La predicción de la recurrencia del tumor después de la resección curativa en el carcinoma gástrico basado en la expresión de Bcl-2

La predicción de la recurrencia del tumor después de la resección curativa en el carcinoma gástrico en base a Bcl-2 expresión

abstracto del fondo de
Actualmente no hay factores predictivos fiables para la recurrencia del cáncer gástrico. El objetivo de este estudio fue evaluar la relación entre la expresión de Bcl-2 y riesgo de recurrencia del cáncer gástrico.
Métodos
Entre enero de 1996 a diciembre de 2007, 449 pacientes con cáncer gástrico sometidos a resección curativa Se estudiaron retrospectivamente. Los niveles de expresión de bcl-2 se examinaron por inmunohistoquímica. La regresión logística se realizó para identificar factores de riesgo independientes de recurrencia global de cáncer gástrico.
Resultados
151 pacientes (33,6%) recurrencias experimentadas. La mediana del tiempo hasta la recurrencia fue de 17,0 meses, 113 (74,8%) pacientes tuvieron recurrencias dentro de 2 años. recidiva peritoneal fue el patrón más frecuente, seguido de la metástasis hematógena en la que el hígado es el sitio más común. Profundidad de la invasión, metástasis en los ganglios linfáticos, y la expresión negativa de Bcl-2 fueron factores independientes de riesgo de recurrencia global. El tiempo de supervivencia global de los pacientes recurrentes fue de 22,7 meses. La mediana de supervivencia después de la recidiva fue de 6,7 meses.
Conclusión México La profundidad de la invasión, metástasis en los ganglios linfáticos y la expresión de Bcl-2 son factores independientes para predecir la recurrencia del cáncer gástrico.
Palabras clave
recurrencia del cáncer gástrico factores clínico-Bcl-2 Antecedentes
Aunque la incidencia de cáncer gástrico ha ido disminuyendo considerablemente durante varias décadas, todavía es el cuarto cáncer más común y la segunda causa más frecuente de muerte por cáncer [1, 2]. Aunque la mayoría de los pacientes con cáncer gástrico en etapa temprana puede tener largos tiempos de supervivencia después de la cirugía, aproximadamente el 40% de los pacientes mueren a causa de la recurrencia, incluso después de someterse a una cirugía curativa [3]. La presencia o ausencia de recurrencia es ampliamente considerado como el factor predictivo más importante para la supervivencia, como el pronóstico de los pacientes con recidiva es muy triste. Por lo tanto, es muy importante para predecir con precisión el riesgo de recurrencia en una etapa temprana con el fin de mejorar el pronóstico de los pacientes con recidiva. Sin embargo, se ha demostrado que el seguimiento de rutina después de la cirugía para el cáncer gástrico no es útil en la detección de la recurrencia en una etapa temprana [4]. Por lo tanto, es esencial para investigar factores específicos que pueden identificar subgrupos de pacientes con enfermedad más agresiva. Recientemente, algunos estudios han demostrado que los factores patológicos tales como el estado de los ganglios linfáticos, la profundidad de la invasión, y el tamaño del tumor, juegan un papel crucial en la predicción de la recidiva después de la gastrectomía [5, 6]. Sin embargo, es difícil predecir la recurrencia utilizando factores clinicopatológicos comunes. Teniendo en cuenta que algunos marcadores biológicos, como los oncogenes, genes supresores de tumores, los reguladores del ciclo celular, y los genes de reparación del ADN, están relacionados con la génesis tumoral, crecimiento, invasión y metástasis, muchos investigadores están buscando nuevos factores predictivos entre estos marcadores moleculares. En un estudio previo, se evaluó el valor pronóstico de los marcadores biológicos tales como p53, Bcl-2, Bax, y c-myc en el cáncer gástrico, y encontramos que Bcl-2 se asoció significativamente con el pronóstico en pacientes con cáncer gástrico [7]. Por lo tanto, la hipótesis de que Bcl-2 expresión puede reflejar las características del tumor, y por lo tanto, servir como un indicador fiable para predecir la recurrencia. El objetivo del presente estudio es determinar si la expresión de Bcl-2 puede predecir la recurrencia de la enfermedad después de la resección curativa en pacientes con cáncer gástrico.
Métodos Los pacientes

entre enero de 1996 y diciembre de 2007, 4.426 pacientes con diagnóstico histológico adenocarcinoma gástrico primario se sometió a una gastrectomía en el Departamento de cáncer gástrico y el sarcoma de tejido blando en la Universidad de Fudan Centro de cáncer de Shanghai. Fuera de estos pacientes, se seleccionaron 449 casos. muestras de estos pacientes se tiñeron inmunohistoquímicamente. Los datos fueron recuperados de informes operativos y patológicas de los pacientes. Los datos de seguimiento se obtuvieron por teléfono, carta, y la base de datos clínica para pacientes ambulatorios. Puesta en escena se realizó de acuerdo a la Unión Internacional contra el Cáncer (UICC) Clasificación TNM de estadificación para el carcinoma del estómago gratis (séptima edición, 2010) [8]. Un seguimiento de todos los pacientes se llevó a cabo de acuerdo con el protocolo estándar (cada tres meses durante al menos 2 años, cada 6 meses durante los próximos 3 años, y después de 5 años cada 12 meses para la vida). Los elementos de comprobación en marcha incluyen el examen físico, examen de marcadores tumorales, ultrasonido, radiografía de tórax, tomografía computarizada y el examen endoscópico. La gama del seguimiento fue desde enero de 1996 hasta mayo de 2010. El tiempo medio de seguimiento fue de 76,5 meses en el momento del análisis. escrito el consentimiento informado se había obtenido de todos los pacientes, y este estudio fue aprobado por el Comité Ético del Centro de Cáncer de Shanghai de la Universidad de Fudan. El estudio fue retrospectivo.
Tinción inmunohistoquímica se detectó
Bcl-2 por el método inmunohistoquímico. Los anticuerpos se adquirieron de Dako (Hamburgo, Alemania). La tinción inmunohistoquímica se realizó por el método de sistema de polímero etiquetado mejorado. Secciones de parafina se deparaffinised con xileno y etanol hidratado con agua /desionizada. Las secciones fueron incubadas con metanol /0,3% H 2O 2 y se bloquearon con tinción no específica reactivo de bloqueo. Después de la incubación durante la noche a 4 ° C con anti-bcl-2 de anticuerpos (diluido 1: 100), las secciones se trataron de acuerdo con los métodos de inmunoperoxidasa estándar. secciones de control negativo se sometieron al mismo procedimiento, excepto que el primer anticuerpo fue sustituido por PBS. No se observó tinción positiva en los controles. La localización de la tinción de Bcl-2 fue predominantemente en el citoplasma y citomembrana
La tinción inmunohistoquímica:. Anotando
Todos los cortes fueron evaluados de forma independiente por dos patólogos. Se evaluó el porcentaje de células inmunorreactivas y intensidad de la tinción. El porcentaje de células inmunorreactivas se clasificó en una escala de 0 a 4: ninguna tinción se puntuó como 0, 1 a 10% de células teñidas anotó como 1, 11 a 50% como 2, de 51 a 80% como 3, y 81 a 100% como 4. Las intensidades de tinción se calificaron de 0 a 3: 0 se definió como negativo, 1 como débil, 2 como moderado, y 3 tan fuerte, respectivamente. Los datos en bruto se convirtieron a una puntuación inmunohistoquímica (IHS) multiplicando las puntuaciones cantidad e intensidad. Una puntuación de IHS de 9 a 12 se consideró como una fuerte inmunorreactividad (+++), 5 a 8 como moderada (++), 1 a 4 como débil (+), y 0 como negativo (-). Los casos con una puntuación inferior a 1 se consideraron como negativos, y los que tienen ≥1 eran considerados como [9].
El análisis estadístico positivo
Los datos se presentan como media ± desviación estándar o la mediana para los parámetros numéricos. características de los pacientes y las características clínicas fueron analizados utilizando el Student de dos colas t-test o
prueba de chi-cuadrado de Pearson según corresponda. Los factores que se consideran de importancia potencial en el análisis univariado fueron incluidos en el análisis multivariante. Se utilizó regresión logística para estimar los factores relacionados para la recurrencia. El nivel aceptado de significación fue P Hotel < 0.05. . Los análisis estadísticos y gráficos se realizaron con el programa SPSS 13.0 (SPSS, Inc., Chicago, IL, EE.UU.): Resultados de la
características clinicopatológicas Francia El estudio incluyó a 307 hombres y 142 pacientes de sexo femenino (2,2: 1 ) con una edad media de 57 años. Hubo 49 (10,9%) primeras cánceres gástricos y 400 (89,1%) avanzaron cánceres gástricos. De acuerdo con el tipo histológico, se observaron tumores bien diferenciados en 7 (1,5%) pacientes, moderadamente diferenciado en 149 (33,2%) pacientes, y poorlydifferentiated tumores en los 293 (65,3%) pacientes restantes. Según tipo Borrmann, 49 (10,9%) eran de tipo 0, 32 (7,1%) de tipo I, 14 (3,1%) de tipo II, 333 (74,2%) de tipo III, y 21 (4,7%) de tipo IV. De estos pacientes, 147 (32,7%) tenían tumores localizados en el tercio superior del estómago, 65 (14,5%) tenían tumores en el tercio medio, 212 (47,2%) tenían tumores en el tercio más bajo, y 25 (5,6%) tenían tumores que ocupan dos tercios o más del estómago. Se observó metástasis en los ganglios linfáticos 326 pacientes, y la tasa de metástasis fue del 72,6%. La distribución de estadio patológico fue la siguiente: 35 (7,8%) pacientes pertenecían al estadio IA, 34 (7,6%) del IB, 50 (11,1%) IIA, 75 (16,7%) IIB, 82 (18,3%) IIIA, 80 ( 17,8%) IIIB y 93 (20,7%) IIIC.
expresión de Bcl-2
Bcl-2 expresión fue positivo en el 21,2% de todos los tejidos de cáncer gástrico. se observó Bcl-2 tinción en el citoplasma y citomembrana de células de carcinoma (Figura 1). Bcl-2 expresión se asoció con el estadio patológico. No hubo correlación entre Bcl-2 y otros parámetros patológicos, como la edad, sexo, tipo histológico, el tipo Borrmann, localización del tumor, o el tamaño del tumor. Figura 1 Expresión positiva de bcl-2 inmunohistoquímica en el tejido de cáncer gástrico. Un aumento original × 100, aumento del original B × 400.
Tiempo hasta la recurrencia y el patrón de recurrencia
La recurrencia ocurrió en 151 (33,6%) pacientes durante el período de seguimiento. La mediana del tiempo hasta la recurrencia fue de 17,0 meses (rango de 2,0 a 91,0 meses), y el tiempo medio fue de 21,1 meses. Entre los pacientes con recidiva, 113 (74,8%) tuvieron recurrencia dentro de 2 años. La frecuencia y la tasa de recurrencia se demuestran en la Figura 2. Figura 2 Frecuencia de recurrencia después de la operación curativa por año.
De los 151 pacientes con recidiva, 58 (38,4%) fueron diagnosticados de recidiva peritoneal, que fue el más prevalente, 49 (32,5%) pacientes tuvieron metástasis hematógenas, que era el segundo patrón de periodicidad más frecuente, y el hígado fue el más frecuentemente implicados órganos; que estaba implicado en 57,1% de todos los pacientes recurrentes. Otros recurrencias fueron loco-regional (n = 34, 22,5%), metástasis de ganglios linfáticos distantes (n = 8, 5,3%), o en múltiples sitios (n = 2, 1,3%) (Figura 3). Figura 3 Patrón de recurrencia de después de la gastrectomía curativa. factores relacionados con la recurrencia
El análisis univariado mostró que el tipo Borrmann, profundidad de la invasión, los ganglios linfáticos, y la expresión de Bcl-2 se asocia con recurrencia en general, mientras que la edad, sexo, tipo histológico, la localización del tumor y el tumor tamaño no fuera (Tabla 1). Se utilizó regresión logística para identificar los factores de riesgo independientes de recurrencia global. Se demostró que la profundidad de la invasión, metástasis en los ganglios linfáticos, y la expresión negativa de Bcl-2 fueron factores predictivos independientes de recidiva general (Tabla 2) .Tabla 1 El análisis univariante de los factores de riesgo para la recurrencia en el cáncer gástrico
n recurrencia
recurrencia
valor P gratis (n = 298) gratis (n = 151) guía empresas Edad (años), media ± DE
57,8 ± 11,9 55,8 ± 12,9

0,095
Género, hombres /mujeres
203/95 104/47

0.871
El tamaño del tumor (cm ), media ± DE
4,8 ± 2,5 5,3 ± 2,7

0,054
localización del tumor, alta /media /baja /dos o más
91/38/153/16
56 /27/59/9
0,094
tipo Borrmann, 0 /I /II /III /IV
45/22/9/211/11
4/10/5/122/10
0.002
Histología, así /moderada /pobremente diferenciado
5/101/192
2/48/101
0,899
profundidad de la invasión, T1 + T2 /T3 + T4
94/204 16/135

0.000
estado de los ganglios linfáticos, /
positivo negativo 108/190 15/136

0.000
Bcl-2, negativo /positivo
226/72 128/23

0.029
Tabla 2 multivariantes analysisof factores de riesgo de recidiva en el cáncer gástrico
variable
P-valor
probabilidades relación
95% IC
Edad
0,116 0,710

0.463, 1.088
Género
0.775 1.069

0.677, 1.687
tipo de Borrmann
0,334 0,872

0.660, 1.152
profundidad de la invasión
0,017 0,438

0.222, 0.861
linfa estado de los ganglios
0.000
3.753
2.040, 6.905
Bcl-2
0,047 0,577

0,336, 0,992
El análisis univariado mostró que el tipo Borrmann, profundidad de la invasión, los ganglios linfáticos, la histología, el género, y la expresión de bcl-2 se asociaron con recurrencia peritoneal. La regresión logística mostró que la profundidad de la invasión, los ganglios linfáticos, la histología y Bcl-2 fueron factores predictivos independientes de recidiva peritoneal. la localización del tumor y el tipo Borrmann estaban relacionadas con las metástasis hematógenas, y la localización del tumor fue el único factor predictivo independiente. No hubo correlación entre los parámetros clínico-patológicos y la recurrencia locorregional. Real Pronóstico de los pacientes recurrentes México La tasa de supervivencia global a los 5 años fue del 52% para todos los pacientes. tasa de supervivencia a cinco años fue del 58,9% y el 45,5% en bcl-2 pacientes negativos Bcl-2 positivos y, respectivamente. En 2 pacientes Bcl-positivos, el estadio patológico y la localización del tumor, afectados significativamente el pronóstico y el estadio patológico fue un factor pronóstico independiente. En bcl-2 negativo pacientes, el análisis univariado mostró que el tipo Borrmann, profundidad de la invasión, metástasis en los ganglios linfáticos, tamaño del tumor, la localización del tumor y el estadio patológico afectó significativamente el pronóstico. El análisis multivariado mostró que las metástasis en los ganglios linfáticos, la localización del tumor y el estadio patológico fueron factores pronósticos independientes. México La mediana de supervivencia de los pacientes con recurrencia fue de 22,7 meses. La mediana de supervivencia después de la recidiva fue de 6,7 meses. De acuerdo con los diferentes patrones de repetición, la mediana de supervivencia después de la recidiva peritoneal, metástasis hematógenas, recurrencia locorregional y metástasis en los ganglios linfáticos distantes fueron de 5,7 meses (2,6 a 12.4), de 7,3 meses (2,4 a 11,7), 7,0 meses (2,5 a 17.1), y 6,1 meses (3,9 a 7,9), respectivamente. Los pacientes con recurrencia de los ganglios linfáticos distantes peritoneal y tenían un tiempo de supervivencia más corta; sin embargo esto no fue estadísticamente significativa.
Discusión
Las principales conclusiones de este estudio fueron que (1) la recidiva peritoneal fue el patrón de periodicidad más frecuente tras la cirugía curativa, y (2) la profundidad de la invasión, metástasis en los ganglios linfáticos y expresión negativa de Bcl-2 fueron factores independientes de riesgo de recurrencia global.
el cáncer gástrico es una de las neoplasias más comunes en todo el mundo. Aunque el pronóstico de los pacientes con cáncer gástrico ha mejorado como resultado de mejores técnicas de diagnóstico y estrategias terapéuticas, cáncer gástrico sigue siendo la segunda causa principal de muertes relacionadas con el cáncer [2]. El pronóstico sombrío de cáncer gástrico se debe principalmente a la frecuencia de recurrencia y metástasis. Por lo tanto, es muy importante aclarar el patrón de recurrencia y los factores de riesgo de recidiva, lo que puede contribuir a la realización de la práctica clínica postoperatoria y seguimiento.
En nuestro estudio, 151 (33,6%) pacientes tuvieron recurrencia durante el seguimiento -up periodo. El tiempo medio hasta la recurrencia fue de 21,1 meses; 113 pacientes (74,8%) tuvieron recurrencia dentro de 2 años. Este resultado muestra que la mayor recurrencia del cáncer gástrico se produce dentro de 2 años, y es consistente con otros estudios [10-12]. Yoo et al.
[12] informó de 508 pacientes con recidiva después de la resección curativa para el cáncer gástrico y demostró que la longitud media de tiempo hasta la recurrencia fue de 21,8 meses. Por lo tanto, era necesario para reforzar el seguimiento dentro de 2 años después de la resección curativa.
Se ha informado de que los patrones de repetición más comunes son la recurrencia hematógena y difusión peritoneal en el cáncer gástrico [3, 12-14]. En nuestra serie, la recidiva peritoneal fue el patrón más común, representando el 38,4% de todos los pacientes con recidiva, seguido de metástasis hematógenas (32,5%). Nuestros resultados son consistentes con estudios previos [3, 12]. Maehara et al.
Informó [15] que el patrón peritoneal representaron el 50% de los casos, la recurrencia hematógena el 40% de los casos, y la recurrencia loco-regional de 20%. Sin embargo, todavía hay algunas diferencias. Un estudio italiano demostró que el patrón de periodicidad más frecuente fue loco-regional, que representa el 45% de todos los casos recurrentes [16]. Esta disparidad indica que hay algunas diferencias en los patrones de recurrencia entre Este y los países occidentales. Es posible que la baja incidencia de recidiva local en los estudios sobre Oriente es debido al amplio uso de la disección de los ganglios linfáticos D2.
La recurrencia es frecuente en pacientes con cáncer gástrico después de someterse a una gastrectomía radical. Por lo tanto, es importante identificar a los pacientes con alto riesgo de recurrencia. En este estudio, el análisis univariado mostró que el tipo Borrmann, profundidad de la invasión, y el estado de los ganglios linfáticos se asociaron con recurrencia global. La regresión logística demostró que la profundidad de la invasión y metástasis de ganglios linfáticos fueron factores independientes de riesgo de recurrencia global. De acuerdo con nuestros resultados, los estudios anteriores han demostrado que los factores clínico-patológicos tradicionales tales como la exposición serosa, el tipo histológico, la profundidad de la invasión y la metástasis de los ganglios linfáticos fueron factores de riesgo para la recidiva [17-19]. Sin embargo, los factores clínico-patológicos tradicionales son a veces insuficientes para la predicción de la recurrencia. Un número de estudios han indicado que los biomarcadores, tales como marcadores tumorales [20, 21], factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) de la familia [22, 23], E-cadherina [24, 25], y microRNAs [26], podrían ser útil para predecir la recurrencia de cáncer gástrico. Bcl-2 situado en el cromosoma 18q21, y codifica una proteína de 26-kDa localizada principalmente en la membrana mitocondrial [27]. El gen bcl-2 fue descrito primero como un oncogén en el linfoma folicular. Algunos estudios han demostrado que la sobreexpresión de la proliferación celular bcl-2 suprimido y se asoció con un comportamiento biológico menos agresivo [28, 29]. Sin embargo, el valor de bcl-2 en la predicción de la recidiva del cáncer gástrico es todavía poco clara. En un estudio anterior, encontramos que Bcl-2 se asoció significativamente con el pronóstico en pacientes con cáncer gástrico [7]. Por lo tanto, la hipótesis de que Bcl-2 podría reflejar la naturaleza biológica del tumor, y serviría como un indicador fiable para predecir la recurrencia. De acuerdo con nuestros resultados, la expresión negativa de Bcl-2 es un factor de riesgo independiente para la recurrencia del cáncer gástrico. El mecanismo exacto todavía no está claro. Es posible que bcl-2 afecta a la recurrencia del cáncer gástrico mediante la regulación del comportamiento biológico de las células tumorales. Saegusa et al.
[28] informó de que la mayoría de las células Bcl-2 + cancerosas se encuentran en un estado no proliferativa, y el medio de expresión de Ki-67 índice de marcaje y etiquetado índice de apoptosis en focos de Bcl-2 + son significativamente más bajos de aquel en el bcl-2 focos. Aizawa et al.
[30] mostró que la expresión de bcl-2 en el cáncer gástrico avanzado está asociada con un índice apoptótico inferior y un mejor pronóstico. Pietenpol et al.
[31] informó de que la sobreexpresión de Bcl-2 inhibe el crecimiento de varias líneas celulares de tumores sólidos.
Conclusión
En conclusión, el presente estudio demostró que la recidiva peritoneal fue el más patrón de repetición común después de la gastrectomía curativa. Profundidad de la invasión, metástasis en los ganglios linfáticos, y la expresión negativa de Bcl-2 predice un mayor riesgo de recurrencia. Estos hallazgos pueden proporcionar información útil para el seguimiento de pacientes con cáncer gástrico que han sido sometidos a cirugía para la resección. En concreto, es necesario llevar a cabo un plan de seguimiento intensivo para pacientes con cáncer gástrico con expresión negativa de Bcl-2. Sin embargo, la pequeña escala y el diseño retrospectivo eran deficiencias del actual estudio. Además de gran escala, los estudios prospectivos se debe realizar para validar la utilidad de bcl-2 en la detección de la recurrencia del tumor en pacientes con cáncer gástrico.
Notas
Jianghong Wu, Liu Xiaowen ha contribuido igualmente a esta labor.
Declaraciones
Agradecimientos Agradecemos a Ben
Liotta para editar el idioma Inglés en nuestro manuscrito.
los autores originales presentados archivos de imágenes
a continuación se presentan los enlaces a los archivos de los autores presentados original para imágenes. 'archivo original para la figura 1 12957_2013_1895_MOESM2_ESM.tif autores 12957_2013_1895_MOESM1_ESM.tif Autores archivo original para la figura 2 12957_2013_1895_MOESM3_ESM.tif autores archivo original para la figura 3 Conflicto de intereses México La autores declaran que no tienen intereses en competencia.
Autores' contribuciones
JMS, XWL y YNW concebido y diseñado los experimentos. JMS y XWL realizaron los experimentos. JMS, XWL y HC analizaron los datos. HC y YNW contribuyeron reactivos /materiales /herramientas de análisis. JMS y XWL escribió el documento. Todos los autores leído y aprobado el manuscrito final.

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