cytoreductive cirurgia mais quimioterapia intraperitoneal hipertérmica melhora a sobrevida de câncer gástrico com carcinomatose peritoneal: evidência de um estudo experimental

cytoreductive cirurgia mais quimioterapia intraperitoneal hipertérmica melhora a sobrevida de câncer gástrico com carcinomatose peritoneal: evidência de um estudo experimental da arte abstracta
Fundo
cytoreductive cirurgia (CRS) mais quimioterapia intraperitoneal hipertérmica (HIPEC) tem sido considerada como um tratamento promissor modalidade para câncer gástrico com carcinomatose peritoneal (PC). No entanto, também houve muitos debates sobre a eficácia e segurança desta nova abordagem. Os resultados do estudo experimental modelo animal poderia ajudar a fornecer informações confiáveis. Este estudo foi investigar a segurança e eficácia do CRS + HIPEC para tratar câncer gástrico com o PC em um modelo de coelho.
Métodos
células tumorais VX2 foram injectadas na submucosa gástrica de 42 coelhos machos da Nova Zelândia usando uma implantação laparotômica técnica, para a construção de modelo de coelho de câncer gástrico com PC. Os coelhos foram divididos aleatoriamente em grupo controle (n = 14), CRS só grupo (n = 14) e CRS + grupo HIPEC (n = 14). O grupo controle foi observada para o curso natural da progressão da doença. Os tratamentos foram iniciados no dia 9 após as células tumorais a inoculação, incluindo a remoção máxima de nódulos de tumor em CRS só grupo, e SRC máximas mais quimioperfusão intraperitoneal heperthermic com docetaxel (10 mg /coelho) e carboplatina (40 mg /coelho) a 42,0 ± 0,5 ° C por 30 min no grupo CRS + HIPEC. O endpoint primário foi a sobrevida global (OS). Os desfechos secundários foram peso corporal, bioquímica, as principais funções dos órgãos e os eventos adversos graves (EAG).
Resultados
modelo de coelho de câncer gástrico com PC foi estabelecida com sucesso em todos os animais. As características clinicopatológicas do modelo foram semelhantes aos PC gástrica humana. O OS mediana foi de 24,0 d (95% intervalo de confiança 21,8-26,2 d) no grupo controle, 25,0 d (IC 95% 21,3-28,7 d) no grupo CRS, e 40,0 d (IC 95% 34,6-45,4 d) no CRS + grupo HIPEC (P
= 0,00, teste logarítmico). Comparado com o CRS grupo só ou controle, CRS + HIPEC poderia estender o sistema operacional em pelo menos 15 d (60%). Na linha de base, no dia da cirurgia e no dia 8 após a cirurgia, os periféricos do sangue contagem de células, funções hepáticas e renais, e parâmetros bioquímicos foram todos comparáveis. SAE ocorreu em 0 animal do grupo controle, 2 animais em CRS só grupo, incluindo a morte de 1 de animais devido a overdose de anestesia e outra morte devido a hemorragia pós-operatória, e 3 animais do grupo CRS + HIPEC incluindo a morte 1 de animais devido a overdose de anestesia, e 2 mortes de animais devido à diarreia 23 e 27 d após a operação.
Conclusões
neste modelo de coelho de câncer gástrico com PC, CRS por si só não poderia trazer benefícios, enquanto CRS + HIPEC com docetaxel e carboplatina pode prolongar significativamente a sobrevivência, com aceitável segurança.
fundo
a progressão loco-regionais de cancro gástrico geralmente resulta em carcinomatose peritoneal (PC), caracterizado por a presença de nódulos de tumores de vários tamanhos, o número e distribuição sobre a superfície peritoneal, bem como ascite maligna , com prognóstico muito pobre [1-5]. Pacientes com rosto PC gástrica um resultado sombrio, com uma sobrevida média de cerca de 6 meses [6].
Tratamentos atuais para tais PC são a quimioterapia sistêmica, melhores cuidados de suporte e terapia paliativa. A fim de resolver este problema, uma nova modalidade de tratamento chamada de cirurgia cytoreductive (CRS) mais quimioterapia intraperitoneal hipertérmica (HIPEC) tem sido desenvolvido ao longo dos últimos 3 décadas, tendo vantagens da cirurgia para reduzir a carga tumoral visível, e quimioterapia hyperthermic regional para erradicar a micrometástases [7-10]. Embora muitos estudos clínicos foram realizados para testar e confirmar a eficácia desta abordagem de tratamento combinado, há uma falta de evidência de alta qualidade a partir de fase III estudos prospectivos randomizados. A fim de avaliar de forma mais objetiva tal tratamento, é necessário estudar esta modalidade de tratamento em condições experimentais, em que a maioria dos fatores de confusão poderia ser bem controlados. A este respeito, os modelos animais adequados de PC são indispensáveis ​​plataformas. modelos animais pequenos de PC foram estabelecidas, incluindo modelos de rato e modelos de ratos [11-18]. Na maior parte destes modelos animais, as células cancerosas são injectados directamente no peritoneu, o que resultará em PC generalizada em devido tempo. Tais modelos têm sido utilizados para testar várias modalidades de tratamento, incluindo CRS e QIPHTO, quer isoladamente ou em combinação, produzindo informações valiosas sobre a validade de diferentes terapias. O tamanho do corpo pequeno e as condições hemodinâmicas delicadas são fatores limitantes para intervenções cirúrgicas complexas. Grandes modelos animais de PC pode ser mais adequado para o tratamento cirúrgico extenso. Portanto, é necessário estabelecer grande modelo animal de PC de câncer gástrico para estudos experimentais para testar extensa CRS e HIPEC.
Em nosso estudo anterior [19], nós estabelecemos um modelo de coelho estável de câncer gástrico com o PC através da injeção células cancerosas VX2 na camada submucosa do estômago. O modelo é caracterizado por câncer gástrico ulcerativa típico com PC progressivo, tornando-o mais adequado para estudos de intervenção cirúrgica para avaliar CRS e HIPEC contra PC gástrico.
Este modelo de coelho de câncer gástrico com PC nos forneceu plataforma adequada para avaliar diferentes abordagens terapêuticas contra PC. Este estudo foi desenhado para avaliar a eficácia e segurança do CRS + HIPEC para o tratamento deste modelo animal de grande porte de PC gástrico, de modo a proporcionar suporte para aplicações clínicas.
Métodos
Animais
Quarenta e dois do sexo masculino Novo coelhos brancos Zelândia, peso corporal entre 1,8-2,9 kg (média 2,0 kg), foram obtidos a partir de Nível de Biossegurança animal 3 Laboratório no Centro Experimental animal da Universidade de Wuhan (estudo animal Certificado SCXK 00.002.826). Os animais foram alojados individualmente e permitido o acesso livre a comida padrão de laboratório e água, bem como 12 h de luz e escuro ciclo por dia. O protocolo do estudo animal foi aprovado pela Comissão do Centro de Bem-Estar Animal.
Construção de modelo de coelho do carcinoma VX2 gástrica com PC
carcinoma Coelho VX2 foi usado para estabelecer câncer gástrico com PC neste estudo. Os animais foram anestesiados por injecção na veia da orelha de 1% de pentobarbital de sódio (30 mg /kg). A pele abdominal foi limpo e desinfectado. As células tumorais foram injectadas na camada submucosa do estômago para a construção de modelos de coelho, de PC, tal como descrito anteriormente [19]. Resumidamente, uma incisão na linha média de 3 cm de comprimento foi realizado a partir de 2 cm abaixo da xifóide e a parte superior do abdómen foi aberto. O estômago foi exposto, 0,1 ml de células de tumor (5 × 10 10 células frasco /L) foi injectado na camada da submucosa do estômago, através da camada serosa e camada muscular, o local da injecção foi pressionado durante 1 min para manter as células tumorais injetadas no lugar, e do abdómen foi fechado com uma camada de 3-0 vicryl sutura interrompida duas vezes. Após inoculação do tumor, penicilina G na dose de 100 mil IU /d foi injectada por via intramuscular a cada animal durante 3 d.
Randomização e tratamento
Quando a construção modelo animal foi confirmada sucesso no dia 9 após a operação, estas foram coelhos randomizados para 3 grupos de acordo com um computador gerado aleatoriamente número, 14 animais em cada grupo (Figura 1). Figura 1 O protocolo do estudo. Após a construção do modelo de PC de câncer gástrico, 42 coelhos Nova Zelândia brancos foram randomizados em 3 grupos com 14 coelhos por grupo, e os efeitos da CRS e CRS + HIPEC foram investigados. D, o dia; PC, carcinomatose peritoneal; CRS, a cirurgia cytoreductive; HIPEC, quimioterapia intraperitoneal hipertérmica.
O grupo controle foi observada para curso natural da progressão da doença, sem qualquer intervenção. Compra de RSC grupo, CRS foi realizado em d 9 depois de células tumorais inoculação. Os coelhos foram tratados com 1% de pentobarbital de sódio (30 mg /kg) por via intravenosa durante a anestesia. A pele abdominal foi limpo e desinfectado. A exploração abdominal foi realizada através de uma incisão na linha média de 8 cm de comprimento começando 1 cm abaixo do xifóide. Uma vez que a parede abdominal foi aberta, avaliação detalhada da PC foi realizado em diferentes regiões, incluindo o peritoneu parietal, peritoneu visceral, o omento, estômago, fígado, baço, intestino delgado, cólon, bexiga e outros tecidos pélvicos. Depois disso, máxima CRS foi realizado incluindo um omentectomia de rotina, e remoção ideal de nódulos tumorais. tumores não ressecáveis ​​foram cauterizados. O tumor gástrico em si, no entanto, não foi removida, mas tratada por injecção de álcool absoluto. Após a conclusão da RSC a parede abdominal foi fechada em camadas usando 2 suturas 3-0 Vicryl constinuous. Compra de CRS + grupo QIPHTO, máxima CRS foi efectuada em d 9 da mesma maneira como no grupo sozinho CRS, que foi imediatamente seguido por HIPEC pouco antes do fechamento da cavidade abdominal. Abrir HIPEC foi realizada, como essa técnica aberta foi acreditado para prestação de homogeneidade térmica óptima e difusão espacial [20, 21], com 250 mL de solução salina aquecida contendo 10 mg de docetaxel (Wanle Pharmaceutical Co., Ltd. Shenzhen, China.) E 40 mg de carboplatina (Qilu Pharmaceutical Co., Ltd. Shandong, na China.) para cada animal. A cavidade abdominal foi enxaguado duas vezes com 250 ml de solução salina normal pré-aquecida a 42,0 ° C e a perfusão tubo foi colocado na cavidade pélvica pouco antes QIPHTO. O equipamento consistia de perfusão de um permutador de calor e uma bomba em miniatura do rolo, permitindo a perfusão com um fluxo dinâmico variável de 6-12 ml /min. Um cateter de influxo foi inserida no abdómen superior entre a superfície do diafragma e hepática e um cateter de saída foi colocado no pavimento pélvico. A solução de perfusão foi aquecida a 42,0 ± 0,5 ° C e infundida na cavidade peritoneal, a uma taxa de 10 ml /min através do tubo de entrada introduzido a partir da bomba de perfusão automática. A perfusão na cavidade peritoneal foi agitada manualmente para fazer a distribuição espacial iguais. A temperatura da solução de perfusão no espaço peritoneal foi mantida a 42,0 ± 0,5 ° C e monitorizada utilizando um termómetro em tempo real. O tempo total QIPHTO foi de 30 min, após o que a solução de perfusão na cavidade abdominal foi removido.
Vinte minutos antes da cirurgia, a 100 ml de solução de NaCl 0,9% com 1 g de pó de ceftriaxona, solução de cloreto de potássio 2 ml de 10% e 20 ml de solução a 50% de glicose foi administrada por via intravenosa para a reidratação, suporte de energia e controle de infecção tanto no grupo sozinho CRS eo grupo CRS + HIPEC. Esse tratamento foi continuado durante 3 d. Observação
Animal e monitoramento curso da doença
O estado geral dos animais foi diária registrada em um formulário padrão. Para estudos patológicos, a eutanásia foi realizada em coelhos por injecção de uma overdose de pentobarbital de sódio% através da veia da orelha. Post mortem exames patológicos incluídos patologia grave, tais como tamanho do tumor e distribuições; características tumorais locais de câncer gástrico, como a formação de úlceras, obstrução e perfuração; características especiais de carcinomatose peritoneal, tais como ascite sangrentas, nódulos tumorais discretos ou confluentes no peritônio, bolo omento e obstruções intestinais; metástases para órgãos importantes, tais como o fígado, glândulas supra-renais, pâncreas e pulmões.
Para os estudos de laboratório, de 5 mL de sangue foi colhido a partir da veia da orelha no dia antes da inoculao como células de tumor da linha de base, no dia da cirurgia, e em d 8 após a cirurgia. As amostras foram utilizados para a rotina testes de funções de teste de sangue periférico, fígado e rins e testes bioquímicos.
Análise Estatística
O endpoint primário foi a sobrevida global (OS) em cada grupo, definido como o tempo de construção forma intervalo de modelo animal para morte do animal devido a qualquer causa, incluindo a evolução do câncer. Os endpoints secundários foram peso corporal, bioquímica, as principais funções dos órgãos e eventos adversos graves (SAE), que foi definida como infecção ou morte severa local e /ou sistêmica devido ao procedimento.
Em nosso estudo anterior para construir este modelo animal , aprendemos que a média de sobrevivência deste modelo PC gástrico é cerca de 3 semanas [19]. Por isso, foi calculado o tamanho da amostra deste estudo com base nesta informação. Este ensaio foi concebido para detectar, pelo menos, uma diferença absoluta de 30% no OS. Com um poder estatístico de 90% para detectar essa diferença ao nível de significância de 5%, pelo menos 12 animais foram exigidos em cada grupo. Tomando em consideração de acontecimentos inesperados, durante a realização do estudo, que aumentou o tamanho da amostra para 14 animais em cada grupo. variáveis ​​categorizadas em dois grupos foram comparadas pelo teste do qui-quadrado ou teste exato de Fisher. Os dados numéricos foram registrados diretamente, e os dados de categoria foram registrados em diferentes categorias. O método de Kaplan-Meier foi utilizado para comparar a sobrevivência, com o teste de log rank. Os dados foram analisados ​​utilizando o programa Statistical Package for the Social Sciences (SPSS Inc., Chicago, Illinois, EUA), versão 13.0 com 2-sided P Art < 0,05 como estatisticamente significativos.
Resultados
características histopatológicas de PC
coelho gástrica modelo de câncer de PC foi estabelecida em todos os animais (100%, 42/42). Nove dias após a inoculação as células tumorais, muitos pequenos nódulos, duros e transparentes tumorais desenvolvidos no omento maior, e cancro ulcerativa típico cerca de 0,5 cm de diâmetro, formada no antro do estômago. Não foi observada ascite. No PC óbvia foi encontrado em outras regiões. Não houve diferenças na severidade PC entre três grupos. Este poderia ser equivalente ao estágio clínico I foi observada carcinomatose peritoneal por critérios Gilly [6].
Cancro ulcerativa típica com PC em post mortem exames patológicos de coelhos no grupo de controle. A parede do estômago foi totalmente invadida pelo tumor para criar úlcera câncer envolto por confluentes nódulos no omento maior, formando um bloco tumor grande. A parede abdominal e diafragma foram totalmente invadida pelo tumor. Muitos nódulos tumorais formados na parede do intestino, do mesentério e retroperitôneo. Sangrentos ascite pode ser mais de 100 ml. Todas as características são semelhantes às características clinicopatológicas de cancro gástrico em pacientes com PC. Mudanças de peso do corpo

O peso corporal de cada animal foi registada a cada 3 d. Não foram encontradas diferenças significativas no peso corporal inicial de 3 grupos antes do tratamento. Perioperatório peso corporal diminuiu em todos os grupos por causa do jejum durante a noite. No grupo controle, o peso corporal recuperou uma vez a ingestão de alimentos foi retomada, mas novamente diminuiu progressivamente até o final do estudo. Nos grupos de tratamento 2, pós-operatória de peso corporal diminuiu consideravelmente durante os primeiros 3 d após a cirurgia e depois diminuir suave tornou-se juntamente com o aumento da ingestão de alimentos na direcção de 5 d a seguir em 2 grupos de tratamento. Depois disso, o peso corporal diminuiu progressivamente novamente até o final do estudo no CRS só grupo, enquanto o peso do corpo pode ser mantido ou aumentado ligeiramente para os 20 d seguinte no grupo CRS + HIPEC e diminuiu lentamente até o final do estudo (Figura 2). Figura mudanças de peso 2 corpo em 3 grupos de coelhos. Em comparação com os grupos de controle e de SRC, grupo CRS + HIPEC experimentaram a perda de peso corporal mais lento, embora as diferenças entre os 3 grupos não atingiu significância estatística. Perfil de sangue mudanças
Na linha de base, no dia da cirurgia e em dia 8 após a cirurgia, os testes de glóbulos contagens, função hepática e renal periféricos e parâmetros bioquímicos foram todos (Tabela 1) .table testes de rotina comparáveis ​​1 de sangue e resultados de testes bioquímicos


Range (mediana)

Parâmetros
Controle (n = 14)
CRS (n = 14)
CRS + HIPEC (n = 14)
P
periférica do sangue testes
A
139 ~ 156 (149)
129 ~ 139 (131)
124 ~ 141 (131)
NS
HGB (G /L)
B
112 ~ 130 (128 )
102 ~ 137 (121)
104 ~ 30 (126)
NS
C
78 ~ 135 (117)
62 ~ 123 (100)
80 ~ 103 (92)
NS
A
6,55 ~ 7,30 (6,77)
6,19 ~ 6,80 (6,77)
5,98 ~ 6,48 (6,29)
NS
RBC (× 109 /L)
B
5,19 ~ 6,18 (5,76)
5,26 ~ 6,54 (5,60)
4,87 ~ 6,37 (6,14)
NS
C
4,27 ~ 6,14 (5,26 )
2,26 ~ 5,76 (5,30)
3,97 ~ 4,70 (4,34)
NS
A
4.0 ~ 10.1 (6.5)
7,4 ~ 9,9 (8,8)
4.2 ~ 8,7 (4,7)
NS
WBC (× 109 /L)
B
6,5 ~ 11,3 (8,0)
4,8 ~ 10,3 (9,1)
7.1 ~ 9.4 (9.2)
NS
C
7.7 ~ 18.2 (9.2)
3.2 ~ 8.3 (4.9)
10,0 ~ 8,3 (9,2)
NS
A
1.3 ~ 3.8 (2.7 )
2.2 ~ 5.9 (4.5)
2.9 ~ 3.8 (3.2)
NS
Neu (× 109 /L)
B
1,8 ~ 4,3 (3,8) 1,4
~ 8,4 (3,6)
2.6 ~ 3.8 (3.1)
NS
C
1.1 ~ 4.8 (3.0)
0.7 ~ 4.1 (2.0)
4.2 ~ 4.8 (4.5)
NS
A
169 ~ 385 (320)
158 ~ 410 (267)
94 ~ 415 (319)
NS
PLT (× 109 /L)
B
68 ~ 434 (231)
103 ~ 398 (232)
232 ~ 682 (360)
NS
C
302 ~ 663 (324)
12 ~ 59 (27)
36 ~ 426 (231)
NS
testes de função hepática
A
15 ~ 24 (22)
34 ~ 44 (35)
15 ~ 24 (22)
NS
AST (U /L)
B
28 ~ 91 (75)
65 ~ 72 (66)
36 ~ 8 (69)
NS
C
27 ~ 30 (29)
14 ~ 22 (20)
15 ~ 19 (17)
NS
A
28 ~ 43 (36 )
65 ~ 72 (66)
36 ~ 81 (69)
NS
ALT (U /L)
B
12 ~ 41 (26)
16 ~ 38 (26)
19 ~ 89 (29)
NS
C
42 ~ 131 (50)
54 ~ 90 (85)
71 ~ 95 (83)
NS
A
60,7 ~ 77,0 (66,1)
62,8 ~ 66,5 (66,0)
58,4 ~ 66,3 (63,8)
NS
TP (g /L)
B
58 0,0 ~ 69,9 (62,3)
56,5 ~ 69,6 (62,8)
53,2 ~ 71,5 (59,9)
NS
C
61,1 ~ 65,6 (62,8)
46,3 ~ 63,7 (55,8)
50,2 ~ 57,8 (54,0)
NS
A
37,3 ~ 41,2 (39,6)
36,6 ~ 41,8 (40,6)
32,0 ~ 41,2 (39,6)
NS
ALB (g /L)
B
35,0 ~ 41,4 (37,1)
31,3 ~ 39,8 (35,8)
32,5 ~ 38,4 (34,9)
NS
C
34,6 ~ 38,9 (36,3)
26,4 ~ 37,4 (30,9)
30,7 ~ 32,8 (31,8)
NS
A
23,4 ~ 35,8 (26,6)
24,8 ~ 26,3 (25,7)
26,4 ~ 32,6 (26,6)
NS
GLB (g /L)
B
22,2 ~ 28,5 (25,5)
24,4 ~ 32,2 (27,3)
19,7 ~ 33,1 (25,2)
NS
C
23,9 ~ 29,3 (26,5)
19,9 ~ 26,3 (24,9)
19,5 ~ 25,0 (22,3)
NS
A
126 ~ 190 (159)
127 ~ 248 (147)
159 ~ 186 (172)
NS
ALP (U /L)
B
78 ~ 145 (98)
45 ~ 177 (86)
51 ~ 133 (89)
NS
C
73 ~ 118 (80)
58 ~ 114 (79)
52 ~ 114 (83)
NS
testes de função renal
A
6,24 ~ 15,08 (6,95)
6,47 ~ 7,68 (7,47)
7,28 ~ 8,44 (8,16)
NS
BUN (mmol /L)
B
8,83 ~ 14,77 (12,24)
0,59 ~ 16,64 (10,18)
6,82 ~ 14,94 (7,92)
NS
C
5,45 ~ 6,45 (6,27)
5,33 ~ 7,07 (6,61)
4,83 ~ 6,45 (5,64)
NS
A
81,0 ~ 121,2 (86,5)
80,6 ~ 99,2 ( 85,4)
81,0 ~ 95,3 (83,7)
NS
Cr (mmol /L)
B
75,0 ~ 99,0 (94,9)
70,4 ~ 107,4 (88,8)
85,8 ~ 97,8 (91,6)
NS
C
67,3 ~ 85,6 (75,7)
60,3 ~ 69,9 (62,2)
65,8 ~ 66,9 (66,4)
NS
eletrólitos
A
4,10 ~ 18,97 (4,66)
3,52 ~ 4,72 (4,21)
3,99 ~ 10,97 (4,30)
NS
K + (mmol /L)
B
7,34 ~ 27,13 (10,44)
4,44 ~ 11,09 (6,29)
4,34 ~ 12,29 (4,74)
NS
C
5,14 ~ 5,91 (5,18)
4,98 ~ 6,08 (5,14)
5,31 ~ 6,32 (5,82)
NS
A
139,1 ~ 148,7 (145,3)
142,8 ~ 148,8 (144,2)
142,2 ~ 145,3 (144,7)
NS
na + (mmol /L)
B
124,5 ~ 146,4 (140,4)
137,3 ~ 148,5 (141.65)
133,6 ~ 146,4 (141,1)
NS
C
133,2 ~ 138,7 (133,5)
132,9 ~ 138,9 (135,3)
133,8 ~ 134,3 (134,1)
NS
A
99,8 ~ 121,2 (102,6)
101,9 ~ 107,2 (103,5)
100,5 ~ 110,2 (102,1)
NS
Cl- (mmol /L)
B
94,6 ~ 103,9 (96,6)
96,6 ~ 107,7 (101,1)
97,0 ~ 106,6 ( 100,8)
NS
C
100,0 ~ 104,1 (103,7)
102,2 ~ 106,6 (104,7)
103,8 ~ 104,2 (104,0)
NS
A
3,11 ~ 3.77 (3.39)
3,05 ~ 3,18 (3,12)
3,18 ~ 3,69 (3,63)
NS
Ca ++ (mmol /L)
B
2,80 ~ 4,04 (3,70)
3,41 ~ 3,96 (3,71)
3,32 ~ 3,96 (3,66)
NS
C
3,71 ~ 4,10 (3,80)
3,19 ~ 3,56 (3,45)
3,48 ~ 3,52 (3,50 )
NS
RBC: glóbulos vermelhos; WBC: glóbulos brancos; HGB: hemoglobina; Neu: contagem de neutrófilos; PLT: plaquetas contagem; ALT: alanina transaminase; AST: aspartato aminotransferase; A: No início do estudo; B: No dia da cirurgia; C: Por d 8 após a cirurgia; TP: proteínas totais; ALB: albumina; GLB: globulina; BUN: uréia; Cr:. Creatinina
Survival
Os animais do grupo controle não recebeu qualquer tratamento cirúrgico ativa, e apenas observada para a história natural da progressão da doença. Para os animais, tanto CRS e + grupos HIPEC CRS, citorredução completa foi realizada por ressecção cirúrgica ou cauterização para a carcinomatose peritoneal, não deixando nódulos tumorais observáveis ​​na cavidade peritoneal. O tumor gástrico em si, no entanto, não foi removida, mas tratada por injecção de álcool absoluto. O OS mediana foi de 24,0 d (IC 95% 21,8-26,2 d) no grupo controle, 25,0 d (IC 95% 21,3-28,7 d) no grupo CRS, e 40,0 d (IC 95% 34,6-45,4 d) no CRS + grupo HIPEC (P
= 0,00, teste logarítmico). Em comparação com o grupo CRS única ou de controlo, CRS + QIPHTO poderia estender SO por, pelo menos, 15 d (60%) (Figura 3). Figura 3 curvas de Kaplan-Meier de sobrevida para o controle, RSC e CRS + grupos HIPEC. Comparado com o CRS grupo só ou controle, CRS + HIPEC poderia estender OS, pelo menos, 15 d (60%). (P
= 0,00, teste logarítmico)
exames patológicos postmortem
A eutanásia foi realizada nos coelhos moribundos por injecção overdose de 1% pentobarbital de sódio através da veia da orelha. Informações detalhadas sobre exames patológicos postmortem foi listado na Tabela 2.Table 2 Resultados de post mortem estudo anatomopatológico em 3 grupos *

Controle ( n = 14)
CRS (n = 12) *
CRS + HIPEC (n = 13) §
P
ulcerativa gástrica cancer
100%
100%
100%
NA
obstrução Pyloric
100%
100%
100%
NA
perfuração gástrica
28,6%
8,3%
8,3%
P
= 0,246
bolo Greater omento
100%
removido
removido
NA
fígado metástases
100%
96,7%
38,5%
P = 0,000
metástases pulmonares
0,0%
8,3%
53,8%
P = 0,000
Cancerous diafragma
100%
100%
53,8%
P = 0,000
superior câncer parede abdominal
100%
100%
84,6%
P
= 0,128
intestino delgado & mesentério semeadura
100%
100%
61,5%
P = 0,002
metástases glândula supra-renal
100%
100%
23,5%
P = 0,000
cápsula renal invasão
100%
75,0%
30,8%
P = 0,000
metástases retroperitônio
100%
100%
76,9%
P = 0,038
semeadura pélvica
100%
100%
69,2%
P = 0,009
retenção urinária
57,1%
75,0%
61,5%
P
= 0,641
ascite sangrentos
100%
100%
38,5%
P = 0,000
* Dois animais foram excluídos do grupo CRS, incluindo uma morte por a overdose de anestesia em d 9 e outra morte devido a hemorragia pós-operatória em d 10.
§ Um animal do CRS grupo + HIPEC foi excluído devido à morte por overdose de anestesia em d 9.
nA:. não aplicável
severos eventos adversos
SAE ocorreu em 0 animal do grupo controle, 2 animais em CRS só grupo, incluindo uma morte por overdose de anestesia (OS = 9 d) e outra morte devido a hemorragia pós-operatória (OS = 10 d) e 3 animais do grupo CRS + HIPEC incluindo uma morte por overdose de anestesia (OS = 9 d), e 2 mortes por diarreia 23 e 27 d após a operação. Uma comparação directa em patologia grave por d 27 de um coelho no grupo CRS (Figura 4A) e um coelho no grupo CRS + HIPEC (Figura 4B) mostrou diferenças significativas na gravidade PC. Figura 4 No dia 27, post mortem exames patológicos de um coelho no grupo CRS (2A) e um coelho no grupo CRS + HIPEC (2B). No grupo CRS, generalizada PC recorrência foi evidente, mesmo após a cirurgia sytoreductive. No grupo CRS + HIPEC, quimioperfusão hyperthermic significativamente retardado PC recorrência.
Discussão
O estudo forneceu novas evidências para apoiar CRS + HIPEC para tratar PC gástrico. Comparado com o grupo controle e RSC do grupo, o grupo CRS + HIPEC poderia ter um ganho de sobrevivência adicional de, pelo menos, 15 d (60%). Em adição a tal benefício significativo sobrevivência, também têm sido observadas outras melhorias, incluindo peso corporal, gravidades PC, ascite, as funções do fígado e dos rins, e electrólitos do sangue.
Este estudo sugere também que, no PC gástrica estabelecida, simplesmente realizando CRS pode não trazem benefício de sobrevivência. Os animais do grupo CRS teve uma sobrevida mediana de 25 d, o que não é estatisticamente diferente de 24 d no grupo de controle.
PC tem sido cada vez mais reconhecida como um importante problema clínico e esforços crescentes têm se dedicado a investigar o mecanismo e estratégias de enfrentamento contra esta doença. Os ensaios clínicos em gástrica selecionado ou pacientes de PC colorretais forneceram evidências em favor da CRS + HIPEC para estes pacientes, ea única fase III prospectivo randomizado julgamento em pacientes PC colorretais relataram uma vantagem de sobrevivência médio de ganho de 70% na sobrevida global (22,4 meses em o grupo CRS + HIPEC VS
12,6 meses com o tratamento padrão paliativos sozinho) [22]. Os resultados encorajadores por [8] Yonemura e Glehen [9] em PC forneceram evidências mais convincentes gástrica para apoiar esta modalidade de tratamento combinado. No entanto, controvérsias sobre a utilidade e valor de tal abordagem permanecem [23, 24]. Parece improvável que esse problema será resolvido em breve em ensaios clínicos randomizados. Portanto, é necessário estudar a modalidade de tratamento, sob condições experimentais, em que a maioria dos factores de confusão pode ser bem controlada para avaliação mais objectiva de QIPHTO.
Nos últimos anos, o aumento do número de modelos animais de PC foram intensamente estudados , incluindo modelo de ratinho nu de PC câncer gástrico construída através da implantação de células cancerosas gástricas humanas [25-28]; cancro do cólon do rato modelo PC construída através da injecção de células de cancro do cólon para a cavidade abdominal de ratinhos Balb /C [29]; modelos de carcinoma de cólon de rato PC construídos através de injecção de células de carcinoma do cólon CC531 para a cavidade abdominal de ratos Wag /Rij [15, 30-33], ou injecção de células de adenocarcinoma do cólon singeneicos (DHD /K12 /TRb) na cavidade abdominal de atímicos BD IX /ratos HansHsd [14, 18, 34, 35]; murino modelo de xenoenxerto de PC de adenocarcinoma mucinoso apendicular construído através da implantação de neoplasias apendicular humanos na cavidade peritoneal de ratinhos nus homozigotas [36]; rato modelo de câncer de ovário PC construído através de injeção de células de câncer de ovário seroso ou epiteliais humanas na cavidade abdominal de ratos [37-39] ou injetar células epiteliais da superfície do ovário murino (células ID8) sob bursa ovário de ratos C57BL6 [39].
em comparação com os modelos de pequenos animais de PC, o nosso modelo de coelho de PC gástrico é o primeiro modelo animal PC grande, mais adequado para estudos de intervenção cirúrgicas complexas tais como CRS + HIPEC. Além disso, este modelo reproduz todo o processo patológico do câncer gástrico primário para o desenvolvimento de PC, assemelhando-se as características completas clínico-patológicos da PC gástrica humana.
Para nosso conhecimento, houve 3 relatos na literatura sobre a eficácia da CRS + HIPEC em modelos animais experimentais de PC. Klaver et al [34] usou o cólon modelo de PC carcinoma de ratos para testar se a adição de HIPEC a CRS é essencial para o benefício de sobrevivência. Os ratos foram divididos em 3 grupos de tratamento de 20 ratos cada um, CRS sozinho, CRS + HIPEC (mitomicina 15 mg /m 2 a 42,0 ° C por 90 min) e CRS + HIPEC (mitomicina C 35 mg /m 2 a 42,0 ° C durante 90 min). O CRS + HIPEC alcançado um ganho significativo de sobrevivência de mais de 120% (a média de sobrevivência de 43, 75 e 97 d, P Art < 0,01). Pelz et al [15] utilizado rato cólon modelo de carcinoma PC semelhante para investigar HIPEC. Após 10 d de células tumorais a inoculação, os ratos foram distribuídos aleatoriamente em 3 grupos de 6 animais cada, de controlo, QIPHTO (mitomicina C 15 mg /m 2 a 40,5-41,5 ° C durante 90 min), e quimioterapia intraperitoneal normathermic ( mitomicina C 10 mg /m 2 ip). Embora o estudo não relataram a sobrevida global, o grupo HIPEC tinha significativamente menor peso do tumor, menos nódulos tumorais, diminuição do índice de câncer e melhor taxa de resposta clínica completa, em comparação com o controle ou tratamento mitomicina ip normathermic sozinho. Em um estudo semelhante em ratos cólon modelo de câncer de PC, Raue et al [36] descobriu que apenas CRS + HIPEC com MMC 15 mg /m 2 a 41,2-42,3 ° C por 60 min poderia resultar em redução significativa do tumor pesar e índice de PC. Mais uma vez este estudo não informar sobre a sobrevida global.
Conclusões
Em resumo, este estudo sobre o primeiro modelo animal de grande porte de PC gástrica provou que CRS + HIPEC poderia realmente trazer benefício de sobrevivência com segurança aceitável, fornecendo provas para apoiar esta estratégia combinada para o tratamento de pacientes selecionados de câncer gástrico com PC.
Notas
Li Tang, deitar-Jun Mei contribuíram igualmente para este trabalho.
Declarações
Agradecimentos
suportados pelas subvenções de apoio

• revisão retrospectiva utilizando sequenciamento profundo alvo revela diferenças mutacionais entre junção gastro-esofágico e gástrico carcinomas
• Expressões e significados clínicos de c-MET, p-MET e E2F-1 em expressões carcinoma