cirugía citorreductora y quimioterapia intraperitoneal con hipertermia mejora la supervivencia del cáncer gástrico con carcinomatosis peritoneal: pruebas de una study

experimental de cirugía citorreductora y quimioterapia intraperitoneal con hipertermia mejora la supervivencia del cáncer gástrico con carcinomatosis peritoneal: evidencia de un estudio experimental
Resumen Antecedentes

cirugía citorreductora (CRS), además de hipertermia quimioterapia intraperitoneal (HIPEC) ha sido considerado como una prometedora modalidad de tratamiento para el cáncer gástrico con carcinomatosis peritoneal (PC). Sin embargo, también ha habido muchos debates sobre la eficacia y seguridad de este nuevo enfoque. Los resultados de los estudios experimentales modelo animal podría ayudar a proporcionar información fiable. Este estudio fue investigar la seguridad y eficacia de CRS + HIPEC para tratar el cáncer gástrico con PC en un modelo de conejo.
Se inyectaron células tumorales Métodos
VX2 en la submucosa gástrica de 42 conejos de Nueva Zelanda machos usando un implante laparotómico técnica, para la construcción de modelo de conejo de cáncer gástrico con PC. Los conejos fueron distribuidos aleatoriamente en el grupo de control (n = 14), CRS solo grupo (n = 14) y CRS grupo + HIPEC (n = 14). Se observó que el grupo de control para el curso natural de la progresión de la enfermedad. Los tratamientos se iniciaron el día 9 después de las células tumorales de la inoculación, incluyendo la eliminación máxima de nódulos tumorales en CRS grupo solo, y CRS máximas más chemoperfusion intraperitoneal heperthermic con docetaxel (10 mg /conejo) y carboplatino (40 mg /conejo) en 42,0 ± 0,5 ° C durante 30 min en el grupo CRS + HIPEC. El criterio principal de valoración fue la supervivencia global (SG). Los criterios de valoración secundarios fueron el peso corporal, la bioquímica, las principales funciones de los órganos y los eventos adversos graves (SAE).
Resultados
modelo de conejo de cáncer gástrico con PC se estableció con éxito en todos los animales. Las características clínico-patológicas del modelo fueron similares a PC gástrico humano. La mediana de SG fue 24,0 d (95% intervalo de confianza del 21,8 - 26,2 d) en el grupo control, 25,0 d (IC del 95%: 21,3 a 28,7 d) en el grupo de CRS y 40.0 d (IC del 95%: 34,6 a 45,4 d) en CRS + grupo HIPEC (P = 0.00
, prueba de log rank). En comparación con CRS grupo solamente o control, CRS + HIPEC podría extender el OS por al menos 15 d (60%). Al inicio del estudio, en el día de la cirugía y en el día 8 después de la cirugía, las células de la sangre periférica recuentos, las funciones del hígado y de los riñones, y los parámetros bioquímicos eran comparables. SAE se produjo en 0 animales en el grupo de control, 2 animales en CRS solo grupo, incluida la muerte 1 animal, debido a sobredosis de anestesia y otra muerte por hemorragia postoperatoria y 3 animales del grupo CRS + HIPEC incluyendo la muerte 1 animal, debido a una sobredosis de anestesia, y 2 muertes de los animales debido a la diarrea 23 y 27 días después de la operación.
Conclusiones
En este modelo de conejo de cáncer gástrico con PC, CRS por sí sola no podría traer beneficios, mientras que CRS + HIPEC con docetaxel y carboplatino podrían prolongar significativamente la supervivencia con aceptables seguridad.
Antecedentes
la progresión loco-regional de cáncer gástrico por lo general resulta en carcinomatosis peritoneal (PC), que se caracteriza por la presencia de nódulos tumorales de varios tamaños, el número y la distribución en la superficie peritoneal, así como ascitis maligna , con muy mal pronóstico [1-5]. Los pacientes con la cara PC gástrica muy mal pronóstico, con una supervivencia media de aproximadamente 6 meses [6].
Los tratamientos actuales para tales PC son la quimioterapia sistémica, el mejor cuidado de apoyo y terapia paliativa. Para hacer frente a este problema, una nueva modalidad de tratamiento denomina cirugía citorreductora (CRS), además de hipertermia quimioterapia intraperitoneal (HIPEC) se ha desarrollado durante los últimos 3 décadas, tomando ventajas de la cirugía para reducir la carga tumoral visible, y la quimioterapia hipertérmica regional para erradicar las micrometástasis [7-10]. Aunque muchos estudios clínicos se han realizado para probar y confirmar la eficacia de este enfoque de tratamiento combinado, hay una falta de pruebas de alta calidad a partir de estudios de fase III aleatorizados. Con el fin de evaluar de manera más objetiva tal tratamiento, es necesario estudiar esta modalidad de tratamiento en condiciones experimentales, en los que la mayor parte de los factores de confusión se puede controlar bien. En este sentido, los modelos animales adecuados de PC son plataformas indispensables. Se han establecido modelos animales pequeños de PC, incluyendo los modelos de ratón y modelos de rata [11-18]. En la mayoría de estos modelos animales, las células cancerosas se inyectan directamente en el peritoneo, lo que resultará en generalizada PC a su debido tiempo. Tales modelos se han utilizado para probar diversas modalidades de tratamiento, incluyendo CRS y HIPEC, ya sea solo o en combinación, produciendo una valiosa información sobre la validez de diferentes terapias. El pequeño tamaño del cuerpo y las condiciones hemodinámicas delicados son factores para intervenciones quirúrgicas complejas limitantes. modelos animales grandes de PC podrían ser más adecuados para un amplio tratamiento quirúrgico. Por lo tanto, es necesario establecer grande modelo animal de la PC de cáncer gástrico para estudios experimentales para poner a prueba extensa CRS y HIPEC.
En nuestro estudio anterior [19], hemos establecido un modelo de conejo estable de cáncer gástrico con el PC mediante la inyección células de cáncer de VX2 en la capa submucosa del estómago. El modelo se caracteriza por cáncer gástrico ulcerosa típica con PC progresiva, por lo que es más adecuado para los estudios de intervención quirúrgica para evaluar CRS y HIPEC contra el PC gástrico.
Este modelo de conejo de cáncer gástrico con PC nos ha provisto de plataforma adecuada para evaluar diferentes enfoques terapéuticos contra el PC. Este estudio fue diseñado para evaluar la eficacia y seguridad de CRS + HIPEC para el tratamiento de este gran modelo animal de PC gástrica, con el fin de proporcionar apoyo a la aplicación clínica.
Métodos Animales

Cuarenta y dos masculinos Nueva conejos blancos Zelanda, el peso corporal entre 1,8-2,9 kg (mediana de 2,0 kg), se obtuvieron a partir de animales de laboratorio de Bioseguridad Nivel 3 en el Centro Experimental de Animales de la Universidad de Wuhan (Animal Certificado de Estudio SCXK 00002826). Los animales se alojaron individualmente y se les permite el acceso libre a la comida estándar de laboratorio y agua, así como 12 horas de luz y oscuridad ciclo por día. El protocolo de estudio en animales fue aprobado por el Comité de Bienestar Animal del Centro.
Construcción de modelo de conejo de carcinoma VX2 gástrica con PC
se utilizó el carcinoma VX2 conejo para establecer cáncer gástrico con PC en este estudio. Los animales fueron anestesiados mediante inyección vena de la oreja de 1% de sodio pentobarbital (30 mg /kg). La piel abdominal sido limpiado y desinfectado. Se inyectaron células tumorales en la capa submucosa del estómago para construir modelos de conejo de PC como se describe anteriormente [19]. En pocas palabras, una incisión en la línea media de 3 cm de largo se hizo a partir de 2 cm por debajo del xifoides y el abdomen superior estaba abierta. El estómago se expuso, 0,1 ml de células tumorales (5 × 10 10 células de viales /l) se inyectaron en la capa submucosa del estómago, a través de la capa serosa y la capa de músculo, el sitio de inyección se ha pulsado durante 1 min para mantener las células tumorales inyectadas en su lugar, y el abdomen se cerró con una doble capa de 3-0 vicryl sutura interrumpida. Después de la inoculación del tumor, penicilina G a la dosis de 100.000 UI /d se inyectó intramuscularmente a cada animal para 3 d.
La aleatorización y el tratamiento
Cuando la construcción modelo animal se ha confirmado el éxito en día 9 después de la operación, estos conejos eran al azar en 3 grupos de acuerdo a un ordenador generado aleatoriamente número, 14 animales en cada grupo (Figura 1). Figura 1 El protocolo de estudio. Después de la construcción del modelo de PC de cáncer gástrico, 42 conejos blancos de Nueva Zelanda fueron distribuidos aleatoriamente en 3 grupos con 14 conejos por grupo, y los efectos de CRS y CRS + HIPEC fueron investigados. D, el día; PC, carcinomatosis peritoneal; CRS, la cirugía citorreductora; HIPEC, quimioterapia intraperitoneal hipertérmica.
Se observó que el grupo de control para el curso natural de la progresión de la enfermedad sin ninguna intervención. Opiniones de CRS solo grupo, CRS se realizó en el día 9 después de la inoculación las células tumorales. Los conejos se les dio 1% pentobarbital sódico (30 mg /kg) por vía intravenosa para la anestesia. La piel abdominal sido limpiado y desinfectado. La exploración abdominal se realiza a través de una incisión en la línea media de 8 cm de longitud a partir de 1 cm por debajo del xifoides. Una vez que la pared abdominal estaba abierta, evaluación detallada de la PC se llevó a cabo en diferentes regiones, incluyendo el peritoneo parietal, el peritoneo visceral, el epiplón, estómago, hígado, bazo, intestino delgado, colon, vejiga y otros tejidos pélvicos. A partir de entonces, máxima CRS se realizó incluyendo una omentectomía rutina, y la eliminación óptima de los nódulos tumorales. Se cauterizan Los tumores no resecables. El propio tumor gástrico, sin embargo, no se ha eliminado pero tratada por inyección de alcohol absoluto. Después de la terminación de CRS la pared abdominal se cerró en 2 capas utilizando suturas de Vicryl 3-0 constinuous.
Para CRS grupo + HIPEC, máxima CRS se realizó en d 9 de la misma manera como en el grupo de sólo CRS, que fue inmediatamente seguida de HIPEC justo antes del cierre de la cavidad abdominal. Abrir HIPEC se llevó a cabo, ya que esta técnica abierta se cree que proporciona una óptima homogeneidad térmica y difusión espacial [20, 21], con 250 ml de solución salina caliente que contiene 10 mg de docetaxel (Wanle Pharmaceutical Co., Ltd. Shenzhen, China.) Y 40 mg de carboplatino (Qilu Pharmaceutical Co., Ltd. Shandong, china.) para cada animal. La cavidad abdominal se enjuagó dos veces con 250 ml de solución salina normal precalentado a 42,0 ° C y la perfusión tubo se colocó en la cavidad pélvica justo antes de HIPEC. El equipo de perfusión consistió en un intercambiador de calor en miniatura y una bomba de rodillos, lo que permite la perfusión con un flujo dinámico variable del 6-12 ml /min. Un catéter de entrada se inserta en la parte superior del abdomen entre la superficie hepática y diafragmática y un catéter de salida se colocó en el suelo de la pelvis. La solución de perfusión se calentó a 42,0 ± 0,5 ° C y se infunde en la cavidad peritoneal a una velocidad de 10 ml /min a través del tubo de entrada introducida desde la bomba de perfusión automática. La perfusión en la cavidad peritoneal se agitó manualmente para hacer la distribución espacial iguales. La temperatura de la solución de perfusión en el espacio peritoneal se mantuvo a 42,0 ± 0,5 ° C y se controló con un termómetro en tiempo real. El tiempo total HIPEC fue 30 min, después de lo cual se eliminó la solución de perfusión en la cavidad abdominal.
Twenty min antes de la cirugía, a 100 ml de solución de NaCl al 0,9% con 1 g de polvo de ceftriaxona, 2 ml de 10% de solución de cloruro de potasio y 20 ml de 50% de solución de glucosa se infundió por vía intravenosa para la rehidratación, el apoyo de energía y control de la infección, tanto en el grupo que sólo CRS y el grupo CRS + HIPEC. Dicho tratamiento se continuó durante 3 d.
La observación de animales y monitoreo curso de la enfermedad Francia El estado general de los animales se registró diariamente en una forma estándar. Para los estudios patológicos, la eutanasia se realizó en los conejos por inyección sobredosis de 1% de sodio pentobarbital a través de la vena de la oreja. Post mortem exámenes patológicos incluyen patología macroscópica, como el tamaño del tumor y distribuciones; características tumorales locales de cáncer gástrico, tales como la formación de úlceras, obstrucción y perforación; características especiales de la carcinomatosis peritoneal como ascitis hemorrágica, nódulos tumorales discretos o confluentes en el peritoneo, epiplón torta y obstrucciones intestinales; metástasis en órganos importantes como el hígado, las glándulas suprarrenales, el páncreas y los pulmones. Opiniones de los estudios de laboratorio, 5 ml de sangre fue cosechada de vena de la oreja en el día antes de la inoculación células tumorales como línea de base, en el día de la cirugía, y en el día 8 después de la cirugía. Las muestras se utilizaron para las pruebas de función del análisis de sangre periférica, hígado y riñón de rutina y pruebas bioquímicas.
Análisis estadístico comentario El criterio principal de valoración fue la supervivencia global (OS) en cada grupo, que se define como el intervalo de tiempo de construcción forma modelo animal para la muerte de los animales debido a cualquier causa, incluyendo el progreso del cáncer. Los criterios de valoración secundarios fueron el peso corporal, la bioquímica, las principales funciones de los órganos y los eventos adversos graves (SAE), que se definió como la infección o la muerte violento a nivel local y /o sistémica debido al procedimiento.
En nuestro estudio previo para la construcción de este modelo animal , hemos aprendido que la mediana de supervivencia de este modelo de PC gástrico es aproximadamente 3 semanas [19]. Por lo tanto, se calculó el tamaño de la muestra de este estudio basado en esta información. Este ensayo fue diseñado para detectar al menos una diferencia absoluta del 30% en la SG. Con una potencia estadística del 90% para detectar tales diferencias a nivel de significación del 5%, se requieren al menos 12 animales en cada grupo. Teniendo en consideración de acontecimientos inesperados durante la realización del estudio, hemos ampliado el tamaño de la muestra de 14 animales en cada grupo. las variables categorizadas en los dos grupos se compararon mediante la prueba de chi cuadrado o la prueba exacta de Fisher. Los datos numéricos se registran directamente, y los datos de categoría se registraron en diferentes categorías. El método de Kaplan-Meier se utilizó para comparar la supervivencia, con la prueba de log-rank. Los datos fueron analizados utilizando el paquete estadístico para Ciencias Sociales (SPSS Inc., Chicago, Illinois, EE.UU.), versión 13.0 con 2 caras P Hotel < 0,05 como estadísticamente significativo.
: Resultados de la características histopatológicas de PC
conejo modelo de cáncer gástrico PC se estableció en todos los animales (100%, 42/42). Nueve días después de la inoculación las células tumorales, muchos nódulos pequeños y duros y transparentes tumorales desarrolladas en el epiplón mayor, y el cáncer ulcerosa típica aproximadamente 0,5 cm de diámetro formadas en el antro del estómago. No se observó ascitis. Sin PC obvia fue encontrado en otras regiones. No hubo diferencias en la gravedad PC entre tres grupos. Esto podría ser equivalente al estadio clínico I se observó carcinomatosis peritoneal por criterios Gilly [6].
Cáncer ulcerosa típico con el PC en las autopsias patológicos de conejos en el grupo control. La pared del estómago estaba totalmente invadida por el tumor para crear úlcera cáncer encerrado por confluentes nódulos en el epiplón mayor, formando un bloque del tumor grande. La pared abdominal y el diafragma fueron totalmente invadidos por el tumor. Muchos nódulos tumorales formadas en la pared intestinal, el mesenterio y retroperitoneo. ascitis hemorrágica podrían ser más de 100 ml. Todas las características son similares a las características clínico-patológicas de cáncer gástrico en pacientes con PC. Cambios en el peso del cuerpo
comentario El peso corporal de cada animal se registró cada 3 d. No se encontraron diferencias significativas en el peso corporal inicial de 3 grupos antes del tratamiento. peso corporal perioperatorio disminuyó en todos los grupos a causa del ayuno durante la noche. En el grupo de control, el peso corporal se recuperó una vez que se reanudó la ingesta de alimentos, pero de nuevo se redujo progresivamente hasta el final del estudio. En los 2 grupos de tratamiento, el peso corporal postoperatorio disminuyó considerablemente durante la primera 3 d después de la cirugía y luego se convirtió en disminución suave junto con el aumento de la ingesta de alimentos en los siguientes 5 d en 2 grupos de tratamiento. A partir de entonces, el peso corporal disminuyó progresivamente de nuevo hasta el punto final del estudio en CRS solo grupo, mientras que el peso del cuerpo se podría mantener o levemente aumentada por los siguientes 20 d en el grupo de CRS + HIPEC y disminuyó lentamente hasta el punto final del estudio (Figura 2). Figura 2 cambios de peso corporal en 3 grupos de conejos. En comparación con los grupos control y CRS, CRS + HIPEC grupo experimentaron una pérdida de peso corporal más lento, aunque las diferencias entre los 3 grupos no alcanzaron significación estadística.
Cambios de perfil Sangre
Al inicio del estudio, en el día de la cirugía y en el día 8 después de la cirugía, las pruebas de función renal recuentos de células sanguíneas, el hígado y los periféricos, y los parámetros bioquímicos eran todas (Tabla 1) .table pruebas rutinarias de sangre 1 comparables y resultados de pruebas bioquímicas


Rango (mediana) guía empresas Parámetros

de control (n = 14)
CRS (n = 14) guía empresas CRS + HIPEC (n = 14)
P
sangre periférica pruebas
A
139 ~ 156 (149)
129 ~ 139 (131)
124 ~ 141 (131) NS

HGB (G /L) sobre B
112 ~ 130 (128 )
102 ~ 137 (121) 104
~ 30 (126)
NS
C
78 ~ 135 (117)
62 ~ 123 (100)
80 ~ 103 (92) NS

Un
6,55 ~ 7,30 (6,77)
6,19 ~ 6,80 (6,77)
5,98 ~ 6,48 (6,29) NS

RBC (× 109 /L) sobre B
5,19 ~ 6,18 (5,76)
5,26 ~ 6,54 (5,60)
4,87 ~ 6,37 (6,14) NS

C
4,27 ~ 6,14 (5,26 )
2,26 ~ 5,76 (5,30)
3,97 ~ 4,70 (4,34) NS

Un
4.0 ~ 10.1 (6.5)
7,4 ~ 9,9 (8,8) 4,2
~ 8,7 (4,7) NS

CMB (× 109 /L) sobre B
6,5 ~ 11,3 (8,0)
4,8 ~ 10,3 (9,1)
7.1 ~ 9.4 (9.2)
NS
C
7,7 ~ 18,2 (9,2)
3.2 ~ 8.3 (4.9)
10,0 ~ 8.3 (9.2)
NS
Un
1.3 ~ 3.8 (2.7 ): perfil del 2.2 ~ 5.9 (4.5)
2.9 ~ 3.8 (3.2)
NS
Neu (× 109 /L) sobre B
1,8 ~ 4,3 (3,8) 1,4
~ 8.4 (3.6)
2.6 ~ 3.8 (3.1)
NS
C
1.1 ~ 4.8 (3.0)
0,7 ~ 4,1 (2,0)
4.2 ~ 4.8 (4.5)
NS
Un
169 ~ 385 (320)
158 ~ 410 (267): perfil 94 ~ 415 (319) NS

PLT (× 109 /L)
B Opiniones 68 ~ 434 (231)
103 ~ 398 (232)
232 ~ 682 (360) NS

C
302 ~ 663 (324) página 12 ~ 59 (27)
36 ~ 426 (231) NS

pruebas de función hepática
Un
15 ~ 24 (22): perfil 34 ~ 44 (35) 15
~ 24 (22) NS

AST (U /L) sobre B
28 ~ 91 (75)
65 ~ 72 (66)
36 ~ 8 (69)
NS
C
27 ~ 30 (29) página 14 ~ 22 (20)
15 ~ 19 (17) NS

Un
28 ~ 43 (36 )
65 ~ 72 (66)
36 ~ 81 (69) NS

ALT (U /L) sobre B página 12 ~ 41 (26)
16 ~ 38 (26) página 19 ~ 89 (29) NS

C
42 ~ 131 (50)
54 ~ 90 (85)
71 ~ 95 (83)
NS
Un
60,7 ~ 77,0 (66,1)
62,8 ~ 66,5 (66,0)
58,4 ~ 66,3 (63,8)
NS
TP (g /L) sobre B
58 0,0 ~ 69,9 (62,3)
56,5 ~ 69,6 (62,8)
53,2 ~ 71,5 (59,9)
NS
C
61,1 ~ 65,6 (62,8) 46,3
~ 63,7 (55,8)
50,2 ~ 57,8 (54,0)
NS
Un
37,3 ~ 41,2 (39,6)
36,6 ~ 41,8 (40,6)
32,0 ~ 41,2 (39,6)
NS
ALB (g /L) sobre B
35,0 ~ 41,4 (37,1)
31,3 ~ 39,8 (35,8)
32,5 ~ 38,4 (34,9)
NS
C
34,6 ~ 38,9 (36,3)
26,4 ~ 37,4 (30,9)
30,7 ~ 32,8 (31,8)
NS
Un
23,4 ~ 35,8 (26,6) 24,8
~ 26,3 (25,7)
26,4 ~ 32,6 (26,6)
NS
GLB (g /L) sobre B
22,2 ~ 28,5 (25,5)
24,4 ~ 32,2 (27,3)
19,7 ~ 33,1 (25,2)
NS
C
23,9 ~ 29,3 (26,5)
19,9 ~ 26,3 (24,9)
19,5 ~ 25,0 (22,3)
NS Un

126 ~ 190 (159)
127 ~ 248 (147)
159 ~ 186 (172) NS

ALP (U /L) sobre B
78 ~ 145 (98)
45 ~ 177 (86)
51 ~ 133 (89) NS

C
73 ~ 118 (80): perfil 58 ~ 114 (79)
52 ~ 114 (83) NS

pruebas de función renal
Un
6.24 ~ 15.08 (6.95)
6,47 ~ 7,68 (7,47)
7,28 ~ 8,44 (8,16)
NS
BUN (mmol /L) sobre B
8.83 ~ 14.77 (12.24)
0.59 ~ 16.64 (10.18)
6,82 ~ 14,94 (7,92) NS

C
5,45 ~ 6,45 (6,27)
5,33 ~ 7,07 (6,61)
4,83 ~ 6,45 (5,64) NS

Un
81,0 ~ 121,2 (86,5)
80.6 ~ 99.2 ( 85,4)
81,0 ~ 95,3 (83,7)
NS
Cr (mmol /L) sobre B
75,0 ~ 99,0 (94,9)
70,4 ~ 107,4 (88,8) 85,8
~ 97,8 (91,6)
NS
C
67,3 ~ 85,6 (75,7)
60,3 ~ 69,9 (62,2)
65,8 ~ 66,9 (66,4)
NS
electrolitos
Una
4.10 ~ 18.97 (4.66)
3,52 ~ 4,72 (4,21) 3,99
~ 10,97 (4,30) NS
sobre K + (mmol /L) sobre B
7,34 ~ 27.13 (10.44)
4.44 ~ 11.09 (6.29)
4.34 ~ 12.29 (4.74)
NS
C
5,14 ~ 5,91 (5,18)
4,98 ~ 6,08 (5,14)
5,31 ~ 6,32 (5,82) NS

Un
139,1 ~ 148,7 (145,3) 142,8
~ 148,8 (144,2) 142,2
~ 145,3 (144,7)
NS
Na + (mmol /L) sobre B
124,5 ~ 146,4 (140,4) 137,3
~ 148.5 (141.65)
133,6 ~ 146,4 (141,1)
NS
C
133,2 ~ 138,7 (133,5) 132,9
~ 138,9 (135,3) 133,8
~ 134,3 (134,1)
NS
Un
99,8 ~ 121,2 (102,6) 101,9
~ 107,2 (103,5)
~ 100,5 110,2 (102,1)
NS
Cl- (mmol /L) sobre B
94,6 ~ 103,9 (96,6)
96,6 ~ 107,7 (101,1)
97,0 ~ 106,6 ( 100,8)
NS
C
100,0 ~ 104,1 (103,7) 102,2
~ 106,6 (104,7) 103,8
~ 104,2 (104,0)
NS
Un
3.11 ~ 3,77 (3,39)
3.05 ~ 3.18 (3.12)
3,18 ~ 3,69 (3,63) NS
sobre Ca ++ (mmol /L) sobre B
2,80 ~ 4,04 (3,70)
3,41 ~ 3,96 (3,71)
3,32 ~ 3,96 (3,66) NS

C
3,71 ~ 4,10 (3,80)
3,19 ~ 3,56 (3,45)
3,48 ~ 3,52 (3,50 )
NS
RBC: glóbulos rojos; WBC: las células blancas de la sangre; HGB: la hemoglobina; Neu: cuentan los neutrófilos; los recuentos de plaquetas; PLT: ALT: alanina aminotransferasa; AST: aspartato aminotransferasa; R: Al inicio del estudio; B: En el día de la cirugía; C: En el día 8 después de la cirugía; TP: proteína total; ALB: albúmina; GLB: globulina; BUN: nitrógeno de urea en sangre; Cr:. Creatinina
Supervivencia México La animales del grupo de control no recibió ningún tratamiento quirúrgico activo, y sólo observó para la historia natural de la progresión de la enfermedad. Para los animales, tanto en CRS y CRS + grupos HIPEC, citorreducción completa se logró ya sea mediante resección quirúrgica o la cauterización de la carcinomatosis peritoneal, dejando sin nódulos tumorales observables en la cavidad peritoneal. El propio tumor gástrico, sin embargo, no se ha eliminado pero tratada por inyección de alcohol absoluto. La mediana de SG fue 24,0 d (IC del 95%: 21,8 - 26,2 d) en el grupo control, 25,0 d (IC del 95%: 21,3 a 28,7 d) en el grupo de CRS y 40.0 d (IC del 95%: 34,6 a 45,4 d) en CRS + grupo HIPEC (P = 0.00
, log rank test). En comparación con CRS grupo solamente o control, CRS + HIPEC podría extender OS por al menos 15 d (60%) (Figura 3). Figura 3 de Kaplan-Meier de supervivencia para el control, CRS solo, y CRS + HIPEC grupos. En comparación con CRS grupo solamente o control, CRS + HIPEC podría extender OS por al menos 15 d (60%). (P = 0.00
, log rank test)
exámenes patológicos postmortem
La eutanasia se realizó en los conejos moribundos por inyección de una sobredosis de pentobarbital de sodio al 1% a través de la vena de la oreja. Información detallada sobre los exámenes patológicos postmortem se enumeran en la Tabla 2.Table 2 Resultados del estudio post mortem patológica en 3 grupos *

de control ( n = 14) guía empresas CRS (n = 12) *
CRS + HIPEC (n = 13) §
P
ulcerosa gástrica cáncer
100% 100%

100%
NA
obstrucción pilórica
100%
100% 100%

NA
perforación gástrica
28,6%
8,3% 8,3%

P = 0,246

Mayor torta epiplón
100%
eliminado
retira
NA
hígado metástasis
100%
96,7% 38,5%

p = 0,000
metástasis pulmonares
0,0% 8,3%

53,8%
P = 0,000
canceroso diafragma
100% 100%

53,8%
P = 0,000
Alta cáncer pared abdominal
100% 100%

84,6%
P
= 0,128
intestino delgado & mesenterio siembra
100% 100%

61,5%
P = 0,002
metástasis de la glándula suprarrenal
100% 100%

23,5%
P = 0,000
invasión de la cápsula renal
100%
75,0% 30,8%

p = 0,000
metástasis retroperitoneo
100% 100%

76,9%
P = 0,038
siembra pélvico
100% 100%

69,2%
P = 0,009
La retención de orina
57,1%
75,0% 61,5%

P = 0.641

ascitis hemorrágica
100% 100%

38,5%
P = 0,000
* Dos animales fueron excluidos en el grupo de CRS, incluyendo 1 muerte debido a una sobredosis de anestesia en el día 9 y otra muerte por hemorragia postoperatoria en el día 10.
§ Un animal en el grupo CRS + HIPEC fue excluido debido a la muerte por sobredosis de anestesia en el día 9.
NA:. no aplicable
Eventos adversos graves
SAE ocurrió en 0 animales en el grupo de control, 2 animales en CRS grupo solo incluyendo 1 muerte por sobredosis de anestesia (OS = 9 d) y otra muerte por hemorragia postoperatoria (OS = 10 d) y 3 animales del grupo CRS + HIPEC incluyendo 1 muerte por sobredosis de anestesia (OS = 9 d), y 2 muertes por diarrea 23 y 27 días después de la operación. Una comparación directa de patología macroscópica en el día 27 de un conejo en el grupo de CRS (Figura 4A) y un conejo en el grupo CRS + HIPEC (Figura 4B) mostraron diferencias significativas en la severidad de PC. Figura 4 En el día 27, post mortem exámenes patológicos de un conejo en el grupo de CRS (2A) y un conejo en el grupo CRS + HIPEC (2B). En el grupo de CRS, recurrencia generalizada PC era evidente incluso después de la cirugía sytoreductive. En el grupo de CRS + HIPEC, chemoperfusion hipertermia significativamente retrasados ​​recurrencia PC.
Discusión
Este estudio ha proporcionado nuevas pruebas en favor de CRS + HIPEC para tratar PC gástrico. En comparación con el grupo control y CRS solo grupo, el grupo CRS + HIPEC podría tener una ganancia adicional para la supervivencia de al menos 15 d (60%). Además de este beneficio significativo en la supervivencia, también se han observado otras mejoras, incluyendo el peso corporal, niveles de gravedad de PC, ascitis, las funciones del hígado y de los riñones, y los electrolitos de la sangre.
Este estudio también sugiere que en PC gástrica establecido, simplemente realizando CRS puede no trae beneficio de supervivencia. Los animales en el grupo de CRS tuvieron una supervivencia media de 25 d, que no es estadísticamente diferente de 24 d en el grupo de control.
PC se ha reconocido cada vez más como un problema clínico importante y el aumento de los esfuerzos se han dedicado a investigar el mecanismo y las estrategias de afrontamiento contra esta enfermedad. Los ensayos clínicos en gástrica seleccionado o los pacientes con CP colorrectal han proporcionado evidencia a favor de CRS + HIPEC para estos pacientes, y la única fase III, prospectivo y aleatorizado en pacientes con CP colorrectales reportado una ventaja de supervivencia media de ganancia de 70% en la supervivencia global (22,4 meses en el grupo HIPEC CRS + VS
12,6 meses con la atención estándar paliativo) [22]. Los resultados alentadores por Yonemura [8] y [9] Glehen en PC proporcionado evidencia más convincente gástrica para apoyar esta modalidad de tratamiento combinado. Sin embargo, las controversias sobre la utilidad y el valor de este enfoque se mantienen [23, 24]. Parece poco probable que este problema se resolverá en breve en ensayos clínicos aleatorios. Por lo tanto, es necesario estudiar la modalidad de tratamiento en condiciones experimentales, en el que la mayor parte de los factores de confusión se puede controlar bien para una evaluación más objetiva de HIPEC.
En los últimos años, el aumento de número de modelos animales de PC han sido intensamente estudiado , incluyendo el modelo de ratón desnudo de PC cáncer gástrico construida mediante el implante de células de cáncer gástrico humano [25-28]; cáncer de colon de ratón modelo PC construido por la inyección de células de cáncer de colon en la cavidad abdominal de ratones Balb /C [29]; modelos de rata carcinoma de colon PC construidos a través de la inyección de células de carcinoma de colon CC531 en la cavidad abdominal de ratas Wag /Rij [15, 30-33] o la inyección de células de adenocarcinoma de colon singénico (DHD /K12 /BRT) en la cavidad abdominal de atímicos BD IX /HansHsd ratas [14, 18, 34, 35]; murino modelo de xenoinjerto PC de adenocarcinoma mucinoso apendicular construido mediante la implantación de los tumores apendiculares humanos en la cavidad peritoneal de ratones desnudos homocigotos [36]; ratón de ovario modelo de cáncer de PC construye a través de la inyección de células de cáncer de ovario seroso o epiteliales humanas en la cavidad abdominal de ratones [37-39] o la inyección de las células epiteliales superficiales de ovario de murino (células ID8) bajo bolsa ovárica de ratones C57BL6 [39].
en comparación con los pequeños modelos animales de PC, nuestro modelo de conejo de PC gástrica es la primera gran modelo animal PC, más adecuado para los estudios de intervención quirúrgicos complejos tales como CRS + HIPEC. Además, este modelo reproduce todo el proceso patológico del cáncer gástrico primario para el desarrollo de PC, se asemeja a las características clínico-patológicas completas de PC gástrico humano.
Hasta donde sabemos, no ha habido 3 informes en la literatura sobre la eficacia de CRS + HIPEC en modelos animales experimentales de PC. Klaver et al [34] utilizaron el modelo de PC colon carcinoma de rata para comprobar si la adición de HIPEC de CRS es esencial para el beneficio de supervivencia. Las ratas se distribuyeron aleatoriamente en 3 grupos de tratamiento de 20 ratas cada uno, CRS solo, CRS + HIPEC (mitomicina 15 mg /m 2 a 42,0 ° C durante 90 minutos) y el SRC + HIPEC (mitomicina C 35 mg /m 2 a 42,0 ° C durante 90 minutos). El CRS + HIPEC logra una ganancia significativa la supervivencia de más del 120% (la supervivencia media de 43, 75 y 97 d, P
< 0,01). Pelz et al [15] utilizaron ratas modelo similar del colon carcinoma de PC para investigar HIPEC. Después de 10 d de las células tumorales de la inoculación, las ratas se asignaron al azar en 3 grupos de 6 animales cada uno, de control, HIPEC (mitomicina C 15 mg /m 2 en 40,5 a 41,5 ° C durante 90 min), y la quimioterapia intraperitoneal normathermic ( mitomicina C 10 mg /m 2 ip). Aunque el estudio no informó la supervivencia global, el grupo HIPEC tenía significativamente menor peso del tumor, un menor número de nódulos tumorales, disminución del índice de cáncer y una mejor tasa de respuesta clínica completa, en comparación con el control o el tratamiento con mitomicina ip normathermic solo. En un estudio similar sobre la rata de colon modelo de cáncer de PC, Raue et al [36] encontraron que sólo los CRS + HIPEC con MMC 15 mg /m 2 41.2 - el 42,3 ° C durante 60 minutos podría resultar en una reducción significativa en el tumor de pesaje y el índice de PC. De nuevo, este estudio no informó sobre la supervivencia global.
Conclusiones
En resumen, este estudio en el primer modelo animal grande de PC gástrica ha demostrado que el CRS + HIPEC de hecho podría traer beneficio en la supervivencia con una seguridad aceptable, proporcionando evidencia para

• revisión retrospectiva mediante secuenciación profunda dirigida revela diferencias mutacionales entre unión gastroesofágica y carcinomas gástricos
• Expresiones y significados clínicos de c-MET, p-MET y E2F-1 en el carcinoma gástrico humano