Promoter methylering en expressie van TIMP3-gen in de maag cancer

promotor methylering en expressie van TIMP3 gen bij maagkanker
Abstracte achtergrond
Maagcarcinoom ontwikkeling is een multi-stage proces dat meer dan één gen gaat. Afwijkende veranderingen in DNA methylering worden beschouwd als de derde mechanisme dat leidt tot een anti-oncogen inactivatie, die een essentiële rol speelt tumorontwikkeling. In deze studie onderzochten we de relatie tussen de afwijkende methylering van de promotor CpG eilanden weefsel inhibitor van metalloproteinase 3 (TIMP3) gen, het eiwit expressie, en de klinisch-pathologische kenmerken van adenocarcinoom van de maag.
Methods Ondernemingen De methylatiestatus van de promotor CpG eilanden en de eiwit expressie van TIMP3 gen in tumoren en aangrenzende normale mucosale weefsel van 78 patiënten met adenocarcinoom van de maag werden gedetecteerd door methylatie-specifieke PCR (MSP) en immunohistochemie.
Resultaten
de CpG eiland methylering van TIMP3 werd gedetecteerd in tumorweefsels, kanker-aangrenzende weefsels en lymfeklieren met metastasen. In oplopende volgorde, de Hypermethylering frequentie van deze weefsels waren 35,9% (28 van de 78 non-neoplastische weefsels), 85% (17 van 20 in een vroeg stadium de gevallen), 89,7% (52 van de 58 progressieve fase gevallen), en 100% (78 van 78 metastatische lymfeklier). Een duidelijk verschil gevonden tussen tumoren en niet-neoplastische weefsels (P
< 0,05), maar geen verschil bestond tussen de subgroepen van tumoren (P
> 0,05). Immunohistochemie analyse bevestigde TIMP3 downregulatie in tumor weefsels. De snelheid van TIMP3 genexpressie was 100% in niet-neoplastische weefsels maar blijkbaar daalde in verschillende mate in verschillende stadia, dat wil zeggen, verlaagd tot 30% (6/20) in een vroeg stadium, tot 3,4% (2/58) bij de progressieve fase en 0% (0/78) in metastatische lymfeknopen. Onder de 70 tumor weefsel met een negatieve TIMP3 meningsuiting, 64 (91,4%) werden gehypermethyleerd en 6 waren niet-gemethyleerd (8,6%), wat wijst op een significant verband tussen hypermethylatie en verminderd of negatief TIMP3 expressie (P Restaurant < 0,01).
Conclusie
de hypermethylering van de promotor regio CpG eilanden is het belangrijkste mechanisme van TIMP3 genexpressie en kan bewijs voor de moleculaire diagnose en het stadium evaluatie van maagkanker te bieden.
Virtual slides Ondernemingen de virtuele dia's voor deze artikel is hier te vinden: http:... //www diagnosticpathol gie diagnomx eu /vs /1756134016954958
Sleutelwoorden
maagdarmkanker Tissue Inhibitor van Metalloproteinase 3 (TIMP3) Methylering Achtergrond
Maagkanker (of gastrische carcinoma) is een van de meest voorkomende kwaadaardige ziekten in de wereld. ziekteontwikkeling bij maagkanker is een meerstaps proces dat meerdere genen betrokken zijn. Vaatziekten uiteindelijk werken op verschillende genen in dezelfde mate, waardoor een verandering in genstructuur en expressie die leiden tot de ontwikkeling van maagkanker. Verlies van functie van een anti-oncogen kan plaatsvinden via verschillende kanalen. Naast deleties en mutaties worden afwijkende in DNA methylering beschouwd als derde mechanisme dat leidt tot anti-oncogen inactivering [1, 2], die een essentiële rol speelt tumorontwikkeling. CpG eilanden, die CpG-rijke sequenties in het stroomopwaartse promotorregio van een huishouding gen zijn, zijn gebieden waar cytosine methylatie algemeen niet soms, maar stimulatie door bepaalde factoren leidt tot de methylatie. Bijgevolg wordt DNA expressie geremd regio [3]. De inactivatie van verschillende tumor-geassocieerde genen zoals P16, THBS1, TIMP3, hMLH1 en MGMT hebben betrekking op de methylering van hun promotergebieden [4-8]. Weefsel inhibitor van metalloproteïnase-3 (TIMP3) heeft betrekking op tumorontwikkeling name tegenwerken van de werking van matrix metalloproteïnasen en remmen tumorgroei, angiogenese, invasie en metastase [9].
In dit werk gedetecteerd we de methylering van de TIMP3 gen promoter CpG eiland en eiwitexpressie in normale maagslijmvlies weefsels, maagkanker weefsels, en metastatische lymfeklieren van 78 patiënten met maagkanker met behulp van methylatie-specifieke PCR (MSP) en immunohistochemie. We onderzochten de correlatie van gen promoter methylatie met zijn overeenkomstige proteïne expressie, de verhouding van TIMP3 gen CpG eiland abnormale methylatie bij de ontwikkeling, evenals de klinische en pathologische kenmerken van maagdarmkanker geanalyseerd.
Materialen en werkwijzen
materialen
Al 78 gevallen van de maag normaal weefsel, maagcarcinoom en metastatische lymfeknopen werden geverifieerd door pathologische diagnose. De tumor monsters werden verkregen tussen maart 1998 tot mei 2005 op de Eerste Affiliated Hospital en Liaoning Provinciaal Tumor Hospital van postoperatieve patiënten met maagkanker (mannen: n
= 54; vrouwelijk: n
= 24) met een gemiddelde leeftijd van 56,2 ± 7,5 jaar. Van de verkregen monsters werden 20 vroege maagkanker, 58 waren gevorderde maagkanker, 44 waren van differentiatie en 14 waren ongedifferentieerde. Tumor enscenering werd op basis van de International Union Against Cancer TNM staging normen, Typen van maagkanker Groei Way en statuten van Staging, en maagkanker te typen in Japan [10-12] van de China Medical University Cancer Institute. Hydrochinon (10 mmol /l) en natriumbisulfaat (3,9 mol /l) werden gekocht bij Sigma. Een DNA-Clean-up systeem werd gekocht van Promega. TIMP3 antilichaam en SP kit werden gekocht bij Boster Biological Engineering Co, Ltd (Dalian). Alle monsters werden behandeld en anoniem gemaakt volgens de ethische en wettelijke normen. Het protocol werd goedgekeurd door de Medisch Ethische Commissie van de provincie Liaoning Tumor Hospital en China Medical University.
MSP
In de MSP methode [13], werd methylase verwerking uitgevoerd op normale perifere bloedcellen en gebruikt als positieve controles. Onbehandelde cellen werden gebruikt als negatieve controles. De sequenties van de gemethyleerde (TIMP3-M) en gemethyleerd (TIMP3-U) primers waren als volgt: (1) TIMP3-M primersequenties, 5'CGTTTCGTTATTTTTTGTTTTTCGGTTTTC-3 'en 5'-CCGAAAACCCCGCCTCG-3'; en (2) TIMP3-U primersequenties, 5'-TTTTGTTTTGTTATTTTTTGTTTTTGGTTTT-3 'en 5'-CCCCCCAAAAACCCCACCTCA-3'. De PCR reactieomstandigheden waren als volgt: 95 ° C initiële denaturatie gedurende 5 min, 95 ° C, denaturatie gedurende 30 seconden (40 cycli), 59 ° C hybridisatie gedurende 60 (40 cycli), 72 ° C verlenging 60 (40 cycli ) en 72 ° C verlenging 10 min. Agarosegelelektroforese en EB kleuring werden vervolgens uitgevoerd. Gegevens uit de gels verzameld met een laser scanner dichtheid (Pharmacia LKB Ultroscan) en vervolgens geanalyseerd. Alle experimenten werden driemaal herhaald en de gemiddelde waarde werd gebruikt voor statistische analyse.
Immunohistochemie
Voor immunohistochemie gebruikten we de streptomycesavidin-peroxidase kleuring methode. Immunohistochemische kleuring werd uitgevoerd volgens de instructies van de fabrikant. Als een diagnostisch criterium, de waarneming van een bruingeel cytoplasma na kleuring werd beschouwd als een positief resultaat voor TIMP3 expressie. Voor de controles, werd een normale weefselgebied gekleurd als de positieve controle, en een normaal weefsel sectie werd gebruikt als negatieve controle en gekleurd met PBS in plaats van primair antilichaam. Maken van standaard werd uitgevoerd volgens de methode beschreven door Shimizu [14] methode. We zagen de kleurintensiteit en de verdeling van positieve cellen bij een hoge vergrotingsfactor; Geen kleuring werd gescoord als 0, zwakke kleuring maar aanzienlijk sterker dan de negatieve controle werd gescoord als 1, wordt een duidelijke vlek gescoord als 2, en een sterke kleuring wordt gescoord als 3. positieve controle cel wordt gescoord als 0. Het vereiste aantal positieve cellen, dwz < 30%, 30% -60% en > 60%, werden als 1, 2 en 3, respectievelijk. Betrokken op het totale scores werden de monsters onderzocht op expressie TIMP3. Een score van ≤2 werd geclassificeerd als negatief, een score van 3 was zwak positief, een score 4-5 was positief, en een score van 6 was sterk positief.
Statistische analyse
De verschillen tussen de TIMP3 -promotormethylatie beoordelen en eiwitexpressie van de monsters gedetecteerd en statistisch geanalyseerd met de χ
2 en Fisher methode. Alle gegevens werden geanalyseerd met SPSS12 statistische software.
Resultaten
TIMP3 gen promoter methylatie analyse
Gehaald genoom DNA van het monster werd versterkt door MSP. De afmetingen van de gemethyleerde en ongemethyleerde PCR-producten werden 116 en 122 bp, resp. TIMP3 gen promoter methylatie verschijnsel werd in het algemeen waargenomen in normale maag weefsels, maagcarcinoom, en lymfeklier metastase monsters. De positieve detectie waren als volgt: 85% (17/20) voor de vroege maagkanker, 89,7% (52/58) voor geavanceerde maagkanker, 98,7% (77/78) voor metastatische lymfeknopen, en slechts 35,9% (28 /78) voor de normale maagweefsel. Een significante toename TIMP3 gen promoter methylatie werd waargenomen bij alle maagkanker groepen (P
< 0,01 Figuur 1 en Tabel 1), hetgeen suggereert dat de methylatie van TIMP3 gen betrokken kan zijn bij de carcinogenese en metastase van tumoren maagkanker en metastatische lymfeknoop weefsel. Figuur 1 methylering-specifieke PCR (MSP): 1, normale controle (normaal maagweefsel); 2, vroege maagkanker; 3, gevorderde maagkanker; 4, de overdracht van de lymfeklieren. M, Marker DL2000; m, Methylering versterking fragment; u, unmethylation versterking fragment.
Tabel 1 Maagcarcinoom TIMP3 promoter methylering en eiwit expressie
Organisaties
n (%)
TIMP3 promoter methylering
TIMP3 eiwit uitdrukking
Positive
Positieve
Normal maag
78
28 (35,9)
78 (100.0)
Vroege maagkanker
20
17 (85,0)
9 (45,0)
Geavanceerd maagkanker
58
52 (89,7)
21 (36,2)
Lymfeklier uitzaaiingen
78
77 (98,7)
12 (15,4)
Immunohistochemie analyse van eiwitexpressie TIMP3
TIMP3 eiwitexpressie was positief in alle 78 gevallen normaal maagweefsel (100%). Onder de maagcarcinoom gevallen 9 bij 20 patiënten waren positief voor vroege maagkanker; 11 gevallen waren negatief (55%), 21 gevallen positief waren, en 37 waren negatief (63,8%) in 58 gevallen van gevorderde maagkanker; en 12 gevallen waren positief en 66 gevallen waren negatief (84,6%) in 78 patiënten met gemetastaseerde maag lymfeklieren. De verminderde TIMP3 expressie die werd waargenomen in de groepen maagkanker bleek statistisch significant (P
< 0,01; figuur 2 en tabel 1), hetgeen suggereert dat TIMP3 eiwitexpressie daalde bij maagkanker tumoren en metastatische lymfeknoop weefsels . Dit verminderde expressie van het gen eiwit kan door de eerder waargenomen toename TIMP3 methylering in maagkanker monsters omdat methylatie is bekend eiwitexpressie onderdrukken. TIMP3 eiwitexpressie voornamelijk in het cytoplasma van normale klieren. In enkele cellen, een kleine hoeveelheid expressie werd gevonden in de celmembranen (Figuur 2). In de normale maagslijmvlies cellen werd geen glandulaire structuur vernietiging waargenomen en kleuring was niet significant verminderd. De vroege maagkanker klieren toonde structurele schade en zwakke kankercel kleuren. De geavanceerde maagkanker weefsels toonden grote gebieden enorme groei (ongedifferentieerd carcinoom) en, afgezien van de individuele cellen, de rest werd gekleurd. Figuur 2 TIMP3 eiwit immunohistochemisty (SP 400 ×): een, normaal de maag weefsel; b, vroege maagkanker; c, gevorderde maagkanker; d, de overdracht van de lymfeklieren.
Relatie tussen TIMP3 gen promoter methylatie en TIMP3 eiwitexpressie
In de gevorderde maagkanker groep, het tarief van TIMP3 methylatie was significant hoger dan de plompe en geneste groeiende weefsels (100% vs. 77,8%, respectievelijk; P
< 0,01). De TIMP3 methylering tarief in metastatische lymfeklieren in de ≥7 weefsel groep was significant hoger dan de < 7 tissue groep (100% vs. 83,3%, respectievelijk; P Restaurant < 0,05). De subserosal en serosal weefsel groep was significant hoger dan de submucosale en myometrium weefsel groep (91,3% en 96,6% vs. 50%, respectievelijk; P Restaurant < 0,05). Verhoogde TIMP3 genmethylatie tarief werd in het algemeen waargenomen in diffuse-like groei, lymfkliermetastasen (≥7) en subserosal en serosal tumoren, wat impliceert dat er geen verband bestond tussen TIMP3 genmethylatie en tumorgrootte, macroscopische soort, en histologische type. De positieve verhouding van de 58 gevallen van gevorderde maagkanker weefsel was 36,2% (21). TIMP3 eiwitexpressie in massieve en genest groeiende weefsels was significant hoger dan die van diffuse-like growth weefsels (55,6% vs.19.4%, respectievelijk P
< 0,01). TIMP3 eiwitexpressie in de metastatische lymfeknoop ≥7 weefsels was significant hoger dan de < 7 weefsel (47,2% vs. 18,2%, respectievelijk P
< 0,05) (tabel 2). Deze resultaten suggereren dat verminderde TIMP3 eiwitexpressie bedroeg vaker voor bij diffuse-like groei en de lymfeklieren uitgezaaide (≥7) tumoren, maar verminderde expressie was niet gerelateerd aan tumorgrootte, bruto type, het histologische type en de diepte van invasion.Table 2 relatie tussen gevorderde maagkanker pathologie TIMP3 methylering en de eiwit expressie niveau
Index
n
TIMP3 promoter methylering
TIMP3 eiwit tumorgrootte

size Tumor (cm) Restaurant < 5
5
3 (60,0)
1 (20,0)
5-10
45
42 (93,3)
18 (40,0) Restaurant > 10 | 8
7 (87,5) Pagina 2 (25.0)
Algemene types
Borr.2
12
10 (83.3 )
4 (33,3)
Borr.3
37
33 (89,2)
15 (40,5)
Borr.4
9
9 (100,0)
2 (22.2)
Histologische differentiatie
Gedifferentieerde
44
39 (88,6)
17 (38,6)
ongedifferentieerde
14
13 (92,9)
4 (28,6)
groeipatroon
Bosjes + geneste
27
21 (77,8)
15 (55,6)
Zend-achtige
31
31 (100.0 ) b
6 (19,4) b
lymfekliermetastasen Restaurant < 7
36
30 (83,3)
17 (47,2)
≥7
22
22 (100.0) een verhuur 4 (18.2) een
Infiltratie
Submucosale muscularis
6
3 (50,0)
1 (16.7)
Subserosal
23
21 (91,3) een
9 (39,1)
serosa
29
28 (96,6)
11 (37,9)
aP
< 0.05 BP Restaurant < 0.01.
Discussie
De vorming van maligniteit is multifactoriële en komt voor in meerdere fasen. De biologische kenmerken van kwaadaardige tumoren omvatten invasieve groei en metastase. Het mechanisme achter tumorontwikkeling omvat abnormale veranderingen in genstructuur en functie in het inwendige van de cel. Moderne theoretici van mening dat het proces van tumorvorming omvat twee belangrijke mechanismen: het eerste is op genetisch niveau, d.w.z. genmutatie veroorzaakt DNA nucleotidensequentieveranderingen; en de tweede is op epigenetisch niveau. Eerdere studies hebben zich geconcentreerd op veranderingen in genexpressie die door middel meiose worden geërfd en geen verandering in DNA-sequentie niet nodig zijn, invloed op de expressie en gen regulerende functie van DNA, hoofdzakelijk door chemische modificatie. Dit mechanisme wordt steeds meer aandacht van onderzoekers van tumorvorming processen [15, 16].
In het DNA van tumorweefsels worden abberant methyleringen vaak waargenomen in genpromotor gebieden, waaronder hypomethylatie in het oncogen. Dit gen is nauw gerelateerd aan celproliferatie cyclus Hypermethylering in tumorsuppressorgenen. Deze abnormale methylatie veranderingen kunnen oncogenen [17-19] activeren en remmen de transcriptie van mRNA tumorsuppressorgenen [20], waardoor geninactivatie. Afwijkende methylering van DNA optreedt door de aanwezigheid van sterk gemethyleerde CpG eilanden in het 5 'uiteinde van een promoter controlegebied. De familie TIMP vier eiwitten leden: TIMP-1, 2, 3, 4 en TIMP-1, 2 en 4 oplosbaar secretoire eiwitten. Daarentegen TIMP-3 is een niet-oplosbare eiwit dat combineert met de extracellulaire matrix, is gelegen in het buitenste celmembraan [21], en is nauw verbonden met het basilair membraan. De functie van TIMPs is de remming van tumornecrosefactor-α (TNF-α) -converterende enzymen en de inductie van geprogrammeerde celdood via stabiele celoppervlak TNF-α-receptor [22]. De inductie van apoptose door middel TIMP gebeurt via twee routes: MMP afhankelijke en onafhankelijke. Hoewel TIMP-3 en 4 hebben een hoge affiniteit voor MMP-2, de eiwitten effectief remmen MT1-MMP, waarbij de MMP-2 zymogeen proces activeren en remmen van tumorcelgroei en metastase. Smith et al. [23] vonden dat de expressie van TIMP-3 in humane colonkanker cellijnen zijn zeldzaam in mitose. De meeste cellen zijn aangehouden in de G1-fase, hoewel de toepassing van TNF-α antilichaam verlaagt mitose met 70%.
De relatie tussen TIMP3 en maagkanker alsook het mechanisme gastrische inactivatie staand, gedetecteerd we TIMP3 gen 5 'CpG eiland hypermethylatie in normale maagslijmvlies, maagcarcinoom en metastatische lymfeknopen. We vonden dat in > 85% van maagkanker weefsels, de TIMP3 gen 5 'CpG eiland vertoonden afwijkende methylering die significant hoger was (P
< 0,01) dan die van de normale maagweefsel groep die TIMP3 impliceerde gen promoter CpG eiland methylering verminderd TIMP3 genexpressie en was daarmee de belangrijkste tumor suppressor-inactivatie mechanisme bij maagkanker. Gagnon et al. [24] gemeld dat in alle MCF-7 longkanker cellijnen TIMP3 mRNA expressie verlies en TIMP3 genpromotor CpG eiland methylering, demethylering werd geïnduceerd door 5-AZA-CdR. TIMP3 expressie vóór en na 5-AZA-CdR inductie werd bepaald door RT-PCR, waaruit bleek dat demethylering geleid TIMP3 hernieuwde genexpressie, in overeenstemming met onze resultaten.
In deze studie alle 78 gevallen normaal maagweefsel waren positief voor TIMP3 eiwitexpressie. Onder deze 78 gevallen, slechts 28 (35,9%) waren positief voor methylatie. Van de 20 patiënten met vroege maagkanker, 9 positief voor TIMP3 eiwitexpressie en 17 (85%) waren positief voor methylering. Onder de 58 gevallen van gevorderde maagkanker, 21 waren positief voor TIMP3 eiwitexpressie en 52 (89,7%) waren positief voor methylatie. Onder de 78 gevallen van metastatische lymfeklieren, 12 waren positief voor TIMP3 eiwit expressie en 77 gevallen (98,7%) waren positief voor methylatie. Verhoogde methylatie rate was significant onder de eerste kanker, gevorderde kanker, en metastatische lymfeknoop monsters verhouding tot de normale weefselmonsters (P
< 0,01), wat bevestigt dat het verlies van TIMP3 eiwitexpressie nauw verwant aan TIMP3 genpromotor CpG eiland methylatie. Feng et al HF. [25] meldde de dezelfde resultaten in JAR en JEG-3 choriocarcinoma cellijnen. Daarom is onze studie bevestigde dat TIMP3 gen promoter CpG eiland methylering was de belangrijkste reden voor de verminderde TIMP3 eiwitexpressie bij maagkanker.
Onder de 58 gevorderde maagkanker monsters, 52 waren positief voor TIMP3 promotor CpG eiland methylering en 21 waren positief voor TIMP3 eiwitexpressie. Deze bevinding suggereerde dat naast CpG eiland methylering, andere factoren, zoals genetische variatie veroorzaakt Aangezien TIMP3 genexpressie. In onze experimenten 34 monsters waren positief voor methylering en unmethylation werd gewoonlijk als volgt uitgelegd: onvolledig methylatiestatus van genen kunnen bestaan, en als het tumorweefsel wordt gemengd met niet-tumorcellen, een positieve PCR product unmethylation (door MSP met -gemethyleerde primer) kan worden waargenomen. TIMP3 eiwitexpressie van het monster negatief was, dus deze monsters werden gedefinieerd als methylatie positief.
In China, de 5-jaarsoverleving van maagcarcinoom patiënten is slechts ongeveer 40% na resectie. De slechte prognose is geassocieerd met uitgebreide lokale invasie en /of regionale lymfekliermetastasen [26]. Lokaal recidief blijft een belangrijke oorzaak van kanker-gerelateerde sterfgevallen na resectie bij maagkanker patiënten [27]. Daarom moet betrouwbare criteria voor het voorspellen van herhaling en identificatie van tumoren vastgesteld moleculaire en cellulaire processen te begrijpen, en ontdekken van nieuwe therapeutische en mogelijke moleculaire doelwitten [28].
Kerbel [29] gemeld dat subkloneren tumorcellen met metastatisch potentieel een groeivoordeel in het vroege stadium van primaire haarden. De reden voor een dergelijke groei voordeel is dat de metastatische subkloon celpopulatie een bepaalde factor of lokale cel groeifactor kan scheiden, waardoor een speciale reactie die resulteert in selectieve groei veroorzaken. Detectie van moleculaire marker niveaus in de primaire tumor exemplaren kan de algemene metastatische kenmerken van het gehele tumor weerspiegelen. In deze groep, de methylering tarieven slechts 35,9% van de normale gastrische weefsels, 85% en 89,7% voor de vroege en gevorderde kankers, respectievelijk 98,7% voor metastatische lymfeknopen. Consequent werd hoog TIMP3 eiwitexpressie alleen waargenomen in de normale maag weefsels. De vroege en gevorderde maagkanker tentoongesteld focal zwakke expressie, en metastatische lymfeklieren toonden bijna geen positieve uitdrukking. Deze bevinding suggereerde dat TIMP3 methylatie verhoogd met progressie van de tumor en dat eiwit expressie geleidelijk af. Bijgevolg is het metastatisch vermogen en groeivoordeel van cellen geleidelijk verhoogd, uiteindelijk leidt tot metastase. Yegnasubramanian et al. [30] gemeld dat tumormetastase had met TIMP3 methylering bij prostaatkanker cellijnen zoals blijkt uit het real-time MSP van monsters van 73 patiënten met vroege prostaatkanker, 91 patiënten met metastatische prostaatkanker en 25 gevallen prostaatweefsel. Dit resultaat impliceerde een relatie tussen CpG methylering en de indeling en de voortgang van prostaatkanker. TIMP3 gen methylering speelt naar verluidt een belangrijke rol in de metastatische proces en de detectie van TIMP3 CpG methylering enig praktisch nut bij het voorspellen van het metastatisch potentieel van de primaire tumor.
TIMP3 een hoge frequentie van genetische variatie in vele soorten menselijke maligne tumoren, inclusief mutaties, deleties, methylering, translocatie, etc. [31]. Deze mutaties resulteren in het verlies van de normale functie van een tumorsuppressorgen, namelijk de inhibitie van celproliferatie (d.w.z. geninactivatie) en zijn nauw verbonden met de ontwikkeling van kanker [32]. Echter slechts weinig studies gedaan naar TIMP3 genmodifcatie primaire maagkanker en de resultaten van deze studies afwijkende resultaten van een lage gendeletie tarief geen mutatie helemaal. Dienovereenkomstig zijn andere mechanismen van inactivatie maagkanker waarbij TIMP3 gen bestudeerd [33]. Zo is de complexiteit van tumor pathogenese is niet alleen een weerspiegeling van genetische veranderingen door mutatie of deletie maar weerspiegelt ook de epigenetische veranderingen, zoals DNA-methylatie. Een diepgaand onderzoek naar de relatie tussen DNA methylatie en genexpressie, evenals de bijbehorende mechanisme, wordt aangeraden, omdat de resultaten van de klinische behandeling van kanker kan leiden.
Verklaringen
Funding
De studie werd gefinancierd door de National Natural Science Foundation of China (nr 30271477) en het project gesponsord door de Stichting Wetenschappelijk Onderzoek voor de Terugkerende Overseas Chinese Geleerden, State ministerie van Onderwijs (No. 2002-247). origineel ingediende dossiers
Authors 'voor afbeeldingen
Hieronder staan ​​de links naar originele ingediende dossiers van de auteurs voor afbeeldingen. Hierbij verklaren 'originele bestand voor figuur 1 13000_2013_791_MOESM2_ESM.tiff Authors' 13000_2013_791_MOESM1_ESM.jpeg Auteurs originele bestand voor figuur 2 Concurreren interesse
De auteurs dat zij geen tegenstrijdige belangen met elkaar.
bijdragen van auteurs '
ZG en JZ verricht de pathologische en PCR onderzoeken, DD en ZG analyseerde de gegevens en ZG opstellers van het manuscript. Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.

• Een vergelijking van endoscopische submucosale dissectie (ESD) en radicale chirurgie voor vroege maagkanker: een retrospectief onderzoek
• Correlatie van hK6 expressie met tumorrecidief en prognose bij gevorderde maagkanker