Expression seerumin miR-20a-5p, let-7a, ja miR-320a ja niiden korrelaatioita pepsinogeeni atrofisessa gastriitti ja mahasyöpä a tapauskontrollitutkimuksessa

Expression seerumin miR-20a-5p, let-7a, ja miR-320a ja niiden korrelaatioita pepsinogeeni atrofisessa gastriitti ja mahasyöpä a tapauskontrollitutkimuksessa
tiivistelmä
tausta
tunnistaminen sarja miRNA kohdistaminen samat toiminnalliset mahalaukun proteiini voisi tarjota uusia ja tehokkaita serologista biomarkkereiden diagnosoimiseksi mahasyövän (GC). Tutkimuksen tavoitteena oli arvioida mahdollisuuksia miR-20a-5p, anna-7a ja miR-320a diagnosoinnissa AG tai GC ja korrelaatio kolmen miRNA niiden ennustetaan tavoite molekyylejä PGA, PGC ja PGA /PGC suhde. Tool menetelmät
yhteensä 291 potilaista 103 säätimet (CON), 94 atrofinen gastriitti (AG) ja 94 GC. Seerumin miRNA havaittiin kvantitatiivinen käänteistranskriptio-polymeraasiketjureaktiolla ja seerumin pepsinogeeni A (PGA) ja C (PGC) määritettiin entsyymi-immunologiset määritykset.
Tulokset
Seerumin miR-320a aleni kautta säätimet, AG ja GC ryhmiä, jotka olivat kaskadeista GC kehitystä, kun taas ei ollut merkittäviä eroja tasojen miR-20a-5p ja anna-7a keskuudessa valvontaa AG ja GC ryhmiä. Kun ositettu sukupuolen ja iän, seerumin miR-320a ilmentyminen oli matalampi naisilla GC potilailla kuin verrokeilla (p
= 0,035), erityisesti naisten GC potilaat yli 60-vuotiaita (p
= 0,008). Erottamiseksi naispuolinen GC potilaiden yli 60-, viljelyala vastaanotin toimii ominaiskäyrä miR-320a oli 0,699, ja paras rajakohta oli 4,76 herkkyydellä 65,2% ja spesifisyys 68,2%. Mitä tulee korrelaatiot valitun miR-20a-5p, let-7a, miR-320a ja PG, huomasimme, että siellä oli positiivisia korrelaatioita kaikkien kolmen ja suhde PGA /PGC (r = 0,408, 0,255, 0,324; p
= < 0,001, 0,009, 0,001, vastaavasti), mutta ei ollut suhdetta ilmaisua seerumin miR-20a-5p ja sen ennakoi maalin PGA, tai välillä anna-7a ja miR-320a ja niiden ennustetaan tavoite PGC . Seerumin miR-320a vähennettiin ja PGC nostettiin GC ryhmässä verrattuna kontrolliryhmään.
Johtopäätökset
Seerumin miR-320a olivat pienemmät naisten GC potilaat yli 60 kuin verrokeilla, jotka voivat tarjota potentiaali arvokas merkkiaine diagnosoimiseksi iäkkäiden naisten GC. Seerumin miR-20a-5p, anna-7a ja miR-320a oli korreloi positiivisesti PGA /PGC, joka voi epäsuorasti heijastaa toiminnallisen tilan mahalaukun limakalvon.
Avainsanat
Serum microRNA biomarkkereiden pepsinogeeni Mahalaukun tauti tausta
on tärkeää tutkia herkkä, erityiset ja ei-invasiivisia kasvain biomarkkerit, jota voidaan käyttää varhaisen diagnoosin, arvioimalla prognoosi, ja ennustaminen toistumisen. MikroRNA (miRNA) ovat luokan erittäin hyvin säilynyt ja endogeenisten ei-koodaavat RNA: t 19-24 nukleotidin pituisia, jotka säätelevät ilmentymistä kohde- geenien transkription jälkeisellä tasolla. Kertyvät todisteet osoittavat, että miRNA ovat mukana merkittävissä biologisissa prosesseissa liittyvät joukkotuhoaseiden leviämisen, apoptoosin, erilaistuminen, etäpesäke, angiogeneesi ja immuunivastetta, kun taas sääntelyn purkaminen miRNA voi olla ratkaiseva syövän aloittamista, etenemistä ja hoitotulokset [1, 2]. Se on äskettäin osoitettu, että ihmisen seerumi tai plasma sisältää suuria määriä vakaa miRNA ilmaisu profiilit joita voitaisiin mahdollisesti käyttää tunnistamaan eri syöpätyyppejä, mukaan lukien eturauhassyöpä, iso B-solujen lymfooma, munasarjasyöpä, maksasyöpä ja ei -Pieni keuhkosyöpä [3-7].
miRNA ovat osa monimutkaista sääntelyverkon; useita geenejä voidaan säädellä yhdellä miRNA, mutta yksi ainoa geeni voidaan myös hienovaraisesti säädellä ryhmä miRNA [2]. Harvat tutkimukset ovat tutkineet yhdistyksen välillä seerumin miRNA ja mahalaukun sairauksien [8, 9], useat tutkimukset keskittyivät plasman miRNA ilmaisun [10-12], Liu H et al. tunnistettu miR-378 kuin seerumin biomarkkereiden [8], ja Liu R et al. valitaan viisi miRNA (miR-1, -20a, -27a, -34 ja -423-5p), kuten sormenjälki GC diagnoosi [9]. Mutta mitään huomiota on kiinnitetty kohdistaminen saman geenin järjestysnumeroa miRNA. Tällaiset tutkimukset voivat auttaa selventämään yhteisten toimintojen sarja miRNA kohdistaminen yksittäisiä geenejä ja näin parantaa ymmärrystämme roolinsa mahasyövän (GC) ja precancerous sairaudet.
Human pepsinogeenia (PG) ovat inaktiivisia pro-entsyymejä erityisiä ruoansulatusentsyymien pepsiini, jotka ovat peräisin mahalaukun limakalvon ja voidaan luokitella biokemiallisesti ja immunokemiallisesti osaksi PGA ja PGC [13, 14]. Aiemmat tutkimukset osoittivat, että PGC ilmentyminen korreloi negatiivisesti aste maligniteetin mahalaukun limakalvon ja kehittäminen mahavaurioita [15]. Alhainen PGA /PGC suhdetta voidaan käyttää serologisissa biomarkkeri atrofinen gastriitti (AG), jonka tiedetään olevan precancerous ehto [15, 16]. Useita miRNA on tunnistettu kaksi kohdegeenin-ennustavat ohjelmistopaketteja (mikrokosmos tavoitteet ja TargetScan Human), joista osa kohdennettua PGA (miR-212, miR-132, miR-20a-5p, miR-93) tai PGC (asennuspalveli- 662, miR-365, let-7a, miR-320a). MiRNA liittyy läheisesti GC tai muiden maligniteettien valittiin lisätutkimuksia olevassa tutkimuksessa. miR-20a-5p, jäsen miR-17-92 klusteri, oli voimistunut mahalaukun, peräsuolen ja haiman adenokarsinooman situ
[17-19], kudosilmentämisen let-7a korreloi imusolmuke etäpesäke GC [20], ja miR-320a on säädellä vähentävästi ensisijainen rintasyöpä ja korreloivat invaasio ja etäpesäkkeiden [21-23]. Nämä kolme miRNA on vain aiemmin tutkittu in situ
, ja useimmat tutkimukset ovat keskittyneet niiden toiminnot; no on tutkittu niiden mahdollisia rooleja kuin seerumin biomarkkereita diagnosoimiseksi GC ja precancerous sairaus. Ja onko ennustettu toiminnallinen miRNA (miR-20a-5p, anna-7a ja miR-320a) voitaisiin tunnistaa biomarkkeri diagnosoimiseksi GC ja precancerous tauti? Lisäksi niiden suhteita niiden ennakoi maalin pepsinogeeni ei tunneta.
Vuoksi tutkimuksessa pyrittiin arvioimaan mahdollisuuksia miR-20a-5p, anna-7a ja miR-320a diagnosointiin GC ja korrelaatio kolmen miRNA ja PGA, PGC ja PGA /PGC suhde. Olemme tutkineet seerumin kolmen valitun miRNA GC ja sen verisyövän esiaste, sekä korrelaatio seerumin miR-20a-5p ja sen ennakoi maalin PGA, ja välillä seerumin anna-7a ja miR-320a ja niiden ennustetaan tavoite PGC . Tulokset ehkä tunnistaa useita arvokkaita serologisia merkkiaineita mahasairauksia jossain määrin, sekä tarjoaa kokeellista näyttöä ja viite tukea meidän edelleen toiminnan ymmärrystä seerumin miRNA prosessissa syövän. Tool Menetelmät
aiheet
yhteensä 291 potilaista, joille tehtiin gastroskopiatarpeeseen ensimmäisessä Affiliated sairaala China Medical University 2004-2011 otettiin tässä tutkimuksessa. Tietoa sukupuoli, ikä ja muut tekijät saatiin kyselylomakkeella annetaan kuhunkin aiheeseen. Tutkimuksen hyväksyi Human eettinen Review komitean Kiinan Medical University. Kirjallinen suostumus saatiin osallistujia mukaisesti Helsingin julistuksen ja sen myöhemmin tarkistamista. Kaikki potilaat saivat endoskooppinen mahalaukun limakalvon biopsia, ja biopsianäytteet upotettiin parafiiniin ja värjättiin HE värjäämällä histologista diagnoosia, joka oli diagnosoitu kaksi kokenutta patologia. Tapaukset minimaalisella pinnallinen gastriitti käsiteltiin valvontaa [24]. Atrofinen gastriitti ryhmä määriteltiin mukaan histopatologia. Histopatologisen diagnoosit oli mukana lievää, kohtalaista ja vakavuus, ja ainoastaan ​​luokka kohtalainen ja vaikeusaste oli ilmoittautunut tässä tapauskontrollitutkimuksessa. Yhdeksänkymmentäneljä potilasta histologisesti varmennettu mahalaukun adenokarsinoomaa tapauksissa; 75 voitaisiin luokitella Lauren luokitusta, kun taas 19 voinut. Ja joukossa 75 tapausta [25], 22 75 GC tapaukset olivat suolen tyyppiä, 45 olivat hajanainen tyyppi ja 8 olivat sekamuotoinen. Näytteet mahasyövän ryhmässä Hyväksytty ikä ja sukupuoli koostumus potilaiden hallintalaitteet ja atrofinen gastriitti.
Seerumin RNA: n eristys ja määrällinen käänteistranskriptio-polymeraasiketjureaktio (qRT-PCR) määritys
Noin 6 ml laskimoverta kerättiin kustakin aiheesta. Seerumin kokonais-RNA uutettiin käyttäen menetelmää, jonka Liu R et ai. [9] tietyin muutoksin. Seerumi erotettiin sentrifugoimalla 3000 g:
10 minuutin ajan, jota seurasi 15 min nopea sentrifugoimalla 12000 g
kokonaan solujätteen poistamiseksi. Supernatantti seerumi otettiin talteen ja säilytettiin -80 ° C: ssa, kunnes se jatkokäsiteltiin. Kokonais-RNA uutettiin 200 ui seerumin hapan fenoli /kloroformilla puhdistusta ja sentrifugoimalla isopropyylialkoholia. Jokainen näyte oli kaikki 20 ui RNA-vapaa DDH 2O ratkaisu ja kuusi mikrolitraa kokonais-RNA käänteistranskriboitua cDNA käyttämällä One Step PrimeScript miRNA cDNA Synthesis Kit (Takara, Dalian, Kiina). Reaaliaikainen PCR suoritettiin käyttäen miRcute miRNA qPCR havaitseminen pakki (Tiangen, Peking, Kiina) on lämpösyklilaitteeseen Dice Real Time System (TaKaRa). Laskea tasot miRNA, synteettinen HSA-miR-20a-5p, HSA-let-7a ja HSA-miR-320a on tunnettujen pitoisuuksien (TaKaRa) myös käänteistranskriptoidaan ja monistettiin. Pitoisuus Kunkin miRNA laskettiin sitten standardikäyrän. Kaikki reaktiot, mukaan lukien ei-templaattikontrollien, ajettiin kahtena.
Seerumin PG ja helikobakteeri
tasoilla
Seerumin PG pitoisuuksina ja helikobakteeri
(HP) tasot määritettiin entsyymilinkitetyllä (ELISA), jossa PGA, PGC ja helikobakteeri
ELISA (Biohit Co., Ltd., Helsinki, Suomi) [16, 26, 27]. Näytteet analysoitiin satunnaisessa järjestyksessä, sokea histologian tuloksiin. Jokainen erä kuului kaupallisia valvontaa ja sokaissut plasmakontrollit arvioida laboratorio vaihtelua. Kaikki plasmakontrollit sijaitsisi keskiarvo ± 2 SDS. Viisi prosenttia kaikista näytteistä analysoitiin kahtena kappaleena.
Tilastollinen analyysi
log 10 miRNA kopioiden lukumäärä edustaa tasojen miRNA, ja erot tasot miRNA ryhmien kesken sekä ositus analyysi verrattiin yksisuuntaisella varianssianalyysillä. Vastaanotin toimii (ROC) käyriä ja ala ROC-käyrän (AUC) käytettiin diagnoositietoja vaikutuksia miRNA ja määrittää asianmukaisen katkaisurajapisteet. Mediaanit seerumin PG pitoisuuksia verrattiin kolmesta ryhmästä sekä osituksen analyysin avulla Kruskal-Wallisin H testejä. Pearsonin korrelaatiokerrointa käytettiin arvioitaessa korrelaatio miRNA ja PG pitoisuuksina. Sirontakuvaaja oli edustaa korrelaatioanalyysiin välillä seerumin miRNA tasot ja PGA /PGC suhde, ja välillä PGA ja PGC tasolla. Kaikki tilastolliset analyysit suoritettiin käyttäen SPSS 17.0 ohjelmistolla (SPSS Inc. Chicago, USA). Kaksipuolinen p
arvo < 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä.
Tulokset
väestöjakauma tutkimushenkilöillä
291 aiheita mukana 103 valvonta, 94 potilaalla on AG: n ja 94 GC. Kuten taulukosta 1, ei ollut merkittäviä eroja sukupuolen (p
= 0,948), ikä (p
= 0,654) ja helikobakteeri
infektiotilanteesta (p
= 0,580) joukossa kolme groups.Table 1 Ominaisuudet tutkimushenkilöillä
muuttujat
Ohjaus
atrofinen gastriitti
Mahasyöpää
n = 103

n = 94
n = 94
Sukupuoli
Mies
65 (63,1%)
61 (64,9%)
59 (62,8%)
Nainen
38 (36,9%)
33 (35,1%)
35 (37,2%) B P
= 0,948
Ikä (vuotta) B Mean
59,1 ± 10,6
60,4 ± 11,2
60,2 ± 11,1
alueella
23-80
28-83
27-80
P
= 0,654
H.pylori
infektiotilanteesta
HP-
60 (58,3%)
48 (51,1%)
53 (56,4%) B Hp +
43 (41,7%)
46 (48,9%)
41 (43,6%) B P
= 0,580
väliset korrelaatiot ilmaus seerumin miRNA ja mahalaukun sairauksien
ei ollut merkittäviä eroja tasojen asennuspalveli- 20a-5p ja anna-7a keskuudessa valvontaa AG ja GC ryhmät (p
= 0,581, 0,445, tässä järjestyksessä), mutta miR-320a pinnat laskivat vähitellen kesken eri ryhmissä (4,99 ± 0,46 vs. 4,94 ± 0,45 vs. 4,90 ± 0,44, p
= 0,152, taulukko 2) .table 2 seerumin miRNA (keskiarvo ± SD), PG (mediaani ± SD) eri mahalaukun sairauksien ryhmiä
muuttujat

CON
AG
GC
P-
arvo
miR-20a-5p
3,77 ± 0,74
3,84 ± 0.69
3,83 ± 0,68
0,581
Mies
3,80 ± 0,77
3.90 ± 0,73
3,88 ± 0,78
0,59
Female
3,72 ± 0,69
3,73 ± 0,60
3,75 ± 0,47
0,855
let-7a
3,72 ± 0,34
3,77 ± 0,29
3,75 ± 0,28
0,445
Mies
3,72 ± 0,31
3,78 ± 0,32
3,77 ± 0,28
0,367
Female
3,71 ± 0,39
3,76 ± 0,24
3,72 ± 0,28
0,93
miR-320a
4,99 ± 0,46
4,94 ± 0,45
4,90 ± 0,44
0,152
Mies
5,03 ± 0,49
5,01 ± 0,46
5,00 ± 0,42
0,76
Nainen
4,93 ± 0,40
4,81 ± 0,39
4,73 ± 0,43
0,035 *
PGA
146,3 ± 101,5
111,0 ± 85,4
130,1 ± 107,1
0,044 §
PGC
19,2 ± 17,6
14,0 ± 12,2
23,1 ± 23,0
0,003 §
PGA /PGC
9,52 ± 4,85
9,52 ± 5,23
7,86 ± 5,46
0,039 §
P
*
: GC vs
valvonta; P
§
: eroa kolmen ryhmissä. CON: Tapaukset mahdollisimman vähän pinnallinen gastriitti käsiteltiin valvontaa; AG: atrofinen gastriitti; GC: mahasyöpä.
Jaottelu sukupuolen ja iän osoitti, että miR-320a ilmentyminen oli matalampi naisilla GC potilailla kuin verrokeilla (p
= 0,035), ja ero oli erityisen merkittävä naisten GC potilaat yli 60 vuotta, verrattuna kontrolleihin (p
= 0,008) (taulukko 3). AUC miR-320a havaitsemiseksi naisten GC potilaat yli 60 oli 0,699. Paras rajakohta oli 4,76, joiden herkkyys on 65,2% (95% CI = 45,8-84,7%) ja spesifisyys 68,2% (95% CI = 48,7-87,6%). Olemme myös analyysi meidän tietojen H.pylori
kerrostuneisuus, mutta ei ollut eroa tahansa ryhmistä kuten taulukossa 4.Table 3 ositus analyysi seerumin miR-320a tason eri mahalaukun sairauksien ryhmissä (keskiarvo ± SD ) B miRNA
CON (n)
AG (n)
GC (n)
P-
arvo
miR-320a
Mies
≥60
5,02 ± 0,44 (27) B 4,96 ± 0,43 (28) B 4,99 ± 0,46 (26)
0,796
< 60
5,03 ± 0,53 (38) B 5,05 ± 0,49 (33) B 5,01 ± 0,39 (33) B 0,859
Female
≥60
4,98 ± 0,46 (22) B 4,77 ± 0,39 (24) B 4,63 ± 0,41 (23) B 0,008 *
< 60
4,88 ± 0,31 (16) B 4,91 ± 0,39 (9) B 4,92 ± 0,42 (12) B 0,774
P
*
: GC vs
Ohjaus. n tarkoittaa näytteen numero kunkin alaryhmän.
Taulukko 4 Expression seerumin miRNA (keskiarvo ± SD), PG (mediaani ± SD) eri mahan tautiryhmistä kun ositettu H.pylori tila
muuttujat

CON
AG
GC
P-
arvo
HP-
miR-20a-5p
3,83 ± 0,71
3,88 ± 0,59
3,85 ± 0,70
0,926
Mies
3,84 ± 0,72
3.90 ± 0,59
3,89 ± 0,34
0,931
Nainen
3,82 ± 0,71
3,86 ± 0,60
3,75 ± 0,53
0,881
let-7a
3,74 ± 0,31
3,81 ± 0,31
3,76 ± 0,25
0,505
Mies
3,73 ± 0,31
3,84 ± 0,34
3,77 ± 0,25
0,36
Female
3,76 ± 0,30
3,76 ± 0,28
3,74 ± 0,27
0,972
miR-320a
5,02 ± 0,48
4,90 ± 0,45
4,91 ± 0,47
0,311
Mies
5,03 ± 0,50
4,97 ± 0,48
4,98 ± 0,44
0,813
Nainen
4,99 ± 0,44
4,81 ± 0,41
4,74 ± 0,50
0,216
PGA
134,99 ± 92,27
96,78 ± 76,05
141,99 ± 125,80
0,056
PGC
15,13 ± 13,67
10,37 ± 9,02
23,15 ± 25,11
0,001
PGA /PGC
10,66 ± 4,81
11.00 ± 6,04
9,17 ± 6,28
0,22
Hp +
miR-20a-5p
3,69 ± 0,78
3,79 ± 0,79
3,81 ± 0,66
0,743
Mies
3,75 ± 0,86
3.90 ± 0,31
3,86 ± 0,82
0,785
Female
3,62 ± 0,66
3,53 ± 0,55
3,74 ± 0,43
0,542
let-7a
3,68 ± 0,38
3,74 ± 0,27
3,74 ± 0,31
0,661
Mies
3,70 ± 0,31
3,73 ± 0,30
3,77 ± 0,33
0,717
Nainen
3,66 ± 0,48
3,75 ± 0,18
3,70 ± 0,28
0,795
miR-320a
4,95 ± 0,44
4,98 ± 0,45
4,89 ± 0,40
0,634
Mies
5,01 ± 0,49
5,05 ± 4,59
5,05 ± 0,46
0,961
Female
4,87 ± 0,36
4,81 ± 0,38
4,72 ± 0,36
0,471
PGA
162,15 ± 112,44
125,81 ± 92,66
114,74 ± 75,23
0,058
PGC
24.82 ± 20.80
17,86 ± 13.95
23,10 ± 20,16
0,182
PGA /PGC
7,91 ± 4,49
7,97 ± 3,70
6,16 ± 3,57
0,06
väliset korrelaatiot ilmaus seerumin miRNA ja niiden ennakoi maalin PG-molekyylit
yhdistyksen analyysi, miR-20a-5p ilmentyminen ei korreloi PGA tasolla (r = 0,110, p
= 0,269), ja anna-7a ja miR-320a eivät korreloi PGC tasot (r = -0,162, -0,102; p
= 0,102, 0,306, vastaavasti), mutta ne olivat kaikki korreloi positiivisesti PGA /PGC-suhde (r = 0,408, 0,255, 0,324, p
= < 0,001, 0,009, 0,001, vastaavasti) (kuvio 1). Kun verrataan tutkituissa miRNA ja ennakoi maalin PG-molekyylien kanssa tarkastuksia, löysimme seerumin PGA tasot GC potilasta laski (130,1 ± 107,1 vs. 146,3 ± 101,5, p
= 0,276), ja PGC tasot GC potilasta lisääntynyt (23,1 ± 23,0 vs. 19,2 ± 17,6 p
= 0,174), vaikka erot eivät olleet merkittäviä. PGA /PGC suhde GC ryhmässä laski (7,86 ± 5,46 vs. 9,52 ± 4,85, p
= 0.039, taulukko 2), jonka korrelaatiokerroin on 0,727 (kuva 1). Verrattuna kontrolleihin, seerumin miR-320a-tasot laskivat (4,90 ± 0,44 vs. 4,99 ± 0,46, p
= 0,153) ja seerumin PGC kohoamiseen GC ryhmässä (23,1 ± 23,0 vs. 19,2 ± 17,6 p
= 0,174), joka osoittaa ilmeisesti vastapäätä taipumuksia, vaikka erot eivät olleet merkittäviä (taulukko 2). Kuva 1 sirontakuvaaja kuvaaja. Kuvio 1-A - C. sirontakuvaajaan seerumin miRNA tasoilla ja niiden korrelaatioita PGA /PGC suhde on kontrolliryhmään. A. miR-20a-5p; B. let-7a; C. miR-320a. Kuva 1-D. Sirontakuvaaja välisen korrelaation seerumin PGA ja PGC tasolla. Kaikki sirontakuvaajaan osoitti yhdistys analyysi varianttien välillä x ja y-akselilla.
Keskustelu
Viimeaikaiset havainnot ovat esittäneet seerumi /plasma miRNA mahdollisina biomarkkereita useiden sairaustilojen, mukaan lukien ihmisen syövistä [28-31]. Kuitenkin tutkimukset seerumin miRNA suhteessa mahalaukun sairaudet on rajallinen, eikä huomiota on kiinnitettävä miRNA sarjatuotantona kohdistaminen samaa geeniä. Perustuen sarjan miRNA ennusti bioinformatiikan ohjelmisto kohdistaa PGA ja /tai PGC, valitsimme miR-20a-5p, anna-7a ja miR-320a jatkotutkimuksiin. Tutkimme mahdollisuuksia miR-20a-5p, anna-7a ja miR-320a diagnosoinnissa AG tai GC ja korrelaatio kolmen miRNA niiden ennustetaan tavoite molekyylejä PGA, PGC ja PGA /PGC suhde. Ilmaisu Mir-320a oli alempi vanhemmissa naisten GC potilaita kuin verrokeilla, mikä viittaa siihen, että miR-320a voi osoittautua arvokkaaksi merkkiaine diagnosoimiseksi iäkkäiden naisten GC. miR-20a-5p, anna-7a ja miR-320a oli korreloi positiivisesti PGA /PGC-suhde, joka voi epäsuorasti heijastaa toiminnallisen tilan mahalaukun limakalvon.
Useissa tutkimuksissa on todettu kasvain-erityisiä miRNA muutoksia plasman /seerumin syöpäpotilaiden, ja osoittavat, että mahdollisuus kiertävän miRNA uutena non-invasiivisen biomarkkereita syövän seulonta [12, 32]. Tulokset Tutkimuksemme osoitti mitään eroja seerumin miR-20a-5p ja anna-7a tasot säätimet, AG ja GC ryhmiä, kun taas miR-320a ilmentymisen määrä väheni koko valvonta, AG ja GC ryhmiä. Seerumin miR-320a tasot olivat pienemmät naisten GC potilailla kuin verrokeilla, ja tämä ero oli erityisen huomattavaa vanhemmilla naisilla, yli 60, mikä viittaa siihen, että miR-320a voi olla uusi kliininen biomarkkeri GC diagnoosin väestön spesifisyys. Tutkimukset miR-320a tähän mennessä ollut vähäistä sen rooleja säätelyssä fysiologiset tehtävät veri-aivoesteen [33] ja maksansisäisten kolangiokarsinooma [34, 35], paksusuolen syöpä [36] ja lapsuusiän leukemian [37]. Parhaan tietomme mukaan nykyinen tutkimus on ensimmäinen, joka ilmoittaa, että miR-320a voisi toimia seerumin biomarkkeri GC, erityisesti vanhemmilla naisilla. Vaikka harvat tutkimukset ovat tutkineet sen mekanismeja, jotkut ovat raportoineet suhdetta sen ennakoi maalin PGC ja sukupuoli, kun taas toiset raportoitu, että PGA /PGC suhde liittyi ikään, mutta vain naisilla [38, 39]. Ohjelmisto on myös ennustettu, että miR-320a kohdistettu estrogeeni liittyvä reseptori gamma (http://​www.​targetscan.​org/​cgi-bin/​targetscan/​mamm_​31/​targetscan.​cgi?​species=​Human&​gid=​&​mir_​c=​&​mir_​nc=​&​mirg=​hsa-miR-320). Nämä linjat todisteet kaikki viittaavat siihen, että miR-320a voi olla tärkeä rooli kehitettäessä GC naisilla, ja voi epäsuorasti heijastaa toiminnallista tilaa mahalaukun limakalvon. Sen käyttö biomarkkerina liittyisi edut kuin invaasio, edullisia ja korkea vakautta. Kuitenkin lisätutkimuksia suurempia näytteitä tarvitaan selvittämään sen mekanismeja ja tarkastaa sen käyttöä biomarkkerina vanhemmilla naisilla GC. Tietenkin, muutoksia miRNA ehkä ei liity ainoastaan ​​muutosten kanssa mahalaukun limakalvon funktio olosuhteissa, mutta liittyy myös joidenkin muiden tekijöiden, esimerkkejä anemia [40], ärsyke patogeenisten mikro-organismien, kuten H.pylor
[41 ] i, jotkut proteiinit, jotka osallistuvat miRNA prosessointireitille kuten Drosha, Dicer ja Argonaute [42, 43]. Toinen liittyviä tekijöitä tulee harkita lisätutkimuksia tulevaisuudessa.
Seerumin PGA ja PGC taso näyttää liittyvän mahalaukun limakalvon rauhas ja solujen määrät, ja välillisesti myös heijastavat sihteeri toiminta mahalaukun corpus ja /tai mahalaukun antrum. PGA erittyy mahan korpus ja mahalaukun kulma, kun taas PGC erittyy kaikki vatsaan, mukaan lukien corpus, kulma ja antrum. Heikentyminen PGA /PGC suhde kuvastaa kehitystä atrofinen vaurioita mahalaukun limakalvon [16], ja alhainen PGA /PGC suhde liittyy suuri riski GC [38, 44, 45]. Tämä on siis käytetty tehokkaana parametri seulontaan joilla on suuri riski GC väestössä, ja se voi olla kliinisesti käyttökelpoinen biomarkkereiden GC ja syöpää edeltävien sairauksien kuten AG [16, 38, 46, 47]. Broutet et ai. kertoi, että vaikka PGC erittyi eri paikoissa vatsassa, se liittyi PGA; kun taas PGA kasvoi nopeasti, PGC vaihteli hieman, ja korrelaatiokerroin saavutti 0,75 [38]. Nykyinen tutkimus on myös laskenut korrelaatiokerroin PGA ja PGC of 0,727. Tämä suhde saattaa selittää, miksi PGA /PGC suhde heijastaa toiminnallisen tilan mahalaukun limakalvon tarkemmin kuin joko PGA tai PGC yksin. Tutkimuksemme löytänyt mitään suhdetta ilmaus miR-20a-5p ja PGA, anna-7a ja PGC, tai miR-320a ja PGC, mutta oli positiivisia korrelaatioita kunkin kolmen ja PGA /PGC-suhde, joka oli jo tiedossa hyödyllisenä biomarkkeri taudin diagnosointiin ja tutkittu miRNA olivat samanaikainen tunnettujen PGA /PGC suhde viittaa niiden potentiaalia hyödyllisinä biomarkkereita taudin diagnosointiin.
Ottaen helikobakteeri
on tärkeä ympäristötekijä mahassa joka myös luokka Icarcinogen määritellyt Maailman terveysjärjestö (WHO), me analyysi kolme miRNA HP kerrostuminen eri mahalaukun sairauksien, mutta ei löytänyt mitään eroa. Olipa H.pylori
ja /tai muut ympäristötekijät vaikuttavat tähän yhdistys tarvitsee lisää tutkimuksia suurempia otoksia tulevaisuudessa.
Oli joitakin rajoituksia tutkimuksessamme. Ensinnäkin valittu miRNA voi toiminnallisesti kohdistaa PGA /C ja /tai ainakin oli vain todiste jonka bioinformaatioteknologian ohjelmisto, jonkin verran näyttöä edelleen toiminnallisia kokeita tarvitaan. Toiseksi korrelaatio ilmaisun kudoksessa miRNA ja arvioitua kohdeproteiinin tarvitaan lisätutkimuksia. Kolmanneksi, korrelaatio miRNA ilmaisun ja kliinis ominaisuudet potilailla, joilla on mahalaukun syövän, kuten Borrmann luokitus, kasvun malli, TNM-luokitus, invaasio syvyys ja imusolmuke etäpesäke, et ai. ei tarkemmin analysoitu, koska biopsialla rajoitettu tiedot puuttuvat. Neljänneksi lähde valvonta ei ollut normaaliväestössä, mutta minimaalinen pinnallinen gastriitti mukaan patologinen diagnoosi, ja gastriitti oli kuuluu myös lukuisiin GC kehitystä.
Päätelmä
Lopuksi osoitimme, että seerumin asennuspalveli- 320a tasot olivat pienemmät naisten GC potilailla yli 60-vuotiaiden kuin verrokeilla, ja voivat siten edustaa arvokas tunnus diagnosoimiseksi GC tässä ryhmässä. Ja tasot miR-20a-5p, anna-7a ja miR-320a oli korreloi positiivisesti PGA /PGC-suhde, joka voi epäsuorasti heijastaa toiminnallisen tilan mahalaukun limakalvon.
Huomautuksia
Qian Xu, Qi- Guan Dong vaikuttanut yhtä tähän työhön.
lyhenteet
miRNA:
microRNA
PG:
pepsinogeeni

PGA:
pepsinogeeni
PGC:
pepsinogeeni C
qRT-PCR:
kvantitatiivinen RT-PCR
ELISA:
Entsyymi immunosorbenttimääritys
ROC käyrä:
Receiver operating ominaiskäyrä

AUC:
ala käyrän
nt:
nukleotidin
cDNA :
komplementaarinen DNA
AG:
atrofinen gastriitti
GC:
Mahasyöpää.


julistukset
Kiitokset
työ tukee avustusta National Key Basic Research Program of China (973 Program viite no. 2010CB529304), National Natural Science Foundation of China (Ref No.31200968), ja säätiön Science and Technology Liaoningin maakunnassa (viite no. 2011225002).
Kirjoittajien alkuperäinen toimitti asiakirjat kuville
Alta linkit kirjoittajien alkuperäiset toimitti asiakirjat kuville. 12907_2012_129_MOESM1_ESM.pdf Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 1 12907_2012_129_MOESM2_ESM.doc Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 2 Kilpailevat edut
Kaikki kirjoittajat luettu ja hyväksytty lopullinen käsikirjoitus, ja ei ole kaupallista tai muu järjestö voivat aiheuttaa eturistiriidan .
Tekijät osuudet
YY suunniteltu ja tässä tutkimuksessa ja tarkistettiin käsikirjoituksen. QG-D vastasi kokeen ja suorittaa tietojen tulkinta. QX mukana kirjallisesti paperi- ja tarkistavat käsikirjoituksen kriittisesti tärkeä henkinen sisältö. LP-S osallistui tutkimuksen suunnittelu osittain. CY-H suoritettiin tilastollinen analyysi. Kaikki kirjoittajat luettu ja hyväksytty lopullinen käsikirjoitus.

• Typpioksidi-endogeeninen inhibiittori mahahapon eritystä eristetyissä ihmisen mahalaukun glands
• CD44 /CD24 Expression toistuviin mahasyövän: retrospektiivinen analyysi