Promoter metiláció és kifejezése TIMP3 gén gyomor cancer

promoter metiláció és kifejezése TIMP3 gén gyomorrák katalógusa Abstract Background katalógusa katalógusa gyomorrák fejlesztés többlépcsős folyamat, amely egynél több gén. Aberráns változások a DNS-metiláció tekintik a harmadik mechanizmus, amely elvezet az anti-onkogén inaktiválását, amely alapvető szerepet játszik a tumor fejlődését. Ebben a vizsgálatban vizsgáltuk a kapcsolat között az aberráns metilezése promoter CpG-szigetek szöveti inhibitor metalloproteináz 3 (TIMP3) gén, a fehérjeexpresszió, és a klinikopatológiai jellemzői gyomor adenokarcinóma.
Módszerek
A metilációs állapotát a promoter CpG szigetek és a fehérje kifejeződését TIMP3 gén tumorok és szomszédos normál nyálkahártya szöveteit 78 beteg gyomor adenokarcinóma detektáltunk metiláció-specifikus PCR (MSP) és immunhisztokémiai. katalógusa Eredmények katalógusa a CPG-sziget metilációját TIMP3 detektáltunk tumor szövetekben, a rák-szomszédos szövetekben, és a nyirokcsomók áttétes. Növekvő sorrendben hipermetilációja gyakorisága Ezeket a szöveteket 35,9% (28, 78, nem neoplasztikus szövetekben), 85% (17 20 korai stádiumú esetek), 89,7% (52 58 progresszív szakaszban eset), és 100% (78 78 metasztatikus nyirokcsomó). Egy jelölt különbséget találtunk tumorok és nem neoplasztikus szövetekben (p
< 0,05), de nincs különbség létezett között alcsoportok daganatok (p
> 0,05). Az immunhisztokémiai analízis megerősítette TIMP3 leszabályozza a daganatos szövetekben. Az arány a TIMP3 génexpresszió 100% -os volt a nem neoplasztikus szövetekben de láthatóan csökkentek különböző mértékben különböző szakaszaiban, azaz a csökkent 30% (6/20), a korai szakaszban, hogy 3,4% (2/58), a progresszív szakaszban, a 0% (0/78), metasztatikus nyirokcsomók. Között 70 daganatos szövetek negatív TIMP3 kifejezés, 64 (91,4%) volt hipermetiláltnak és 6 metilálatlanok (8,6%), jelezve, hogy szignifikáns összefüggést hipermetiláltsági, csökkentik vagy negatív TIMP3 kifejezés (P katalógusa < 0,01).
Következtetés
hipermetiláció a promoter régió CpG-szigetek fő mechanizmusa TIMP3 génexpresszió és bizonyítják a molekuláris diagnosztika és értékelési szakaszon a gyomorrák. katalógusa virtuális diák
virtuális diák erre cikk megtalálható itt: http: //www. diagnosticpathol lógia. diagnomx. eu /vs /1756134016954958 katalógusa Kulcsszavak katalógusa gyomor adenokarcinóma szöveti inhibitor metalloproteináz 3 (TIMP3) Metiláció háttér
gyomorrák (vagy gyomor karcinóma) az egyik leggyakoribb rosszindulatú daganatok a világon. Betegség kialakulásának a gyomorrák egy többlépcsős folyamat, amely egynél több gént. Betegség faktorok végül hatnak különböző gének különböző szakaszaiban, ami a változást gén szerkezete és expressziós szintje, melyek a fejlesztés gyomor kialakulásában. Funkciójának elvesztése egy anti-onkogén előfordulhatnak különböző csatornákon keresztül. Amellett, hogy a deléciók és mutációk, aberráns változások a DNS-metiláció tekintik, mint a harmadik vezető mechanizmus anti-onkogén inaktiválás [1, 2], amely alapvető szerepet játszik a tumor fejlődését. A CpG-szigetek, melyek CpG-gazdag szekvenciákat található upstream promoter régiójának egy háztartási gén, olyan régiók, ahol a citozin metilezése általában nem fordul elő, bár a stimuláció bizonyos tényezők vezet a metilezés. Következésképpen DNS-expressziós gátolt ebben a régióban [3]. Inaktiválását számos tumor-asszociált gének, mint például a P16, THBS1, TIMP3, hMLH1, és MGMT kapcsolódnak a metilációs saját promóter régiók [4-8]. Tissue inhibitor metalloproteináz-3 (TIMP3) kapcsolatban áll a tumor fejlődését, különösen antagonizálása aktivitásának mátrix metalloproteinázok, valamint gátolja a tumor növekedését, angiogenezis, invázió, és metasztázis [9].
Ebben a munkában, észleltünk a metiiációs a TIMP3 gén promoter CpG-sziget és fehérje expresszió normál gyomornyálkahártya szövetekben, gyomorrák szöveteket, és áttétes nyirokcsomók 78 gyomorrákos betegeknél a metiláció-specifikus PCR (MSP) és immunhisztokémiai. Mi feltárt korrelációja gén promoter metiláció annak megfelelő protein expresszióját és ezután analizáltuk a kapcsolat TIMP3 gén CpG-szigetre rendellenes metiláció a fejlesztés, valamint a klinikai és patológiai jellemzői, a gyomor adenokarcinóma.
Anyagok és módszerek katalógusa anyagok
Összes 78 esetben a gyomor normál szövetben, gyomorrák, és áttétes nyirokcsomók igazoltuk patológiai diagnózis. A tumor vettünk között 1998. március 2005. májusi első Kapcsolt Kórház és Liaoning tartományi Tumor Kórház posztoperatív gyomorrákos betegeknél (férfi: n katalógusa = 54; nő: n katalógusa = 24), az átlagos életkor 56,2 ± 7,5 év. A minták között kapott, 20 pedig a korai gyomorrák, 58 volt az előrehaladott gyomorrák, 44 volt a differenciálás, és 14 volt differenciálatlan. Stádium alapult International Union Against Cancer TNM stádium szabványok, gépelés Gyomorrák Növekedési Way és alapokmánya Staging, és a gyomorrák gépelési Japánban [10-12] a Kínai Orvostudományi Egyetem Rákkutató Intézet. Hidrokinon (10 mmol /l) és nátrium-hidrogén-szulfát (3,9 mol /l) a Sigma. A DNS-Clean-up rendszer vásárolta Promega. TIMP3 antitest és SP kit vásároltuk Boster Biological Engineering Co., Ltd. (Dalian). Minden mintát kezelték és névtelenek szerint az etikai és jogi normákat. A protokollt jóváhagyta az orvosi etikai bizottság Liaoning tartományi Tumor Kórház és Kína Orvostudományi Egyetem.
MSP katalógusa Az MSP módszer [13], metiláz feldolgozása zajlott normál perifériás vérsejtek és pozitív kontrollként. Kezeletlen sejteket alkalmaztunk negatív kontrollként. A szekvenciákat a metilezett (TIMP3-M) és nem metilált (TIMP3-U) primerek a következők voltak: (1) TIMP3-M primer szekvenciák, 5'CGTTTCGTTATTTTTTGTTTTTCGGTTTTC-3 'és 5'-CCGAAAACCCCGCCTCG-3'; és (2) TIMP3-U primer szekvenciákat, 5'-TTTTGTTTTGTTATTTTTTGTTTTTGGTTTT-3 'és 5'-CCCCCCAAAAACCCCACCTCA-3'. A PCR-reakció körülményei a következők voltak: 95 ° C kezdeti denaturálás 5 perc, 95 ° C-on, denaturálás 30 S (40 ciklus), 59 ° C-on hőkezelés 60 másodpercig (40 ciklus), 72 ° C-kiterjesztése 60s (40 cikluson ), és 72 ° C kiterjesztés 10 percig. Agaróz gél elektroforézissel és EB-festéssel végeztünk,. Az adatok a géleket összegyűjtött lézerrel sűrűségű scanner (Pharmacia LKB Ultroscan) és ezt követően elemeztük. Minden kísérletet háromszor megismételtük, és az átlagértéket használtuk a statisztikai elemzéshez.
Immunhisztokémia
Immunhisztokémiához, használtuk a streptomycesavidin-peroxidáz festési eljárással. Immunhisztokémiai festés szerint hajtottuk végre a gyártó utasításai szerint. Diagnosztikus kritérium, a megfigyelés barnássárga citoplazmában festést követően ítélték pozitív eredménynek TIMP3 kifejezést. A kontrollok esetében, a normális szöveti területének festettük, mint a pozitív kontroll, és egy normális szövet rész használtunk negatív kontrollként, és megfestettük PBS helyett egy primer antitest. Pontozási szabvány szerint végeztük által leírt módszer Shimizu [14]. Megfigyeltük a festés intenzitása és eloszlása ​​pozitív sejtek nagy nagyítás; nincs festést pontozni 0, gyenge festést de sokkal erősebb, mint a negatív kontroll pontozni 1, világos folt szerzett a 2., és egy erős foltot bírálják 3. Nincs pozitív kontroll sejt bírálják 0. A szükséges számú a pozitív sejtek, azaz < 30%, 30% -60%, és > 60%, pontoztuk mint 1, 2, és 3., ill. Alapján a teljes pontszámok, a mintákat megvizsgáltuk TIMP3 kifejezés. A pontszám ≤2 minősítették negatív, 3 pontot enyhén pozitív volt, a pontszám kezdve 4-5 pozitív volt, és egy tucat 6 erősen pozitív.
Statisztikai analízis katalógusa A különbség az egyes TIMP3 gén promoter metiláció mértékét és fehérje expressziója a mintákat észlelt és statisztikailag analizáltuk a χ
2 és Fisher módszerekkel. Minden adatot elemeztük SPSS12 statisztikai szoftver. Katalógusa Eredmények katalógusa TIMP3 gén promoter metiláció vizsgálata
Kivont genomi DNS-mintában amplifikáltuk MSP. A méretek a metilált és nem metilált PCR-termékeket a 116 és 122 bp volt. TIMP3 gén promoter metiláció jelenséget általában megfigyelhető normális gyomor- szövetekben, gyomor karcinóma, és a nyirokcsomó-metasztázis mintákban. A pozitív észlelési arány a következő volt: 85% (17/20) a korai gyomorrák, 89,7% (52/58) az előrehaladott gyomorrák, 98,7% (77/78) metasztatikus nyirokcsomók, és csak 35,9% (28 /78) a normális gyomor szövetet. A jelentős növekedés a TIMP3 gén promoter metiláció figyelték meg az összes gyomorrák csoportban (p
&0,01; 1. ábra és 1. táblázat), ami arra utal, hogy a metilezést a TIMP3 gén is be lehet vonni a karcinogenezis és metasztázis a gyomorrák tumorok és metasztatikus nyirokcsomó szövetekben. 1. ábra metiiációspeeifikus PCR (MSP): 1, normál kontroll (normál gasztrikus szövet); 2, a korai gyomorrák; 3, az előrehaladott gyomorrák; 4, átadása nyirokcsomó. M, Marker DL2000; m, metilálása amplifikációs fragmens; u, unmethylation amplifikációs fragmens. katalógusa 1. táblázat gyomorrák TIMP3 promoter metiláció és protein expresszió katalógusa Szervezetek Matton n (%) Matton TIMP3 promoter metiláció Matton TIMP3 fehérje kifejezés Matton Pozitív Matton Pozitív Matton Normál gyomor katalógusa 78 katalógusa 28 (35,9) hotelben 78 (100.0) hotelben Korai gyomorrák katalógusa 20 katalógusa 17 (85,0) hotelben 9 (45.0) hotelben Előrehaladott gyomorrák katalógusa 58 katalógusa 52 (89,7) hotelben 21 (36,2) hotelben nyirokcsomó-metasztázisok
78
77 (98,7)
12 (15,4)
Immunhisztokémia elemzése TIMP3 fehérjeexpresszió
TIMP3 fehérje expresszió pozitív volt mind a 78 esetben a normális gyomor- szövet (100%). Között a gyomorrák esetek 9 20 betegnél volt pozitív korai gyomorrák; 11 esetben negatív volt (55%), 21 esetben volt pozitív és 37 negatív volt (63,8%) 58 esetben előrehaladott gyomorrák; és 12 esetben volt pozitív és 66 esetben negatív volt (84,6%), 78 esetben a metasztatikus gyomor nyirokcsomók. A csökkentett TIMP3 kifejezés, amely volt megfigyelhető a gyomorrák csoportok találták statisztikailag szignifikáns (p
&0,01; a 2. ábra és 1. táblázat), ami arra utal, hogy a TIMP3 fehérje expresszió mértéke csökkent gyomor rákos daganatok és metasztatikus nyirokcsomó szövetekben . Ez csökkentette a gén expressziója fehérje oka lehet, hogy a korábban megfigyelt növekedése TIMP3 metilezés a gyomorrák mintákat mert metilezés ismert, hogy elnyomják a fehérje expresszióját. TIMP3 fehérje expressziót elsősorban található citoplazmájában normális mirigyek. Néhány sejtekben, kis mennyiségű expressziót találtunk a sejtmembránok (2. ábra). A normál gyomornyálkahártya-sejtek, nem mirigyes szerkezet pusztítás volt megfigyelhető, és színezés nem volt jelentősen csökkent. A korai gyomorrák mirigyek megmutatta szerkezeti károk és a gyenge ráksejtek színezés. Az előrehaladott gyomorrák szövetek azt mutatta, nagy területen a masszív növekedés (differenciálatlan karcinóma), és eltekintve az egyes cellákat, a többiek nem színezett. 2. ábra TIMP3 protein immunohistochemisty (SP 400 ×): a normál gyomor szöveti; b, a korai gyomorrák; c, az előrehaladott gyomorrák; d, átadása nyirokcsomó.
közötti kapcsolat TIMP3 gén promoter metiláció és TIMP3 fehérje expresszióját katalógusa Az előrehaladott gyomorrák csoport, melynek mértéke TIMP3 metiláció szignifikánsan magasabb volt, mint az idomtalan és beágyazott szövetek növekedését (100% vs. 77,8% -kal; P
< 0,01). A TIMP3 metiláció mértéke az áttétes nyirokcsomók ≥7 szövet csoportban szignifikánsan magasabb volt, mint a < 7 szövet csoport (100% vs. 83,3% -kal; P katalógusa < 0,05). A savós és savós hártya szöveti csoportban szignifikánsan magasabb volt, mint a nyálkahártya alatti és myometrium szövetet csoportban (91,3% és 96,6% vs. 50% -kal; p
< 0,05). Fokozott TIMP3 gén metilációs arányt általában megfigyelhető diffúz-szerű növekedési, nyirokcsomó áttétek (≥7), és savós és serosus daganatok, utalva arra, hogy nincs kapcsolat állt fenn TIMP3 gén metiláció és a tumor mérete, makroszkopikus típusát, és a szövettani típus. A pozitív arány a 58 esetben előrehaladott gyomorrák szövetek 36,2% (21). TIMP3 fehérje expresszió masszív és a beágyazott növekvő szövetekben jelentősen magasabb volt, mint a diffúz-szerű növekedési szövetekben (55,6% vs.19.4% -kal; p
< 0,01). TIMP3 fehérje expresszió a metasztatikus nyirokcsomó ≥7 szövetekben jelentősen magasabb volt, mint a < 7 szövet (47,2% vs. 18,2% -kal; p
< 0,05) (2. táblázat). Ezek az eredmények arra utalnak, hogy a csökkent TIMP3 fehérje expressziós ráta gyakoribb volt diffúz-szerű növekedési és nyirokcsomó áttétes (≥7) tumorok, de csökkent expressziója nem volt összefüggésben a daganat mérete, bruttó típus, szövettani típus, és mélysége invasion.Table 2 közötti kapcsolat előrehaladott gyomorrák patológia TIMP3 metiláció és protein expressziós szint katalógusa index
n
TIMP3 promoter metiláció Matton TIMP3 protein tumor mérete katalógusa
A tumor mérete (cm) hotelben < 5 katalógusa 5 katalógusa 3 (60,0) hotelben 1 (20.0) hotelben 5-10 katalógusa 45 katalógusa 42 (93,3)
18 (40,0) hotelben > 10 katalógusa 8 katalógusa 7 (87,5) hotelben 2 (25.0) hotelben Általános típusok katalógusa Borr.2 katalógusa 12 katalógusa 10 (83,3 ) hotelben 4 (33.3) hotelben Borr.3 katalógusa 37 katalógusa 33 (89,2) hotelben 15 (40,5) hotelben Borr.4
9 katalógusa 9 (100,0)
2 (22.2) hotelben szövettani differenciálás
differenciált katalógusa 44 katalógusa 39 (88,6) hotelben 17 (38,6) hotelben differenciálatlan
14 katalógusa 13 (92,9)
4 (28.6) hotelben növekedési minta katalógusa rögöket + nested katalógusa 27 katalógusa 21 (77,8) hotelben 15 (55,6) hotelben diffúz jellegű
31 katalógusa 31 (100.0 ) b katalógusa 6 (19.4) b katalógusa nyirokcsomó áttét katalógusa < 7 katalógusa 36 katalógusa 30 (83,3) hotelben 17 (47,2) hotelben ≥7 katalógusa 22
22 (100,0) egy fiatal 4 (18.2) egy fiatal szikkasztó katalógusa Submucosalis muscularis katalógusa 6 katalógusa 3 (50,0) hotelben 1 (16.7) hotelben savós katalógusa 23 katalógusa 21 (91,3) egy fiatal 9 (39.1) hotelben savóshártyát
29 katalógusa 28 (96,6) hotelben 11 (37,9) hotelben aP katalógusa < 0,05 BP katalógusa < 0.01.
Megbeszélés katalógusa képződése rosszindulatú daganatok többtényezős és akkor több lépcsőben. A biológiai jellemzői a rosszindulatú daganatok közé tartoznak az invazív növekedés és metasztázis. A mechanizmus mögött tumor fejlődését magában rendellenes változás gén szerkezete és funkciója a belső a sejt. Modern elmélet szerint, hogy a folyamat a tumorképződés tartalmaz két fő mechanizmusa: az első az a genetikai szinten, azaz a gén mutáció okozza a DNS nukleotid szekvencia megváltozik; és a második áll a epigenetikus szinten. Korábbi tanulmányok középpontjában a génexpressziós változásokat, amelyek révén örökölte a meiózis és nem járnak a változás a DNS-szekvencia, de befolyásolja a véleménynyilvánítás és a gén szabályozó funkciója a DNS, elsősorban kémiai módosításával. Ez a mechanizmus egyre fokozott figyelmet a kutatók tumorképződés folyamatok [15, 16].
A DNS-ben a tumor szövetekben, abberant metilálásokat gyakran megfigyelhető gén promoter régiók, beleértve hipometiláció az onkogén. Ez a gén szorosan összefügg sejtproliferáció ciklus és hipermetiláció a tumor szuppresszor gének. Ezek a kóros metiláció változások aktiválhatja onkogének [17-19], és gátolják az mRNS transzkripcióját a tumorszuppresszor gének [20], ami a gén inaktiválását. Aberráns metilezés DNS révén történik jelenléte erősen metilált CpG-szigetek az 5 'végén egy promoter szabályozó régió. A TIMP család négy protein tagja van: a TIMP-1, 2, 3, és 4. a TIMP-1, 2, és 4 oldható szekréciós fehérjék. Ezzel szemben, TIMP-3 egy nem-oldható fehérje, amely egyesíti az extracelluláris mátrixszal való, található, a külső sejtmembránban [21], és lehet szorosan kapcsolódik a basilaris membránon. A funkció a TIMP-ek a gátlás a tumor nekrózis faktor-α (TNF-α) -converting enzimek és az indukciós a programozott sejthalál keresztül stabil sejtfelszíni TNF-α-receptor [22]. Az apoptózis indukciója révén TIMP bekövetkezik a két úton: MMP-függő és független. Bár a TIMP-3 és 4 nagy affinitást mutatnak az MMP-2, a fehérjék hatékonyan gátolják a MT1-MMP, ezáltal aktiválják az MMP-2 zimogén folyamat, és gátolja a tumor sejtek növekedését és a metasztázist. Smith et al. [23] megállapította, hogy a kifejezés a TIMP-3 humán vastagbélrák sejtvonalak ritkák a mitózis során. A legtöbb sejt letartóztatják a G1 fázisban, bár az alkalmazása a TNF-α antitest csökkenti mitotikus leállást 70% -kal.
Feltárása közötti kapcsolat TIMP3 és gyomorrák, valamint a mechanizmus gyomor inaktiválás, észleltünk TIMP3 gén 5 'CpG-szigetre hipermetiláció normál gyomornyálkahártya, gyomor karcinóma, és metasztatikus nyirokcsomók. Azt találtuk, hogy a > 85% -a az összes gyomorrák szöveteket TIMP3 gén 5 'CpG-szigetre mutatott aberráns metiláció hogy szignifikánsan magasabb volt (p
< 0,01), mint a normál gyomor szöveti csoport, amely azt jelentette, hogy TIMP3 gén promoter metiláció CpG sziget csökkentett TIMP3 génexpresszió, és így az a fő tumor szupresszor-inaktivációjának gyomorrákban. Gagnon et al. [24] beszámolt arról, hogy az összes MCF-7 tüdőrák sejtvonalak TIMP3 mRNS expressziója veszteség és TIMP3 gén promoter CpG-sziget metiláció, demetilezési indukáltunk 5-aza CDR. TIMP3 kifejezés előtt és után 5-aza-CdR indukció értékeltük RT-PCR, ami azt mutatta, hogy a demetilezési eredményezett TIMP3 gén re-expresszálásához, összhangban eredményeink.
A jelen vizsgálatban, mind a 78 esetben a normális gyomor- szövet volt pozitív TIMP3 fehérje expressziót. Ezek közül 78 esetben, csak 28 (35,9%) volt pozitív metilációs. Közül a 20 beteg korai gyomorrák, 9 volt pozitív TIMP3 fehérje expresszióját és 17 (85%) volt pozitív metilációs. Között 58 esetben előrehaladott gyomorrák, 21 volt pozitív TIMP3 fehérje expresszióját és 52 (89,7%) volt pozitív metilációs. Közül 78 esetben a metasztatikus nyirokcsomók, 12 volt pozitív TIMP3 fehérje expresszióját és 77 esetben (98,7%) volt pozitív metilációs. Fokozott metiláció mértéke jelentős volt a korai rák, előrehaladott rák, és metasztatikus nyirokcsomó mintákat összehasonlítva a hagyományos szövetminták (P katalógusa < 0,01), amely megerősíti, hogy a veszteség TIMP3 fehérje expresszió szorosan kapcsolódik TIMP3 gén promoter CpG-sziget metiláció. Feng HF et al. [25] számolt ugyanazt az eredményt a JAR és JEG-3-choriocarcinoma-sejt-vonalak. Ezért a tanulmány megerősítette, hogy TIMP3 gén promoter metiláció CpG-sziget volt a fő oka a csökkentett TIMP3 fehérje expressziója gyomorrákban.
Között 58 előrehaladott gyomorrák minta, 52 volt pozitív TIMP3 promoter CpG-sziget metiláció és 21 volt pozitív a TIMP3 fehérje expresszió. Ez az eredmény azt javasolta, hogy eltekintve a CpG sziget metiláció, egyéb tényezők, mint például a genetikai variáció miatt távollétében TIMP3 génexpresszió. Kísérleteinkben 34 minta volt pozitív metiláció, és unmethylation rendszerint a következőképpen értelmezendő: hiányos metilációs állapotát gének létezhetnek, és ha a tumorszövetben összekeverjük a nem daganatos sejtek, a pozitív PCR-terméket unmethylation (MSP által a metilálatlanok primer) figyelhető meg. TIMP3 fehérje expressziója a minta negatív volt, így ezek a mintákat definiált metiláció pozitív.
Kínában, az 5 éves túlélési arány a gyomorrák betegek csak körülbelül 40% reszekció után. A rossz prognózis társul kiterjedt lokális invázió és /vagy regionális nyirokcsomó metasztázis [26]. Helyi kiújulás marad a fő oka a rák összefüggő halálesetek után reszekció gyomorrákos betegek [27]. Ezért megbízható kritériumokat a jóslat a kiújulás és azonosítása tumorok kell kialakítani, hogy megértsük a molekuláris és sejtszintű folyamatokat, valamint olyan új és lehetséges terápiás molekuláris célpontok [28].
Kerbel [29] számolt be, hogy alklónozására tumorsejtek metasztatikus potenciállal rendelkezik növekedési előnye a korai szakaszában az elsődleges góc. Ennek oka az ilyen növekedési előnye az, hogy a metasztatikus szubklón sejtpopuláció kiválasztódhat egy bizonyos faktor vagy helyi sejt növekedési faktor, és ezáltal egy speciális reakció, hogy az eredmények a szelektív növekedés. Kimutatása molekuláris marker szintek primer tumor példányokat tükrözik az általános metasztatikus jellemzői a teljes tumor. Ebben a csoportban a metilezés rátákat csak 35,9% a normál gyomor szövetek, 85% és 89,7% a korai és előrehaladott rákok, illetve 98,7% a metasztatikus nyirokcsomók. Egyenletesen magas TIMP3 fehérje expresszióját figyeltük csak normál gyomor szövetekben. A korai és előrehaladott gyomorrák mutatott fokális gyenge kifejezés, és áttétes nyirokcsomók megmutatta szinte nincs pozitív kifejeződése. Ez az eredmény azt javasolta, hogy TIMP3 metiláció növekedett a tumorok progresszióját, hogy a fehérje expressziója fokozatosan csökkent. Következésképpen a metasztatikus potenciál és növekedési előnye a sejtek fokozatosan nőtt, ami végső soron a metasztázis. Yegnasubramanian et al. [30] beszámolt arról, hogy a tumor metasztázis volt kapcsolatos TIMP3 metilezés prosztatarák sejtvonalak által feltárt valós idejű MSP származó minták 73 betegek korai prosztatarák, 91 metasztatikus prosztatarák, és 25 esetben prosztata szövetben. Ez az eredmény hallgatólagos közötti kapcsolat CpG metiláció és az osztályozás és a haladás a prosztatarák. TIMP3 gén metiláció állítólag fontos szerepet játszik a metasztatikus folyamatban, és az észlelési TIMP3 CpG metiláció van néhány gyakorlati értéke előrejelzésében a metasztatikus potenciálja a primer tumor.
TIMP3 magas frekvenciája genetikai variáció számos típusú emberi rosszindulatú tumorok, beleértve a mutációk, deléciók, metilezés, kromoszóma transzlokáció, és így tovább [31]. Ezek a mutációk a veszteséget a normális működéséhez egy tumorszuppresszor gén, nevezetesen, a sejtproliferáció (azaz gén inaktiválása), és szorosan kapcsolódik a rák kialakulása [32]. Ugyanakkor kevés vizsgálatot végeztek a TIMP3 génmódosítás elsődleges gyomorrák, és ezek eredménye vizsgálatok azt mutatják, eltérő eredményeket alacsony géndelécióval ráta mutációt nem egyáltalán. Ennek megfelelően más inaktiválása mechanizmusai gyomorrák magában TIMP3 gént vizsgálták [33]. Így a bonyolultsága tumor patogenezise nem csak tükrözi a genetikai változás által mutációt vagy deléciót, hanem tükrözi a epigenetikai változások, mint például a DNS-metiláció. Mélyreható vizsgálat közötti kapcsolat DNS metiláció és génexpresszió, valamint a hozzá tartozó mechanizmus, ajánlott, mert az eredmények irányítani a klinikai kezelés a rák. Katalógusa nyilatkozatok
Finanszírozás katalógusa A tanulmány által finanszírozott a Nemzeti Természettudományi Alapítvány Kína (No. 30271477), és a projektet a Tudományos Kutatási Alapítvány visszatért tengerentúli kínai tudósok, állami oktatási minisztérium (No. 2002-247). katalógusa a szerzők eredeti beküldötteknek képek
alábbiakban a linkeket a szerzők eredeti beküldötteknek képeket. 13000_2013_791_MOESM1_ESM.jpeg A szerzők eredeti fájlt az 1. ábra szerinti 13000_2013_791_MOESM2_ESM.tiff A szerzők eredeti fájl 2. ábrán versengő érdek katalógusa A szerzők kijelentik, hogy nincsenek egymással versengő érdekek egymással. Katalógusa szerzôk hozzájárulása katalógusa ZG és JZ elvégzett kórbonctani és PCR vizsgálatok, DD és ZG elemezte az adatokat, és ZG elkészítette a kéziratot. Minden szerző elolvasta és jóváhagyta a végleges kéziratot. Katalógusa

• Összehasonlítása endoszkópos nyálkahártya alatti boncolás (ESD) és a radikális műtét korai gyomorrák: retrospektív
• Korrelációja hK6 kifejezés a tumor kiújulásának és a prognózis előrehaladott gyomorrákban