Klinikopatológiai jelentőségét a nukleáris faktor (eritroid-2) kapcsolatos faktor 2 (Nrf2) kifejezés a gyomorrák

Klinikopatológiai jelentőségét a nukleáris faktor (eritroid-2) val kapcsolatos faktor 2 (Nrf2) kifejezés a gyomorrák katalógusa Abstract katalógusa Háttér katalógusa transzkripciós faktor nukleáris faktor (eritroid-2) val kapcsolatos faktor 2 (Nrf2) volt eredetileg azonosított kritikus szabályozója intracelluláris anti-oxidánsok és fázis II méregtelenítő enzimek révén transzkripciós up-regulációját sok anti-oxidáns válasz elem (ARE) -tartalmú géneket. Nrf2 védi nem csak a normális sejteket, hanem a rákos sejtek a celluláris stressz, és javítja a rákos sejtek túlélését. Egyes tanulmányok kimutatták, hogy Nrf2 kifejezés a rákos betegek van klinikai jelentősége. Azonban nem volt átfogó elemzése a nukleáris expressziós szintjének Nrf2 gasztrointesztinális rákos sejtekben. Ebben a tanulmányban azt kívánta immunohisztokémiailag kifejezés kiértékelésére Nrf2, és értékelje annak klinikai jelentősége gyomorrákban. Katalógusa Módszerek
Összesen 175 gyomorrákos betegek, akik R0 resectio standard nyirokcsomók vontunk be. Mi immunohisztokémiailag értékelték Nrf2 kifejezést a paraffinba ágyazott műtétileg eltávolított mintákat ezeknek 175 betegnél. Csoport különbségeket elemeztük a χ katalógusa 2 teszt, Fisher-féle egzakt tesztet, és a Mann-Whitney U teszt katalógusa. Egyesületek között Nrf2 kifejezés klinikopatológiai jellemzők, beleértve a klinikai eredmény, értékelték egyváltozós és többváltozós elemzéseket és Kaplan-Meier görbék log-rank teszt, ill. Katalógusa Eredmények katalógusa Nrf2 immunreakciót túlnyomórészt azonosították a sejtmagban gyomor rákos sejteket. Nrf2 pozitivitás szorosan összefügg a tumor mérete, mélysége, nyirokcsomó-metasztázisok lymphovascularis invázió, szövettani és színpadi (p < 0,05 minden). A log-rank teszt azt mutatta, hogy a teljes túlélés a Nrf2-pozitív csoportban szignifikánsan rosszabb, mint a Nrf2-negatív (p < 0,01). És pozitív Nrf2 expresszió szignifikánsan rezisztenciával összefüggő 5FU alapú adjuváns kemoterápia (p = 0,024). Katalógusa Következtetések katalógusa Nrf2 kifejezés pozitívan kapcsolódó agresszív daganat viselkedését a gyomorrák. Ez az eredmény arra utal, hogy Nrf2 kifejezés a gyomorrák egyik lehetséges mutatója rosszabb prognózist. Katalógusa Kulcsszavak katalógusa NF-E2 kapcsolatos faktor 2 Gyomorrák Antioxidánsok Háttér katalógusa gyomorrák a negyedik leggyakoribb emésztőrendszeri rák és a második leggyakoribb halálos kimenetelű gastrointestinalis rák a világon. Kelet-ázsiai ország, köztük Japán között a legmagasabb kockázatú területeken gyomorrák [1,2]. Japánban, a létesítmény tömeges szűrővizsgálatra fotó- röntgen vagy emésztőrendszeri fibroscopy vezetett gyomorrák diagnosztizáltak korai szakaszában. A kedvező prognózist várhatóan ezen gyomorrákos betegek következő kuratív műtét vagy endoszkópos kezelést. Egyes betegeknél azonban azt mutatják, kedvezőtlenül alakult ellenére az kuratív rezekció. A posztoperatív eredményét gyomorrák erősen függ TNM tényező [3,4]. Amellett, hogy ezeket a kritikus klinikopatológiai faktorok, a prognózis a gyomor karcinóma befolyásolja néhány biológiai változók. Ebben az összefüggésben meg kell találni az új rákkal kapcsolatos tényezők, amelyek lehet használni, mint markerek a diagnózis és a kezelés a gyomorrák. Általánosan elfogadott, hogy az oxidatív stressz (OS) részt vesz a patofiziológiájában degeneratív betegségek. Sőt, a termelés és növekedése OS és a másodlagos DNS oxidatív károsodás is ismert, hogy kapcsolatban áll a kár és a malignus transzformáció gyomornyálkahártya [5]. Így OS tartották, hogy fontos szerepet játszanak a karcinogenezis gyomorrák [5,6].
A transzkripciós faktor nukleáris faktor (eritroid-2) -függő faktor 2 (Nrf2), amely egy alap redox-érzékeny bzip transzkripciós faktor, eredetileg azonosított kritikus szabályozója intracelluláris antioxidáns és fázis II méregtelenítő enzimeket a transzkripciós túlszabályzását sok antioxidáns válasz elem (ARE) tartalmú gének [7-9]. Nyugalmi állapotban Nrf2 kötődik a Kelch-szerű ECH-asszociált protein 1 (Keap1), egy CUL3 alapú E3 ubikvitin ligáz adapter, amely szabályozza Nrf2 ubikvitináció és proteaszóma-függő degradáció [10].
Upon a sejtek érintkeztetése oxidatív stressz vagy kemopreventív vegyületek, Nrf2 a sejtmagba, képez heterodimert annak kötelező partner Maf, kötődik az olyan szekvenciák, a DNS-t és aktiválja a transzkripciót downstream gének, mint például antioxidánsokat és fázis II méregtelenítő enzimek [8,11-13] . A fontos biológiai szerepe Nrf2 aláhúzva által megállapítások bizonyítva Nrf2-függő védelmet számos emberi betegségek vagy kóros állapotok, például rák, neurodegeneratív betegségek, szív- és érrendszeri betegségek, a gyulladás, tüdőfibrózis, akut pulmonális sérülés és Nrf2 is lassítja az öregedés folyamatát [14 -18]. Így Nrf2 tartották, mint a "jó" transzkripciós faktor, amely elengedhetetlen a védelem az oxidatív stressz elleni [19]. Azonban újabb adatok feltárta a sötét oldalát Nrf2 [20]. A közelmúltban kimutatták, hogy a rendellenes aktiválása a Nrf2 útvonal gyakran fordul elő rákos sejtek és a tumoros szövetekben. Nrf2 védi nem csak a normális sejtek átalakítja a rákos sejteket, hanem megvédi a rákos sejtek a celluláris stressz, növeli a rákos sejtek túlélését, és a kapcsolódó rákos növekedéséhez és progressziójához [18]. Mivel ezek a kinyilatkoztatások, nem volt átfogó elemzését expressziós szintjének Nrf2 a sejtmagban gyomorrák-sejtek, és nem voltak tanulmányok tisztázását célzó közötti kapcsolat expressziós szintjének Nrf2 a sejtmagban a gyomor rákos sejtek és a klinikai eredmény. A jelenlegi vizsgálat során végeztünk az első vizsgálata expressziós szintjének Nrf2 a sejtmagban a gyomor rákos sejteket, és folytassák a tárgyalásokat a klinikai jelentősége Nrf2 kifejezés tekintetében anti- oxidatív stresszt. Katalógusa módszerei katalógusa kimutatása Nrf2 kifejezés a gyomorrák-sejtvonalak Western blot katalógusa a gyomorrák-sejtvonalak MKN74, MNK45, KATO-III és NUGC4 vásároltunk a japán Fizikai és Kémiai Intézet, Tokió, japán. A sejteket RPMI 1640-ben 10% -os magzati marhaszérumot (FBS), 100 egység /ml penicillinnel és 100 ug /ml sztreptomicint, 37 ° C-on egy sejtben inkubátorban. Az összes sejtet centrifugálással összegyűjtjük, öblítjük foszfáttal puffereit sóoldattal (PBS), és a teljes protein extraháljuk lízis pufferben. Nukleáris kivonatok és citoplazmatikus frakciók Western blot Nrf2 alkalmazásával állítottuk elő a nukleáris /citoszoija frakcionálása Kit (K266-25, BioVison, Kalifornia, USA). Western blot analízis Nrf2 expresszió gyomor rákos sejtvonalakban a következőképpen végeztük. A denaturált proteint kivonjuk a sejtmag vagy citoplazma-t választunk el SDS-poliakrilamid gél és Hybond membrán, amelyet ezután blokkolva egy éjszakán át 5% lefölözött tej Tris-pufferolt sóoldattal (TBS). A membránt ezután inkubáltuk felismerő egér monoklonális ellenanyag Nrf2 (SC-365949, a Santa Cruz Biotechnology Inc., Santa Cruz, CA, USA) 1: 500 hígítás egy éjszakán át. A membránt leöblítjük TBS-Tween 20-at (TBST), és inkubáltuk anti-egér IgG konjugált torma-peroxidáz (HAF007, RD Syestems, Minneapolis, USA) 15 percig. Az immunreaktív sávokat láthatóvá röntgen film (Fuji, Japán) alkalmazásával ECL-Plus detektáló reagens (RPN2132, GE Healthcare, Buckinghamshire, Anglia). Ezt követően, a megerősítéshez nukleáris és citoplazmatikus frakciók, a membránt mostuk WB lemosó Solution (Nakalai Tesque, Tokió, Japán) 15 percig, és újra próbáztuk nukleáris és citoplazmatikus markerek alkalmazásával az anti-Lamin B1 antitest (ab16048, ABCAM, Cambridge USA, 1: 1000) és az anti-α-tubulin antitesttel (CP06, Calbiochem, MA, USA, 1: 1000) volt. katalógusa betegek és minták
Ebben a vizsgálatban 175 beteg gyomor adenokarcinóma, hogy betört a nyálkahártya alatti réteg, vagy mélyebb. Minden betegnél kuratív gastrectomián a nyirokcsomók a Kagoshima University Hospital 1995 januárja 2004. december között 175 beteg, 57, 14, 99 és 5 beteg kapott távolabbi, közelebbi, teljes és részleges gastrectomián ill. A férfi-nő arány 116-59, az átlagéletkor 66 év volt, kezdve 31-84 év. A betegek száma stádiumú I, II és III a gyomor rákos volt 47, 33 és 95, ill. Szövettanilag, 71 esetben került differenciált (papilláris, jól differenciált és közepesen differenciált csöves adenokarcinóma), és 104 volt a differenciálatlan (gyengén differenciált adenocarcinoma, mucinosus adenocarcinoma és pecsétgyűrű sejtes carcinoma) carcinomák szerint 7 th kiadása tumor áttét osztályozás. Ezen betegek egyike sem kapott kemoterápia a műtét előtt. Írásos beleegyezését adta a betegek és az jóváhagyta a vizsgálatot etikai bizottsága Kagoshima University Hospital (nyilvántartási szám 35-24). Ezt a vizsgálatot megfelelt a vázolt elvek a Helsinki Nyilatkozatban. Klinikopatológiai megállapítások szerint leírt a 7 th kiadás tumor áttét besorolás.
Immunhisztokémiai vizsgálatát Nrf2 a gyomorrák és annak értékelését
tumormintákat fixáltuk 10% formaldehid PBS-ben, paraffinba ágyaztuk, osztva 4-um vastag metszeteket és üveg tárgylemezekre az immunhisztokémiai analízishez. A metszeteket deparaffinised xilolban és a dehidratált egy sor fokozatos etanol. Az endogén peroxidáz aktivitás a próbatestek blokkolva volt merítve a lemezeket 3% -os hidrogén-peroxidáz-metanolos oldatot 10 percig szobahőmérsékleten keverjük. Mosás után háromszor PBS (5 perc mosásonként), a metszeteket kezelünk 1% szarvasmarha szérum albumin, 30 percig szobahőmérsékleten, hogy blokkolja a nem specifikus reakciókat. Festés esetében anti-Nrf2 antitestek metszeteket előkezeljük citrát pufferben 10 percen át 121 ° C hőmérsékleten mikrohullámú kemencében letölteni antigenitás. A metszeteket háromszor mossuk PBS-sel 5 percig minden egyes alkalommal, és ezután blokkolja kezelés tartalmazó PBS-sel 3% -os sovány tejben 10 percig, szobahőmérsékleten. A blokkolt metszeteket a hígított primer anti-Nrf2 antitest (SC-365949, Santa Cruz Biotechnology, Inc., 1: 200,), PBS-ben 4 ° C hőmérsékleten egy éjszakán át, majd megfestettük egy sztreptavidin-biotin-peroxidáz kit ( Nichirei, Tokió, Japán). A metszeteket háromszor mostuk PBS-sel 5 percig mosásonként, és az immunkomplex tettük láthatóvá inkubáljuk szakaszok diaminobenzidin tetra-hidroklorid. A metszeteket öblítjük röviden a vízben, hematoxilinnel ellenfestettük, és szerelve. Jóindulatú placenta szövetet alkalmaztunk pozitív kontrollként Nrf2. Nrf2 expresszióját úgy határoztuk meg, hogy megszámoljuk a rákos sejtek, amelyekben a mag festettük az anti-Nrf2 antitest. Minden immunfestett diák értékeltük két független megfigyelő (YK és SI), akik nem tudtak a klinikai adatok és a betegség kimenetelét. Hogy értékelje Nrf2 kifejezés, 10 reprezentatív területeken belül a tumor került kiválasztásra, és a kifejezés egy összesen 1000 rákos sejtek (100 sejt per field) alkalmazásával értékeltük a magas teljesítmény (× 400) mikroszkópia. Abban az esetben, egymás mellett a differenciált és differenciálatlan terület azonos rész, értékeltük az expressziós szintjének Nrf2 a differenciálatlan területen, bár a terület a differenciálatlan kisebb, mint a differenciált területen. Az átlagos jelölési index Nrf2 szerint értékeltük a pozitív sejtek arányát az egyes mezőkbe. Expression of Nrf2 értékelték alapja mind az aránya a pozitív sejtek és a festődés intenzitása. Az intenzitás Nrf2 festést mennyiségileg három érték intenzitás pontszámot (0, 1+ vagy 2+). A mértéke reaktivitás szerint értékeltük Solis et al. [21] és fejeztük ki százalékban (0-100%). Immunhisztokémiai eredmények, amelyek között mozgott 0-200 voltak szorzata az értékeket a intenzitása és mértéke reaktivitás. Ezeket a pontértékeket használták, hogy meghatározzák Nrf2 expressziós szintek. Mivel az átlagos pontszám Nrf2 kifejezés gyomorrákban 110 A jelen tanulmányban egy cut-off érték 100 határozták el. Katalógusa egyrészről az expressziós szintjének Nrf2 gyomorrákban és kemorezisztenciájának katalógusa Annak eldöntésére, hogy a expressziós szintjének Nrf2 gyomorrákban érinti kemorezisztenciájának összehasonlítottuk expressziós szintjének Nrf2 a gyomorrákos betegek közül, akik 5-fluorouracil (5-FU) alapú adjuváns kemoterápiát. Mi határozza meg "5FU ellenállás", mint a gyomorrák, hogy kiújult az adjuváns kemoterápiát. A standard protokoll, kezeli az 5-fluorouracil alapú adjuváns kemoterápia stádiumú II vagy III rák. Mi kizárták azokat a betegeket, akik nem tudták, hogy továbbra is az adjuváns kemoterápia mellékhatásai miatt. Ennek eredményeként a 72 beteget vontak be ebben az elemzésben.
Statisztikai analízis
Statisztikai elemzést csoport különbségek végeztünk a χ
2 teszt, Fisher-féle egzakt teszt, és a Mann-Whitney U
teszt. A Kaplan-Meier módszerrel történt túlélési analízis és különbségek a túlélés becslése szerint a log-rank teszt. Prognosztikai tényezőket is megvizsgáltak, egyváltozós és többváltozós elemzés (Cox-féle regressziós modell). A p katalógusa érték < 0,05 értéket tekintettük statisztikailag szignifikánsnak. Minden statisztikai analízist végeztünk a StatFlex version 6.0 for Windows szoftver (StatFlex 6.0 verzió; Artec Inc., Osaka, Japán). Katalógusa Eredmények katalógusa Nrf2 expresszió gyomorkarcinóma sejtvonalon
kifejezése Nrf2 nukleáris és citoplazmatikus frakciójában gyomor karcinóma sejtvonalak analizáltuk Western-blottal. Nrf2 fejeztük főként a sejtmagban az összes, a gyomor rákos sejtvonalak, és kevés expresszió volt megfigyelhető a citoplazmába (1. ábra). 1. ábra nukleáris faktor (eritroid-2) kapcsolatos faktor 2 (Nrf2) expresszió gyomor karcinóma sejtvonalakban. Nrf2 fehérje expresszió nukleáris, citoplazma kivonatokat a gyomor sejtvonalak MKN74, MNK45, KATO-III és NUGC4 vizsgáltuk Western-blottal. A blotot ismét próbaként anti-Lamin B1 és anti-α-tubulin antitestek használtunk pozitív kontrollként a sejtmagban és a citoplazmában, ill. Nukleáris és citoplazmatikus frakciókat egyértelműen elkülöníthető. Az Nrf2 fehérje azonosítottuk főként a sejtmagban az összes gyomor rákos sejtvonalak. Kis Nrf2 kimutatható volt a citoplazmában.
Nrf2 immunhisztokémiai expresszió gyomorrák és annak kapcsolata klinikopatológiai jellemzői
Mi következő határoztuk expresszióját és szubcelluláris lokalizációját Nrf2 175 paraffinba ágyazott archivált gyomorrák szövetekben, immunhisztokémiai. Klinikopatológiai jellemzői a betegek 1. táblázatban mutatjuk be Nrf2 immunreaktivitás volt kimutatható elsősorban a mag (2. ábra). További értékelés A nukleáris Nrf2 immunreaktivitás jelezte, hogy az Nrf2 immunreaktív minta különbözött differenciált gyomor rákos sejtek és nem differenciált gyomor rákos sejtek ugyanabban a mintában. Így, differenciálatlan gyomorrák-sejtek nagyobb valószínűséggel voltak megjelenítéséhez pozitív Nrf2 immunreaktivitás képest differenciált gyomor rákos sejteket. A 175 beteg, 108 (61,7%) jelenik meg egy Nrf2 immunhisztokémiai pontszáma nagyobb, mint 100, és sorolták Nrf2 pozitív. A fennmaradó 67 (38,3%) beteg minősítjük Nrf2 negatív csoportban. A 2. táblázat mutatja az összefüggést a Nrf2 expresszió és klinikopatológiai jellemzői. Nrf2 pozitív kifejeződése szignifikánsan összefüggött a nemek, a tumor mérete, mélysége, nyirokcsomó-metasztázisok lymphovascularis invázió, szövettani osztályozása és klinikai fázisában gyomor cancer.Table 1 Betegjellemzők Matton No. Matton nemek katalógusa Férfi
116 fiatal női katalógusa 59 katalógusa Kor
Mean katalógusa 66 katalógusa tartomány katalógusa 31-84 katalógusa Operation
99 katalógusa Összesen gastrectomia katalógusa distalis
56 katalógusa Proximal
14 katalógusa részleges katalógusa 6 katalógusa Stage katalógusa IA, IB
47 katalógusa IIA, IIB
33
IIIA, IIIB IIIC
95 katalógusa Szövet-
differenciált katalógusa 71 katalógusa differenciálatlan
104 katalógusa Stage szerint értékeltük 7. kiadása tumor áttét besorolás. katalógusa 2. ábra Immunfestést nukleáris faktor (eritroid-2) val kapcsolatos faktor 2 (Nrf2) klinikai gyomorrák mintákat. Reprezentatív immunfestésével Nrf2 (a) Pozitív kontroll, nem rákos placentaszövet; (B) a normál gyomor szöveti; (C - e) Gyomorrák szövetek; (C) negatív festési Nrf2, (d) gyenge festést (1) Nrf2, (e) erős festés (2) Nrf2 (eredeti nagyítás, × 400). Expressziója Nrf2 klinikai mintákban. Immunfestésével Nrf2 (eredeti nagyítás, × 400) hotelben 2. táblázat közötti korreláció kifejezése nukleáris faktor (eritroid-2) kapcsolatos faktor 2 (Nrf2) és klinikopatológiai faktorok
klinikai tényezők
kifejezése Nrf2 Matton P- érték Matton Negatív Matton Pozitív Matton n = 67 (38,3%) Matton n = 108 (61,7%)
Age katalógusa ns katalógusa < 65 katalógusa 22 katalógusa 47 katalógusa ≧ 65 katalógusa 45 katalógusa 61 katalógusa nemek katalógusa < 0,05 katalógusa férfi katalógusa 51 katalógusa 65 fiatal női
16 katalógusa 43 katalógusa tumor méretét katalógusa < 0,01 katalógusa < 5 cm katalógusa 36 katalógusa 27 katalógusa ≧ 5 cm katalógusa 31 katalógusa 81 katalógusa tumor mélységi katalógusa < 0,01 katalógusa T1a, T1b, T2 katalógusa 31 katalógusa 19 katalógusa T3, T4a, T4B
36 katalógusa 89 katalógusa nyirokcsomó-metasztázisok katalógusa < 0,05 katalógusa Igen
35 katalógusa 74
Nem katalógusa 32
34 katalógusa Stage katalógusa < 0,01 katalógusa IA, IB
28 katalógusa 19 katalógusa IIA, IIB
12 katalógusa 21 katalógusa IIIA, IIIB IIIC
27 katalógusa 68 katalógusa lymphovascularis invázió katalógusa < 0,05 katalógusa Igen katalógusa 49 katalógusa 90 katalógusa No katalógusa 18 katalógusa 14
Szövet- katalógusa <0,01 katalógusa differenciált katalógusa 37 katalógusa 34 katalógusa differenciálatlan
30 katalógusa 74 katalógusa Nrf2 immunhisztokémiai expressziója gyomorrákban és kapcsolata 5FU ellenállás katalógusa 3. táblázat mutatja az összefüggést a Nrf2 kifejezés és 5FU ellenállást a 72 betegnél, akiket 5FU alapú adjuváns kemoterápiát. Közülük 72 beteg, 59 volt Nfr2 pozitív és 13 volt negatív Nfr2. Ki a 59 Nfr2 pozitív betegek, 43 (72,9%) beteg 5FU rezisztens, míg mindössze 5 (38,5%), a 13 Nrf2 negatív betegek 5-FU-rezisztens. A különbség a százalékos Nrf2 pozitív és Nrf2 negatív betegek az 5FU ellenállás csoport statisztikailag szignifikáns volt (p = 0,024) .table 3 Korreláció expressziója nukleáris faktor (eritroid-2) kapcsolatos faktor 2 (Nrf2) és 5-fluor-uracil (5FU) kemoszenzitivitás katalógusa 5FU érzékenység

Expression Nrf2 Matton P- érték
Negatív
Pozitív Matton Ellenálló katalógusa 5 katalógusa 43 katalógusa 0,024 katalógusa Sensitive katalógusa 8 katalógusa 16 katalógusa túlélési analízis katalógusa Kaplan-Meier analízis szerint a teljes túlélés a Nrf2 pozitív csoportban szignifikánsan rosszabb, mint a hogy az Nrf2 negatív csoportban (61% vs. 79% -kal) (p < 0,01) (3. ábra). 3. ábra A posztoperatív eredményeit 175 gyomorrákos betegek szerint a nukleáris faktor (eritroid-2) val kapcsolatos faktor 2 (Nrf2) kifejezést. Kaplan-Meier analízis a posztoperatív eredmények 175 gyomorrákos betegek szerint Nrf2 kifejezést. A túlélési görbéket szerkesztettünk a 175 beteg, hogy osztottuk Nrf2-pozitív és Nrf2-negatív csoportban. Az Nrf2-pozitív csoportban szignifikánsan rosszabb eredmény, mint az Nrf2-negatív (p < 0,01).
Emellett tumor mélység, a tumor mérete, nyirokcsomó-metasztázisok szövettani osztályozás, lymphovascularis invázió is jelentős tényező a túlélésért alapuló egyváltozós analízis (4. táblázat) .table 4 egyváltozós és többváltozós prognosztikai faktorok gyomorrákban katalógusa klinikai tényezők
egyváltozós Matton többváltozós Matton p katalógusa
többváltozós P Matton hazárd Matton 95%

Age
0.42
-
-
-
Gender
0.50
-
-
-
Depth
<0.01
0.25
2.44
0.52 - 11.44 katalógusa tumor méretét katalógusa < 0,01 katalógusa 0,35 katalógusa 1,58 katalógusa 0,61-4,09 katalógusa nyirokcsomó-érintettség katalógusa < 0,01 katalógusa 0,03 katalógusa 5.02 katalógusa 1.18 - 21.41 katalógusa lymphovascularis invázió katalógusa < 0,05 katalógusa 0,27 katalógusa 0.35 katalógusa 0,05-2,26 katalógusa Szövet- katalógusa < 0,05 katalógusa 0,17 katalógusa 1.1.62 katalógusa 0,81-3,24 katalógusa Nrf2 katalógusa < 0,05 katalógusa 0,40 katalógusa 1,37 katalógusa 0,66-2,87 katalógusa Nrf2 nukleáris faktor (eritroid-2) val kapcsolatos tényező 2. katalógusa is végeztünk többváltozós elemzés a hat tényező, köztük Nrf2 önálló prognosztikai marker. A nyirokcsomó-metasztázisok választották független prognosztikai faktora. Azonban Nrf2 expresszió nem kiválasztott (4. táblázat).
Megbeszélés
Az antioxidáns Nrf2, mely funkciók, hogy megvédje a normális sejteket a számos káros oxidatív körülmények között, úgy tartották, hogy egy jelentős celluláris védekező mechanizmus. Azonban sok papírok jelezték a overexpressziója Nrf2 és downstream gének sokféle emberi rákos [19-25]. Ezek a jelentések azt mutatták, hogy Nrf2 nemcsak védi a normális sejteket a átalakítja a rákos sejteket, de az is elősegíti a rákos sejtek szaporodását, és meghosszabbítják a túlélést [18]. Ez a jelentés az első jelentés mutatni közötti társulás expressziós szintjének Nrf2 a sejtmagban gyomorrák sejtek és klinikopatológiai eredményeket.
A jelenlegi vizsgálat során, Nrf2 immunreakció volt kimutatható túlnyomórészt a magban nemcsak in vivo, de in vitro is számos gyomor rákos sejtvonalak. Azt gondolták, hogy a tartós nukleáris expressziója Nrf2 a gyomor rákos sejtvonalakban termelését eredményezi antioxidánsok, ami alapján a következő rákos sejtvonalak nagy képességét, hogy ellenálljon a reaktív oxigéngyökök (ROS). Egy hasonló jelenség volt jelentették Ma és mtsai. a méhnyakrák szövet Úgy tűnik, hogy a upstaging méhnyakrák vezet nem csak a magasabb koncentrációjú Nrf2 a sejtmagban a rákos sejtek, hanem a nagyobb koncentrációjú downstream antioxidáns válasz fehérjék [22]. Ezért elméletileg azt javasolta, hogy a gyomor rákos sejtvonalak nukleáris Nrf2 kifejezés lenne magasabb malignus potenciállal ezen a mechanizmuson keresztül.
Mi immunohisztokémiailag azonosított magas Nrf2 kifejezés gyomorrákban klinikai minta (2. táblázat). Így 61,7% -a minta volt Nrf2 pozitív volt, ami magasabb, mint a százalékos pozitív mintákat jelentett nem-kissejtes tüdőkarcinóma (26%) [21], vagy epehólyag rák (23%) [23].
Emellett nem volt szignifikáns korrelációt Nrf2 expresszió és számos klinikopatológiai faktorok, mint például a tumor mérete, mélység, limfatikus invázió, nyirokcsomó metasztázisok, és a tumor szövettani. Eredményeink összhangban vannak azoknak Wang et al. akik arról számoltak be, hogy a kifejezés Nrf2 az epehólyag rák szignifikánsan összefüggött a differenciálódás, színpad, és a nyirokcsomó metasztázisok [23]. A közelmúltban katalógusa Xiu-Freg Hu et al. Hasonlóan vizsgált Nrf2 kifejezés gyomorrákban [26]. Azt is felvetették, prognosztikai jelentősége Nrf2 kifejezés összhangban eredményeink. Azonban azt jelentette, hogy Nrf2 immunreaktivitás volt kimutatható a citoplazmában hanem azt, hogy nem volt kimutatható a sejtmagban. Ez az eltérő eredmény oka lehet, hogy az a tény, hogy használják a különböző antitestek azok, használt a jelen tanulmányban. Azt jól dokumentált tény, hogy Nrf2 fejti ki antioxidáns képesség csak akkor, amikor a sejtmagba a citoplazmából [27]. A immunblot analízis azt mutatta, hogy Nrf2 volt túlnyomórészt jelen a sejtmagban a sejtek a gyomor rákos sejtvonalak. Ezért úgy vélték, hogy a tartós overexpressziója Nrf2 a sejtmagban gyomorrák sejtek valószínűleg dolgozott egy antioxidáns, amely védi a gyomor rákos sejtek ROS, és hogy Nrf2 nukleáris kifejezés utalhat az agresszív viselkedés a gyomorrák. Ennek alapján ezt az elméletet, alapvető fontosságúnak tartja, hogy értékelje a nukleáris, de nem citoplazmatikus expresszióját Nrf2 klinikai mintákban a gyomorrák.
Ebben a tanulmányban azt mutatták, prognosztikai értékének Nrf2 kifejezése egyváltozós elemzés. Bár Nrf2 pozitivitást nem választotta független prognosztikai többváltozós elemzés, ez a megállapítás az lehet a magyarázata annak lehetőségét, hogy Nrf2 pozitivitás szignifikánsan befolyásolta nyirokcsomó-érintettség, melyet tekinthető rossz prognózisú. Solis et al. és Wang et al. Hasonlóképpen számolt be, hogy Nrf2 expresszió társított az általában gyenge túléléssel a nem-kissejtes tüdő-karcinóma [21], és az epehólyag rák [23], ill. Ezek az adatok azt sugallják, hogy Nrf2 kifejezés lehet használni, mint egy jelentős prognosztikai paraméter előrejelzése a túlélés a posztoperatív gyomor rákos betegek.
Újabban leírták, hogy a magas Nrf2 expresszió megkönnyítése, és meghosszabbítja a rákos sejtek túlélését következő daganatellenes kemoterápia és sugárkezelés [14,16,19-22,28-33]. Eredményeink azt mutatták, hogy a pozitív is Nrf2 expresszió szignifikánsan rezisztenciával összefüggő 5FU alapú adjuváns kemoterápiát. Ezek a kombinált eredmények arra utalnak, hogy az a kifejezés kiértékelésének szintjét Nrf2 a sejtmagban gyomorrák sejtek, lehetséges lenne megjósolni a legjobb jelölteket, aki élvezi részesülő nemcsak adjuváns kemoterápia hanem neoadjuváns kemoterápia. Katalógusa genetikai vagy funkcionális gátlása Nrf2 kimutatták, hogy eredményeként a elnyomás celluláris Nrf2 -regulated antioxidáns enzimek, beleértve a celluláris glutation, tioredoxin és nem-fehérje tiolok. Végső soron ezek a változtatások is visszaállítja a daganatos sejtek érzékenysége a rákellenes gyógyszerek és sugárkezelés. Így Cho és mtsai. számolt be, hogy a funkcionális gátlása Nrf2 vezet szenzibilizálja a rákos sejteket, hogy az alkiláló rákellenes szerek [31]. Továbbá, Ma és mtsai. számolt be, hogy a kombináció a ciszplatin és kiütése Nrf2 drámaian és szignifikánsan gátolta a tumor növekedését in vivo [22].
Figyelembe ezeket a bizonyítékokat figyelembe véve, nagyon valószínű, hogy az új kemoterápiás protokoll, amely magában foglalja a Nrf2 szabályozás kerül bevezetésre a közeli jövő. Például a kemoterápia hatékonyságát lehetne első által előre jelzett értékelését Nrf2 expresszióját, és ha bármely Nrf2 pozitív betegek értékelik, hogy a rezisztens a kemoterápiára, akkor lehet, hogy lehetséges, hogy elérjék megfelelő hatékonyság a kemoterápia egyidejű gátlása Nrf2. Ezért új kemoterápiás protokoll, amely magában foglalja az antioxidáns terápia lehet egy hasznos módszer a megoldására egy klinikai probléma.
Következtetések
Nrf2 kifejezés szorosan kapcsolódik a klinikopatológiai faktorok és a gyomorrák prognózisa betegeknél. Nrf2 expresszió gyomorrák hasznosak lehetnek értékelésére biológiai malignus potenciál, amely lehet közvetített részben Nrf2 fokozása a antioxidáns képességét gyomor rákos sejteket. Antioxidáns terápia lehet ígéretes megközelítése kezelésére Nrf2 pozitív gyomorrákos betegek. Katalógusa rövidítések katalógusa Nrf2: katalógusa NF-E2 kapcsolatos faktor 2
OS: katalógusa oxidatív stressz
Keap 1: katalógusa Kelch-szerű ECH-asszociált protein 1
ARE:
antioxidáns válasz elem
FBS: katalógusa magzati borjú szérumot
PBS: katalógusa foszfáttal pufferolt sóoldat Matton
TBS: katalógusa Tris-pufferolt sóoldat
TBST: katalógusa TBS-Tween 20
5FU:
5-fluorouracil
ROS: katalógusa reaktív oxigéngyökök
nyilatkozatok katalógusa Köszönetnyilvánítás katalógusa kijelentjük, hogy minden szerző nem részesült Minden szerző elolvasta és jóváhagyta a végleges kéziratot. Katalógusa

• Lymphangiogenezist gyomorkarcinómában szabályozza Akt /mTOR-VEGF-C /VEGF-D axis
• Meghatározói gyomorrák szűrés jelenléti Koreában: egy többszintű analysis