Expressie van serum miR-20a-5p, laat-7a en miR-320a en hun correlaties met pepsinogen in atrofische gastritis en maagkanker: een case-control study

expressie van serum miR-20a-5p, laat-7a en buitenspiegels 320a en hun correlaties met pepsinogen in atrofische gastritis en maagkanker: een case-control studie
Abstracte achtergrond
de identificatie van seriële miRNAs gericht op dezelfde functionele maag-eiwit kunnen nieuwe en effectieve serologische biomarkers voor de diagnose van maagkanker (GC). Het doel van deze studie was om het potentieel van miR-20a-5p evalueren, laat-7a en miR-320a in de diagnose van AG of GC en de correlatie van de drie miRNAs met hun doel kan worden voorspeld moleculen PGA, PGC en PGA /PGC ratio.
Methodes Ondernemingen De in totaal 291 patiënten opgenomen 103 controles (CON), 94 met atrofische gastritis (AG) en 94 met GC. Het serum miRNAs werden gedetecteerd door kwantitatieve reverse transcriptie-polymerase kettingreactie en serum pepsinogeen A (PGA) en C (PGC) werden bepaald door enzymgekoppelde immunosorbent assays.
Resultaten
serum miR-320a niveau door het terugbrengen de controles AG en GC groepen die de stromen van GC ontwikkeling waren, terwijl er geen significante verschillen in miR-20a-5p en let-7a tussen de controles AG en GC groepen. Wanneer gestratificeerd naar geslacht en leeftijd, was serum miR-320a uitdrukking lager bij vrouwelijke GC patiënten dan bij controles (p
= 0,035), vooral bij vrouwelijke GC patiënten ouder dan 60 jaar (p
= 0,008). Voor het onderscheiden vrouwelijke GC patiënten ouder dan 60 jaar, het gebied onder de receiver operating characteristic curve voor miR-320a was 0,699 en de beste afkappunt was 4,76 met een gevoeligheid van 65,2% en een specificiteit van 68,2%. Wat betreft de correlaties tussen de geselecteerde miR-20a-5p, laat-7a, miR-320a en PG's, vonden we dat er een positieve correlatie tussen de drie en de verhouding van de PGA /PGC (r = 0,408, 0,255, 0,324; p
= < 0,001, 0,009, 0,001, respectievelijk), maar er is geen relatie tussen de expressie van serum miR-20a-5p en de voorspelde doel PGA, of tussen laat-7a en miR-320a en hun voorspelde doel PGC . Serum miR-320a was verminderd en PGC werd verhoogd in de GC-groep vergeleken met de controlegroep.
Conclusies
Niveaus van serum miR-320a lager bij vrouwen GC patiënten ouder dan 60 dan bij de controlegroep, die een kan verschaffen potentieel waardevolle marker voor de diagnose van oudere vrouwen met GC. De niveaus van serum miR-20a-5p, laat-7a en miR-320a werden positief gecorreleerd met PGA /PGC, die indirect de functionele status van het maagslijmvlies kunnen weerspiegelen.
Ziekte Sleutelwoorden
Serum microRNA Biomarker Pepsinogen Gastric achtergrond
Het is essentieel om gevoelige, specifieke en niet-invasieve tumor biomarkers die kunnen worden gebruikt voor de vroege diagnose, prognose schatten en voorspellen herhaling verkennen. MicroRNAs (miRNAs) zijn een klasse van sterk geconserveerd en endogene niet-coderende RNA's 19-24 nucleotiden, die de expressie van doelgenen regelen op post-transcriptioneel niveau. Accumuleren bewijsmateriaal wijst erop dat miRNAs betrokken zijn bij belangrijke biologische processen met betrekking tot proliferatie, apoptose, differentiatie, metastase, angiogenese en immuunrespons, terwijl de deregulering van miRNAs cruciaal bij kanker initiatie, voortgang en resultaat van de behandeling kan worden [1, 2]. Recent is gebleken dat menselijk serum of plasma bevat grote hoeveelheden stabiele miRNAs, de expressieprofielen die zou kunnen worden gebruikt om verschillende soorten kanker, waaronder prostaatkanker, grote B-cellymfoom, eierstokkanker, leverkanker en niet identificeren . -kleine cel longkanker [3-7]
miRNA's zijn onderdeel van een complexe regulerende netwerk; meerdere genen kan worden gereguleerd door een miRNA, maar één gen kan ook subtiel geregeld door een groep miRNAs [2]. Er zijn maar weinig studies hebben het verband tussen serum miRNAs en maag ziekten [8, 9], een aantal studies gericht op de plasma miRNA expressie [10-12], Liu H et al onderzocht. geïdentificeerd miR-378 als serum biomarker [8], en R Liu et al. geselecteerde vijf miRNAs (miR-1, -20a, -27a, -34 en -423-5p) als een vingerafdruk voor GC diagnose [9]. Maar geen aandacht is besteed aan targeting van hetzelfde gen door serial miRNAs. Dergelijke studies kunnen helpen om de gemeenschappelijke functies van miRNAs seriële targeting individuele genen te verduidelijken en daarmee het verbeteren van ons begrip van hun rol bij maagkanker (GC) en voorstadia ziekten.
Human pepsinogens (PG) zijn inactieve pro-enzymen van de specifieke verteringsenzymen pepsine, die afkomstig zijn van het maagslijmvlies en kan biochemisch en immunochemisch worden ingedeeld in PGA en PGC [13, 14]. Eerdere studies toonden aan dat PGC expressie negatief was gecorreleerd met de mate van kwaadaardigheid van het maagslijmvlies en het ontwikkelen van maaglesies [15]. Een lage PGA /PGC verhouding kan worden gebruikt als een biomarker van serologische atrofische gastritis (AG), waarvan bekend is dat een voorstadium [15, 16]. Verschillende miRNAs zijn geïdentificeerd door twee target-gen voorspellen softwarepakketten (microkosmos Doelen en TargetScan Human), waarvan sommige gericht PGA (miR-212, miR-132, miR-20a-5p, miR-93) of PGC (buitenspiegels 662, miR-365, laat-7a, miR-320a). De miRNAs nauw verwant aan GC of andere maligniteiten werden geselecteerd voor verder onderzoek in de huidige studie. miR-20a-5p, een lid van de miR-17-92-cluster, werd opgereguleerd in maag-, colorectale en pancreas adenocarcinoom in situ
[17-19], weefsel expressie van laat-7a werd gecorreleerd met lymfeklieren metastase van GC [20], en miR-320a werd down-gereguleerd in primaire borstkanker en gecorreleerd met de invasie en metastase [21-23]. Deze drie miRNAs slechts eerder onderzocht in situ
, en de meeste studies zijn gericht op de functies; geen studies hebben hun mogelijke rol onderzocht als serum biomarkers voor de diagnose van GC en precancereuze ziekte. En of de voorspelde functionele miRNAs (miR-20a-5p, laat-7a en miR-320a) kan worden geïdentificeerd als een biomarker voor de diagnose van GC en precancereuze ziekte? Bovendien, hun relaties met hun doel kan worden voorspeld pepsinogen zijn onbekend.
Dit onderzoek dan ook gericht op het potentieel van miR-20a-5p evalueren, laat-7a en miR-320a in de diagnose van GC en de correlatie van de drie miRNAs en PGA, PGA en PGC /PGC ratio. We onderzochten de serumniveaus van de drie geselecteerde miRNAs in GC en voorstadium, en de correlatie tussen serum miR-20a-5p en de voorspelde doel PGA en tussen serum let-7a en miR-320a en hun voorspelde doel PGC . De resultaten misschien enkele waardevolle serologische merkers voor maagaandoeningen identificeren enigszins, alsmede het verschaffen experimenteel bewijs en waarmee ons verder begrip van de functies van serum miRNAs helpen bij het proces van carcinogenese.
Methods
onderwerpen
Een totaal van 291 proefpersonen die gastroscopie examens in de eerste Affiliated Hospital van de China Medical University 2004-2011 ondergingen werden geïncludeerd in deze studie. Informatie over geslacht, leeftijd en andere factoren werd verkregen door middel van een vragenlijst toegediend aan elk subject. Het onderzoek werd goedgekeurd door de Human Toetsingscommissie Ethiek van de China Medical University. Schriftelijke toestemming is verkregen van de deelnemers in overeenstemming met de Verklaring van Helsinki en de latere herziening. Alle patiënten ondergingen endoscopische maagslijmvlies biopsie, en de biopsie monsters werden in paraffine ingebedde en gekleurd door HE kleuring voor histologische diagnose, die werd gediagnosticeerd door twee ervaren pathologen. Gevallen met minimale oppervlakkige gastritis werden als controles [24]. De atrofische gastritis groep werd gedefinieerd volgens de histopathologie. De histopathologie diagnoses werd opgenomen lichte, matige en ernst, en alleen de graad van gematigde en de ernst werd ingeschreven in deze case-control studie. Negentig-vier patiënten werden histologisch bevestigde maagdarmkanker gevallen; 75 konden worden ingedeeld naar Lauren indeling, terwijl 19 niet kon. En onder de 75 gevallen [25], 22 van de 75 GC gevallen waren de intestinale soort, 45 waren het diffuse type en 8 waren het gemengde type. De monsters bij maagkanker overeenkomende groep in leeftijd en geslacht compositie bij patiënten met controles en met atrofische gastritis.
Serum RNA-isolatie en kwantitatieve reverse transcriptie-polymerase ketenreactie (qRT-PCR) test
Ongeveer 6 ml veneus bloed werd verzameld van elke proefpersoon. Serum totaal RNA werd geëxtraheerd volgens een methode beschreven door Liu et al R. [9] met enige modificaties. Serum werd gescheiden door centrifugeren bij 3000 g
gedurende 10 min, gevolgd door 15 min centrifugatie bij hoge snelheid bij 12.000 g
celresten te verwijderen. Het supernatant werd gewonnen en serum bewaard bij -80 ° C tot verdere verwerking. Totaal RNA werd geëxtraheerd uit 200 pi serum door zure fenol /chloroform zuivering en centrifugatie in isopropylalcohol. Elk monster was in 20 ui RNA-vrij DDH 2O oplossing en zes microliter totaal RNA reverse getranscribeerd in cDNA met behulp One Step PrimeScript miRNA cDNA Synthesis Kit (TaKaRa, Dalian, China). Real-time PCR werd uitgevoerd met behulp van een miRcute miRNA qPCR detectie kit (Tiangen, Beijing, China) op de Thermal Cycler Dice Real Time System (TaKaRa). Om de niveaus van de miRNAs te berekenen, synthetische HSA-miR-20a-5p, HSA-laat-7a en HSA-miR-320a bij bekende concentraties (TaKaRa) werden ook reverse-getranscribeerd en versterkt. De concentratie van elke miRNA werd vervolgens berekend volgens de standaard curve. Alle reacties, met inbegrip van no-template controles werden uitgevoerd in tweevoud.
Serum PG en H. pylori
niveaus
Serum PG concentraties en H. pylori
(HP) niveaus werden bepaald door enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) met PGA, PGC en H. pylori
ELISA-kits (Biohit Co., Ltd., Helsinki, Finland) [16, 26, 27]. De monsters werden onderzocht in een willekeurige volgorde, blind voor histologie resultaten. Elke partij opgenomen commerciële controles en verblind plasma controles laboratorium variatie te beoordelen. Alle plasma controles waren binnen het gemiddelde ± 2 SD's. Vijf procent van alle monsters werden in tweevoud.
Statistische analyse
log 10 van het miRNA kopieaantal vertegenwoordigde de niveaus van de miRNAs, en verschillen in de niveaus van miRNA tussen de groepen en in de gelaagdheid analyse werden vergeleken door one-way variantieanalyse. Receiver operating characteristic (ROC) krommen en het gebied onder de curve (AUC) werden gebruikt om de effecten van de diagnostische miRNAs evalueren en passende cut-off punten te bepalen. Medianen serum PG concentraties werden vergeleken tussen de drie groepen en de stratificatie analyse met Kruskal-Wallis H testen. Pearson correlatiecoëfficiënt werd gebruikt om de correlatie tussen miRNAs en PG concentraties schatten. De scatter plot was vertegenwoordigen de correlatieanalyse tussen het serum miRNA niveaus en PGA /PGC-verhouding, en tussen de PGA en PGC niveaus. Alle statistische analyses werden uitgevoerd met SPSS 17.0 software (SPSS Inc. Chicago, USA). Een tweezijdige p
waarde < 0,05 werd beschouwd als statistisch significant.
Resultaten
Demografie van de proefpersonen
291 personen geïncludeerd 103 controles, 94 patiënten met AG en 94 met GC. Zoals weergegeven in tabel 1, waren er geen significante verschillen in termen van geslacht (p
= 0,948), leeftijd (p
= 0,654) en H. pylori
infectiestatus (p
= 0,580) tussen drie groups.Table 1 Kenmerken van de proefpersonen
Variabelen
Controle
Atrofische gastritis
Maagkanker
n = 103

n = 94
n = 94
Geslacht
Man
65 (63,1%)
61 (64,9%)
59 (62,8%)
Vrouw
38 (36,9%)
33 (35,1%)
35 (37,2%)
P
= 0,948
Leeftijd (jaar)
Mean
59,1 ± 10,6
60,4 ± 11,2
60,2 ± 11,1
Bereik
23-80
28-83
27-80
P
= 0,654
H. pylori
infectiestatus
HP-
60 (58,3%)
48 (51,1%)
53 (56,4%)
Hp +
43 (41,7%)
46 (48,9%)
41 (43,6%)
P
= 0,580
correlaties tussen expressie van serum miRNAs en maag ziekten
Er waren geen significante verschillen in de niveaus van buitenspiegels 20a-5p en laat-7a van de controles, AG en GC groepen (p
= 0,581, 0,445, respectievelijk), maar miR-320a levels daalde geleidelijk tussen de verschillende groepen (4,99 ± 0,46 versus 4,94 ± 0,45 vs. 4,90 ± 0,44, p = 0,152
, tabel 2) .table 2 Niveaus van serum miRNAs (gemiddelde ± SD), PG (mediaan ± SD) tussen verschillende maag-en vaatziekten groepen
Variabelen

CON
AG
GC
P-
waarde
miR-20a-5p
3.77 ± 0.74
3,84 ± 0.69
3.83 ± 0.68
0,581
Man
3.80 ± 0.77
3.90 ± 0.73
3.88 ± 0.78
0.59
Female
3,72 ± 0,69
3.73 ± 0.60
3.75 ± 0.47
0,855
laat-7a
3,72 ± 0.34
3.77 ± 0.29
3.75 ± 0.28
0,445
Man
3,72 ± 0.31
3.78 ± 0.32
3.77 ± 0.28
0,367
Female
3.71 ± 0.39
3.76 ± 0.24
3.72 ± 0.28
0.93
miR-320a
4.99 ± 0.46
4.94 ± 0.45
4.90 ± 0.44
0,152
Man
5.03 ± 0.49
5.01 ± 0.46
5.00 ± 0.42
0.76
Vrouw
4.93 ± 0.40
4.81 ± 0.39
4.73 ± 0.43
0.035 *
PGA
146,3 ± 101,5
111,0 ± 85,4
130,1 ± 107,1
0,044 §
PGC
19,2 ± 17,6
14,0 ± 12,2
23,1 ± 23,0
0.003 §
PGA /PGC
9.52 ± 4.85
9.52 ± 5.23
7,86 ± 5.46
0.039 §
P
* Twitter: GC vs
controle; P
§ Twitter: verschil tussen de drie groepen. CON: Gevallen met minimale oppervlakkige gastritis werden behandeld als de controles; AG: atrofische gastritis; GC:. Maagkanker
Stratificatie naar geslacht en leeftijd bleek dat miR-320a expressie was lager bij vrouwelijke GC patiënten dan bij controles (p
= 0,035) en het verschil was vooral belangrijk bij vrouwelijke GC patiënten ouder dan 60 jaar, vergeleken met de controlegroep (p =
0,008) (Tabel 3). De AUC van miR-320a voor het opsporen van vrouwelijke GC patiënten ouder dan 60 was 0,699. Het beste afkappunt was 4,76, met een gevoeligheid van 65,2% (95% CI = 45,8-84,7%), en een specificiteit van 68,2% (95% CI = 48,7-87,6%). Ook analyse onze data in de H. pylori
stratificatie, maar er was geen verschil tussen elk van de groepen zoals weergegeven in tabel 3 4.Table stratificatie analyse van serum miR-320a niveau tussen verschillende maagaandoeningen groepen (gemiddelde ± SD )
miRNA
CON (n)
AG (n)
GC (n)
P-
waarde
miR-320a
Male
≥60
5,02 ± 0,44 (27)
4,96 ± 0,43 (28)
4,99 ± 0,46 (26)
0,796 Restaurant < 60
5,03 ± 0,53 (38)
5,05 ± 0,49 (33)
5,01 ± 0,39 (33)
0,859
Female
≥60
4,98 ± 0,46 (22)
4,77 ± 0,39 (24)
4,63 ± 0,41 (23)
0.008 * Restaurant < 60
4,88 ± 0,31 (16)
4,91 ± 0,39 (9)
4,92 ± 0,42 (12)
0,774
P
* Twitter: GC vs de kwaliteitscontrole. n: het monster aantal elke subgroep.
Tabel 4 Expressie niveaus van serum miRNAs (gemiddelde ± SD), PG (mediaan ± SD) tussen verschillende maag-en vaatziekten groepen wanneer gestratificeerd door H. pylori-status
Variabelen

CON
AG
GC
P-
waarde
HP-
miR-20a-5p
3.83 ± 0.71
3.88 ± 0.59
3,85 ± 0,70
0,926
Man
3.84 ± 0.72
3.90 ± 0.59
3.89 ± 0.34
0,931
Vrouw
3.82 ± 0.71
3,86 ± 0,60
3.75 ± 0.53
0,881
laat-7a
3,74 ± 0.31
3.81 ± 0.31
3.76 ± 0.25
0,505
Man
3.73 ± 0.31
3.84 ± 0.34
3.77 ± 0.25
0.36
Female
3,76 ± 0.30
3.76 ± 0.28
3,74 ± 0,27
0,972
miR-320a
5.02 ± 0.48
4.90 ± 0.45
4,91 ± 0,47
0,311
Man
5.03 ± 0.50
4.97 ± 0.48
4.98 ± 0.44
0,813
Female
4.99 ± 0.44
4,81 ± 0,41
4,74 ± 0,50
0,216
PGA
134,99 ± 92,27
96,78 ± 76,05
141,99 ± 125,80
0,056
PGC
15.13 ± 13.67
10.37 ± 9.02
23.15 ± 25.11
0.001
PGA /PGC
10.66 ± 4.81
11.00 ± 6.04
9.17 ± 6.28
0,22
Hp +
miR-20a-5p
3.69 ± 0.78
3.79 ± 0.79
3.81 ± 0.66
0,743
Man
3.75 ± 0.86
3.90 ± 0.31
3.86 ± 0.82
0,785
Female
3.62 ± 0.66
3.53 ± 0.55
3.74 ± 0.43
0,542
let-7a
3.68 ± 0.38
3.74 ± 0.27
3.74 ± 0.31
0,661
Man
3.70 ± 0.31
3.73 ± 0.30
3.77 ± 0,33
0,717
Female
3.66 ± 0.48
3.75 ± 0.18
3.70 ± 0.28
0,795
miR-320a
4.95 ± 0.44
4.98 ± 0.45
4.89 ± 0.40
0,634
Man
5.01 ± 0.49
5.05 ± 4.59
5.05 ± 0.46
0,961
Female
4.87 ± 0.36
4,81 ± 0,38
4.72 ± 0.36
0,471
PGA
162,15 ± 112,44
125,81 ± 92,66
114,74 ± 75,23
0,058
PGC
24.82 ± 20.80
17.86 ± 13.95
23.10 ± 20.16
0.182
PGA /PGC
7,91 ± 4.49
7.97 ± 3.70
6.16 ± 3.57
0.06
correlaties tussen expressie van serum miRNAs en hun doel kan worden voorspeld PG moleculen
voor de vereniging analyse werd miR-20a-5p expressie niet gecorreleerd met PGA niveaus (r = 0,110, p
= 0,269), en laat-7a en miR-320a werden niet gecorreleerd met PGC niveaus (r = -0,162, -0,102; p
= 0,102, 0,306, respectievelijk), maar ze waren positief gecorreleerd met de PGA /PGC ratio (r = 0,408, 0,255, 0,324, p =
< 0,001, 0,009, 0,001, respectievelijk) (Fig 1). In vergelijking van de onderzochte miRNAs en het doel kan worden voorspeld PG moleculen met controles, vonden we serum PGA levels in GC patiënten werden afgenomen (130,1 ± 107,1 versus 146,3 ± 101,5, p
= 0,276) werden, en PGC levels in GC patiënten toegenomen (23,1 ± 23,0 versus 19,2 ± 17,6 p
= 0,174), maar de verschillen waren niet significant. De PGA /PGC verhouding in de GC-groep daalde (7,86 ± 5,46 vs 9,52 ± 4,85, p = 0,039
, tabel 2), met een correlatiecoëfficiënt van 0,727 (figuur 1). In vergelijking met de controlegroep, werden serum miR-320a levels gedaald (4,90 ± 0,44 versus 4,99 ± 0,46, p
= 0,153) en serum PGC niveaus werden verhoogd in de GC-groep (23,1 ± 23,0 versus 19,2 ± 17,6 p
= 0,174), met ogenschijnlijk tegengestelde neigingen, maar de verschillen waren niet significant (Tabel 2). Figuur 1 Scatter plot grafiek. Figuur 1-A - C. De scatter plot van serum miRNA niveaus en hun correlaties met PGA /PGC-verhouding van de controlegroep. A. miR-20a-5p; B. let-7a; C. miR-320a. Figuur 1-D. De scatter plot van de correlatie tussen serum PGA en PGC niveaus. Alle scatterplot toonde de associatie analyse van de varianten tussen de x- en y-as.
Discussie
Recente bevindingen serum /plasma miRNAs hebben gepresenteerd als mogelijke biomarkers voor een aantal voorwaarden en vaatziekten, met inbegrip van menselijke kankers [28-31]. Studies hebben echter serum miRNAs ten opzichte maagklachten beperkt en geen aandacht is besteed aan miRNAs serieel targeting hetzelfde gen. Gebaseerd op een reeks van miRNAs voorspeld door bioinformatica software te richten op PGA en /of PGC, hebben we gekozen voor miR-20a-5p, laat-7a en miR-320a voor verdere studie. We onderzochten de mogelijkheden van miR-20a-5p, laat-7a en miR-320a in de diagnose van AG of GC en de correlatie van de drie miRNAs met hun doel kan worden voorspeld moleculen PGA, PGC en PGA /PGC-verhouding. De expressie van miR-320a was lager in oudere vrouwelijke GC patiënten dan bij controles, wat suggereert dat miR-320a een waardevol marker kan blijken voor het diagnosticeren van oudere vrouwen met GC. miR-20a-5p, laat-7a en miR-320a werden positief gecorreleerd met de PGA /PGC-ratio, die indirect de functionele status van het maagslijmvlies kan weerspiegelen.
Verschillende studies hebben geïdentificeerd tumor-specifieke miRNAs veranderingen in plasma /serum van patiënten met kanker, en hebben het potentieel van circulerende miRNAs als nieuwe niet-invasieve biomarkers voor kanker screening [12, 32] getoond. De resultaten van onze studie bleek geen verschillen in serum miR-20a-5p en laat-7a niveaus onder de controles, AG en GC groepen, terwijl miR-320a expressie viel gedurende de controles, AG en GC groepen. Serum miR-320a waren lager bij vrouwelijke GC patiënten dan bij controles, en dit verschil werd vooral gekenmerkt bij oudere vrouwen, ouder dan 60 jaar, wat suggereert dat miR-320a een nieuwe klinische biomarker voor GC diagnose bevolking specificiteit kan zijn. Studies van miR-320a tot nu toe beperkt zijn rol bij het reguleren van de fysiologische functies van de bloed-hersenbarrière [33], en met intrahepatische cholangiocarcinoom [34, 35], darmkanker [36] en leukemie [37]. Om het beste van onze kennis, de huidige studie is de eerste te melden dat miR-320a zou kunnen fungeren als een serum biomarker van GC, vooral bij oudere vrouwen. Hoewel er weinig studies de mechanismen onderzocht, hebben sommige een relatie tussen de voorspelde doel PGC en geslacht gerapporteerd, terwijl anderen gemeld dat de PGA /PGC-verhouding was gerelateerd aan de leeftijd, maar bij vrouwen [38, 39]. Software heeft ook voorspeld dat miR-320a richt zich op de oestrogeen-gerelateerde receptor gamma (http://​www.​targetscan.​org/​cgi-bin/​targetscan/​mamm_​31/​targetscan.​cgi?​species=​Human&​gid=​&​mir_​c=​&​mir_​nc=​&​mirg=​hsa-miR-320). Deze lijnen van bewijs suggereren allemaal dat miR-320a een belangrijke rol kunnen spelen bij de ontwikkeling van GC bij vrouwen en kan indirect tijdens de bedrijfstoestand van het maagslijmvlies. Het gebruik ervan als een biomarker zou worden geassocieerd met de voordelen van niet-invasie, lage kosten en hogere stabiliteit. Echter, verder onderzoek in grotere steekproeven nodig zijn de mechanismen te verklaren en het gebruik daarvan als biomarker verifiëren bij oudere vrouwen met GC. Natuurlijk, de veranderingen van miRNAs misschien niet alleen verband met de veranderingen van maagslijmvlies functie condities, maar ook in verband met andere factoren, voorbeelden anemie [40], de stimulus van pathogene micro-organismen zoals H.pylor
[41 ] i, sommige eiwitten die betrokken zijn bij de verwerking van miRNAs route zoals Drosha, Dicer en Argonaute [42, 43]. De andere factoren in verband moeten de verdere studies in de toekomst worden beschouwd.
Serum PGA en PGC niveau lijken gerelateerd aan maagslijmvlies glandulaire en cellulaire hoeveelheden en indirect weerspiegelen de secretaresse functie van de maag corpus en /of gastrische antrum. PGA wordt uitgescheiden door de maag corpus en maag hoek, terwijl PGC wordt uitgescheiden door de maag, met inbegrip van het corpus, hoek en antrum. Een daling van de PGA /PGC percentage ligt in de ontwikkeling van atrofische laesies op het maagslijmvlies [16] en een lage PGA /PGC verhouding gerelateerd aan een hoog risico op GC [38, 44, 45]. Deze werd derhalve gebruikt als een effectief parameter voor het screenen van individuen met een hoog risico van GC in de populatie, en kunnen een klinisch bruikbare biomarker van GC en precancerous ziekten zoals AG [16, 38, 46, 47]. Broutet et al. meldde dat hoewel PGC werd uitgescheiden door verschillende plaatsen in het maag werd gerelateerd aan PGA; terwijl PGA snel toe, PGC varieerde enigszins, en de correlatie coëfficiënt bereikte 0,75 [38]. De huidige studie is ook berekend op een correlatiecoëfficiënt tussen PGA en PGC van 0,727. Deze relatie kan verklaren waarom de PGA /PGC verhouding nauwkeuriger weerspiegelt de functionele status van het maagslijmvlies dan zowel PGA of PGC alleen. Onze studie vond geen relatie tussen de expressie van miR-20a-5p en PGA, let-7a en PGC of miR-320a en PGC, maar er waren positieve correlaties tussen elk van de drie en de PGA /PGC-verhouding reeds bekend was als een nuttig biomarker voor de ziekte van de diagnose, en de bestudeerde miRNAs waren synchroon met de bekende PGA /PGC-verhouding suggereert hun potentieel als bruikbare biomarkers voor de diagnose van de ziekte.
aangezien H. pylori
is een belangrijke omgevingsfactor in de maag die is een klasse Icarcinogen gedefinieerd door World Health Organization (WHO), we analyse drie miRNAs in de HP stratificatie bij verschillende maagklachten, maar vond geen verschil. Of H. pylori Kopen en /of andere omgevingsfactoren beïnvloeden deze vereniging heeft behoefte aan meer studies in grotere monsters in de toekomst.
Er was een beperking in onze studie. Ten eerste kunnen de geselecteerde miRNAs functioneel doel PGA /C en /of ten minste slechts bewijs door Bioinformatie software, aanwijzingen voor de verdere functionele experimenten nodig. Ten tweede correlatie van expressie in de weefsels van miRNAs en de voorspelde doeleiwit voor nader onderzoek. Ten derde is de correlatie van miRNAs expressie en klinisch-pathologische kenmerken van patiënten met maagkanker, waaronder classification Borrmann's groeipatroon, TNM, invasie diepte en lymfeknoop metastasen, et al. werden niet verder geanalyseerd omdat biopsie beperkte informatie ontbreekt. Ten vierde, de bron van de controles niet de normale populatie, maar met een minimale oppervlakkige gastritis volgens de pathologische diagnose en gastritis ook behoort een cascade van GC ontwikkeling.

Conclusie Concluderend hebben we aangetoond dat serum buitenspiegels 320a waren lager bij vrouwelijke patiënten ouder dan 60 GC dan bij controles leeftijd, en aldus een waardevolle marker vormen voor diagnose GC in deze groep. En de niveaus van miR-20a-5p, laat-7a en miR-320a werden positief gecorreleerd met PGA /PGC-ratio, die indirect de functionele status van het maagslijmvlies kan weerspiegelen.
Notes
Qian Xu, Qi- Guan Dong eveneens bijgedragen aan dit werk
Afkortingen
miRNA.
microRNA
PG:
Pepsinogen

PGA:
Pepsinogen Een
PGC:
Pepsinogen C
qRT-PCR:
kwantitatieve reverse transcriptie polymerase chain reaction
ELISA:
Enzyme-linked immunosorbent assay
ROC-curve:
Receiver operating characteristic curve

AUC:
Het gebied onder de curve
nt:
nucleotide
cDNA :
complementaire DNA
AG:
atrofische gastritis
GC:.
Maagkanker


verklaringen
Dankwoord
Dit werk wordt ondersteund door subsidies van de National Key Basic Research Program van China (973 Program ref geen. 2010CB529304), de National Natural Science Foundation of China (Ref No.31200968) en de Stichting voor Wetenschap en Technologie in de provincie Liaoning (Ref nr. 2011225002).
Authors 'originele ingediende dossiers voor afbeeldingen
Hieronder staan ​​de links naar originele ingediende dossiers van de auteurs voor afbeeldingen. 'Originele bestand voor figuur 1 12907_2012_129_MOESM2_ESM.doc Authors' 12907_2012_129_MOESM1_ESM.pdf Auteurs originele bestand voor figuur 2 Competing belangen
Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript, en niet over een commerciële of andere vereniging die een belangenconflict kunnen opleveren bijdragen.
Authors '
YY bedacht en deze studie ontworpen en herzien van het manuscript. QG-D was verantwoordelijk voor het experiment en uitgevoerd data interpretatie. QX die betrokken zijn bij het schrijven van het papier en de herziening van manuscript kritisch voor belangrijke intellectuele inhoud. LP-S deel aan de opzet van de studie deel. CY-H voerde de statistische analyse. Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.

• Stikstofoxidevrij een endogene remmer van maagzuurafscheiding in geïsoleerde menselijke maagklieren
• CD44 /CD24 Expressie in recidiverende maagkanker: een retrospectieve analyse