Pronostico recidiva del tumore dopo resezione curativa nel carcinoma gastrico sulla base di Bcl-2 expression

previsione di recidiva del tumore dopo resezione curativa nel carcinoma gastrico sulla base di Bcl-2 espressione
Abstract
sfondo
Non ci sono fattori predittivi affidabili per gastrica recidiva del tumore. Lo scopo di questo studio era di valutare la relazione tra bcl-2 e il rischio di cancro gastrico recidiva.
Metodi
Dal gennaio 1996 al dicembre 2007 449 pazienti affetti da cancro gastrico sottoposti a resezione curativa sono stati retrospettivamente studiati. I livelli di espressione di Bcl-2 sono stati esaminati mediante immunoistochimica. La regressione logistica è stata effettuata per identificare i fattori di rischio indipendenti per la recidiva globale del cancro gastrico.
Risultati
151 pazienti (33,6%) recidive esperti. Il tempo mediano alla recidiva era 17.0 mesi, 113 (74.8%) pazienti avevano recidive entro 2 anni. recidiva peritoneale è stato il modello più diffuso, seguito da metastasi ematogena in cui il fegato è stato il sito più comune. Profondità di invasione, metastasi linfonodali, e espressione negativa di Bcl-2 erano fattori di rischio indipendenti per la recidiva generale. Il tempo di sopravvivenza globale dei pazienti ricorrenti è stato 22,7 mesi. Il tempo mediano di sopravvivenza dopo la recidiva era 6.7 mesi.
Conclusione
La profondità di invasione, metastasi linfonodali e l'espressione di Bcl-2 sono fattori indipendenti per la previsione gastrica recidiva del tumore.
Parole
gastrico recidiva del cancro fattori clinicopatologici Bcl-2 Background
Sebbene l'incidenza di cancro gastrico è in calo sostanziale per diversi decenni, è ancora il quarto cancro più comune e la seconda causa più frequente di morte per cancro [1, 2]. Anche se la maggior parte dei pazienti con cancro gastrico in stadio precoce può avere tempi di sopravvivenza a lungo dopo l'intervento chirurgico, circa il 40% dei pazienti muoiono di recidiva, anche dopo aver subito un intervento chirurgico curativo [3]. La presenza o l'assenza di recidiva è ampiamente considerato il fattore predittivo più importante per la sopravvivenza, come la prognosi per i pazienti con recidiva è estremamente triste. Pertanto, è molto importante per prevedere con precisione il rischio di recidiva in una fase iniziale, al fine di migliorare la prognosi di pazienti con recidiva. Tuttavia, è stato dimostrato che il follow routine dopo intervento chirurgico per cancro gastrico non è utile per individuare recidive in una fase iniziale [4]. Pertanto, è fondamentale studiare fattori specifici che possono identificare sottogruppi di pazienti con malattia più aggressiva. Di recente, alcuni studi hanno dimostrato che i fattori patologici come lo stato dei linfonodi, profondità di invasione, e la dimensione del tumore, svolgono un ruolo cruciale nel predire recidive dopo gastrectomia [5, 6]. Tuttavia, è difficile prevedere recidiva utilizzando fattori clinicopatologiche comuni. Dato che alcuni marcatori biologici, come oncogeni, geni oncosoppressori, regolatori del ciclo cellulare, e geni di riparazione del DNA, sono legati alla genesi del tumore, la crescita, invasione e metastasi, molti ricercatori sono alla ricerca di nuovi fattori predittivi tra questi marcatori molecolari. In uno studio precedente, abbiamo valutato il valore prognostico dei marcatori biologici, come p53, Bcl-2, Bax, e c-myc nel cancro gastrico, e ha scoperto che Bcl-2 era significativamente associato con la prognosi nei pazienti con cancro gastrico [7]. Pertanto, abbiamo ipotizzato che Bcl-2 espressione può riflettere le caratteristiche del tumore e, quindi, servire come un indicatore affidabile per prevedere recidive. L'obiettivo di questo studio è quello di determinare se Bcl-2 espressione può predire la malattia recidiva dopo resezione curativa in pazienti con cancro gastrico.
Metodi
pazienti
tra il gennaio 1996 e dicembre 2007, 4.426 pazienti con istologicamente confermati adenocarcinoma gastrico primario ha subito gastrectomia presso il Dipartimento di cancro gastrico e soft Tissue Sarcoma di Fudan University di Shanghai Cancer center. Di questi pazienti, sono stati selezionati 449 casi. esemplari di questi pazienti erano macchiati immunoistochimica. I dati sono stati recuperati da rapporti attivi e patologici dei pazienti. i dati di follow-up sono stati ottenuti per telefono, lettera, e il database clinico ambulatoriale. Messa in scena è stata eseguita secondo l'Unione per il controllo internazionale Cancer (UICC) Classificazione stadiazione TNM per il carcinoma dello Stomaco
(Settima edizione, 2010) [8]. Un follow-up di tutti i pazienti è stata effettuata secondo il nostro protocollo standard (ogni tre mesi per almeno 2 anni, ogni 6 mesi per i prossimi 3 anni, e dopo 5 anni ogni 12 mesi per la vita). Le voci di check-up incluso l'esame fisico, l'esame del tumore-marcatore, ecografia, radiografia del torace, tomografia computerizzata, e l'esame endoscopico. La portata del follow-up è stato dal gennaio 1996 al maggio 2010. Il tempo medio di follow-up è stata di 76,5 mesi al momento dell'analisi. il consenso informato scritto è stato ottenuto da tutti i pazienti, e questo studio è stato approvato dal Comitato Etico di Shanghai Cancer Center della Fudan University. Lo studio è stato retrospettiva.
Colorazione immunoistochimica
Bcl-2 è stato rilevato con il metodo immunoistochimica. Gli anticorpi sono stati acquistati da Dako (Amburgo, Germania). La colorazione immunoistochimica è stata eseguita con il metodo sistema polimerico etichettato migliorato. Sezioni in paraffina sono stati deparaffinised con xilene e idratata con etanolo /acqua deionizzata. Le sezioni sono state poi incubate con metanolo /0,3% H 2O 2 e bloccato con colorazione non specifica il blocco reagente. Dopo incubazione per una notte a 4 ° C con anti-Bcl-2-anticorpo (diluito 1: 100), le sezioni sono state trattate secondo metodi immunoperossidasi standard. sezioni di controllo negativi sono stati sottoposti alla stessa procedura, tranne che il primo anticorpo è stato sostituito con PBS. Nessuna colorazione positiva è stata osservata nei controlli. La posizione di colorazione per Bcl-2 era prevalentemente nel citoplasma e cytomembrane
colorazione immunoistochimica:. Segnando
Tutte le sezioni sono state valutate in modo indipendente da due patologi. La percentuale di cellule immunoreattive e intensità di colorazione sono stati valutati. La percentuale di cellule immunoreattive è stata classificata su una scala da 0 a 4: nessuna colorazione stato ottenuto come 0, 1 al 10% di cellule marcate segnato come 1, da 11 a 50% 2, 51 al 80% come 3, e 81 a 100% come 4. Le intensità di colorazione sono stati classificati da 0 a 3: 0 è stato definito come negativo, 1 debole, 2 come moderata, e 3 come forte rispettivamente. I dati grezzi sono stati convertiti in un punteggio immunoistochimica (IHS) moltiplicando i punteggi quantità e intensità. Un punteggio IHS da 9 a 12 è stato considerato come forte immunoreattività (+++), da 5 a 8 come moderato (++), da 1 a 4 come debole (+), e 0 negativo (-). I casi con un punteggio inferiore a 1 sono stati considerati come negativi, e quelli con ≥1 erano considerati positivi analisi [9].
Statistica
dati sono stati presentati come media ± SD o la mediana per i parametri numerici. caratteristiche dei pazienti e le caratteristiche cliniche sono stati analizzati utilizzando il Student a due code t
-test o test del chi-quadrato di Pearson a seconda dei casi. I fattori che sono stati ritenuti di potenziale importanza in analisi univariata sono stati inclusi nell'analisi multivariata. La regressione logistica è stata utilizzata per stimare fattori correlati per la ricorrenza. Il livello di significatività è stato accettato P
< 0.05. . Le analisi statistiche e grafici sono stati eseguiti utilizzando il pacchetto statistico SPSS 13.0 (SPSS, Inc., Chicago, IL, USA): Risultati
caratteristiche clinico-patologiche
Lo studio ha incluso 307 142 pazienti di sesso femminile (2,2 maschi e: 1 ) con un'età media di 57 anni. Ci sono stati 49 (10,9%) i primi tumori gastrici e 400 (89,1%) ha avanzato tumori gastrici. Secondo il tipo istologico, tumori ben differenziati sono stati osservati in 7 (1,5%) pazienti, moderatamente differenziato in 149 (33,2%) pazienti, e poorlydifferentiated tumori nei rimanenti 293 (65,3%) pazienti. Secondo il tipo Borrmann, 49 (10,9%) erano di tipo 0, 32 (7,1%) di tipo I, 14 (3,1%) di tipo II, 333 (74,2%) di tipo III, e il 21 (4,7%) di tipo IV. Di questi pazienti, 147 (32,7%) hanno avuto tumori localizzati nel terzo superiore dello stomaco, 65 (14,5%) avevano tumori del terzo medio, 212 (47,2%) avevano tumori nel terzo inferiore, e 25 (5,6%) avevano tumori che occupano i due terzi o più dello stomaco. Metastasi linfonodali è stata osservata in 326 pazienti, e il tasso di metastasi era 72,6%. La distribuzione dei stadio patologico è stato il seguente: 35 (7.8%) pazienti appartenevano a stadio IA, 34 (7,6%) IB, 50 (11,1%) IIA, 75 (16,7%) IIB, 82 (18,3%) IIIA, 80 ( 17,8%) IIIB, e 93 (20,7%) IIIC.
espressione di Bcl-2
Bcl-2 è risultato positivo nel 21,2% di tutti i tessuti di cancro gastrico. Bcl-2 colorazione è stata osservata nel citoplasma e cytomembrane delle cellule di carcinoma (Figura 1). Bcl-2 è stato associato con stadio patologico. Non c'era alcuna correlazione tra gli altri parametri patologici, come l'età, il sesso, il tipo istologico, tipo Borrmann, localizzazione del tumore, o le dimensioni del tumore Bcl-2 e. Figura 1 espressione positiva di Bcl-2 immunoistochimica nei tessuti cancro gastrico. Un ingrandimento originale × 100, B ingrandimento originale × 400.
Tempo alla recidiva e la reiterazione modello
ricorrenza si è verificato in 151 (33,6%) pazienti durante il periodo di follow-up. Il tempo mediano alla recidiva era 17,0 mesi (range da 2,0 a 91,0 mesi), e il tempo medio è stato di 21.1 mesi. Tra i pazienti con recidiva, 113 (74,8%) ha avuto una recidiva entro 2 anni. La frequenza e tasso di recidiva sono dimostrati nella Figura 2. Figura 2 Frequenza di recidiva dopo l'intervento curativo per anno. La rosa della 151 pazienti con recidiva, 58 (38,4%) sono stati diagnosticati con recidiva peritoneale, che era la più diffusa, 49 (32,5%) pazienti avevano metastasi ematogene, che era il secondo modello più comune di recidiva, e il fegato è stato il più frequentemente coinvolti organo; è stato implicato nel 57,1% di tutti i pazienti ricorrenti. Altre ricorrenze sono stati loco-regionale (n = 34, 22,5%), lontani metastasi linfonodali (n = 8, 5,3%), o in più siti (n = 2, 1,3%) (Figura 3). Figura 3 Modello di reiterazione del dopo gastrectomia curativo. Fattori
ricorrenza legati
analisi univariata ha mostrato che tipo Borrmann, profondità di invasione, lo stato dei linfonodi, e l'espressione di Bcl-2 sono stati associati con recidiva generale, mentre l'età, il sesso, il tipo istologico, localizzazione del tumore, e tumore dimensioni non erano (Tabella 1). La regressione logistica è stato impiegato per identificare i fattori di rischio indipendenti per la recidiva generale. E 'stato dimostrato che la profondità di invasione, metastasi linfonodali, e espressione negativa di Bcl-2 sono stati fattori predittivi indipendenti per la ricorrenza complessiva (Tabella 2) .table 1 L'analisi univariata dei fattori di rischio di recidiva nel carcinoma gastrico
No recidiva
ricorrenza
P-value
(n = 298)
(n = 151)
Età (anni), media ± SD
57,8 ± 11,9
55,8 ± 12,9
0,095
genere, maschio /femmina
203/95
104/47
0,871
Le dimensioni del tumore (cm ), media ± SD
4.8 ± 2.5
5.3 ± 2.7
0,054
localizzazione del tumore, in alto /medio /basso /due o più
91/38/153/16
56 /27/59/9
0,094
tipo Borrmann, 0 /I /II /III /IV
45/22/9/211/11
4/10/5/122/10
0,002
Istologia, ben /moderata /
scarsamente differenziato 5/101/192
2/48/101
0,899
profondità di invasione, T1 + T2 /T3 + T4
94/204
16/135
0.000
stato dei linfonodi, negativo /positivo
108/190
15/136
0.000
Bcl-2, negativo /positivo
226/72
128/23
0.029
Tabella 2 multivariata analysisof fattori di rischio per recidiva nel carcinoma gastrico
variabile
p-value
Odds rapporto
95% CI
Età
0,116
0.710
0.463, 1.088
genere
0,775
1.069
0,677, 1.687
Borrmann tipo
0,334 0,872

0.660, 1.152
profondità di invasione
0,017 0,438

0,222, 0,861
linfa stato del nodo
0.000
3.753
2.040, 6,905
Bcl-2
0,047 0,577

0,336, 0,992
L'analisi univariata ha mostrato che tipo Borrmann, profondità di invasione, lo stato dei linfonodi, istologia, genere, e l'espressione di Bcl-2 sono stati associati con recidiva peritoneale. La regressione logistica ha mostrato che la profondità di invasione, lo stato dei linfonodi, l'istologia, e Bcl-2 erano fattori predittivi indipendenti per la recidiva peritoneale. localizzazione del tumore e il tipo Borrmann hanno riguardato metastasi ematogene, e la posizione del tumore è stato l'unico fattore predittivo indipendente. Non c'era alcuna correlazione tra i parametri clinico-patologici e recidive loco-regionale.
Prognosi dei pazienti ricorrenti
Il tasso complessivo di sopravvivenza a 5 anni è stata del 52% per tutti i pazienti. tasso di sopravvivenza a cinque anni è stato del 58,9% e del 45,5% in bcl-2 pazienti negativi Bcl-2 positivi e rispettivamente. In 2 pazienti BCL-positivi, stadio patologico e la posizione del tumore significativamente influenzato la prognosi, e stadio patologico è stato un fattore prognostico indipendente. In 2 pazienti BCL-negativi, analisi univariata ha mostrato che tipo Borrmann, profondità di invasione, metastasi linfonodali, dimensioni del tumore, localizzazione del tumore e lo stadio patologico influenzato in modo significativo la prognosi. L'analisi multivariata ha mostrato che metastasi linfonodali, localizzazione del tumore, e stadio patologico sono stati fattori prognostici indipendenti.
Il tempo mediano di sopravvivenza dei pazienti con recidiva è stato 22,7 mesi. Il tempo mediano di sopravvivenza dopo la recidiva era 6.7 mesi. Secondo i diversi modelli di ricorrenza, il tempo di sopravvivenza mediana dopo recidiva peritoneale, metastasi ematogene, recidiva loco-regionale, e distanti metastasi linfonodali erano 5,7 mesi (2,6-12,4), 7,3 mesi (2,4 a 11,7), 7,0 mesi (da 2,5 a 17.1), e 6,1 mesi (3,9 a 7,9), rispettivamente. I pazienti con peritoneale e distante recidiva linfonodale ha avuto un tempo di sopravvivenza più breve; tuttavia questo non era statisticamente significativa.
Discussione
I principali risultati di questo studio sono stati che (1) recidiva peritoneale è stato il criterio di ricorrenza più diffusa dopo l'intervento chirurgico curativo, e (2) la profondità di invasione, metastasi linfonodali e espressione negativa di Bcl-2 erano fattori di rischio indipendenti per la recidiva generale.
cancro gastrico è una delle neoplasie più comuni in tutto il mondo. Anche se la prognosi dei pazienti con cancro gastrico è migliorata a seguito di migliori tecniche diagnostiche e strategie terapeutiche, cancro gastrico è ancora la seconda causa di decessi correlati al cancro [2]. La prognosi infausta di cancro gastrico è dovuto principalmente alla frequenza delle recidive e metastasi. Pertanto, è molto importante chiarire il modello di recidiva e fattori di rischio per la recidiva, che può contribuire allo svolgimento della pratica clinica post-operatoria e follow-up.
Nel nostro studio, 151 (33,6%) pazienti hanno avuto recidive durante il follow periodo up. Il tempo medio alla recidiva era 21.1 mesi; 113 pazienti (74,8%) hanno avuto recidiva entro 2 anni. Questo risultato dimostra che la maggior parte ricorrenza del cancro gastrico si verifica entro 2 anni, ed è coerente con altri studi [10-12]. Yoo et al.
[12] ha segnalato 508 pazienti con recidiva dopo resezione curativa per il cancro gastrico e ha dimostrato che la lunghezza media del tempo alla recidiva era 21,8 mesi. Pertanto, è stato necessario rafforzare il follow-up entro 2 anni dopo la resezione curativa.
E 'stato riportato che i modelli di ricorrenza più comuni sono recidive ematogena e la diffusione peritoneale nel cancro gastrico [3, 12-14]. Nella nostra serie, recidiva peritoneale è stato il modello più comune, pari al 38,4% di tutti i pazienti con recidiva, seguita da metastasi ematogene (32,5%). I nostri risultati sono coerenti con gli studi precedenti [3, 12]. Maehara et al.
Riportato [15] che il modello peritoneale rappresentato il 50% dei casi, la recidiva ematogena per il 40% dei casi, e le recidive loco-regionale per il 20%. Tuttavia, vi sono ancora alcuni contenziosi. Uno studio italiano ha dimostrato che il modello più comune di recidiva è stato loco-regionale, che rappresentano il 45% di tutti i casi ricorrenti [16]. Questa disparità ha indicato che ci sono alcune differenze nei modelli di ricorrenza tra i paesi orientali e occidentali. E 'possibile che la bassa incidenza di recidiva locale in studi orientali è dovuto al largo uso di D2 linfonodi dissezione
. Ricorrenza è frequente nei pazienti affetti da cancro gastrico dopo aver subito gastrectomia radicale. Pertanto, è importante identificare i pazienti ad alto rischio di recidiva. In questo studio, l'analisi univariata ha mostrato che tipo Borrmann, profondità di invasione, e lo stato dei linfonodi sono stati associati con recidiva generale. La regressione logistica ha dimostrato che la profondità di invasione e metastasi linfonodali erano fattori di rischio indipendenti per la recidiva generale. Coerentemente con i nostri risultati, studi precedenti hanno dimostrato che i fattori tradizionali clinico-patologici come l'esposizione sierose, tipo istologico, la profondità di invasione e metastasi linfonodali sono stati i fattori di rischio per la recidiva [17-19]. Tuttavia, i fattori tradizionali clinico-patologici sono a volte inadeguate per la previsione di recidiva. Un certo numero di studi hanno indicato che i biomarcatori, come marcatori tumorali [20, 21], fattore di crescita vascolare endoteliale (VEGF), la famiglia [22, 23], E-caderina [24, 25], e microRNA [26], potrebbero essere utile per prevedere il ripetersi di cancro gastrico. Bcl-2 situato sul cromosoma 18q21 e codifica per una proteina 26-kDa localizzata principalmente nella membrana mitocondriale [27]. Il gene Bcl-2 è stata descritta come un oncogene nel linfoma follicolare. Alcuni studi hanno dimostrato che la sovraespressione di proliferazione cellulare Bcl-2 soppressa ed è stato associato con il comportamento biologico meno aggressivo [28, 29]. Tuttavia, il valore di Bcl-2 nel predire le recidive di cancro gastrico è ancora chiaro. In uno studio precedente, abbiamo scoperto che Bcl-2 è risultato significativamente associato con la prognosi nei pazienti affetti da cancro gastrico [7]. Pertanto, abbiamo ipotizzato che Bcl-2 potrebbe riflettere la natura biologica del tumore, e servirebbe come un indicatore affidabile per prevedere recidive. Secondo i nostri risultati, l'espressione negativa di Bcl-2 è un fattore di rischio indipendente per gastrica recidiva del tumore. L'esatto meccanismo non è ancora chiaro. E 'possibile che bcl-2 colpisce gastrico recidiva di cancro regolando il comportamento biologico delle cellule tumorali. Saegusa et al.
[28] ha riferito che la maggior parte di Bcl-2 + cellule tumorali sono in uno stato non proliferativa, e l'espressione media di Ki-67 indice di marcatura e indice di marcatura apoptotico nelle foci Bcl-2 + sono significativamente più bassi quello in bcl-2 foci. Aizawa et al.
[30] ha mostrato che l'espressione di bcl-2 nel cancro gastrico avanzato è associato ad un indice apoptotico inferiore e una prognosi migliore. Pietenpol et al.
[31] ha riferito che l'eccesso di espressione di Bcl-2 inibisce la crescita di diverse linee cellulari solido-tumorali.
Conclusione
In conclusione, questo studio ha dimostrato che la ricorrenza peritoneale è stato il più criterio di ricorrenza comune dopo gastrectomia curativa. Profondità di invasione, metastasi linfonodali, e espressione negativa di Bcl-2 predire maggiore rischio di recidiva. Questi risultati possono fornire alcune informazioni utili per followup in pazienti affetti da cancro gastrico che hanno subito un intervento chirurgico per la resezione. In particolare, è necessario condurre un piano di follow-up intensivo per pazienti affetti da cancro gastrico con espressione negativa di Bcl-2. Tuttavia, la piccola scala e il disegno retrospettivo sono stati difetti di questo studio. Ulteriori su larga scala, i futuri studi devono essere effettuati per convalidare l'utilità di Bcl-2 nella rilevazione recidiva tumorale nei pazienti con cancro gastrico.
Note
Jianghong Wu, Liu Xiaowen ha contribuito ugualmente a questo lavoro.
Dichiarazioni
Ringraziamenti
ringraziamo Ben Liotta per la modifica della lingua inglese nel nostro manoscritto.
autori fascicoli presentati originali per
di seguito sono riportati i link ai file degli autori originali inviati per le immagini. 'file originale per la figura 1 12957_2013_1895_MOESM2_ESM.tif Autori 12957_2013_1895_MOESM1_ESM.tif autori file originale per la figura 2 12957_2013_1895_MOESM3_ESM.tif Autori file originale per gli interessi figura 3 Competere
Gli autori dichiarano di non avere interessi in gioco.
Autori' contributi
JHW, XWL e YNW ideato e progettato gli esperimenti. JHW e XWL eseguiti gli esperimenti. JHW, XWL e HC analizzato i dati. HC e YNW contribuito reagenti /materiali /strumenti di analisi. JHW e XWL ha scritto il giornale. Tutti gli autori hanno letto e approvato il manoscritto finale.

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