Promoter metylering og ekspresjon av genet i TIMP3 gastrisk cancer

promoter metylering og ekspresjon av genet i TIMP3 magekreft
Abstract
Bakgrunn
Gastrisk carcinom utvikling er en flertrinns prosess som omfatter mer enn ett gen. Avvikende endringer i DNA-metylering anses som den tredje mekanisme som fører til anti-onkogen inaktivering, som spiller en vesentlig rolle i tumorutvikling. I denne studien, vurderte vi forholdet mellom avvik metylering av arrangøren CpG øyene vev hemmer av metalloproteinase 3 (TIMP3) genet, sin protein uttrykk, og clinicopathological funksjonene adenokarsinom i ventrikkel.
Metoder
metylering status av arrangøren CpG øyer og protein uttrykk for TIMP3 genet i svulster og tilstøtende normale slimhinne vev av 78 pasienter med adenokarsinom i ventrikkel ble oppdaget ved metylering spesifikk PCR (MSP) og immunhistokjemi.
Resultater
CpG island metylering av TIMP3 ble oppdaget i tumorvev, kreftfrem tilstøtende vev og lymfeknuter med metastaser. I stigende orden, hypermethylation hyppigheten av disse vev var 35,9% (28 av 78 ikke-neoplastiske vev), 85% (17 av 20 tidlig stadium tilfeller), 89,7% (52 av 58 progressiv trinns tilfeller), og 100% (78 av 78 metastatisk lymfeknute). En markert forskjell ble funnet mellom svulster og ikke-neoplastiske vev (P
< 0,05), men ingen forskjell fantes blant undergrupper av svulster (P
> 0,05). Immunhistokjemi analyser bekreftet TIMP3 nedregulering i tumorvev. Frekvensen av TIMP3 genekspresjon var 100% i ikke-neoplastiske vev, men tilsynelatende redusert i varierende grad ved forskjellige stadier, dvs. redusert til 30% (6/20) på et tidlig stadium, til 3,4% (2/58) ved progressive scenen, og til 0% (0/78) i metastatiske lymfeknuter. Blant de 70 tumorvev med negativ TIMP3 uttrykk, 64 (91,4%) ble hypermethylated og 6 var unmethylated (8,6%), noe som indikerer en signifikant sammenheng mellom hypermethylation og redusert eller negativ TIMP3 uttrykket (P
< 0,01).
Konklusjon
hypermethylation til promoter-regionen i CpG øyer er den viktigste mekanismen for TIMP3 genekspresjon og kan gi bevis for molekylær diagnose og stadium evaluering av magekreft
. Virtual lysbilder
den virtuelle lysbilder for dette artikkelen finner du her: http:... //www diagnosticpathol logi diagnomx eu /vs /1756134016954958
nøkkelord
adenokarsinom i ventrikkel Tissue Inhibitor of Metalloproteinase 3 (TIMP3) Metylering Bakgrunn
mage~~POS=TRUNC kreft~~POS=HEADCOMP (eller gastrisk karsinom) er en av de vanligste kreftformen i verden. Sykdomsutvikling i magekreft er en flertrinns prosess som omfatter mer enn ett gen. Sykdomsfaktorer til slutt virke på forskjellige gener på ulike stadier, forårsaker en endring i genet struktur og ekspresjonsnivå som fører til utvikling av magekreftutvikling. Tap av funksjon av et anti-onkogen kan skje gjennom forskjellige kanaler. I tillegg til delesjoner og mutasjoner, er avvikende endringer i DNA-metylering betraktes som den tredje mekanismen som fører til anti-onkogen inaktive [1, 2], som spiller en vesentlig rolle i tumorutvikling. CpG øyer, som er CpG-rike sekvenser lokalisert i oppstrøms promoter-regionen i en husholdningsgenet, er områder hvor cytosin metylering ikke vanligvis forekommer, selv om stimulering av visse faktorer fører til sin metylering. Følgelig blir DNA-ekspresjon inhibert i denne region [3]. Den inaktivering av mange tumorassosierte gener som P16, THBS1, TIMP3, hMLH1, og MGMT er relatert til metylering av deres respektive promotorområdene [4-8]. Vevsinhibitor av metalloproteinase-3 (TIMP3) er relatert til tumorutvikling, spesielt å antagonisere aktiviteten av matriks-metalloproteinaser, så vel som å inhibere tumorvekst, angiogenese, invasjon og metastase [9].
I dette arbeidet har vi oppdaget metylering av TIMP3 genet promoter CpG island og protein uttrykk i normale mageslimhinnen vev, mage kreft vev og metastatiske lymfeknuter av 78 pasienter med magekreft ved hjelp av metylering spesifikk PCR (MSP) og immunhistokjemi. Vi har utforsket korrelasjonen av genpromoteren metylering med det tilsvarende protein ekspresjon og deretter analyseres forholdet av TIMP3 gen CpG øy unormal metylering med utviklingen, så vel som kliniske og patologiske funksjoner, av gastrisk adenokarsinom.
Materialer og metoder
materialer
Alle 78 tilfeller av mage normalt vev, magekreft, og metastatiske lymfeknuter ble verifisert ved patologisk diagnose. De tumorprøver ble oppnådd mellom mars 1998 til mai 2005 på First Affiliated Hospital og Liaoning provins Tumor Hospital fra postoperative pasienter med magekreft (hann: n
= 54; kvinnelig: n
= 24) med en gjennomsnittsalder fra 56,2 ± 7,5 år. Blant de prøver tatt, 20 var av tidlig magekreft, 58 var av avansert magekreft, 44 var av differensiering, og 14 var udifferensiert. Tumor iscenesettelse var basert på International Union Against Cancer TNM staging standarder, Typing av magekreft Vekst Way og vedtektene for stillas, og magekreft skrive i Japan [10-12] fra Kina Medical University Cancer Institute. Hydrokinon (10 mmol /L) og natrium-bisulfat (3,9 mol /l) ble innkjøpt fra Sigma. En DNA Clean-up-systemet ble kjøpt fra Promega. TIMP3 antistoff og SP kit ble kjøpt fra BOOSTER Biological Engineering Co Ltd (Dalian). Alle prøvene ble håndtert og anonymisert i henhold til de etiske og juridiske standarder. Protokollen ble godkjent av Medical Ethics Committee av Tumor Hospital Liaoning Provincial og Kina Medical University.
MSP
I MSP metoden [13], ble metylase foredling utført på normale perifere blodceller og brukt som positive kontroller. Ubehandlede celler ble anvendt som negative kontroller. Sekvensen av metylert (TIMP3-M) og unmethylated (TIMP3-U) primere var som følger: (1) TIMP3-M primersekvenser, 5'CGTTTCGTTATTTTTTGTTTTTCGGTTTTC-3 'og 5'-CCGAAAACCCCGCCTCG-3'; og (2) TIMP3-U primersekvenser, 5'-TTTTGTTTTGTTATTTTTTGTTTTTGGTTTT-3 'og 5'-CCCCCCAAAAACCCCACCTCA-3'. PCR-reaksjonsbetingelsene var som følger: 95 ° C innledende denaturering i 5 min, 95 ° C denaturering i 30 sekunder (40 sykluser), 59 ° C gløding i 60 s (40 sykluser), 72 ° C forlengelse i 60 s (40 sykluser ), og 72 ° C forlengelse i 10 min. Agarosegelelektroforese og EB-farging ble deretter utført. Data fra gelene ble oppsamlet med en laserskanner tetthet (Pharmacia LKB Ultroscan) og deretter analysert. Alle forsøk ble gjentatt tre ganger, og den midlere verdi ble benyttet for statistisk analyse.
Immunhistokjemi
For immunhistokjemi, vi brukte streptomycesavidin-peroksydase fargemetoden. Immunhistokjemisk farging ble utført i henhold til produsentens instruksjoner. Som et diagnostisk kriterium, ble observasjon av et brunaktig gult cytoplasma etter farging betraktet som et positivt resultat for TIMP3 ekspresjon. For kontrollene, ble et normalt vev farget område som den positive kontroll, og en normalt vev seksjon ble anvendt som negativ kontroll og farget med PBS i stedet for et primært antistoff. Å utføre standard ble utført i henhold til fremgangsmåten beskrevet av Shimizu [14]. Vi har observert fargeintensitet og fordeling av positive celler ved høy forstørrelse; ingen farging ble scoret som 0, svak farging men betydelig sterkere enn den negative kontrollen ble scoret som en, er en klar flekk scoret som to, og en sterk flekk scores som 3. Ingen positiv kontroll celle scores som 0. Det nødvendige antall positive celler, det vil si, < 30%, 30% -60%, og > 60%, ble scoret som 1, 2 og 3, henholdsvis. Basert på den totale poengsummene ble prøvene vurdert for TIMP3 uttrykk. En score på ≤2 ble klassifisert som negative, en score på tre var svakt positiv, en poengsum som strekker seg 4-5 var positive, og en score på 6 var sterkt positiv.
Statistisk analyse Bedrifter Den forskjeller mellom TIMP3 genpromoteren metylering hastighet og protein ekspresjon av prøvene ble detektert og statistisk analysert ved Kji-kvadrat
2 og Fisher metoder. Alle data ble analysert med SPSS12 statistisk programvare. Search Results
TIMP3 genet promoter metylering analyse
Hentet genomisk DNA fra prøven ble forsterket av MSP. Størrelsene på metylerte og unmethylated PCR-produkter ble 116 og 122 bp, respektivt. TIMP3 genpromotoren metylering fenomen ble vanligvis observert hos normale gastriske vev, gastrisk karsinom, og lymfeknutemetastase prøver. De positive deteksjon priser var som følger: 85% (17/20) for tidlig magekreft, 89,7% (52/58) for avansert magekreft, 98,7% (77/78) for metastatiske lymfeknuter, og bare 35,9% (28 /78) for normal gastrisk vev. Det ble observert en signifikant økning i TIMP3 genpromoteren metylering i alle magekreft-grupper (P
< 0,01; figur 1 og tabell 1), noe som tyder på at metylering av TIMP3 genet kan være involvert i kreftutvikling og metastasering av magekreftsvulster og metastatisk lymfeknute vev. Figur 1 Metylering-spesifikk PCR (MSP): 1, normal kontroll (normal gastrisk vev); 2, tidlig magekreft; 3, avansert magekreft; 4, overføring av lymfeknute. M, Marker DL2000; m, Metylering forsterkning fragment; u, unmethylation forsterkning fragment.
Tabell 1 magekarsinom TIMP3 promoter metylering og protein uttrykk
Organisasjoner
n (%)
TIMP3 arrangøren metylering
TIMP3 protein uttrykk
Positive
Positiv
Normal magen
78
28 (35,9)
78 (100,0)
Tidlig magekreft
20
17 (85,0)
9 (45,0)
Avansert magekreft
58
52 (89,7)
21 (36,2)
lymfeknutemetastaser
78
77 (98,7)
12 (15,4)
Immunohistochemistry analyse av TIMP3 protein uttrykk
TIMP3 protein uttrykk var positiv i alle 78 tilfeller av normal mage vev (100%). Blant de magekreft tilfeller, ni i 20 pasientene var positive for tidlig magekreft; 11 tilfeller var negative (55%), 21 tilfeller var positive, og 37 var negative (63,8%) i 58 tilfeller av avansert magekreft; og 12 saker var positive og 66 tilfeller var negative (84,6%) i 78 pasienter med metastatisk adenokarsinom lymfeknuter. Den reduserte TIMP3 uttrykk som ble observert i magekreft grupper ble funnet å være statistisk signifikant (P
< 0,01; Figur 2 og tabell 1), noe som tyder på at TIMP3 protein uttrykk sank i magekreftsvulster og metastatisk lymfeknute vev . Dette reduserte ekspresjon av genet proteinet kan være på grunn av den tidligere observerte økningen i TIMP3 metylering i magekreftprøvene fordi metylering er kjent for å undertrykke proteinekspresjon. TIMP3 protein ekspresjon ble hovedsakelig lokalisert i cytoplasma av normale kjertler. I noen få celler, ble en liten mengde av uttrykk som finnes i cellemembraner (figur 2). I de normale mageslimhinneceller, ble det ikke observert kjertelstruktur ødeleggelse og fargestoffer ble ikke vesentlig redusert. De tidlige magekreft kjertler viste strukturelle skader og svak kreftcelle fargelegging. De avanserte magekreft vev viste store områder med massiv vekst (udifferensiert karsinom), og bortsett fra de enkelte cellene, ble resten ikke farget. Figur 2 TIMP3 protein immunohistochemisty (SP 400 ×): en, normal mage vev; b, tidlig magekreft; c, avansert magekreft; d, overføring av lymfeknute.
Forholdet mellom TIMP3 genet promoter metylering og TIMP3 protein uttrykk
I avansert magekreft gruppe, frekvensen av TIMP3 metylering var betydelig høyere enn de lumpish og nestet voksende vev (100% vs. 77,8%, henholdsvis; P
< 0,01). Den TIMP3 metylering satsen i metastatisk lymfeknuter i ≥7 vev gruppen var signifikant høyere enn < 7 vev gruppen (100% vs. 83,3%, henholdsvis; P
< 0,05). Den subserosal og serøse vev gruppen var signifikant høyere enn den submucosal og myometrium vev gruppe (91,3% og 96,6% vs. 50%, henholdsvis; P
< 0,05). Økt TIMP3 genet metylering hastighet ble generelt observert i diffuse-like growth, lymfeknutemetastaser (≥ 7), og subserosal og serøse svulster, noe som tyder på at noe forhold eksisterte mellom TIMP3 genet metylering og tumorstørrelse, makroskopiske type, og histologisk type. Den positive frekvensen av de 58 tilfellene av avansert ventrikkelcancer vev var 36,2% (21). TIMP3 proteinekspresjon i massive og nestede voksende vev var signifikant høyere enn den av diffuse-lignende vekst vev (55,6% vs.19.4%, henholdsvis; P
< 0,01). TIMP3 protein uttrykk i metastatisk lymfeknute ≥ 7 vev var betydelig høyere enn < 7 vev (47,2% vs. 18,2%, henholdsvis; P
< 0,05) (tabell 2). Disse resultatene antydet at redusert TIMP3 protein uttrykk hastigheten var mer vanlig i diffuse-lignende vekst og lymfeknute metastatisk (≥7) svulster, men redusert uttrykk var ikke relatert til tumor størrelse, grov type histologisk type og dybde av invasion.Table 2 forholdet mellom avansert magekreft patologi TIMP3 metylering og dens protein uttrykk nivå
Index
n
TIMP3 arrangøren metylering
TIMP3 protein tumorstørrelse

Tumor størrelse (cm)
< 5
5
3 (60,0)
1 (20,0)
5-10
45
42 (93,3)
18 (40,0)
> 10
8
7 (87,5)
2 (25,0)
Generelle typer
Borr.2
12
10 (83,3 )
fire (33,3)
Borr.3
37
33 (89,2)
15 (40,5)
Borr.4
9
9 (100,0)
2 (22.2)
Histologisk differensiering
Differensiert
44
39 (88,6)
17 (38,6)
Undifferentiated
14
13 (92,9)
4 (28,6)
Vekst mønster
Klumper + nestet
27
21 (77,8)
15 (55,6)
Diffuse lignende
31
31 (100,0 ) b
6 (19,4) b
lymfeknutemetastaser
< 7
36
30 (83,3)
17 (47,2)
≥7
22
22 (100,0) en
4 (18.2) en
Infiltrasjon
submucosal muskularis
6
3 (50,0)
1 (16,7)
Subserosal
23
21 (91,3) en
9 (39,1)
serosa
29
28 (96,6)
11 (37,9)
aP
< 0,05, BP
< 0.01.
Diskusjon
Dannelsen av malignitet er flere faktorer og forekommer i flere etapper. De biologiske egenskapene til ondartede svulster er invasive vekst og metastase. Mekanismen bak tumorutvikling innebærer unormale forandringer i gen-struktur og funksjon i det indre av cellen. Moderne teoretikere anser at prosessen med tumordannelse består av to hovedmekanismer: den første er på genetisk nivå, dvs. bevirker genmutasjon DNA-nukleotidsekvens endres; og den andre er på epigenetisk nivå. Tidligere studier har fokusert på endringer i genekspresjon som er arvet gjennom meiose og ikke innebærer en forandring i DNA-sekvensen, men påvirker ekspresjon og genet regulerings funksjon av DNA, hovedsakelig ved kjemisk modifikasjon. Denne mekanismen er å få økt oppmerksomhet fra forskere av svulstdannelse prosesser [15, 16].
I DNA fra tumorvev, er abberant metyleringer ofte observert i genet promoter regioner, inkludert hypometylering i onkogen. Dette genet er nært knyttet til celleproliferasjon syklus og hypermethylation i tumorsuppressorgener. Disse unormale metylering endringene kan aktivere onkogener [17-19] og hemme mRNA-transkripsjon av tumorsuppressorgener [20], som fører til geninaktivering. Aberrant metylering i DNA skjer ved nærvær av høyt metylerte CpG-øyer i 5'-enden av en promoter kontrollregion. TIMP familien har fire protein medlemmer: TIMP-1, 2, 3, og 4. TIMP-1, 2, og 4 er oppløselige sekretoriske proteiner. I motsetning til dette er TIMP-3 en ikke-oppløselig protein som kombinerer med den ekstracellulære matriks, er lokalisert i den ytre cellemembran [21], og kan være nært forbundet med hele membranen. Funksjonen til TIMPs er hemning av tumornekrosefaktor-α (TNF-α) -converting enzymer og induksjon av programmert celledød gjennom stabil celleoverflate TNF-reseptor α [22]. Induksjon av apoptose via TIMP skjer på to måter: MMP avhengige og uavhengige. Selv om TIMP-3 og 4 har en høy affinitet for MMP-2, proteiner effektivt inhiberer MT1-MMP, for derved å aktivere den MMP-2-zymogen prosessen og inhibering av tumorcellevekst og metastase. Smith et al. [23] funnet at ekspresjonen av TIMP-3 i humane koloncancer cellelinjer er sjeldne i mitose. De fleste celler blir arrestert i G1 fase, selv om anvendelsen av TNF-α antistoff minsker mitotisk stopp med 70%.
For å undersøke forholdet mellom TIMP3 og magekreft, så vel som dens mekanisme i mage-inaktivering, vi har oppdaget TIMP3 gen 5 'CpG island hypermethylation i normal mage slimhinner, magekreft, og metastatiske lymfeknuter. Vi fant at i > 85% av all magekreft vev, det TIMP3 genet 5 'CpG øy viste avvikende metylering som var signifikant høyere (P
< 0,01) enn den til normal gastrisk vev gruppe, som antydet at TIMP3 genet promoter CpG island metylering redusert TIMP3 genekspresjon og var dermed den viktigste tumor suppressor-inaktivering mekanisme i magekreft. Gagnon et al. [24] rapporterte at i alle MCF-7 lunge kreft cellelinjer med TIMP3 mRNA uttrykk tap og TIMP3 genet promoter CpG island metylering, ble demetylering indusert av 5-AZA-CDR. TIMP3 uttrykk før og etter fem-AZA-CDR induksjon ble vurdert av RT-PCR, som viste at demetylering resulterte i TIMP3 gen re-uttrykk, i samsvar med våre resultater.
I denne studien, alle 78 tilfeller av normal mage vev var positive for TIMP3 protein uttrykk. Blant disse 78 tilfellene, bare 28 (35,9%) var positive for metylering. Blant de 20 pasienter med tidlig magekreft, 9 var positive for TIMP3 protein ekspresjon og 17 (85%) var positive for metylering. Blant de 58 tilfellene av avansert magekreft, 21 var positive for TIMP3 protein uttrykk og 52 (89,7%) var positive for metylering. Blant de 78 tilfellene av metastatiske lymfeknuter, 12 var positive for TIMP3 protein uttrykk og 77 tilfeller (98,7%) var positiv for metylering. Økt metylering hastigheten var betydelig mellom tidlig kreft, avansert kreft, og metastatisk lymfeknuteprøver sammenlignet med normale vevsprøver (P
< 0,01), som bekrefter at tapet av TIMP3 protein uttrykk var nært knyttet til TIMP3 genet promoter CpG island metylering. Feng HF et al. [25] rapporterte de samme resultatene i JAR og JEG-3 choriocarcinom cellelinjer. Derfor vår studie bekreftet at TIMP3 genet promoter CpG island metylering var hovedårsaken til den reduserte TIMP3 protein uttrykk i magekreft.
Blant de 58 fremskreden ventrikkelcancer prøver, 52 var positive for TIMP3 arrangøren CpG island metylering og 21 var positive for TIMP3 protein uttrykk. Dette funn antydet at bortsett fra CpG øy metylering, andre faktorer slik som genetisk variasjon som skyldes fravær av TIMP3 genekspresjon. I våre eksperimenter, 34 prøvene var positive for metylering, og unmethylation ble vanligvis tolkes som følger: ufullstendig metylering status av gener kan eksistere, og hvis tumorvev blandes med ikke-tumorceller, et positivt PCR-produkt for unmethylation (ved MSP med unmethylated primer) kan observeres. TIMP3 protein uttrykk av prøven var negativ, så disse prøvene ble definert som metylering positiv.
I Kina har fem års overlevelse av magekreft pasienter er bare ca 40% etter reseksjon. Den dårlig prognose er forbundet med omfattende lokal invasjon og /eller regional lymfeknutemetastase [26]. Lokalt tilbakefall fortsatt som en viktig årsak til kreftrelaterte dødsfall etter reseksjon i magekreftpasienter [27]. Derfor må pålitelige kriterier for prediksjon av tilbakefall og identifisering av svulster bli etablert for å forstå molekylære og cellulære prosesser, samt oppdage nye og mulige terapeutiske molekylære mål [28].
Kerbel [29] rapporterte at delkloning tumorceller med metastatisk potensial har en vekstfordel i den tidlige fasen av primærbrennpunkter. Grunnen for en slik vekst fordel er at den metastatisk subklon cellepopulasjon kan utskille en bestemt faktor eller lokal cellevekstfaktor, og dermed forårsaker en spesiell reaksjon som resulterer i selektiv vekst. Påvisning av molekylære markører nivåer i grunnskolen vevsprøver kan gjenspeile den generelle metastatiske egenskapene til hele svulsten. I denne gruppen, de metylering prisene var bare 35,9% for normal mage vev, 85% og 89,7% for tidlig og avansert kreft, henholdsvis 98,7% for metastatiske lymfeknuter. Gjennomgående høy TIMP3 protein uttrykk ble kun observert i normale mage vev. Tidlig og avanserte mage kreft utstilt fokus svak uttrykk, og metastatiske lymfeknuter viste nesten ingen positive uttrykk. Dette funnet antydet at TIMP3 metylering økt med tumorprogresjon og at protein uttrykk gradvis redusert. Følgelig, metastatisk potensial og vekstfordel av celler gradvis økt, til slutt resulterer i metastasering. Yegnasubramanian et al. [30] rapporterte at metastase var relatert til TIMP3 metylering i prostata kreft cellelinjer som avslørt av sanntids MSP av prøver fra 73 pasienter med tidlig prostatakreft, 91 pasienter med metastatisk prostatakreft, og 25 tilfeller med prostatavevet. Dette resultatet innebar en sammenheng mellom CpG metylering og gradering og utviklingen av prostatakreft. TIMP3 gen metylering spiller velig en viktig rolle i den metastatiske prosess, og påvisning av TIMP3 CpG metylering har noen praktisk verdi i å forutsi den metastatisk potensial av den primære tumoren.
TIMP3 har en høy frekvens av genetisk variasjon i mange typer humane ondartede svulster, inkludert mutasjoner, slettinger, metylering, translokasjon, og så videre [31]. Disse mutasjoner resulterer i tap av normal funksjon av et tumorsuppressorgen, nemlig inhibering av celleproliferasjon (dvs. geninaktivering) og er nært beslektet med utvikling av kreft [32]. Imidlertid har få studier blitt utført på TIMP3 gen endring i primær magekreft, og resultatene av disse studiene viser avvikende resultater fra en lav-genet delesjon sats til ingen mutasjon i det hele tatt. Følgelig har andre inaktive mekanismer for mage kreft som involverer TIMP3-genet blitt undersøkt [33]. Således kompleksiteten av svulsten patogenesen er ikke bare en refleksjon av genetisk endring av mutasjon eller delesjon, men også en refleksjon av epigenetiske endringer, slik som DNA-metylering. En grundig studie av forholdet mellom DNA metylering og genekspresjon, samt den tilsvarende mekanisme, anbefales fordi resultatene kan veilede klinisk behandling av kreft.
Erklæringer
Funding
Studien ble finansiert av Natural Science Foundation National of China (nr 30271477) og prosjekt Sponset av Scientific Research Foundation for den returnerte Overseas Chinese Scholars, State Kunnskapsdepartementet (nr 2002-247).
Forfatternes opprinnelige innsendte filer for bilder
Nedenfor er linkene til forfatternes opprinnelige innsendte filer for bilder. 13000_2013_791_MOESM1_ESM.jpeg Forfatteroriginalfilen for figur 1 13000_2013_791_MOESM2_ESM.tiff Forfatteroriginalfilen for figur 2 Konkurrerende interesse
Forfatterne erklærer herved at de ikke har noen konkurrerende interesser med hverandre. Bidrag
Forfatternes
ZG og JZ utført patologiske og PCR-undersøkelser, DD og ZG analysert data, og ZG utarbeidet manuskriptet. Alle forfattere lese og godkjent den endelige manuskriptet.

• En sammenligning av endoskopisk submucosal disseksjon (ESD) og radikal kirurgi for tidlig magekreft: en retrospektiv studie
• Korrelasjon av Ht6 uttrykk med tumorresidiv og prognose ved avansert ventrikkelcancer