Выражение сывороточного MIR-20a-5p, пусть-7а, и микроРНК-320а и их корреляции с пепсиногена в атрофический гастрит и рак желудка: случай-контроль study

экспрессии сывороточного MIR-20a-5p, пусть-7а, и зер- 320а и их корреляции с пепсиногена в атрофический гастрит и рак желудка: случай-контроль исследование
Аннотация
Справочная информация
идентификация серийных микроРНК ориентации тот же функциональный белок желудка может стать источником новых и эффективных серологических биомаркеров для диагностики рака желудка (GC). Цель данного исследования состояла в том, чтобы оценить потенциал MIR-20a-5p, пусть-7а и микроРНК-320а в диагностике АГ или GC и соотношение трех микроРНК с их предсказанных молекул-мишеней ПГД, PGC и ПГД /PGC соотношение.
Методы
общее количество 291 пациентов, включенных 103 управления (CON), 94 с атрофический гастрит (АГ) и 94 с GC. Уровни сыворотки микроРНК были обнаружены с помощью количественной обратной транскрипции-полимеразной цепной реакции и сывороточного пепсиногена А (PGA) и С (PGC) определяли с помощью иммуноферментного анализа.

Результаты серологического уровня микроРНК-320а уменьшен путем средства управления, группы AG и GC, которые были каскады развития GC, в то время как не было никаких существенных различий в уровнях MIR-20a-5p и пусть-7а среди управлений, AG и GC групп. Когда стратифицированная по полу и возрасту, экспрессия микроРНК-320а в сыворотке крови был ниже у пациентов женского пола GC, чем в контрольной группе (р = 0,035
), особенно у самок GC пациентов старше 60 лет (р = 0,008
). Для различения пациентов женского пола в возрасте от GC старше 60 лет, площадь под приемником характеристической кривой для СИК-320а был 0,699, а лучшая точка отсечения была 4,76 с чувствительностью 65,2% и специфичность 68,2%. Что касается корреляции между выбранной MIR-20a-5p, пусть-7а, MIR-320А и PGS, мы обнаружили, что там были положительные корреляции между всеми тремя и соотношение ПГА /PGC (г = 0,408, 0,255, 0,324; р
= &л; 0,001, 0,009, 0,001, соответственно), но не было никакой связи между экспрессией сыворотки MIR-20a-5p и его предсказанным целевой ПГК, или между LET-7а и микроРНК-320а и их прогнозируемой цели PGC , Сыворотка микроРНК-320а понижали и ПГК была увеличена в группе GC по сравнению с контрольной группой.
Выводы
Уровни сывороточного MIR-320a были ниже у пациентов женского пола старше 60 лет, чем в контрольной группе GC, что может дать потенциал ценным маркером для диагностики пожилых женщин с GC. Уровни сывороточного MIR-20a-5p, пусть-7а и микроРНК-320а были положительно коррелирует с ПГА /PGC, которые могут косвенно отражать функциональное состояние слизистой оболочки желудка.
Болезни Ключевые слова
Сыворотка микроРНК биомаркеров Пепсиноген Желудочный Фон изображения Крайне важно, чтобы исследовать чувствительные, специфические и неинвазивные опухолевые биомаркеры, которые могут быть использованы для ранней диагностики, оценка прогноза и прогнозирования рецидива. MicroRNAs (миРНК) представляют собой класс высоко консервативных и эндогенных некодирующих РНК длинных 19-24 нуклеотидов, которые регулируют экспрессию генов-мишеней на пост-транскрипционном уровне. Накопленные данные показывают, что микроРНК участвуют в важных биологических процессах, связанных с пролиферации, апоптоза, дифференцировки, метастазированием, ангиогенеза и иммунного ответа, в то время как дерегулирование микроРНК может иметь решающее значение в инициации рака, болезни и исход лечения [1, 2]. Недавно было показано, что сыворотка крови человека или плазма содержит большое количество стабильных микроРНК, профили экспрессии которых потенциально могут быть использованы для идентификации различных видов рака, включая рак простаты, большая В-клеточная лимфома, рак яичников, рак печени и не . -Малый рак легкого [3-7]
микроРНК являются частью сложной регуляторной сети; множественные гены могут регулироваться одним микроРНК, а один ген может также быть тонко регулируется группой [2] микроРНК. Несколько исследований изучали связь между сывороточные микроРНК и желудочных заболеваний [8, 9], несколько исследований сосредоточились на экспрессии микроРНК в плазме [10-12], Лю H и др. определены микроРНК-378 в качестве биомаркеров в сыворотке крови [8], и Лю R и др. выбранные пять микроРНК (MIR-1, -20a, -27a, -34 и -423-5p) в качестве отпечатка пальца для диагностики GC [9]. Но никакого внимания не было уделено ориентации того же гена серийных микроРНК. Тем не менее, такие исследования могли бы помочь разъяснить общие функции серийных микроРНК, ориентированных на отдельные гены и таким образом улучшить наше понимание их роли в раке желудка (GC) и предраковых заболеваний.
Человека pepsinogens (PGS) являются неактивными про-ферменты специфический пищеварительный фермент пепсин, которые происходят из слизистой оболочки желудка и может быть классифицирована биохимически и иммунохимически в ФГК и PGC [13, 14]. Предыдущие исследования показали, что экспрессия PGC отрицательно коррелирует со степенью злокачественности слизистой оболочки желудка и развитие желудочных поражений [15]. А /ПГК низкий коэффициент ПГА может быть использован в качестве серологического биомаркером атрофический гастрит (AG), который, как известно, предраковое состояние [15, 16]. Несколько микроРНК были идентифицированы два гена-мишени-прогнозирования программных пакетов (микрокосма мишенями и TargetScan человека), некоторые из которых целевых ПГК (MIR-212, MIR-132, микроРНК-20a-5p, микроРНК-93) или PGC (зер- 662, микроРНК-365, пусть-7а, микроРНК-320а). В микроРНК тесно связаны с GC или других злокачественных опухолей были выбраны для дальнейшего исследования в данном исследовании. микроРНК-20a-5p, член кластера микроРНК-17-92, был усиливается в желудка, ободочной и прямой кишки и поджелудочной железы аденокарциномы на месте
[17-19], экспрессии в тканях LET-7а в коррелировала с лимфоузлов метастазирования GC [20], и микроРНК-320а подавлялась в первичного рака молочной железы и коррелировать с инвазии и метастазированию [21-23]. Эти три микроРНК только ранее были исследованы на месте
, и большинство исследований были сосредоточены на своих функций; никакие исследования не исследовали их потенциальной роли в качестве биомаркеров в сыворотке крови для диагностики ГХ и предраковые заболевания. И может ли предсказанных функциональных микроРНК (MIR-20a-5p, пусть-7а и микроРНК-320а) могут быть идентифицированы в качестве биомаркеров для диагностики GC и предраковые заболевания? Кроме того, их отношения с их предсказанной целевой пепсиногена неизвестны.
Это исследование Поэтому цель оценить потенциал MIR-20a-5p, пусть-7а и MIR-320А в диагностике GC и соотношение трех микроРНК и ПГД, PGC и /PGC отношение ПГА. Мы исследовали сывороточные уровни трех выбранных микроРНК в GC и его предраковое состояние, а также корреляции между сывороточным MIR-20a-5p и его предсказанным целевой ПГК, а также между сывороткой пусть-7а и микроРНК-320а и их предсказали целевой PGC , Результаты, возможно определить несколько ценных серологические маркеры заболеваний желудка, в некоторой степени, а также предоставление экспериментальные доказательства и ссылки, чтобы помочь нашему дальнейшему пониманию функций сыворотки микроРНК в процессе канцерогенеза.
Методы
Субъекты <бр> в общей сложности 291 субъектов, перенесших гастроскопии экзамены в первой больнице Дочернее Китайского медицинского университета с 2004 по 2011 год были включены в данное исследование. Информация о пол, возраст и другие факторы, было получено с помощью опросного листа, вводимая каждому предмету. Исследование было одобрено Комитетом по этике человека по рассмотрению действия Китайского медицинского университета им. Письменное информированное согласие было получено от участников в соответствии с Хельсинской декларацией и ее последующего пересмотра. Всем пациентам была выполнена эндоскопическая биопсия слизистой оболочки желудка, а образцы биопсии были залитых парафином и окрашивались HE окрашивание для гистологического диагноза, который был поставлен диагноз двумя опытными патологоанатомов. Случаи с минимальными поверхностными гастрита рассматривались как элементы управления [24]. Атрофический гастрит группа была определена в соответствии с гистопатологии. Гистопатологии диагнозов была включена небольшая, умеренная и тяжесть, и только степень умеренной степени тяжести и был зачислен в этом исследование случай-контроль. Девяносто четыре пациента были подтверждены гистологически желудка случаев аденокарциномы; 75 могут быть классифицированы в соответствии с классификацией Лорен, в то время как 19 не смогла. А среди 75 случаев [25], 22 из 75 случаев GC были типа кишечных, 45 были диффузного типа и 8 были смешанного типа. Образцы в желудочном группе рака сопоставляются в половозрастной состав с пациентами с контролем и с атрофическим гастритом. Изолирующие
Сыворотка РНК и количественный обратной транскрипции-полимеразной цепной реакции (QRT-ПЦР)
Приблизительно 6 мл венозной крови была собрана из каждого предмета. Сыворотка Суммарную РНК экстрагировали с использованием метода, описанного Лю R и соавт. [9] с некоторыми изменениями. Сыворотку отделяли центрифугированием при 3000 г
в течение 10 мин, а затем 15 мин высокоскоростного центрифугирования с при 12000 г
для полного удаления остатков клеток. Супернатант сыворотка извлекали и хранили при -80 ° С до дальнейшей обработки. Суммарную РНК экстрагировали из 200 мкл сыворотки фенолом очистки кислоты /хлороформом и центрифугирования в изопропиловом спирте. Каждый образец был всего в 20 мкл РНК-свободный DDh <суб> 2O решение и шесть микролитров тотальной РНК подвергали обратной транскрипции в кДНК с использованием One Step PrimeScript микроРНК синтеза кДНК Kit (Takara, Далянь, Китай). ПЦР в реальном времени проводили с использованием набора для обнаружения miRcute микроРНК КПЦР (Tiangen, Пекин, Китай) по тепловому системе Cycler Dice в реальном масштабе времени (Takara). Для расчета уровней микроРНК, синтетический HSA-микроРНК-20a-5p, HSA-пусть-7а и HSA-микроРНК-320а в известных концентрациях (Takara) также обратной транскрипции и усиливается. Концентрацию каждого микроРНК Затем рассчитывают в соответствии со стандартной кривой. Все реакции, в том числе управления не-шаблон, запускались в двух экземплярах.
Serum PG и H. Pylori уровней

концентрации в сыворотке крови PG и h.pylori
уровни (HP) определяли методом ферментативного иммуноферментный анализ (ИФА) с ПГД, PGC и H.pylori
ИФА-наборов (Biohit Co., Ltd., Хельсинки, Финляндия) [16, 26, 27]. Образцы анализировали в случайном порядке, слеп к результатам гистологии. Каждая партия включены коммерческие средства управления и ослеплен контроля плазмы для оценки лабораторных вариаций. Все элементы управления плазмы находились в пределах среднего значения ± 2 ПКО. Пять процентов всех образцов в дубликатах.
Статистический анализ
В журнале <суб> 10 из микроРНК числа копий представлены уровни микроРНК, а также различия в уровнях микроРНК между группами, а также в анализ стратификации сравнивали с помощью одностороннего анализа дисперсии. Приемник работает характеристика (ROC) кривых и площадь под кривой (AUC) были использованы для оценки диагностических эффекты микроРНК и определить соответствующие точки отсечения. Медианы концентрации сыворотки PG сравнивали между тремя группами, а также в анализе с использованием стратификации Крускала-Уоллиса H тесты. коэффициент корреляции Пирсона был использован для оценки корреляции между микроРНК и концентрациями ПГ. Разброс сюжет был представлять анализ корреляции между уровнями сыворотки микроРНК и /PGC соотношение ПГА, а также между уровнями ПГД и PGC. Все статистические анализы были проведены с использованием SPSS 17,0 программного обеспечения (SPSS Inc. Чикаго, США). Двусторонний р
значение &л; 0,05 считалось статистически значимым.

Результаты Демографические исследуемых субъектов
291 субъектов, включенных 103 управления, 94 пациентов с АГ и 94 с GC. Как показано в таблице 1, не было никаких существенных различий с точки зрения пола (р = 0,948
), возраст (р = 0,654
) и h.pylori
серологического статуса (р = 0,580
) среди трех groups.Table 1 Характеристика субъектов исследования
переменные

управления

атрофический гастрит

Желудочный рак

п = 103

п = 94

п = 94

Гендер
Мужчина
65 (63,1%)
61 (64,9%)
59 (62,8%)
Female
38 (36,9%)
33 (35,1%)
35 (37,2%)
P = 0,948

Возраст (лет)
Среднее значение <бр> 59,1 ± 10,6
60,4 ± 11,2 ± 60,2
11.1
Диапазон
23-80
28-83
27-80
P = 0,654

h.pylori
серологического статуса
hp-
60 (58,3%)
48 (51,1%)
53 (56,4%)
Hp +
43 (41,7%)
46 (48,9%)
41 (43,6%)
P
= 0.580
Корреляция между экспрессией микроРНК в сыворотке крови и желудочных заболеваний не
Существовали никаких существенных различий в уровнях зер- 20a-5p и пусть-7а среди управлений, AG и GC групп (р = 0,581
, 0,445, соответственно), но микроРНК-320A уровень постепенно снижается среди различных групп (4,99 ± 0,46 против 4,94 ± 0,45 vs. 4,90 ± 0,44, р = 0,152
, таблица 2) .table 2 Уровни сыворотки микроРНК (среднее ± стандартное отклонение), PG (медиана ± стандартное отклонение) между различными желудочных групп заболеваний
переменные

<Ьг> CON

AG

GC

P-
значение

микроРНК-20a-5p
3,77 ± 0,74 3,84 ±
0,69
3,83 ± 0,68
0,581
Мужской
3,80 ± 0,77 3,90 ±
0,73
3,88 ± 0,78 0,59

Female
3,72 ± 0,69
3,73 ± 0,60 3,75 ±
0,47
0,855
пусть 7а
3,72 ± 0,34 3,77 ±
0,29
3,75 ± 0,28
0,445
Мужской
3,72 ± 0,31
3,78 ± 0,32 3,77 ±
0,28
0,367
Женский
3,71 ± 0,39 3,76 ±
0.24
3,72 ± 0,28
0,93
микроРНК-320а
4,99 ± 0,46 4,94 ±
0,45
4,90 ± 0,44
0,152
Мале
5,03 ± 0,49 5,01 ±
0,46
5.00 ± 0.42
0,76
Женский
4,93 ± 0,40 4,81 ±
0,39
4,73 ± 0,43
0,035 *
ПГА
146,3 ± 101,5
111,0 ± 85,4
130,1 ± 107,1
0,044 §
PGC
19,2 ± 17.6
14,0 ± 12,2 23,1 ±
23,0
0,003 §
ПГД /PGC
9,52 ± 4,85
9,52 ± 5,23
7,86 ± 5,46
0,039 §
P
*
: GC против
контроля; P
§
: разница между тремя группами. CON: Случаи с минимальным поверхностным гастритом рассматривались как элементы управления; AG: атрофический гастрит; GC:. Рак желудка
Расслоение по полу и возрасту показали, что экспрессия микроРНК-320а был ниже у пациентов женского пола GC, чем в контрольной группе (р = 0,035
), и разница была особенно важна у женщин GC старше 60 лет лет, по сравнению с контрольной группой (р = 0,008
) (Таблица 3). АУК MIR-320а для выявления пациентов женского пола GC старше 60 лет был 0,699. Лучшая точка отсечения была 4,76, с чувствительностью 65,2% (95% ДИ = 45.8-84.7%) и специфичность 68,2% (95% ДИ = 48.7-87.6%). Мы также анализ наши данные в h.pylori
стратификации, но не было никакой разницы между любыми группами, как показано в таблице 4.Table 3 Расслоение анализа сыворотки уровня микроРНК-320а между различными желудочными групп заболеваний (среднее ± стандартное отклонение )
микроРНК:

CON (п)

AG (п)

GC (п)

Р-
значение

микроРНК-320а
Мужчина
≥60
5,02 ± 0,44 (27) 4,96 ±
0,43 (28)
4,99 ± 0,46 (26) <бр> 0,796
&л; 60
5,03 ± 0,53 (38) 5,05 ±
0,49 (33)
5,01 ± 0,39 (33)
0,859
Женский
≥60 <бр> 4,98 ± 0,46 (22) 4,77 ±
0,39 (24)
4,63 ± 0,41 (23)
0,008 *
&л; 60
4,88 ± 0,31 (16) 4,91 ±
0,39 (9)
4,92 ± 0,42 (12)
0,774
P

*: GC против
Control. п означает номер выборки каждой подгруппы.
Таблица 4 уровня экспрессии микроРНК сыворотки (среднее ± стандартное отклонение), PG (среднее ± стандартное отклонение) между различными группами желудочных заболеваний, когда стратификация по статусу H.pylori
Переменные


CON

AG

GC

P-
значение

hp-
микроРНК-20a-5p
3,83 ± 0,71 3,88 ±
0,59
3,85 ± 0,70
0,926
Мале
3,84 ± 0,72 3,90 ±
0,59
3,89 ± 0,34
0,931
Женский
3,82 ± 0,71 ± 3,86
0,60
3,75 ± 0,53
0,881
пусть 7а
3,74 ± 0,31 3,81 ±
0,31
3,76 ± 0,25
0,505
Мужской
3.73 ± 0.31 3.84 ±
0,34
3,77 ± 0,25 0,36

Женский
3,76 ± 0,30 3,76 ±
0,28
3,74 ± 0,27
0,972
микроРНК-320а
5,02 ± 0,48 4,90 ±
0,45
4,91 ± 0,47
0,311
Мале
5,03 ± 0,50 4,97 ±
0,48
4,98 ± 0,44
0,813
Женский
4,99 ± 0,44 ± 4,81
0,41
4,74 ± 0,50
0,216
ПГА
Результаты 134.99 ± 92.27
96,78 ± 76,05
141.99 ± 125.80
0,056
PGC
15,13 ± 13,67
10,37 ± 9,02
23,15 ± 25,11
0,001
ПГД /PGC
10,66 ± 4,81
11.00 ± 6.04
9,17 ± 6,28
0,22
Hp +
микроРНК-20a-5p
3,69 ± 0,78 ± 3,79
0,79
3,81 ± 0,66
0,743
Мужской
3,75 ± 0,86 3,90 ±
0,31
3,86 ± 0,82
0,785
Женский
3,62 ± 0,66 ± 3,53
0,55
3,74 ± 0,43
0,542
пусть-7а
3,68 ± 0,38 ± 3,74
0,27
3,74 ± 0,31
0,661
Мужской
3,70 ± 0,31
3,73 ± 0,30 3,77 ±
0,33
0,717
Женский
3,66 ± 0,48 ± 3,75
0,18
3,70 ± 0,28
0,795
микроРНК-320а
4,95 ± 0,44 4,98 ±
0,45
4,89 ± 0,40
0,634
мужчина
5,01 ± 0,49 5,05 ±
4,59
5,05 ± 0,46
0,961
Женский
4,87 ± 0,36 4,81 ±
0,38
4,72 ± 0,36
0,471
ПГА
162,15 ± 112,44
125,81 ± 92,66
114,74 ± 75,23
0,058
PGC
24.82 ± 20.80
17,86 ± 13.95
23,10 ± 20,16
0,182
ПГД /PGC
7,91 ± 4,49 ± 7,97
3,70
6,16 ± 3,57 0,06

Корреляция между экспрессией микроРНК в сыворотке крови и их предсказанной молекулы-мишени PG
Для анализа ассоциации, выражение микроРНК-20a-5p не коррелировала с ПГА уровнями (г = 0,110, р = 0,269
), и пусть-7а и микроРНК-320а не коррелировали с PGC уровни (г = -0,162, -0,102; р
= 0,102, 0,306, соответственно), но все они были положительно коррелирует с отношением /PGC ПГД (г = 0,408, 0,255, 0,324; р =
&л; 0,001, 0,009, 0,001, соответственно) (рис 1). При сравнении изученные микроРНК и предсказанные молекулы-мишени PG с элементами управления, мы обнаружили, что уровни ПГА у больных ГХ снизились (130,1 ± 107,1 против 146,3 ± 101,5, р = 0,276
) и PGC уровни у больных ГК были увеличены (23,1 ± 23,0 против 19,2 ± 17,6 р
= 0,174), хотя эти различия не были значительными. уменьшали /PGC отношение ПГА в группе GC (7,86 ± 5,46 против 9,52 ± 4,85, р = 0,039
, таблица 2), с коэффициентом корреляции 0,727 (Рисунок 1). По сравнению с контрольной группой, сывороточные уровни микроРНК-320A были снижены (4,90 ± 0,44 против 4,99 ± 0,46, р = 0,153
) и сывороточные уровни PGC были увеличены в группе GC (23,1 ± 23,0 против 19,2 ± 17,6 р <бр> = 0,174), показывая, по-видимому, противоположные тенденции, хотя различия не были значимыми (таблица 2). На рисунке график участок 1 Scatter. Рисунок 1-A - C. Разброс график уровней сывороточного микроРНК и их корреляции с ПГА /PGC соотношении от контрольной группы. А. микроРНК-20a-5p; B. пусть-7а; C. микроРНК-320а. Рисунок 1-D. Разброс график корреляции между уровнями сыворотки и PGC ПГД. Весь график рассеяния показал анализ ассоциации вариантов между х и у оси.
Обсуждение
Недавние исследования представлены сыворотки /плазмы микроРНК в качестве потенциальных биомаркеров для нескольких болезненных состояний, в том числе злокачественных опухолей человека [28-31]. Тем не менее, исследования в сыворотке крови микроРНК в отношении заболеваний желудка, были ограничены, и никакого внимания не было уделено микроРНК серийно ориентированных один и тот же ген. На основе ряда микроРНК, предсказываемых биоинформатики программного обеспечения, чтобы настроить таргетинг ПГК и /или PGC, мы выбрали MIR-20А-5р, пусть-7а и MIR-320А для дальнейшего изучения. Мы исследовали потенциал MIR-20a-5p, пусть-7а и микроРНК-320а в диагностике АГ или GC и корреляции трех микроРНК с их предсказанных молекул-мишеней ПГД, PGC и /PGC отношение ПГА. Выражение микроРНК-320а был у пожилых пациентов женского пола GC ниже, чем в контрольной группе, предполагая, что микроРНК-320а может оказаться ценным маркером для диагностики пожилых женщин с GC. микроРНК-20a-5p, пусть-7а и микроРНК-320а положительно коррелируют с /PGC отношением ПГА, что может косвенно отражать функциональное состояние слизистой оболочки желудка.
Несколько исследований выявили опухоль-специфичные изменения микроРНК в плазме /в сыворотке крови больных раком, и показали потенциал циркулирующих микроРНК в качестве новых неинвазивных биомаркеров для скрининга рака [12, 32]. Результаты нашего исследования не показали никаких различий в сыворотке крови микроРНК-20a-5p и пусть-7а уровней среди управлений, AG и GC группы, тогда как экспрессия микроРНК-320а выпавшие на протяжении управления, AG и GC групп. Уровни сыворотки микроРНК-320A были у женщин GC ниже, чем в контрольной группе, и эта разница была особенно отмечена у пожилых женщин, в возрасте старше 60 лет, предполагая, что микроРНК-320а может быть новый клинический биомаркером для диагностики GC со спецификой населения. Исследования MIR-320а до настоящего времени были ограничены ее роль в регуляции физиологических функций гематоэнцефалического барьера [33], а в внутрипеченочного холангиокарциномой [34, 35], рак толстой кишки [36] и детской лейкемии [37]. Насколько нам известно, данное исследование является первым, чтобы сообщить, что микроРНК-320а может выступать в качестве сыворотки биомаркеров GC, особенно у пожилых женщин. Хотя несколько исследований изучали его механизмы, некоторые из них сообщили о взаимосвязи между его предсказанным целевой PGC и пола, в то время как другие сообщили о том, что /ПГК отношение ПГА был связан с возрастом, но только у женщин [38, 39]. Программное обеспечение также предсказал, что микроРНК-320а предназначается гамма-рецептор эстрогена, связанные с (http://​www.​targetscan.​org/​cgi-bin/​targetscan/​mamm_​31/​targetscan.​cgi?​species=​Human&​gid=​&​mir_​c=​&​mir_​nc=​&​mirg=​hsa-miR-320). Эти линии доказательств все предполагают, что микроРНК-320а может играть важную роль в развитии ГК у женщин, и может косвенно отражать функциональное состояние слизистой оболочки желудка. Его использование в качестве биомаркера было бы связано с преимуществами отсутствия инвазии, низкой стоимости и более высокой стабильностью. Тем не менее, дальнейшие исследования в более крупных образцов необходимы, чтобы уточнить свои механизмы и проверки его использования в качестве биомаркера у пожилых женщин с GC. Конечно, изменения микроРНК может быть связано не только с изменениями условий желудочных функций слизистых оболочек, но и связаны с некоторыми другими факторами, примеры анемии [40], стимул патогенных микроорганизмов, таких как H.pylor
[41 ] я, некоторые белки, участвующие в обработке микроРНК пути, как Drosha, Dicer и Argonaute [42, 43]. Другие факторы, связанные следует рассматривать в дальнейших исследованиях в будущем.
Уровни сыворотки и PGC ПГД, кажется, связаны с железистой слизистой оболочки желудка и клеточных количествах, а также косвенно отражают функцию секретаря желудочного корпуса и /или желудка Антрум. ПГА выделяется из желудка корпус и угла желудка, в то время как PGC выделяется из всего желудка, включая корпус, угол и антрума. Снижение в /PGC соотношении ПГА отражает развитие атрофических поражений на слизистой оболочке желудка [16], и /PGC низкое соотношение ПГД связано с высоким риском GC [38, 44, 45]. Это поэтому был использован в качестве эффективного параметра для скрининга лиц с высоким риском GC в популяции, и может быть клинически полезным биомаркером GC и предраковых заболеваний, таких как АГ [16, 38, 46, 47]. Бруте и др. сообщила, что, хотя ЧОП секретируется из различных участков в желудке, это было связано с ФГК; в то время как ПГА быстро увеличивалось, PGC незначительно изменялась, и коэффициент корреляции составил 0,75 [38]. Настоящее исследование также вычислили коэффициент корреляции между ПГК и PGC из 0,727. Эта связь может объяснить, почему PGA /PGC соотношение отражает функциональное состояние слизистой оболочки желудка более точно, чем любой ФГК или PGC в одиночку. Наше исследование не обнаружило взаимосвязи между экспрессией микроРНК-20a-5p и ПГК, пусть-7а и PGC или микроРНК-320а и PGC, но были положительные корреляции между каждым из трех и /PGC соотношение ПГА, который был уже известен как полезный биомаркера для диагностики заболеваний и исследованных микроРНК были синхронными с известным /PGC соотношением ПГА что свидетельствует об их потенциал в качестве полезных биомаркеров для диагностики заболеваний.
Учитывая H. Pylori
является важным фактором внешней среды в желудке, также класс Icarcinogen определяется Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ), мы анализ трех микроРНК в стратификации HP среди различных заболеваний желудка, но не нашел никакой разницы. Будь H.pylori
и /или другие факторы окружающей среды влияют на это объединение нуждается в большем количестве исследований в более крупных образцов в будущем.
Существовал некоторые ограничения в нашем исследовании. Во-первых, выбранные микроРНК могут функционально целевой PGA /C и /или, по крайней мере, было только доказательством программным обеспечением биоинформации, некоторые доказательства для дальнейшего функциональных экспериментов необходимы. Во-вторых, корреляция экспрессии в тканях микроРНК и его прогнозируемое целевой белок необходим для дальнейшего исследования. В-третьих, соотношение экспрессии микроРНК и клинико-патологическими характеристиками пациентов с раком желудка, такие как классификация Бормана, в модели роста, стадии TNM, глубина вторжения и метастаза узла лимфы, и др. не далее анализировали из-за информации биопсией ограничена недостающего. В-четвертых, источником контроля не было нормальной популяции, но с минимальным поверхностный гастрит в соответствии с патологическим диагнозом, и гастрит также принадлежит каскад развития GC.
Заключение
В заключение, мы показали, что сыворотка зер- 320A уровни были ниже у пациентов женского пола в возрасте от GC старше 60 лет, чем в контрольной группе, и может, таким образом, представляют собой ценный маркер для диагностики GC в этой группе. И уровни микроРНК-20a-5p, пусть-7а и микроРНК-320а были положительно коррелирует с /PGC отношением ПГА, что может косвенно отражать функциональное состояние слизистой оболочки желудка.
Notes
Цянь Сюй, Qi- Guan Dong внесли одинаковый вклад в эту работу
Сокращения
микроРНК:.
микроРНК


PG:
Пепсиноген

<бр> ПГА:
Пепсиноген управлением


PGC:
Пепсиноген C


QRT-PCR:
количественное обратной транскрипции полимеразной цепной реакции


ELISA:
иммуноферментный анализ


ROC кривая:
приемник работает характеристической кривой


ППК:
площадь под кривой


нт:
нуклеотид


кДНК :
комплементарной ДНК


AG:
атрофический гастрит


GC:.
рак желудка
<бр>
декларациях
Благодарности
работа выполнена при поддержке грантов от Национального ключа программы фундаментальных исследований Китая (973 Программа № объекта. 2010CB529304), Национальный фонд естественных наук Китая (реф No.31200968), и Фонд науки и техники в провинции Ляонин (исх нет. 2011225002).
Авторы 'оригинал представлены файлы для изображений изображения Ниже приведены ссылки на исходные файлы представленных авторов для изображений. 'Исходный файл для фигурного 1 12907_2012_129_MOESM2_ESM.doc Авторского 12907_2012_129_MOESM1_ESM.pdf авторов исходного файла для фигурного 2 конкурирующими интересами
Все авторы прочитали и одобрили окончательный вариант рукописи, и не имеют коммерческую или иную ассоциацию, которая может привести к конфликту интересов взносов.
авторов
YY продуманы и разработаны это исследование и отредактировали рукопись. QG-D был ответственен за эксперимент и проводили интерпретацию данных. QX участвует в написании бумаги и пересмотра рукописи критически важного для интеллектуального содержания. LP-S участвовал в разработке дизайна исследования частично. CY-Н выполняется статистический анализ. Все авторы читали и одобрили окончательный вариант рукописи.

• Оксид азота-эндогенным ингибитором секреции желудочной кислоты в изолированных желудочных железах человека
• CD44 /CD24 экспрессия в рецидивами рака желудка: ретроспективный анализ