Klinikos reikšmė branduolinio faktoriaus (eritocitinių-2) padarė išvadą faktorius 2 (Nrf2) išraiška skrandžio cancer

klinikos reikšmės branduolinės koeficiento (eritocitinių-2) padarė išvadą faktorius 2 (Nrf2) išraiška skrandžio vėžio
tezės
Background Viesbutis The transkripcijos faktorius atominės faktorius (eritocitinių-2) padarė išvadą faktorius 2 (Nrf2) iš pradžių buvo laikomas esminiu reguliatorius ląstelėje antioksidantų ir II fazės detoksikacijos fermentų per savo transkripcijos iki reguliavimą daugelio antioksidantas atsakymo elementas (ARE) -Kurių sudėtyje genus. Nrf2 apsaugo ne tik normalias ląsteles, bet ir vėžines ląsteles nuo ląstelių stresą ir pagerina vėžinių ląstelių išgyvenimą. Kai kurie tyrimai parodė, kad Nrf2 išraiška vėžiu sergantiems pacientams turi klinikinę reikšmę. Tačiau nebuvo išsamią analizę branduolinėje ekspresijos lygį Nrf2 virškinimo trakto vėžinių ląstelių. Šiame tyrime siekėme immunohistochemically įvertinti Nrf2 išraišką, ir įvertinti jo klinikinės reikšmės skrandžio vėžio.
Metodai
A 175 skrandžio vėžiu sergantiems pacientams, kurie vartojo R0 pašalintas skrandis su standartiniu limfmazgių skrodimo buvo įtraukti iš viso. Mes immunohistochemically įvertino Nrf2 išraišką parafino įterptųjų chirurginiu rezekcijos egzempliorių šių 175 pacientų. Grupė skirtumai buvo analizuojami naudojant χ
2 testą, Fisher'io testą ir Mann-Whitney U
testą. Asociacijos tarp Nrf2 saviraiškos ir klinikos ypatybių, įskaitant klinikinių rezultatų, buvo vertinami naudojant vienmatės ir daugiamatis analizuoja ir Kaplan-Meier kreivė su log-rank testas, atitinkamai rezultatai
Nrf2 reaktyvumas.
Buvo daugiausia aptikta iš branduolio skrandžio vėžio ląsteles. Nrf2 pozityvumo buvo glaudžiai susijęs su naviko dydžio, naviko gylis, metastazių limfmazgiuose, lymphovascular invazijos, histologijos ir scenoje (p < 0,05 visi). Rąstinis-rank testas parodė, kad bendras išgyvenamumas iš Nrf2-teigiamas grupėje buvo žymiai skurdesnės nei Nrf2-neigiamas grupėje (p < 0,01). Ir teigiamas Nrf2 išraiška buvo reikšmingai susijęs su atsparumu 5FU pagrindu palaikomąja chemoterapija (p = 0,024).
Išvados
Nrf2 išraiška buvo teigiamai susijęs su agresyvaus auglio elgesį skrandžio vėžio. Šis rezultatas rodo, kad Nrf2 išraiška skrandžio vėžys yra potencialus rodiklis blogiau prognozė.
Raktiniai žodžiai
NF-E2 susijusių faktorius 2 skrandžio vėžio Antioksidantai faktai
Skrandžio vėžys yra ketvirtas labiausiai paplitusi iš virškinimo trakto vėžio ir antra labiausiai paplitusi mirtinas virškinimo trakto vėžio pasaulyje. Rytų Azijos šalių, įskaitant Japoniją, yra vienas didžiausių rizikos zonose skrandžio vėžio [1,2]. Japonijoje, masinės atrankos sukūrimas naudojant nuotraukų Fluorografijos ar virškinimo fibroscopy sukėlė skrandžio vėžys yra diagnozuojamas ankstyvosiose stadijose. Palanki prognozė tikimasi šių skrandžio vėžiu pacientams po chirurginio gydymo ar endoskopinė gydymą. Tačiau kai kurie pacientai rodo nepalankią kursą nepaisant gauti gydomąjį rezekcija. Pooperacinis rezultatas skrandžio vėžiu labai priklauso nuo TNM veiksnių [3,4]. Be šių kritinių klinikos veiksnių, skrandžio karcinoma prognozė turi įtakos keletas biologinių kintamųjų. Šiame kontekste, ji yra būtina rasti naujų vėžio-liečiančius faktorius, kurie gali būti naudojami kaip žymekliai gyvūnų ligų diagnozavimo ir gydymo skrandžio vėžio. Visuotinai pripažįstama, kad oksidacinis stresas (OS) dalyvauja degeneracinių ligų patofiziologija. Be to, gamybos ir padidinti OS ir antrinė DNR oksidacinio pažeidimo, taip pat žinoma, kad būti susijęs su žalos ir piktybinę transformaciją skrandžio gleivinės [5]. Taigi OS buvo manoma, kad vaidina svarbų vaidmenį skrandžio vėžio [5,6] kancerogenezėje.
Transkripcijos faktorius branduolinio faktoriaus (eritocitinių-2) padarė išvadą faktorius 2 (Nrf2), kuri yra pagrindinis redokso jautrus BIP transkripcijos faktorius, iš pradžių buvo laikomas esminiu reguliatorius ląstelėje antioksidantų ir II fazės detoksikacijos fermentų per transkripcijos ląstelę daug antioksidantų reagavimo elemento (ARE) -Kurių sudėtyje genai [7-9]. Pagal bazinių sąlygų, Nrf2 jungiasi prie KELCH-kaip ECH susijusių baltymų 1 (Keap1) A cul3 pagrindu E3 Ubikvitino Ligase adapterio, kuri reguliuoja Nrf2 ubiquitination ir proteasomos priklauso nuo degradacijos [10].
Po poveikio ląstelių oksidacinis stresas ar cheminių profilaktikos junginiai, Nrf2 translocates į branduolį, sudaro heterodimerą su savo privalomo partnerio MAF, jungiasi prie Are sekas DNR ir suaktyvina tolesniems genų, pavyzdžiui, antioksidantų ir II fazės detoksikacijos fermentų transkripcijos [8,11-13] , Svarbus biologinis vaidmuo Nrf2 pabrėžiama išvadų, įrodančių Nrf2 priklausomas apsaugą nuo daugelio ligų ar patologinių būsenų, tokių kaip vėžys, neurodegeneracinių ligų, širdies ir kraujagyslių ligos, uždegimas, plaučių fibrozė, ūminis plaučių sužalojimo ir Nrf2 taip pat lėtina senėjimo procesą [14 -18]. Taigi Nrf2 buvo laikoma "gera" transkripcijos veiksnio, kuris yra būtinas apsaugos nuo oksidacinio streso [19]. Tačiau atsiranda duomenis atskleidė tamsiąją Nrf2 [20]. Ji neseniai buvo parodyta, kad nukrypęs nuo normos, aktyvavimo Nrf2 būdo dažnai pasitaiko vėžinių ląstelių ir navikų audiniuose. Nrf2 apsaugo ne tik normalios ląstelės iš transformuojasi į vėžio ląsteles, bet taip pat apsaugo vėžines ląsteles iš korinio streso, pagerina vėžinių ląstelių išgyvenimą ir yra susijęs su vėžio augimo ir progresavimo [18]. Nuo šitų apreiškimų, nebuvo išsamią analizę ekspresijos lygį Nrf2 į skrandžio vėžio ląstelių branduoliuose, ir nebuvo jokių tyrimų, kuriais siekiama išsiaiškinti ryšį tarp ekspresijos lygį Nrf2 santykius skrandžio vėžio ląsteles ir klinikinės branduolio rezultatas. Atsižvelgiant į dabartinę tyrime mes
metodai atliko pirmąjį egzaminą ekspresijos lygį Nrf2 į skrandžio vėžio ląstelių branduolį ir toliau aptarti klinikinė reikšmė Nrf2 išraiškos atžvilgiu kovos oksidacinį stresą.
Aptikimas Nrf2 išraiška skrandžio vėžio ląstelių linijų Vakarų blot analizė Viesbutis The skrandžio karcinoma ląstelių linijų MKN74, MNK45, Kato-III ir NUGC4 buvo įsigytas iš Japonijos Fizikinės ir cheminės institutas, Tokijuje, Japonijoje. Ląstelės buvo inkubuojami RPMI 1640 su 10% vaisiaus galvijų serumo (FBS), 100 vienetų /ml penicilino, ir 100 mikrogramų /ml streptomicino 37 ° C temperatūroje, ląstelių inkubatoriuje. Visos ląstelės buvo surinktos centrifuguojant, skalaujami fosfatinio buferio druskų tirpalu (PBS) ir bendro baltymo buvo ekstrahuojamas lizuojančiame buferyje. Branduoliniai ekstraktai ir citoplazmos frakcijos, imunoblotingo iš Nrf2 buvo paruošti naudojant Branduolinė /citozolyje frakcionavimo komplektas (K266-25, BioVison, Kalifornija, JAV). Western Blot analizė Nrf2 išraiškos skrandžio vėžio ląstelių linijų buvo atliekama taip. Denatūruotas baltymai, ekstrahuoti iš branduolio arba citoplazmoje buvo atskirtos SDS-poliakrilamido gelyje ir perkelti į Hybond membranos, kuri tada buvo per naktį buvo užblokuotos 5% lieso pieno tri-buferio druskų tirpalu (TBS). tada membrana inkubuojama su pele monokloniniai antikūnai prieš Nrf2 (SC-365.949, Santa Cruz Biotechnologijos, Inc, Santa Krusas, Kalifornija, JAV); 1: 500 praskiedimo už naktį. Membrana buvo skalaujamas TBS-Tween 20 (TBST) ir inkubuojama su anti-pelės IgG, konjuguoto su krienų peroksidazės (HAF007, RD Syestems, Mineapolis, JAV) 15 minučių. Imunoreaktyvių juostos buvo vizualizuota rentgeno plėvelės (Fuji, Japonija), naudojant ECL-plus aptikimo reagentai (RPN2132, GE Healthcare, Buckinghamshire, Anglija). Vėliau patvirtinti branduolinių ir citoplazmos frakcijos, membrana buvo plaunami WB išpardavimas Sprendimas (Nakalai Tesque, Tokijas, Japonija) 15 minučių ir vėl tyrinėjo branduolinių ir citoplazmos žymekliai, naudojant anti-Lamin B1 antikūnas (ab16048, Abcam, Cambridge , Jungtinės Amerikos Valstijos, 1: 1000) ir anti-α-tubulino antikūnas (kp06, Calbiochem, MA, JAV, 1:. 1000), atitinkamai
Pacientai ir jų pavyzdžiai
Šiame tyrime dalyvavo 175 pacientai, sergantys skrandžio adenokarcinoma, kad įsiveržė į pogleivio sluoksnio ar giliau. Visi pacientai buvo atlikta gydomoji pašalintas skrandis su limfmazgių skrodimo metu Kagoshima universitetinės ligoninės nuo 1995 sausio iki 2004 gruodžio Tarp 175 pacientų, 57, 14, 99, ir 5 pacientams buvo distalinio, proksimalinės, visiškai ir iš dalies pašalintas skrandis, atitinkamai. Vyrų ir moterų santykis buvo 116 iki 59, o vidutinis amžius buvo 66 metai, nuo 31 iki 84 metų. Pacientų skaičius su I etapas, II ir III skrandžio vėžio buvo 47, 33 ir 95, atitinkamai. Histopathologically, 71 atvejų buvo diferencijuojami (spenelių, gerai diferencijuotas ir vidutiniškai diferencijuoti kanalėlių adenokarcinoma) ir 104 buvo nediferencijuotos (blogai diferencijuotą adenokarcinoma, mucinous adenokarcinoma ir antspaudu žiedo ląstelių karcinoma) karcinomos pagal 7 -asis leidimas naviko mazgo metastazių klasifikacija. Nė vienas iš šių pacientų chemoterapija prieš operaciją. Parašė informuotas sutikimas buvo gautas iš pacientų, o tyrimas buvo patvirtintas Etikos komiteto Kagoshima universitetinės ligoninės (registracijos numeris 35-24). Šis tyrimas atitiko nurodytus principus, Helsinkio deklaracijos. Klinikos išvados yra aprašyti pagal 7 -osios redakcijos naviko mazgas metastazių klasifikaciją.
Imunohistocheminiais analizę Nrf2 skrandžio vėžio ir jo vertinimo
navikų mėginiuose buvo nustatytas 10% formaldehido PBS, įterptųjų parafinu suskirstyta į 4-mikrometrai storio sekcijų ir montuojamas ant stikliukų imunohistochemiškai analizė. Skyriai buvo deparaffinised į ksileno ir dehidratuotas rūšiuotų etanolio serijos. Endogeninis peroksidazės veikla bandinių užblokuotas, panardinant skaidres 3% vandenilio peroksidazės-metanolio tirpalas 10 min kambario temperatūroje. Po plovimo tris kartus su PBS (5 minutės vienam skalbimui), sekcijos buvo gydomi 1% galvijų serumo albumino 30 min kambario temperatūroje, kad būtų blokuoti nespecifinių reakcijų. Už dažymo su anti-Nrf2 antikūnų, dalys buvo iš anksto apdoroti citrato buferio už 10 min 121 ° C, mikrobangų krosnelėje, gauti antigeniškumą. Sekcijos tris kartus buvo plaunamos su PBS 5 min kiekvieną kartą, ir tada buvo užblokuotas gydymo PBS, kurių sudėtyje yra 3% liesas pienas 10 min kambario temperatūroje. Blokuojamąsias dalys buvo inkubuotos su praskiestų pirminės anti-Nrf2 antikūno (SC-365949, Santa Cruz biotechnologijos, Inc, 1: 200,) PBS esant 4 ° C temperatūroje per naktį, po nudažant streptavidino-biotinas-peroksidazės rinkinio ( Nichirei, Tokijas, Japonija). Sekcijos tris kartus buvo plaunamos PBS 5 min vienam skalbimui, ir imuninio komplekso buvo vizualizuojami inkubavimą skyrius diamonobenzidinas tetra hidrochlorido. Skyriai buvo išplautas trumpai vandenyje, counterstained hematoksilinu, ir sumontuoti. Noncancerous placentos audinių buvo naudojamas kaip teigiama kontrolė Nrf2. Nrf2 išraiška buvo nustatytas skaičiuojant vėžinių ląstelių, kurioje branduolys buvo dažytų su anti-Nrf2 antikūno skaičių. Visi immunostained skaidres vertino du nepriklausomi stebėtojai (yk ir SI), kurie nežinojo apie klinikinius duomenis ir ligos baigtį. Įvertinti Nrf2 išraišką, 10 atstovybės laukai naviko buvo atrinkti ir išraišką 1000 vėžinių ląstelių (100 ląstelių viename lauke) iš viso buvo įvertinta naudojant didelės galios (× 400) mikroskopu. Sambūvio diferencijuotų ir nediferencijuotos srityje pačiame skyriuje atveju, mes įvertino išraiška lygį Nrf2 į nediferencijuotos srityje, nors nediferencijuotą plotas yra mažesnis, nei diferencijuotai srityje. Vidutinė ženklinimas indeksas Nrf2 buvo įvertintas pagal prie teigiamų ląstelių proporcingai kiekvienoje srityje. Išraiška Nrf2 buvo įvertinti, remiantis tiek teigiamų ląstelių proporcingai ir dažymo intensyvumo. Iš Nrf2 dažymo intensyvumas buvo įvertintas naudojant trijų vertės intensyvumo balas (0, 1+ arba 2+). Reaktyvumą mastu buvo įvertintas pagal Solis et al. [21] ir buvo išreikštas procentais (0-100%). Imunohistocheminiais balai, kuris svyravo nuo 0 iki 200, buvo apskaičiuojamas dauginant intensyvumo vertybes ir reaktyvumo laipsnį. Šie balai buvo naudojamos siekiant nustatyti Nrf2 ekspresijos lygį. Kadangi vidutinis balas Nrf2 raiškos skrandžio vėžio buvo 110 šiame tyrime, atjungimo vertė 100 buvo nuspręsta asociacija.
Tarp ekspresijos lygį Nrf2 skrandžio vėžio ir Atsparumas cheminėms
įvertinti, ar išraiška lygis Nrf2 skrandžio vėžys pasireiškia Atsparumas cheminėms, mes palyginti išraiška lygį Nrf2 skrandžio vėžiu sergantiems pacientams, kurie gavo 5-fluorouracilu (5FU) remiantis adjuvantinis chemoterapija. Mes nustatėme "5FU pasipriešinimą", kaip skrandžio vėžiu, kuris atsinaujino po palaikomąja chemoterapija. Kaip standartinis protokolas, mes administruoti 5FU adjuvanto chemoterapija sergantiems pacientams, II arba III stadijos vėžys. Mes įtraukti pacientai, kuriems nebuvo galima tęsti adjuvantinis chemoterapija dėl šalutinių poveikių. Kaip rezultatas, 72 pacientai buvo įtraukti į šią analizę.
Statistinė analizė
Statistinė analizė grupinių skirtumų buvo atlikta naudojant χ
2 testus, Fišerio tikslusis testas ir Mann-Whitney U
išbandymas. Kaplan-Meier metodu buvo naudojamas išgyvenamumo analizė ir skirtumai išlikimo buvo apskaičiuota naudojant log-rank testą. Prognostiniai veiksniai buvo nagrinėjami pagal Vienaveiksnės ir daugiamatis analizių (Cox proporcinės rizikos regresijos modelis). Psl
vertė < 0,05 buvo laikomas rodo statistinį reikšmingumą. Visi statistinės analizės buvo atliekamos naudojant StatFlex versija 6.0 Windows "programinės įrangos (StatFlex versija 6.0; Artec Inc., Osaka, Japonija).
Rezultatai
Nrf2 raiškos skrandžio karcinoma ląstelių linijų
į Nrf2 išraišką branduolinėmis ir citoplazminio frakcijas, skrandžio karcinoma ląstelių linijų buvo analizuojami Vakarų blotingo metodu. Nrf2 buvo esmės išreiškiamas visų iš skrandžio vėžio ląstelių linijų branduolio ir mažai išraiška buvo pastebėtas citoplazmą (1 pav). 1 pav atominės faktorius (eritocitinių-2) padarė išvadą faktorius 2 (Nrf2) išraiška skrandžio karcinoma ląstelių linijų. Nrf2 baltymų ekspresija branduolinių ir citoplazmos ekstraktų skrandžio ląstelių linijų MKN74, MNK45, Kato-III, NUGC4 buvo tiriami imunoblotingo. Dėmė buvo vėl tyrinėjo su anti-Lamin B1 ir Anti-α-tubulino antikūnų, kurie buvo naudojami kaip ir branduolio ir citoplazmos, atitinkamai teigiamos kontrolės. Branduolinių ir citoplazmos frakcijos buvo aiškiai atskirtos. Nrf2 baltymo buvo nustatyta daugiausia atsižvelgiant į visas skrandžio vėžio ląstelių linijų branduolio. Mažasis Nrf2 buvo aptiktas citoplazmoje.
Nrf2 imunohistocheminės išraišką skrandžio vėžiu ir jo ryšį su klinikos funkcijų
Mes šalia nulėmusių išraišką ir pavienių ląstelių tyri- mas lokalizacijos Nrf2 175 parafino įterptųjų archyvinių skrandžio vėžio audiniuose, naudojant imunohistocheminis. Į klinikos charakteristikos pacientų parodyta 1 lentelėje Nrf2 reaktyvumas buvo aptikta daugiausia branduolio (2 paveikslas). Daugiau vertinimas branduolinės Nrf2 reaktyvumas nurodė, kad Nrf2 imunoreaktyvi modelis skyrėsi tarp diferencijuotų skrandžio vėžio ląsteles ir neišrūšiuotos skrandžio vėžio ląstelių tose pačiose pavyzdį. Tokiu būdu, nediferencijuotųjų skrandžio vėžio ląstelės buvo labiau tikėtina, kad rodyti teigiamą Nrf2 reaktyvumas, palyginti su diferencijuotų skrandžio vėžio ląsteles. Iš 175 pacientų, 108 (61,7%) demonstravo Nrf2 imunohistocheminės rezultatas didesnis nei 100 ir buvo klasifikuojami kaip Nrf2 teigiamas. Likusios 67 (38,3%) pacientai buvo suskirstyti kaip Nrf2 neigiamas grupei. 2 lentelė rodo tarp Nrf2 saviraiškos ir klinikos funkcijų koreliaciją. Nrf2 teigiamas išraiška buvo reikšmingai susijęs su lytimi, naviko dydžio, naviko gylis, metastazių limfmazgiuose, lymphovascular invazijos, histologinis klasifikavimo ir klinikinės stadijos skrandžio cancer.Table 1 pacientui savybių
Nr
lyčių
Vyras
116
Moteris
59
Amžius
Vidutinis
66
spektrui
31-84
operacija
99
Iš viso pašalintas skrandis
Distalinė
56
Proksimalinės
14
Dalinis
6
etapas IA, IB
47
IIa, IIb
33
IIIA, IIIB, IIIC
95
Histologija
Diferencijuoti
71
Nediferencijuota
104
etapas buvo įvertintas pagal 7-asis leidimas naviko mazgo metastazių klasifikacija.
2 pav imunodažymu branduolinės faktoriaus (eritroidinėse-2) padarė išvadą faktorius 2 (Nrf2) klinikinių skrandžio vėžio pavyzdžius. Atstovas imunodažymu iš Nrf2 (a) teigiamos kontrolės, noncancerous placentos audinio; (B) normalus skrandžio audinio; (C - E) skrandžio vėžys audiniuose; (C) neigiamas dažymo Nrf2, (D) silpnas dažymo (1) nuo Nrf2, (E) stiprus dažymo (2) iš Nrf2 (originalas didinimas, × 400). Išraiška Nrf2 klinikinių mėginių. Imunodažymu iš Nrf2 (originalas priartinimas, x 400)
2 lentelė Koreliacija tarp saviraiškos branduolinės koeficiento (eritocitinių-2) padarė išvadą faktorius 2 (Nrf2) ir klinikos veiksnių
klinikinius veiksnius
išraiška Nrf2
P- vertė
neigiamas

Teigiamas
n = 67 (38,3%)
n = 108 (61,7%)

Amžius
ns
< 65
22
47
≧ 65
45
61
Lytis
< 0,05
vyrai
51
65
Moteris
16
43
naviko dydis
< 0,01
< 5 cm
36
27
≧ 5 cm
31
81
Naviko gylis
< 0,01 T1a, T1b, T2
31
19
T3 T4A, T4b
36
89
limfmazgių metastazių
< 0,05
Taip
35
74
Nėra
32
34
etapas
< 0,01
IA, IB
28
19
IIa, IIb
12
21
IIIA, IIIB, IIIC
27
68
Lymphovascular invazija
< 0,05
Taip
49
90
Nėra
18
14
Histologija
< 0,01
Diferencijuotas
37
34
Nediferencijuota
30
74
Nrf2 imunohistocheminis išraiška skrandžio vėžiu ir jo asociacija su 5FU atsparumo
3 lentelėje matyti, tarp koreliacijos Nrf2 išraiška ir 5FU varža 72 pacientų, kurie buvo gydomi 5FU pagrindu palaikomąja chemoterapija. Iš šių 72 pacientų, 59 buvo Nfr2 teigiamas ir 13 buvo Nfr2 neigiamas. Iš 59 Nfr2 teigiamiems pacientams, 43 (72,9%) pacientų buvo atsparios 5FU, o tik 5 (38,5%) iš 13 Nrf2 neigiamiems pacientams buvo atsparios 5FU. Skirtumas tarp Nrf2 teigiamų ir neigiamų pacientų Nrf2 procentais atsparumo 5FU grupėje buvo statistiškai reikšmingas (p = 0,024) .table 3 Koreliacija tarp saviraiškos branduolinės faktoriaus (eritroidinėse-2) padarė išvadą faktorius 2 (Nrf2) ir 5-fluorouracilu (5FU) chemosensitivity
5FU jautrumas

išraiška Nrf2 pervežimas pervežimas P-vertės
Neigiama

Teigiamas
atsparus
5
43
0,024
Jausmingas
8
16
išgyvenimo analizė
Kaplanas Meier analizė parodė, kad bendras išgyvenamumas iš Nrf2 teigiamą grupėje buvo žymiai skurdesnės nei kad iš Nrf2 neigiamo grupės (61%, palyginti su 79% atitinkamai) (p < 0,01) (3 pav.) Pav 3 Pagal branduolinio faktoriaus (eritocitinių-2) padarė išvadą faktorius 2 (Nrf2) išraiška Pooperacinis rezultatai 175 skrandžio vėžiu sergantiems pacientams. Kaplanas Meier analizė pooperacinių rezultatų 175 skrandžio vėžiu sergantiems pacientams pagal Nrf2 išraiška. Išgyvenimo kreivės buvo pastatytas 175 pacientų, kurie buvo suskirstyti į Nrf2-teigiamų ir Nrf2 neigiami grupes. Nrf2 teigiamas grupė buvo gerokai prastesne rezultatus nei Nrf2-neigiamas grupėje (p < 0,01).
Be to, naviko gylis, naviko dydis, metastazių limfmazgiuose, histologinis klasifikacija, lymphovascular invazija taip pat buvo svarbūs veiksniai išlikimo remiantis pagal vieną požymį analizę (4 lentelė) .table 4 vienmatės ir daugiamatis analizuoja prognozinių veiksnių skrandžio vėžio
klinikinius veiksnius
vienmatės
daugiamatis
p

daugiamatė P
rizikos santykis

95% pasikliautinasis intervalas

Age
0.42
-
-
-
Gender
0.50
-
-
-
Depth
<0.01
0.25
2.44
0.52 - 11.44
Naviko dydis
< 0,01
0,35
1.58
0,61-4,09
apyvartos dalyvavimas
< 0,01
0,03
5.02
1.18 - 21.41
Lymphovascular invazija
< 0,05
0,27
0,35
0,05-2,26
Histologija
< 0,05
0,17
1.1.62
0,81-3,24
Nrf2
< 0,05
0,40
1.37
0,66-2,87
Nrf2, branduolinės faktorius (eritocitinių-2) padarė išvadą veiksnys 2.
Mes taip pat atliko daugiamatis analizė šių šešių veiksnių, įskaitant Nrf2 kaip nepriklausomas prognostinis rodiklis. Limfmazgių metastazių buvo pasirinktas kaip nepriklausomas prognostinis rodiklis. Tačiau Nrf2 išraiška buvo nepasirinkote (4 lentelė).
Diskusijos
antioksidantas Nrf2, kuris veikia apsaugoti normalias ląsteles nuo daugelio žalingų oksidacijos sąlygomis, buvo laikoma didžiausia mobiliojo gynybos mechanizmą. Tačiau daugelis dokumentai parodė, kad Nrf2 ir jos paskesnių genų raiška įvairių tipų žmogaus vėžio [19-25]. Šios ataskaitos parodė, kad Nrf2 ne tik apsaugo normalios ląstelės iš transformuojasi į vėžio ląsteles, bet taip pat gali palengvinti vėžio ląstelių proliferaciją ir pratęsti išgyvenimą [18]. Ši ataskaita yra pirmoji ataskaita rodo asociaciją tarp ekspresijos lygį Nrf2 į skrandžio vėžio ląsteles ir klinikos išvadas branduolio asociaciją.
Dabartiniame tyrime Nrf2 reaktyvumas buvo aptikta daugiausia branduolį, o ne tik in vivo, tačiau taip pat in vitro iš skrandžio vėžio ląstelių linijų skaičius. Buvo spėjama, kad patvarūs branduolinę išraišką Nrf2 skrandžio vėžio ląstelių linijų rezultatų antioksidantų, kurios suteikia šių vėžio ląstelių linijas aukštą gebėjimą atsispirti reaktyvių deguonies formų (ROS) gamybai. Panašus reiškinys buvo pranešta Ma et al. gimdos kaklelio vėžio audinio Jie pranešė, kad upstaging gimdos kaklelio vėžio veda ne tik į aukštesnį koncentracijos Nrf2 Atsižvelgiant į vėžio ląstelių branduolį, bet ir aukštesnio koncentracijos tolesniems antioksidantų reagavimo baltymų [22]. Todėl gali būti teoriškai pasiūlė, kad skrandžio vėžio ląstelių linijas su branduolinės Nrf2 išraiškos turės didesnę piktybinis potencialą per šį mechanizmą.
Mes immunohistochemically identifikuoti didelį greitį Nrf2 išraiškos skrandžio vėžio klinikinių mėginių (2 lentelė). Tokiu būdu, 61,7% bandinių buvo Nrf2 teigiamas, kuris buvo didesnis nei teigiamų mėginių procentinė dalis pranešė ne smulkiųjų ląstelių plaučių vėžio (26%) [21] arba tulžies pūslės vėžio (23%) [23].
Be to, buvo nustatyti reikšmingi koreliacijos tarp Nrf2 saviraiškos ir kelių klinikos veiksnių, tokių kaip naviko dydžio, naviko gylis, limfinės invazijos, metastazių limfmazgiuose, ir naviko histologiją. Mūsų išvados atitinka tuos Wang et al. kas pranešė, kad Nrf2 išraišką tulžies pūslės vėžiu buvo reikšmingai susijęs su diferenciacijos stadijoje, ir metastazių limfmazgiuose [23].
Neseniai Xiu-Freg Hu et al., panašiai ištirti Nrf2 išraišką skrandžio vėžio [26]. Jie taip pat pasiūlė prognostinę reikšmę Nrf2 išraiška pagal mūsų rezultatus. Tačiau, jie pranešė, kad Nrf2 reaktyvumas buvo aptikta citoplazmą bet kad ji nebuvo aptikta branduolio. Tai skiriasi rezultatas gali būti dėl to, kad jie naudojo skirtingus antikūnus iš balasto, naudojamo šiame tyrime. Ji buvo gerai dokumentuota, kad Nrf2 daro savo antioksidacinių galimybę tik tada, kai translocates į branduolį nuo citoplazmos [27]. Mūsų imunoblotingo analizė parodė, kad Nrf2 buvo daugiausia esančių iš skrandžio vėžio ląstelių linijų ląstelių branduolio. Todėl laikoma, kad nuolatinis padidėjusią Nrf2 į skrandžio vėžio ląstelių branduoliuose greičiausiai dirbo kaip antioksidantas, kad saugomos skrandžio vėžio ląsteles nuo ROS, ir kad Nrf2 atominės išraiška gali atspindėti agresyvų elgesį skrandžio vėžio. Remiantis šia teorija, mūsų nuomone, kad labai svarbu įvertinti branduolinės, bet ne citoplazmos išraiška Nrf2 klinikinių pavyzdžių skrandžio vėžio.
Šiame tyrime mes parodėme prognostinę vertę Nrf2 išraiškos vieną požymį analizė. Nors Nrf2 pozityvumo nebuvo pasirinktas kaip nepriklausomas prognostinis persekiotoją iki Dispersinės analizės duomenimis, ši išvada gali būti paaiškinama galimybe, kad Nrf2 pozityvumo buvo didelės įtakos mazgo dalyvavimo kuri buvo laikoma prastos prognostinis faktorius. Solis ir kt. Wang et al., Panašiai pranešė, kad Nrf2 išraiška buvo susijęs su prasta bendra išlikimo nesmulkiųjų ląstelių plaučių vėžiu [21] ir tulžies pūslės vėžiu [23], atitinkamai. Šie duomenys rodo, kad Nrf2 išraiška gali būti naudojamas kaip reikšmingas prognostinis parametras prognozavimas pooperacinių skrandžio vėžiu sergančių pacientų išgyvenimo.
Ji neseniai buvo pranešta, kad aukštos Nrf2 išraiška gali palengvinti ir prailginti vėžio ląstelių išgyvenamumą nuo vėžio chemoterapija ir radioterapija [14,16,19-22,28-33]. Mūsų rezultatai taip pat parodė, kad teigiamas Nrf2 išraiška buvo reikšmingai susijęs su atsparumu 5FU remiantis palaikomąja chemoterapija. Šios kombinuotos rezultatai gali reikšti, kad, vertinant išraiškos lygį Nrf2 į skrandžio vėžio ląstelių branduoliuose, tai gali būti įmanoma prognozuoti geriausius kandidatus, kurie gali pasinaudoti gauti ne tik adjuvantinis chemoterapijos, bet taip pat indukcinę chemoterapiją.
Genetinis arba funkcinis slopinimas Nrf2 buvo įrodyta, kad sukelti ląstelių Nrf2 -regulated antioksidantinių fermentų, įskaitant akytosios glutationo, tioredoksino ir nebaltyminės tiolių represijų. Galų gale, šie pakitimai gali atkurti vėžio ląstelių jautrumą priešvėžinių vaistų ir spindulinė terapija. Tokiu būdu, CHO ir kt. Pranešama, kad funkcinis slopinimas Nrf2 sukelia jautrinimo vėžio ląstelių alkilinimo vaistais nuo vėžio [31]. Be to, Ma ir kt. pranešė, kad cisplatinos ir triuškinantis iš Nrf2 derinys žymiai ir žymiai slopinamas vėžinių augimas in vivo [22].
Atsižvelgiant į šiuos įrodymus atsižvelgiama, tai labai tikėtina, kad nauja chemoterapinio protokolas, kuris apima Nrf2 reglamentas bus įvestas artimiausioje ateitis. Pavyzdžiui, chemoterapijos veiksmingumas galėtų būti pirmasis prognozuojama įvertinant Nrf2 išraiškos ir, jei bet kuri iš Nrf2 teigiamų pacientų yra vertinami kaip atsparus chemoterapija, tada jis gali būti įmanoma pasiekti pakankamo efekto, chemoterapijos, kai kartu slopinimo Nrf2. Todėl nauja chemoterapinio protokolas, kuris apima antioksidantų terapija gali būti naudinga metodas sprendžiant klinikinį problemą.
Išvadas
Nrf2 išraiška yra glaudžiai susijęs su klinikos veiksnių ir skrandžio vėžiu sergančių pacientų prognozei. Nrf2 išraiška skrandžio vėžio gali būti naudinga įvertinti biologinės piktybinės potencialą, kuris gali būti medijuojamos iš dalies Nrf2 stiprinimo antioksidanto gebėjimas skrandžio vėžio ląsteles. Antioksidantas terapija gali būti perspektyvus požiūris į Nrf2 teigiamų skrandžio vėžiu sergančių pacientų gydymo
Santrumpos
Nrf2:.
NF-E2 susijusių faktorius 2
OS: Rīga, oksidacinis stresas
Keap 1: Rīga, KELCH-kaip ECH susijęs baltymas 1
YRA:
antioksidantas atsakas elementas
FBS: Rīga Vaisiaus jaučio serumo
PBS: Rīga, fosfato buferinis tirpalas

TBS: Rīga, tri-buferinis tirpalas
TBST: Rīga, TBS-Tween 20
5FU:
5-fluorouracilu
ROS: Rīga, reaktyvių deguonies rūšių
deklaracijų
Padėkos
Mes pareiškiame, kad kiekvienas autorius gavo ne Visi autoriai skaityti ir patvirtino galutinį rankraštį.

• Limfangiogenezės skrandžio vėžio reguliuojama Akt /mTOR-VEGF-C /VEGF-D ašį
• Lemiantys veiksniai skrandžio vėžio lankomumo Korėjoje: multi-lygio analizė