Ennustaminen kasvaimen uusiutumisen jälkeen parantavaa resektio vuonna mahakarsinoo- perustuu Bcl-2: n ilmentymisen
tiivistelmä
tausta
Tällä hetkellä ei luotettavia ennustavaa tekijöitä mahalaukun syövän uusiutumiseen. Tutkimuksen tavoitteena oli arvioida suhdetta Bcl-2: n ilmentymisen ja maha- syövän uusiutumiseen. Tool Menetelmät
tammikuusta 1996 joulukuuhun 2007 449 mahasyövän potilailla, joille tehtiin parantava resektio oli jälkikäteen tutkittu. Ilmentymistasojen bcl-2 tutkittiin immunohistokemiallisesti. Logistinen regressio suoritettiin tunnistamaan riippumattomia riskitekijöitä yleisestä toistumisen mahasyövän.
Tulokset
151 potilasta (33,6%) koki toistuminen. Mediaani aika uusiutumiseen oli 17,0 kuukautta, 113 (74,8%) potilaista oli toistuminen 2 vuoden sisällä. Peritoneaalisille toistuminen oli yleisin kuvio, jonka jälkeen hematogenous etäpesäke, joka maksassa oli Yleisin. Syvyys hyökkäyksen, imusolmukemetastaaseja, ja negatiivinen ilmaus Bcl-2 olivat riippumattomia riskitekijöitä yleistä toistumisen. Yleinen elinaika toistuvien potilaista oli 22,7 kuukautta. Keskimääräinen elinaika jälkeen uusiutuminen oli 6,7 kuukautta.
Päätelmä
syvyys hyökkäyksen imusolmukemetastaaseja ja ilmentyminen Bcl-2 ovat riippumattomia tekijöitä ennustamiseen mahalaukun syövän uusiutumiseen.
Avainsanat
Mahalaukun syövän uusiutumiseen kliinis tekijät bcl-2 Taustaa
Vaikka esiintyvyys mahasyövän on laskenut huomattavasti useiden vuosikymmenten ajan, se on edelleen neljänneksi yleisin syöpä ja toiseksi yleisin syy syövän kuolema [1, 2]. Vaikka suurin osa potilaista, joilla alkuvaiheen mahasyöpä voi olla pitkä selviytymisen kertaa leikkauksen jälkeen, noin 40% potilaista kuolee toistuminen, vaikka kun niitä on parantava leikkaus [3]. Läsnäolo tai puuttuminen toistuminen yleisesti pidetään tärkeimpänä ennustaja eloonjäämisestä kuin ennuste potilaille, joilla uusiutumisen on erittäin synkkä. Siksi on erittäin tärkeää tarkasti ennustaa uusiutumisen riskiä varhaisessa vaiheessa, jotta voidaan parantaa ennustetta potilaille, joilla uusiutumisen. Kuitenkin on osoitettu, että rutiini seurannassa leikkauksen jälkeen mahasyövän ei auta havaitsemisessa uusiutumisen varhaisessa vaiheessa [4]. Siksi on tärkeää tutkia tiettyjä tekijöitä, jotka voivat tunnistaa potilailla, joiden aggressiivisempi sairaus. Viime aikoina jotkut tutkimukset ovat osoittaneet, että patologisia tekijät, kuten imusolmukkeesta tila, syvyys invaasio ja kasvaimen kokoa, on ratkaiseva rooli ennustaa toistumisen jälkeen gastrectomy [5, 6]. On kuitenkin vaikea ennustaa toistumisen käyttäen yhteisiä kliinis tekijöitä. Koska jotkut biologisten merkkiaineiden, kuten onkogeenien, kasvaimen synnyssä, solusyklin sääntelyviranomaisten, ja DNA: n korjaukseen geenejä, jotka liittyvät kasvaimen synty, kasvu, invaasio ja metastaasi, monet tutkijat etsivät uusia ennustavaa tekijää näistä molekyylimarkkereina. Aikaisemmassa tutkimuksessa, arvioimme prognostinen arvo biologisten merkkiaineiden, kuten p53, bcl-2, bax, ja c-myc mahasyövän, ja havaitsi, että bcl-2-oli merkitsevästi yhteydessä ennusteeseen mahasyöpäpotilaista [7]. Siksi me arveltu, että Bcl-2: n ilmentymisen voivat heijastaa kasvainten ominaisuuksiin, ja siten, ollakseen luotettava indikaattori ennustamaan toistumisen. Tavoitteena nykyisen tutkimuksen tarkoituksena on selvittää, onko Bcl-2: n ilmentymisen voi ennustaa taudin uusiutumisen jälkeen parantavaa resektiota potilailla mahalaukun syövän. Tool Menetelmät
Potilaat
välisenä tammikuun 1996 ja joulukuun 2007 4426 Histologisesti vahvistettu ensisijainen mahalaukun adenokarsinooman kävi gastrectomy laitoksella mahasyövän ja pehmytkudossarkooman Fudanin yliopistossa Shanghaissa Cancer Center. Näistä potilaista, 449 tapausta valittiin. Nämä potilaiden näytteet värjättiin immunohistokemiallisesti. Tiedot haettiin potilaiden operatiivisen ja patologinen raportit. Follow-up tiedot saatiin puhelimitse, kirjeitse, ja avohoidon kliinisiä tietokantaan. Staging suoritettiin unionin International Cancer valvonta (UICC) TNM lavastus Luokittelu Karsinooma mahan
(seitsemäs painos, 2010) [8]. Followup potilaista suoritettiin saamiemme vakioyhteyskäytäntöä (kolmen kuukauden välein vähintään 2 vuotta, 6 kuukauden välein seuraavien 3 vuoden ja 5 vuoden kuluttua 12 kuukauden välein elämän). Check-up erät lääkärintarkastus, kasvain-merkki, ultraäänitutkimus, rintakehän röntgenkuvaus, tietokonetomografia tomografiseen skannaus, ja tähystys. Valikoima followup oli tammikuusta 1996 toukokuuhun 2010. mediaani seuranta-aika oli 76,5 kuukautta aikaan analyysia. Kirjallinen suostumus oli saatu kaikista potilaista, ja tämä hyväksyi tutkimuksen eettinen komitea Shanghai Cancer Center Fudanin yliopistossa. Tutkimus oli retrospektiivinen.
Immunohistokemiallinen värjäys
Bcl-2 havaittiin, että immunohistokemiallisella menetelmällä. Vasta-aineet hankittiin Dako (Hampuri, Saksa). Immunohistokemiallinen värjäys suoritettiin tehostetun leimattu polymeeri järjestelmän menetelmää. Parafiinisektioista oli deparaffinised ksyleenillä ja sammutettua etanoli /deionisoidulla vedellä. Leikkeitä inkuboitiin sitten metanolilla /0,3% H
2O 2 ja blokattiin ei-spesifistä värjäytymistä estoreagenssia. Sen jälkeen kun oli inkuboitu yön yli 4 ° C: ssa anti-Bcl-2-vasta-ainetta (laimennettu 1: 100), leikkeitä käsiteltiin standardin immunoperoksidaasilla menetelmiä. Negatiivinen kontrolli osat saatettiin saman menettelyn, paitsi että ensimmäinen vasta-aine korvattiin PBS: llä. Ei positiivista värjäytymistä ei havaittu kontrolleissa. Sijainti värjäyksen Bcl-2 oli pääasiassa solulimassa ja cytomembrane.
Immunohistokemiallinen värjäys: teki
Kaikki siivuja itsenäisesti arvioitiin kaksi patologia. Prosenttiosuus immunoreaktiivisten solujen ja värjäytymisvoimakkuuksia arvioitiin. Prosenttiosuus immunoreaktiivisten solujen arvostellaan asteikolla 0-4: ei värjäytymistä pisteytettiin 0, 1-10% soluista värjättiin pisteytetään 1, 11-50%, kuten 2, 51-80%, kuten 3, ja 81 100% kun 4. värjäytymisvoimakkuuksia lajiteltiin 0-3: 0 määritettiin negatiiviseksi, 1 heikko, 2 maltillisena, ja 3 niin vahva, vastaavasti. Raakadata muunnettiin immunohistokemiallinen pisteet (IHS) kertomalla määrän ja intensiteetin tulokset. IHS pisteet 9-12 pidettiin vahvana immunoreaktiivisuus (+++), 5-8 kohtalainen (++), 1-4 heikkona (+), ja 0 negatiivisena (-). Tapaukset tuloksella alle 1 katsottiin negatiivisiksi, ja ne, joilla ≥1 pidettiin positiivisina [9].
Tilastollinen analyysi
Tulokset esitettiin keskiarvo ± SD tai mediaani numeeristen parametrien. Potilaiden ominaisuudet ja kliinisiä tekijöitä analysoitiin käyttämällä kaksisuuntaisia Student t
-testiä tai Pearson chi-neliö testi tarvittaessa. Tekijöitä, jotka katsottiin jotka voivat olla merkittäviä yhden muuttujan analyysiin otettiin mukaan monimuuttujamenetelmin. Logistinen regressio avulla arvioitiin liittyvistä tekijöistä uusiutumisen. Hyväksytylle tasolle merkitys oli P
< 0,05. Tilastolliset analyysit ja grafiikkaa suoritettiin käyttäen SPSS 13.0 tilastopaketista (SPSS, Inc., Chicago, IL, USA).
Tulokset
kliinis ominaisuudet
Tutkimuksessa oli mukana 307 mies- ja 142 naispotilaita (2,2: 1 ), joiden keski-ikä 57 vuotta. Oli 49 (10,9%) varhainen syöpien ja 400 (89,1%) eteni syöpien. Mukaan histologinen tyyppi, hyvin erilaistunut kasvainten havaittiin 7 (1,5%) potilaista, kohtalaisen erilaistuvat 149 (33,2%) potilaista, ja poorlydifferentiated kasvaimia jäljellä 293 (65,3%) potilaista. Mukaan Borrmann tyyppi, 49 (10,9%) oli tyyppi 0, 32 (7,1%) tyyppi I, 14 (3,1%) tyypin II, 333 (74,2%) tyyppi III, ja 21 (4,7%) tyyppi IV. Näistä potilaista 147 (32,7%) oli kasvaimia yläkulmassa kolmannes mahan, 65 (14,5%) oli kasvaimia keskimmäiseen kolmannekseen, 212 (47,2%) oli kasvaimia alalaitaan, ja 25 (5,6%) oli kasvaimia miehittää kaksi kolmasosaa tai enemmän vatsaan. Imusolmuke etäpesäke havaittiin 326 potilaalla, ja etäpesäkkeitä oli 72,6%. Jakelu patologinen vaiheessa oli seuraava: 35 (7,8%) potilaista kuului vaiheessa IA, 34 (7,6%) IB, 50 (11,1%) IIA, 75 (16,7%) IIB, 82 (18,3%) IIIA, 80 ( 17,8%) III B, ja 93 (20,7%) IIIC.
Expression of Bcl-2
Bcl-2: n ilmentymisen oli positiivinen 21,2% kaikista mahasyövän kudoksiin. Bcl-2-värjäytyminen havaittiin sytoplasmassa ja cytomembrane ja karsinoomasoluja (kuvio 1). Bcl-2-ilmentyminen liittyy patologinen vaiheessa. Ei ollut mitään korrelaatiota Bcl-2 ja muut patologiset parametrejä, kuten ikä, sukupuoli, histologinen tyyppi, Borrmann tyyppi, kasvain sijainti, tai kasvaimen kokoa. Kuvio 1 positiivinen ekspressio bcl-2 immunohistokemia mahasyövän kudoksessa. Alkuperäinen suurennos x 100, B alkuperäinen suurennos x 400.
Aika uusiutumiseen ja uusiutumisen malli
uusiutuminen tapahtui 151 (33,6%) potilaista aikana seurantajakson aikana. Mediaani aika uusiutumiseen oli 17,0 kuukautta (vaihteluväli 2,0-91,0 kuukautta), ja keskimääräinen aika oli 21,1 kuukautta. Potilailla, joilla uusiutumisen, 113 (74,8%) oli toistuminen 2 vuoden sisällä. Taajuus ja määrä toistumisen osoitetaan kuviossa 2. Kuvio 2 Taajuus uusiutumisen jälkeen parantavaa toimintaa vuosittain.
Niistä 151 potilasta, joiden tauti uusiutui, 58 (38,4%) oli diagnosoitu vatsakalvon toistuminen, mikä oli yleisin, 49 (32,5%) potilaista oli hematogenous etäpesäkkeitä, joka oli toiseksi yleisin toistuminen malli, ja maksa oli useimmiten aiheuttavat elin; se oli osallisena 57,1% kaikista toistuvista potilaita. Muut toistuminen oli loco alueiden (n = 34, 22,5%), kaukana imusolmukemetastaaseja (n = 8, 5,3%), tai useisiin kohtiin (n = 2, 1,3%) (kuvio 3). Kuva 3 Pattern toistumisen jälkeen parantavaa gastrectomy.
uusiutuminen liittyvät tekijät
univariate analyysi osoitti, että Borrmann tyyppi, syvyys invaasio, imusolmuke tila, ja ilmaus Bcl-2 liittyi yleiseen toistuminen, kun taas ikä, sukupuoli, histologinen tyyppi, kasvain sijainti, ja kasvain koko ei ollut (taulukko 1). Logistinen regressio käytettiin tunnistamaan riippumattomia riskitekijöitä yleistä toistumisen. On osoitettu, että syvyys invaasio, imusolmukemetastaaseja, ja negatiivinen ilmaus Bcl-2 oli riippumaton ennustavaa tekijää yleisen toistumisen (taulukko 2) .table 1 Univariate analyysin riskitekijöistä uusiutumisen mahasyövän
Ei toistuminen
uusiutuminen
P-arvo
(n = 298)
(n = 151)
Ikä (vuotta), keskiarvo ± SD
57,8 ± 11,9
55,8 ± 12,9
0,095
sukupuoli, mies /nainen
203/95
104/47
0,871
Tuumorin koko (cm ), keskiarvo ± SD
4,8 ± 2,5
5,3 ± 2,7
0,054
Kasvain sijainti, ylä- /keski /alemman /kahden tai useamman
91/38/153/16
56 /27/59/9
0,094
Borrmann tyyppi, 0 /I /II /III /IV
45/22/9/211/11
4/10/5/122/10
0,002
Histologia, hyvin /kohtalainen /huonosti eriytetty
5/101/192
2/48/101
0,899
syvyys hyökkäystä, T1 + T2 /T3 + T4
94/204
16/135
0,000
Imusolmuke tila, negatiivinen /positiivinen
108/190
15/136
0,000
Bcl-2, negatiivinen /positiivinen
226/72
128/23
0,029
Taulukko 2 Monimuuttujatestaus analyysien avulla.Työ riskitekijöitä uusiutumisen mahasyövän
Variable
P-arvo
Odds suhde
95% CI
Ikä
0,116
0,710
0,463, 1,088
Sukupuoli
0,775
1,069
0,677, 1,687
Borrmann tyyppi
0,334
0,872
0,660, 1,152
syvyys invaasion
0,017
0,438
0,222, 0,861
Imusolmuke tila
0,000
3,753
2.040, 6.905
Bcl-2
0,047
0,577
0,336, 0,992
univariate analyysi osoitti, että Borrmann tyyppi, syvyys invaasio, imusolmuke tila, histologia, sukupuoli, ja ilmaus bcl-2 liittyivät vatsakalvon toistumisen. Logistinen regressio osoitti, että syvyys invaasio, imusolmuke tila, histologian, ja Bcl-2 olivat riippumattomia ennustavia tekijöitä vatsakalvon toistumisen. Kasvaimen sijainti ja Borrmann tyyppi liittyivät hematogenous etäpesäkkeitä, ja kasvaimen sijainti oli ainoa itsenäinen ennustava tekijä. Ei ollut mitään korrelaatiota kliinis parametrien ja paikallista alueellista toistuminen.
Ennuste toistuvien potilaiden
yleinen 5-vuoden pysyvyys oli 52% kaikille potilaille. Viiden vuoden eloonjääminen oli 58,9% ja 45,5% vuonna Bcl-2 positiivisia ja Bcl-2 negatiivinen potilaista. Bcl-2 positiiviset potilaat, patologinen vaiheessa ja kasvaimen sijainti vaikuttaa merkittävästi ennustetta, ja patologinen vaihe oli itsenäinen ennustetekijä. Bcl-2 negatiivisilla potilailla, yhden muuttujan analyysi osoitti, että Borrmann tyyppi, syvyys invaasio, imusolmukemetastaaseja, kasvaimen koko, kasvain sijainti ja patologinen vaiheessa vaikutti merkittävästi ennustetta. Monimuuttuja-analyysi osoitti, että imusolmukemetastaaseja, kasvain sijainti, ja patologinen vaiheessa olivat riippumattomia ennustavia tekijöitä.
Keskimääräinen elinaika potilailla, joilla uusiutumisen 22,7 kuukautta. Keskimääräinen elinaika jälkeen uusiutuminen oli 6,7 kuukautta. Mukaan eri toistumisen kuvioita, eloonjäämisajan mediaanin jälkeen vatsakalvon toistuminen, hematogenous etäpesäkkeitä, paikallista alueellista toistuminen, ja kaukainen imusolmukemetastaaseja oli 5,7 kuukautta (2,6 ja 12,4), 7,3 kuukautta (2,4 ja 11,7), 7,0 kuukautta (2,5 17.1), ja 6,1 kuukautta (3,9-7,9), tässä järjestyksessä. Potilaat, joilla on vatsakalvon ja etäinen imusolmukkeesta toistuminen oli lyhyempi elinaika; kuitenkaan tämä ei ollut tilastollisesti merkitsevä.
Keskustelu
tärkeimmät tulokset Tämän tutkimuksen että (1) vatsakalvon toistuminen oli yleisin toistumisen kuvion jälkeen parantava leikkauksen, ja (2) syvyys hyökkäyksen, imusolmukemetastaaseja ja negatiivinen ilmaus bcl-2 olivat riippumattomia riskitekijöitä yleisen uusiutumisen.
Mahalaukun syöpä on yksi yleisimmistä syöpäsairauksia maailmanlaajuisesti. Vaikka ennusteen potilaita, joilla on mahalaukun syöpä on parantunut seurauksena parempia diagnostisia menetelmiä ja terapeuttisia strategioita, mahalaukun syöpä on edelleen toinen johtava syy syöpään liittyvien kuolemien [2]. Synkkä ennuste mahasyöpä johtuu pääasiassa taajuus toistumisen ja etäpesäke. Siksi on erittäin tärkeää selventää kuvion toistumisen ja riskitekijöitä uusiutumisen, joka voi edistää kulusta leikkauksen jälkeisen kliinisen käytännön ja seurannassa.
Tutkimuksessamme 151 (33,6%) potilaista oli uusiutumisen aikana seuranta up aikana. Keskimääräinen aika uusiutumiseen oli 21,1 kuukautta 113 potilasta (74,8%) oli toistuminen 2 vuoden sisällä. Tämä tulos osoittaa, että useimpien mahalaukun syövän uusiutumiseen tapahtuu 2 vuoden sisällä, ja on yhdenmukainen muiden tutkimusten [10-12]. Yoo ym.
[12] raportoitu 508 potilasta, joiden tauti uusiutui jälkeen parantava resektio mahasyövän ja osoitti, että keskimääräinen aika uusiutumiseen oli 21,8 kuukautta. Siksi oli tarpeen vahvistaa followup 2 vuotta kuluttua parantava resektion.
On raportoitu, että yleisin toistumisen kuviot ovat hematogenous toistuminen ja vatsakalvon levittämistä mahasyövän [3, 12-14]. Meidän sarja, vatsakalvon toistuminen oli yleisin malli, osuus 38,4% kaikista potilaista, joiden tauti uusiutui, jonka jälkeen hematogenous metastaaseja (32,5%). Tuloksemme ovat yhdenmukaisia aiempien tutkimusten [3, 12]. Maehara ym.
Raportoitu [15], että vatsakalvon malli osuus 50% tapauksista, hematogenous uusiutumisen 40% tapauksista, ja paikallista alueellista uusiutumisen 20%. On kuitenkin olemassa vielä joitakin kiistoja. Italialaisessa tutkimus osoitti, että yleisin toistumisen malli oli paikallista alueellista, osuus 45% kaikista toistuvista tapauksista [16]. Ero osoitti, että on olemassa joitakin eroja uusiutumisen malleja itäisen ja länsimaissa. On mahdollista, että esiintyvyys on alhainen paikallisen uusiutumisen Itä tutkimuksissa johtuu laaja käyttö D2 imusolmukkeiden leikkelyn.
Uusiutuminen on yleistä mahasyöpäpotilaista jälkeen voimakkaassa gastrectomy. Siksi on tärkeää tunnistaa potilaat suuri riski toistumisen. Tässä tutkimuksessa yhden muuttujan analyysi osoitti, että Borrmann tyyppi, syvyys hyökkäystä, ja imusolmukkeesta tila liittyi yleiseen toistumisen. Logistinen regressio osoitti, että syvyys hyökkäys ja imusolmukemetastaaseja olivat riippumattomia riskitekijöitä yleistä toistumisen. Vastaa meidän havaintojen aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että perinteiset kliinis tekijät, kuten seröösisiä altistuminen, histologinen tyyppi, syvyys hyökkäystä, ja imusolmuke etäpesäke olivat riskitekijöitä uusiutumisen [17-19]. Kuitenkin perinteiset kliinis tekijät ovat toisinaan riittämättömiä ennustamiseen toistumisen. Useat tutkimukset ovat osoittaneet, että biomarkkerit, kuten kasvainmerkkiaineet [20, 21], verisuonten endoteelin kasvutekijän (VEGF) perheeseen [22, 23], E-kadheriinin [24, 25], ja MikroRNA [26], voivat olla hyödyllinen ennustamiseksi toistumisen mahasyövän. Bcl-2 sijaitsee kromosomissa 18q21, ja koodaa 26 kDa: n proteiini, joka sijaitsee pääasiassa mitokondrion kalvon [27]. Bcl-2-geenin kuvattiin ensin onkogeenin follikulaarinen lymfooma. Jotkut tutkimukset ovat osoittaneet, että yli-ilmentyminen Bcl-2 tukahdutetaan solujen lisääntymistä ja liittyi vähemmän aggressiivisia biologista käyttäytymistä [28, 29]. Kuitenkin arvo Bcl-2 ennustettaessa mahasyövässä toistuminen on vielä epäselvä. Aikaisemmassa tutkimuksessa havaittiin, että Bcl-2 on merkittävästi yhteydessä ennusteen mahasyöpäpotilaista [7]. Siksi me arveltu, että Bcl-2 saattaa heijastaa biologinen luonne kasvain, ja toimisi luotettava indikaattori ennustamaan toistumisen. Saamiemme tulosten, negatiivinen ilmaus Bcl-2 on itsenäinen riskitekijä mahalaukun syövän uusiutumiseen. Tarkkaa mekanismia ei vielä tunneta. On mahdollista, että Bcl-2 vaikuttaa mahalaukun syövän uusiutumista säätelemällä kasvainsolujen biologista käyttäytymistä. Saegusa ym.
[28] ilmoitetaan, että suurin osa Bcl-2 + syöpäsolut ovat on nonproliferatiivinen tilassa, ja keskimääräinen ilmaus Ki-67 merkintää indeksin ja apoptoottisten merkintöjen indeksiä Bcl-2 + pesäkkeitä ovat huomattavasti pienemmät kuin että bcl-2 pesäkkeitä. Aizawa et ai.
[30] osoittivat, että ilmentyminen bcl-2 edenneessä mahasyövässä liittyy pienempi apoptoottisten indeksi ja parempi ennuste. Pietenpol et ai.
[31] on raportoitu, että yli-ilmentyminen bcl-2 estää niiden kasvun useiden kiinteiden kasvainten solulinjoissa.
Päätelmä
Lopuksi, esillä oleva tutkimus osoitti, että vatsakalvon toistuminen oli kaikkein yhteinen toistumisen kuvion jälkeen parantavaa gastrectomy. Syvyys hyökkäyksen, imusolmukemetastaaseja, ja negatiivinen ilmaus Bcl-2 ennustaa suurempi riski syövän uusiutumiselle. Nämä havainnot voivat tarjota hyödyllistä tietoa followup mahasyövän potilailla, joille on tehty leikkaus resektio. Erityisesti on tarpeen tekevät huolellisen seurannan suunnitelma mahasyövän potilaille, joilla on negatiivinen ilmaus Bcl-2. Kuitenkin pieni mittakaava ja retrospektiivinen suunnittelu oli puutteita nykyisen tutkimuksen. Edelleen suuren mittakaavan, mahdollisille tutkimukset on suoritettava validoimiseksi hyödyllisyyttä Bcl-2 havaitsemaan kasvaimen uusiutumisen potilailla, joilla on mahalaukun syövän.
Huomautuksia
Jianghong Wu, Xiaowen Liu vaikuttanut yhtä tähän työhön.
Julistukset
Kiitokset
Kiitämme Ben Liotta muokkausta Englanti kielellä meidän käsikirjoituksen.
kirjoittajien alkuperäinen toimitti asiakirjat kuville
Alla linkkejä kirjoittajien alkuperäiset toimitti asiakirjat kuville. 12957_2013_1895_MOESM1_ESM.tif Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 1 12957_2013_1895_MOESM2_ESM.tif Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 2 12957_2013_1895_MOESM3_ESM.tif Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 3 Kilpailevat edut
Kirjoittajat ilmoittavat, että heillä ei ole kilpailevia intressejä.
Kirjoittajien maksut
JHW, XWL ja YNW suunniteltu ja kokeet. JHW ja XWL suoritti kokeita. JHW, XWL ja HC analysoi tiedot. HC ja YNW osaltaan reagenssit /materiaalit /analyysityökaluja. JHW ja XWL kirjoitti paperille. Kaikki kirjoittajat luettu ja hyväksytty lopullinen käsikirjoitus.