Rėmėjas metilinimas ir išraiška TIMP3 geno skrandžio cancer

Rėmėjas metilinimo ir išraiška TIMP3 geno skrandžio vėžio pervežimas Anotacija
fone
Skrandžio vėžio vystymosi yra kelių pakopų procesas, kuris apima daugiau nei vieną geną. Netipiško pokyčiai DNR metilinimo laikomi trečiosios mechanizmą, kuris veda į anti-onkogeno nukenksminti, kuris vaidina svarbų vaidmenį navikų vystymosi. Šiame tyrime mes įvertino paskirstyti tarp nukrypusiu nuo normos metilinimo rengėjo santykius CpG salos audinių inhibitorius metaloproteinazės 3 (TIMP3) geno, jos baltymų ekspresijos, ir klinikos ypatybių skrandžio adenokarcinoma.
Metodai
metilinimo statusą iš promotoriaus CpG salų ir baltymų raiškos TIMP3 geno navikų ir gretimuose normaliuose gleivinės audinių 78 pacientams, sergantiems skrandžio adenokarcinoma buvo aptiktos metilinimo konkrečių PGR (MSP) ir imunohistocheminiu.
rezultatai Viesbutis The CpG salos metilinimo TIMP3 buvo aptikta vėžinių audinių vėžį gretimuose audiniuose bei limfmazgių su metastazėmis. Didinant pavedimą, hypermethylation dažnis šių audinių buvo 35,9% (28 iš 78 ne navikiniai audiniai), 85% (17 iš 20 jaunesniųjų atvejai), 89,7% (52 iš 58 progresuojanti pakopų atvejai), ir 100% (78 78 metastazavusiu limfmazgiuose). Ryškus skirtumas buvo nustatyta, tarp auglių ir ne-neoplastinių audinių (P
< 0,05), bet ne skirtumas egzistavo tarp auglių pogrupių (P
> 0,05). Imunohistocheminis analizė patvirtino TIMP3 žemyn reguliavimo navikų audiniuose. Iš TIMP3 genų ekspresijos lygis buvo 100% ne navikinių audinių, bet, matyt, sumažėjo įvairių mastu skirtinguose etapuose, ty sumažėjo 30% (6/20) ankstyvoje stadijoje, iki 3,4% (2/58) ne progresuojanti stadija, ir 0% (0/78) metastazių limfmazgiuose. Tarp 70 navikų audiniuose neigiami TIMP3 išraiškos, 64 (91,4%) buvo hypermethylated ir 6 buvo nemetilintas (8,6%), nurodant reikšmingas ryšys tarp hypermethylation ir sumažinta arba neigiamas TIMP3 išraiška (p
< 0,01).
Išvada
iš promotoriaus regione hypermethylation į CpG salų yra pagrindinis mechanizmas TIMP3 genų ekspresiją ir gali pateikti įrodymus dėl molekulinės diagnostikos ir vertinimo etapus skrandžio vėžio.
Virtualūs skaidres
virtualus skaidres už tai straipsnyje galima rasti čia: http:... //www diagnosticpathol nologija diagnomx ES /vs /1756134016954958
Raktiniai žodžiai
skrandžio adenokarcinoma Audinių inhibitorius metaloproteinazės 3 (TIMP3) metilinimas Background
skrandžio vėžys (arba skrandžio karcinoma) yra vienas iš labiausiai paplitusių piktybinių navikų pasaulyje. Ligos vystymąsi skrandžio vėžys yra kelių etapų procesas, kuris apima daugiau nei vieną geną. Ligos veiksniai galiausiai veikti skirtingų genų skirtingais etapais, sukelia genų struktūros ir raiškos lygmenyse, kurie veda prie skrandžio kancerogenezėje plėtros pokyčius. Praradimas funkcija anti-onkogeno gali atsirasti įvairiais kanalais. Be trynimų ir mutacijų, neįprastų pokyčių DNR metilinimo laikomi trečiosios mechanizmą kurio anti-onkogeno nukenksminti [1, 2], kuris vaidina svarbų vaidmenį navikų vystymosi. CpG salos, kurios CpG turtingas sekas esančių tiekėjų promotoriaus regione yra namų ruošos geno, yra regionai, kuriuose citozinu metilinimas nėra paprastai atsiranda, nors stimuliacija tam tikrų veiksnių lemia jo metilinimo. Todėl, DNR išraiška yra slopinamas šiame regione [3]. Daugelio naviko susijusių genų, pavyzdžiui, P16, THBS1, TIMP3, hMLH1 ir MGMT inaktyvacijai yra susiję su jų atitinkamų promotoriaus regionuose [4-8] metilinimo. Audinių inhibitorius metaloproteinazės-3 (TIMP3) yra susijusi su auglių vystymuisi, ypač priešinamų matrikso metaloproteinazių veiklą, taip pat auglio augimo slopinimui, angiogenezę, invazija, ir metastazes [9].
Šiame darbe, mes nustatėme, metilinimo iš TIMP3 geno promotoriaus CpG salos ir baltymų raiškos normaliomis skrandžio gleivinės audinių, skrandžio vėžio audiniuose ir metastazių limfmazgiuose 78 pacientams, sergantiems skrandžio vėžiu, naudojant metilinimo konkrečių PGR (MSP) ir imunohistocheminis. Mes ištirti genų promotoriaus metilinimo koreliaciją su atitinkamu baltymų ekspresijos ir tada analizavo TIMP3 genas CpG salos nenormalus metilinimo santykius su plėtros, taip pat klinikinių ir patologinių funkcijų, skrandžio adenokarcinoma.
Medžiagos ir metodai
medžiagos
Visi 78 atvejai skrandžio normalaus audinio, skrandžio karcinoma, ir metastazavusiu limfmazgių patikrino patologinės diagnozės. Naviko mėginiai buvo imami nuo 1998 kovo iki 2005 m gegužės mėn pirmasis filialas ligoninės ir Liaoningo provincijos auglio ligoninėje nuo pooperacinių pacientams, sergantiems skrandžio vėžiu (vyrų: N
= 54; moterų: N pervežimas = 24), kurių vidutinis amžius nuo 56,2 ± 7,5 metų. Tarp pavyzdžių gautų 20 buvo anksti skrandžio vėžio, 58 buvo pažengusios stadijos skrandžio vėžio, 44 ​​buvo diferenciacijos, o 14 buvo nediferencijuota. Naviko stadija buvo grindžiamas Tarptautinės Sąjungos kovos su vėžiu TNM sustojimo standartus, spausdinimo skrandžio vėžio augimo keliu ir statuto Skirstymas ir skrandžio vėžio rašyti Japonijoje [10-12] iš Kinijos medicinos universiteto onkologijos institutas. Hidrochinono (10 mmol /l) ir natrio rūgščiojo sulfato (3,9 mol /l) buvo įsigytas iš Sigma. DNR valymo sistema buvo įsigytas iš PROMEGA. TIMP3 antikūnų ir SP rinkinys buvo įsigytas iš Boster Biologinės Engineering Co, Ltd (Dalian). Visi egzemplioriai buvo tvarkomi ir kad taptų anoniminiais, atsižvelgiant į etinius ir teisinius standartus. Protokolas buvo patvirtintas medicinos etikos komiteto Liaoningo provincijos auglio ligoninės ir Kinijos medicinos universiteto.
MSP
MSP metodą [13], metilazės apdorojimas buvo atliktas įprastomis periferinio kraujo ląsteles ir naudojamas kaip teigiamos kontrolės. Neapdorotos ląstelės buvo naudojamas kaip neigiamos kontrolės. Priemonės, kuriomis metilinti (TIMP3-M) ir nemetilintas (TIMP3-U) pradmenų sekas buvo taip: (1) TIMP3-M pradmens sekų, 5'CGTTTCGTTATTTTTTGTTTTTCGGTTTTC-3 'ir 5'-CCGAAAACCCCGCCTCG-3'; ir (2) TIMP3-U pradmenų sekas, 5'-TTTTGTTTTGTTATTTTTTGTTTTTGGTTTT-3 'ir 5'-CCCCCCAAAAACCCCACCTCA-3'. PGR reakcijos sąlygos buvo tokios: 95 ° C pirminis denatūruoti 5 min, 95 ° C temperatūroje, denatūruoti 30 s (40 ciklų), 59 ° C atkaitinimo už 60 (40 ciklų), 72 ° C, pratęsimo 60 (40 ciklų ), ir 72 ° C pratęsimas 10 min. Agarozės gelio elektroforezės "ir" EB dažymo Po to buvo atlikta. Duomenys iš gelių buvo surinkti su lazeriu tankio skaitytuvas (Pharmacia "LKB Ultroscan) ir vėliau analizuojami. Visi eksperimentai buvo kartojamas tris kartus, o vidutinė vertė buvo naudojamas statistinės analizės.
Imunohistocheminis
Dėl imunohistocheminiu, mes panaudojome streptomycesavidin-peroksidazės dažymo metodą. Imunohistocheminį dažymo buvo atliekami pagal gamintojo instrukcijas. Kaip diagnostikos kriterijų, A rusvai geltonas citoplazmoje po dažymo pastebėjimas buvo laikoma, kad tyrimo rezultatas TIMP3 išraiška. Už kontrolę, normalus audinio dalis buvo dažomi, kaip teigiama kontrolė, ir normalus audinio pjūvio buvo naudojamas kaip neigiama kontrolė ir nudažomi su PBS, o ne pirminio antikūno. Balai standartas buvo atliekamas pagal aprašytą metodą Shimizu [14]. Mes pastebėtas Dažymo intensyvumą bei paskirstymą teigiamų ląstelių aukštoje priartinimas; Nėra dažymo pelnytas kaip 0, silpnas dažymo bet žymiai stipresnis nei neigiamos kontrolės pelnytas, kaip 1, aiškus dėmė gavo kaip 2 ir stiprus dėmė gavo kaip 3. Ne teigiama kontrolė ląstelių įmetė kaip 0. reikiamą skaičių teigiamų ląstelių, ty, < 30%, 30% -60%, ir > 60%, buvo įmušė kaip 1, 2, ir 3, atitinkamai. Kuris apskaičiuojamas remiantis bendru balų, mėginiai buvo vertinamas TIMP3 išraiška. Balas ≤ 2 buvo klasifikuojama kaip neigiamas, iš 3 rezultatas buvo silpnai teigiama, balas svyruoja nuo 4 iki 5 buvo teigiamas, o 6 rezultatas buvo stipriai teigiamas.
Statistinė analizė
skirtumus tarp TIMP3 skirtumų geno promotoriaus metilinimo lygis ir baltymų ekspresija mėginių buvo aptikta ir statistiškai analizuojami χ
2 ir Fisher metodus. Visi duomenys buvo analizuojami su SPSS12 statistinės programinės įrangos.
Rezultatai
TIMP3 geno promotoriaus metilinimo analizė
Išgauti genomo DNR iš mėginio sustiprino JEP. Priemonės, kuriomis metilintų ir nemetilintas PGR produktų dydžio, buvo 116 ir 122 bp, atitinkamai. TIMP3 geno promotoriaus metilinimo reiškinys paprastai buvo stebima esant normalioms skrandžio audinių, skrandžio karcinoma, ir limfmazgiuose metastazės pavyzdžius. Teigiami aptikimo dažnis buvo toks: 85% (17/20) išankstinio skrandžio vėžio, 89,7% (52/58) už išplitusiu skrandžio vėžiu, 98,7% (77/78) metastazavusio limfmazgius, ir tik 35,9% (28 /78) normaliam skrandžio audinio. Reikšmingas padidėjimas TIMP3 geno promotoriaus metilinimo buvo stebimas visų skrandžio vėžio grupių (p
< 0,01; 1 pav ir 1 lentelė), o tai rodo, kad TIMP3 geno metilinimas gali būti įtraukti į kancerogenezėje ir metastazių skrandžio vėžio navikų ir metastazavusiu limfmazgiuose audiniuose. 1 pav Metilinimas konkrečių PGR (JEP): 1, normalus kontrolė (normalus skrandžio audinio); 2, anksti skrandžio vėžys; 3, pažangios skrandžio vėžys; 4, perdavimo limfmazgiuose. M, žymeklis DL2000; m Metilinimas amplifikacija fragmentas; u unmethylation amplifikacija fragmentas.
1 lentelė Skrandžio vėžys TIMP3 rengėjas metilinimas ir baltymų ekspresijos
organizacijų
n (%)
TIMP3 rengėjas metilinimas
TIMP3 baltymų išraiška
Teigiamas
Teigiamas
Normalus skrandžio
78
28 (35,9)
78 (100,0)
Ankstyvasis skrandžio vėžys
20
17 (85,0)
9 (45,0)
Išplėstinė skrandžio vėžys
58
52 (89,7)
21 (36,2)
limfiniai metastazių mazgas
78
77 (98,7)
12 (15,4)
imunohistocheminis analizės TIMP3 baltymų raiškos pervežimas TIMP3 baltymų ekspresijos buvo teigiamas visose 78 atvejais normalios skrandžio audinio (100%). Tarp skrandžio karcinoma atvejais 9 iš 20 pacientų buvo teigiami ankstyvos skrandžio vėžio; 11 atvejų buvo neigiamas (55%), 21 atvejų buvo teigiami, ir 37 buvo neigiamas (63,8%) 58 atvejais išplitusiu skrandžio vėžiu; ir 12 atvejai buvo teigiami ir 66 atvejai buvo neigiamas (84,6%) 78 pacientams, sergantiems metastazavusiu skrandžio limfmazgiai. Sumažintas TIMP3 išraiška, kuri buvo pastebėta, kad skrandžio vėžio grupės buvo nustatyta, kad statistiškai patikimas (p
< 0,01; 2 pav ir 1 lentelė), o tai rodo, kad TIMP3 baltymo ekspresiją lygis sumažėjo skrandžio vėžio auglių ir metastazių limfmazgiuose audinių , Ši sumažinta išraiška genų baltymų gali būti dėl to, kad anksčiau padidėjusį TIMP3 metilinimo skrandžio vėžio mėginių, nes metilinimas yra žinoma, kad slopinti baltymo ekspresiją. TIMP3 baltymo ekspresija daugiausia buvo įsikūręs normaliomis liaukų citoplazmoje. Po kelių ląstelių, nedidelė išraiškos buvo rastas ląstelių membranų (2 paveikslas). Be įprastų skrandžio gleivinės ląstelių, nėra liaukų struktūros sunaikinimas buvo pastebėtas ir dažymas nebuvo gerokai sumažintas. Ankstyvieji skrandžio vėžio liaukos parodė struktūrinę žalą ir silpna vėžinių ląstelių dažymas. Išplėstinė skrandžio vėžio audiniuose parodė didelius plotus didžiulio augimo (nediferencijuota karcinoma) ir, išskyrus iš atskirų ląstelių, likusi buvo nedažyta. 2 pav TIMP3 baltymų immunohistochemisty (SP 400 ×): A, normalus skrandžio audinio; B, anksti skrandžio vėžys; c, pažangios skrandžio vėžys; D, perdavimas limfmazgiuose.
Ryšys tarp TIMP3 geno promotoriaus metilinimo ir TIMP3 baltymų raiškos
Į išplitusiu skrandžio vėžiu grupėje, TIMP3 metilinimo lygis buvo gerokai didesnis nei kvailas ir įdėtos augančių audinių (100% vs 77,8%, atitinkamai; p
< 0,01). TIMP3 metilinimas norma metastazių limfmazgiuose į ≥7 audinių grupėje buvo reikšmingai didesnis nei < 7 audinių grupė (100% vs 83,3%, atitinkamai; p
< 0,05). Subserosal ir serosal audinių grupė buvo gerokai didesnis nei gleivine ir raumeninį audinį audinių grupėje (91,3% ir 96,6%, palyginti su 50%, atitinkamai; p
< 0,05). Padidėjęs TIMP3 genų metilinimas norma paprastai buvo pastebėtas difuzinio-kaip augimo, limfmazgių metastazių (≥ 7) ir subserosal ir serosal navikų, o tai reiškia, kad nė santykiai egzistavo tarp TIMP3 genų metilinimas ir naviko dydžio, makroskopinis tipo, ir histologinio tipo. Teigiamas rodiklis iš 58 atvejų išplitusiu skrandžio vėžiu, audinius buvo 36,2% (21). TIMP3 baltymų ekspresija masyvi ir įdėtos augančių audinių buvo gerokai didesnis nei pasklidųjų panašus augimo audinių (55,6% vs.19.4%, atitinkamai; p
< 0,01). TIMP3 baltymo ekspresiją, esant metastazėms, limfmazgių ≥ 7 audiniai buvo žymiai didesnis nei < 7 audinių (47,2%, palyginti su 18,2%, atitinkamai; P
< 0,05) (2 lentelė). Šie rezultatai rodo, kad sumažėjo TIMP3 baltymų ekspresijos lygis buvo labiau paplitęs difuzinio panašus augimo ir limfmazgių metastazavusiu (≥ 7) navikai, bet sumažėjo raiška nebuvo susijęs su naviko dydis, bendrojo tipo, histologinio tipo ir gylio invasion.Table 2 Ryšys tarp išplitusiu skrandžio vėžiu patologija TIMP3 metilinimo ir jame esančių baltymų ekspresiją
puslapis
N
TIMP3 promotorių metilinimas
TIMP3 baltymų naviko dydis

naviko dydis (cm)
< 5
5
3 (60,0)
1 (20,0)
5 - 10
45
42 (93,3)
18 (40,0)
> 10
8
7 (87,5)
2 (25,0)
General tipų
Borr.2
12
10 (83,3 )
4 (33,3)
Borr.3
37
33 (89,2)
15 (40,5)
Borr.4
9
9 (100,0)
2 (22,2)
histologinis diferenciacija
Diferencijuotas
44
39 (88,6)
17 (38,6)
Nediferencijuota
14
13 (92,9)
4 (28,6)
augimo modelis
gumulėlių + įdėtos
27
21 (77,8)
15 (55,6)
Difuzinė-kaip
31
31 (100,0 ); b
6 (19,4) b
limfmazgių metastazių
< 7
36
30 (83,3)
17 (47,2)
≥7
22
22 (100,0)
4 (18,2)
infiltracija
gleivine muscularis
6
3 (50,0)
1 (16.7)
Subserosal
23
21 (91,3)
9 (39,1)
serosa
29
28 (96,6)
11 (37,9)
AP
< 0,05, BP
< 0.01.
Diskusijos
piktybinių navikų formavimuisi yra kelių veiksnių ir vyksta keliais etapais. Biologines savybes piktybinių navikų yra invazinis augimas ir metastazes. Už naviko vystymosi mechanizmas apima nenormalius pokyčius genų struktūrą ir funkciją ląstelės vidų. Modernių teoretikai, kad navikų susidarymo procesas apima dvi pagrindines mechanizmus: pirmasis yra genetiniame lygiu, t.y., genų mutacija sukelia DNR nukleotidų sekoje; ir antrasis yra tuo epigenetinio lygiu. Ankstesni tyrimai daugiausia dėmesio buvo skirta pokyčius genų ekspresiją, kurie paveldėtų per mejozės ir nesusijusios su DNR seka pokyčius, bet įtakos išraiška ir genų, reglamentuojančio funkciją DNR, daugiausia cheminio modifikavimo. Šis mechanizmas yra vis daugiau dėmesio iš mokslininkų navikų susidarymo procesus [15, 16].
Atsižvelgiant navikų audiniuose, DNR, abberant methylations dažnai stebimas geno promotoriaus regionuose, įskaitant hipometilinimą į onkogeno. Šis genas yra glaudžiai susijęs su ląstelių proliferacija ciklą ir hypermethylation naviko slopintuvas genų. Šie nenormalūs metilinimo pokyčiai gali aktyvuoti onkogenų [17-19] ir slopina iRNR transkripcija navikas slopintuvas genų [20], todėl genų nukenksminimą. Nukrypęs nuo normos, metilinimas DNR įvyksta per aukštos metilintų CpG salos buvimas 5 'galo kontroliuojamas promotoriumi regione. TIMP šeimos turi keturis baltymų prisijungę: timp-1, 2, 3, ir 4 timp-1, 2, ir 4 yra tirpūs sekrecinių baltymų. Priešingai, TIMP-3 yra ne-tirpus baltymas, kuris sujungia su matriksą, yra išorinėje ląstelės membranos [21], ir gali būti glaudžiai susijęs su pamatinės membranos. Iš timps funkcija yra auglio nekrozės faktoriaus-alfa (TNF-alfa) -converting fermentų slopinimas ir programuota ląstelių mirtis indukcija per stabilios ląstelės paviršiaus TNF-alfa receptoriaus [22]. Apoptozės indukcija per TIMP atsiranda dviem būdais: MMA priklausomų ir nepriklausomų. Nors TIMP-3 ir 4 iš jų turi aukštą giminingumą MMP-2, baltymai veiksmingai slopina MT1-MMP, tokiu būdu aktyvuojant MMP-2 zymogen procesą ir slopina naviko ląstelių augimą ir metastazes. Smith ir kt. [23] nustatyta, kad timp-3 išraiška žmogaus gaubtinės žarnos vėžio ląstelių linijų yra reti mitozės. Dauguma ląstelių suimtas G1 fazėje, nors TNF-alfa antikūnų taikymas sumažina mitozinę areštą 70%.
Tirti tarp TIMP3 ir skrandžio vėžio ryšį, taip pat jo mechanizmą skrandžio nukenksminti, mes nustatėme, TIMP3 geną 5 "CpG sala hypermethylation normaliai skrandžio gleivinės, skrandžio karcinoma, ir metastazavusiu limfmazgiai. Mes nustatėme, kad > 85% visų skrandžio vėžio audinių, TIMP3 genų 5 'CpG sala eksponuojami netipiško metilinimas, kuris buvo žymiai didesnis (p
< 0,01) nei įprastos skrandžio audinių grupė, kuri reiškė, kad TIMP3 geno promotoriaus CpG sala metilinimas sumažintas TIMP3 genų ekspresiją ir taip buvo pagrindinis navikas slopintuvas-inaktyvacijai mechanizmas skrandžio vėžio. Gagnon ir kt. [24] pranešė, kad visais MCF-7 plaučių vėžio ląstelių linijų su TIMP3 iRNR išraiška nuostolių ir TIMP3 geno promotoriaus CpG salos metilinimo, demetilinimu buvo sukeltas 5-aza-CdR. TIMP3 išraiška prieš ir po 5-aza-CdR indukcija buvo įvertintas RT-PCR, kuris parodė, kad demetilinimu lėmė TIMP3 genų naujo išraiškos, suderinamas su mūsų rezultatus.
Šioje studijoje visi 78 atvejai normalų skrandžio audinio buvo teigiami TIMP3 baltymų išraiška. Tarp šių 78 atvejų, tik 28 (35,9%) buvo teigiami metilinimo. Tarp 20 pacientams su ankstyvos skrandžio vėžio, 9 buvo teigiamas TIMP3 baltymų raiškos ir 17 (85%) buvo teigiamas metilinimo. Tarp 58 atvejais išplitusiu skrandžio vėžiu, 21 buvo teigiami TIMP3 baltymų raiškos ir 52 (89,7%) buvo teigiami metilinimo. Tarp 78 atvejais metastazių limfmazgiuose, 12 buvo teigiami TIMP3 baltymų raiškos ir 77 atvejais (98,7%) buvo teigiami metilinimo. Padidėjęs metilinimas norma buvo reikšmingas tarp ankstyvojo vėžio, pažangių vėžiu ir metastazavusiu limfmazgių mėginių, palyginti su normaliomis audinių mėginių (P
< 0,01), patvirtinantis, kad TIMP3 baltymų raiškos praradimas buvo glaudžiai susijęs su TIMP3 geno promotoriaus CpG salos metilinimas. Feng HF ir kt. [25] pranešė apie pačius rezultatus JAR ir jeg-3 choriokarcinomos ląstelių linijų. Todėl, mūsų tyrimas patvirtino, kad TIMP3 geno promotoriaus CpG sala metilinimas buvo pagrindinė priežastis, dėl sumažinto TIMP3 baltymų raiškos skrandžio vėžio.
Tarp 58 išplitusiu skrandžio vėžiu mėginių, 52 buvo teigiami TIMP3 promotoriaus CpG salos metilinimo ir 21 buvo teigiami už TIMP3 baltymų išraiška. Ši išvada rodo, kad be CpG salos metilinimo kiti veiksniai, tokie kaip genetinės variacijos sukėlė TIMP3 genų ekspresijos nebuvimą. Mūsų eksperimentų, 34 mėginiai buvo teigiami metilinimo ir unmethylation paprastai buvo aiškinama taip: nepilnas metilinimas statusas genų gali egzistuoti, ir, jei navikas audinių yra sumaišytas su ne-naviko ląstelių, teigiamą PGR produkto unmethylation (pagal MSP su nemetilintas gruntas), gali būti pastebėta. TIMP3 baltymų ekspresija mėginyje buvo neigiamas, todėl šie mėginiai buvo apibrėžiamas kaip metilinimo teigiamas.
Kinijoje, 5 metų išgyvenamumas skrandžio karcinoma sergantiems pacientams yra tik apie 40% po rezekcijos. Prasta prognozė yra susijęs su plataus vietos invazija ir /ar regioniniu limfmazgių metastazių [26]. Vietinis pasikartojimo išlieka pagrindinė priežastis, dėl vėžio mirčių po rezekcijos skrandžio vėžiu sergančių pacientų [27]. Todėl reikia nustatyti patikimų kriterijai pasikartojimo ir identifikavimo navikų prognozavimas suprasti molekulinių ir ląstelinių procesų, taip pat atrasti naujus ir galimus gydomąjį molekulinius taikinius [28].
Kerbel [29] pranešė, kad subklonavimas auglio ląsteles metastazavusiu potencialas turi augimo pranašumą anksti pirminės židinių. Tokio augimo pranašumą priežastis yra ta, kad metastazavusiu subclone ląstelių populiacijos gali išskirti tam tikrą veiksnį arba vietos ląstelių augimo faktorius, ir taip sukelia ypatingą reakciją, kuris atsiranda pasirinktinio augimą. Aptikta molekulinės žymeklis lygių pirminio naviko egzempliorių gali atspindėti bendruosius neišplitusios charakteristikas visai naviko. Šioje grupėje metilinimo lygis buvo tik 35,9% į įprastas skrandžio audinių, 85% ir 89,7%, kai ankstyvoje ir vėlyvoje vėžio, atitinkamai, 98,7% metastazavusio limfmazgiai. Nuosekliai aukštos TIMP3 baltymo ekspresija buvo pastebėtas tik normaliomis skrandžio audinius. Ankstyvosios ir progresuojančios skrandžio vėžio eksponuojami židinio silpna išraiška, ir metastazių limfmazgiuose parodė beveik jokių teigiamų išraiška. Ši išvada rodo, kad TIMP3 metilinimas padidėjo naviko progresavimo ir kad baltymo ekspresija palaipsniui mažėjo. Vadinasi, metastazavusiu potencialas ir augimas privalumas ląstelių palaipsniui didinama, o galiausiai metastazių. Yegnasubramanian ir kt. [30] pranešė, kad naviko metastazės buvo susijęs su TIMP3 metilinimo prostatos vėžio ląstelių linijas, atskleidė realiu laiku MSP mėginių iš 73 pacientų, sergančių ankstyvos prostatos vėžio, 91 pacientams, sergantiems metastazavusiu prostatos vėžiu, ir 25 atvejai, kurių prostatos audinio. Šis rezultatas reiškė ryšį tarp CpG metilinimo ir rūšiavimo bei pažangos prostatos vėžio. TIMP3 genų metilinimas Pranešama vaidina svarbų vaidmenį metastazavusiu procesą, o TIMP3 CpG metilinimo aptikimo turi praktinę vertę prognozuojant metastazavusiu potencialą pirminio naviko.
TIMP3 turi aukšto dažnio genetinės variacijos įvairių tipų žmogaus piktybiniai navikai, įskaitant mutacijų, trynimų, metilinimas, tRANSLOKACIJA ir tt [31]. Šios mutacijos sukelti įprasta funkcija auglio slopinamojo geno praradimo, būtent, ląstelių proliferacijos (t.y., genų inaktyvavimo) slopinimo ir yra glaudžiai susijęs su vėžio [32] plėtros. Tačiau keli tyrimai buvo atliekami TIMP3 genų modifikacijos pirminės skrandžio vėžio, ir šių tyrimų rezultatai rodo klaidingus rezultatus mažo geną norma be mutacijos ne visiems. Taigi, buvo išnagrinėtos kitos inaktyvuojančioms mechanizmai skrandžio vėžio dalyvauja TIMP3 geną [33]. Tokiu būdu, navikų patogenezės sudėtingumo yra ne tik genetinės kaitos, mutacijos arba ištrynimo atspindys bet taip pat yra epigenetinių pokyčių, pavyzdžiui, DNR metilinimo atspindys. Išsamus tyrimas tarp DNR metilinimo ir genų ekspresijos, taip pat atitinkamoje mechanizmo santykiams, yra rekomenduojama, nes rezultatai gali padėti klinikinį gydymą nuo vėžio.
Deklaracijos
Finansavimas
Tyrimas buvo finansuojamas Nacionalinis Gamtos mokslo fondo Kinijos (Nr 30.271.477) ir remiamas projektas Mokslo tyrimų fondo grąžinto užjūrio kinų mokslininkai, Valstybinės švietimo ministerijos (Nr 2002-247).
Autorių originalių pateiktų failų vaizdų
Žemiau išvardintos nuorodos į autorių originalus pateiktų failų vaizdų. 13000_2013_791_MOESM1_ESM.jpeg Autorių originalus failas 1 pav 13000_2013_791_MOESM2_ESM.tiff Autorių originalios ir 2 pav konkuravimas susidomėjimą Viesbutis The autorių pareiškiu, kad jie neturi jokių konkuruojančių interesų vienas su kitu.
Autorių indėlį
ZG ir JZ atliekamas patologinius ir PGR tyrimai, dd ir ZG išanalizavo duomenis ir ZG parengė rankraštį. Visi autoriai skaityti ir patvirtino galutinį rankraštį.

• Iš endoskopinės gleivine skrodimo (ESD) ir radikalios operacijos ankstyvo skrandžio vėžio palyginimas: retrospektyvus tyrimas
• Koreliacija hK6 išraiškos su naviko atsinaujinimo ir prognoze išplitusiu skrandžio vėžiu