Prédiction de la récidive de la tumeur après résection curative dans le carcinome gastrique sur la base de bcl-2 expression

Prédiction de récidive tumorale après résection curative dans le carcinome gastrique sur la base de bcl-2 expression
Résumé de l'arrière-plan
Il n'y a pas de facteurs prédictifs fiables pour une récidive de cancer gastrique. Le but de cette étude était d'évaluer la relation entre bcl-2 expression et risque de récidive du cancer de l'estomac.
Méthodes
De Janvier 1996 à Décembre 2007, 449 patients atteints de cancer gastrique qui ont subi une résection curative ont été étudiés rétrospectivement. Les niveaux d'expression de bcl-2 ont été étudiés par immunohistochimie. La régression logistique a été réalisée pour identifier les facteurs de risque indépendants de récidive globale du cancer gastrique
. Résultats
151 patients (33,6%) des récurrences expérimentés. Le délai médian de récidive était de 17,0 mois, 113 (74,8%) patients avaient récurrences dans les 2 ans. récidive péritonéale était le modèle le plus répandu, suivi par des métastases hématogène dans laquelle le foie a été le site le plus commun. Profondeur de l'invasion, les métastases des ganglions lymphatiques, et l'expression négative de bcl-2 étaient des facteurs de risque indépendants de récidive générale. Le temps de survie globale des patients récurrents était de 22,7 mois. La durée médiane de survie après récidive était de 6,7 mois.
Conclusion
La profondeur de l'invasion, les métastases des ganglions lymphatiques et l'expression de bcl-2 sont des facteurs indépendants pour prédire la récidive du cancer gastrique.
Mots-clés
récidive du cancer gastrique facteurs clinicopathologiques Contexte bcl-2
Bien que l'incidence du cancer gastrique a diminué sensiblement depuis plusieurs décennies, il est toujours le quatrième cancer le plus fréquent et la deuxième cause la plus fréquente de décès par cancer [1, 2]. Bien que la majorité des patients atteints de cancer gastrique à un stade précoce peut avoir des temps de survie à long après la chirurgie, environ 40% des patients meurent de récidive, même après avoir subi une chirurgie curative [3]. La présence ou l'absence de récidive est largement considéré comme le facteur prédictif le plus important pour la survie, que le pronostic des patients avec récidive est extrêmement sombre. Par conséquent, il est très important de prédire avec précision le risque de récidive à un stade précoce afin d'améliorer le pronostic des patients atteints de récidive. Cependant, il a été démontré que le suivi de routine après une intervention chirurgicale pour un cancer gastrique ne sont pas utiles dans la détection de la récurrence à un stade précoce [4]. Par conséquent, il est essentiel d'étudier les facteurs spécifiques qui permettent d'identifier des sous-groupes de patients souffrant d'une maladie plus agressive. Récemment, certaines études ont montré que les facteurs pathologiques tels que l'état des ganglions lymphatiques, de la profondeur de l'invasion, et la taille de la tumeur, jouent un rôle crucial dans la prédiction de la récidive après gastrectomie [5, 6]. Cependant, il est difficile de prédire à l'aide des facteurs récurrence clinicopathological communs. Étant donné que certains marqueurs biologiques, tels que les oncogènes, les gènes suppresseurs de tumeur, les régulateurs du cycle cellulaire, et les gènes de réparation d'ADN, sont liés à la genèse de la tumeur, la croissance, l'invasion et les métastases, de nombreux chercheurs sont à la recherche de nouveaux facteurs prédictifs entre ces marqueurs moléculaires. Dans une précédente étude, nous avons évalué la valeur pronostique de marqueurs biologiques tels que p53, bcl-2, bax, et c-myc dans le cancer gastrique, et a constaté que bcl-2 était significativement associé à un pronostic chez les patients gastriques de cancer [7]. Par conséquent, nous avons supposé que bcl-2 expression peut refléter les caractéristiques de la tumeur, et donc, servir d'indicateur fiable pour prédire la récidive. L'objectif de l'étude est de déterminer si bcl-2 expression peut prédire la récurrence de la maladie après résection curative chez les patients atteints de cancer gastrique.
Méthodes
Patients
Entre Janvier 1996 et Décembre 2007 4.426 patients avec histologiquement confirmés adénocarcinome gastrique primaire a subi une gastrectomie au Département de cancer gastrique et des tissus mous sarcome à l'Université Fudan de Shanghai Cancer Center. Parmi ces patients, 449 cas ont été sélectionnés. Les spécimens de ces patients ont été colorées par immunohistochimie. Les données ont été extraites de rapports opérationnels et pathologiques des patients. Les données de suivi ont été obtenus par téléphone, courrier, et la base de données clinique ambulatoire. Staging a été réalisée selon l'Union internationale contre le cancer (UICC) Classification TNM Staging pour Carcinome de l'estomac
(septième édition, 2010) [8]. Un suivi de tous les patients a été réalisée selon notre protocole standard (tous les trois mois pendant au moins 2 ans, tous les 6 mois pour les 3 prochaines années, et après 5 ans tous les 12 mois pour la vie). Les éléments de check-up inclus un examen physique, examen marqueur tumoral, l'échographie, la radiographie thoracique, tomodensitométrie, et l'examen endoscopique. La portée du suivi était de Janvier 1996 à mai 2010. La durée médiane de suivi était de 76,5 mois au moment de l'analyse. Le consentement éclairé écrit a été obtenu à partir de tous les patients, et cette étude a été approuvée par le Comité d'éthique du Cancer Center de l'Université Fudan de Shanghai. L'étude était rétrospective.
Coloration immunohistochimique
Bcl-2 a été détectée par la méthode immunohistochimique. Les anticorps ont été achetés auprès de Dako (Hambourg, Allemagne). La coloration immunohistochimique a été réalisée par la méthode marquée du système polymère renforcé. Les sections de paraffine ont été déparaffinées avec du xylène et hydratés avec de l'éthanol /eau déminéralisée. Les coupes ont été ensuite mises en incubation avec du méthanol /0,3% de H 2 O 2 et bloquées avec une coloration non spécifique, réactif de blocage. Après incubation pendant une nuit à 4 ° C avec un anti-Bcl-2 anticorps (dilution 1: 100), les sections ont été traitées selon les méthodes classiques d'immunoperoxydase. les sections de contrôle négatif ont été soumis à la même procédure, sauf que le premier anticorps a été remplacé par du PBS. Aucune coloration positive a été observée chez les témoins. L'emplacement de coloration pour bcl-2 était principalement dans le cytoplasme et cytomembrane
coloration immunohistochimique:. Marquant
Toutes les tranches ont été évalués indépendamment par deux pathologistes. Le pourcentage de cellules immunoréactives et l'intensité de la coloration a été évaluée. Le pourcentage de cellules immunoréactives a été notée sur une échelle de 0 à 4: aucune coloration n'a été notée comme 0, 1 à 10% des cellules colorées marqué comme 1, 11 à 50% 2, 51 à 80% 3 et 81 100% par 4. Les intensités de coloration ont été notées de 0 à 3: 0 a été défini comme négatif, 1 faible, 2 modéré et 3 aussi forte, respectivement. Les données brutes ont été converties en un score immunohistochimique (IHS) en multipliant la quantité et l'intensité des scores. Un score IHS de 9 à 12 a été considéré comme une forte immunoréactivité (+++), 5 à 8 comme modéré (++), 1 à 4 comme faible (+), et 0 comme négatif (-). Cases avec un score de moins de 1 ont été considérés comme négatifs, et ceux qui étaient considérés comme ≥1 [9].
Analyse statistique positif
données ont été présentées comme la moyenne ± écart-type ou de la médiane pour les paramètres numériques. Les caractéristiques des patients et les caractéristiques cliniques ont été analysées en utilisant le Student bilatéral t
-test ou Pearson test du chi-carré, selon le cas. Les facteurs qui ont été considérés comme d'une importance potentielle sur l'analyse univariée ont été inclus dans l'analyse multivariée. La régression logistique a été utilisée pour estimer les facteurs connexes de récidive. Le niveau accepté d'importance était P
< 0,05. . Les résultats des analyses statistiques et graphiques ont été effectuées à l'aide du logiciel SPSS 13.0 logiciel statistique (SPSS, Inc., Chicago, IL, USA)
caractéristiques clinicopathologiques
L'étude a porté sur 307 142 chez les femmes (2,2 mâle et: 1 ) avec un âge moyen de 57 ans. Il y avait 49 (10,9%) des cancers gastriques précoces et 400 (89,1%) avancé cancers gastriques. Selon le type histologique, les tumeurs bien différenciées ont été observées dans 7 (1,5%) patients, modérément différencié dans 149 (33,2%) patients, et poorlydifferentiated tumeurs dans les 293 (65,3%) patients restants. Selon le type Borrmann, 49 (10,9%) étaient de type 0, 32 (7,1%) de type I, 14 (3,1%) de type II, 333 (74,2%) de type III, et 21 (4,7%) de type IV. Parmi ces patients, 147 (32,7%) avaient des tumeurs situées dans le tiers supérieur de l'estomac, 65 (14,5%) avaient des tumeurs dans le tiers médian, 212 (47,2%) avaient des tumeurs dans le tiers inférieur, et 25 (5,6%) avaient des tumeurs qui occupent les deux tiers ou plus de l'estomac. Métastases ganglionnaires a été observée chez 326 patients, et le taux de métastases était de 72,6%. La distribution de stade pathologique était la suivante: 35 (7,8%) patients appartenaient au stade IA, 34 (7,6%) IB, 50 (11,1%) IIA, 75 (16,7%) IIB, 82 (18,3%) IIIA, 80 ( 17,8%) HIB, et 93 (20,7%), l'expression de IIIC. bcl-2
expression de Bcl-2 était positive dans 21,2% de tous les tissus du cancer de l'estomac. Bcl-2 coloration a été observée dans le cytoplasme et cytomembranaire des cellules de carcinome (figure 1). Bcl-2 expression était associée à stade pathologique. Il n'y avait pas de corrélation entre bcl-2 et d'autres paramètres pathologiques, tels que l'âge, le sexe, le type histologique, le type Borrmann, localisation de la tumeur, ou la taille de la tumeur. La figure 1 expression positive de bcl-2 immunohistochimie dans les tissus du cancer gastrique. Un grossissement × 100, B grossissement × 400.
Temps de récurrence et de périodicité
Récurrence a eu lieu dans 151 (33,6%) des patients au cours de la période de suivi. Le délai médian de récidive était de 17,0 mois (plage de 2,0 à 91,0 mois), et le temps moyen était de 21,1 mois. Parmi les patients avec récidive, 113 (74,8%) avaient récidive dans les 2 ans. La fréquence et le taux de récidive sont démontrés dans la figure 2. Figure 2 Fréquence de récidive après opération curative par année.
Sur les 151 patients avec récidive, 58 (38,4%) ont été diagnostiqués avec une récidive péritonéale, ce qui était, 49 (32,5%) des patients les plus répandues avaient des métastases hématogènes, ce qui était le deuxième motif de récurrence la plus courante, et le foie était la le plus souvent impliqué organe; il a été impliqué dans 57,1% des patients récurrents. D'autres récurrences ont été loco-régionale (n = 34, 22,5%), éloignés des métastases des ganglions lymphatiques (n = 8, 5,3%), ou à des sites multiples (n = 2, 1,3%) (figure 3). Figure 3 Motif de la récurrence des après gastrectomie curative. facteurs
Récurrence liés
analyse univariée a montré que le type Borrmann, profondeur de l'invasion, de l'état des ganglions lymphatiques, et l'expression de bcl-2 ont été associés à la récidive générale, alors que l'âge, le sexe, le type histologique, la localisation de la tumeur et la tumeur la taille était pas (tableau 1). La régression logistique a été utilisée pour identifier les facteurs de risque indépendants de récidive générale. Il a été démontré que la profondeur de l'invasion, les métastases des ganglions lymphatiques, et l'expression négative de bcl-2 étaient des facteurs prédictifs indépendants de récidive générale (tableau 2) .Table 1 analyse univariée des facteurs de risque de récidive dans le cancer gastrique
Non récurrence
récurrence
P-valeur
(n = 298)
(n = 151)
âge (années), moyenne ± SD
57,8 ± 11,9 55,8 ± 12,9

0,095
Sexe, mâle /femelle
203/95
104/47
0,871
taille de la tumeur (cm ), moyenne ± SD
4,8 ± 2,5 5,3 ± 2,7

0,054
emplacement de la tumeur, le haut /milieu /bas /deux ou plusieurs
91/38/153/16
56 /27/59/9
0,094
Type Borrmann, 0 /I /II /III /IV
45/22/9/211/11
4/10/5/122/10
0,002
histologie, bien /modéré /
peu différencié 5/101/192
2/48/101
0,899
Profondeur d'invasion, T1 + T2 /T3 + T4
94/204
16/135
0.000
lymphe état de noeud, négatif /positif
108/190
15/136
0.000
Bcl-2, positif /négatif
226/72
128/23
0.029
Tableau 2 facteurs de risque analysisof multivariées de récidive dans le cancer gastrique
P-valeur variable
Odds rapport
IC à 95%
Age
0,116
0,710
0.463, 1.088
Sexe
0,775
1.069
0,677, 1,687
Type Borrmann
0,334
0,872
0.660, 1.152
Profondeur d'invasion
0,017
0,438
0,222, 0,861
lymphe état du noeud
0.000
3.753
2.040, 6.905
Bcl-2
0,047
0,577
0,336, 0,992
analyse univariée a montré que le type Borrmann, profondeur de l'invasion, de l'état des ganglions lymphatiques, l'histologie, le sexe, et l'expression de bcl-2 ont été associées à la récurrence péritonéale. La régression logistique a montré que la profondeur de l'invasion, le statut ganglionnaire, histologie et bcl-2 étaient des facteurs prédictifs indépendants de récidive péritonéale. emplacement de la tumeur et le type Borrmann étaient liés à des métastases hématogènes, et l'emplacement de la tumeur était le seul facteur prédictif indépendant. Il n'y avait pas de corrélation entre les paramètres clinicopathologiques et loco-régionale récidive. Réelles Prévisions des patients récurrents
Le taux global de survie à 5 ans était de 52% pour tous les patients. taux de survie à cinq ans était de 58,9% et 45,5% en bcl-2 patients négatifs bcl-2 positifs et respectivement. Dans bcl-2 patients positifs, le stade pathologique et la localisation de la tumeur affectés de manière significative le pronostic et le stade pathologique était un facteur pronostique indépendant. Dans bcl-2 patients négatifs, l'analyse univariée a montré que le type Borrmann, profondeur de l'invasion, les métastases des ganglions lymphatiques, la taille de la tumeur, la localisation de la tumeur et le stade pathologique affecté significativement le pronostic. L'analyse multivariée a montré que les métastases des ganglions lymphatiques, l'emplacement de la tumeur et le stade pathologique étaient des facteurs pronostiques indépendants.
La durée médiane de survie des patients atteints de récidive était de 22,7 mois. La durée médiane de survie après récidive était de 6,7 mois. Selon les différents modèles de récurrence, la durée médiane de survie après récidive péritonéale, des métastases hématogènes, loco-régionale récidive et éloignés des métastases ganglionnaires étaient de 5,7 mois (2,6 à 12,4), 7,3 mois (2,4 à 11,7), 7,0 mois (2,5 à 17.1) et 6,1 mois (3,9 à 7,9), respectivement. Les patients atteints du péritoine et distante récurrence des ganglions lymphatiques ont eu un temps de survie plus courte; Rapport de mais cela n'a pas été statistiquement significative.
Les principales conclusions de cette étude étaient que (1) la récidive péritonéale était modèle de récurrence la plus répandue après la chirurgie curative, et (2) la profondeur de l'invasion, les métastases des ganglions lymphatiques et expression négative de bcl-2 étaient des facteurs de risque indépendants de récidive générale.
le cancer gastrique est l'une des tumeurs malignes les plus courantes dans le monde entier. Bien que le pronostic des patients atteints de cancer gastrique est améliorée à la suite de l'amélioration des techniques de diagnostic et les stratégies thérapeutiques, le cancer gastrique est toujours la deuxième cause de décès liés au cancer [2]. Le mauvais pronostic du cancer gastrique est due principalement à la fréquence des récidives et des métastases. Par conséquent, il est très important de préciser le modèle de récurrence et les facteurs de risque de récidive, ce qui peut contribuer à la conduite de la pratique clinique postopératoire et le suivi.
Dans notre étude, 151 (33,6%) patients avaient récidive au cours du suivi période -up. Le délai moyen de récidive était de 21,1 mois; 113 patients (74,8%) ont eu récidive dans les 2 ans. Ce résultat montre que la plupart récidive du cancer de l'estomac se produit dans les 2 ans, et est compatible avec d'autres études [10-12]. Yoo et al.
[12] ont rapporté 508 patients avec récidive après résection curative pour le cancer gastrique et a montré que la durée moyenne du temps de récidive était de 21,8 mois. Par conséquent, il était nécessaire de renforcer le suivi dans les 2 ans après résection curative.
Il a été rapporté que les modèles de récurrence les plus courants sont la récurrence hématogène et la diffusion péritonéale dans le cancer gastrique [3, 12-14]. Dans notre série, la récidive péritonéale a été le modèle le plus courant, ce qui représente 38,4% de tous les patients avec récidive, suivie par des métastases hématogènes (32,5%). Nos résultats sont cohérents avec les études antérieures [3, 12]. Maehara et al.
Rapporté [15] que le motif péritonéale a représenté 50% des cas, la récidive hématogène pour 40% des cas, et loco-régionale récurrence pour 20%. Cependant, il y a encore quelques différends. Une étude italienne a montré que le modèle de récurrence plus fréquente était loco-régionale, ce qui représente 45% de tous les cas récurrents [16]. Cette disparité a indiqué qu'il ya des différences dans les modes de récurrence entre les pays orientaux et occidentaux. Il est possible que la faible incidence des récidives locales dans les études orientales est due à l'utilisation intensive de D2 ganglionnaire dissection. Récurrence est fréquente chez les patients atteints de cancer gastrique après avoir subi une gastrectomie radicale. Par conséquent, il est important d'identifier les patients présentant un risque élevé de récurrence. Dans cette étude, l'analyse univariée a montré que le type Borrmann, profondeur de l'invasion et de l'état des ganglions lymphatiques ont été associés à la récidive générale. La régression logistique a montré que la profondeur de l'invasion et les métastases ganglionnaires ont été des facteurs de risque indépendants de récidive générale. Conformément à nos résultats, des études antérieures ont montré que les facteurs traditionnels clinicopathologiques tels que l'exposition séreuse, le type histologique, la profondeur de l'invasion et les métastases ganglionnaires étaient des facteurs de risque de récidive [17-19]. Cependant, les facteurs clinicopathologiques traditionnels sont parfois insuffisants pour la prédiction de la récidive. Un certain nombre d'études ont montré que les biomarqueurs, tels que les marqueurs tumoraux [20, 21], facteur de croissance vasculaire endothéliale (VEGF) [22, 23], E-cadhérine [24, 25], et microARN [26], peut-être utile pour prédire la récurrence du cancer gastrique. Bcl-2 situé sur le chromosome 18q21, et code pour une protéine de 26 kDa principalement localisée dans la membrane mitochondriale [27]. Le gène bcl-2 a été décrit comme un oncogène dans le lymphome folliculaire. Certaines études ont montré que la surexpression de la prolifération cellulaire bcl-2 supprimé et a été associée à un comportement moins agressif biologique [28, 29]. Toutefois, la valeur de bcl-2 pour prédire les récidives de cancer gastrique est encore peu clair. Dans une étude précédente, nous avons constaté que bcl-2 était significativement associée à un pronostic chez les patients atteints de cancer gastrique [7]. Par conséquent, nous avons supposé que bcl-2 pourrait refléter la nature biologique de la tumeur, et servirait comme un indicateur fiable pour prédire la récidive. Selon nos résultats, l'expression négative de bcl-2 est un facteur de risque indépendant de récidive du cancer gastrique. Le mécanisme exact est encore incertain. Il est possible que bcl-2 affecte la récidive du cancer de l'estomac en régulant le comportement biologique des cellules tumorales. Saegusa et al.
[28] ont rapporté que la majorité des 2 bcl-cellules cancéreuses + sont dans un état non proliférante, et l'expression moyenne de Ki-67 l'indice de marquage et de l'indice de marquage apoptotique dans les foyers de bcl-2 + sont nettement inférieurs que celui bcl-2 foyers. Aizawa et al.
[30] a montré que l'expression de bcl-2 dans le cancer gastrique avancé est associé à un indice apoptotique inférieur et un meilleur pronostic. Pietenpol et al.
[31] ont rapporté que la surexpression de bcl-2 inhibe la croissance de plusieurs lignées de cellules tumorales solides.
Conclusion
En conclusion, la présente étude a démontré que la récidive péritonéale était le plus modèle de récurrence commune après gastrectomie curative. Profondeur de l'invasion, les métastases des ganglions lymphatiques, et l'expression négative de bcl-2 prédisent un plus grand risque de récidive. Ces résultats peuvent fournir des informations utiles pour le suivi des patients atteints de cancer gastrique qui ont subi une intervention chirurgicale pour la résection. Plus précisément, il est nécessaire de procéder à un plan de suivi intensif pour les patients atteints de cancer de l'estomac avec une expression négative de bcl-2. Cependant, la petite échelle et la conception rétrospective des lacunes de l'étude actuelle. Déclarations de plus grande échelle, les études prospectives devraient être effectuées pour valider l'utilité de bcl-2 dans la détection de la récidive tumorale chez les patients atteints de cancer gastrique.
Jianghong Wu Notes, Xiaowen Liu a contribué également à ce travail.
Remerciements
Nous remercions Ben Liotta pour l'édition de la langue anglaise dans notre manuscrit.
auteurs fichiers originaux soumis pour les images
Voici les liens vers les auteurs originaux soumis les fichiers pour les images. de fichier d'origine pour la figure 1 12957_2013_1895_MOESM2_ESM.tif Auteurs 12957_2013_1895_MOESM1_ESM.tif Auteurs fichier d'origine pour la figure 2 12957_2013_1895_MOESM3_ESM.tif Auteurs fichier d'origine pour la figure 3 Intérêts concurrents
Les auteurs déclarent qu'ils ont aucun conflit d'intérêts.
Auteurs ' contributions
JHW, XWL et YNW conçu et développé les expériences. JHW et XWL effectué les expériences. JHW, XWL et HC ont analysé les données. HC et YNW contribué réactifs /matériaux /outils d'analyse. JHW et XWL a écrit le papier. Tous les auteurs ont lu et approuvé le manuscrit final.

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