Metilenotetraidrofolato polimorfismo C677T reductase em pacientes com estômago e câncer colorretal em uma população Korean

Metilenotetrahidrofolato redutase polimorfismo C677T em pacientes com estômago e câncer colorretal em uma população coreana da arte abstracta
Fundo
Este estudo foi desenhado para investigar a associação entre o metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR) C677T eo risco de gástrico e colorectal câncer na população coreana.
Métodos
Foi realizado um estudo caso-controle em larga escala de base populacional envolvendo 2.213 pacientes com câncer gástrico recém-diagnosticados, 1.829 pacientes com câncer colorretal recém-diagnosticados, e 1.700 controles saudáveis. A genotipagem foi realizada com DNA de sangue periférico para MTHFR C677T. A significância estatística foi estimada pela análise de regressão logística.
Resultados
As frequências MTHFR C677T de CC, genótipos CT e TT foram 35,2%, 47,5% e 17,3% entre o câncer de estômago, 34%, 50,5% e 15,5% para o cancro colorectal, e 31,8%, 50,7%, e 17,5% nos controlos, respectivamente. O genótipo MTHFR 677TT demonstrou uma fraca associação oposto com câncer colorretal em comparação com o genótipo homozigoto CC [ajustada idade e sexo chances ratio (OR) = 0,792, 95% de intervalo de confiança (IC) = 0,638-0,984, P
= 0,035] . Indivíduos com o MTHFR 677CT apresentaram um risco significativamente reduzido de câncer gástrico em comparação cuja com o genótipo 677CC (ajustada por idade e sexo OR = 0,810; IC95% = 0,696-0,942, P
= 0,006). Observamos, também, não há interações significativas entre o polimorfismo MTHFR C677T e fumar ou beber no risco de câncer de estômago e colo-rectal.
Conclusões
O alelo T foi encontrado para fornecer uma associação protetora fraca com câncer de estômago e câncer colorretal.
Fundo
Embora a incidência de câncer gástrico e de mortalidade têm vindo a diminuir em todo o mundo, ainda é a causa mais comum de morte por câncer na Coréia para ambos os sexos [1]. O câncer colorretal é muito comum e tem aumentado rapidamente, juntamente com a ocidentalização do estilo de vida na Coréia. Embora a Helicobacter pylori (H. pylori) estirpes têm sido propostos para ser uma das principais causas de cancro gástrico, não fornecem uma explicação completa. Estudos epidemiológicos têm indicado uma associação entre a ingestão de ácido fólico e uma redução do risco de certos cânceres [2-5], incluindo câncer gástrico [4] e cancro colorectal [3]. deficiências de folato pode resultar na metilação de ADN anormal e descontrolada a expressão do gene que conduz à transformação maligna [6, 7].
metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR) é uma enzima que desempenha um papel essencial no metabolismo de ácido fólico e catalisa a redução irreversível de 5,10-metilenotetrahidrofolato para 5-metiltetraidrofolato. A mudança de C para T no nucleótido 677 na MTHFR C677T resulta em uma mudança substância de aminoácidos de uma alanina para valina, e esta substância está associada com uma actividade enzimática reduzida, o que conduz a níveis reduzidos de folato no plasma [8]. baixa actividade enzimática de genótipos variantes MTHFR C677T estão associados com hipometilação do DNA, o que pode induzir a instabilidade genômica e, assim, afetar a expressão dos oncogenes ou genes supressores de tumor.
A associação entre os polimorfismos do gene MTHFRC677T e susceptibilidade genética para câncer de estômago e câncer colorretal tem sido amplamente avaliada em estudos recentes, mas com conclusões controversas. Diversos estudos relataram que um genótipo homozigoto variante do polimorfismo de MTHFRC677T foi associado com um aumento do risco de cancro gástrico [9, 10] e do cancro colo-rectal [11, 12]. No entanto, outros estudos relataram que os indivíduos com o genótipo MTHFR 677TT teve uma diminuição do risco de cancro colo-rectal [13], ao passo que outros ainda observada associação entre o genótipo MTHFRC677T e susceptibilidade genética para o cancro gástrico e colorectal [14-17]. Considerando os estudos apresentados até à data, resultados bastante inconsistentes foram relatados relativa à associação dos polimorfismos do gene MTHFR C677T com suscetibilidade genética para câncer de estômago e câncer colorretal. Nós projetamos um estudo de caso-controle de base populacional em grande escala na Coreia para avaliar o potencial papel do polimorfismo do gene C677T MTHFR no risco de câncer gástrico e colorectal, que nos ajudaria a tela, tratar, pesquisa, e prevenir estômago e câncer colorretal .
Métodos
assuntos
A população do estudo é constituída de 2.213 pacientes com câncer gástrico recém-diagnosticados, 1.829 pacientes com câncer recém diagnosticado colorretal (câncer de cólon 833, câncer retal 996) e 1.700 controles de base populacional. Todos os pacientes incluídos foram patologicamente confirmado pela Universidade Nacional Chonnam Hwasun Hospital entre abril de 2004 e junho de 2008. Os casos com tumores secundários ou recorrentes foram excluídos. Os estágios tumorais foram classificados de acordo com a classificação TNM, incluindo estágios clínicos ou patológicos TNM. O câncer gástrico foi classificada pela localização anatômica como cárdia (C16.0) ou não-cárdia (C16.1-16.8) e tipos histológicos, tais como intestinal, difusa, ou tipo misto.
O grupo controle (n = 1.700) consistia de participantes do Thyroid Disease Study Prevalência [18], realizado a partir de Julho de 2004 a Janeiro de 2006 no Yeonggwang e Muan condados de Jeollanam-Província e em Namwon Cidade de Jeollabuk-do, Coreia. Na época de suas coleções de sangue periférico, todos os sujeitos de estudo e controle desde que o seu consentimento informado para participar neste estudo. Este estudo foi aprovado pelo Institutional Review Board do Hwasun Hospital da Universidade Nacional Chonnam em Hwasun, Coreia do Sul.
Genotipagem
DNA genômico foi extraído de sangue periférico usando um Kit QIAamp Blood DNA Mini (Qiagen, Valencia, CA, EUA), de acordo com o protocolo do fabricante. A genotipagem foi realizada por PCR-RFLP ou PCR em tempo real. O protocolo para a genotipagem de PCR-RFLP foi adaptado de Frosst et al [19]. Depois de Hinfl (Takara, Tóquio, Japão) a digestão com enzimas de restrição, as amostras foram corridas num gel de poliacrilamida a 10% (19: 1) utilizando microtitulação matriz diagonal Electroforese em Gel (Madge; MadgeBio, Grantham e Southampton, Reino Unido) por genotipagem
. PCR em tempo real foi realizada por discriminação alélica, utilizando sondas duplamente marcadas que contêm ácidos nucleicos bloqueados (LNA), em um ensaio de reacção em cadeia da polimerase em tempo real (PCR). Os iniciadores de PCR e sondas LNA foram concebidos e sintetizados por tecnologias de ADN Intergrated (IDT) (Coralville; City, IA, EUA). Os iniciadores de PCR, produzindo um fragmento amplificado de 104 pb foram como se segue: iniciador directo, 5'-CTTTGAGGCTGACCTGAAGC-3 'e o iniciador reverso, 5'-GAA TCACAAAGCGGAA tgtg-3'. sondas de hibridização LNA duplamente marcadas foram 5'-FAM -ATG GCT ccc-BHQ1- 3 'para o alelo C e 5'-Cy5-CGA CTC CCG C-BHQ2-3' para o alelo T (bases LNA são indicados na parte superior do caso, polimorfismos de nucleotídeo único estão sublinhados). PCR em tempo real foi realizado utilizando um sistema multiplex de 3000 Rotor-Gene (Corbett Research, Sydney, Austrália) num volume de reacção de 10 ul contendo 200 nM de iniciador de PCR, 10-10 nM de cada sonda, 0,5 U F-polimerase Taq (Solgent , Daejeon, Coreia do Sul), e 40 ng de genômica.
análise estatística
A significância estatística das diferenças entre os grupos de pacientes e controle foi estimada pela análise de regressão logística. odds ratio ajustadas (OR) foram calculadas com o modelo de regressão logística que controlava por sexo e idade e são indicadas com intervalos de 95% de confiança (IC). Indivíduos com os genótipos de tipo selvagem (MTHFR 677 CC) foram consideradas como sendo de risco da linha de base. A frequência esperada de genótipos de controle foi verificada pelo teste de equilíbrio de Hardy-Weinberg. Interações do genótipo com o tabagismo, consumo de álcool e idade foram estimadas usando o modelo de regressão logística, os produtos de pontuações para hábito de fumar (0, Nunca e 1, sempre), beber hábito (0, não-bebedor e 1, bebedor), idade (0, ≤ 65 anos e 1, > 65 anos) e genótipo (0, genótipo CC para o alelo de referência; 1, CT genótipo e 2, o genótipo TT). análise de subgrupo foi realizada no local anatômica, tipo histológico e estadiamento TNM. Os temas para os quais não havia falta de dados para fumar, beber, localização anatômica, tipo histológico e estadiamento TNM foram excluídos na interação e subgrupo análises relacionadas com essas variáveis. Todas as análises foram realizadas utilizando o Statistical Package for a versão do software Ciências Sociais 17.0 (SPSS, Chicago, IL, EUA).

Resultados As características da população estudada são apresentados na Tabela 1. A média de idade dos pacientes com câncer de estômago e câncer colorretal foi significativamente maior em comparação com o grupo controle. A diferença entre os sexos estatisticamente significativa também foi encontrada entre os pacientes com câncer de estômago e colo-rectal e controles saudáveis, e o grupo controle tinha assuntos mais femininos. A proporção de fumadores em casos de cancro gástrico foi maior do que nos controlos, mas a proporção entre os casos de cancro colo-rectal foi menor do que nos controlos. A proporção de bebedores em ambos os grupos de câncer foi menor do que nos controls.Table 1 Características gerais dos temas
Características

Controls

O câncer gástrico
câncer colorretal
Sem
1700
2213
1829
Idade, quer dizer, anos
52,2 ± 14,3
60,2 ± 12,1 *
61,9 ± 11,4 **
≤ 65 anos
1321 (77,7)
1314 (59,4)
985 (53,9) Art > 65 anos
379 (22,3)
899 (40,6) *
844 (46,1) ** Sexo seguro
Masculino
821 (48,3)
1510 (68,2)
1149 (62,8)
Feminino
879 (51,7)
703 (31,8) *
680 (37,2) **
habitat fumar
Nunca
1000 (58,8)
1127 (50,9)
1137 (62,2)
Já
655 (38,5)
997 (45,1) *
582 (31,8) **
faltando
45 (2,6)
89 (4.0)
110 (6.0)
Beber habitat
não Nunca
825 (48,5)
1198 (54,1)
1084 (59,3)
bebedor
833 (49,0)
921 (41,6) *
623 (34,1) **
Faltando
42 (2,5)
94 (4.3)
122 (6,7)
TNM Stage
I
1138 (51,4)
291 (15,9)
II
305 (13,8)
547 (29,9)
III
290 (13,1)
615 (33,6 )
IV
386 (17,4)
230 (12,6) estágio
não especificado
94 (4.2)
147 (8,0)
Tumor local
O câncer gástrico
Cardiac
106 (4.8)
não-cardíaca
2093 (94,6) local
não especificado
14 (0,6)
câncer colorretal
Colon
833 (45,5)
reto
996 (54,5)
tipo histológico
intestinal
1286 (58,1)
difusa
561 (25,4)
Mixed
240 (10,8)
tipo não especificado
126 (5,7)
Os dados são expressos em número, porcentagem e média ± desvio padrão
* O câncer gástrico em comparação com o controlo, p <
.; 0,05;
câncer colorretal ** quando comparado com o controle, p Art < 0,05.
A Tabela 2 apresenta as distribuições de genótipos para MTHFR C677T e suas odds ratio ajustados e intervalos de confiança de 95% no câncer gástrico e colorretal. A distribuição dos polimorfismos do gene da MTHFR C677T nos controlos foi em equilíbrio de Hardy-Weinberg. As frequências MTHFR C677T de CC, genótipos CT e TT foram 35,2%, 47,5% e 17,3% entre câncer gástrico, 34%, 50,5% e 15,5% no cancro colorectal, e 31,8%, 50,7% e 17,5% no os controlos, respectivamente. As freqüências do alelo C e T foram 59,0% e 41,0% entre câncer gástrico, 59,2% e 40,8% no cancro colorectal, e 57,1% e 42,9% nos controles, respectivamente. Em comparação com o genótipo CC, o genótipo TT foi significativamente correlacionada com um risco reduzido de câncer colorretal, quando foram feitos ajustes para idade e sexo (ajustada por idade e sexo OR = 0,792; IC95% = 0,638-0,984, P = 0,035) . Embora nossos resultados para MTHFR 677TT e risco de câncer gástrico não atingiu significância estatística, a tendência observada (geral TT contra o CC OR = 0,877; IC95% = 0,719-1,070) indica um efeito um pouco de proteção. Considerando que o genótipo 677CT foi significativamente associada com um risco reduzido de câncer gástrico, o ajustada por idade e sexo ou foi 0,810 (IC95% = 0,696-0,942, P = 0,006) .table 2 MTHFR distribuições C677T e odds ratio ajustado para câncer gástrico e colorectal




O câncer gástrico
câncer colorretal
MTHFR C677T
Controls
O câncer gástrico
câncer colorretal

ou a (IC 95%)
valor P
ou a (95% CI)
valor P
CC
540 ( 31,8)
778 (35,2)
622 (34,0)
1

• Aumento do risco de adenocarcinoma gástrico após o tratamento de gástrico primário difuso de grandes células B lymphoma
• A análise in silico e verificação da expressão do gene S100 em cancer