Izražanje v serumu pokoj-20a-5p, naj-7a in miR-320a in njihove korelacije z pepsinogen v atrofični gastritis in rak želodca: študije primerov in kontrol

Izražanje v serumu pokoj-20a-5p, naj-7a in miR-320a in njihove korelacije z pepsinogen v atrofični gastritis in rak želodca: študija primerov in kontrol
Abstract
Ozadje
identifikacijo serijskih miRNAs ciljanje isto funkcionalno želodcu beljakovine lahko zagotovi nove in učinkovite seroloških biomarkerjev za diagnozo raka želodca (GC). Cilj te raziskave je bil oceniti potencial pokoj-20a-5p, naj-7a in miR-320a pri diagnozi AG ali GC in soodvisnost treh miRNAs z njihovih predvidenih ciljnih molekul PGA, PGC in PGA /PGC razmerje.
Metode
skupno 291 bolnikov, vključenih 103 nadzor (CON), 94 s atrofični gastritis (AG) in 94 z GC. Ravni serumu miRNAs so odkrili s kvantitativno reverzno transkripcijo-verižne reakcije s polimerazo in serum pepsinogen A (PGA) in C (PGC) smo določili z encimskoimunske teste.
Rezultati
raven Serum miR-320a zmanjšuje z kontrole, AG in GC skupin, ki so bile v kaskade razvoja GC, medtem ko ni bilo pomembne razlike v stopnjah pokoj-20a-5p in naj-7a med kontrolami, AG in GC skupine. Ko razdeljeni glede na spol in starost, je serum miR-320a izraz nižja pri ženskah GC kot v kontrolni skupini (p
= 0.035), še posebej pri bolnicah z GC, starejših od 60 let (p
= 0,008). Za razlikovanje bolnikov ženske GC, starih nad 60 let, je bila površina pod sprejemnik deluje karakteristike za pokoj-320a 0,699, in najboljši cut-off point je bil 4,76, z občutljivostjo 65,2% in specifičnost 68,2%. V zvezi s korelacijo med izbrane pokoj-20a-5p, naj-7a, MIR-320a in SP, smo ugotovili, da obstajajo pozitivne korelacije med vsemi tremi in razmerju PGA /PGC (r = 0,408, 0,255, 0,324; p
= < 0,001, 0,009, 0,001, v tem zaporedju), vendar je bil med izražanjem v serumu pokoj-20a-5p in njene predvidene ciljne PGA nobene povezave, ali med pustiti-7a in pokoj-320a in njihove predvidene tarče PGC . Serum miR-320a se je zmanjšala in PGC je bil v skupini GC povečala v primerjavi s kontrolno skupino.
Sklepe
vrednosti serumskih pokoj-320a je bila nižja pri ženskah GC starejše od 60 let, kot v okviru nadzora, ki lahko zagotavljajo potencial dragoceno marker za diagnosticiranje starejše ženske z GC. Ravni serumskega pokoj-20a-5p, naj-7a in miR-320a so v pozitivni korelaciji s PGA /PGC, ki bi lahko posredno odražajo funkcionalno stanje želodčne sluznice.
Ključne besede
Serum microRNA Biomarker Pepsinogen želodca bolezen Ozadje
bistveno je, da razišče občutljive, posebne in neinvazivnih tumorjev biomarkerjev, ki se lahko uporabljajo za zgodnje odkrivanje bolezni, saj ocenjuje napovedi in napovedi ponovitve. MicroRNAs (miRNAs) so razred visoko konzerviranim in endogenih RNA nekodiranih 19-24 nukleotidov dolge, ki uravnavajo izražanje tarčnih genov na post-transkripcijski ravni. Kopičijo dokazi kažejo, da so miRNAs sodeluje pri pomembnih bioloških procesih, povezanih s širjenjem, apoptoze, diferenciacija, metastaz, angiogenezo in imunski odziv, medtem ko lahko deregulacija miRNAs ključna za začetek raka, napredovanju in rezultatih zdravljenja [1, 2]. Nedavno je bilo dokazano, da človeški serum ali plazma vsebuje velike količine stabilnih miRNAs se izraz profile, ki bi lahko uporabijo za prepoznavanje različnih vrst raka, vključno z rakom na prostati, v veliki B-celični limfom, rak jajčnikov, rak jeter in zunaj . -small pljučnega raka [3-7]
miRNAs so del zapletenega zakonodajnega omrežja; več genov lahko reguliramo z enim miRNA, ampak en sam gen lahko tudi subtilno urejena s skupino miRNAs [2]. Nekaj ​​študije so raziskovali povezavo med serumskih miRNAs in želodčnih bolezni [8, 9], številne študije osredotočila na plazemske miRNAs izražanja na [10-12], Liu H et al. označene MIR-378 kot biomarker serumu [8], in Liu R et al. izbranih pet miRNAs (miR-1, -20a, -27a, -34 in -423-5p) kot prstni odtis za GC diagnozo [9]. Vendar ni bila pozornost namenjena ciljanje istega gena s serijskimi miRNAs. Vendar pa bi lahko takšne študije pomagala razjasniti skupne funkcije serijskih miRNAs ciljajo posameznih genov in tako izboljšati naše razumevanje njihove vloge pri bolnikih z rakom želodca (GC) in rakavih bolezni.
Človeški pepsinogens (SP) so neaktivni pro-encimov specifična prebavni encim pepsin, ki izvirajo iz želodčne sluznice in se lahko biokemično in imunokemijsko razvrščeni v PGA in PGC [13, 14]. Prejšnje študije so pokazale, da je bila PGC izrazom negativni korelaciji s stopnjo malignosti želodčne sluznice in razvoj želodčnih lezij [15]. nizko /PGC razmerje Z PGA lahko uporabimo kot serološki biomarkerja atrofičnega gastritisa (AG), ki je znano, da je predrakavo stanje [15, 16]. Več miRNAs so bile ugotovljene v dveh ciljnih genov napovedujejo programskih paketov (mikrokozmos Cilji in TargetScan ljudi), od katerih so nekatere ciljne PGA (MIR-212, MIR-132, miR-20a-5p, miR-93) ali PGC (miR- 662, miR-365, naj-7a, miR-320a). V miRNAs tesno povezane s PK ali drugih malignih so bili izbrani za nadaljnje preiskave v trenutni raziskavi. miR-20a-5p, član miR-17-92 grozda, je bila povečana pri želodca, debelega črevesa in trebušne slinavke adenokarcinoma in situ
[17-19], tkiva izražanja oddajal-7a se je povezala s bezgavk metastazami GC [20], in miR-320a je navzdol urejena v primarnim rakom dojke in povezana z invazijo in metastaz [21-23]. Te tri miRNAs so bile prej samo raziskovali in situ
, in večina študije so osredotočeni na svoje naloge; Študij so raziskovali njihove morebitne vloge kot v serumu biomarkerjev za diagnozo GC in predrakavih bolezni. In ali predvidenih funkcionalnih miRNAs (pokoj-20a-5p, naj-7a in miR-320a) ni bilo mogoče opredeliti kot biomarker za diagnozo GC in predrakavih bolezni? Poleg tega je njihov odnos z njihove predvidene ciljne pepsinogen niso znani.
Ta študija torej cilj je oceniti potencial pokoj-20a-5p, naj-7a in MIR-320a pri diagnozi GC in korelacijo treh miRNAs in PGA, PGC in PGA /PGC razmerje. Raziskovali smo koncentracijo v serumu treh izbranih miRNAs v GC in njene predrakavih stanju, kot tudi povezavo med serumu pokoj-20a-5p in njene predvidene ciljne PGA, in med serumom pustite-7a in pokoj-320a in njihovo napovedano ciljno PGC . Rezultati morda prepoznali več dragocenih seroloških označevalcev za zdravljenje želodčnih bolezni, do neke mere, kot tudi zagotavljanje eksperimentalne dokaze in sklicevanje na pomoč naše nadaljnje razumevanje funkcij serumskih miRNAs v procesu rakotvornosti.
Metode
Predmeti
skupaj 291 oseb, ki so bile opravljene gastroskopija izpite v prvem odvisnimi Hospital China Medical University od leta 2004 do leta 2011 so bili vključeni v to študijo. Podatki o spolu, starosti in drugih dejavnikov, smo pridobili s pomočjo vprašalnika, uporabljenega za vsak predmet. Študija je odobril Odbor za človekovo etično presojo China Medical University. Pisna privolitev je bila pridobljena iz udeležencev v skladu s Helsinško deklaracijo in njene kasnejše spremembe. Vsi bolniki so opravili endoskopsko želodčne sluznice biopsijo, in vzorci biopsije so parafina-vgrajeni in obarvajo s HE obarvanjem za histološko diagnostiko, ki je bil diagnosticiran z dvema izkušeni patologi. Primeri z minimalnimi površinskimi gastritis so bili obravnavani kot kontrole [24]. Atrofični gastritis skupina je bila opredeljena v skladu s histopatologijo. Histopatologiji diagnoze je bila vključena rahlo, zmerno in resnost, in le razred zmerno in resnost se je vpisal v tej študiji primerov in kontrol. Devetdeset-štirje bolniki so histološko potrjeni primeri adenokarcinomom želodca; 75 je mogoče razvrstiti glede na klasifikacijo Lauren, medtem ko je 19 ne bi mogel. In med 75 primerih [25], je bilo 22 primerov GC 75 črevesno tipa, 45 sta bila razpršena tipa in je bilo 8 mešan tip. Vzorci iz želodca skupini raka ujema v sestavi starosti in spola z bolniki s kontrolami in z atrofični gastritis.
Serum RNA izolacije in kvantitativno reverzno transkripcijo-verižna reakcija s polimerazo (QRT-PCR) test
približno 6 ml venske krvi je bilo odvzeto vsak predmet. Serum skupno RNA smo ekstrahirali z uporabo metode, ki jo Liu R et al opisan. [9], z nekaterimi spremembami. Serum smo ločili s centrifugiranjem pri 3000 g
10 minut, čemur sledi 15 min hitrim centrifugiranjem je pri 12.000 g
popolnoma odstranimo celične ostanke. Serum Supernatant predela in shranimo pri -80 ° C do nadaljnje obdelave. Celotno RNA smo ekstrahirali z 200 ul seruma po kisline fenol /kloroform čiščenja in centrifugiranjem v izopropil alkoholu. Vsak vzorec je bilo vse v 20 ul RNA brez DDH 2O rešitev in šest mikrolitrov celotne RNA je bila reverzno prepisana na cDNA, ki uporabljajo en korak PrimeScript miRNA cDNA zbirno Kit (Takara, Dalian, Kitajska). PCR v realnem času smo izvedli z uporabo miRcute miRNA qPCR odkrivanja komplet (Tiangen, Peking, Kitajska), v Termalnem ciklerja Dice sistem v realnem času (Takara). Za izračun stopnje prisotnosti miRNAs, sintetična HSA-miR-20a-5p, HSA-naj-7a in HSA-miR-320a na znane koncentracije (Takara) so tudi obrnjene prepisani in razširiti. Koncentracija vsake miRNA smo nato izračuna glede na standardno krivuljo. Vse reakcije, vključno s kontrolami ne-predloge, smo izvedli v dveh izvodih.
Serum PG in H. pylori
ravneh
Serum PG koncentracije in H. pylori
ravni (HP) smo določili z encimsko vezani imunski test (ELISA) z PGA, PGC in H. pylori
ELISA kitih (BIOHIT Co., Ltd., Helsinki, Finska) [16, 26, 27]. Vzorce smo testirali v naključnem vrstnem redu, slepi z rezultati histoloških. Vsaka serija vključeni komercialne kontrole in zaslepljene kontrole v plazmi za oceno laboratorijsko razlike. Vse plazmi kontrole so v srednjih ± 2 SDS. Pet odstotkov vseh vzorcev smo testirali v dveh izvodih.
Statistična analiza
dnevniku 10 Mirne kopirate število zastopa ravni v miRNAs in razlike v stopnjah miRNA med skupinami, kot tudi v analiza stratifikacija smo primerjali z enosmerno analizo variance. Sprejemnik deluje značilne (ROC) krivulj in površino pod ROC krivuljo (AUC) so bili uporabljeni za oceno diagnostične učinke miRNAs in določiti ustrezne Ločnice. Mediane serumskih koncentracij PG smo primerjali med tremi skupinami, kot tudi v analizi stratifikacije pomočjo testov Kruskal-Wallis H. koeficient korelacije Pearson je bila uporabljena za oceno korelacije med miRNAs in koncentracijah PG. Raztros parcela je bila predstavljajo korelacijsko analizo med serumskih ravni miRNA in PGA /PGC razmerju, in med ravnmi PGA in PGC. Vse statistične analize smo izvedli s pomočjo SPSS 17,0 programske opreme (SPSS Inc. Chicago, ZDA). Obojestranskega p
vrednost < 0.05 smo imeli za statistično značilne.
Rezultati
Demografija študijskih predmetov
so 291 preiskovancev, vključenih 103 nadzorov, 94 bolnikov z AG in 94 z GC. Kot je prikazano v tabeli 1, ni bilo pomembnih razlik glede na spol (p
= 0,948), starost (p
= 0,654) in H. pylori
stanje okužbe (p
= 0,580) med tremi groups.Table 1 značilnostim študijskih predmetov
spremenljivk
nadzor
atrofični gastritis
želodca raka
n = 103

n = 94
n = 94
Spol
Moški
65 (63,1%)
61 (64,9%)
59 (62,8%)
ženski
38 (36,9%)
33 (35,1%)
35 (37,2%)
P
= 0,948
Starost (leta)
Mean
59,1 ± 10,6
60,4 ± 11,2
60.2 ± 11.1
Domet
23-80
28-83
27-80
P
= 0.654
H. pylori
stanje okužbe
HP-
60 (58,3%)
48 (51,1%)
53 (56,4%)
Hp +
43 (41,7%)
46 (48,9%)
41 (43,6%)
P
= 0,580
Korelacije med izražanje serumskih miRNAs in želodčnih bolezni
ni bilo pomembne razlike v stopnjah miR- 20a-5p in naj-7a med kontrolami, AG in GC skupin (p
= 0,581, 0,445, v tem zaporedju), vendar miR-320a ravni postopoma zmanjšalo med različnimi skupinami (4,99 ± 0,46 vs. 4,94 ± 0,45 Vs. 4,90 ± 0,44, p
= 0.152, Tabela 2) .table 2 Ravni serumskih miRNAs (povprečje ± SD), PS (mediana ± SD) med različnimi skupinami bolezni želodca
spremenljivk

CON
AG
GC
P-
vrednost
miR-20a-5P
3,77 ± 0,74
3,84 ± 0.69
3,83 ± 0,68
0,581
moški
3,80 ± 0,77
3,90 ± 0,73
3,88 ± 0,78
0,59
ženska
3,72 ± 0,69
3,73 ± 0,60
3,75 ± 0,47
0,855
naj-7a
3,72 ± 0,34
3,77 ± 0,29
3,75 ± 0,28
0,445
Moški
3,72 ± 0,31
3,78 ± 0,32
3,77 ± 0,28
0,367
Moški
3,71 ± 0,39
3,76 ± 0,24
3,72 ± 0,28
0,93
miR-320a
4,99 ± 0,46
4,94 ± 0,45
4,90 ± 0,44
0,152
Male
5,03 ± 0,49
5,01 ± 0,46
5,00 ± 0,42
0,76
Moški
4,93 ± 0,40
4,81 ± 0,39
4,73 ± 0,43
0,035 *
PGA
146,3 ± 101,5
111,0 ± 85,4
130,1 ± 107,1
0,044 §
PGC
19,2 ± 17,6
14,0 ± 12,2
23,1 ± 23,0
0,003 §
PGA /PGC
9,52 ± 4,85
9,52 ± 5,23
7.86 ± 5,46
0,039 §
P
*
: GC vs
nadzor; P
§
: razlike med tremi skupinami. CON: Primeri z minimalno površno gastritis bila obravnavana kot nadzora; AG: atrofični gastritis; GC. Rak želodca
razdelitev po spolu in starosti, je pokazala, da je bil miR-320a izraz nižja pri ženskah GC kot v kontrolni skupini (p
= 0,035), in razlika je še posebej pomembno pri bolnikih, GC ženske, starejše od 60 let, v primerjavi s kontrolno skupino (p
= 0,008) (tabela 3). AUC miR-320a za odkrivanje GC bolnikov ženske, starejše od 60 let je bil 0,699. Najboljši cut-off point je bil 4,76, z občutljivostjo 65,2% (95% CI = 45,8-84,7%) in specifičnost 68,2% (95% CI = 48,7-87,6%). Smo tudi analizo naših podatkov in v H. pylori
razslojevanje, vendar ni bilo razlike med katero koli od skupin, kot je prikazano v tabeli 4.Table analize 3 stratifikacija serumu ravni miR-320a med različnimi skupinami želodčnih bolezni (povprečje ± SD )
miRNA

CON (n)
AG (n)
GC (n)
P-
vrednost
miR-320a
Moški
≥60
5,02 ± 0,44 (27)
4,96 ± 0,43 (28)
4,99 ± 0,46 (26)
0,796
< 60
5,03 ± 0,53 (38)
5,05 ± 0,49 (33)
5.01 ± 0,39 (33)
0.859
Moški
≥60
4,98 ± 0,46 (22)
4,77 ± 0,39 (24)
4,63 ± 0,41 (23)
0,008 *
< 60
4,88 ± 0,31 (16)
4,91 ± 0,39 (9)
4,92 ± 0,42 (12)
0,774
P
*
: GC vs
nadzor. n pomeni število vzorcev vsake podskupine.
Tabela 4 stopnje izražanja serumskih miRNAs (povprečje ± SD), PG (mediana ± SD) med različnimi skupinami želodčnih bolezni, ko razdeljeni glede na stanje H. pylori
spremenljivke

CON
AG
GC
P-
vrednost
HP-
miR-20a-5P
3,83 ± 0,71
3,88 ± 0,59
3,85 ± 0,70
0,926
Male
3,84 ± 0,72
3,90 ± 0,59
3,89 ± 0,34
0,931
Moški
3,82 ± 0,71
3,86 ± 0,60
3,75 ± 0,53
0,881
naj-7a
3,74 ± 0,31
3,81 ± 0,31
3,76 ± 0,25
0,505
Moški
3,73 ± 0,31
3,84 ± 0,34
3,77 ± 0,25
0,36
Moški
3,76 ± 0,30
3,76 ± 0,28
3,74 ± 0,27
0,972
miR-320a
5,02 ± 0,48
4,90 ± 0,45
4,91 ± 0,47
0,311
Male
5,03 ± 0,50
4,97 ± 0,48
4,98 ± 0,44
0.813
Moški
4.99 ± 0,44
4,81 ± 0,41
4,74 ± 0,50
0.216
PGA
134.99 ± 92.27
96.78 ± 76.05
141,99 ± 125.80
0,056
PGC
15.13 ± 13.67
10,37 ± 9,02
23.15 ± 25.11
0.001
PGA /PGC
10,66 ± 4,81
11,00 ± 6,04
9,17 ± 6,28
0,22
Hp +
miR-20a-5P
3,69 ± 0,78
3,79 ± 0,79
3,81 ± 0,66
0.743
moški
3,75 ± 0,86
3,90 ± 0,31
3,86 ± 0,82
0,785
moški
3,62 ± 0,66
3,53 ± 0,55
3,74 ± 0,43
0,542
naj-7a
3,68 ± 0,38
3,74 ± 0,27
3,74 ± 0,31
0,661
Moški
3,70 ± 0,31
3,73 ± 0,30
3,77 ± 0,33
0,717
Moški
3,66 ± 0,48
3,75 ± 0,18
3,70 ± 0,28
0,795
miR-320a
4,95 ± 0,44
4,98 ± 0,45
4,89 ± 0,40
0,634
Moški
5.01 ± 0.49
5,05 ± 4,59
5,05 ± 0,46
0,961
Moški
4,87 ± 0,36
4,81 ± 0,38
4,72 ± 0,36
0,471
PGA
162,15 ± 112,44
125,81 ± 92,66
114,74 ± 75,23
0,058
PGC
24.82 ± 20.80
17.86 ± 13.95
23,10 ± 20,16
0,182
PGA /PGC
7,91 ± 4,49
7,97 ± 3,70
6,16 ± 3,57
0,06
korelacije med izražanje serumskih miRNAs in njihovimi predvidene ciljne PG molekule
za združenje analizo, miR-20a-5P izraz ni bila povezana z PGA ravni (r = 0.110, p
= 0,269), in naj-7a in miR-320a ni bila povezana z PGC stopnje (r = -0,162, -0,102; p
= 0,102, 0,306, v tem zaporedju), vendar so bili vsi pozitivni korelaciji z /PGC razmerje PGA (r = 0,408, 0,255, 0,324; p
= < 0,001, 0,009, 0,001, v tem zaporedju) (slika 1). V primerjavi z študiral miRNAs in predvidene ciljne PG molekule s kontrolami, smo ugotovili, serumsko koncentracijo PGA pri bolnikih GC so se znižale (130,1 ± 107,1 v primerjavi z 146,3 ± 101,5, p
= 0,276) so se povečale, in PGC vrednosti pri bolnikih GC (23,1 ± 23,0 proti 19,2 ± 17,6 p
= 0,174), vendar razlike niso bile statistično značilne. V /PGC razmerje PGA v skupini GC je zmanjšala (7,86 ± 5,46 vs. 9,52 ± 4,85, p
= 0,039, tabela 2), s korelacijskim koeficientom 0.727 (slika 1). V primerjavi s kontrolno skupino, so se znižale vrednosti miR-320a v serumu (4,90 ± 0,44 vs. 4,99 ± 0,46, p
= 0,153) in serumsko koncentracijo PGC so v skupini GC povečala (23,1 ± 23,0 proti 19,2 ± 17,6 p
= 0,174), kar kaže na videz nasprotne težnje, vendar razlike niso bile statistično značilne (tabela 2). Slika 1 Raztreseni plot graf. Slika 1 A - C. graf raztrosa ravni v serumu miRNA in njihove korelacije z PGA /PGC razmerja iz kontrolne skupine. A. miR-20a-5P; B. naj-7a; C. miR-320a. Slika 1-D. Raztros graf korelacije med serumskih vrednosti PGA in PGC. Vse graf raztrosa pokazala pridružitvenega analizo variant med x in y osi.
Razprava
so Nedavne ugotovitve predstavila v serumu /plazmi miRNAs kot potencialnih biomarkerjev za več bolezenskih stanj, vključno s človeškimi raka [28-31]. Vendar pa so bile študije serumskih miRNAs v zvezi z želodčnih bolezni omejeni, in ne pozornost je bila posvečena miRNAs serijsko ciljajo na isti gen. Ki temelji na nizu miRNAs s bioinformatika programsko opremo, predvidenih za ciljanje na PGA in /ali PGC, smo izbrali MIR-20a-5P, pustite-7a in MIR-320a za nadaljnji študij. Raziskovali smo potencial pokoj-20a-5p, naj-7a in miR-320a pri diagnozi AG ali GC in korelacije treh miRNAs z njihovih predvidenih ciljnih molekul PGA, PGC in PGA /PGC razmerje. Izraz miR-320a je bila pri starejših bolnikih GC ženske nižja kot v kontrolni skupini, kar pomeni, da lahko miR-320a dragocena marker za diagnosticiranje starejše ženske z GC. miR-20a-5p, pustil-7a in miR-320a so v pozitivni korelaciji z /PGC razmerje PGA, ki bi lahko posredno odražajo funkcionalno stanje želodčne sluznice.
Številne študije so ugotovili tumor specifične miRNAs sprememb v plazmi /serumu bolnikov z rakom, in so pokazale potencial obtoku miRNAs kot novih neinvazivnih biomarkerjev za odkrivanje raka [12, 32]. Rezultati naše raziskave ne kažejo razlik v serumu pokoj-20a-5p in naj-7a ravni med kontrolami, AG in GC skupine, medtem ko miR-320a izraz padel skozi kontrole, AG in GC skupine. Serumsko koncentracijo miR-320a je bila pri bolnikih, GC ženske nižja kot v kontrolni skupini, in ta razlika je še posebej izrazito pri starejših ženskah, starih nad 60 let, kar pomeni, da lahko miR-320a nov klinični biomarkerjev za GC diagnostike prebivalstva specifičnosti. Študije pokoj-320a do danes so bili omejeni na svojo vlogo pri urejanju fiziološke funkcije krvno-možgansko pregrado [33], in v intrahepatično holangiokarcinom [34, 35], debelega črevesa raka [36] in levkemije [37]. Kolikor nam je znano, trenutno študija je prvi poročal, da bi miR-320a deluje kot serumu biomarker GC, predvsem pri starejših ženskah. Čeprav so malo študij raziskati mehanizme, nekateri so poročali razmerje med svoje predvidene ciljne PGC in spol, medtem ko so poročali, da je bil /PGC razmerje PGA povezana s starostjo, vendar samo pri ženskah [38, 39]. Programska oprema je tudi napovedal, da miR-320a cilja receptorjev gama, povezanega z estrogenom (http://​www.​targetscan.​org/​cgi-bin/​targetscan/​mamm_​31/​targetscan.​cgi?​species=​Human&​gid=​&​mir_​c=​&​mir_​nc=​&​mirg=​hsa-miR-320). Te linije dokazov vsi kažejo, da lahko miR-320a igrajo pomembno vlogo pri razvoju GC pri ženskah, in lahko posredno odražajo funkcionalno stanje želodčne sluznice. Njegova uporaba kot biomarker bi povezano s prednostmi prepovedi invazije, nizki ceni in višji stabilnosti. Vendar pa so potrebne nadaljnje študije na večjih vzorcih, naj pojasni svoje mehanizme in preveri njegovo uporabo kot biomarker pri starejših ženskah z GC. Seveda so spremembe miRNAs morda ne le v zvezi s spremembami na želodcu funkcijo sluznice pogoji, ampak tudi v zvezi z nekaterimi drugimi dejavniki, za primere anemije [40], spodbuda patogenih mikroorganizmov, kot so H.pylor
[41 ] i, nekateri proteini, vključeni v miRNAs obdelavo poti kot Drosha, Kocka in Argonaute [42, 43]. Drugi dejavniki, povezani treba upoštevati pri nadaljnjih raziskavah v prihodnosti.
Ravni Serum PGA in PGC se zdi, da so povezani z želodčne sluznice žleznega in celičnih količinah, in tudi posredno odražajo funkcijo sekretarja želodčne korpusa in /ali želodca antruma. PGA se izloča iz želodca korpusa in želodca kotom, medtem ko je PGC izloča iz vseh želodca, vključno corpus, kota in antruma. Padec PGC razmerju PGA /odraža razvoj atrofije poškodb na želodčne sluznice [16], in nizko /PGC razmerje PGA je povezana z visokim tveganjem GC [38, 44, 45]. To je torej uporabljen kot učinkovit parameter za pregledovanje posameznikov z velikim tveganjem GC v populaciji, in lahko klinično uporabna biomarker GC in predrakavih bolezni, kot AG [16, 38, 46, 47]. Broutet sod. je poročal, da čeprav je bil PGC izloča iz različnih lokacij v želodcu, je bila povezana z PGA; medtem ko PGA hitro poveča, PGC nekoliko spreminja, in koeficient korelacije je dosegel 0,75 [38]. Sedanja študija izračuna tudi korelacijski koeficient med PGA in PGC za 0.727. To razmerje lahko pojasni, zakaj je razmerje PGA /PGC odraža funkcionalno stanje želodčne sluznice natančneje od obeh PGA ali PGC sam. Naša raziskava je pokazala, da ni povezave med izražanjem pokoj-20a-5p in PGA, naj-7a in PGC, ali miR-320a in PGC, vendar je bilo pozitivna korelacija med vsako od treh in PGA /PGC razmerje, ki je že znana kot koristen biomarker za diagnozo bolezni ter proučevali miRNAs so hkrati z znanim PGA /PGC razmerja, ki kažejo svoj potencial kot koristni biomarkerjev za diagnosticiranje bolezni.
Glede H. pylori
je pomemben okoljski dejavnik v želodcu, ki tudi razred Icarcinogen opredeljuje Svetovna zdravstvena organizacija (WHO), smo analizo tri miRNAs v HP razslojevanje med različnimi želodčnih bolezni, vendar ni našel razlike. Ali H. pylori
in /ali drugi okoljski dejavniki vplivajo na to združenje potrebuje več študij v večjih vzorcih v prihodnosti.
Bilo je nekaj omejitev v naši raziskavi. Prvo lahko izbrani miRNAs funkcionalno ciljno PGA /C in /ali vsaj Šele dokaz programska oprema biološke informacije, so potrebni nekateri dokazi za nadaljnje funkcionalne eksperimentov. Drugič, in je njena napovedal tarčni protein potrebno korelacija izražanja v tkivu miRNAs za nadaljnjo preiskavo. Tretjič, korelacija miRNAs izražanja in clinicopathological značilnosti bolnikov z rakom želodca, kot klasifikaciji BORRMANN je, vzorec rasti, stopnji TNM, globina invazije in bezgavk metastaz, et al. niso bili dodatno analizirani, ker-biopsijo omejeno informacij manjka. Četrti je vir kontrol ni normalna populacija vendar z minimalno površinski gastritis po patološke diagnoze in gastritis bil pripada tudi kaskado razvoja GC.
Zaključek
Na koncu smo dokazali, da je serum miR- 320a ravni so bile nižje pri ženskah GC starejših od 60 let, kot v kontrolni skupini, in lahko tako predstavlja dragocen marker za diagnosticiranje GC v tej skupini. In ravni pokoj-20a-5p, naj-7a in miR-320a so v pozitivni korelaciji s PGA /PGC razmerja, ki bi lahko posredno odražajo funkcionalno stanje želodčne sluznice.
Opombe
Qian Xu, Qi- Guan Dong prav tako prispevali k temu delu
Kratice
miRNA.
microRNA
PG:
Pepsinogen

PGA:
Pepsinogen
PGC:
Pepsinogen C
QRT-PCR:
kvantitativna povratne prepisu verižno reakcijo s polimerazo
ELISA:
encimsko-imunskim testom
ROC krivulja:
sprejemnik deluje karakteristike

AUC:
območje pod krivuljo
nt:
nukleotidov
cDNA :
komplementarna DNA
AG:
atrofični gastritis
GC.
rak želodca


IZJAVE
Zahvala
to delo je podprta s sredstvi iz državnega Key Temeljni raziskovalni program Kitajske (973 Program ref št. 2010CB529304), National Natural Science Foundation of China (Ref No.31200968) in Fundacija za znanost in tehnologijo v provinci Liaoning (ref št. 2011225002).
Avtorji "prvotna predložiti datoteke za slike
Spodaj so povezave s prvotno predloženih spisov avtorjev za slike. "Izvirno datoteko na sliki 1 12907_2012_129_MOESM2_ESM.doc avtorjev 12907_2012_129_MOESM1_ESM.pdf avtorjev prvotni datoteki slika 2 nasprotujočimi si interesi
Vsi avtorji prebrali in potrdil končni rokopis, in nimajo komercialnega ali drugo združenje, ki bi lahko povzročile nasprotje interesov prispevki.
avtorjev
YY zasnovana in izdelana te študije in popravljen rokopis. QG-D je bil odgovoren za poskus in opravili interpretacijo podatkov. QX sodeluje pri pisanju papir in revizijo rokopis kritično za pomemben intelektualni vsebino. LP-S sodeloval pri zasnovi študije delno. CY-H izvedli statistično analizo. Vsi avtorji prebrali in potrdil končni rokopis.

• Dušikov oksid-endogeni inhibitor izločanja želodčne kisline pri izoliranem človeške želodčne glands
• CD44 /CD24 Izražanje v ponavljajočimi raka želodca: retrospektiva analysis