CCK-2 (gastrin /CCK b) receptore [35]. Aktivacija tih receptora izaziva aktivaciju fosfolipaze C, oslobađanje diacylglerol i inozitol 1,4,5-trifosfata i zatim povišenja [Ca 2 +] i i aktiviranje PKC, što dovodi do oslobađanja peptida [36 ]. Ovi rezultati su u skladu s rezultatima za A23187 i PMA stimuliranje. Stoga se čini da CCK može djelovati kao fiziološki stimulans od amilina otpuštanja.
Epinefrin i GLP-1 proizveden malo povećanje ovisne o dozi u amilina i izlučivanje somatostatina. Ovaj se učinak može pojačati zajedničko liječenje s inhibitorom fosfodiesteraze IBMX, koji inhibira razgradnju cAMP pojačava odgovor generira adenilat ciklaze vezanih receptora. No odgovori su bili još uvijek znatno manje od onih vidio s aktivacijom Ca 2 + /PKC stazi bilo CCK ili PMA. Slične razlike u osjetljivosti su opisani u ljudskom antralne [26] i pseći fundusa [30] D-stanica.
Dominantni inhibitorni utjecaj dosad opisanim u fundusnih D-stanice su agonisti muskarinskog receptora [37, 38] i autoregulacija po Somatostatin sama [39, 40]. Odgovori izvijestili ovdje su u skladu s podacima o somatostatina oslobađanje od pseće fundusnih D-stanicama [30, 37]. Za razliku od toga, muskarinski receptori su nadražajni da antralnim D-stanicama [41], vjerojatno odražava određenu razliku u funkciji. Trenutna studija potvrdila inhibicije djelovanja oba somatostatin-analognom somatostatina i muskarinskih agonista karbahola protiv somatostatina izdanju. Slična inhibicija stimuliranog Amylin izdanja vidio. To upućuje na zaključak da se in vivo pregled inhibicija Amylin oslobađanje uključuje parasimpatički ulaz i autokrini propis po somatostatina.
U svim uvjetima studirao somatostatin i amilin su luči paralelno, kao što se može očekivati, ako su ko-pohranjen u izlučivanje granula. Inzulin i amilin su ko-izlučuje iz gušterače beta-stanica, lučenje normalno javlja u paralelnom [42-44], no diferencijal sekrecija je prikazana u eksperimentalnim modelima dijabetesa melitusa [45, 46]. Daljnja istraživanja će biti potrebno da se dodatno definirati odnos između lučenja i djelovanju želučane Amylin i somatostatina. U izoliranim otočićima pankreasa dva peptida pojaviti imati co-operative ulogu u reguliranju lučenja peptida: kombinirani imunoneutralisation od Amylin i somatostatina je rezultiralo većom unapređenje inzulin i glukagon sekreciju od neutralizacije ili samo s [10]. Bit će zanimljivo ispitati da li su slični rezultati vidjeti s želučanih funkcija.
Nakon obroka oslobađanje crijevnih CCK i GLP-1 blokadom pražnjenja želuca i lučenje kiseline [13, 47]. Ovi učinci su, iako se razmišljali barem djelomično preko međuprodukata oslobađaju iz D-stanice, a ne izravno inhibirati kiseline izlučuju parijetalne stanice [48]. Vjerovalo se da somatostatin bio jedini srednji, ali rezultati trenutne studije sugeriraju da parakrina regulacija Amylin od parijetalni, ECL- i druge endokrine stanice mogu imati ulogu u integrativnim odgovora na obroke. Amilin inducirana inhibicija histamina pušten iz štakora fundusnih sluznice segmentima in vitro pregled posredovao povećanog oslobađanja somatostatina [19], ali pomoću selektivnog antagonista receptora samotostatin Rossowski sur pregled pokazao in vivo pregled kod štakora da dio kiseline Inhibicijska djelovanja kako amilina i srodnih peptida adrenomedullin su somatostatin neovisno [49]. Specifični uloge Amylin u želučanom fiziologiji zahtijevaju dodatno razjašnjavanje ali ti podaci ukazuju na to da lokalno objavio amilin izravno u stanju regulirati sluznice funkcije.
Odgovora na epinefrina i karbahol ukazuju na to da autonomni inervaciju može regulirati lučenje Amylin. Ukupna bilanca in vivo pregled će onda ovisi o relativnoj ulaz inhibitorno muskarinskih i podsticajnim adrenergičkih sustava, u kombinaciji s kruži endokrini i lokalne parakrino i eventualno lumena faktora. Pregled Zaključak pregled ovoj studiji opisuje početni karakterizaciju faktori koji reguliraju želučanu Amylin izdanje. Mi smo pokazali da amilin izdanje može se potaknuti stimulacija receptora ovisne o bilo koji od Ca 2 + /PKC i adenilat ciklaza /cAMP putevi i da fiziološki relevantnim peptidi i neuronske posrednici mogu poboljšati amilin izdanje. To podupire hipotezu da Amylin mogu modul želučane sluznice funkciju. Ova studija potvrđuje da kratkoročne kulture stanica obogaćen ispiranja će se model za istraživanje patofiziološki oslobađanje želučanih Amylin i osigurati put dodatno razumijevanje uloge Amylin u regulaciji želučane motora i sekretorni funkciju.
Metode
Materijali pregled Matrigel je dobiven od Universal Biologicals (London, UK), somatostatina iz Novartisa (Surrey, UK) i Ham + s F12 /Dulbeccovom modificiranom Eagle mediju kulture (50:50, v: v), glutamin, Hanksova uravnotežena sol otopina te fetalnog goveđeg seruma su kupljeni od Gibco (Paisley, UK). Sulfatnim kolecistokinin-8 (CCK), humani GLP-1 i svi drugi reagensi su dobiveni od tvrtke Sigma (Poole, UK). Izolacija pregled kultura stanica i pregled Primarne kulture zečjih želučanih fundusnih mukoznih stanica obogaćenih D-stanice dobije se kao što je ranije opisano [39, 48]. Ukratko, zečja fundusa sluznica je podvrgnut uzastopnom EDTA i razgradnja kolagenazom. Dobivena suspenzija je obogaćen D-stanica protustrujna elutatriation korištenjem standardnog rotora Beckman JE 5.0 kao što je prethodno opisano. Obogaćen frakcija D-stanice ponovno suspendirane u medij za kultiviranje (Hamov F12 /Dulbecco modificiran Eagle-ov medij kulture (50:50, v: v), koji sadrži 2 mM glutamina, 10 mM HEPES pH 7.4, 0.22% NaHCO 3, 10% fetalnog telećeg seruma, 1 mg /l hidrokortizon, 8 mg /l na inzulin, 100 mg /l penicilina, 100 mg /l gentamicina, 100 mg /l streptomicin) i kultivirane na Matrigel® obložene 24 ploča sa kulturom tkiva i [50] pri gustoći od 1 x 10 6 stanica /jažica 40 sati u atmosferi 5% CO 2, 95% zraka na 37 ° C. pregled Ispitivanja oslobađanja pregled uzgojene stanice su isprane 3 puta u sredini za oslobađanje (Earl izbalansirana otopina soli koja sadrži 0,1% goveđeg serumskog albumina, 10 mM HEPES pH 7,4) za uklanjanje mrtvih i nezaljepljene stanice. Doda se još 1 ml medija za otpuštanje sadrže ispitivane agoniste i stanice se inkubiraju tijekom 2 sata na 37 ° C u atmosferi 5% CO 2, 95% zraka. Nakon perioda otpuštanja kondicionirani medij se aspirira i centrifugira da se odstrane nezaljepljene stanice. Ukupna stanična sadržaj peptida ekstrahira kuhanjem u 1 ml u destiliranoj vodi. Kondicioniranog medija i ekstrakti stanica su pohranjeni na -70 ° C do određivanja sadržaja peptida [30]. Mjerenje pregled peptida pregled koncentracija somatostatina su ispitana radioimunotestu (RIA) antiserumom K2, kao što je prethodno opisano [39]. Polu-maksimalna inhibicija vezanja dogodila na 2 fmol /epruveti i intra-test i varijacije između testova su 7%, 8% posto. Koncentracije amilina mjerene su izravne ELISA (Penninsula Laboratories, Belmont, CA, SAD), prema uputama proizvođača. Test ima raspon od 0.04-2 ng /ml, a intra-test i inter-test varijacija < 5%, a < odnosno 14%. Antitijelo koje se koristi je 100% križne reaktivnosti s amilina i amilina-amida već < 1% unakrsne reaktivnosti sa CGRP i neznatnim reakciji s drugim biološki aktivnim peptida. Svi eksperimentalni uzorci iz jednog pripravka životinja je izmjerena u istom RIA ili ELISA. Pregled statističkom analizom
Peptide oslobađanja tijekom perioda od 2 sata je izražena kao postotak sadržaja ukupnog stanica (TCC) tog peptida. Svaki eksperimentalni uvjet je testiran u duplikatu i rezultati jednog pripravka životinja su smatrani su N = 1. Rezultati prikazani kao prosjek ± SEM od 3-6 životinja odvojenim pripravcima. Svaki 24 jažica uvijek uključene kontrole (osnovna) bunara i pozitivne stimulanse. Peptid otpuštanje stimulansa je u odnosu na bazalno oslobađanje na odgovarajućem 24 jamica. Jednosmjerna analiza varijance i Student par t-testom su korišteni za određivanje značaja. P pregled vrijednost < 0,05 je smatran kao značajan
Popis kratica pregled CCK.
Kolecistokinin
ECL-: pregled enterokromafinskim nalik pregled
pregled GLP-1: pregled glukagon peptid-1
IAPP: pregled otočić amylioid polipeptid
IBMX: pregled izobutilmetilksantin
PKC: pregled protein kinaze C
PMA: pregled forbol-12-miristat -13-acetat, TCC, ukupni sadržaj ćelije.
deklaracijama
Priznanja
ovaj rad je podržan dijelom od strane Medical Research Council trening zajedništva za ILPB.
Neki od podaci su prikazani u obrascu na Sjedinjene Europske Gastroenterology Week u Birminghamu 1997. godine pregled autora originalne dostavljeni datoteke za slike
Ispod su linkovi na autora originalnih dostavljenih datoteka za slike. Izvorna datoteka za Slika 1 12899_2003_47_MOESM2_ESM.jpeg autorskim 12899_2003_47_MOESM1_ESM.jpeg autora izvorne datoteke za sliku 2 12899_2003_47_MOESM3_ESM.jpeg autorskim izvorne datoteke na Slici 3 12899_2003_47_MOESM4_ESM.jpeg autorskim izvorne datoteke za Slika 4 12899_2003_47_MOESM5_ESM.jpeg autorskim izvorne datoteke za lik 5 12899_2003_47_MOESM6_ESM.jpeg autora izvorna datoteka za Slika 6 autorskih doprinosa pregled ILPB zamišljen i dizajniran studija, provedena samici, kulturu, eksperimente otpuštanjem, imunotestove i napisao nacrta i završnog verzije rukopisa. Pokojni JC koncipiran studij i co-napisao prvi rukopis nacrt. Pregled

• Faktori rizika za dubinu infiltracije u diferenciranim depresivnog početkom želučanog karcinoma: Preliminarna analiza
• Diferencijalna ekspresija gena u mišjem želuca fundusa nedostaje intersticijske stanice izražavanja Cajal