Napoved tumorja ponovitve po kurativno resekcijo karcinoma želodca, ki temelji na bcl-2 expression

Napoved tumorja ponovitve po kurativno resekcijo karcinoma želodca, ki temelji na bcl-2 izražanja
Abstract
Ozadje
Trenutno ni zanesljivih napovedni dejavniki za želodčno ponovitve raka. Cilj te raziskave je bil ugotoviti odnos med bcl-2 izražanja in grozi želodca ponovitev raka.
Metode
Od januarja 1996 do decembra 2007 je bilo 449 želodca pri bolnikih z rakom, ki so šli skozi kurativno resekcijo naknadno raziskano. Ravni izraz za bcl-2 je pregledal imunohistokemijo. Logistična regresija je bila izvedena za opredelitev neodvisne dejavnike tveganja za splošne ponovitev raka želodca.
Rezultati
151 bolnikov (33,6%) doživela ponovitev. Mediani čas do ponovitve je bila 17,0 mesecev, je bilo 113 (74,8%) bolnikov ponovitev v 2 letih. Peritonealno ponovitev je bila najbolj razširjena vzorec, ki mu sledi hematogenim metastaz v katerem je bila jetra najpogostejši mesto. Globina invazije, bezgavkah in negativno izražanje bcl-2 so bili neodvisni dejavniki tveganja za splošne ponovitve. Skupni čas preživetja bolnikov s ponovitvijo je bila 22,7 mesecev. Mediana časa preživetja po ponovitve je bil 6,7 meseca.
Zaključek
globino invazije, bezgavkah in izražanje bcl-2 so neodvisne dejavnike za napovedovanje želodca ponovitve raka.
Ključne besede
želodca ponovitev raka clinicopathological dejavniki, bcl-2 Ozadje
Čeprav se je incidenca raka želodca bistveno upada že več desetletij, je še vedno četrti najpogostejši rak in drugi najpogostejši vzrok smrti zaradi raka [1, 2]. Čeprav imajo lahko večina bolnikov v zgodnji fazi raka želodca dolgo časa preživetja po operaciji, približno 40% bolnikov umre zaradi ponovitve, tudi po opravljenem kurativno operacijo [3]. Prisotnost ali odsotnost ponovitve na splošno velja, da je najbolj pomemben prediktor za preživetje, saj je prognoza za bolnike z ponovitve zelo žalostna. Zato je zelo pomembno, da natančno napovedati tveganje ponovitve v zgodnji fazi, da bi izboljšali prognozo bolnikov z ponovitve. Vendar pa je bilo dokazano, da je rutina navezuje po operaciji raka želodca ne pomaga pri odkrivanju ponovitve v zgodnji fazi [4]. Zato je nujno, da se razišče posamezne dejavnike, ki lahko prepoznajo podskupine bolnikov z bolj agresivnim bolezni. V zadnjem času so nekatere študije pokazale, da patološki dejavniki, kot so stanje bezgavk, globina invazije, in velikost tumorja, ki igrajo ključno vlogo pri napovedovanju ponovitve po odstranitvi želodca [5, 6]. Vendar pa je težko napovedati ponovitev uporabi običajnih clinicopathological faktorjev. Glede na to, da so nekateri biološki označevalci, kot so onkogeni, tumor-zaviralnih genov, regulatorji celičnega cikla in popravljanja DNA genov, povezanih z tumorja nastanku, rasti, invazije in metastaze, mnogi raziskovalci iščejo nove napovedne dejavnike, med temi molekularnih markerjev. V prejšnji študiji smo ocenili napovedno vrednost biološke označevalce, kot p53, bcl-2, BAX, in c-myc raka želodca, in ugotovili, da je bcl-2 močno povezana s prognozo pri bolnikih želodca z rakom [7]. Zato smo predpostavili, da lahko bcl-2 ekspresijo odražajo značilnosti tumorjev, in tako služijo kot zanesljiv kazalnik za napovedovanje ponovitev. Cilj trenutne raziskave je ugotoviti, ali lahko bcl-2 izraz napovedujejo ponovitev bolezni po kurativno resekcijo pri bolnikih z rakom želodca.
Metode
Bolniki
Med januarjem 1996 in decembrom 2007, 4,426 bolnikov s histološko potrjeni primarni želodca adenokarcinom doživel želodca na Oddelku želodčnega raka in Soft Tissue sarkom v Fudan University Šanghaju Cancer Center. Od teh bolnikov je bilo izbranih 449 primerov. osebki teh bolnikov smo obarvali imunohistokemicno. Podatki so bili pridobljeni iz operativnih in patoloških poročil pacientov. Nadaljnji podatki so bili pridobljeni po telefonu, pošti in klinične baze podatkov ambulantno. Uprizoritev je bila izvedena v skladu s Unije za mednarodni nadzor raka (UICC) TNM izvajalno klasifikacije za raka želodca
(sedmi izdaja, 2010) [8]. Navezuje vseh bolnikov je bila izvedena v skladu z našim standardnim protokolom (vsake tri mesece za vsaj 2 leti, vsakih 6 mesecev v naslednjih 3 letih, in po 5 letih vsakih 12 mesecev za življenje). Postavke check-up vključeni fizični pregled, pregled tumor marker, ultrazvok, prsih slikanje, izračunan tomografsko skeniranje in endoskopsko preiskavo. Razpon Followup je bil od januarja 1996 do maja 2010. Mediana spremljanja, ko je bil 76,5 meseca v času analize. Pisna privolitev je bila pridobljena iz vseh bolnikih, in ta študija je odobrila etični odbor Shanghai Cancer Center Fudan University. Raziskava je bila retrospektivna.
Imunohistokemijsko
Bcl-2 je zaznal imunohistokemičnim metodo. Protitelesa so bile kupljene od Dako (Hamburg, Nemčija). Imunohistokemijsko smo izvedli z okrepljenim oznako metodo polimer sistema. Parafin odseki smo deparaffinised s ksilenom in hidrirani z etanolom /deionizirane vode. Oddelki smo nato inkubirali z metanolom /0,3% H 2O 2 in blokirani z nespecifično obarvanje blokiranje reagent. Po inkubaciji preko noči pri 4 ° C z anti-bcl-2, protitelesa (razredčimo 1: 100) so bili odseki obdelamo v skladu s standardnimi metodami imunoperoksidazni. Negativne kontrole odseki podvržemo enakem postopku, le da je prvo protitelo nadomesti s PBS. Ne pozitiven obarvanje opazili pri kontrolni skupini. Lokacija obarvanja za bcl-2 je bil pretežno v citoplazmi in cytomembrane
Imunohistokemijsko. Točkovanja
Vse rezine so neodvisno ocenila dva patologi. Odstotek imunoreaktivnih celic in z različno intenziteto barvanja so bile ocenjene. Odstotek imunoreaktivnih celic smo ocenili na lestvici od 0 do 4: no obarvanje je dosegel vrednost 0, 1 do 10% celic, obarvanih dosegel kot 1, 11 do 50%, kot 2, 51-80% v 3 in 81 do 100% so 4. intenzivnosti barvanje so ocenjena 0 do 3: 0 je bil opredeljen kot negativen, 1, ko je šibka, 2 zmerno in 3 tako močan, oz. Neobdelani podatki so bili preračunani na imunohistokemičnim točk (IHS) z množenjem količine in intenzivnosti rezultate. Rezultat IHS od 9 do 12 se je štelo kot močan radioinkorporacijo (+++), od 5 do 8 zmerna (++), od 1 do 4 kot šibko (+) in 0 kot negativna (-). Primeri z rezultatom manj kot 1, so bile obravnavane kot negativni, in tiste, ki imajo ≥1 bilo obravnavati kot pozitiven [9].
Statistična analiza
Podatki so bili predstavljeni kot povprečje ± SD ali mediane numeričnih parametrov. lastnosti pacientov in klinične značilnosti so bili analizirani s pomočjo dveh zimsko Student t
-test ali Pearsonov test hi-kvadrat, kot je primerno. Dejavniki, ki so se zdele potencialnega pomena na univariatno analizo so bili vključeni v multivariatne analize. Logistična regresija je bila uporabljena za oceno s tem povezanih dejavnikov za ponovitev. Sprejeta Stopnja pomembnosti je P
< 0,05. . Statistične analize in grafike so bile izvedene s pomočjo SPSS 13.0 statistični paket (SPSS, Inc., Chicago, IL, ZDA)
Rezultati
Clinicopathological značilnosti
V raziskavi je sodelovalo 307 moških in 142 ženskih bolnikov (2,2: 1 ) s povprečno starostjo 57 let. Je bilo 49 (10,9%), zgodnje želodčni rak in 400 (89,1%) napredovala želodca raka. Glede na histološki tip, so bili v 7 (1,5%) bolnikih, ki so dobro diferencirana-tumorji, zmerno diferenciran v 149 (33,2%) bolnikov, in poorlydifferentiated tumorje v preostalih 293 (65,3%) bolnikov. Glede na tip BORRMANN je bilo 49 (10,9%) tipa 0, 32 (7,1%) tip I, 14 (3,1%) tipa II, 333 (74,2%) tipa III, in 21 (4,7%) tip IV. Od teh bolnikov je imelo 147 (32,7%), tumorjev, ki se nahajajo v zgornji tretjini želodca, 65 (14,5%) je imelo tumorje v srednjem tretji, 212 (47,2%) imeli tumorje v spodnje tretjine in 25 (5,6%) imel tumorje zasedajo dve tretjini ali več želodcu. Bezgavka metastaze so opazili pri 326 bolnikih, stopnja metastaze je bila 72,6%. Porazdelitev patološkega fazi je bila naslednja: 35 (7,8%) bolnikov je pripadal oder IA, 34 (7,6%) IB, 50 (11,1%) IIA, 75 (16,7%) IIB, 82 (18,3%) IIIA, 80 ( 17,8%), IIIB, in 93 (20,7%) IIIC.
izražanje bcl-2
Bcl-2 izražanja je bil pozitiven v 21,2% vseh želodčnega tkiva raka. Bcl-2 obarvanje opazili v citoplazmi in cytomembrane karcinom celic (slika 1). Bcl-2 ekspresijo bil povezan s patološkim fazi. Tam je bila med bcl-2 in drugih patoloških parametrov, kot so starost, spol, histološki tip, vrsto BORRMANN, lokacije tumorja, ali velikost tumorja ni nobene povezave. Slika 1 Pozitivno ekspresijo bcl-2 imunohistokemijo na želodcu tkivu raka. A Originalen povečava × 100, B izvirna povečava × 400.
Čas do ponovitve in ponovitve vzorcev
ponovitve prišlo v 151 (33,6%) bolnikov v obdobju spremljanja. Mediani čas do ponovitve je bila 17,0 mesecev (razpon od 2,0 do 91,0 mesecev), povprečni čas je bil 21,1 meseca. Med bolniki z ponovitve, 113 (74,8%) je ponovitev v roku 2 let. Pogostnost in stopnja ponovitve so dokazali na sliki 2. Slika 2 Frekvenca ponovitve po kurativno operacijo leto.
Od 151 bolnikov z ponovitve, 58 (38,4%) so diagnosticirali peritonealno ponovitve, ki je najbolj razširjena, 49 (32,5%) bolnikov je imelo hematogenim metastaze, kar je drugi najpogostejši ponovitve vzorec, in jeter je bil najpogosteje vključene organa; je bil vpleten v 57,1% vseh ponavljajočih pacientov. Druge ponovitve smo lokalnoregionalno (n = 34, 22,5%), oddaljene bezgavkah (n = 8, 5,3%), ali na več mestih (n = 2, 1,3%) (slika 3). Slika 3 vzorca ponovitve po kurativnega želodca. povezane z Ponavljanje
dejavniki
analizo univariatne je pokazala, da je tip BORRMANN, globina invazije, stanje bezgavk in izražanje bcl-2 so bili povezani s splošnim ponovitve, medtem ko starost, spol, histološki tip, lokacije tumorja in tumorja velikost niso (tabela 1). Logistična regresija je bila uporabljena za določitev neodvisne dejavnike tveganja za splošne ponovitve. Se je pokazalo, da je globina invazije, bezgavkah in negativno izražanje bcl-2 so neodvisni napovedni dejavnik za celotne ponovitve (tabela 2) .table 1 Univariatna analiza dejavnikov tveganja za ponovitev raka želodca
Ne ponovitev
ponavljanje
P-vrednost
(n = 298)
(n = 151)
Starost (leta) povprečje ± SD
57,8 ± 11,9
55,8 ± 12,9
0.095
spol, moški /ženske
203/95
104/47
0,871
velikost tumorja (cm ), povprečje ± SD
4,8 ± 2,5
5,3 ± 2,7
0,054
tumor lokacijo, zgornji /sredi /nižja /dve ali več
91/38/153/16
56 /27/59/9
0.094
vrste BORRMANN, 0 /I /II /III /IV
45/22/9/211/11
4/10/5/122/10
0.002
Histologija dobro /zmerno /slabo diferenciran
5/101/192
2/48/101
0,899
Globina invazije, T1 + T2 /T3 + T4
94/204
16/135
0.000
stanje vozlišča limfnih, negativni /pozitivni
108/190
15/136
0.000
Bcl-2, negativni /pozitivni
226/72
128/23
0,029
Tabela 2 multivariatnih analysisof dejavniki tveganja za ponovitev raka želodca
Variable
P-vrednosti
Odds razmerje
95% CI

dobe
0,116
0,710
0.463, 1.088
Spol
0,775
1,069
0,677, 1.687
Vrsta BORRMANN
0,334
0,872
0,660, 1,152
globina invazije
0.017
0.438
0,222, 0,861
limfnih stanja vozlišče
0.000
3,753
2,040, 6,905
Bcl-2
0,047
0,577
0,336, 0,992
analizo univariatne pokazala, da je tip BORRMANN, globina invazije, status bezgavk, histologijo, spol, in izraz bcl-2 so bili povezani s peritonealno ponovitve. Logistična regresija je pokazala, da je globina invazije, status bezgavk, histologijo in so bcl-2 neodvisni napovedni dejavniki za peritonealno ponovitve. Tumor lokacija in vrsta BORRMANN so se nanašali na hematogenim metastaz in lokacijo tumorja je bil edini neodvisni napovedni dejavnik. Tam je bil med clinicopathological parametrov in lokalnoregionalno ponovitve nobene povezave.
Prognoza bolnikov s ponovitvijo
Splošni 5-letno preživetje je bilo 52% za vse bolnike. Petletno preživetje v izraženost bcl-2 pozitivnih in BCL-2 negativnih bolnikov je bila 58,9% in 45,5% oz. Na izraženost bcl 2-pozitivnih bolnikih, patološko stanje in lokacijo tumorja bistveno vpliva na prognozo, in patološko faza je neodvisen napovedni dejavnik. V BCL-2 negativnih bolnikih, univariatne analize so pokazale, da tip BORRMANN, globina invazije, bezgavkah, velikost tumorja, lokacija tumorja in patološkega fazi bistveno vpliva na prognozo. Multivariatna analiza je pokazala, da so bili bezgavkah, lokacija tumorja in patološko fazi neodvisni napovedni dejavniki.
Srednji čas preživetja bolnikov z ponovitve je bil 22,7 meseca. Mediana časa preživetja po ponovitve je bil 6,7 meseca. Glede na različne vzorce ponovitve, sta bila mediana časa preživetja po peritonealno ponovitve, hematogenim metastaz, lokalnoregionalno ponovitev in oddaljenih bezgavkah 5,7 meseca (2,6-12,4), 7.3 meseca (2,4 do 11,7), 7.0 meseca (2,5 do 17.1) in 6.1 meseca (3,9 do 7,9), oz. Bolniki s peritonealno in oddaljenih bezgavkah ponovitve imel krajši čas preživetja; Vendar pa to ni bila statistično značilna.
Razprava
glavnih ugotovitev te raziskave so bile, da (1) peritonealno ponovitev je bila najbolj razširjena ponovitev vzorca po kurativno operaciji, in (2), globina invazije, bezgavkah in negativen izraz bcl-2 so bili neodvisni dejavniki tveganja za celotni ponovitve.
rak želodca je ena izmed najpogostejših malignih bolezni po vsem svetu. Čeprav je prognoza bolnikov z rakom želodca izboljšalo zaradi boljših diagnostičnih metod in terapevtskih strategij, želodčni rak še drugi najpogostejši vzrok smrti zaradi raka [2]. Žalostna Prognoza raka želodca, je bilo predvsem posledica pogostosti ponovitev in metastaz. Zato je zelo pomembno, da se pojasni vzorec ponovitve in dejavnikov tveganja za ponovitev, ki lahko prispevajo k vodenju pooperativnem klinične prakse in Followup.
V naši raziskavi je bilo 151 (33,6%) bolnikov ponovitev v nadaljnjem -up obdobje. Povprečni čas do ponovitve je bila 21,1 mesecev; 113 bolnikov (74,8%) je imelo ponovitve v 2 letih. Ta rezultat kaže, da pride do najbolj želodca ponovitev raka v 2 letih, in je v skladu z drugimi študijami [10-12]. Yoo et al.
[12] poročalo 508 bolnikov s ponovitvijo po kurativne resekcijo raka želodca in pokazali, da je bil povprečni čas do ponovitve 21,8 mesecev. Zato je bilo treba okrepiti nadaljnje dejanje v roku 2 let po kurativno resekcijo.
Ugotovljeno je bilo, da so najpogostejši ponavljajoče vzorce hematogenim ponovitve in peritonealno širjenje raka želodca [3, 12-14]. V naši seriji, je peritonealna ponovitev najpogostejši vzorec, kar predstavlja 38,4% vseh bolnikov s ponovitvijo, sledijo hematogenim metastaz (32,5%). Naši rezultati so v skladu s prejšnjimi študijami [3, 12]. Maehara et al.
Poročali [15], da peritonealno vzorec predstavljajo 50% primerov, hematogenim ponovitve bolezni za 40% primerov, in lokalnoregionalno ponovitev za 20%. Vendar pa še vedno obstajajo nekatere spore. Italijanska študija je pokazala, da je najpogostejši ponovitev vzorca lokalnoregionalno, kar predstavlja 45% vseh ponavljajočih se primerih [16]. Ta razlika je pokazala, da obstajajo razlike v ponovitve vzorcev med vzhodnimi in zahodnimi državami. Možno je, da je nizka pojavnost lokalne ponovitve v vzhodnoevropskih študij zaradi obsežne uporabe D2 limfna vozlišča seciranje.
Ponavljanje je pogosta pri bolnikih z rakom želodca po postopku radikalno želodca. Zato je pomembno ugotoviti bolnikov na visoko tveganje za ponovitev. V tej študiji, univariatne analize pokazale, da je tip BORRMANN, globina invazije, in status bezgavko povezana s splošnim ponovitve. Logistična regresija je pokazala, da je bila globina invazije in bezgavkah neodvisni dejavniki tveganja za splošne ponovitve. V skladu z našimi ugotovitvami, so prejšnje študije so pokazale, da so tradicionalni clinicopathological dejavniki, kot so serozne izpostavljenostjo histološki tip, globina invazije, in bezgavkah metastaze dejavniki tveganja za ponovitev [17-19]. Vendar pa je tradicionalni clinicopathological dejavniki so včasih neustrezni za napovedovanje ponovitve. Številne študije so pokazale, da je [26], lahko biomarkerji, kot tumorskih označevalcev [20, 21], vaskularni endotelijski rastni faktor (VEGF) družine [22, 23], E-kadherina [24, 25] in microRNAs uporaben za napovedovanje ponovitve raka želodca. Bcl-2 se nahaja na kromosomu 18q21 in kodira 26-kDa protein lokalizirane predvsem v mitohondrijski membrani [27]. Gen bcl-2 je bil prvič opisan kot onkogen v folikularnega limfoma. Nekatere študije so pokazale, da čezmerno bcl-2 zatreti celično proliferacijo in je bila povezana z manj agresivnim biološkega vedenja [28, 29]. Vendar pa je vrednost bcl-2 pri napovedovanju želodčne ponovitev raka je še vedno nejasno. V prejšnji študiji smo ugotovili, da je bcl-2 močno povezana s prognozo pri bolnikih z rakom želodca [7]. Zato smo predpostavili, da bi bcl-2 je odvisen od biološke značilnosti tumorja, in bi služil kot zanesljiv kazalnik za napovedovanje ponovitev. Po naših rezultatih, negativni izraz bcl-2 je neodvisen dejavnik tveganja za želodčne ponovitve raka. Natančen mehanizem še vedno ni jasno. Možno je, da bcl-2 pojavijo želodčne ponovitve raka za regulacijo biološke lastnosti tumorskih celic. Saegusa et al.
[28] je poročal, da je večina izraženost bcl 2-+ rakavih celic v nonproliferative stanju, povprečna izraz Ki-67 indeksa označevanja in apoptoze indeksa označevanja v BCL-2 + žarišč, so bistveno nižje kot v bcl-2 žarišča. Aizawa sod.
[30], so pokazali, da je izražanje Bcl-2, pri napredovalem raku želodca povezana z nižjim apoptotske indeksa in boljšo prognozo. Pietenpol sod.
[31] poročali, da prekomerno ekspresijo Bcl-2 zavira rast različnih celičnih linij trdni tumor.
Zaključek
Na koncu je ta študija pokazala, da je bilo največ peritonealno ponovitve Skupno ponovitev vzorca po kurativno želodca. Globina invazije, bezgavkah in negativno izražanje bcl-2 napovedujejo večje tveganje za ponovitev. Te ugotovitve lahko da koristne informacije za Followup pri bolnikih želodca z rakom, ki so opravili operacijo za resekcijo. Natančneje, je treba izvesti intenzivno nadaljnje spremljanje načrta za bolnike želodca z rakom z negativnim izražanjem bcl-2. Vendar pa so zaradi majhnosti in naknadno oblikovanje pomanjkljivosti sedanje študije. Nadaljnje obsežno, naj bi prihodnje študije je treba opraviti, da bi preverili uporabnost bcl-2, pri odkrivanju tumorjev ponovnega pojava bolezni pri bolnikih z rakom želodca.
Opombe
Jianghong Wu, Xiaowen Liu prav tako prispevali k temu delu.
Izjave
Priznanja
zahvaljujemo Ben Liotta za urejanje angleškega jezika v našem rokopisu.
avtorjev originalnih predloženi datoteke za slike
Spodaj so povezave do avtorjev prvotna predloženih spisov za slike. "Izvirno datoteko na sliki 1 12957_2013_1895_MOESM2_ESM.tif avtorjev 12957_2013_1895_MOESM1_ESM.tif avtorjev prvotni datoteki Slika 2 12957_2013_1895_MOESM3_ESM.tif avtorjev prvotni datoteki slika 3 Konkurenca interesov
Avtorji izjavljajo, da nimajo konkurenčnih interesov.
Avtorji" prispevki
JHW, XWL in YNW pripravljenimi in namenjenimi poskuse. JHW in XWL izvedli eksperimente. JHW, XWL in HC analizirali podatke. HC in YNW prispeval reagenti /gradivo /orodja za analizo. JHW in XWL napisal papirja. Vsi avtorji prebrali in potrdil končni rokopis.

• Kombinirani epitelnih-mezenhimskih prehod z rakom izvornih celic, kot označevalec, kot napovedujejo ponovitve po radikalni resekciji za rakom želodca
• Primerjava med boljše in slabo diferenciranega lokalno napredovalega raka želodca v predoperativno kemoterapijo: retrospektiva, primerjalna študija na enem terciarni zavod za nego