Metilentetrahidrofolato reductasa C677T polimorfismo en pacientes con cáncer gástrico y colorrectal en una población de Corea

Metilentetrahidrofolato polimorfismo C677T reductasa en pacientes con gástrico y el cáncer colorrectal en una población de Corea
Abstract
Antecedentes
Este estudio fue diseñado para investigar una asociación entre la metilentetrahidrofolato reductasa (MTHFR) polimorfismo C677T y el riesgo de gástrico y colorrectal cáncer en la población coreana.
Métodos Se realizó un
a gran escala estudio de casos y controles de base poblacional que implica 2.213 pacientes con cáncer gástrico recién diagnosticado, 1.829 pacientes con cáncer colorrectal recién diagnosticado, y 1.700 controles sanos. La genotipificación se realizó con el ADN de sangre periférica para la MTHFR C677T. La significación estadística se estimó mediante análisis de regresión logística.
Resultados
Las frecuencias MTHFR C677T de CC, los genotipos CT y TT fueron 35,2%, 47,5% y 17,3% entre el cáncer de estómago, 34%, 50,5%, y 15,5% en el cáncer colorrectal, y el 31,8%, 50,7% y 17,5% en los controles, respectivamente. El genotipo MTHFR 677TT mostró una débil asociación opuesto con cáncer colorrectal en comparación con el genotipo CC homocigotos [edad y sexo odds ratio ajustado (OR) = 0,792, 95% intervalo de confianza (IC) = 0,638-0,984; p = 0,035
] . Los sujetos con la MTHFR 677CT mostraron una reducción significativa del riesgo de cáncer gástrico en comparación con el genotipo cuya 677CC (por edad y sexo OR ajustada = 0,810; IC del 95% = 0,696-0,942; p = 0,006
). También se observó ninguna interacción significativa entre el polimorfismo C677T MTHFR y el fumar o beber en el riesgo de cáncer gástrico y colorrectal.
Conclusiones Se encontró Francia El alelo T para proporcionar una asociación protectora débil con cáncer gástrico y cáncer colorrectal.
Antecedentes
Aunque la incidencia de cáncer gástrico y la mortalidad han disminuido en todo el mundo, sigue siendo la causa más común de muerte por cáncer en Corea por ambos sexos [1]. El cáncer colorrectal es muy común y se ha incrementado rápidamente junto con la occidentalización del estilo de vida en Corea. Aunque se han propuesto Helicobacter pylori (H. pylori) de las cepas a ser una causa importante de cáncer gástrico, que no proporcionan una explicación completa. Estudios epidemiológicos han indicado una asociación entre la ingesta de ácido fólico y un menor riesgo de ciertos tipos de cáncer [2-5], incluyendo el cáncer gástrico [4] y el cáncer colorrectal [3]. Las deficiencias de folato pueden resultar en la metilación del ADN y la expresión génica anormal no controlada que conduce a la transformación maligna [6, 7].
reductasa metilentetrahidrofolato reductasa (MTHFR) es una enzima que juega un papel esencial en el metabolismo del ácido fólico y cataliza la reducción irreversible de 5,10-metilentetrahidrofolato a 5-metiltetrahidrofolato. Un cambio de C a T en el nucleótido 677 en los resultados de MTHFR C677T en un cambio de sustancia de aminoácidos de una alanina a valina, y esta sustancia se asocia con la actividad de la enzima reducida que conduce a niveles de folato en plasma reducidos [8]. Actividad baja enzima de genotipos variantes MTHFR C677T están asociados con la hipometilación del ADN, lo que puede inducir a la inestabilidad genómica y por lo tanto afectar la expresión de oncogenes o genes supresores de tumores. México La asociación entre los polimorfismos de genes MTHFRC677T y la susceptibilidad genética al cáncer de estómago y el cáncer colorrectal ha sido ampliamente evaluado en estudios recientes, pero con conclusiones controversiales. Varios estudios informaron que una variante genotipo homocigótico del polimorfismo de MTHFRC677T se asoció con un mayor riesgo de cáncer gástrico [9, 10] y el cáncer de colon [11, 12]. Sin embargo, otros estudios informaron que los individuos con el genotipo MTHFR 677TT tenían un menor riesgo de cáncer colorrectal [13], mientras que otros aún no observaron ninguna asociación entre el genotipo MTHFRC677T y la susceptibilidad genética al cáncer gástrico y colorrectal [14-17]. Teniendo en cuenta los estudios proporcionados hasta la fecha, resultados bastante inconsistentes han sido reportados en la asociación de los polimorfismos del gen MTHFR C677T con la susceptibilidad genética al cáncer de estómago y cáncer colorrectal. Se diseñó un estudio de casos y controles de base poblacional a gran escala en Corea para evaluar el papel potencial del polimorfismo del gen C677T MTHFR en el riesgo de cáncer gástrico y colorrectal, lo que nos ayudaría a la pantalla, tratar, encuesta, y evitar gástrico y cáncer colorrectal .
Métodos sujetos

La población de estudio consta de 2.213 pacientes con cáncer gástrico recién diagnosticado, 1.829 pacientes con diagnóstico reciente de cáncer colorrectal (cáncer de colon 833, 996 cáncer de recto), y 1.700 controles basados ​​en la población. Todos los pacientes que participaron fueron confirmadas patológicamente por el Hospital de la Universidad Nacional de Chonnam Hwasun entre abril de 2004 y junio de 2008. Los casos con tumores secundarios o recurrentes fueron excluidos. Las etapas de los tumores se clasifican de acuerdo a la clasificación TNM, incluyendo estadios TNM clínicos o patológicos. El cáncer gástrico fue clasificado por sitio anatómico como cardias (C16.0) o no cardias (C16.1-16.8) y por tipos histológicos como intestinal, difusa, o de tipo mixto. Francia El grupo control (n = 1.700) constaba de los participantes en el Estudio de prevalencia de la enfermedad de tiroides [18], llevado a cabo entre julio de 2004 enero de 2006 en Yeonggwang y Muan condados de Jeolla-do y en Namwon Ciudad de Jeollabuk-do, Corea. En el momento de sus colecciones de sangre periférica, todos los sujetos de casos y controles dieron su consentimiento informado para participar en este estudio. Este estudio fue aprobado por el Comité de Revisión Institucional del Hospital Hwasun Universidad Nacional Chonnam en Hwasun, Corea del Sur.
Genotipado
ADN genómico fue extraído a partir de sangre periférica utilizando un QIAamp DNA Blood Mini Kit (Qiagen, Valencia, CA, EE.UU.), de acuerdo con el protocolo del fabricante. La genotipificación se realizó mediante PCR-RFLP o PCR en tiempo real. El protocolo de determinación del genotipo para la PCR-RFLP fue adaptado de Frosst et al [19]. Después de HinfI (Takara, Tokio, Japón) la digestión con enzimas de restricción, las muestras se corrieron en un gel de poliacrilamida 10% (19: 1) utilizando la matriz de microtitulación Diagonal electroforesis en gel (MADGE; MadgeBio, Grantham y Southampton, Reino Unido)
Genotipado por. PCR en tiempo real se llevó a cabo por la discriminación alélica, utilizando sondas de doble etiquetado que contienen ácidos nucleicos bloqueados (LNA), en un ensayo de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (PCR). PCR primers y sondas LNA fueron diseñados y sintetizados por Intergrated Tecnologías de ADN (IDT) (Coralville; City, IA, EE.UU.). Los cebadores de PCR que producen un amplicón de 104 pb fueron los siguientes: cebador directo, 5'-CTTTGAGGCTGACCTGAAGC-3 'y cebador inverso, 5'-GAA TCACAAAGCGGAA TGTG-3'. sondas de hibridación LNA doblemente marcadas fueron 5'-FAM -ATG GCT ccc-BHQ1- 3 'para el alelo C y 5'-Cy5-CGA TACc CCG C-BHQ2-3' para el alelo T (bases de LNA se indican en la parte superior caso, polimorfismos de nucleótido único están subrayados). PCR en tiempo real se realizó utilizando un sistema multiplex 3000 Rotor-Gene (Corbett Research, Sydney, Australia) en un volumen de reacción de 10 l que contiene cebador 200 nM PCR, 10-10 nM cada sonda, 0,5 U f-taq polimerasa (Solgent , Daejeon, Corea del Sur), y 40 ng de genómica.
El análisis estadístico
La significación estadística de las diferencias entre los grupos de pacientes y de control se estimó mediante análisis de regresión logística. Ajustada odds ratios (OR) se calcularon con el modelo de regresión logística que controló el sexo y la edad y se da con intervalos de confianza del 95% (IC). Los sujetos con los genotipos de tipo salvaje (MTHFR 677 cc) se consideraron riesgo basal. La frecuencia esperada de los genotipos de control se comprobó mediante la prueba de equilibrio de Hardy-Weinberg. Las interacciones de genotipo con el tabaquismo, el consumo de alcohol, y la edad se calcula utilizando el modelo de regresión logística, productos de calificaciones de hábito de fumar (0, Nunca y 1, jamás), el consumo de hábito (0, no bebedor y 1, bebedor), edad (0, ≤ 65 años y 1, > 65 años) y el genotipo (0, genotipo CC para el alelo de referencia; 1, el genotipo CT y 2, el genotipo TT). El análisis de subgrupos se llevó a cabo en el sitio anatómico, el tipo histológico y la estadificación TNM. Los temas en los que no había datos faltantes para fumar, beber, localización anatómica, el tipo histológico y estadificación TNM fueron excluidos de la interacción y el análisis de subgrupos relacionados con estas variables. Todos los análisis se realizaron utilizando el paquete estadístico para la versión de software 17.0 Ciencias Sociales (SPSS, Chicago, IL, EE.UU.).
Resultados
Las características de la población de estudio se presentan en la Tabla 1. La edad media de los pacientes con cáncer gástrico y el cáncer colorrectal fue significativamente mayor en comparación con el grupo control. También se encontró una diferencia de sexo estadísticamente significativas entre los pacientes con cáncer gástrico y colorrectal y controles sanos, y el grupo de control tenía más temas femeninos. La proporción de fumadores en casos de cáncer gástrico fue mayor que en los controles, pero la proporción entre los casos de cáncer colorrectal fue menor que en los controles. La proporción de bebedores en ambos grupos de cáncer fue menor que en los controls.Table 1 Características generales de los sujetos
Características

Controles

El cáncer gástrico
El cáncer colorrectal
Sin
1700
2213
1829
Edad, media, 52,2 años
± 14,3 60,2 ± 12,1
*
61,9 ± 11,4 **
≤ 65 años
1321 (77,7)
1314 (59,4)
985 (53,9) Hotel > 65 años
379 (22,3)
899 (40,6) *
844 (46,1) ** Sexo seguro
Hombre
821 (48.3)
1510 (68,2)
1149 (62,8)
Mujer
879 (51,7)
703 (31,8) *
680 (37,2) **
hábitat de fumadores
Nunca
1000 (58,8)
1127 (50,9)
1137 (62,2)
siempre
655 (38,5)
997 (45,1) *
582 (31,8) **
falta
45 (2.6)
89 (4,0)
110 (6.0)
hábitat Beber
no bebedor
825 (48,5)
1198 (54,1)
1084 (59,3)
bebedor
833 (49,0)
921 (41,6) *
623 (34,1) **
Missing
42 (2,5)
94 (4.3)
122 (6,7)
estadio TNM
I
1138 (51,4)
291 (15,9)
II
305 (13,8)
547 (29,9)
III
290 (13,1)
615 (33,6 )
IV
386 (17,4)
230 (12,6) etapa
no especificado
94 (4.2)
147 (8,0)
tumor sitio
cáncer
cardíaca
106 (4.8)
no cardiaco
2093 (94,6)
sitio no especificado página 14 (0,6)
El cáncer colorrectal
Colón
833 (45,5)
recto
996 (54,5)
tipo histológico intestinal

1286 (58,1)
difusa
561 (25,4)
Mixta
240 (10,8)
tipo no especificado
126 (5,7)
Los datos se expresan como el número, ciento y la media ± desviación estándar
* El cáncer gástrico en comparación con el control, p <
.; 0,05;
** El cáncer colorrectal en comparación con el control, p Hotel < 0.05.
Tabla 2 muestra las distribuciones de genotipo para MTHFR C677T y sus odds ratios ajustados y los intervalos de confianza del 95% en el cáncer gástrico y colorrectal. La distribución de los polimorfismos del gen MTHFR C677T en los controles fue en equilibrio de Hardy-Weinberg. Las frecuencias MTHFR C677T de CC, los genotipos CT y TT fueron 35,2%, 47,5% y 17,3% entre cáncer gástrico, 34%, 50,5% y 15,5% en el cáncer colorrectal, y el 31,8%, 50,7% y 17,5% en los controles, respectivamente. Las frecuencias del alelo C y T fueron 59,0% y 41,0% entre cáncer gástrico, 59,2% y 40,8% en el cáncer colorrectal, y 57,1% y 42,9% en los controles, respectivamente. En comparación con el genotipo CC, el genotipo TT fue significativamente correlacionado con un menor riesgo de cáncer colorrectal cuando se hicieron ajustes para la edad y el sexo (por edad y sexo OR ajustada = 0,792; IC del 95% = 0,638 a 0,984, P = 0,035) . Aunque nuestros resultados para MTHFR 677TT y el riesgo de cáncer gástrico no alcanzaron significación estadística, la tendencia observada (TT global frente a CC OR = 0,877; IC del 95% = 0,719-1,070) indica un efecto algo de protección. Mientras que el genotipo 677CT se asoció significativamente con un riesgo reducido de cáncer gástrico, la edad y el sexo OR ajustada fue 0.810 (IC del 95% = 0,696 hasta 0,942, P = 0,006) .table 2 MTHFR C677T y genotipo distribuciones de probabilidades ajustadas de para cáncer gástrico y colorrectal




El cáncer gástrico
El cáncer colorrectal
MTHFR C677T
Controles
cáncer gástrico

El cáncer colorrectal

O un (IC del 95%)
valor de p
o a (IC del 95%)
P valor
CC
540 ( 31.8)
778 (35,2)
622 (34,0)
1

• Aumento del riesgo de adenocarcinoma gástrico después del tratamiento de la gástrico primario grande difuso de células B lymphoma
• En el análisis de silico y verificación de la expresión génica en S100 cancer