Expression de sérum miR-20a-5p, laissez-7a, et miR-320a et leurs corrélations avec pepsinogène dans la gastrite atrophique et cancer gastrique: une étude cas-témoins

Expression de sérum miR-20a-5p, laissez-7a, et miR-320a et leurs corrélations avec pepsinogène dans la gastrite atrophique et cancer gastrique: une étude cas-témoins
Résumé de l'arrière-plan
L'identification des miARN série ciblant la même protéine fonctionnelle gastrique pourrait fournir de nouvelles et efficaces biomarqueurs sérologiques pour le diagnostic du cancer gastrique (CG). Le but de cette étude était d'évaluer le potentiel de miR-20a-5p, laissez-7a et miR-320a dans le diagnostic des AG ou GC et la corrélation des trois miARN avec leurs molécules cibles prédites PGA, PGC et PGA /PGC ratio.
Méthodes
Le total de 291 patients inclus 103 contrôles (CON), 94 avec gastrite atrophique (AG) et 94 avec GC. Les niveaux de miARN sériques ont été détectés par inverse quantitative réaction en chaîne de transcription-polymerase et pepsinogène sérique A (PGA) et C (PGC) ont été déterminées par des dosages immuno-enzymatiques.
Niveau Sérum miR-320a de résultats a diminué par les contrôles, AG et GC groupes qui étaient les cascades de développement du GC, alors qu'il n'y avait pas de différences significatives dans les niveaux de miR-20a-5p et laissez-7a parmi les témoins, AG et GC groupes. Lorsque stratifiés selon le sexe et l'âge, le sérum miR-320a expression était plus faible chez les patients du GC femmes que chez les témoins (p = 0,035)
, en particulier chez les patients du GC femmes âgées de 60 ans (p = 0,008)
. Pour distinguer les patients du GC femmes âgées de plus de 60, l'aire sous la courbe de fonctionnement caractéristique de miR-320a était 0,699, et le meilleur point de coupure était de 4,76 avec une sensibilité de 65,2% et une spécificité de 68,2%. En ce qui concerne les corrélations entre le miR-20a-5p sélectionné, laissez-7a, miR-320a et PGs, nous avons trouvé qu'il y avait une corrélation positive entre tous les trois et le rapport PGA /PGC (r = 0,408, 0,255, 0,324; p
= < 0,001, 0,009, 0,001, respectivement), mais il n'y avait pas de relation entre l'expression de sérum miR-20a-5p et son PGA prévue de la cible, ou entre let-7a et miR-320a et de leur cible prédite PGC . Sérum miR-320a a été diminué et PGC a été augmenté dans le groupe GC par rapport au groupe témoin.
Conclusions de Niveaux de sérum miR-320a étaient plus faibles chez les patients du GC femmes âgés de plus de 60 ans que chez les témoins, ce qui peut fournir un marqueur de valeur potentielle pour le diagnostic des femmes plus âgées avec GC. Les niveaux de sérum miR-20a-5p, laissez-7a et miR-320a étaient positivement corrélés avec PGA /PGC, qui peuvent refléter indirectement l'état fonctionnel de la muqueuse gastrique.
Maladie Mots-clés
Sérum microRNA Biomarker Pepsinogène gastrique Contexte
Il est essentiel d'explorer les biomarqueurs sensibles, spécifiques et non-invasives tumorales qui peuvent être utilisés pour le diagnostic précoce, le pronostic, l'estimation et la prévision récurrence. Les microARN (miARN) sont une classe d'ARN non codantes très conservées et endogènes 19-24 nucléotides de long, qui régulent l'expression des gènes cibles au niveau post-transcriptionnel. L'accumulation des données indique que les miARN sont impliqués dans des processus biologiques importants liés à la prolifération, l'apoptose, la différenciation, la métastase, l'angiogenèse et la réponse immunitaire, tandis que la déréglementation des miARN peut être crucial dans l'initiation du cancer, la progression et le résultat du traitement [1, 2]. Il a été récemment montré que le sérum ou le plasma humain contient de grandes quantités de miARN stables, les profils d'expression qui pourraient potentiellement être utilisés pour identifier les divers types de cancer, notamment le cancer de la prostate, lymphome à grandes cellules B, le cancer de l'ovaire, le cancer du foie et de la non . les miARN de cancer du poumon -petit cellulaire [3-7] font partie d'un réseau complexe de réglementation; plusieurs gènes peuvent être régulés par un miRNA, mais un seul gène peut également être subtilement réglementés par un groupe de miARN [2]. Peu d'études ont étudié l'association entre les miARN sériques et des maladies gastriques [8, 9], plusieurs études ont porté sur l'expression des miARN plasmatiques [10-12], Liu H et al. miR-378 identifié comme marqueur biologique sérique [8], R et Liu et al. sélectionnés cinq miARN (miR-1, -20, -27a, -34 et -423-5p) comme une empreinte digitale pour le diagnostic de GC [9]. Mais aucune attention n'a été accordée au ciblage du même gène par miARN série. Cependant, ces études pourraient aider à clarifier les fonctions communes de miARN série ciblant les gènes individuels et ainsi améliorer notre compréhension de leurs rôles dans le cancer gastrique (GC) et les maladies précancéreuses.
Pepsinogènes humaines (PGs) sont pro-enzymes inactives du pepsine d'enzymes digestives spécifiques, qui proviennent de la muqueuse gastrique et peut être classé biochimiquement et immunochimique dans la PGA et PGC [13, 14]. Des études antérieures ont montré que l'expression de PGC est en corrélation négative avec le degré de malignité de la muqueuse gastrique et le développement des lésions gastriques [15]. Un PGA /rapport PGC bas peut être utilisé en tant que biomarqueur sérologique de la gastrite atrophique (AG), qui est connu pour être une condition précancéreuse [15, 16]. Plusieurs miARN ont été identifiés par les paquets de deux cibles de gènes prédire logiciels (Cibles Microcosme et TargetScan humain), dont certains ciblés PGA (miR-212, miR-132, miR-20a-5p, miR-93) ou PGC (Mir- 662, miR-365, laissez-7a, miR-320a). Les miARN étroitement liés à GC ou d'autres tumeurs malignes ont été sélectionnées pour une enquête plus approfondie dans l'étude actuelle. miR-20a-5p, un membre du cluster miR-17-92, a été régulée à la hausse dans l'estomac, colorectal et adénocarcinomes pancréatiques in situ
[17-19], d'expression tissulaire de let-7a a été corrélée avec métastases ganglionnaires de GC [20], et miR-320a a été régulés à la baisse dans le cancer du sein primaire et en corrélation avec l'invasion et les métastases [21-23]. Ces trois miARN ont seulement été précédemment étudiée dans
situ, et la plupart des études se sont concentrées sur leurs fonctions; aucune étude ont étudié leurs rôles potentiels en tant que biomarqueurs sériques pour le diagnostic de GC et de la maladie précancéreuse. Et si les miARN fonctionnels prédites (miR-20a-5p, laissez-7a et miR-320a) peuvent être identifiés en tant que biomarqueur pour le diagnostic de GC et de la maladie précancéreuse? En outre, leurs relations avec leur pepsinogène cible prédite sont inconnus.
Cette étude a donc pour objectif d'évaluer le potentiel de miR-20a-5p, laissez-7a et miR-320a dans le diagnostic de GC et la corrélation des trois miARN et PGA, PGC et PGA /rapport PGC. Nous avons étudié les taux sériques des trois miARN sélectionnés dans GC et son état précancéreux, ainsi que la corrélation entre le sérum miR-20a-5p et son PGA cible prédite, et entre le sérum let-7a et miR-320a et de leur cible prédite PGC . Les résultats identifient peut-être plusieurs marqueurs sérologiques précieux pour les maladies gastriques dans une certaine mesure, ainsi que de fournir des preuves expérimentales et de référence pour faciliter notre compréhension des fonctions de miARN sériques dans le processus de cancérogenèse.
Méthodes
sujets
Un total de 291 sujets qui ont subi des examens gastroscopie dans le premier hôpital affilié de l'Université médicale de Chine 2004-2011 ont été inclus dans cette étude. Informations sur le sexe, l'âge et d'autres facteurs ont été obtenus au moyen d'un questionnaire administré à chaque sujet. L'étude a été approuvée par le Comité d'éthique humaine de l'Université médicale de Chine. Le consentement éclairé écrit a été obtenu des participants conformément à la Déclaration d'Helsinki et de sa révision ultérieure. Tous les patients ont subi une biopsie endoscopique de la muqueuse gastrique, et les échantillons de biopsie ont été inclus dans la paraffine et colorées par coloration HE pour le diagnostic histologique qui a été diagnostiqué par deux pathologistes expérimentés. Les cas de gastrite superficielles minimales ont été traités comme les contrôles [24]. Le groupe de gastrite atrophique a été définie selon l'une histopathologie. Les diagnostics histopathologiques a été inclus légère, modérée et la gravité, et seulement le degré de gravité modérée et a été inclus dans cette étude cas-témoins. Quatre-vingt-quatre patients ont été histologiquement confirmé cas d'adénocarcinome gastrique; 75 pourraient être classés selon la classification de Lauren, alors que 19 ne pouvait pas. Et parmi les 75 cas [25], 22 des 75 cas GC étaient du type intestinal, 45 sont du type diffus et 8 sont du type mixte. Les échantillons dans le groupe de cancer gastrique appariés dans la composition de l'âge et le sexe des patients avec des contrôles et de gastrite atrophique. Isolement
ARN sérique et inverse quantitative réaction en chaîne de transcription-polymerase (qRT-PCR)
sang Environ 6 ml veineux a été prélevé sur chaque sujet. L'ARN total dans le sérum a été extrait à l'aide d'un procédé décrit par Liu R et al. [9] avec quelques modifications. Le sérum a été séparé par centrifugation à 3000 g
pendant 10 minutes, suivie d'une centrifugation de 15 min à grande vitesse à 12000 g Comment faire pour supprimer complètement les débris cellulaires. Le sérum surnageant est récupéré et stocké à -80 ° C jusqu'à traitement ultérieur. L'ARN total a été extrait à partir de 200 ul de sérum par l'acide phénol /chloroforme et la purification de la centrifugation dans l'alcool isopropylique. Chaque échantillon était tous dans 20 ul exempt d'ARN ddH 2O solution et six microlitres d'ARN total a été inverse transcrit en ADNc à l'aide de One Step Kit PrimeScript miRNA de synthèse d'ADNc (Takara, Dalian, Chine). PCR en temps réel a été réalisée en utilisant un kit de détection miRcute miRNA qPCR (Tiangen, Beijing, Chine) sur le Thermal Cycler Dice Système Temps réel (Takara). Pour calculer les niveaux de miARN, synthétique hsa-miR-20a-5p, hsa-let-7a et hsa-miR-320a à des concentrations connues (Takara) ont également été une transcription inverse et amplifiés. La concentration de chacun des miARN a été ensuite calculée en fonction de la courbe standard. Toutes les réactions, y compris les contrôles sans matrice, ont été analysés en double.
Sérum PG et H. pylori Les concentrations sériques de PG de
niveaux et H.pylori de niveaux (HP) ont été déterminées par-enzymatique immunosorbent assay (ELISA) avec PGA, PGC et H.pylori
kits ELISA (Biohit Co., Ltd., Helsinki, Finlande) [16, 26, 27]. Les échantillons ont été analysés dans un ordre aléatoire, aveugle aux résultats histologiques. Chaque lot comprend des contrôles commerciaux et des contrôles de plasma aveugle pour évaluer la variation de laboratoire. Tous les contrôles de plasma étaient dans la moyenne ± 2 écarts. Cinq pour cent de tous les échantillons ont été analysés en double.
Analyse statistique
Le journal 10 des miRNA nombre de copies représenté les niveaux des miARN, et les différences dans les niveaux de miARN entre les groupes ainsi que dans l'analyse de stratification ont été comparés par une analyse de variance. Récepteur d'exploitation (ROC) courbes et l'aire sous la courbe ROC (AUC) ont été utilisés pour évaluer les effets de diagnostic des miARN et pour déterminer les points de coupure appropriés. Médianes des concentrations sériques de PG ont été comparés entre les trois groupes de même que dans l'analyse de la stratification en utilisant des tests de Kruskal-Wallis H. Le coefficient de corrélation de Pearson a été utilisé pour estimer la corrélation entre les miARN et les concentrations de PG. Le diagramme de dispersion était de représenter l'analyse de corrélation entre les taux sériques de miARN et PGA /rapport PGC, et entre les niveaux de la PGA et PGC. Toutes les analyses statistiques ont été effectuées en utilisant SPSS 17.0 logiciel (SPSS Inc. Chicago, États-Unis). A deux faces p
valeur < 0,05 a été considérée comme statistiquement significative.
Résultats
Démographie des sujets de l'étude
Les 291 sujets inclus 103 contrôles, 94 patients avec AG et 94 avec GC. Comme le montre le tableau 1, il n'y avait pas de différences significatives en termes de sexe (p = 0,948
), l'âge (p = 0,654
) et l'état de l'infection de H. pylori (p = 0,580
) entre trois groups.Table 1 Caractéristiques des variables de l'étude des sujets
contrôle
gastrite atrophique
cancer gastrique
n = 103

n = 94
n = 94
sexes Homme
65 (63,1%)
61 (64,9%)
59 (62,8%) 38 (36,9%) de
Femme
33 (35,1%)
35 (37,2%)
P
= 0,948
âge (années)
moyenne
59,1 ± 10,6 60,4 ± 11,2

60.2 ± 11.1
Gamme
23-80
28-83
27-80
P
= 0,654
l'état d'infection de H.pylori
60 (58,3%) de HP-
48 (51,1%)
53 (56,4%)
Hp +
43 (41,7%)
46 (48,9%)
41 (43,6%)
P
= 0,580
Corrélation entre l'expression des miARN sériques et des maladies gastriques
Il n'y avait pas de différences significatives dans les niveaux de Mir- niveaux 20a-5p et laissez-7a parmi les témoins, AG et les groupes de GC (p = 0,581
, 0,445, respectivement), mais miR-320a a diminué progressivement entre les différents groupes (4,99 ± 0,46 vs 4,94 ± 0,45 vs 4,90 ± 0,44, p = 0,152
, tableau 2) .Table 2 niveaux de miARN sériques (moyenne ± écart-type), PG (médiane ± écart-type) entre les différents groupes de maladies gastriques de Variables

CON
AG
GC
P-
valeur
miR-20a-5p
3,77 ± 0,74 ± 3,84
3,72 ± 0.69 de
0.69
3,83 ± 0,68
0,581
3,80 ± 0,77
3,90 ± 0,73
3,88 ± 0,78
0,59
Femme
Homme 3,73 ± 0,60 3,75 ± 0,47

0,855
laissez-7a
3,72 ± 0,34 3,77 ± 0,29

3,75 ± 0,28
0,445
Homme
3,72 ± 0,31
3,78 ± 0,32 3,77 ± 0,28

0,367
Femme
3,71 ± 0,39 3,76 ± 0,24

3,72 ± 0,28
0,93
miR-320a
4,99 ± 0,46 4,94 ± 0,45

4,90 ± 0,44
0,152
5,03 ± 0,49
5.01 ± 0.46 ± 5.00
0,42
0,76
Homme Femme
4,93 ± 0,40 4,81 ± 0,39

4,73 ± 0,43
0,035 *
PGA
146,3 ± 101,5
111,0 ± 85,4 130,1 ± 107,1

0,044 §
19,2 ± 17,6 14,0 ± 12,2

23,1 ± 23,0
0.003 le § de PGC
PGA /PGC
9,52 ± 4,85 ± 5,23 9,52

7,86 ± 5,46
0,039 §
P
*
: GC vs
contrôle; P
§
: différence entre les trois groupes. CON: Cas avec la gastrite superficielle minimale ont été traités comme les contrôles; AG: gastrite atrophique; GC:. Cancer gastrique
Stratification par sexe et âge a montré que l'expression de miR-320a était plus faible chez les patients du GC femmes que chez les témoins (p = 0,035
), et la différence était particulièrement significative chez les patients du GC femmes âgés de plus de 60 années, par rapport aux témoins (p = 0,008
) (tableau 3). La CUA de miR-320a pour détecter les patients GC femmes âgées de 60 était 0,699. Le meilleur point de coupure était de 4,76, avec une sensibilité de 65,2% (IC à 95% = 45,8 à 84,7%), et une spécificité de 68,2% (IC à 95% = 48,7 à 87,6%). Nous avons également l'analyse de nos données dans la stratification du H.pylori, mais il n'y avait pas de différence entre l'un des groupes comme indiqué dans le tableau 4.Table analyse 3 Stratification de sérum niveau miR-320a entre les différents groupes de maladies gastriques (moyenne ± SD )
miRNA
CON (n)
AG (n)
GC (n)
P-
valeur
miR-320a
Homme
≥60
5,02 ± 0,44 (27)
4,96 ± 0,43 (28)
4,99 ± 0,46 (26)
0,796
< 60
5,03 ± 0,53 (38)
5,05 ± 0,49 (33)
5.01 ± 0.39 (33)
0,859
Femme
≥60
4,98 ± 0,46 (22)
4,77 ± 0,39 (24)
4,63 ± 0,41 (23)
0,008 *
< 60
4,88 ± 0,31 (16)
4,91 ± 0,39 (9)
4,92 ± 0,42 (12)
0,774
P
*
: GC vs
contrôle. n signifie le nombre de chaque sous-groupe de l'échantillon.
Tableau 4 niveaux de miARN sériques d'expression (moyenne ± écart-type), PG (médiane ± écart-type) entre les différents groupes de maladies gastriques après stratification par statut H.pylori
Variables

CON
AG
GC
P-
valeur
HP-
miR-20a-5p
3,83 ± 0,71
3,88 ± 0,59 3,85 ± 0,70

0,926
3,84 ± 0,72
3,90 ± 0,59
3,89 ± 0,34
0,931
Homme Femme
3,82 ± 0,71 3,86 ± 0,60

3,75 ± 0,53
0,881
laissez-7a
3,74 ± 0,31 3,81 ± 0,31

3,76 ± 0,25
0,505
Homme
3,73 ± 0,31 3,84 ± 0,34

3,77 ± 0,25 0,36

Femme
3,76 ± 0,30 3,76 ± 0,28

3,74 ± 0,27
0,972
miR-320a
5,02 ± 0,48 4,90 ± 0,45

4,91 ± 0,47
0,311
5,03 ± 0,50 ± 0,48 4,97

Homme 4,98 ± 0,44
0,813
Femme
4,99 ± 0,44 ± 0,41 4,81

4,74 ± 0,50
0,216
PGA
134,99 ± 92,27
96,78 ± 76,05
15,13 ± 13,67
10,37 ± 9,02
23,15 ± 25,11
0,001
PGA /PGC
10,66 ± 4,81
141,99 ± 125,80
0,056
PGC 11,00 ± 6,04
9,17 ± 6,28
0,22
Hp +
miR-20a-5p
3,69 ± 0,78 3,79 ± 0,79

3,81 ± 0,66
0,743
Homme
3,75 ± 0,86 3,90 ± 0,31

3,86 ± 0,82
0,785
Femme
3,62 ± 0,66 3,53 ± 0,55

3,74 ± 0,43
0,542
let-7a
3,68 ± 0,38 3,74 ± 0,27

3,74 ± 0,31
0,661
Homme
3,70 ± 0,31 3,73 ± 0,30

3,77 ± 0,33
0,717
Femme
3,66 ± 0,48 3,75 ± 0,18

3,70 ± 0,28
0,795
miR-320a
4,95 ± 0,44 4,98 ± 0,45

4,89 ± 0,40
0,634
Homme
5.01 ± 0.49 ± 5.05
4,59
5,05 ± 0,46
0,961
Femme
4,87 ± 0,36 4,81 ± 0,38

4,72 ± 0,36
0,471
PGA
162,15 ± 112,44
125,81 ± 92,66
114,74 ± 75,23
0,058
PGC
24,82 ± 20,80
17,86 ± 13,95
23,10 ± 20,16
0,182
PGA /PGC
7,91 ± 4,49
7,97 ± 3,70 6,16 ± 3,57

0,06
Corrélation entre l'expression des miARN sériques et leur prédit molécules cibles PG
Pour l'analyse d'association, d'expression de miR-20a-5p n'a pas été corrélée avec PGA niveaux (r = 0,110, p = 0,269
), et laissez-7a et miR-320a ne sont pas corrélés avec PGC niveaux (r = -0,162, -0,102; p = 0,102
, 0,306, respectivement), mais ils ont tous été corrélé positivement avec le /rapport PGC PGA (r = 0,408, 0,255, 0,324; p =
< 0,001, 0,009, 0,001, respectivement) (Figure 1). En comparaison avec les miARN étudiées et les molécules de PG cibles prédites avec des contrôles, on a trouvé des niveaux de PGA sériques chez les patients atteints de GC ont diminué (130,1 ± 107,1 contre 146,3 ± 101,5, p
= 0,276) et PGC niveaux chez les patients atteints de GC ont été augmentés (23,1 ± 23,0 vs 19,2 ± 17,6 p
= 0,174), bien que les différences ne sont pas significatives. PGA /rapport de PGC dans le groupe GC a été réduite (7,86 ± 5,46 vs 9,52 ± 4,85, p = 0,039
, tableau 2), avec un coefficient de corrélation de 0,727 (figure 1). Par rapport aux témoins, les taux sériques de miR-320a ont diminué (4,90 ± 0,44 vs 4,99 ± 0,46, p = 0,153
) et les niveaux sériques de PGC ont été augmentés dans le groupe GC (23,1 ± 23,0 vs 19,2 ± 17,6 p
= 0,174), montrant des tendances apparemment opposées, bien que les différences ne sont pas significatives (tableau 2). Figure 1 Scatter tracé graphique. Figure 1-A - C. Le diagramme de dispersion des niveaux sériques de miARN et leurs corrélations avec PGA /rapport PGC du groupe témoin. A. miR-20a-5p; B. laissez-7a; C. miR-320a. Figure 1-D. Le diagramme de dispersion de la corrélation entre les niveaux de la PGA et PGC sériques. Tout le diagramme de dispersion a montré l'analyse de l'association des variantes entre axes x et y
. Discussion
résultats récents ont présenté miARN sérum /plasma comme biomarqueurs potentiels pour plusieurs conditions pathologiques, y compris les cancers humains [28-31]. Cependant, les études de miARN sériques par rapport aux maladies gastriques ont été limitées, et aucune attention a été accordée à miARN ciblant en série le même gène. Basé sur une série de miARN prévues par le logiciel bioinformatique pour cibler PGA et /ou PGC, nous avons sélectionné miR-20a-5p, laissez-7a et miR-320a pour une étude plus approfondie. Nous avons étudié la possibilité de miR-20a-5p, let-7a et miR-320a dans le diagnostic de AG et CG, et la corrélation des trois miARN avec leurs molécules cibles prédites de la PGA, PGC et PGA /rapport PGC. L'expression de miR-320a était plus faible chez les patients du GC femmes âgées que chez les témoins, ce qui suggère que miR-320a peut se révéler un marqueur utile pour diagnostiquer les femmes plus âgées avec GC. miR-20a-5p, laissez-7a et miR-320a étaient positivement corrélés avec le rapport PGA /PGC, ce qui pourrait refléter indirectement l'état fonctionnel de la muqueuse gastrique.
Plusieurs études ont identifié spécifiques de la tumeur miARN modifications dans le plasma /sérum des patients atteints de cancer, et ont montré le potentiel de circulation miARN comme nouveaux biomarqueurs non-invasives pour le dépistage du cancer [12, 32]. Les résultats de notre étude ont indiqué aucune différence dans le sérum miR-20a-5p et laissez-7a niveaux parmi les contrôles, AG et GC groupes, tandis que l'expression de miR-320a est tombé à travers les contrôles, AG et GC groupes. Les taux sériques miR-320a étaient plus faibles chez les patients du GC femmes que chez les témoins, et cette différence a été particulièrement marquée chez les femmes âgées, plus de 60 ans, ce qui suggère que miR-320a peut être un nouveau biomarqueur clinique pour le diagnostic de GC avec une spécificité de la population. Les études de miR-320a à ce jour ont été limitées à ses rôles dans la régulation des fonctions physiologiques de la barrière hémato-encéphalique [33], et cholangiocarcinome intrahépatique [34, 35], le cancer du côlon [36] et la leucémie infantile [37]. Au meilleur de notre connaissance, l'étude en cours est le premier à signaler que miR-320a pourrait agir comme un biomarqueur sérique de GC, en particulier chez les femmes âgées. Bien que peu d'études ont étudié les mécanismes, certains ont fait état d'une relation entre sa PGC cible prévue et le sexe, tandis que d'autres ont indiqué que le /rapport PGC PGA a été liée à l'âge, mais seulement chez les femmes [38, 39]. Software a également prédit que miR-320a cible le récepteur gamma liés à l'œstrogène (http://​www.​targetscan.​org/​cgi-bin/​targetscan/​mamm_​31/​targetscan.​cgi?​species=​Human&​gid=​&​mir_​c=​&​mir_​nc=​&​mirg=​hsa-miR-320). Ces lignes de preuve tous suggèrent que miR-320a peut jouer un rôle important dans le développement de GC chez les femmes, et pourrait refléter indirectement l'état fonctionnel de la muqueuse gastrique. Son utilisation en tant que biomarqueur serait associée à des avantages de non-atteinte, un faible coût et une plus grande stabilité. Cependant, d'autres études dans des échantillons plus importants sont nécessaires pour clarifier ses mécanismes et de vérifier son utilisation en tant que biomarqueur chez les femmes âgées avec GC. Bien entendu, les changements de miARN peut-être non seulement en relation avec les changements de conditions de la fonction de la muqueuse gastrique, mais aussi lié à d'autres facteurs, par exemple l'anémie [40], la stimulation de micro-organismes pathogènes tels que H.pylor
[41 ] i, certaines protéines impliquées dans la voie de traitement des miARN comme Drosha, Dicer et Argonaute [42, 43]. Les autres facteurs liés devraient être pris en considération dans les études complémentaires à l'avenir les taux sériques de la PGA et PGC de. Semblent être liées aux quantités glandulaires et cellulaires de la muqueuse gastrique, et reflètent également indirectement la fonction de secrétaire du corpus et /ou gastrique gastrique antrum. PGA est sécrétée à partir du corpus gastrique et angle gastrique, tandis que PGC est sécrétée de tout l'estomac, y compris le corps, l'angle et de l'antre. Une baisse du /rapport PGC PGA reflète le développement des lésions atrophiques sur la muqueuse gastrique [16], et un PGA /rapport PGC faible est lié à un risque élevé de GC [38, 44, 45]. Cela a donc été utilisé comme un paramètre efficace pour le dépistage des personnes à risque élevé de GC dans la population, et peut être un biomarqueur utile cliniquement du GC et les maladies précancéreuses telles que AG [16, 38, 46, 47]. Broutet et al. a indiqué que bien que PGC a été sécrété à partir de différents sites dans l'estomac, elle est liée à la PGA; tandis que la PGA a augmenté rapidement, PGC a varié légèrement et le coefficient de corrélation atteint 0,75 [38]. L'étude actuelle a aussi calculé un coefficient de corrélation entre la PGA et des PGC 0,727. Cette relation peut expliquer pourquoi le rapport de la PGA /PGC reflète l'état fonctionnel de la muqueuse gastrique plus précisément que ce soit de la PGA ou PGC seul. Notre étude n'a trouvé aucune relation entre l'expression de miR-20a-5p et PGA, laissez-7a et PGC, ou miR-320a et PGC, mais il y avait une corrélation positive entre chacun des trois et le PGA /rapport PGC qui était déjà connue comme un biomarqueur utile pour le diagnostic de la maladie, et les miARN étudiés étaient synchrones avec le PGA /rapport PGC connu suggérant leur potentiel en tant que biomarqueurs utiles pour le diagnostic de la maladie.
Considérant H. pylori
est un facteur environnemental important dans l'estomac qui est également un Icarcinogen de classe définie par l'Organisation mondiale de la santé (OMS), nous avons analyse les trois miARN dans la stratification HP parmi les différentes maladies gastriques, mais n'a trouvé aucune différence. Que H.pylori
et /ou d'autres facteurs environnementaux affectent cette association a besoin de plus d'études dans des échantillons plus importants à l'avenir.
Il y avait une certaine limitation dans notre étude. Tout d'abord, les miARN sélectionnés peuvent fonctionnellement cible PGA /C et /ou au moins était que la preuve par le logiciel bioinformations, certains éléments de preuve pour les expériences fonctionnels supplémentaires sont nécessaires. Deuxièmement, la corrélation d'expression dans le tissu des miARN et sa protéine cible prédite est nécessaire pour une enquête plus approfondie. En troisième lieu, la corrélation des miARN expression et les caractéristiques clinico des patients atteints de cancer de l'estomac, comme la classification de Borrmann, modèle de croissance, stade TNM, la profondeur de l'invasion et métastases ganglionnaires, et al. ne sont pas encore analysées en raison des informations de biopsie limitée manquante. Quatrièmement, la source des contrôles n'a pas été la population normale, mais avec une gastrite superficielle minimale selon le diagnostic pathologique, et la gastrite a également fait partie d'une cascade de développement du GC.
Conclusion
En conclusion, nous avons démontré que le sérum Mir- 320a niveaux étaient plus faibles chez les patients du GC femmes âgées de plus de 60 ans que chez les témoins, et peuvent donc représenter un marqueur utile pour le diagnostic de GC dans ce groupe. Remarques
Qian Xu Et les niveaux de miR-20a-5p, laissez-7a et miR-320a étaient positivement corrélés avec PGA rapport /PGC, ce qui pourrait refléter indirectement l'état fonctionnel de la muqueuse gastrique., Qi- Guan Dong a contribué également à ce travail
abréviations
miRNA:.
microRNA
PG:
pepsinogène

PGA:
pepsinogène A
PGC:
pepsinogène C
qRT-PCR:
quantitative transcription inverse réaction en chaîne par polymérase
ELISA:
Enzyme linked immunosorbent assay
courbe ROC:
récepteur fonctionnant courbe caractéristique

AUC:
La zone sous la courbe
nt:
nucléotide
ADNc :
ADN complémentaire
AG:
atrophique gastrite
GC:. Le cancer gastrique


Déclarations Remerciements
Ce travail est soutenu par des subventions du Programme national de recherche clés de base de la Chine (973 Programme ref no. 2010CB529304), la National Natural Science Foundation de Chine (Ref No.31200968), et la Fondation des sciences et de la technologie dans la province du Liaoning (n ° de réf. 2011225002).
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Auteurs
YY conçu et conçu cette étude et a révisé le manuscrit. QG-D était responsable de l'expérience et de réaliser l'interprétation des données. QX participé à la rédaction du document et la révision de manuscrit critique de son contenu intellectuel important. LP-S a participé à la conception de l'étude en partie. CY-H a effectué l'analyse statistique. Tous les auteurs ont lu et approuvé le manuscrit final.

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