Promoteur méthylation et l'expression du gène TIMP3 dans la méthylation gastrique cancer

de promoteur et de l'expression du gène TIMP3 dans le cancer gastrique
Résumé de l'arrière-plan de développement de carcinome gastrique est un processus en plusieurs étapes qui implique plus d'un gène. changements aberrants dans méthylation de l'ADN sont considérées comme le troisième mécanisme qui conduit à l'inactivation anti-oncogène, qui joue un rôle essentiel dans le développement des tumeurs. Dans cette étude, nous avons évalué la relation entre la méthylation aberrante du promoteur îlots CpG de l'inhibiteur tissulaire de la métalloprotéinase 3 (TIMP3) gène, son expression de protéines, et les caractéristiques clinico de adénocarcinome gastrique.
Méthodes
Le statut de méthylation des promoteurs îlots CpG et l'expression de la protéine du gène TIMP3 dans les tumeurs et les tissus muqueux normaux adjacents de 78 patients atteints d'un adénocarcinome gastrique ont été détectés par PCR spécifique de la méthylation (MSP) et immunohistochimie.: Résultats
la CpG île méthylation de TIMP3 a été détectée dans les tissus tumoraux, des tissus cancéreux adjacents, et des ganglions lymphatiques avec des métastases. Dans l'ordre croissant, la fréquence de hypermethylation de ces tissus étaient de 35,9% (28 sur 78 des tissus non-néoplasiques), 85% (17 de 20 des cas à un stade précoce), 89,7% (52 sur 58 des cas progressive stade), et 100% (78 de 78 ganglions lymphatiques métastatique). Une nette différence a été observée entre les tumeurs et les tissus non-néoplasiques (P
< 0,05), mais aucune différence existait entre les sous-groupes de tumeurs (P
> 0,05). analyse immunohistochimique a confirmé TIMP3 régulation à la baisse dans les tissus tumoraux. Le taux d'expression du gène TIMP3 était de 100% dans les tissus non-néoplasiques, mais apparemment diminué à des degrés divers aux différentes étapes, à savoir, une diminution de 30% (20/06) à un stade précoce, à 3,4% (2/58) au niveau de la étape progressive, et à 0% (0/78) dans les ganglions lymphatiques métastatiques. Parmi les tissus tumoraux 70 avec l'expression TIMP3 négative, 64 (91,4%) ont été hyperméthylés et 6 étaient non méthylé (8,6%), ce qui indique une association significative entre hypermethylation et réduit ou l'expression négative de TIMP3 (P
< 0,01).
Conclusion
l'hyperméthylation de la région de promoteur dans les îlots CpG est le principal mécanisme d'expression du gène TIMP3 et peut fournir des preuves pour l'évaluation du diagnostic et du stade moléculaire du cancer gastrique.
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Mots-clés
Tissue Inhibitor adénocarcinome gastrique de métalloprotéinase 3 (TIMP3) méthylation Contexte
le cancer gastrique (ou carcinome gastrique) est l'une des tumeurs malignes les plus courantes dans le monde. le développement de la maladie dans le cancer gastrique est un processus en plusieurs étapes qui implique plus d'un gène. Les facteurs de la maladie agissent finalement sur des gènes différents à différentes étapes, ce qui provoque un changement dans la structure des gènes et l'expression des niveaux qui conduisent au développement de la carcinogenèse gastrique. La perte de fonction d'un anti-oncogène peut se produire par différents canaux. En plus des suppressions et des mutations, des changements aberrants dans méthylation de l'ADN sont considérées comme le troisième mécanisme conduisant à une inactivation anti-oncogène [1, 2], qui joue un rôle essentiel dans le développement des tumeurs. îlots CpG, qui sont des séquences riches en CpG situés dans la région de promoteur en amont d'un gène d'entretien, sont des régions où méthylation de cytosine ne se produisent généralement, bien que la stimulation par certains facteurs conduit à la méthylation. Par conséquent, l'expression de l'ADN est inhibée dans cette région [3]. L'inactivation des gènes associés à une tumeur tels que de nombreux P16 THBS1, TIMP3, hMLH1, MGMT et sont liés à la méthylation de leurs régions promotrices respectives [4-8]. inhibiteur tissulaire de métalloprotéinase-3 (TIMP3) est liée au développement de la tumeur, en particulier antagoniser l'activité des métalloprotéinases matricielles, ainsi que l'inhibition de la croissance tumorale, l'angiogenèse, l'invasion et les métastases [9].
Dans ce travail, nous avons détecté la méthylation du promoteur du gène de TIMP3 d'îlot CpG et l'expression des protéines dans les tissus normaux de la muqueuse gastrique, les tissus de cancer gastrique, et les ganglions lymphatiques métastasiques de 78 patients atteints d'un cancer gastrique en utilisant la PCR spécifique de la méthylation (MSP) et immunohistochimie. Nous avons exploré la corrélation du promoteur du gène de la méthylation avec son expression de la protéine correspondante, puis analysé la relation du gène TIMP3 île CpG méthylation anormale avec le développement, ainsi que les caractéristiques cliniques et pathologiques, de l'adénocarcinome gastrique. Matériaux et méthodes
Matériaux
Tous les 78 cas de tissu gastrique normale, carcinome gastrique, et les ganglions lymphatiques métastatiques ont été vérifiés par un diagnostic pathologique. On a obtenu les échantillons de tumeurs entre Mars 1998 à mai 2005 au Premier hôpital affilié et Liaoning Tumor hôpital provincial de patients atteints de cancer gastrique postopératoires (mâle: n
= 54; femelle: n
= 24) avec un âge moyen de 56,2 ± 7,5 ans. Parmi les échantillons obtenus, 20 étaient du cancer gastrique précoce, 58 étaient du cancer gastrique avancé, 44 étaient de différenciation, et 14 étaient indifférenciée. Tumeur mise en scène a été basé sur les normes de mise en scène internationale TNM du cancer Union contre, dactylographie de cancer gastrique croissance Way et le Statut de la mise en scène, et le typage de cancer gastrique au Japon [10-12] de l'Institut du cancer China Medical University. Hydroquinone (10 mmol /L) et de bisulfate de sodium (3,9 mol /l) ont été achetés chez Sigma. Un système DNA Clean-up a été acheté chez Promega. anticorps TIMP3 et kit SP ont été achetés chez Boster Biological Engineering Co., Ltd (Dalian). Tous les échantillons ont été traités et rendus anonymes selon les normes éthiques et juridiques. Le protocole a été approuvé par le Comité d'éthique médicale de l'hôpital provincial de Liaoning de la tumeur et de l'Université médicale de Chine.
MSP
Dans la méthode MSP [13], le traitement de méthylase a été effectuée sur des cellules du sang périphérique normaux et utilisés comme témoins positifs. les cellules non traitées ont été utilisés comme témoins négatifs. Les séquences des TIMP3 (U)-amorces (TIMP3-M) et non méthylés méthylés sont les suivantes: (1) TIMP3-M séquences d'amorce, 5'CGTTTCGTTATTTTTTGTTTTTCGGTTTTC-3 'et 5'-CCGAAAACCCCGCCTCG-3'; et (2) TIMP3-U séquences d'amorces, 5'-TTTTGTTTTGTTATTTTTTGTTTTTGGTTTT-3 'et 5'-CCCCCCAAAAACCCCACCTCA-3'. Les conditions de réaction PCR étaient les suivantes: 95 ° C dénaturation initiale pendant 5 min, 95 ° C, une dénaturation pendant 30 s (40 cycles), 59 ° C, annelage pendant 60 s (40 cycles), 72 ° C extension pour 60 (40 cycles ) et 72 ° C extension pendant 10 min. une électrophorèse sur gel d'agarose et coloration EB ont ensuite été réalisées. Les données provenant des gels ont été recueillies à l'aide d'un scanner de densité laser (Ultroscan Pharmacia LKB) et analysés par la suite. Toutes les expériences ont été répétées trois fois, et la valeur moyenne a été utilisée pour l'analyse statistique.
Immunohistochimie
Pour immunohistochimie, nous avons utilisé la méthode de coloration streptomycesavidin-peroxydase. La coloration immunohistochimique a été réalisée selon les instructions du fabricant. Comme critère de diagnostic, l'observation d'un cytoplasme jaune brunâtre après coloration a été considéré comme un résultat positif pour l'expression de TIMP3. Pour les témoins, une zone de tissu normal est coloré en tant que témoin positif, et une section de tissu normal a été utilisé comme témoin négatif et colorées avec du PBS au lieu d'un anticorps primaire. norme notation a été réalisée selon la méthode décrite par Shimizu [14]. Nous avons observé l'intensité et la distribution de cellules positives à fort grossissement coloration; aucune coloration a été marqué comme 0, une faible coloration, mais beaucoup plus fort que le contrôle négatif a été marqué comme 1, une tache claire est marqué que 2, et une tache forte est marqué comme 3. Aucune cellule de contrôle positif est marqué comme 0. Le nombre requis de cellules positives, à savoir, < 30%, 30% -60%, et > 60%, ont été marqués comme 1, 2, et 3, respectivement. Sur la base des scores totaux, les échantillons ont été évalués pour l'expression de TIMP3. Un score de ≤2 a été classé comme négatif, un score de 3 était faiblement positif, un score allant de 4 à 5 a été positive, et un score de 6 était fortement positive.
Analyse statistique
Les différences entre les TIMP3 taux de méthylation du promoteur du gène et l'expression des protéines des échantillons ont été détectés et analysés statistiquement par les χ
2 et méthodes Fisher. Toutes les données ont été analysées avec SPSS12 logiciel statistique. Gène TIMP3 analyse de méthylation du promoteur de
Résultats
Extraite l'ADN génomique de l'échantillon a été amplifié par MSP. Les tailles des produits de PCR méthylées et non méthylées était de 116 et 122 pb, respectivement. gène TIMP3 phénomène de méthylation du promoteur a été généralement observé dans les tissus normaux gastriques, le carcinome gastrique et des échantillons de métastases des ganglions lymphatiques. Les taux de détection positifs étaient les suivants: 85% (17/20) pour le cancer gastrique, 89,7% (52/58) pour le cancer gastrique avancé, 98,7% (77/78) pour les ganglions lymphatiques métastatiques, et seulement 35,9% (28 /78) pour le tissu gastrique normal. Une augmentation significative du gène TIMP3 méthylation du promoteur a été observée dans tous les groupes de cancer gastrique (P
< 0,01; figure 1 et tableau 1), ce qui suggère que la méthylation du gène de TIMP3 peut être impliqué dans la carcinogenèse et les métastases des tumeurs cancéreuses gastriques et métastatique des tissus de ganglions lymphatiques. Figure 1 méthylation spécifique PCR (MSP): 1, contrôle normal (tissu gastrique normal); 2, le cancer gastrique précoce; 3, le cancer gastrique avancé; 4, le transfert des ganglions lymphatiques. M, Marker DL2000; m, fragment d'amplification de méthylation; u, fragment méthylation d'amplification.
Tableau 1 Gastric cancer TIMP3 méthylation du promoteur et de l'expression de la protéine
'n Organisations (%)
TIMP3 méthylation du promoteur
protéine TIMP3 expression
positif
positif
estomac normal
78
28 (35,9) 78
(100,0) Early cancer gastrique
20
17 (85,0)
9 (45,0)
cancer gastrique avancé
58
52 (89,7)
21 (36,2)
métastases ganglionnaires
78
77 (98,7)
12 (15.4)
analyse immunohistochimique de l'expression de la protéine TIMP3
expression de la protéine TIMP3 était positive dans tous les 78 cas de tissu gastrique normale (100%). Parmi les cas de carcinome gastrique, 9 patients sur 20 étaient positifs pour le cancer gastrique au début; 11 cas ont été négatifs (55%), 21 cas ont été positifs, et 37 étaient négatifs (63,8%) dans 58 cas de cancer gastrique avancé; et 12 cas étaient positifs et 66 cas ont été négatifs (84,6%) chez 78 patients avec des ganglions lymphatiques gastriques métastatiques. L'expression TIMP3 réduite qui a été observée dans les groupes de cancer gastrique a été jugée statistiquement significative (P
< 0,01; Figure 2 et tableau 1), ce qui suggère que le taux d'expression de la protéine TIMP3 diminuée dans les tumeurs du cancer de l'estomac et les tissus de ganglions lymphatiques métastatiques . Cette expression réduite de la protéine du gène peut être dû à l'augmentation observée précédemment dans TIMP3 méthylation dans les échantillons de cancer gastrique, car la méthylation est connu pour supprimer l'expression de la protéine. TIMP3 expression de la protéine est principalement localisée dans le cytoplasme des glandes normales. Dans quelques cellules, une petite quantité d'expression a été trouvée dans les membranes cellulaires (Figure 2). Dans les cellules de la muqueuse gastrique normale, pas de destruction de la structure glandulaire a été observée et la coloration n'a pas été significativement réduite. Les glandes gastriques précoces ont montré un cancer des dommages structuraux et une faible coloration des cellules cancéreuses. Les tissus de cancer gastrique avancé ont montré de grandes zones de croissance massive (carcinome indifférencié) et, en dehors des cellules individuelles, les autres ont été colorés. Figure 2 TIMP3 protéine immunohistochimie (SP 400 ×): un tissu gastrique normal,; b, cancer gastrique; c, le cancer gastrique avancé; d, transfert des ganglions lymphatiques.
Relation entre le gène de TIMP3 méthylation du promoteur et de l'expression de la protéine TIMP3
Dans le groupe de cancer gastrique avancé, le taux de TIMP3 méthylation était significativement plus élevée que les tissus en croissance pataudes et emboîtés (100% contre 77,8%, respectivement; P
< 0,01). Le taux de méthylation de TIMP3 dans les ganglions lymphatiques métastatiques dans le groupe ≥7 des tissus était significativement plus élevé que le < 7 groupe de tissus (100% contre 83,3%, respectivement; P
< 0,05). Le groupe séreux et le tissu séreux était significativement plus élevé que le groupe de tissus muqueux et myomètre (91,3% et 96,6% contre 50%, respectivement; P
< 0,05). taux de méthylation du gène TIMP3 accrue a été généralement observée dans la croissance diffuse-like, métastases ganglionnaires (≥ 7), et sous-séreux et séreuses tumeurs, ce qui implique qu'aucune relation existait entre TIMP3 méthylation des gènes et la taille de la tumeur, le type macroscopique, et le type histologique. Le taux positif des 58 cas de tissus de cancer gastrique avancé était de 36,2% (21). TIMP3 expression de protéines dans des tissus massifs et imbriqués de croissance était significativement plus élevé que celui des tissus de croissance analogue diffus (55,6% vs.19.4%, respectivement; P
< 0,01). TIMP3 expression des protéines dans le ganglion lymphatique métastatique ≥7 tissus était significativement plus élevé que le < 7 tissus (47,2% contre 18,2%, respectivement; P
< 0,05) (tableau 2). Ces résultats suggèrent que la diminution de taux d'expression de la protéine TIMP3 était plus courante dans la croissance et des ganglions lymphatiques métastatique diffuse-like (≥7) des tumeurs, mais l'expression réduite n'a pas été liée à la taille de la tumeur, le type brut, le type histologique, et la profondeur de invasion.Table 2 relation entre gastrique avancé méthylation pathologie cancéreuse TIMP3 et l'indice de son niveau d'expression de protéine de
n

promoteur TIMP3 méthylation
taille de la tumeur de la protéine TIMP3

taille de la tumeur (cm)
< 5
5
3 (60,0)
1 (20,0)
5-10
45
42 (93,3)
18 (40,0)
> 10 8
7 (87,5)
2 (25,0)
types généraux
Borr.2
12
10 (83,3 )
4 (33,3)
Borr.3
37
33 (89,2)
15 (40,5)
Borr.4
9
9 (100,0)
2 (22.2)
différenciation histologiques
Differentiated
44
39 (88,6)
17 (38,6)
indifférencié
14
13 (92,9)
4 (28,6) motif
de croissance
Clumps + de
imbriquée 27
21 (77,8)
15 (55,6)
diffuse-like
31
31 (100,0 ) b
6 (19.4) b
métastase ganglionnaire
< 7
36
30 (83,3)
17 (47,2)
≥7
22
22 (100,0) a
4 (18.2) a
infiltration
6
3 (50,0)
1 (16,7)

23 sous-séreux de sous-muqueux
21 (91,3) un
9 (39,1)
Séreuse
29
28 (96,6)
11 (37,9)
aP
< 0,05, bP
< Rapport de 0,01.
La formation de malignité est multi-factorielle et se produit en plusieurs étapes. Les caractéristiques biologiques de tumeurs malignes comprennent la croissance invasive et métastatique. Le mécanisme de développement des tumeurs implique des changements anormaux dans la structure et la fonction des gènes à l'intérieur de la cellule. Les théoriciens modernes considèrent que le processus de formation de tumeurs comprend deux mécanismes principaux: le premier est au niveau génétique, à savoir, la mutation du gène provoque la séquence nucléotidique de l'ADN change; et la seconde est au niveau épigénétique. Des études antérieures se sont concentrées sur les modifications de l'expression génique qui sont héritées par une méiose et ne comportent pas de changement dans la séquence d'ADN, mais affectent la fonction de régulation de l'expression et du gène de l'ADN, principalement par une modification chimique. Ce mécanisme gagne une attention accrue de chercheurs de processus de formation de la tumeur [15, 16].
Dans l'ADN des tissus tumoraux, méthylations aberrante sont souvent observées dans les régions du promoteur du gène, y compris hypométhylation dans l'oncogène. Ce gène est étroitement liée au cycle de la prolifération cellulaire et hyperméthylation dans des gènes suppresseurs de tumeur. Ces changements de méthylation anormale peuvent activer les oncogènes [17-19] et d'inhiber la transcription de l'ARNm des gènes suppresseurs de tumeurs [20], ce qui conduit à l'inactivation du gène. une méthylation aberrante dans l'ADN se fait par la présence d'îlots CpG méthylés fortement à l'extrémité 5 'd'une région de régulation de promoteur. La famille des TIMP comporte quatre éléments protéiques: TIMP-1, 2, 3 et 4. TIMP-1, 2 et 4 sont des protéines sécrétoires solubles. En revanche, le TIMP-3 est une protéine non soluble qui se combine avec la matrice extracellulaire, est situé dans la membrane cellulaire externe [21] et peut être étroitement liée à la membrane basilaire. La fonction du TIMP est l'inhibition de facteur de nécrose tumorale-α (TNF-α) les enzymes -converting et l'induction de la mort cellulaire programmée par l'intermédiaire du récepteur du TNF-α de la surface cellulaire stable [22]. L'induction de l'apoptose par le TIMP se fait par deux voies: MMP dépendantes et indépendantes. Bien que le TIMP-3 et 4 ont une affinité élevée pour la MMP-2, les protéines inhibent efficacement MT1-MMP, en activant ainsi le procédé de la MMP-2 zymogène et inhiber la croissance des cellules tumorales et des métastases. Smith et al. [23] ont montré que l'expression de TIMP-3 dans des lignées cellulaires de cancer du côlon humain sont rares dans la mitose. La plupart des cellules sont arrêtées dans la phase G1, bien que l'application d'anticorps TNF-α diminue mitotique arrestation de 70%.
Pour explorer la relation entre TIMP3 et le cancer gastrique, ainsi que son mécanisme d'inactivation gastrique, nous avons détecté gène TIMP3 5 'CpG île hyperméthylation dans la muqueuse normale gastrique, cancer de l'estomac, et les ganglions lymphatiques métastatiques. Nous avons constaté que, dans > 85% de tous les tissus du cancer de l'estomac, le gène TIMP3 5 'îlot CpG présentait une méthylation aberrante qui était significativement plus élevé (P
< 0,01) que celui du groupe de tissu gastrique normale, ce qui implique que TIMP3 le promoteur du gène îlot CpG méthylation réduit l'expression du gène et TIMP3 est donc le principal mécanisme d'inactivation suppresseur de tumeur dans le cancer gastrique. Gagnon et al. [24] ont rapporté que dans toutes les lignées de cellules cancéreuses MCF-7 du poumon avec une perte TIMP3 ARNm d'expression et promoteur du gène TIMP3 îlot CpG méthylation, la déméthylation a été induite par 5-aza-CdR. expression TIMP3 avant et après 5-AZA-induction CdR a été évaluée par RT-PCR, qui a montré que la déméthylation a entraîné TIMP3 gène ré-expression, conformément à nos résultats.
Dans la présente étude, les 78 cas de tissu gastrique normale étaient positifs pour l'expression de la protéine TIMP3. Parmi ces 78 cas, seulement 28 (35,9%) étaient positifs pour la méthylation. Parmi les 20 patients atteints de cancer gastrique précoce, 9 étaient positifs pour l'expression de la protéine TIMP3 et 17 (85%) étaient positifs pour la méthylation. Parmi les 58 cas de cancer gastrique avancé, 21 étaient positifs pour l'expression de la protéine TIMP3 et 52 (89,7%) étaient positifs pour la méthylation. Parmi les 78 cas de ganglions métastatiques, 12 étaient positifs pour l'expression de la protéine TIMP3 et 77 cas (98,7%) étaient positifs pour la méthylation. taux de méthylation accrue était significative parmi les cancers précoces, le cancer avancé, et des échantillons de ganglions lymphatiques métastatiques par rapport aux échantillons normaux de tissus (P
< 0,01), ce qui confirme que la perte d'expression de la protéine TIMP3 était étroitement liée à promoteur du gène de TIMP3 îlot CpG méthylation. Feng HF et al. [25] ont rapporté les mêmes résultats dans JAR et JEG-3 lignées cellulaires de choriocarcinome. Par conséquent, notre étude a confirmé que le promoteur du gène de TIMP3 CpG île méthylation a été la principale raison de la TIMP3 expression de la protéine réduite dans le cancer gastrique.
Parmi les 58 échantillons de cancer gastrique avancé, 52 étaient positifs pour le promoteur de TIMP3 CpG île méthylation et 21 étaient positifs pour l'expression de la protéine TIMP3. Cette constatation suggère que, hormis îlots CpG méthylation, d'autres facteurs tels que la variation génétique due à l'absence d'expression du gène de la TIMP3. Dans nos expériences, 34 échantillons étaient positifs pour la méthylation, et la méthylation ont été généralement interprétés comme suit: l'état de méthylation incomplète des gènes peuvent exister, et si le tissu tumoral est mélangé avec des cellules non tumorales, un produit de PCR positif pour méthylation (par MSP amorce non méthylé) peut être observée. TIMP3 expression de la protéine de l'échantillon était négatif, de sorte que ces échantillons ont été définis comme la méthylation positive.
En Chine, le taux de survie à 5 ans des patients atteints de carcinome gastrique est seulement d'environ 40% après résection. Le mauvais pronostic est associé à une vaste invasion locale et /ou régionale métastatique ganglionnaire [26]. La récidive locale demeure une cause majeure de décès liés au cancer après résection chez les patients atteints de cancer gastrique [27]. Par conséquent, des critères fiables pour la prédiction de la récidive et l'identification des tumeurs doivent être établies pour comprendre les processus moléculaires et cellulaires, ainsi que de découvrir de nouvelles cibles moléculaires possibles thérapeutiques [28].
Kerbel [29] ont rapporté que le sous-clonage des cellules tumorales avec potentiel métastatique ont un avantage de croissance dans le stade précoce des foyers primaires. La raison de cet avantage est que la croissance de la population de cellules sous-clone métastasique peut sécréter un facteur particulier ou d'un facteur de croissance cellulaire locale, provoquant ainsi une réaction particulière qui aboutit à une croissance sélective. La détection des niveaux de marqueurs moléculaires dans des échantillons de tumeurs primaires peut refléter les caractéristiques métastatiques généraux de toute la tumeur. Dans ce groupe, le taux de méthylation étaient seulement 35,9% pour les tissus gastriques normaux, 85% et 89,7% pour les cancers, respectivement précoces et avancées, 98,7% pour les ganglions lymphatiques métastatiques. Constamment haute TIMP3 expression de la protéine a été observée uniquement dans les tissus gastriques normaux. cancers précoces et avancés gastriques exposées focale faible expression, et les ganglions lymphatiques métastatiques ont montré presque aucune expression positive. Cette constatation suggère que TIMP3 méthylation augmente avec la progression tumorale et que l'expression de la protéine a diminué progressivement. Par conséquent, l'avantage potentiel et la croissance métastatique des cellules a augmenté progressivement, entraînant finalement des métastases. Yegnasubramanian et al. [30] ont rapporté que les métastases tumorales était liée à TIMP3 méthylation dans des lignées cellulaires du cancer de la prostate tel que révélé par le temps réel MSP d'échantillons provenant de 73 patients atteints d'un cancer de la prostate précoce, 91 patients atteints d'un cancer métastatique de la prostate et 25 cas avec le tissu de la prostate. Ce résultat implique une relation entre la méthylation CpG et le classement et le progrès du cancer de la prostate. TIMP3 gène méthylation joue aurait un rôle important dans le processus métastatique, et la détection de TIMP3 méthylation CpG a une valeur pratique pour prédire le potentiel métastatique de la tumeur primitive.
TIMP3 a une fréquence élevée de la variation génétique dans de nombreux types de l'homme les tumeurs malignes, y compris des mutations, deletions, la méthylation, la translocation chromosomique, etc. [31]. Ces mutations entraînent la perte de la fonction normale d'un gène suppresseur de tumeur, à savoir l'inhibition de la prolifération cellulaire (à savoir, l'inactivation de gènes) et sont étroitement liées à l'apparition du cancer [32]. Cependant, peu d'études ont été menées sur la modification du gène TIMP3 dans le cancer gastrique primaire, et les résultats de ces études montrent des résultats discordants à partir d'un taux de délétion du gène faible à aucune mutation du tout. Par conséquent, d'autres mécanismes d'inactivation du cancer gastrique impliquant le gène TIMP3 ont été étudiés [33]. Ainsi, la complexité de la pathogenèse de la tumeur est non seulement le reflet des changements génétiques par mutation ou une deletion, mais aussi le reflet des modifications épigénétiques, tels que la méthylation d'ADN. Déclarations d'une étude approfondie de la relation entre la méthylation de l'ADN et l'expression des gènes, ainsi que son mécanisme correspondant, est recommandé parce que les résultats peuvent guider le traitement clinique du cancer.
Financement
L'étude a été financée par la national science Foundation naturel de la Chine (n ° 30271477) et le projet parrainé par la Fondation pour la recherche scientifique pour les Returned Scholars outre-mer chinois, État Ministère de l'Education (n ° 2002-247). les fichiers originaux soumis de
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Les auteurs déclarent par la présente que ils ont aucun conflit d'intérêts avec l'autre. Les contributions
auteurs
ZG et JZ a effectué les examens pathologiques et PCR, DD et ZG ont analysé les données, et ZG a rédigé le manuscrit. Tous les auteurs ont lu et approuvé le manuscrit final.

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