Promoter метилирование и экспрессию гена TIMP3 в желудочном cancer

метилирования промоторов и экспрессии гена TIMP3 при раке желудка
Аннотация
фоне
развития карциномы желудка является многоступенчатый процесс, который включает в себя более одного гена. Аберрантных изменения в метилирование ДНК рассматриваются в качестве третьего механизма, который приводит к анти-онкогенов инактивация, которая играет существенную роль в развитии опухоли. В данном исследовании мы оценивали взаимосвязь между аномальным метилирования промотора CpG островков тканевого ингибитора металлопротеиназы 3 (TIMP3) гена, его экспрессии белка, а также клинико-патологическими особенностями аденокарциномы желудка.
Методы
статус метилирования промоторных CpG островков и экспрессии белка гена TIMP3 в опухолях и прилегающих к ним нормальных слизистых тканей 78 больных с аденокарциномой желудка были обнаружены с помощью метилирования специфической ПЦР (MSP) и иммуногистохимии.
Результаты
КПГ острова метилирования TIMP3 была обнаружена в опухолевых тканях, рак прилегающих тканей и лимфатических узлов с метастазами. В порядке возрастания, частота гиперметилирование этих тканей были 35,9% (28 из 78 неопухолевых тканей), 85% (17 из 20 случаев на ранней стадии), 89,7% (52 из 58 случаев прогрессивной стадии), и 100% (78 из 78 метастатических лимфатических узлов). Заметное различие было обнаружено между опухолями и неопухолевых тканей (Р
≪ 0,05), но нет никакой разницы существовало среди подгрупп опухолей (P
> 0,05). Анализ Immunohistochemistry подтвердил TIMP3 понижающей регуляции в опухолевых тканях. Уровень экспрессии гена TIMP3 составила 100% в неопухолевых тканях, но, по-видимому снизилась в различной степени на разных этапах, то есть снизилась до 30% (6/20) на ранней стадии, до 3,4% (2/58) в прогрессивной стадии, и до 0% (0/78) в метастатических лимфатических узлов. Среди 70 опухолевых тканей с выражением отрицательным TIMP3, 64 (91,4%) были гиперметилированы и 6 были неметилированным (8,6%), что указывает на значительную связь между гиперметилированием и снижение или отрицательное выражение TIMP3 (P &
л; 0,01).
Вывод
гиперметилирование промоторной области в CpG островов является основным механизмом экспрессии генов TIMP3 и может предоставить доказательства для диагностики и стадии оценки молекулярного развития рака желудка.
Виртуальные слайды
виртуальном слайды для этого статьи можно найти здесь: HTTP:... //WWW diagnosticpathol логии diagnomx ес /против /1756134016954958
Ключевые слова
Желудочный Аденокарцинома тканевый ингибитор металлопротеиназы 3 (TIMP3) метилирования Справочная информация
рак желудка (или рак желудка) является одним из наиболее распространенных злокачественных заболеваний в мире. Развитие заболевания при раке желудка является многоступенчатый процесс, который включает в себя более одного гена. факторы заболевания в конечном счете действуют на разных генов на разных этапах, что приводит к изменению уровней структуры и экспрессии генов, которые приводят к развитию рака желудка. Потеря функции антионкоген может происходить по различным каналам. В дополнение к делеции и мутации, отклоняющиеся изменения в метилирование ДНК рассматриваются в качестве третьего механизма, приводящего к антионкоген инактивации [1, 2], который играет существенную роль в развитии опухоли. CpG островки, которые являются CpG-богатых последовательностей, расположенных в верховьях промоторной области гена домашнего хозяйства, представляют собой области, при которых не возникают, как правило цитозин метилирование, хотя стимуляция определенных факторов приводит к его метилирования. Следовательно, векторы экспрессии ДНК, ингибируется в этой области [3]. Инактивация многих ассоциированных с опухолью генов, таких как р16, THBS1, TIMP3, hMLH1 и MGMT связаны с метилирования их соответствующих областей промотора [4-8]. тканевый ингибитор металлопротеиназы-3 (TIMP3) связана с развитием опухоли, особенно антагонизм активность металлопротеиназ матрикса, а также ингибирования роста опухоли, ангиогенез, инвазию и метастазирование [9].
В этой работе мы обнаружили метилирование промотора гена TIMP3 CpG острова и экспрессии белка в нормальных тканях желудка слизистой оболочки желудка, раковых тканей и метастатических лимфатических узлов 78 больных раком желудка с помощью метилирования-специфической ПЦР (MSP) и иммуногистохимии. Мы исследовали корреляцию промотора гена метилирование с соответствующим экспрессии белка, а затем анализировали взаимосвязь гена TIMP3 CpG острова ненормального метилирования с развитием, а также клинические и патологические особенности, желудка аденокарциномы.
Материалы и методы
материалы
Все 78 случаев желудка нормальной ткани, рак желудка, и метастатических лимфатических узлов были проверены с помощью патологического диагноза. Образцы опухоли были получены в период с марта 1998 года по май 2005 года в Первой больнице дочернему и провинции Ляонин опухолевой больницы от послеоперационных пациентов с раком желудка (мужчины: п
= 54; женщины: п
= 24) со средним возрастом 56,2 ± 7,5 лет. Среди образцов, полученных, 20 были раннего рака желудка, 58 были поздних стадиях рака желудка, 44 были дифференциации, и 14 были недифференцированные. Опухоль постановка была основана на стандартах перевалочных Международный союз против рака TNM, типирование рака желудка роста Пути и Статутом театрализации и желудка набрав рака в Японии [10-12] из Китайского института рака медицинского университета. Гидрохинон (10 ммоль /л) и бисульфат натрия (3,9 моль /л) были приобретены у компании Sigma. A-Clean System до ДНК был приобретен у компании Promega. TIMP3 антитела и SP комплект были приобретены у Boster биологической инженерии Лтд (Далянь). Все образцы были обработаны и сделаны анонимно в соответствии с этическими и правовыми нормами. Протокол был одобрен Комитетом по медицинской этике больницы провинции Ляонин опухолью и Китайского медицинского университета им.
MSP
В методе ССП [13], обработка метилазы проводили на нормальных клетках периферической крови и использовали в качестве положительного контроля. Необработанные клетки использовали в качестве отрицательного контроля. Последовательности метилированных (TIMP3-М) и неметилированных (TIMP3-U) праймеров были следующими: (1) последовательности TIMP3-M праймеров, 5'CGTTTCGTTATTTTTTGTTTTTCGGTTTTC-3 'и 5'-CCGAAAACCCCGCCTCG-3'; и (2) последовательности праймера TIMP3-U, 5'-TTTTGTTTTGTTATTTTTTGTTTTTGGTTTT-3 'и 5'-CCCCCCAAAAACCCCACCTCA-3'. Условия реакции ПЦР были следующими: 95 ° C начальная денатурация в течение 5 мин, 95 ° С, денатурация в течение 30 с (40 циклов), 59 ° C отжига в течение 60-х (40 циклов), 72 ° С расширением в течение 60-х (40 циклов ), и 72 расширение ° С в течение 10 мин. Электрофорез в агарозном геле и окрашивания ЕВ были затем выполнены. Данные из гелей были собраны с помощью сканера плотности лазерной (фирма Pharmacia LKB Ultroscan) и затем анализировали. Все эксперименты повторяли три раза, а среднее значение использовали для статистического анализа.
Immunohistochemistry
Для иммуногистохимии, мы использовали streptomycesavidin-пероксидаза метод окрашивания. Иммуногистохимическое окрашивание проводили в соответствии с инструкциями изготовителя. В качестве диагностического критерия, наблюдение коричневато-желтого цитоплазме после окрашивания считается положительным результатом для выражения TIMP3. Для элементов управления, область нормальной ткани окрашивали в качестве положительного контроля, и секция нормальная ткань была использована в качестве негативного контроля и окрашивали PBS вместо первичного антитела. Забив стандарт проводили в соответствии с методом, описанным Shimizu [14]. Мы наблюдали, интенсивность и распределение положительных клеток при большом увеличении окрашивания; нет окрашивания не был забит как 0, слабый окрашивания, но значительно сильнее, чем отрицательный контроль был забит как 1, ясное пятно оценивается как 2, и сильное пятно оценивается как 3. Отсутствие положительных клеток контроль не засчитывается как 0. Требуемое количество положительных клеток, то есть &ЛТ, 30%, 30% -60%, а &GТ; 60%, оценивали как 1, 2, и 3, соответственно. На основании общей оценки, образцы оценивали на экспрессию TIMP3. Счет ≤2 был классифицирован как негативный, балл 3 был слабоположительны, оценка в диапазоне от 4 до 5 было положительным, а оценка 6 был сильно положительным.
Статистический анализ
Различия между TIMP3 скорость метилирование промотора гена и экспрессию белка из образцов были обнаружены и статистически анализировали с помощью рентгеновых
2 и методы Фишера. Все данные были проанализированы с помощью статистического программного обеспечения SPSS12.

Результаты гена TIMP3 Анализ метилирования промотора
Извлеченные геномной ДНК из образца усилено МПВ. Размеры метилированных и неметилированных продуктов ПЦР были 116 и 122 б.п., соответственно. Ген TIMP3 промотор метилирование явление обычно наблюдается в нормальных тканях желудка, рак желудка и лимфатических узлов образцов метастазирования. Положительные темпы обнаружения распределились следующим образом: 85% (17/20) для ранней диагностики рака желудка, 89,7% (52/58) для поздних стадий рака желудка, 98,7% (77/78) для метастатических лимфатических узлов, и только 35,9% (28 /78) для нормальной желудочной ткани. Значительное увеличение гена TIMP3 метилирования промотора наблюдалось во всех группах желудочного рака (P
&л; 0,01; Рисунок 1 и таблица 1), что свидетельствует о том, что метилирование гена TIMP3 могут быть вовлечены в канцерогенез и метастазирования рака желудка опухолей и метастатических ткани лимфатических узлов. Рисунок 1 Метилирование-специфической ПЦР (MSP): 1, нормальное управление (нормальная желудочная ткань); 2, ранний рак желудка; 3, поздних стадиях рака желудка; 4, передача лимфатического узла. M, Маркер DL2000; м, метилирование фрагмент усиления; и, фрагмент unmethylation амплификации.
Таблица 1 Желудочный карцинома TIMP3 промотор метилирование и экспрессию белка
организации

п (%)

TIMP3 промотор метилирование

TIMP3 белок выражение

Позитивный

Позитивный

Нормальный желудок
78
28 (35,9) 78
(100,0)
Early желудка
рака 20
17 (85,0)
9 (45,0)
Расширенный рак желудка
58
52 (89,7)
21 (36,2)
метастазов в лимфоузлах
78
77 (98,7) 12
(15,4)
иммуногистохимии анализа экспрессии белка TIMP3
экспрессии белка TIMP3 был положительным во всех 78 случаях нормальной желудочной ткани (100%). Среди случаев карциномы желудка, 9 из 20 пациентов были положительными на ранних стадиях рака желудка; 11 случаев были отрицательными (55%), 21 случаев были положительными, а 37 были отрицательными (63,8%), в 58 случаях запущенного рака желудка; и 12 случаев были положительными и 66 случаев были отрицательными (84,6%) у 78 больных с метастатическим желудочных лимфатических узлов. было обнаружено, что сниженная экспрессия TIMP3, что наблюдалось в желудочном группах рака статистически значимыми (Р &
л; 0,01; Рисунок 2 и таблица 1), предполагая, что скорость экспрессии белка TIMP3 снизилась в желудочном раковых опухолей и метастатических ткани лимфатических узлов , Это привело к снижению экспрессии белка гена, может быть связано с ранее наблюдаемым увеличением TIMP3 метилирования образцов желудочного рака, потому что метилирование как известно, подавляет экспрессию белка. экспрессия белка TIMP3, в основном, находится в цитоплазме нормальных желез. В некоторых клетках, небольшое количество экспрессии было обнаружено в клеточных мембранах (рисунок 2). В нормальных клетках слизистой оболочки желудка, не наблюдалось разрушение железистой структуры и окраска не была значительно снижена. Ранние желудочных желез рака показали структурные повреждения и слабую окраску раковых клеток. Усовершенствованные желудочные раковые ткани показали большие участки массивного роста (недифференцированный рак) и, кроме отдельных клеток, а остальные не были окрашены. Рисунок 2 TIMP3 белка immunohistochemisty (SP 400 ×): а, нормальная ткань желудка; б, ранний рак желудка; с, раком желудка; д, передача лимфатического узла.
Взаимосвязь между геном TIMP3 метилирования промотора и экспрессии белка TIMP3
В расширенном желудка группы рака, скорость TIMP3 метилирования была значительно выше, чем неповоротливым и вложенными растущих тканей (100% против 77,8% соответственно; P
&л; 0,01). Скорость метилирование TIMP3 в метастатических лимфатических узлов в группе ≥7 ткани было значительно выше, чем ≪ 7 группа ткани (100% против 83,3%, соответственно; Р
≪ 0,05). Subserosal и серозный ткани группы была значительно выше, чем подслизистого и миометрия группы тканей (91,3% и 96,6% против 50% соответственно; P
&л; 0,05). Увеличение скорости метилирования гена TIMP3 в целом наблюдается диффузного как роста, метастазов в лимфоузлах (≥7) и subserosal и серозных опухолей, подразумевая, что никакого отношения не существовало между TIMP3 метилирования гена и размера опухоли, макроскопического типа и гистологического типа. Положительная скорость 58 случаев передовых желудка тканей рака был 36,2% (21). экспрессия белка TIMP3 в массивных и вложенными растущих тканях была значительно выше, чем у тканей роста диффузного типа (55,6% vs.19.4%, соответственно; P
&л; 0,01). экспрессия белка TIMP3 в метастатических лимфатических узлах ≥7 ткани была значительно выше, чем ≪ 7 ткани (47,2% против 18,2%, соответственно; Р
≪ 0,05) (таблица 2). Эти результаты свидетельствуют о том, что снижение скорости экспрессии TIMP3 белка было более распространенным в диффузного типа роста и лимфатических узлов метастазами (≥7) опухоли, но снижение экспрессии не было связано с размером опухоли, валового типа, гистологического типа и глубины invasion.Table 2 Взаимосвязь между расширенному желудка онкологическая патология TIMP3 метилирования и его белкового уровня экспрессии
Индекс


п

TIMP3 метилирования промоторов

TIMP3 белка размер опухоли

размер опухоли (см)
&л; 5 страница 5 из 3 (60,0)
1 (20,0)
5 - 10
45
42 (93,3) <бр> 18 (40,0)
> 10
8
7 (87,5)
2 (25.0)
Общие типы
Borr.2
12
10 (83,3 )
4 (33,3)
Borr.3
37
33 (89,2)
15 (40.5)
Borr.4
9
9 (100,0)
2 (22.2)
Гистологическое дифференцировка
Дифференцированный
44
39 (88,6)
17 (38,6)
Недифференцированный
Результаты 14
13 (92,9) <бр> 4 (28,6)
модель роста
Глыбы + вложенная
27
21 (77,8) 15
(55,6)
диффузного как
31
31 (100,0 ) б
6 (19,4) б
узла метастазирования лимфы
&л; 7
36
30 (83,3)
17 (47,2)
≥7
22
22 (100,0) а
4 (18,2) а
Проникновение
подслизистых
6 мышечной
3 (50,0)
1 (16.7)
Subserosal
23
21 (91,3) а
9 (39,1)
серозной
29
28 (96,6)
11 (37,9)
Ap
&л; 0,05, Б.П.
&л; 0.01.
Обсуждение
формирование злокачественных новообразований является многофакторным и происходит в несколько этапов. Биологические характеристики злокачественных опухолей включают инвазивный рост и метастазирование. Механизм за развитием опухоли включает аномальные изменения в генной структуре и функции во внутренней части клетки. Современные теоретики считают, что процесс образования опухоли включает в себя два основных механизма: первый из них на генетическом уровне, то есть мутация гена приводит к изменению нуклеотидов ДНК; а второй находится на эпигенетическом уровне. Предыдущие исследования были сосредоточены на изменения в экспрессии генов, которые наследуются через мейоза и не влекут за собой изменения в последовательности ДНК, но влиять на экспрессию генов и регулирующую функцию ДНК, в основном, путем химической модификации. Этот механизм приобретает все большее внимание исследователей процессов формирования опухоли [15, 16].
В ДНК опухолевых тканей, abberant метилирование часто наблюдаются в регионах промотора гена, в том числе гипометилированию в онкоген. Этот ген тесно связан с циклом пролиферации клеток и гиперметилированием в генах супрессоров опухолей. Эти патологические изменения метилирования может активировать онкогены [17-19] и ингибируют транскрипцию мРНК генов-супрессоров опухолей [20], что приводит к инактивации генов. Ненормальная метилирование ДНК происходит за счет наличия высоко метилированных CpG островков в конце 5'-области управления промотора. Семейство ТИМП имеет четыре члена белка: TIMP-1, 2, 3 и 4. TIMP-1, 2, и 4 представляют собой растворимые секреторными белками. В противоположность этому, TIMP-3 представляет собой нерастворимый белок, который связывается с внеклеточным матриксом, расположен в наружной клеточной мембране [21], и может быть тесно связана с базальной мембраной. Функция TIMPs является ингибирование фактора некроза опухоли-альфа (TNF-alpha) -converting ферментов и индукцию запрограммированной гибели клеток через стабильной клеточной поверхности TNF-alpha-рецептора [22]. Индукцию апоптоза через TIMP происходит по двум путям: ММР зависимыми и независимыми. Несмотря на то, ТИМП-3 и 4 имеют высокое сродство к ММР-2, белки эффективно ингибируют МТ1-ММР, тем самым активизируя процесс ММР-2 зимоген и ингибирования роста опухолевых клеток и метастазирование. Смит и др. [23] обнаружили, что экспрессия TIMP-3 в линиях клеток рака толстой кишки человека очень редки в митозе. Большинство клеток арестованы в фазе G1, хотя применение TNF-alpha антитела уменьшает митотический на 70%.
Для изучения взаимосвязи между TIMP3 и рака желудка, а также его механизм в желудочном инактивации, мы обнаружили ген TIMP3 5 'остров гиперметилирование CpG в нормальной слизистой оболочке желудка, рак желудка, и метастатических лимфатических узлов. Мы обнаружили, что в &ГТ; 85% всех желудочных раковых тканей, ген TIMP3 5 'CpG острова выставлены аномальное метилирование, который был значительно выше (Р
≪ 0,01), чем у нормального желудка группы ткани, которая подразумевает, что TIMP3 промотор гена CpG острова метилирование пониженную экспрессию генов TIMP3 и был, таким образом, основным механизмом-супрессоры-инактивация при раке желудка. Ганьон и др. [24] сообщили, что во всех линиях раковых клеток MCF-7 легких с потерей экспрессии мРНК TIMP3 и ген TIMP3 промотора CpG острова метилирования, деметилирования индуцируют 5-аза-корд. Выражение TIMP3 до и после 5-аза-корд индукции оценивали с помощью ОТ-ПЦР, который показал, что деметилирование привело к TIMP3 гена повторного выражения, в соответствии с нашими результатами.
В настоящем исследовании, все 78 случаев нормальной ткани желудка были положительными для экспрессии TIMP3 белка. Среди этих 78 случаев, только 28 (35,9%) были положительными для метилирования. Среди 20 пациентов с ранним раком желудка, 9 были положительными для экспрессии TIMP3 белка и 17 (85%) были положительны на метилирование. Среди 58 случаев поздних стадий рака желудка, 21 были положительными для экспрессии TIMP3 белка и 52 (89,7%) были положительными для метилирования. Среди 78 случаев метастатических лимфатических узлов, 12 были положительными для экспрессии TIMP3 белка и 77 случаев (98,7%) были положительными для метилирования. Увеличение скорости метилирования был значительным среди ранних стадий рака, прогрессирующего рака и метастатических лимфатических узлов образцов по сравнению с образцами нормальных тканей (P &
ЛТ; 0,01), подтверждая, что потеря экспрессии белка TIMP3 был тесно связан с геном TIMP3 промотора CpG острова метилирование. Фэн-HF и др. [25] сообщили те же результаты в ЕАО и СГЭ-3 хориокарциному клеточных линий. Таким образом, наше исследование подтвердило, что ген TIMP3 промотор CpG острова метилирование был основной причиной снижения экспрессии белка TIMP3 при раке желудка.
Среди 58 передовых образцов желудочного рака, 52 были положительными для TIMP3 промотора CpG острова метилирования и 21 были положительными для экспрессии белка TIMP3. Эти данные предполагают, что помимо метилирования CpG острова, другие факторы, такие как генетической изменчивости вызвано отсутствием экспрессии гена TIMP3. В наших экспериментах, 34 пробы были положительными для метилирования, и unmethylation обычно интерпретируются следующим образом: неполный статус метилирования генов может существовать, и если опухолевая ткань смешивается с неопухолевых клеток, положительным ПЦР-продукта для unmethylation (ССП с неметилированная праймер) можно наблюдать. экспрессия белка TIMP3 образца был отрицательным, так что эти образцы были определены как метилирование положительной.
В Китае 5-летняя выживаемость больных раком желудка составляет лишь около 40% после резекции. Плохой прогноз связан с обширной местной инвазии и /или региональных метастазов лимфатических узлов [26]. Местные рецидивы остается одной из основных причин смертности от онкологических заболеваний после резекции у больных раком желудка [27]. Поэтому надежные критерии для прогнозирования рецидива и выявления опухолей должна быть установлена, чтобы понять молекулярные и клеточные процессы, а также открыть для себя новые и возможные терапевтические молекулярные мишени [28].
Кербель [29] сообщили, что субклонирования опухолевых клеток метастатический потенциал имеют преимущество роста на ранней стадии первичного очага. Причиной такого роста является преимуществом, что метастатические популяция подклон клетка может секретировать определенный фактор или фактор роста клеток местный, вызывая тем самым особую реакцию, что приводит к селективному росту. Обнаружение молекулярных уровней маркеров в первичных опухолевых образцах может отражать общие метастатических характеристики всей опухоли. В этой группе показатели метилирования были лишь 35,9% для нормальных тканей желудка, 85% и 89,7% для ранних и поздних стадиях рака, соответственно, 98,7% для метастатических лимфатических узлов. Последовательно экспрессии белка высокой TIMP3 наблюдался только в нормальных тканях желудка. Ранние и на поздних стадиях рака желудка выставлялись фокусного слабое выражение, и метастатические лимфатические узлы показали почти не положительное выражение. Этот вывод предположил, что TIMP3 метилирование увеличилась с опухолевой прогрессии и что экспрессия белка постепенно снижается. Следовательно, метастатический потенциал и рост преимущество клеток постепенно увеличивается, в конечном счете, приводит к метастазированию. Yegnasubramanian и др. [30] сообщили, что метастазирование опухоли была связана с TIMP3 метилирования в линиях клеток рака простаты, как показали в реальном времени MSP проб из 73 больных с ранними стадиями рака простаты, 91 пациентов с метастатическим раком простаты, и 25 случаев с простатической ткани. Этот результат подразумевает связь между CpG метилирования и градуировки и прогресс рака простаты. TIMP3 гена метилирование по сообщениям, играет важную роль в процессе метастазирования, а также обнаружение TIMP3 CpG метилирования имеет некоторое практическое значение в прогнозировании метастатического потенциала первичной опухоли.
TIMP3 имеет высокую частоту генетической изменчивости во многих типах человека злокачественные опухоли, в том числе мутации, делеции, метилирование, хромосомной транслокации, и так далее [31]. Эти мутации приводят к потере нормальной функции гена-супрессора опухоли, а именно, ингибирование пролиферации клеток (т.е. ген деактивацией) и тесно связаны с развитием рака [32]. Тем не менее, несколько исследований были проведены на генной модификации TIMP3 в первичном раке желудка, и результаты этих исследований показывают противоречивые результаты низкой скорости удаления гена, чтобы не мутации вообще. Соответственно, другие механизмы инактивации рака желудка с участием гена TIMP3 исследованы [33]. Таким образом, сложность опухоли патогенеза является не только отражением генетических изменений в результате мутации или удаления, но и отражение эпигенетических изменений, таких как метилирование ДНК. Углубленное исследование взаимосвязи между метилирование ДНК и экспрессии генов, а также его соответствующего механизма, рекомендуется, потому что результаты могут служить ориентиром при клиническом лечении рака.
Объявления
Финансирование
Исследование финансировалось Национальным фондом естественных наук Китая (№ 30271477) и проекта При поддержке исследовательского фонда Научно-Возвращенный заморских китайских ученых, Государственного Министерства образования (№ 2002-247). исходные файлы для представленных авторов о изображений
Ниже приведены ссылки на оригинальные файлы представленных авторов для изображений. "Исходный файл для фигурного 1 13000_2013_791_MOESM2_ESM.tiff Авторского 13000_2013_791_MOESM1_ESM.jpeg авторов исходного файла для фигуры 2 Конкурирующие интерес
Авторы настоящим заявляют, что у них нет никаких конкурирующих интересов друг с другом. Вклад
Авторского
ZG и JZ проводят патологические и ПЦР-обследования, DD и ZG проанализировали данные, и ZG подготовил рукопись. Все авторы читали и одобрили окончательный вариант рукописи.

• Сравнение эндоскопической подслизистой диссекции (ОУР) и радикальной операции по поводу раннего рака желудк…
• Корреляция экспрессии hK6 с рецидивом опухоли и прогнозом при поздних стадиях рака желудка