Uttrykk av serum MIR-20a-5p, la-7a, og MIR-320a og deres korrelasjon med pepsinogen i atrofisk gastritt og magekreft: en case-control study

uttrykk for serum MIR-20a-5p, la-7a, og speil 320a og deres korrelasjon med pepsinogen i atrofisk gastritt og magekreft: en case-control studie
Abstract
Bakgrunn
identifisering av serie mirnas rettet mot samme funksjonelle mage protein kan gi nye og effektive serologiske biomarkører for diagnostisering av magekreft (GC). Målet med denne studien var å vurdere potensialet i MIR-20a-5p, la-7a og MIR-320a i diagnostisering av AG eller GC og korrelasjonen av de tre mirnas med sine spådd målmolekylene PGA, PGC og PGA /PGC forhold.
Metoder
totalt 291 pasienter inkludert 103 kontroller (CON), 94 med atrofisk gastritt (AG) og 94 med GC. Nivået av serum mirnas ble påvist ved kvantitativ revers transkripsjon-polymerasekjedereaksjon, og serum pepsinogen A (PGA) og C (PGC) ble bestemt ved hjelp av enzymbundet immunosorbent assays.
Resultater
Serum MIR-320a nivå redusert igjennom kontrollene, AG og GC grupper som var de kaskader av GC utvikling, mens det var ingen signifikante forskjeller i nivåene av MIR-20a-5p og la 7a blant kontrollene, AG og GC grupper. Når stratifisert etter kjønn og alder, serum MIR-320a uttrykk var lavere hos kvinner GC pasienter enn hos kontrollgruppen (p
= 0,035), særlig hos kvinner GC pasienter eldre enn 60 år (p
= 0,008). For å skille kvinnelige GC pasienter over 60 år, arealet under mottaker drift karakteristikk for MIR-320a var 0,699, og den beste cut-off point var 4,76 med en sensitivitet på 65,2% og spesifisitet på 68,2%. Når det gjelder sammenhengen mellom den valgte MIR-20a-5p, la-7a, MIR-320a og PG, fant vi at det var positive korrelasjoner mellom alle de tre og forholdet mellom PGA /PGC (r = 0,408, 0,255, 0,324; p
= < 0,001, 0,009, 0,001, henholdsvis), men det var ingen sammenheng mellom ekspresjonen av serum MIR-20a-5p og dens forutsagte mål PGA, eller mellom la-7a og MIR-320a og deres forutsagte mål PGC . Serum MIR-320a ble redusert og PGC ble øket i GC-gruppen sammenlignet med kontrollgruppen.
Konklusjoner
Nivåer av serum MIR-320a var lavere hos kvinner GC pasienter eldre enn 60 enn i kontrollene, som kan tilveiebringe en potensiell verdifull markør for diagnostisering av eldre kvinner med GC. Nivåene av serum MIR-20a-5p, la-7a og MIR-320a ble positivt korrelert med PGA /PGC, som indirekte kan gjenspeile den funksjonelle status av mageslimhinnen.
Nøkkelord
Serum mikroRNA Biomarker pepsinogen Gastric sykdom bakgrunn
Det er viktig å utforske sensitive, spesifikke og ikke-invasive kreft biomarkører som kan brukes for tidlig diagnose, estimering prognose, og prognoser gjentakelse. MicroRNAs (mirnas) er en klasse av sterkt konserverte og endogene ikke-kodende RNA 19-24 nukleotider lange, som regulerer ekspresjonen av målgener ved post-transkripsjonelle nivå. Samle bevis indikerer at mirnas er involvert i viktige biologiske prosesser knyttet til spredning, apoptose, differensiering, metastase, angiogenese og immunrespons, mens deregulering av miRNAs kan være avgjørende i kreft initiering, progresjon og behandlingsresultat [1, 2]. Det har nylig blitt vist at humant serum eller plasma inneholder store mengder av stabile mirnas, ekspresjons-profiler som potensielt kan brukes til å identifisere forskjellige typer kreft, inkludert prostata cancer, stor B-celle lymfom, eggstokk-kreft, leverkreft og ikke- . -små celle lungekreft [3-7]
mirnas er en del av et komplekst regulatorisk nettverk; multiple gener kan reguleres ved en miRNA, men et enkelt gen kan også være diskret regulert av en gruppe av mirnas [2]. Få studier har undersøkt sammenhengen mellom serum mirnas og mage sykdommer [8, 9], flere studier fokusert på plasma mirnas uttrykk [10-12], Liu H et al. identifisert MIR-378 som et serum biomarkør [8], og Liu R et al. utvalgte fem mirnas (MIR-1, ^ 20, -27a, -34 og -423-5p) som et fingeravtrykk for GC diagnose [9]. Men ingen oppmerksomhet har blitt betalt til målretting av det samme genet ved serie miRNAs. Imidlertid kan slike studier bidra til å avklare de vanligste funksjonene i serie mirnas rettet mot enkeltgener og dermed forbedre vår forståelse av sine roller i magekreft (GC) og forstadier til sykdommer.
Menneske pepsinogens (PGS) er inaktive pro-enzymer i spesifikk digestive enzym pepsin, som stammer fra den gastriske slimhinne, og kan klassifiseres biokjemisk og immunokjemisk til PGA og PGC [13, 14]. Tidligere studier viste at PGC ekspresjon var negativt korrelert med graden av malignitet av mageslimhinnen og utvikling av gastriske lesjoner [15]. En lav PGA /PGC-forhold kan brukes som en serologisk biomarkør av atrofisk gastritt (AG), som er kjent for å være en forstadier tilstand [15, 16]. Flere mirnas har blitt identifisert av to target gen-forutsi programvarepakker (mikrokosmos Mål og TargetScan human), hvorav noen målrettede PGA (MIR-212, MIR-132, MIR-20a-5p, MIR-93) eller PGC (speil 662, MIR-365, la-7a, MIR-320a). De mirnas nært knyttet til GC eller andre kreftformer ble valgt for videre undersøkelser i denne studien. MIR-20a-5p, et medlem av MIR-17-92 klynge, ble oppregulert i mage, tykktarms og bukspyttkjertelen adenokarsinomer in situ product: [17-19], vev uttrykk for skuffelse 7a ble korrelert med lymfeknutemetastase av GC [20], og MIR-320a ble nedregulert i primær brystkreft og korrelert med invasjon og metastase [21-23]. Disse tre mirnas har tidligere bare blitt undersøkt in situ
, og de fleste studier har fokusert på sine funksjoner; ingen studier har undersøkt deres potensielle roller som serum biomarkører for diagnostisering av GC og forstadier sykdom. Og om de antatte funksjonelle mirnas (MIR-20a-5p, la-7a og MIR-320a) kunne identifiseres som en biomarkør for diagnostisering av GC og forstadier sykdom? Videre sine relasjoner med sine spådd mål pepsinogen er ukjent.
Denne studien derfor sikte på å evaluere potensialet i MIR-20a-5p, la-7a og MIR-320a i diagnostisering av GC og korrelasjonen av de tre miRNAs og PGA, PGC og PGA /PGC-forhold. Vi undersøkte serumnivåene av de tre utvalgte mirnas i GC og dens forstadier tilstand, samt korrelasjon mellom serum MIR-20a-5p og dens forutsagte mål PGA, og mellom serum la-7a og MIR-320a og deres forutsagte mål PGC . Resultatene kanskje identifisere flere verdifulle serologiske markører for gastriske sykdommer i en viss utstrekning, samt gi eksperimentelle bevis og referanse for å hjelpe til vår ytterligere forståelse av funksjonene til serum mirnas i ferd med kreftutvikling.
Methods
emner
En totalt 291 pasienter som gjennomgikk gastroskopi eksamen i første Affiliated Hospital of China Medical University 2004-2011 ble inkludert i denne studien. Informasjon om kjønn, alder og andre faktorer som ble oppnådd ved hjelp av et spørreskjema administrert til hver enkelt gjenstand. Studien ble godkjent av Human Etisk Review Committee of China Medical University. Skriftlig informert samtykke ble innhentet fra deltakerne i samsvar med Helsinkideklarasjonen og dens senere revisjon. Alle pasientene gjennomgikk endoskopisk mage mucosal biopsi, og lige snitt ble parafininnstøpte og farget av HE farging for histologisk diagnose som ble diagnostisert med to erfarne patologer. Saker med minimal overfladisk gastritt ble behandlet som kontrollene [24]. Den atrofisk gastritt gruppen ble definert i henhold til histopatologi. De histopatologiske diagnoser ble inkludert svak, moderat og alvorlighetsgrad, og bare karakteren av moderat og alvorlighetsgrad ble innrullert i denne case-control studie. Ninety-fire pasienter ble histologisk bekreftet adenokarsinom tilfeller; 75 kan bli klassifisert i henhold til Lauren klassifisering, mens 19 ikke kunne. Og blant de 75 tilfellene [25], 22 av de 75 GC tilfellene var tarmtype, 45 var den diffuse typen og 8 var blandet type. Prøvene i magekreft gruppe matchet i alders- og kjønnssammensetning med pasienter med kontroller og med atrofisk gastritt.
Serum RNA isolasjon og kvantitativ revers transkripsjon-polymerasekjedereaksjon (QRT-PCR) assay
Omtrent 6 ml veneblod ble oppsamlet fra hvert emne. Serum total RNA ble ekstrahert ved anvendelse av en metode som er beskrevet av Liu R et al. [9] med noen modifikasjoner. Serum ble separert ved sentrifugering ved 3000 g
i 10 minutter, etterfulgt av en 15 min høyhastighetssentrifugering ved 12.000 g
for å fjerne celleavfall. Supernatanten serum ble gjenvunnet og lagret ved -80 ° C inntil videre behandling. Total RNA ble ekstrahert fra 200 ul serum med syre fenol /kloroform rensing og sentrifugering i isopropylalkohol. Hver prøve ble tatt i 20 ul RNA-fri DDH 2o løsning og seks mikroliter av total RNA ble revers-transkribert til cDNA ved hjelp av One Step PrimeScript miRNA cDNA Synthesis Kit (Takara, Dalian, Kina). Real-time PCR ble utført ved hjelp av en miRcute miRNA qPCR deteksjon kit (Tiangen, Beijing, Kina) på termosykler Dice Real Time System (Takara). For å beregne nivåene av de mirnas, syntetisk HSA-MIR-20a-5p, HSA-la-7a og HSA-MIR-320a på kjente konsentrasjoner (Takara) ble også revers-transkribert og forsterket. Konsentrasjonen av hver miRNA ble så beregnet i henhold til standardkurven. Alle reaksjoner, inkludert ingen-mal kontroller, ble kjørt i duplikat.
Serum PG og H. pylori
nivåer
Serum PG konsentrasjoner og H.pylori
(HP) nivåer ble bestemt av enzymbundet immunosorbent assay (ELISA) med PGA, PGC og h.pylori
ELISA kits (Biohit Co., Ltd, Helsingfors, Finland) [16, 26, 27]. Prøvene ble analysert i tilfeldig rekkefølge, blind for histologi resultater. Hvert parti inkludert kommersielle kontroller og blindet plasma kontroller for å vurdere laboratorie variasjon. Alle plasma kontroller var innenfor gjennomsnitt ± 2 SDS. Fem prosent av alle prøver ble analysert i duplikat.
Statistisk analyse
log 10 av de miRNA kopitall representerte nivåene av de mirnas, og forskjeller i nivåene av miRNA blant grupper så vel som i lagdel analysen ble sammenlignet med en-veis analyse av varians. Mottaker som opererer karakteristiske (ROC) kurver og arealet under ROC-kurven (AUC) ble anvendt for å evaluere de diagnostiske effekter av mirnas og for å bestemme passende loddepunkter. Medianer serumkonsentrasjoner PG ble sammenlignet mellom de tre grupper så vel som i lagdelingen analyse ved hjelp av Kruskal-Wallis H-tester. Pearsons korrelasjonskoeffisient ble brukt for å beregne sammenhengen mellom mirnas og PG konsentrasjoner. Punktplottet var representerer korrelasjonsanalyse mellom serum miRNA nivåer og PGA /PGC-forhold, og mellom PGA og PGC nivåer. Alle statistiske analyser ble utført ved hjelp av SPSS 17.0 programvare (SPSS Inc. Chicago, USA). En tosidig p
verdi < 0,05 ble ansett som statistisk signifikant.
Resultater
demografi forsøkspersonene Bedrifter Den 291 deltakere inkludert 103 kontroller, 94 pasienter med AG og 94 med GC. Som vist i tabell 1, var det ingen signifikante forskjeller i forhold til kjønn (p
= 0,948), alder (p
= 0,654) og h.pylori
infeksjonsstatus (p
= 0,580) mellom tre groups.Table 1 Kjennetegn på forsøkspersonene
variabler
Kontroll
atrofisk gastritt
Magekreft kreft~~POS=HEADCOMP
n = 103

n = 94
n = 94
Kjønn
Mann fra 65 (63,1%)
61 (64,9%)
59 (62,8%)
Kvinne
38 (36,9%)
33 (35,1%)
35 (37,2%)
P
= 0,948
Alder (år)
Mean
59,1 ± 10,6
60,4 ± 11,2
60,2 ± 11,1
Rekkevidde
23-80
28-83
27-80
P
= 0,654
h.pylori
smittestatus
HP-
60 (58,3%)
48 (51,1%)
53 (56,4%)
Hp +
43 (41,7%)
46 (48,9%)
41 (43,6%)
P
= 0,580
Korrelasjoner mellom uttrykk av serum miRNAs og mage sykdommer
Det var ingen signifikante forskjeller i nivåene av speil 20a-5p og la 7a blant kontrollene, AG og GC grupper (p
= 0,581, 0,445, henholdsvis), men MIR-320A minket gradvis mellom de ulike gruppene (4,99 ± 0,46 vs. 4,94 ± 0,45 vs. 4,90 ± 0,44, p
= 0,152, Tabell 2) .table 2 nivåer av serum mirnas (gjennomsnitt ± SD), PG (median ± SD) mellom ulike mage sykdomsgrupper
variabler

CON
AG
GC
P-
verdi
MIR-20a-5p
3,77 ± 0,74
3,84 ± 0.69
3,83 ± 0,68
0,581
Mann fra 3,80 ± 0,77
3,90 ± 0,73
3,88 ± 0,78
0,59
Kvinne
3,72 ± 0,69
3,73 ± 0,60
3,75 ± 0,47
0,855
la-7a
3,72 ± 0,34
3,77 ± 0,29
3,75 ± 0,28
0,445
Mann fra 3,72 ± 0,31
3,78 ± 0,32
3,77 ± 0,28
0,367
Kvinne
3,71 ± 0,39
3,76 ± 0,24
3,72 ± 0,28
0,93
MIR-320a
4,99 ± 0,46
4,94 ± 0,45
4,90 ± 0,44
0,152
Mann fra 5,03 ± 0,49
5.01 ± 0.46
5.00 ± 0.42
0,76
Kvinne
4,93 ± 0,40
4,81 ± 0,39
4,73 ± 0,43
0,035 *
PGA
146,3 ± 101,5
111,0 ± 85,4
130,1 ± 107,1
0,044 §
PGC
19,2 ± 17,6
14,0 ± 12,2
23,1 ± 23,0
0,003 §
PGA /PGC
9,52 ± 4,85
9,52 ± 5,23
7,86 ± 5,46
0,039 §
P product: *
: GC vs
kontroll; P
§
: Forskjellen mellom de tre gruppene. CON: Saker med minimal overfladisk gastritt ble behandlet som kontrollene; AG: atrofisk gastritt; GC:. Magekreft
Stratifisering etter kjønn og alder viste at Mir-320a uttrykk var lavere hos kvinner GC pasienter enn hos kontrollgruppen (p
= 0,035), og forskjellen var spesielt viktig i kvinnelige GC pasienter eldre enn 60 år, sammenlignet med kontroller (p
= 0,008) (tabell 3). AUC for MIR-320a for å oppdage kvinnelige GC pasienter over 60 var 0,699. Den beste cut-off point var 4,76, med en sensitivitet på 65,2% (95% KI = 45,8 til 84,7%), og en spesifisitet på 68,2% (95% KI = 48,7 til 87,6%). Vi har også analyse våre data på H.pylori
lagdeling, men det var ingen forskjell mellom en hvilken som helst av gruppene som vist i tabell 3 4.Table Lagdeling analyse av serum MIR-320a nivå mellom forskjellige mage sykdomsgrupper (gjennomsnitt ± SD )
miRNA
CON (n)
AG (n)
GC (n)
P-
verdi
MIR-320a
Mann fra ≥60
5,02 ± 0,44 (27)
4,96 ± 0,43 (28)
4,99 ± 0,46 (26)
0,796
< 60
5,03 ± 0,53 (38)
5,05 ± 0,49 (33)
5,01 ± 0,39 (33)
0,859
Kvinne
≥60
4,98 ± 0,46 (22)
4,77 ± 0,39 (24)
4,63 ± 0,41 (23)
0,008 *
< 60
4,88 ± 0,31 (16)
4,91 ± 0,39 (9)
4,92 ± 0,42 (12)
0,774
P product: *
: GC vs
Control. n mener utvalget antall hver undergruppe.
Tabell 4 Expression nivåer av serum mirnas (gjennomsnitt ± SD), PG (median ± SD) mellom ulike mage sykdomsgrupper når stratifisert etter h.pylori status
variabler

CON
AG
GC
P-
verdi
HP-
MIR-20a-5p
3,83 ± 0,71
3,88 ± 0,59
3,85 ± 0,70
0,926
Mann fra 3,84 ± 0,72
3,90 ± 0,59
3,89 ± 0,34
0,931
Kvinne
3,82 ± 0,71
3,86 ± 0,60
3,75 ± 0,53
0,881
la-7a
3,74 ± 0,31
3,81 ± 0,31
3,76 ± 0,25
0,505
male 3,73 ± 0,31
3,84 ± 0,34
3,77 ± 0,25
0,36
Kvinne
3,76 ± 0,30
3,76 ± 0,28
3,74 ± 0,27
0,972
MIR-320a
5,02 ± 0,48
4,90 ± 0,45
4,91 ± 0,47
0,311
Mann fra 5,03 ± 0,50
4,97 ± 0,48
4,98 ± 0,44
0,813
Kvinne
4,99 ± 0,44
4,81 ± 0,41
4,74 ± 0,50
0,216
PGA
134,99 ± 92,27
96,78 ± 76,05
141,99 ± 125,80
0,056
PGC
15,13 ± 13,67
10.37 ± 9.02
23,15 ± 25,11
0,001
PGA /PGC
10,66 ± 4,81
11.00 ± 6.04
9.17 ± 6.28
0,22
Hp +
MIR-20a-5p
3.69 ± 0.78
3,79 ± 0,79
3,81 ± 0,66
0,743
male 3,75 ± 0,86
3,90 ± 0,31
3,86 ± 0,82
0,785
Kvinne
3,62 ± 0,66
3,53 ± 0,55
3,74 ± 0,43
0,542
la-7a
3,68 ± 0,38
3,74 ± 0,27
3,74 ± 0,31
0,661
Mann fra 3,70 ± 0,31
3,73 ± 0,30
3,77 ± 0,33
0,717
Kvinne
3,66 ± 0,48
3,75 ± 0,18
3,70 ± 0,28
0,795
MIR-320a
4,95 ± 0,44
4,98 ± 0,45
4,89 ± 0,40
0,634
male 5,01 ± 0,49
5.05 ± 4.59
5.05 ± 0.46
0,961
Kvinne
4,87 ± 0,36
4,81 ± 0,38
4,72 ± 0,36
0,471
PGA
162,15 ± 112,44
125,81 ± 92,66
114,74 ± 75,23
0,058
PGC
24,82 ± 20,80
17,86 ± 13.95
23,10 ± 20,16
0,182
PGA /PGC
7,91 ± 4,49
7,97 ± 3,70
6,16 ± 3,57
0,06
Korrelasjoner mellom uttrykk av serum miRNAs og deres spådd mål PG molekyler
For foreningen analyse ble MIR-20a-5p uttrykk ikke korrelert med PGA nivåer (r = 0,110, p
= 0,269), og la-7a og MIR-320a var ikke korrelert med PGC nivåer (r = -0,162, -0,102; p
= 0,102, 0,306, henholdsvis), men de var alle positivt korrelert med PGA /PGC-forhold (r = 0,408, 0,255, 0,324, p
= < 0,001, 0,009, 0,001, henholdsvis) (Figur 1). Når sammenlignet de studerte mirnas og de antatte målet PG molekyler med kontroller, fant vi serum PGA nivåer i GC pasienter ble redusert (130,1 ± 107,1 g 146,3 ± 101,5, p
= 0,276) ble, og PGC nivåer i GC pasienter økt (23,1 ± 23,0 vs. 19,2 ± 17,6 p
= 0,174), men forskjellene var ikke signifikante. PGA /PGC-forholdet i GC-gruppen ble redusert (7,86 ± 5,46 vs 9,52 ± 4,85, p
= 0,039, tabell 2), med en korrelasjonskoeffisient på 0,727 (figur 1). Sammenlignet med kontroller, ble serum MIR-320A nivåer redusert (4,90 ± 0,44 vs. 4,99 ± 0,46, p
= 0,153) og serum PGC nivåene ble økt i GC-gruppen (23,1 ± 23,0 vs. 19,2 ± 17,6 p
= 0,174), som viser tilsynelatende motsatte tendenser, men forskjellene var ikke signifikante (tabell 2). Figur 1 Spredeplottingen grafen. Figur 1-A - C. spredningsplott av serum miRNA nivåer og deres korrelasjon med PGA /PGC forhold fra kontrollgruppen. A. MIR-20a-5p; B. la-7a; C. MIR-320a. Figur 1-D. Den punktplott av sammenhengen mellom serum PGA og PGC nivåer. Alle punktplottet viste foreningen analyse av variantene mellom x og y-aksen
. Diskusjon
Nyere funn har presentert serum /plasma mirnas som potensielle biomarkører for flere sykdomstilstander, inkludert kreft hos mennesker [28-31]. Men studier av serum mirnas i forhold til mage sykdommer har vært begrenset, og ingen oppmerksomhet har blitt viet mirnas serielt rettet mot samme genet. Basert på en rekke mirnas spådd av bioinformatiske programvare for å målrette til PGA og /eller PGC, valgte vi MIR-20a-5p, la-7a og MIR-320a for videre studier. Vi undersøkte potensialet i MIR-20a-5p, la-7a og MIR-320a i diagnostisering av AG eller GC og korrelasjonen av de tre mirnas med sine spådd målmolekylene PGA, PGC og PGA /PGC forholdet. Uttrykket av MIR-320a var lavere hos eldre kvinnelige GC pasienter enn hos kontrollene, noe som tyder på at MIR-320a kan vise seg en verdifull markør for diagnostisering av eldre kvinner med GC. MIR-20a-5p, la-7a og MIR-320a var positivt korrelert med PGA /PGC-forhold, som indirekte kan reflektere den funksjonelle status av mageslimhinnen.
Flere studier har identifisert kreftspesifikke mirnas endringer i plasma /serum av kreftpasienter, og har vist potensialet av sirkulerende mirnas som nye ikke-invasive biomarkører for kreft screening [12, 32]. Resultatene fra vår studie indikerte ingen forskjeller i serum MIR-20a-5p og la 7a nivåer blant kontrollene, AG og GC grupper, mens MIR-320a uttrykk falt gjennom kontrollene, AG og GC grupper. Serum MIR-320A nivåene var lavere hos kvinner GC enn hos kontroller, og denne forskjellen var spesielt markert hos eldre kvinner, i alderen over 60, noe som tyder på at MIR-320a kan være en ny klinisk biomarkør for GC diagnose med befolknings spesifisitet. Studier av MIR-320a hittil har vært begrenset til sine roller i regulering av fysiologiske funksjoner i blod-hjerne-barrieren [33], og i intrahepatisk kolangiokarsinom [34, 35], tykktarmskreft [36] og leukemi [37]. Så langt vi kjenner til, er denne studien den første til å rapportere at MIR-320a kan fungere som et serum biomarkør for GC, særlig hos eldre kvinner. Selv om få studier har undersøkt dens mekanismer, har noen rapporterte en sammenheng mellom sin spådd målet PGC og kjønn, mens andre rapporterte at PGA /PGC-forholdet var relatert til alder, men bare i kvinner [38, 39]. Software har også spådd at Mir-320a er rettet mot østrogen-relaterte reseptor gamma (http://​www.​targetscan.​org/​cgi-bin/​targetscan/​mamm_​31/​targetscan.​cgi?​species=​Human&​gid=​&​mir_​c=​&​mir_​nc=​&​mirg=​hsa-miR-320). Disse linjer av bevis alle antyder at MIR-320a kan spille en viktig rolle i utviklingen av GC i kvinner, og kan indirekte reflekterer den funksjonelle tilstand av mageslimhinnen. Dens bruk som en biomarkør ville være forbundet med fordelene av ikke-invasjon, lave kostnader og høyere stabilitet. Men videre studier i større prøver for å avklare sine mekanismer og kontrollere dens bruk som en biomarkør hos eldre kvinner med GC. Selvfølgelig, endringer av mirnas kanskje ikke bare relatert med endringer av mage mucosal funksjonsforhold, men også beslektet med noen andre faktorer, for eksempel anemi [40], stimulans av sykdomsfremkallende mikroorganisme som H.pylor product: [41 ] i, noen proteiner som er involvert i mirnas behandling sti som drosha, dicer og argonaute [42, 43]. De andre faktorer knyttet bør vurderes i videre studier i fremtiden Serum PGA og PGC nivåer.
Synes å være relatert til mage slimhinnekjertel og cellulære mengder, og også indirekte reflektere sekretær funksjon av mage corpus og /eller mage antrum. PGA skilles fra mage corpus og gastrisk vinkel, mens PGC skilles fra hele magen, inkludert corpus, vinkel og antrum. En nedgang i PGA /PGC-forholdet reflekterer utviklingen av atrofiske lesjoner på maveslimhinnen [16], og en lav PGA /PGC-forholdet er relatert til en høy risiko for GC [38, 44, 45]. Det har derfor vært anvendt som en effektiv parameter for screening av individer med høy risiko for GC i befolkningen, og kan være et klinisk nyttig biomarkør av GC og forstadier til sykdommer slik som AG [16, 38, 46, 47]. Broutet et al. rapportert at selv om PGC ble utskilt fra forskjellige steder i magen, ble det knyttet til PGA; mens PGA økte raskt, PGC variert litt, og korrelasjonskoeffisienten nådde 0,75 [38]. Den aktuelle studien også beregnet en korrelasjonskoeffisient mellom PGA og PGC av 0,727. Dette forholdet kan forklare hvorfor PGA /PGC forholdet gjenspeiler den funksjonelle status av mageslimhinnen mer presist enn både PGA eller PGC alene. Vår studie fant ingen sammenheng mellom uttrykket av MIR-20a-5p og PGA, la-7a og PGC, eller MIR-320a og PGC, men det var positive sammenhenger mellom hver av de tre og PGA /PGC-forhold som allerede var kjent som en nyttig biomarkør for sykdom diagnose, og de studerte mirnas var synkron med den kjente PGA /PGC-forhold som tyder på sitt potensial som nyttige biomarkører for sykdom diagnose.
Vurderer H. pylori
er en viktig miljøfaktor i magen som er også en klasse Icarcinogen definert av Verdens helseorganisasjon (WHO), vi analyse av de tre mirnas i HP lagdeling mellom ulike mage sykdommer, men fant ingen forskjell. Enten h.pylori
og /eller andre miljøfaktorer påvirker denne foreningen trenger flere studier i større prøver i fremtiden.
Det var noen begrensning i vår studie. For det første kan de valgte mirnas funksjonelt målrette PGA /C og /eller i det minste var bare bevis av bioinformation programvare, er noen bevis for ytterligere funksjonelle eksperimenter nødvendig. For det andre korrelasjon av ekspresjon i vevet av mirnas og dens forutsagte målprotein er nødvendig for videre undersøkelser. For det tredje korrelasjonen av mirnas ekspresjon og clinicopathological karakteristika for pasienter med magekreft, slik som Borrmann klassifikasjon, vekstmønster, TNM stadium, invasjonsdybden og lymfeknutemetastase, et al. ble ikke videre analysert på grunn av biopsi begrenset informasjon mangler. For det fjerde, kilden til kontroller var ikke normalpopulasjonen, men med en minimal overfladisk gastritt i henhold til den patologiske diagnose, og gastritt ble også tilhører en kaskade av GC-utvikling.
Konklusjon
Avslutningsvis viste vi at serum speil 320A nivåene var lavere hos kvinner GC pasienter over 60 år enn i kontrollene, og kan dermed representere en verdifull markør for diagnostisering GC i denne gruppen. Og nivåene av MIR-20a-5p, la-7a og MIR-320a ble positivt korrelert med PGA /PGC-forhold, som indirekte kan reflektere den funksjonelle status av mageslimhinnen.
Merknader
Qian Xu, Qi- Guan Dong bidratt likt til dette arbeidet
Forkortelser
miRNA.
mikroRNA
PG:
pepsinogen

PGA:
pepsinogen En
PGC:
pepsinogen C
QRT-PCR:
kvantitativ revers transkripsjon polymerase chain reaction
ELISA:
Enzyme linked immunosorbent assay
ROC kurve:
Receiver opererer karakteristikk

AUC:
Arealet under kurven
nt:
nucleotide
cDNA :
komplementær DNA
AG:
atrofisk gastritt
GC.
Magekreft kreft~~POS=HEADCOMP


Erklæringer
Takk
Dette arbeidet støttes med tilskudd fra National Key Basic Research Program of China (973 Program Ref. 2010CB529304), National Natural Science Foundation of China (Ref No.31200968) og Foundation of Science and Technology i Liaoning-provinsen (Ref. 2011225002).
Forfattere 'originale legges filer for Images Nedenfor er de linker til forfatternes originale innsendte filer for bilder. 12907_2012_129_MOESM1_ESM.pdf Forfatteroriginalfilen for figur 1 12907_2012_129_MOESM2_ESM.doc Forfatteroriginalfilen for figur 2 konkurrerende interesser
Alle forfattere lese og godkjent den endelige manuskriptet, og ikke har en kommersiell eller annen forening som kan utgjøre en interessekonflikt bidrag.
Forfatternes
YY unnfanget og utviklet denne studien og revidert manuskriptet. QG-D var ansvarlig for forsøket og utførte data tolkning. QX involvert i å skrive på papiret og revidere manuskript kritisk for viktige intellektuelle innhold. LP-S deltok i utformingen av studien delvis. CY-H utført den statistiske analysen. Alle forfattere lese og godkjent den endelige manuskriptet.

• Nitrogenoksid-en endogen hemmer av magesyre sekresjon i isolerte humane mage kjertler
• CD44 /CD24 uttrykk i tilbakevendende magekreft: en retrospektiv analyse