Vorhersage von Rezidiven nach kurativer Resektion bei Magenkarzinom basierend auf bcl-2-Expression
Zusammenfassung
Hintergrund
Es liegen noch keine zuverlässige prädiktive Faktoren für Magenkrebs Rezidiv. Das Ziel dieser Studie war es, die Beziehung zwischen bcl-2-Expression und Risiko von Magenkrebs Wiederholung zu bewerten.
Methoden
Von Januar 1996 bis Dezember 2007 449 Magenkrebs-Patienten, die kurative Resektion unterzogen wurden retrospektiv untersucht. Die Expression von bcl-2 wurden durch Immunhistochemie untersucht. Die logistische Regression wurde durchgeführt, um die Wiederholung von Magenkrebs unabhängige Risikofaktoren zu identifizieren.
Ergebnisse | 151 Patienten (33,6%) kam es Rezidive. Die mediane Zeit bis zum Rezidiv war 17,0 Monate, 113 (74,8%) der Patienten Rezidive innerhalb von 2 Jahren. Peritoneal Rezidiv war die häufigste Muster, gefolgt von hämatogenen Metastasierung bei denen die Leber war die häufigste Stelle. Tiefe der Invasion, Lymphknotenmetastasen und negative Expression von bcl-2 waren unabhängige Risikofaktoren für die Wiederholung. Die Gesamtüberlebenszeit von rezidivierenden Patienten betrug 22,7 Monate. Die mediane Überlebenszeit nach Rezidiv war 6,7 Monate.
Fazit
Die Tiefe der Invasion, Lymphknotenmetastasen und die Expression von bcl-2 sind unabhängige Faktoren für Magenkrebs Wiederholung der Vorhersage.
Schlüsselwörter Magenkrebsrezidiv klinisch-pathologischen Faktoren bcl-2 Hintergrund
Obwohl die Häufigkeit von Magenkrebs wurde im wesentlichen seit mehreren Jahrzehnten rückläufig ist, ist es immer noch die vierthäufigste Krebserkrankung und die zweithäufigste Ursache für Krebstod [1, 2]. Obwohl die Mehrheit der Patienten mit Magenkrebs im Frühstadium lange Überlebenszeiten nach der Operation haben kann, etwa 40% der Patienten, die an Rezidiv sterben, auch nach kurativer Operation unterziehen [3]. Das Vorhandensein oder Fehlen eines erneuten Auftretens ist weithin als der wichtigste Prädiktor für das Überleben zu dem Ergebnis, da die Prognose für Patienten mit einem Rezidiv extrem düster ist. Daher ist es sehr wichtig, genau das Risiko eines erneuten Auftretens, um in einem frühen Stadium vorherzusagen Prognose von Patienten mit einem Rezidiv zu verbessern. Allerdings hat es sich gezeigt, dass Routine Followup nach der Operation für Magenkrebs ist nicht hilfreich Wiederholung in einem frühen Stadium bei der Aufdeckung von [4]. Daher ist es wichtig, bestimmte Faktoren zu untersuchen, die Untergruppen von Patienten mit aggressiver Krankheit zu identifizieren. Vor kurzem haben einige Studien gezeigt, dass pathologische Faktoren wie Lymphknotenstatus, Tiefe der Invasion und Tumorgröße, eine entscheidende Rolle spielen Rezidiv nach Gastrektomie bei der Vorhersage [5, 6]. Jedoch ist es schwierig, Rezidiv mit gängigen klinisch-pathologischen Faktoren vorherzusagen. Da einige biologische Marker, wie Onkogene, Tumor-Suppressor-Gene, Zellzyklusregulatoren und Gene der DNA-Reparatur, die Tumorgenese verwandt sind, das Wachstum, Invasion und Metastasierung, suchen viele Forscher für neue prädiktive Faktoren unter diesen molekularen Markern. In einer früheren Studie haben wir den prognostischen Wert von biologischen Markern wie p53, fand bcl-2, Bax und c-myc bei Magenkrebs, und dass bcl-2 signifikant mit Prognose bei Patienten mit Magenkrebs assoziiert wurde [7]. Daher nahmen wir an, dass bcl-2-Expression Tumor-Eigenschaften reflektieren können und somit dienen als zuverlässiger Indikator für die Vorhersage von Rezidiv. Das Ziel der vorliegenden Studie ist es, festzustellen, ob bcl-2-Expression ein Rezidiv nach kurativer Resektion bei Patienten mit Magenkrebs vorhersagen kann.
Methoden
Patienten
Zwischen Januar 1996 und Dezember 2007 4.426 Patienten mit histologisch gesichertem primären Adenokarzinom des Magens unterzog Gastrektomie in der Abteilung für Magenkrebs und Weichteilsarkomen in der Fudan-Universität Shanghai Cancer Center. Von diesen Patienten wurden 449 Fälle ausgewählt. Diese Patienten Proben wurden immunhistochemisch gefärbt. Die Daten wurden von Patienten wirksam und pathologischen Berichte abgerufen werden. Follow-up-Daten wurden per Telefon erhalten, Brief und ambulanten klinischen Datenbank. Staging wurde nach der Union for International Cancer Control (UICC) TNM Klassifikation durchgeführt für Magenkarzinom
(Siebte Edition, 2010) [8]. Ein Followup aller Patienten wurde nach unseren Standardprotokoll durchgeführt (alle drei Monate für mindestens 2 Jahre, alle 6 Monate für die nächsten 3 Jahre, und alle 12 Monate für das Leben nach 5 Jahren). Die Check-up-Elemente enthalten körperliche Untersuchung, Tumormarker Untersuchung, Ultraschall, Röntgen-Thorax, Computertomographie-Scan, und endoskopische Untersuchung. Die Reichweite des Followup war von Januar 1996 bis Mai 2010. Die mediane Nachbeobachtungszeit betrug 76,5 Monate in der Zeit der Analyse. Eine schriftliche Einverständniserklärung wurden von allen Patienten erhalten, und diese Studie wurde von der Ethikkommission der Shanghai Cancer Center der Fudan-Universität genehmigt. Die Studie wurde retrospektiv.
Immunhistochemische Färbung
Bcl-2 wurde durch das immunhistochemische Verfahren detektiert. Die Antikörper wurden von Dako (Hamburg, Deutschland) erworben. Immunhistochemische Färbung wurde durch das verbesserte markierten Polymersystem-Verfahren durchgeführt. Paraffinschnitte wurden mit Xylol und hydriert mit Ethanol /VE-Wasser deparaffinised. Die Schnitte wurden dann inkubiert mit Methanol /0,3% H
2 O 2 und blockiert mit unspezifischen Färbungsreagens blockiert. Nach Inkubation über Nacht bei 4ºC mit anti-Bcl-2-Antikörper (verdünnt 1: 100) wurden die Schnitte nach Standard Immunperoxidase Methoden behandelt. Negative Kontrollschnitte wurden dem gleichen Verfahren unterzogen, mit der Ausnahme, dass der erste Antikörper durch PBS ersetzt wurde. Keine positive Färbung wurde bei den Kontrollen beobachtet. Die Lage der Färbung für bcl-2 war überwiegend in Zytoplasma und Cytomembran
Immunhistochemische Färbung:. Scoring
Alle Scheiben wurden durch zwei Pathologen unabhängig bewertet. Der Prozentsatz der immunoreaktiven Zellen und Färbungsintensitäten wurden ausgewertet. Der prozentuale Anteil an immunreaktiven Zellen wurde auf einer Skala von 0 bis 4 bewertet: keine Färbung als 0 erzielt wurde, 1 bis 10% der Zellen als 1, von 11 bis 50% als 2, 51 bis 80% als 3 hat gefärbt, und 81 bis 100% als 4. Die Färbeintensitäten von 0 bis 3 bewertet wurden: 0 wurde als negativ definiert, 1 als schwach, 2 als moderat und 3 so stark sind. Die Rohdaten wurden einer immunhistochemischen Score (IHS) umgewandelt, indem sie die Menge und Intensität Partituren multipliziert wird. Eine IHS-Score von 9 bis 12 wurde als starke Immunreaktivität (+++) betrachtet, 5 bis 8 als moderat (++), 1 bis 4 als schwach (+) und 0 als negativ (-). Fälle mit einem Wert von weniger als 1 wurden als negativ angesehen, und solche mit ≥1 wurden als positiv angesehen. [9]
Statistische Analyse
Die Daten wurden als Mittelwert ± SD oder dem Median für numerische Parameter dargestellt. Die Patienten Merkmale und klinischen Eigenschaften wurden mit dem zweiseitigen Student t analysiert
-test oder Pearson-Chi-Quadrat-Test als angemessen. Faktoren, die auf univariate Analyse potentieller Bedeutung erachtet wurden, wurden in der multivariaten Analyse einbezogen. Die logistische Regression wurde verwendet, um Wiederholung verwandte Faktoren zu schätzen. Die akzeptierte Signifikanzniveau war P
< 0,05. . Statistische Analysen und Grafiken wurden mit dem 13,0 SPSS Statistikpaket (SPSS Inc., Chicago, IL, USA)
Ergebnisse
Clinicopathological Merkmale
Die Studie umfasste 307 männliche und 142 weibliche Patienten (2,2: 1 ) mit einem mittleren Alter von 57 Jahren. Es waren 49 (10,9%) frühen Magenkrebs und 400 (89,1%) mit fortgeschrittenem Magenkrebs. Gemäß histologischen Typ, gut differenzierten Tumoren wurden in 7 (1,5%) der Patienten beobachtet, mäßig differenzierten in 149 (33,2%) der Patienten und poorlydifferentiated Tumoren in den verbleibenden 293 (65,3%) Patienten. Gemäß Borrmann-Typ, 49 (10,9%) waren Typ 0, 32 (7,1%) Typ I, 14 (3,1%), Typ II, 333 (74,2%) Typ III, und 21 (4,7%) Typ IV. Von diesen Patienten 147 (32,7%) hatten im oberen Drittel des Magens befindet Tumoren, 65 (14,5%) hatten Tumoren im mittleren Drittel, 212 (47,2%) hatten Tumoren im unteren Drittel, und 25 (5,6%) hatten Tumoren besetzen zwei Drittel oder mehr des Magens. Lymphknotenmetastasen wurde in 326 Patienten beobachtet, und die Metastasierungsrate betrug 72,6%. Die Verteilung der Krankheitsstadium war wie folgt: 35 (7,8%) Patienten gehörte IA zu Stufe 34 (7,6%) IB, 50 (11,1%) IIA, 75 (16,7%) IIB, 82 (18,3%) IIIA, 80 ( 17,8%) IIIB und 93 (20,7%) IIIC.
Expression von Bcl-2
Bcl-2-Expression wurde in 21,2% aller Magenkrebsgewebe positiv. Bcl-2-Färbung wurde in das Zytoplasma und Zellmembran von Karzinomzellen (Abbildung 1) beobachtet. Bcl-2-Expression wurde mit pathologischen Stadium verbunden. Es gab keine Korrelation zwischen Bcl-2 und anderen pathologischen Parametern, wie Alter, Geschlecht, histologischen Typ, Borrmann Typ, Tumorlokalisation oder Tumorgröße. Abbildung 1 Positive Expression von bcl-2-Immunhistochemie im Magenkrebsgewebe. Eine Originalvergrößerung × 100, B Originalvergrößerung × 400.
Zeit bis zum Rezidiv und Wiederholungsmuster
Rezidive traten bei 151 (33,6%) der Patienten während des Follow-up-Periode. Die mediane Zeit bis zum Rezidiv war 17,0 Monate (Bereich von 2,0 bis 91,0 Monate), und die mittlere Zeit war 21,1 Monate. Unter den Patienten mit einem Rezidiv, 113 (74,8%) hatten Rezidiv innerhalb von 2 Jahren. Die Häufigkeit und die Rezidivrate sind in Abbildung 2 Abbildung 2 Häufigkeit eines erneuten Auftretens nach kurativer Operation für Jahr unter Beweis gestellt.
Von den 151 Patienten mit einem Rezidiv, 58 (38,4%) wurden mit Peritonealdialyse Rezidiv diagnostiziert, die die häufigsten war, 49 (32,5%) Patienten hämatogene Metastasen hatten, die die zweithäufigste Wiederholungsmuster war, und in der Leber war die am häufigsten Orgel beteiligt; es wurde in 57,1% aller wiederkehrenden Patienten gebracht. Andere Rezidive wurden lokoregionale (n = 34, 22,5%), entfernte Lymphknotenmetastasen (n = 8, 5,3%), oder an mehreren Standorten (n = 2, 1,3%) (Abbildung 3). Abbildung 3 Muster eines erneuten Auftretens der nach kurativer Gastrektomie.
Recurrence bezogene Faktoren
Univariate Analyse zeigte, dass Borrmann Typ, Tiefe der Invasion, Lymphknotenstatus, und die Expression von bcl-2 mit insgesamt Wiederholung verbunden waren, während Alter, Geschlecht, histologischen Typ, Tumorlokalisation und Tumor Größe waren nicht (Tabelle 1). Die logistische Regression wurde eingesetzt, um die unabhängige Risikofaktoren für die Wiederholung zu identifizieren. Es zeigte sich, dass die Tiefe der Invasion, Lymphknotenmetastasen nachgewiesen, und negative Expression von bcl-2 wurden unabhängige Prädiktoren für die Wiederholung (Tabelle 2) .Tabelle 1 Univariate Analyse von Risikofaktoren für Rezidiv bei Magenkrebs
Nein Wiederholung
Recurrence
P-Wert
(n = 298)
(n = 151)
Alter (Jahre), Mittelwert ± SD
57,8 ± 11,9
55,8 ± 12,9
0.095
Geschlecht, männlich /weiblich
203/95
104/47
0.871
Tumorgröße (cm bedeuten), ± SD
4,8 ± 2,5
5,3 ± 2,7
0,054
Tumor Lage, obere /mittlere /untere /zwei oder mehr
91/38/153/16
56 /27/59/9
0,094
Borrmann Typ 0 /I /II /III /IV
45/22/9/211/11
4/10/5/122/10
0.002
Histologie, gut /mittel /schlecht differenzierten
5/101/192
2/48/101
0.899
Tiefe der Invasion, T1 + T2 /T3 + T4
94/204
16/135
0.000
Lymphknotenstatus, negativ /positiv
108/190
15/136
0.000
Bcl-2, negativ /positiv
226/72
128/23
0,029
Tabelle 2 Multivariate analysisof Risikofaktoren für eine Wiederholung bei Magenkrebs
Variable
P-Wert
Quoten Verhältnis
95% CI
Alter Bei
0.116
0.710
0.463, 1.088
Geschlecht
0.775
1,069
0,677, 1,687
Borrmann Typ
0.334
0.872
0.660, 1.152
Tiefe der Invasion
0,017
0.438
0.222, 0.861
Lymphknotenstatus
0.000
3,753
2,040, 6,905
Bcl-2
0,047
0.577
0.336, 0.992
Univariate Analyse zeigte, dass Borrmann Typ, Tiefe der Invasion, Lymphknotenstatus, Histologie, Geschlecht, und die Expression von bcl-2 wurden mit peritonealen Rezidiv verbunden. Die logistische Regression zeigte, dass die Tiefe der Invasion, Lymphknotenstatus, Histologie und bcl-2 waren unabhängige Prädiktoren für Peritonealdialyse Rezidiv. Tumorlokalisation und Borrmann Typ wurden hämatogene Metastasen im Zusammenhang und Tumor Lage war der einzige unabhängige prädiktiver Faktor. Es gab keine Korrelation zwischen klinischen Parametern und lokoregionale Rezidiv. Reale Prognose von rezidivierenden Patienten
Die allgemeine 5-Jahres-Überlebensrate 52% für alle Patienten war. Fünf-Jahres-Überlebensrate betrug 58,9% und 45,5% in bcl-2-positiven und bcl-2-negativen Patienten sind. In bcl-2-positiven Patienten, Krankheitsstadium und Tumorlokalisation signifikant beeinflusst Prognose und Krankheitsstadium war ein unabhängiger prognostischer Faktor. In bcl-2-negativen Patienten zeigte univariaten Analyse, dass Borrmann Typ, Tiefe der Invasion, Lymphknoten-Metastasen, Tumorgröße, Tumorlokalisation und Krankheitsstadium signifikant Prognose betroffen. Multivariate Analyse zeigte, dass Lymphknoten-Metastasen, Tumorlokalisation und pathologische Stadium unabhängige prognostische Faktoren waren. Die mediane Überlebenszeit von Patienten mit Rezidiv
war 22,7 Monate. Die mediane Überlebenszeit nach Rezidiv war 6,7 Monate. Entsprechend den verschiedenen Wiederholungsmuster, die mediane Überlebenszeit nach Peritonealdialyse Rezidiv, hämatogene Metastasen, lokoregionale Rezidiv, und entfernten Lymphknotenmetastasen waren 5,7 Monate (2,6 bis 12,4), 7,3 Monate (2,4 bis 11,7), 7,0 Monate (2,5 bis 17.1) und 6,1 Monate (3,9 bis 7,9), respectively. Patienten mit Peritonealdialyse und entfernten Lymphknoten Rezidiv hatten eine kürzere Überlebenszeit; aber dies war statistisch nicht signifikant.
Diskussion
Die wichtigsten Ergebnisse dieser Studie waren, dass (1) Peritonealdialyse Wiederholung die häufigste Wiederholungsmuster nach kurativer Operation war, und (2) die Tiefe der Invasion, Lymphknotenmetastasen und negativen Expression von Bcl-2 waren unabhängige Risikofaktoren für die Wiederholung.
Magenkrebs weltweit einer der häufigsten bösartigen Erkrankungen ist. Obwohl die Prognose mit Magenkrebs von Patienten als Folge der besseren Diagnoseverfahren und Therapiestrategien verbessert hat, ist Magenkrebs immer noch die zweithäufigste Ursache der durch Krebs verursachten Todesfälle [2]. Die düstere Prognose von Magenkrebs ist aufgrund hauptsächlich auf die Frequenz des Rezidiv und Metastasierung. Daher ist es sehr wichtig ist, um das Muster eines erneuten Auftretens und die Risikofaktoren für eine Wiederholung zu klären, die für die Durchführung der postoperativen klinischen Praxis und Followup beitragen können.
In unserer Studie, 151 (33,6%) Patienten hatten Wiederholung während des Follow -up Zeitraum. Die mittlere Zeit bis zum Rezidiv war 21,1 Monate; 113 Patienten (74,8%) hatten Rezidiv innerhalb von 2 Jahren. Dieses Ergebnis zeigt, dass die meisten Magenkrebs Rezidiv innerhalb von 2 Jahren auf, und steht im Einklang mit anderen Untersuchungen [10-12]. Yoo et al.
[12] berichteten 508 Patienten mit einem Rezidiv nach kurativer Resektion für Magenkrebs und zeigte, dass die mittlere Länge der Zeit, um eine Wiederholung 21,8 Monate war. Daher war es notwendig, die Followup innerhalb von 2 Jahren nach kurativer Resektion zu verstärken.
Es wurde berichtet, dass die häufigsten Wiederholungsmuster sind hämatogene Rezidiv und Peritonealdialyse Verbreitung bei Magenkrebs [3, 12-14]. In unserer Serie war Peritonealdialyse Rezidiv ist die häufigste Muster, einem Anteil von 38,4% aller Patienten mit einem Rezidiv, gefolgt von hämatogene Metastasen (32,5%). Unsere Ergebnisse stimmen mit früheren Studien [3, 12]. Maehara et al.
[15] berichtet, dass die Peritonealdialyse Muster für 50% der Fälle ausmachten, hämatogene Wiederholung für 40% der Fälle und lokoregionale Wiederholung für 20%. Es gibt jedoch noch einige Streitigkeiten. Eine italienische Studie zeigte, dass die häufigste Wiederholungsmuster war lokoregionale, für 45% aller wiederkehrenden Fälle aus [16]. Diese Unterschiede zeigten, dass es einige Unterschiede in der Wiederholungsmuster zwischen östlichen und westlichen Ländern. Es ist möglich, dass die niedrige Inzidenz von Lokalrezidiven in Ost-Studien ist aufgrund der umfangreichen Verwendung von D2 Lymphknoten-Dissektion.
Recurrence die nach einer radikalen gastrectomy häufiger bei Patienten mit Magenkrebs ist. Daher ist es wichtig, Patienten mit einem hohen Risiko eines erneuten Auftretens zu identifizieren. In dieser Studie zeigte univariaten Analyse, dass Borrmann Typ, Tiefe der Invasion und Lymphknotenstatus mit insgesamt Wiederholung verbunden waren. Die logistische Regression zeigte, dass die Tiefe der Invasion und Lymphknotenmetastasen waren unabhängige Risikofaktoren für die Wiederholung. In Übereinstimmung mit unseren Ergebnissen haben frühere Studien zeigten, dass traditionelle klinisch-pathologischen Faktoren wie serosal Exposition, histologischen Typ, Tiefe der Invasion und Lymphknotenmetastasen waren Risikofaktoren für eine Wiederholung [17-19]. Allerdings sind traditionelle klinisch-pathologischen Faktoren manchmal unzureichend für die Vorhersage eines erneuten Auftretens. Eine Reihe von Studien haben gezeigt, dass Biomarkern, wie beispielsweise Tumormarker [20, 21], vaskulären endothelialen Wachstumsfaktor (VEGF) -Familie [22, 23], E-cadherin [24, 25] und mikroRNAs [26], könnte sein, nützlich für die Wiederholung von Magenkrebs vorherzusagen. Bcl-2 auf Chromosom 18q21 und kodiert für ein 26 kDa-Protein lokalisiert hauptsächlich in der mitochondrialen Membran [27]. Das bcl-2-Gen wurde zuerst als ein Onkogen in follikulärem Lymphom beschrieben. Einige Studien haben gezeigt, dass die Überexpression von bcl-2 die Zellproliferation unterdrückt, und wird mit weniger aggressive biologische Verhalten assoziiert [28, 29]. Allerdings ist der Wert von bcl-2 in Magenkrebs Rezidive die Vorhersage noch unklar. In einer früheren Studie fanden wir, dass bcl-2 signifikant mit Prognose bei Patienten mit Magenkrebs assoziiert wurde [7]. Daher nahmen wir an, dass bcl-2 könnte die biologische Natur des Tumors zu reflektieren, und würde für die Vorhersage Wiederholung als zuverlässiger Indikator dienen. Nach unseren Ergebnissen ist die negative Expression von bcl-2 ein unabhängiger Risikofaktor für Rezidiv Magenkrebs. Der genaue Mechanismus ist noch unklar. Es ist möglich, dass bcl-2 die Tumorzelle biologische Verhalten durch Regulierung Magenkrebs Wiederholung beeinflusst. Saegusa et al.
[28] berichteten, dass die Mehrheit der bcl-2 + Krebszellen in einem nicht-proliferativen Zustand sind, und die durchschnittliche Expression von Ki-67 Markierungsindex und apoptotischen Markierungsindex in bcl-2 + Foci sind deutlich niedriger als die in bcl-2-Foci. Aizawa et al.
[30] zeigten, dass die Expression von Bcl-2 in fortgeschrittenem Magenkrebs mit einem niedrigeren apoptotische Index und einer besseren Prognose assoziiert ist. Pietenpol et al.
[31] berichtet, dass eine Überexpression von Bcl-2 das Wachstum von mehreren Festtumorzelllinien hemmt.
Fazit Abschließend
zeigte die vorliegende Studie, dass Peritonealdialyse Rezidiv war die gemeinsame Wiederholungsmuster nach kurativer Gastrektomie. Tiefe der Invasion, Lymphknotenmetastasen und negative Expression von bcl-2 vorhersagen höheres Risiko eines erneuten Auftretens. Diese Ergebnisse können einige nützliche Informationen für Followup in Magenkrebs-Patienten zur Verfügung stellen, die eine Operation zur Resektion unterzogen wurden. Insbesondere ist es notwendig, eine intensive Follow-up-Plan für Magenkrebs-Patienten mit negativen Expression von Bcl-2 zu leiten. Allerdings ist die kleine und die retrospektive Design waren Mängel der aktuellen Studie. Weitere groß angelegte, sollten prospektive Studien den Nutzen von bcl-2 bei der Aufdeckung von Rezidiven bei Patienten mit Magenkrebs zu validieren durchgeführt werden.
Hinweise
Jianghong Wu, Xiaowen Liu gleichermaßen zu dieser Arbeit beigetragen.
Erklärungen
Acknowledgments kaufen Wir danken Ben Liotta für die Bearbeitung der englischen Sprache in unserer Handschrift.
Autoren Original vorgelegt Dateien für Bilder
Nachfolgend finden Sie die Links zu den Autoren ursprünglich eingereichten Dateien für Bilder. 12957_2013_1895_MOESM1_ESM.tif Autoren Originaldatei für Abbildung 1 12957_2013_1895_MOESM2_ESM.tif Autoren Originaldatei für Abbildung 2 12957_2013_1895_MOESM3_ESM.tif Autoren Originaldatei für Abbildung 3 Konkurrierende Interessen
Die Autoren erklären, dass sie keine Interessenkonflikte haben.
Autoren Beiträge
JHW, XWL und YNW konzipiert und die Experimente entwickelt. JHW und XWL geführt, um die Experimente. JHW, XWL und HC analysiert die Daten. HC und YNW beigetragen Reagenzien /Materialien /Analyse-Tools. JHW und XWL schrieb die Zeitung. Alle Autoren gelesen und genehmigt haben das endgültige Manuskript.