Прогнозирование рецидива опухоли после радикального резекции при раке желудка на основе Bcl-2 expression

Прогнозирование рецидива опухоли после радикального резекции при раке желудка на основе экспрессии Bcl-2
Аннотация
Фон не
Есть в настоящее время нет надежных прогностические факторы для желудка рецидива рака. Целью данного исследования было оценить взаимосвязь между BCL-2 экспрессии и риск рецидива рака желудка.
Методы
С января 1996 по декабрь 2007 года 449 больных раком желудка, перенесшие резекцию целебное были ретроспективно изучены. Уровни экспрессии Bcl-2, были исследованы с помощью иммуногистохимии. Логистической регрессии было проведено с целью выявления независимых факторов риска для общего рецидива рака желудка.
Результаты
151 пациентов (33,6%) испытали рецидивами. Медиана времени до рецидива было 17,0 месяцев, 113 (74,8%) пациентов имели рецидивы в течение 2-х лет. Перитонеального рецидива была наиболее распространенной модели, с последующим гематогенным метастазированием, в котором печень является наиболее распространенным местом. Глубина вторжения, метастазов в лимфатических узлах, а также отрицательным выражением BCL-2 были независимыми факторами риска рецидива в целом. Общая продолжительность жизни рецидивирующих пациентов составила 22,7 мес. Медиана выживаемости после рецидива составил 6,7 месяца.
Вывод изображения Глубина вторжения, метастазов в лимфоузлах и экспрессию Bcl-2 являются независимыми факторами для прогнозирования рецидива рака желудка.
Ключевые слова
Желудочный рецидива рака факторы клинико-патологических Bcl-2 предпосылки
Хотя заболеваемость раком желудка снижается, по существу, в течение нескольких десятилетий, она до сих пор является четвертым наиболее распространенным видом рака и второй наиболее частой причиной смерти от рака [1, 2]. Хотя большинство больных раком желудка на ранней стадии могут долго выживаемость после операции, около 40% больных умирают от рецидива, даже после того, как проходит хирургическое лечение [3]. Наличие или отсутствие рецидива широко считается наиболее важным прогностическим фактором для выживания, так как прогноз для пациентов с рецидивами крайне мрачными. Поэтому очень важно, чтобы точно предсказать риск рецидива на ранней стадии, с тем, чтобы улучшить прогноз у больных с рецидивами. Тем не менее, было показано, что рутинное Followup после операции по поводу рака желудка не помогает в обнаружении рецидивов на ранней стадии [4]. Поэтому крайне важно, чтобы исследовать специфические факторы, которые могут идентифицировать подгруппы пациентов с более агрессивным заболеванием. В последнее время некоторые исследования показали, что патологические факторы, такие как состояние лимфатических узлов, глубина вторжения, и размер опухоли, играют решающую роль в прогнозировании рецидива после резекции желудка [5, 6]. Тем не менее, трудно предсказать рецидив, используя общие факторы клинико. Учитывая, что некоторые биологические маркеры, такие как онкогены, гены опухоль-супрессорных, регуляторы клеточного цикла, а также генов репарации ДНК, которые связаны с опухолью генеза, рост, инвазию и метастазирование опухолей, многие исследователи ищут новые прогнозирующих факторов, среди этих молекулярных маркеров. В предыдущем исследовании, мы оценили прогностическое значение биологических маркеров, таких как р53, Bcl-2, Вах, и с-Мус при раке желудка, и обнаружили, что Bcl-2 была в значительной степени связано с прогнозом у больных раком желудка [7]. Поэтому мы предположили, что экспрессия Bcl-2 может отражать характеристики опухоли, и, таким образом, служить надежным показателем для прогнозирования рецидива. Целью данного исследования является определить, может ли экспрессия Bcl-2 предсказать рецидив заболевания после лечебной резекции у больных раком желудка.
Методы
Пациенты
В период с января 1996 по декабрь 2007, 4426 пациентов с гистологически подтвержденным первичной аденокарциномы желудка подвергся гастрэктомии в отделении рака желудка и саркома мягких тканей в шанхайского университета Фудань онкологического центра. Из этих пациентов, были выбраны 449 случаев. Образцы этих пациентов были окрашены иммуногистохимии. Данные были получены из оперативных и патологических отчетов пациентов. Последующие данные были получены по телефону, письмом и клинической базы данных амбулаторных условиях. Постановка была выполнена в соответствии с Союзом по международному контролю рака (UICC) TNM Staging классификации для рака желудка
(седьмое издание, 2010 г.) [8]. Либо отклик всех пациентов проводилось в соответствии с нашим стандартным протоколом (каждые три месяца в течение по крайней мере 2-х лет, через каждые 6 месяцев в течение следующих 3-х лет, а через 5 лет через каждые 12 месяцев для жизни). Элементы проверочные включены физическое обследование, опухоль-маркерный исследование, УЗИ, рентгенографию грудной клетки, компьютерная томографию и эндоскопическое исследование. Диапазон наблюдения составил с января 1996 по май 2010 года средний срок наблюдения составила 76,5 месяцев на момент анализа. Письменное информированное согласие было получено от всех пациентов, и это исследование было одобрено Комитетом по этике Шанхай онкологического центра университета Фудань мимо. Исследование было ретроспективным.
Иммуногистохимическое окрашивание
была обнаружена Bcl-2 с помощью иммуногистохимического метода. Антитела были приобретены у Dako (Гамбург, Германия). Иммуногистохимическое окрашивание проводили путем улучшенного метода меченых полимерной системы. Парафиновые срезы deparaffinised с ксилолом и увлажненной смесью этанол /деионизированной воды. Затем срезы инкубировали с метанолом /0,3% Н <югу> 2О <суб> 2 и блокировали неспецифическое окрашивание блокирующий реагент. После инкубации в течение ночи при 4 ° C с анти-Bcl-2 антитела (разведенного 1: 100), срезы обрабатывали в соответствии со стандартными методами иммунопероксидазных. Отрицательные контрольные участки были подвергнуты такой же процедуре, за исключением того, что первое антитело было заменено PBS. Нет положительное окрашивание не наблюдалось в контрольной группе. Расположение окрашивания для Bcl-2 был преимущественно в цитоплазме и cytomembrane
иммуногистохимического окрашивания:. Тем самым увеличив счет
Все срезы были независимо друг от друга оценивали двумя патологоанатомов. Процент иммунореактивных клеток и интенсивности окраски оценивали. Процент иммунореактивных клеток оценивали по шкале от 0 до 4: нет окрашивания не был забит как 0, 1 до 10% от клеток окрашиваются по шкале от 1, 11 до 50%, как 2, 51 до 80%, как 3, и 81 к 100%, так как 4. интенсивности окрашивания сортировали от 0 до 3: 0 был определен как отрицательный, 1, как слабый, 2, как умеренное, и 3, как сильные, соответственно. Исходные данные были преобразованы в иммуногистохимического балла (IHS) путем умножения количества и интенсивности баллов. Счет IHS от 9 до 12 считался сильным иммунореактивности (+++), от 5 до 8, как умеренное (++), от 1 до 4, как слабый (+), и 0 в качестве отрицательного (-). Случаи со счетом менее 1 рассматривались как отрицательные, и те, с ≥1 считались положительными [9].
Статистический анализ
Данные были представлены как среднее ± SD или медианы для числовых параметров. Особенности пациентов и клинические характеристики были проанализированы с помощью двух хвостами Стьюдента
-test или Pearson критерий хи-квадрат в зависимости от обстоятельств. Факторы, которые были признаны потенциальной важности на однофакторного анализа были включены в многомерном анализе. Логистическая регрессия была использована для оценки связанных с этим факторов рецидива. Принятый уровень значимости был P
&л; 0.05. . Статистический анализ и графики были выполнены с использованием SPSS 13,0 статистического пакета (SPSS, Inc., Chicago, IL, USA)

Результаты клинико-патологическими характеристики
В исследование были включены 307 мужчин и 142 пациентов женского пола (2.2: 1 ) со средним возрастом 57 лет. Были 49 (10,9%) в начале рака желудка и 400 (89,1%) расширенный рак желудка. В соответствии с гистологическим типом, наблюдали хорошо дифференцированные опухоли у 7 (1,5%) пациентов, умеренно дифференцированные в 149 (33,2%) больных, а также poorlydifferentiated опухоли в остальных 293 (65,3%) пациентов. В зависимости от типа Бормана, 49 (10,9%) были типа 0, 32 (7,1%) I типа 14 (3,1%) типа II, 333 (74,2%) типа III, и 21 (4,7%) типа IV. Из этих пациентов, 147 (32,7%) имели опухоли, расположенные в верхней трети желудка, 65 (14,5%) имели опухоли в средней трети, 212 (47,2%) имели опухоли в нижней трети, и 25 (5,6%) имели опухоли, занимающие две трети или более желудка. узел метастазирование Лимфатические наблюдалась у 326 больных, а частота метастазирования составила 72,6%. Распределение патологической стадии следующим образом: 35 (7,8%) пациентов принадлежали к стадии IA, 34 (7,6%) IB, 50 (11,1%) IIA, 75 (16,7%), IIB, 82 (18,3%) IIIa, 80 ( 17,8%) IIIB, и 93 (20,7%). IIIc
Экспрессия BCL-2
экспрессии Bcl-2 был положительным в 21,2% всех раковых тканей желудка. Bcl-2, окрашивание наблюдалось в цитоплазме и cytomembrane карциномы клеток (рисунок 1). выражение Bcl-2, был связан с патологической стадии. Там не было никакой корреляции между BCL-2 и других патологических параметров, таких как возраст, пол, гистологический тип, тип Бормана, расположение опухоли или размера опухоли. Рисунок 1 Положительное выражение Bcl-2 иммуногистохимии в желудочной ткани рака. Исходное увеличение × 100, B исходное увеличение × 400.
Время рецидива и повторения модели
Рекурренции произошло в 151 (33,6%) пациентов в течение периода наблюдения. Медиана времени до рецидива был 17,0 месяцев (диапазон от 2,0 до 91,0 месяцев), а среднее время составил 21,1 месяцев. Среди пациентов с рецидивом, 113 (74,8%) имели рецидив в течение 2-х лет. Частота и частота рецидивов, показаны на рисунке 2. Рисунок 2 Частота рецидивов после лечебной работы от года.
Из 151 пациентов с рецидивом, 58 (38,4%) были диагностированы с перитонеального рецидива, который был наиболее распространенным, 49 (32,5%) больных гематогенным метастазами, который был вторым наиболее распространенным шаблон повторений, и печень была наиболее часто участвует орган; он был вовлечен в 57,1% всех рецидивных больных. Другие Рецидивы заменяющими-региональный (п = 34, 22,5%), удаленных метастазов в лимфатических узлах (п = 8, 5,3%), или на нескольких площадках (п = 2, 1,3%) (рисунок 3). Рисунок 3 Структура рецидива после лечебной гастрэктомии.
Рецидив факторы, связанные с анализом
однофакторном показали, что тип Бормана, глубина вторжения, состояние лимфатических узлов, а также экспрессия Bcl-2 были связаны с общим рецидивом, в то время как возраст, пол, гистологического типа, локализации опухоли и опухоли размер не были (таблица 1). Логистическая регрессия была использована для определения независимых факторов риска для общего рецидива. Было показано, что глубина вторжения, метастазов в лимфатических узлах, а также отрицательным выражением BCL-2 были независимыми прогностическими факторами для общего рецидива (таблица 2) .table 1 Одномерный анализ факторов риска рецидива рака желудка

Нет рецидивы

рецидив

P-значение

(n = 298) завод
(n = 151)

Возраст (лет), среднее значение ± SD
57,8 ± 11,9 ± 55,8
12,9
0,095
Пол, мужской /женский
203/95 104/47

0,871
Опухоль размер (см ), среднее значение ± SD
4,8 ± 2,5 5,3 ±
2,7
0,054
опухолевого местоположение, верхний /средний /нижний /два или более
91/38/153/16
56 /27/59/9
0,094
типа Бормана, 0 /I /II /III /IV
45/22/9/211/11
4/10/5/122/10
0,002
гистологии, а /умеренная /слабо дифференцированы
5/101/192
2/48/101
0.899
глубина инвазии, T1 + T2 /T3 + T4 <бр> 94/204
16/135
0,000
состояние узла лимфы, негатив /позитив
108/190
15/136
0,000
Bcl-2, негатив /позитив
226/72 128/23

0.029
Таблица 2 Многофакторный analysisof факторы риска рецидива рака желудка
Переменная

P-значение

Odds соотношение

95% ДИ

Возраст
0,116
0,710
0,463, 1,088
Пол
0,775
1,069
0,677, 1.687
тип Боррманна
0,334
0,872
0,660, 1,152
Глубина вторжения
0,017
0,438
0,222, 0,861
состояния лимфатических узлов
0,000 <бр> 3,753
2,040, 6,905
Bcl-2
0,047
0,577
0,336, 0,992
анализ однофакторного показал, что тип Бормана, глубина вторжения, состояние лимфатических узлов, гистологии, пола, и экспрессия Bcl-2 были связаны с перитонеального рецидива. Логистической регрессии показал, что глубина вторжения, состояние лимфатических узлов, гистологии и Bcl-2 являются независимыми прогностическими факторами для перитонеального рецидива. Опухоль расположение и тип Бормана были связаны с гематогенных метастазов, и расположение опухоли единственным независимым прогностическим фактором. Там не было никакой корреляции между клинико-патологическими параметрами и заменяющих-регионального рецидива. Прогноз
рецидивных больных
Общий показатель 5-летней выживаемости составила 52% для всех пациентов. Выживаемость Пятилетняя 58,9% и 45,5% в BCL-2 положительных и Bcl-2 отрицательных больных соответственно. В BCL 2-положительных пациентов, патологическая стадия и локализация опухоли существенно влияет прогноз, и патологическая стадия была независимым прогностическим фактором. В BCL 2-отрицательных пациентов, однофакторный анализ показал, что типа Бормана, глубина вторжения, метастазов в лимфоузлах, размер опухоли, локализации опухоли и патологической стадии существенно влияет прогноз. Многофакторный анализ показал, что метастазов в лимфатических узлах, местоположение опухоли, и патологические стадии являются независимыми прогностическими факторами.
Медиана выживаемости пациентов с рецидивом был 22,7 мес. Медиана выживаемости после рецидива составил 6,7 месяца. В соответствии с различными моделями повторяемости, медиана выживаемости после перитонеального рецидива, гематогенных метастазов, заменяющих-регионарных рецидивов и отдаленных метастазов в лимфоузлах было 5,7 месяцев (от 2,6 до 12,4), 7,3 месяцев (2,4 до 11,7), 7,0 месяцев (от 2,5 до 17.1), и 6,1 мес (3,9 до 7,9), соответственно. Пациенты с рецидивом перитонеального и отдаленного лимфатических узлов имели более короткое время выживания; однако это не было статистически значимым.
Обсуждение
основных выводов этого исследования было то, что (1) перитонеального рецидива была наиболее распространенной модели рецидива после радикальной операции, и (2) глубина вторжения, метастазами в лимфатических узлах и отрицательное выражение Bcl-2, были независимыми факторами риска рецидива в целом.
рак желудка является одним из наиболее распространенных злокачественных заболеваний во всем мире. Хотя прогноз пациентов с раком желудка улучшилась в результате лучших методов диагностики и терапевтических стратегий, рака желудка по-прежнему является второй ведущей причиной смертности от онкологических заболеваний [2]. Мрачный прогноз развития рака желудка связано главным образом с частотой рецидивов и метастазов. Поэтому, очень важно уточнить картину рецидива и факторов риска рецидива, который может способствовать проведению послеоперационной клинической практики и последующем наблюдении.
В нашем исследовании, 151 (33,6%) пациентов имели рецидив в течение последующих -до период. Среднее время до рецидива составил 21,1 месяцев; 113 пациентов (74,8%) имели рецидив в течение 2-х лет. Этот результат показывает, что большинство желудка рецидива рака происходит в течение 2-х лет, и согласуется с результатами других исследований [10-12].
Yoo и др. [12] сообщили о 508 больных с рецидивом после лечебной резекции при раке желудка и показал, что средняя продолжительность времени до рецидива составила 21,8 месяцев. Поэтому необходимо было укрепить Followup в течение 2-х лет после лечебной резекции.
Сообщалось, что наиболее распространенные модели рецидивов являются гематогенный рецидивов и перитонеальный распространение рака желудка [3, 12-14]. В нашей серии, перитонеальный рецидив был наиболее распространенный вариант, что составляет 38,4% от всех пациентов с рецидивом, а затем гематогенных метастазов (32,5%). Наши результаты согласуются с предыдущими исследованиями [3, 12]. Маэхара и др.
Сообщалось [15], что перитонеальный модели приходилось 50% случаев, гематогенный рецидивов на 40% случаев, и локо-регионального рецидива на 20%. Тем не менее, все еще существуют некоторые споры. Итальянское исследование показало, что наиболее распространенный вариант рецидива был локо-региональный, что составляет 45% всех рецидивных случаев [16]. Это несоответствие показало, что существуют некоторые различия в рекуррентных моделей между восточными и западными странами. Вполне возможно, что низкая частота местного рецидива в восточных исследований связано с широким использованием D2 лимфатических узлов рассечение.
Рецидив часто в больных раком желудка после радикальной резекции желудка претерпевает. Поэтому, важно, чтобы выявить пациентов с высоким риском рецидива. В этом исследовании, однофакторный анализ показал, что тип Бормана, глубина инвазии, и состояние лимфатических узлов были связаны с общим рецидивом. Логистической регрессии показал, что глубина инвазии и метастазов в лимфатических узлах являются независимыми факторами риска развития рецидива в целом. В соответствии с нашими данными, предыдущие исследования показали, что традиционные клинико-патологические факторы, такие как серозный воздействия, гистологического типа, глубина вторжения и метастазов в лимфатических узлах являются факторами риска развития рецидива [17-19]. Тем не менее, традиционные факторы клинико-патологические иногда недостаточно для прогнозирования рецидива. Ряд исследований показал, что биомаркеры, такие как опухолевые маркеры [20, 21], фактор роста эндотелия сосудов семьи (VEGF) [22, 23], Е-кадгерин [24, 25], и микроРНК [26], может быть полезны для прогнозирования рецидива рака желудка. Bcl-2, расположенный на хромосоме 18q21, и кодирует белок 26-кДа локализуется преимущественно в митохондриальной мембране [27]. Ген Bcl-2 был впервые описан как онкоген в фолликулярной лимфомы. Некоторые исследования показали, что избыточная экспрессия Bcl-2 подавляется клеточной пролиферации и было связано с менее агрессивным биологическим поведением [28, 29]. Тем не менее, значение Bcl-2 в прогнозировании желудка рецидивов рака до сих пор неясно. В предыдущем исследовании, мы обнаружили, что Bcl-2 была в значительной степени связано с прогнозом у больных раком желудка [7]. Поэтому мы предположили, что Bcl-2 могут отражать биологическую природу опухоли, и будет служить надежным показателем для прогнозирования рецидива. Согласно нашим результатам, отрицательное выражение Bcl-2 является независимым фактором риска развития рака желудка рецидива. Точный механизм до сих пор неясно. Вполне возможно, что Bcl-2 влияет на желудочную рецидива рака, регулируя биологическое поведение опухолевых клеток. Saegusa и др.
[28] сообщили о том, что большинство из Bcl-2 + раковых клеток находятся в непролиферативной состоянии, а среднее выражение Ki-67 индекс мечения и апоптотической индекс мечения в Bcl-2 + фокусах значительно ниже чем в Bcl-2 фокусах. Айдзава и др.
[30] показали, что экспрессия Bcl-2 в поздних стадиях рака желудка связано с более низким индексом апоптотических и лучшим прогнозом. Pietenpol и др.
[31] сообщили, что избыточная экспрессия Bcl-2 ингибирует рост нескольких линий твердых опухолей клеток.
Заключение
В заключение, данное исследование показало, что перитонеального рецидива была наиболее общая картина рецидивов после радикального гастрэктомии. Глубина вторжения, метастазов в лимфатических узлах, а также отрицательным выражением BCL-2 предсказывают более высокий риск рецидива. Эти данные могут предоставить некоторую полезную информацию для последующем наблюдении в больных раком желудка, перенесших операцию по поводу резекции. В частности, необходимо провести интенсивный план последующих действий для больных раком желудка с отрицательным выражением Bcl-2. Тем не менее, небольшой масштаб и ретроспективный дизайн были недостатки текущего исследования. Далее крупномасштабные, перспективные исследования должны быть выполнены, чтобы подтвердить полезность BCL-2 при выявлении рецидива опухоли у больных раком желудка.
Notes
Jianghong Ву, Xiaowen Лю также внесли вклад в эту работу.
Объявления
Подтверждения
Мы благодарим Бен Лиотта для редактирования английского языка в нашей рукописи.
авторов оригинальные представленные файлы для изображений изображения Ниже приведены ссылки на авторов оригинала, представленных файлов для изображений. 'Исходный файл для Рисунок 1 12957_2013_1895_MOESM2_ESM.tif Авторского 12957_2013_1895_MOESM1_ESM.tif авторов исходного файла для Рисунок 2 12957_2013_1895_MOESM3_ESM.tif Авторского исходного файла для фигурного 3 конкурирующими интересами
Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов.
Авторы " вклад
JHW, XWL и Уп сконструированная и разработанная эксперименты. JHW и XWL проводили эксперименты. JHW, XWL и HC проанализировали данные. HC и Уп вклад реагенты /материалы /инструменты анализа. JHW и XWL написал бумагу. Все авторы читали и одобрили окончательный вариант рукописи.

• Комбинированный эпителиально-мезенхимальных перехода с помощью стволовых раковых клеток, как маркер в качес…
• Сравнение между лучше и слабо дифференцированной местно-распространенным раком желудка в предоперационной …