Prognozė naviko atsinaujinimo po radikalių rezekcijos skrandžio karcinoma, remiantis BCL-2 raiškos pervežimas tezės
Background
Šiuo metu naujienų nėra patikimų prognozavimo veiksniai skrandžio vėžio pasikartojimo. Šio tyrimo tikslas buvo įvertinti tarp BCL-2 ekspresijos ir rizikos skrandžio vėžio pasikartojimo santykius.
Metodai
iš 1996 sausio iki 2007 gruodžio, 449 skrandžio vėžiu sergantiems pacientams, kuriems buvo atlikta gydomoji rezekcija Retrospektyviai ištirti. Sąvoka lygiai BCL-2 buvo išnagrinėti imunohistocheminiu. Logistinės regresijos buvo atliekama siekiant nustatyti nepriklausomus rizikos veiksnius bendrą pasikartojimo skrandžio vėžio.
Rezultatai
151 pacientų (33,6%) pasireiškė pasikartojimo. Vidutinis laikas, pasikartojimo buvo 17,0 mėnesių, 113 (74,8%) pacientai turėjo recidyvų per 2 metus. Pilvaplėvės pasikartojimo buvo labiausiai paplitęs modelis, po hematogenous metastazių, kurioje kepenys buvo dažniausia svetainė. Gylis invazijos, metastazių limfmazgiuose, ir neigiamos išraiškos BCL-2 buvo nepriklausomi rizikos veiksniai bendrą pasikartojimo. Bendras išgyvenamumas laikas pasikartojančių pacientams buvo 22,7 mėnesių. Vidutinė gyvenimo trukmė po pasikartojimo buvo 6,7 mėnesio.
Išvada
invazijos gylis, metastazių limfmazgiuose ir raišką BCL-2 yra nepriklausomi veiksniai prognozuoja skrandžio vėžio pasikartojimo.
Raktiniai žodžiai
skrandžio vėžio pasikartojimo klinikos veiksniai BCL-2 faktai
Nors skrandžio vėžio atvejų mažėjo žymiai kelis dešimtmečius, tai dar ketvirtoji dažniausia vėžio ir antra dažniausia priežastis, dėl vėžio mirties [1, 2]. Nors pacientų, sergančių ankstyvos stadijos skrandžio vėžio dauguma gali turėti ilgas išgyvenimo kartus po operacijos, maždaug 40% pacientų miršta nuo pasikartojimo, net po to, kai vyksta chirurginio gydymo [3]. Buvimas ar nebuvimas pasikartojimo yra plačiai laikomas svarbiausia prognozuoti dėl išlikimo, nes pacientams, sergantiems pasikartojimo prognozė yra labai niūrus. Todėl, kad tai yra labai svarbu tiksliai prognozuoti pasikartojimo riziką ankstyvoje stadijoje, siekiant pagerinti prognozę pacientams, sergantiems pasikartojimo. Tačiau tai buvo įrodyta, kad įprastas followup po operacijos dėl skrandžio vėžio nėra naudinga nustatyti pasikartojimo ankstyvame etape [4]. Todėl svarbu ištirti konkrečius veiksnius, kurie gali nustatyti pacientų pogrupiuose, kuriuose yra daugiau agresyvus liga. Neseniai, kai kurie tyrimai parodė, kad patologiniai veiksniai, tokie kaip limfmazgių būklę, gylis invazijos, ir naviko dydžio, vaidina lemiamą vaidmenį prognozuojant pasikartojimo po pašalintas skrandis [5, 6]. Tačiau sunku prognozuoti pasikartojimo naudojant bendrus klinikos veiksnius. Atsižvelgiant į tai, kad kai kurie biologiniai žymenys, tokie kaip onkogenų, naviko slopintuvas genų, ląstelių ciklo reguliavimo, bei DNR pažaidų atstatymo genų, kurie yra susiję su naviko genezės, augimui, invazija ir metastazių, daugelis tyrėjai ieško naujų prognozavimo veiksniai tarp šių molekulinių žymenų. Ankstesniame tyrime mes įvertintas prognostinę vertę biologinių žymenų, tokių kaip p53 Bcl-2, bax, ir C-myc skrandžio vėžio, ir nustatė, kad BCL-2 buvo reikšmingai susijęs su prognoze skrandžio vėžiu sergantiems pacientams, [7]. Taigi, mes iškėlė hipotezę, kad BCL-2 ekspresija gali atspindėti auglio savybių, todėl, tarnauti kaip patikimas rodiklis prognozuoja pasikartojimo. Dabartinio tyrimo tikslas yra nustatyti, ar BCL-2 ekspresija gali prognozuoti ligos pasikartojimo po radikalių rezekcijos pacientams, sergantiems skrandžio vėžiu.
Metodai
Pacientai
nuo 1996 sausio iki 2007 gruodžio, 4,426 pacientams, sergantiems histologiškai patvirtinta pagrindinis skrandžio adenokarcinoma patyrė pašalintas skrandis ne iš skrandžio vėžio ir minkštųjų audinių sarkoma departamento Fudan universitetas Šanchajaus Cancer Center. Iš šių pacientų, 449 atvejų buvo pasirinktas. Šie pacientai "egzemplioriai buvo tamsintas immunohistochemically. Duomenys buvo gauti iš pacientų operacijos ir patologinių ataskaitas. Tolesni duomenys buvo gauti telefonu, laišku, ir ambulatoriškai klinikinių duomenų bazę. Skirstymas buvo atlikta pagal Sąjungos Tarptautinės vėžio kontrolės (UICC) TNM sustojimo klasifikacija karcinoma, skrandžio
(septintasis leidimas, 2010) [8]. Visų pacientų followup buvo atliktas pagal mūsų standartinį protokolą (kas tris mėnesius mažiausiai 2 metus, kas 6 mėnesius per ateinančius 3 metus, o po 5 metų kartą per 12 mėnesių iki gyvos galvos). Kontrolinis iki dalykai, įtraukti fizinę apžiūrą, naviko gabaritinis tyrimą, ultragarsu, krūtinės rentgenograma, kompiuterinė mografais nuskaitymo ir endoskopinės egzaminą. Iš followup diapazonas buvo nuo 1996 sausio iki gegužės 2010 mediana tolesnių laikas buvo 76,5 mėnesių analizės metu. Parašė informuotas sutikimas buvo gautas iš visų pacientų, ir šis tyrimas patvirtino Etikos komiteto Šanchajaus vėžio centro Fudano universitete. Tyrimas buvo retrospektyva.
Imunohistocheminį dažymo
BCL-2 buvo aptikta imunohistocheminio metodu. Antikūnai buvo įsigytas iš Dako (Hamburgas, Vokietija). Imunohistocheminį dažymo buvo atlikta pagal sustiprinto žymėto polimeras sistemos metodu. Parafino skyriai buvo deparaffinised su ksileno ir hidratuotas su etanolio /dejonizuoto vandens. tada skyriai buvo inkubuojami su metanolio /0,3% O
2O 2 ir blokavo su nespecifinis dažymo blokuoja reagentą. Po nakties inkubacijos 4 ° C temperatūroje su anti-BCL-2 antikūno (skiesti santykiu 1: 100), sekcijos buvo gydomi pagal standartines imunoperoksidazinis metodų. Neigiami kontroliniai dalys buvo taikoma ta pati tvarka, išskyrus tai, kad pirmasis antikūnas buvo pakeistas PBS. Nėra teigiamas dažymo buvo stebimas kontrolės. Iš dažymo vieta BCL-2 daugiausia buvo citoplazmoje ir cytomembrane
imunohistocheminį dažymo. Balais
Visi griežinėliai buvo nepriklausomai įvertintas dviem patologai. buvo įvertintas imunoreaktyviųjų ląstelių ir dažymo intensyvumo procentas. Iš imunoreaktyviųjų ląstelių procentas buvo rūšiuojami nuo 0-4 iki: ne dažymo pelnytas kaip 0, nuo 1 iki 10% ląstelių dažytų įmušė kaip 1, 11-50%, kaip parodyta 2, 51-80%, kaip 3, ir 81 iki 100%, kaip 4. dažymo intensyvumas buvo klasifikuojami kaip 0-3: 0 buvo apibrėžtas kaip neigiamas, 1 labai silpnas, 2, kaip vidutinio sunkumo, ir 3 kaip stiprus, atitinkamai. Pirminiai duomenys buvo konvertuoti į imunohistocheminio balas (IHS) padauginus kiekio ir intensyvumo balai. IHS rezultatas 9-12 buvo kuris yra laikomas stipriu reaktyvumas (+++), 5-8 kaip vidutinio sunkumo (++), nuo 1 iki 4, kaip silpnas (+), ir 0, kaip neigiamas (-). Atvejai, kurių mažiau kaip 1 balas buvo įvertintas kaip neigiamas, o tie su ≥1 buvo laikomas teigiamu [9].
Statistinė analizė
duomenys buvo pateikti kaip vidurkis ± SD arba skaitiniams parametrų vidurkio. Pacientų funkcijos ir klinikines charakteristikas buvo analizuojami naudojant dvipusiu Stjudent'ot
-test arba "Pearson Chi-kvadrato testas, kaip tinkama. Veiksniai, kurie buvo laikomi potencialios svarbos ant požymį analizę buvo įtraukti į Dispersinės analizės. Logistinės regresijos buvo naudojamas įvertinti susijusius veiksnius pasikartojimo. Priimtas reikšmingumo lygmuo p
< 0,05. . Statistines analizes ir grafika buvo atlikta naudojant SPSS 13.0 statistinį paketą (SPSS Inc., Chicago, IL, JAV)
rezultatai
klinikos charakteristikos
Tyrime dalyvavo 307 vyrų ir 142 moterų pacientams (2,2: 1 ), kurių vidutinis amžius buvo 57 metų. Nebuvo 49 (10,9%) Anksti skrandžio vėžio ir 400 (89,1%) išplitusiu skrandžio vėžiu. Pasak histologinis tipas, gerai diferencijuotas navikas buvo pastebėtas 7 (1,5%) pacientų, vidutiniškai diferencijuoti 149 (33,2%) pacientų, o poorlydifferentiated navikus likusių 293 (65,3%) pacientams. Pasak BORRMANN tipo, 49 (10,9%) buvo 0 tipo, 32 (7,1%) I, 14 (3,1%) II tipo, 333 (74,2%) III tipo ir 21 (4,7%) IV tipo. Iš šių pacientų, 147 (32,7%) buvo navikų, esančių viršutinio trečdalio skrandį, 65 (14,5%) buvo navikai viduriniame trečdalyje, 212 (47,2%) turėjo auglius apatinis trečdalis, ir 25 (5,6%) turėjo auglius okupacinė du trečdalius arba daugiau skrandį. Limfmazgių metastazės buvo pastebėtas 326 pacientų, o metastazės lygis buvo 72,6%. Patologinės etape pasiskirstė taip: 35 (7,8%) pacientai priklausė etape IA, 34 (7,6%) IB, 50 (11,1%) IIa, 75 (16,7%) IIB, 82 (18,3%) IIIA, 80 ( 17,8%) IIIB, ir 93 (20,7%) IIIc.
išraiška BCL-2
BCL-2 raiškos buvo teigiamas 21,2% visų skrandžio vėžio audiniuose. BCL-2 dažymo buvo pastebėtas citoplazmą ir cytomembrane karcinomos ląstelių (1 paveikslas). BCL-2 išraiška buvo susijęs su patologinės etape. Nebuvo koreliacija tarp BCL-2 ir kitų patologinių parametrų, pavyzdžiui, amžiaus, lyties, histologinio tipo, BORRMANN tipo, naviko vietoje, arba naviko dydžio. 1 pav Teigiamas išraišką BCL-2 imunohistocheminiu skrandžio vėžio audinyje. Originalus didinimas × 100 B originalus didinimas × 400.
Laikas pasikartojimo ir pasikartojimo modelis
pasikartojimo įvyko 151 (33,6%) pacientų per stebėjimo laikotarpį. Vidutinis laikas, pasikartojimo buvo 17,0 mėnesio (diapazonas nuo 2,0 iki 91,0 mėnesių), o vidutinis laikas buvo 21,1 mėnesių. Tarp pacientų, sergančių pasikartojimo, 113 (74,8%) turėjo pasikartoti per 2 metus. Dažnumas ir norma pasikartojimo yra įrodytas pav 2 pav 2 dažnumas pasikartos po radikalių operacijoje metus.
Iš 151 pacientų, sergančių pasikartojimo, 58 (38,4%) buvo diagnozuota peritoninės pasikartojimo, kuri labiausiai buvo paplitusi, 49 (32,5%) pacientai turėjo hematogenous metastazes, kurios buvo antra labiausiai paplitusi pasikartojimo modelis, ir kepenų buvo dažniausiai dalyvauja organą; ji buvo susijęs su 57,1% visų pasikartojančių pacientams. Kitos recidyvo buvo sritinių (n = 34, 22,5%), tolimus metastazių limfmazgiuose (n = 8, 5,3%), arba kelių vietų (n = 2, 1,3%) (3 pav.) 3 paveikslas Šablonas pasikartojimo po radikalių pašalintas skrandis.
Pasikartojimas susiję veiksniai
vienmatės analizė parodė, kad BORRMANN tipas, gylis invazija, limfmazgių būklę, ir raišką BCL-2 buvo susijęs su bendra pasikartojimo, o amžių, lytį, histologinio tipo, naviko vietą, ir naviko dydis buvo ne (1 lentelė). Logistinės regresijos dirbo nustatyti nepriklausomus rizikos veiksnius bendrą pasikartojimo. Buvo įrodyta, kad invazijos, metastazių limfmazgiuose, ir neigiamos išraiškos BCL-2 gylį buvo nepriklausomi prognozavimo veiksniai bendrą pasikartojimo (2 lentelė) .table 1 vienmatės analizės rizikos veiksnių pasikartojimo skrandžio vėžio
Nėra pasikartojimo
pasikartojimas
P vertė
(n = 298)
(n = 151)
Amžius (metai) vidurkis ± SD
57,8 ± 11,9
55,8 ± 12,9
0,095
Lytis, vyras /moteris
203/95
104/47
0,871
naviko dydis (cm ), vidurkis ± SD
4,8 ± 2,5
5.3 ± 2.7
0,054
auglio vietą, viršutinėje /viduryje /nuleidimo /dviejų ar daugiau
91/38/153/16
56 /27/59/9 pervežimas 0,094 pervežimas BORRMANN tipo, 0 /I /II /III /IV
45/22/9/211/11
4/10/5/122/10
0,002
histologija, gerai /vidutinio /blogai diferencijuota
5/101/192
2/48/101
0.899
gylis invazija, T1 + T2 /T3 + T4
94/204
16/135
0,000
Limfmazgių būklė, neigiamas /teigiamas
108/190
15/136
0,000
BCL-2, neigiamas /teigiamas
226/72
128/23
0,029
2 lentelė daugiamatis analysisof rizikos veiksniai pasikartojimo skrandžio vėžio
Kintamojo
p reikšmė
Odds santykis
95% PI
amžius
0.116
0.710
0.463, 1.088
Lytis
0,775
1,069
0,677, 1.687
BORRMANN tipas
0,334
0,872
0.660, 1,152
Gylis invazijos
0,017
0.438
0,222, 0,861
Limfmazgių status
0,000
3,753
2.040, 6,905
BCL-2
0,047
0,577
0,336, 0,992
vienmatės analizės parodė, kad BORRMANN tipo, gylio invazijos, limfmazgių būklę, histologiją, lyties, ir išraiška BCL-2 buvo susiję su pilvaplėvės pasikartojimo. Logistinės regresijos parodė, kad invazijos, limfmazgių būklę, histologiją gylį ir BCL-2 buvo nepriklausomi prognozavimo veiksniai peritoninės pasikartojimo. Naviko vieta ir BORRMANN tipas buvo susiję su hematogenous metastazių, ir naviko vietą buvo vienintelė nepriklausoma prognozavimo veiksnys. Nebuvo koreliacija tarp klinikos parametrus ir sritinių pasikartojimo.
Prognozė pasikartojančių pacientų
Bendras 5 metų išgyvenamumas buvo 52% visų pacientų. Penkerių metų išgyvenamumas buvo 58,9% ir 45,5% visų BCL-2 teigiamus ir BCL-2 neigiamų pacientų. Be BCL-2 teigiamiems pacientams, patologinė stadija ir naviko vietą didelės įtakos prognozei, ir patologinis etapas buvo nepriklausoma prognostinis faktorius. Be BCL-2 neigiamiems pacientams, vienmatės analizė parodė, kad BORRMANN tipo, gylio invazijos, metastazių limfmazgiuose, naviko dydžio, naviko vietą ir patologinės etape reikšmingai paveikta prognozę. Daugiamatė analizė parodė, kad limfmazgiuose metastazių, auglio vietą, ir patologinis etapas buvo nepriklausomi prognostiniai veiksniai.
Išgyvenamumo mediana laiką pacientams, sergantiems pasikartojimo buvo 22,7 mėnesių. Vidutinė gyvenimo trukmė po pasikartojimo buvo 6,7 mėnesio. Atsižvelgiant į skirtingus pasikartojimo modelius, vidutinė gyvenimo trukmė po pilvaplėvės pasikartojimo, hematogenous metastazių, sritinių pasikartojimo, ir tolimų metastazių limfmazgiuose buvo 5,7 mėnesių (2.6 iki 12,4), 7,3 mėnesių (2,4 iki 11,7), 7,0 mėnesių (nuo 2,5 iki 17.1), ir 6.1 mėnesių (3,9 iki 7,9), atitinkamai. Pacientai, kurių pilvaplėvės ir tolimoje limfmazgių pasikartojimo turėjo trumpesnį išgyvenimo laikas; Tačiau tai nebuvo statistiškai reikšmingas.
Diskusijos
pagrindinių išvadų šio tyrimo buvo, kad (1) peritoninės pasikartojimo buvo labiausiai paplitęs pasikartojimo modelis po chirurginio gydymo, ir (2) invazijos gylis, metastazių limfmazgiuose ir neigiamas išraiška BCL-2 buvo nepriklausomi rizikos veiksniai bendrą pasikartojimo.
Skrandžio vėžys yra viena iš labiausiai paplitusių piktybinių navikų visame pasaulyje. Nors pacientų, sergančių skrandžio vėžio prognozė pagerėjo kaip geresnių diagnozavimo metodus ir terapinių strategijų rezultatas, skrandžio vėžys yra vis dar antroji pagrindinė priežastis, vėžio susijusių mirčių [2]. Niūrus prognozė skrandžio vėžys yra daugiausia dėl pasikartojimo ir metastazių dažnį. Todėl yra labai svarbu išaiškinti pasikartojimo modelio ir rizikos veiksnius pasikartojimo, kuris gali prisidėti prie pooperacinio klinikinėje praktikoje ir followup elgesio.
Mūsų tyrimo duomenimis, 151 (33,6%) pacientai turėjo pasikartoti tolesnei metu -up laikotarpis. Vidutinis laikas pasikartojimo buvo 21,1 mėnesiai; 113 pacientai (74,8%) turėjo pasikartoti per 2 metus. Šis rezultatas rodo, kad dauguma skrandžio vėžio pasikartojimo pasireiškia per 2 metus, o yra suderinamas su kitų tyrimų [10-12]. Yoo et al.,
[12] pranešė 508 pacientai, sergantys pasikartos po radikalių rezekcija dėl skrandžio vėžio ir parodė, kad vidutinis ilgis laiko pasikartojimo buvo 21,8 mėnesių. Todėl buvo būtina sustiprinti per 2 metus po radikalių rezekcijos papildomą adresatą.
Buvo pranešta, kad dažniausi jų pasikartojimo modeliai yra hematogenous pasikartojimo ir pilvaplėvės sklaida skrandžio vėžiu [3, 12-14]. Mūsų serijos, pilvaplėvės pasikartojimo buvo dažniausia modelis, sudarantis 38,4% visų pacientų, sergančių pasikartojimo, po hematogenous metastazių (32,5%). Mūsų rezultatai atitinka ankstesnių tyrimų [3, 12]. Maehara et al.,
Pranešė [15], kad pilvaplėvės modelis sudarė 50% visų atvejų, hematogenous pasikartojimų 40% atvejų, o lokalus regioninis pasikartojimo 20%. Tačiau vis dar yra kai ginčai. Italijos Tyrimas parodė, kad dažniausiai pasikartojantys modelis buvo Loco-regiono, sudaro 45% visų pasikartojančių atvejų [16]. Šis skirtumas rodo, kad yra keletas pasikartojimo modelių tarp Rytų ir Vakarų šalių skirtumai. Tai yra įmanoma, kad žemas dažnis vietos pasikartojimo Eastern tyrimų yra dėl plataus naudojimo D2 limfos-mazgo skrodimo.
Požymiai dažnai skrandžio vėžiu sergantiems pacientams po išgyvena radikalius pašalintas skrandis. Todėl, svarbu nustatyti pacientus, esančius didelės rizikos pasikartojimo. Šiame tyrime vienmatės analizė parodė, kad BORRMANN tipas, gylis invazija, ir limfmazgių būklė buvo susijęs su bendra pasikartojimo. Logistinės regresijos parodė, kad gylis invazija ir limfmazgiuose metastazių buvo nepriklausomi rizikos veiksniai bendrą pasikartojimo. Suderinamas su mūsų išvadomis, ankstesni tyrimai parodė, kad tradiciniai klinikos veiksnių, tokių kaip serosal poveikio, histologinis tipas, gylis invazijos, ir limfmazgių metastazių buvo rizikos veiksniai pasikartojimo [17-19]. Tačiau tradiciniai klinikos veiksniai kartais nepakanka prognozavimas pasikartojimo. Daugybė tyrimų parodė, kad biomarkeriai, pavyzdžiui, naviko žymenų [20, 21], kraujagyslių endotelio augimo faktoriaus (VEGF) šeimos [22, 23], E-cad [24, 25], ir mikro RNR [26], gali būti naudinga prognozuojant pasikartojimo skrandžio vėžio. BCL-2 yra ne chromosomos 18q21, ir koduoja 26-kDa baltymą lokalizuotą daugiausia mitochondrijų membranos [27]. Bcl-2 geno pirmą kartą buvo apibūdinamas kaip folikulinės limfomos onkogeno. Kai kurie tyrimai parodė, kad Bcl-2 slopinamas ląstelių proliferacija raiška ir buvo susijęs su mažiau agresyvaus biologinės elgsenos veiksnys [28, 29]. Tačiau BCL-2 vertė prognozuojant skrandžio vėžio recidyvų dar neaišku. Ankstesniame tyrime, mes nustatėme, kad BCL-2 buvo reikšmingai susijęs su prognoze skrandžio vėžiu sergantiems pacientams [7]. Taigi, mes iškėlė hipotezę, kad BCL-2 gali atspindėti biologinę prigimtį naviko ir pasitarnautų kaip patikimas rodiklis prognozuoja pasikartojimo. Pagal mūsų rezultatus, neigiamas išraiška BCL-2 yra nepriklausoma rizikos veiksnys skrandžio vėžio pasikartojimo. Tikslus mechanizmas dar neaiškus. Ji yra įmanoma, kad BCL-2 veikia skrandžio vėžio pasikartojimo reguliuojant naviko ląstelių biologinės savybės gali. Saegusa et al.,
[28] pranešė, kad BCL-2 + vėžinių ląstelių dauguma į nonproliferative valstybės, o vidutinė išraiška Ki-67 ženklinimą indekso ir apoptozės ženklinimo indeksą BCL-2 + židinių yra žymiai mažesnės nei ta, BCL-2 židinių. Aizawa ir kt.
[30] parodė, kad BCL-2 ekspresija išplitusio skrandžio vėžio yra susijęs su mažesne apoptozės indekso ir geriau prognozė. Pietenpol et al.,
[31] pranešė, kad per išraiška BCL-2 slopina keletą kietųjų navikų ląstelių linijų augimą.
Išvada
Apibendrinant, šis tyrimas parodė, kad pilvaplėvės pasikartojimo buvo labiausiai bendra pasikartojimo modelis po radikalių pašalintas skrandis. Gylis invazijos, metastazių limfmazgiuose, ir neigiamos išraiškos BCL-2 prognozuoja didesnę riziką pasikartojimo. Šie rezultatai gali suteikti šiek tiek naudingos informacijos followup skrandžio vėžiu sergantiems pacientams, kuriems buvo atliktos chirurginės operacijos už rezekcija. Konkrečiau kalbant, ji yra būtina atlikti intensyvų tolesnių planą skrandžio vėžio pacientams, kuriems nenustatoma išraiška BCL-2. Tačiau nedidelio masto ir retrospektyvinė dizainas buvo trūkumų dabartinio tyrimo. Daugiau didelio masto, turi būti atliekami siekiant patvirtinti, kad BCL-2 naudingumą aptikti naviko recidyvo pacientams su skrandžio vėžiu, perspektyviniai tyrimai.
Notes
Jianghong Wu Xiaowen Liu prisidėjo vienodai prie šio darbo.
Deklaracijos
Padėka
dėkojame Ben Liotta redaguoti anglų kalbos mūsų rankraščio.
autorių originalios pateikti failai vaizdų
Žemiau išvardintos nuorodos į autorių originalus pateiktų failų vaizdų. 12957_2013_1895_MOESM1_ESM.tif Autorių originalus failas 1 pav 12957_2013_1895_MOESM2_ESM.tif Autorių originalaus failo 2 pav 12957_2013_1895_MOESM3_ESM.tif Autorių originalaus failo 3 pav konkuruojančių interesų Viesbutis The autoriai deklaruoja, kad jie neturi jokių konkuruojančių interesų.
Autoriai " įmokos
JHW, XWL ir YNW pastojo ir skirtos eksperimentus. JHW ir XWL atliko eksperimentus. JHW, XWL ir HC išanalizavo duomenis. HC ir YNW prisidėjo reagentai /Medžiagos /analizės įrankius. JHW ir XWL rašė popierių. Visi autoriai skaityti ir patvirtino galutinį rankraštį.