Detektioun vun carcinoembryonic antigen Messenger RNS am Blutt benotzt grouss real-Zäit transcriptase-polymerase Kette Reaktioun ëmgedréint Terrain vun gastric adenocarcinoma ze soe

Detektioun vun carcinoembryonic antigen Messenger RNS am Blutt grouss real-Zäit transcriptase-polymerase Kette Reaktioun ëmgedréint Hëllef um Terrain vun gastric adenocarcinoma VerfÜgung D'Existenz vun libre entholl Zellen (CTCs) zu Randerscheinung Blutt als VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background ze soe Luucht vun entholl Terrain huet kloer etabléiert, besonnesch fir gastric Kriibs Patienten net ginn. Mir hunn eng Retrospektiv Analyse vun der Relatioun tëscht CTCs zu Randerscheinung Blutt um initial Diagnos an clinicopathologic Conclusiounen an Patienten mat gastric carcinoma. VerfÜgung Method VerfÜgung Bluttprouwen aus 123 gastric carcinoma Patienten am initialen Diagnos kritt huet. mRNA war fir carcinoembryonic antigen (CEA) mRNA erkennen mat real-Zäit RT-Hinnen alleguer ofgebaut an Kick. Periodesch 3-Mount Suivi Examen abegraff serum CEA Miessungen an Imaging. VerfÜgung Resultater VerfÜgung De Minimum loung fir Korrektioun CEA mRNA stoung [(CEA mRNA /GAPDH mRNA) × 10 6] op 100 gesat huet. véierzeg-fënnef vu 123 Patienten (36.6%) waren fir CEA mRNA Ausdrock positiv. CEA mRNA Ausdrock vill mat T Etapp an Thes Terrain Status (P VerfÜgung = 0.001) soll. Onbekannt Krankheet huet an 44 vun 123 Fäll (35.8%), an 25 vun dësen (56.8%) waren positiv fir CEA mRNA fonnt. Vun deene Patienten, war CEA mRNA méi sensibel wéi serum CEA zu Terrain ugëtt. Dräi Joer Krankheet-gratis Iwwerliewe vu Patienten positiv fir CEA mRNA war wiesentlech méi aarmen wéi vun Patienten negativ fir CEA mRNA (P VerfÜgung &Si besteet; 0.001). Nëmmen sech histological Schouljoer an CEA mRNA komm onofhängeg Facteure fir Krankheet-gratis Iwwerliewe multivariate Analyse benotzt. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung CEA mRNA Zuel vun Randerscheinung Blutt um initial Diagnos Kopie vill mat Krankheet Terrain zu gastric adenocarcinoma Patienten verbonne war. Real-Zäit RT-Hinnen alleguer ze erkennen CEA mRNA Niveauen am initialen Diagnos ebenfalls gastric adenocarcinoma Patienten eng villverspriechend Estimatioun fir Krankheet Terrain ze ginn. VerfÜgung Background VerfÜgung Gastric Kriibs den Haaptfiguren Ursaach vum Kriibs veruerteelt weltwäit an der 20. Joerhonnert blouf. Déi eenzeg bewisen curative Behandlung ass chirurgesch resection vun all consomméiert a microscopic lesions. Mä trotz curative gastrectomy amgaang, dorënner verlängert lymph Node dissection an adjuvant Chimiotherapie, recurs Kriibs zu souwuel regionaler wéi och wäit ewech vu Siten zu Majoritéit vun de Patienten [1]. Diagnos vum Terrain mat gemeinsam Suivi Ëmwelt- normalerweis bei engem spéiden Etapp gemaach ass, deen, fir eng Mooss, d'Méiglechkeet vun efficace Behandlung precludes [2]. Iwwerwaachung vun entholl Zellen (CTCs) libre schéngt fir virdrun Diagnos vun onbekannt Krankheet grouss Méiglechkeet ze bidden. VerfÜgung D'Konzept vun der metastatic Prozess zu Randerscheinung Blutt am 19. Joerhonnert entstanen enquêtéiert wann T.R. Ashworth beschriwwen éischt de Phänomen vun CTCs, an S. Paget engem Net-zoufälleg Muster vun Kriibs metastasization Hypothes (den "Som a Buedem" Theorie) [3, 4]. Duerno, war d'malignant Natur vun CTCs bestätegt andeems dass se entholl-spezifesch chromosomal geometrescher Figur besëtzen [5, 6] an datt se wuessen ex VIVO als Zell Linnen mat engem malignant phenotype [7]. Puer Approche CTCs z'entdecken goufen beschriwwen a kënnen an Hinnen alleguer-baséiert Methoden an cytometric Methoden séiert ginn [8]. No der Radioastronomie grouss real-Zäit Hinnen alleguer Techniken [9], genee quantification vun engem Zil- Haaptreiestären VerfÜgung ass méiglech . Chemeschen Hinnen alleguer stellt Enquêteuren net nëmme mat technesch Virdeeler, mee och mat applicative Virdeeler, wéi d'Definitioun vun cutoff Wäerter mRNA Ausdrock Niveau vun de Medeziner Relevanz vun Kriibs Patienten am Verglach mat gesonde Sujeten ugëtt. Real-Zäit Hinnen alleguer, wou och d'Méiglechkeeten Zil--Haaptrei opbauen mat Medeziner Resultat vun correlating [10] oder Äntwert ze Therapie [11]. VerfÜgung CEA, ursprénglech als entholl-verbonne beschriwwen Colon Kriibs antigen, war vun 1987 gekloonten an ass elo als Member vun der immunoglobulin FAQ superfamily unerkannt [12]. Vill Studien hu erkennen gastric Zellen am Blutt gemellt [13], Schanken hiirgestallt [14], an peritoneal wäschen [15] vun gastric Kriibs Patienten déi fir CEA mRNA real-Zäit Hinnen alleguer benotzt. VerfÜgung D'Zil vun dëser Etude war fir d'Effikacitéit vun der CEA mRNA real-Zäit Hinnen alleguer Technik fir fréi ze erkennen entholl Terrain diskutéieren. Fir dëst Zil ze treffen, d'Relatioun tëscht Medeziner Terrain a Blutt Niveau vun CEA mRNA preoperatively war zu gastric adenocarcinoma Patienten iwwerpréift. VerfÜgung Method VerfÜgung kennen VerfÜgung Schrëftlech Awëllegung vun all Patient op de Gebrauch vun Bluttprouwen kritt huet fir Fuerschung am Aklang mat der institutioneller Richtlinnen vun eisem Spidol. Tëscht Februar 2002 an Dezember 2006, goufen am Ganzen 123 Nuechten Patienten mat gastric adenocarcinoma am Cancer Center vun Sun Yat-sen Universitéit an dëser Etude Coursë. All Patienten scho radikal resection an D2 lymphadenectomy. Op Valeur 15 lymph Wirbelen sech fir d'Detectioun sinn. Nee peritoneal Publikatioun war fonnt. Kloer records vun serum CEA änneren an Imaging Evaluatioun virun der Operatioun, an all dräi Méint no der Operatioun waren néideg. Patienten déi positiv lymph Node hu sech bewosst adjuvant Chimiotherapie ze kréien mee schlussendlech nëmmen uechtzeg-dräi Patienten mécht adjuvant Chimiotherapie goen. D'regimens abegraff CAPOX (Capecitabine + Oxaliplatin, 16 Fäll, mat engem Steiren Zyklus vu 4), folfox6 (56 Fäll, mat engem Steiren Zyklus vun 6), ëmgedréint + cisplatin (4 Fäll, mat engem Steiren Zyklus vu 4), ëmgedréint + 5FU /CF (Fluorouracil /Leucovorin, 7 Fäll, mat engem Steiren Zyklus vun 6). Onbekannt Krankheet, dorënner lokal Réckwee an fernen Investitiounen, war vun berechnen tomography Ënnersichung fonnt. New lesions vun Imaging Examen am Suivi Rendez fonnt goufen den Terrain erauskoum. Fro war net Zäitche gemaach histological Terrain ze bestëmmen. All Imaging war vun op d'mannst zwee onofhängeg Observateuren, dorënner radiologists bewäert. D'Steiren Suivi Period war 37,0 Méint (Rei, 3.0-73.6 Méint). VerfÜgung Bluttprouwen VerfÜgung Bluttprouwen am initialen Diagnos gesammelt goufen een oder zwee Deeg virun der Chirurgie. Déi éischt 3 ml vu Blutt war discarded epidermal kontaminéierte ze verhënneren, an dann e 5-ml Blutt Prouf war vun der Randerscheinung verfeelt kritt. Randerscheinung Blutt Echantillon vun 30 Net-Kriibs Patient Fräiwëlleger kritt sech als negativ Kontrollen benotzt VerfÜgung All Patienten schrëftlech informéiert Zoustëmmung gëtt. mir kritt trennen Erlaabnes fir Benotzung vun Blutt Prouf. Etude averstaane war vun onofhängege Ethik Comitée am Cancer Center vun Sun Yat-Sen Universitéit krut. D'Etude gouf am Aklang mat der ethesch Normen vun der World Medical Association Deklaratioun vun Helsinki land. VerfÜgung Pre-Veraarbechtung vun Bluttprouwen VerfÜgung Bluttprouwen waren an héich-haltege iech gesammelt. Sample Veraarbechtung war bannent 2 Stonnen no Blutt Réckzuch gesuergt. Blutt huet an engem 30-ml falcon Rouer transferéiert a fir 20 Minutten an 1800 Ziichter bei Raumtemperatur centrifuged. Serum gouf geläscht, an Zellen sech an 5 ml Salins an 0.3 ml RNS spéit Léisung resuspended. No Vermëschung gutt, war d'Blutt Zell Mëschung bei -80 ° C Nuecht op 4 ° C an gespäichert gehaalen bis benotzt. VerfÜgung RNS erauszéien a cDNA Synthes VerfÜgung Total RNS vun Randerscheinung Blutt Echantillon war mat RNAprep Zell Kit Quecksëlwer (Tiangen , Peking, China) folgenden de Protokoll vun der Produktioun gëtt. RNS Integritéit vun electrophoresis a laachen vun Tellur am 260 a 280 nm mat engem UV-siichtbar spectrophotometer (Beckman Coulter Du ® 800, Fullerton, CA) konsultéiert gouf. Fir ëmgedréint Transkriptiouns, 1 μg vun insgesamt RNS, 1 μL Oligo (DT) 15 an 1 μL dNTP sech zu 10 μL RNase-gratis Waasser, incubated 10. Minutt op 37 ° C an 1 μL vun 25 mmol /L héich war dobäi verdënntem. Eng 11 μL aliquot vun Reaktioun Mëschung war bei 65 ° C fir 10 Minutten incubated a séier no 2 Minutten op Äis Feierowend. cDNA war bei -80 ° C gespäichert bis benotzt. cDNA Synthes Leeschtung war d'TIANScript M-MLV Method benotzt (Tiangen Biotech, Peking, China). VerfÜgung Zell Linnen VerfÜgung fir CEA-spezifesch RT-Hinnen alleguer, zwee Zell Linnen, stellare-480 (Colon Kriibs Zell Linn ze preparéieren ) an SC-7901 (gastric Kriibs Zell Linn) gebraucht goufen. Lymphocytes sech aus gesond Fräiwëlleger ouni epithelial malignancy gesammelt. No lymphocytes aus Randerscheinung Blutt vun packt centrifugation isoléiert huet, war d'mononuclear Zell futti gesammelt. Zell Strecken serially verdënntem (10-fantastesch) an 2 × 10 7 bis 5 × 10 7 lymphocytes ginn carcinoma Zell: vun 1:10 bis 1:10 rangéiert nennen lymphocyte 7.
CEA mRNA Analys vum Real-Time Chemeschen Hinnen alleguer VerfÜgung Chemeschen Hinnen alleguer war mat der liichtkraaftarm heescht System, Abi PRISM 7500 (Obwuel Biosystems 7500 Fast Real-Time Hinnen alleguer System) gesuergt. Hinnen alleguer primers an der TaqMan Ämter goufen entworf Primer Express 1.0 Software Programm benotzt. An dëser assay, war d'housekeeping Gentherapie glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) wéi eng intern Kontroll benotzt ofgebaut Variatiounen an Integritéit an der Héicht vun RNS ze normaliséieren. D'real-Zäit Hinnen alleguer assays fir GAPDH an CEA sech zu trennen iech gemaach. CEA mRNA Wäerter sech géint GAPDH mRNA Wäerter ugepasst, an der famill CEA mRNA Fändelen sech als (CEA mRNA /GAPDH mRNA) × 10 6 fir all Prouf presentéiert. VerfÜgung 5 μL vun der Prouf cDNA fir real- benotzt gouf Zäit Hinnen alleguer an engem 20 μL Mëschung Reaktioun aus 10 pmol passenden primers (Invitrogen Kooperatioun, Japan) an 5 pmol TaqMan Studiebäihëllefe (Invitrogen Kooperatioun, Japan). De Rapporteur Hoerfaarw (6-carboxy-fluorescein: FAM) war covalently de 5 verbonnen 'Enn vun de Studiebäihëllefe, an der quencher Hoerfaarw (6-carboxy-tetramethyl-rhodamine: TAMRA) war fir d'3 verbonnen' Enn vun de Studiebäihëllefe. D'Temperatur Profil fir amplification benotzt huet wéi follegt: denaturation fir 1 Semester bei 95 ° C fir 10 Minutten, fir 10 Sekonnen op 95 ° C vun 40 Zykle duerno, 60 ° C fir 15 Sekonnen, an 72 ° C fir 5 Sekonnen. Quantification war vun der Abi Prism 7500 liichtkraaftarm heescht System gemaach. All Saz vun Echantillonen an serially-verdënntem extern Kontrollen waren am zweete Kick. Der Moyenne vun de Retard war als grouss Wäert benotzt. VerfÜgung A CEA-spezifesch oligonucleotide primer baséiert op de Rapport vun Gerhard entworf gouf et al. VerfÜgung [16]. De Message huet: 5'-TGTCGGCATCATGATTGG-3 "(Senn) an 5'-GCAAATGCTTTAAGGAAGAAGC-3" (antisense). Unisse an LC-Red Studiebäihëllefe e Message fir CEA Identifikatioun benotzt goufen: 5'-CCTGAAATGAAGAAACTACACCAGGGC-fluorescein an 5'-LC-Red 640-GCTATATCAGAGCAACCCCAACCAGC-phosphate VerfÜgung Real-Zäit Hinnen alleguer Iwwerwaachung duerch Miessunge der fluorescence Signal um Enn erreecht gouf. vun annealing Phase vun all Cycle. D'primer Message fir GAPDH amplification benotzt goufen: 5'-TGAACGGGAAGCTCACTGG-3 "(Senn) an 5'-TCCACCACCCTGTTGCTGTA-3" (antisense). D'Studiebäihëllefe e Message fir GAPDH Identifikatioun benotzt goufen: 5'-TCAACAGCGACACCCACTCCT-fluorescein an 5'-LC-Red 640-CACCTTTGACGCTGGGGCT-phosphate VerfÜgung Entschlossenheet vun CEA zu serum Echantillon VerfÜgung Pre-grënnen serum Echantillon och fir assaying benotzt goufen. entholl CEA Bissau eng kommerziell sinn Aktivitéit immunoassay Kit benotzt (Cobas Haaptentwéckler EIA, Roche, Basel, Schwäiz). . Agebousst cutoff Niveau war um 5 NG gegrënnt /ml fir serum CEA VerfÜgung statistique Analysë VerfÜgung D'Kaplan-Meier statistesch Method fir analyséiert Medeziner Fonctiounen an Terrain benotzt gouf; Differenzen sech mat der Läschlëscht-Platz Test geschat. Prognostic Facteure sech duerch univariate an multivariate Analysë (umellen-Platz Test fir univariate Analyse an Cox proportional Risikoe Réckgang Modell, hannen stepwise (geplangten LR) fir multivariate Analyse) iwwerpréift. Den Chi-wäissfeldreg an Fisher genau Tester goufen fir statistesch Analyse benotzt. All Statistik analyséiert goufen mat SPSS16.0 gemaach. . All P Wäerter goufen 2-tailed, an de Niveau vun Bedeitung bei 0,05 opgeriicht VerfÜgung Resultater VerfÜgung Séminairen Fonctiounen VerfÜgung Den 123 an der Etude iwwregens Patienten am Alter vun 28 bis 84 Joer (schwätzen, 57,11 Joer; Steiren, 59 Joer), an d'Verhältnis vun Männercher ze Weibercher war 82:41 (Table 1). Stadium Leeschtung war no der entholl-Node-Metastasen (TNM) Klassifikatioun vun der American Gemeinsam Comité op Cancer (AJCC, iwwerschafft 1997). Twenty-véier erhéijen an der Cardia, 3 vun der gastric fundus, 44 an der gastric Corpus, 45 an der gastric antrum etabléiert huet, Équipe 5 ganzt Mo, an 2 goung un de Rescht gastric carcinoma (Table 1) .Table 1 Clinicopathologic Fonctiounen an CEA * mRNA fonnt Ausdrock vun real-Zäit RT-Hinnen alleguer VerfÜgung Charakteristiken VerfÜgung Total Zuel VerfÜgung (N = 123) VerfÜgung
CEA mRNA
P Wäert
positiv VerfÜgung (n = 45)
Negativ VerfÜgung (n = 78) VerfÜgung
Alter VerfÜgung ≤40 VerfÜgung 13 VerfÜgung 3 VerfÜgung 10 VerfÜgung 41-50 VerfÜgung 20 VerfÜgung 9 VerfÜgung 11 VerfÜgung 51-60 VerfÜgung 39 VerfÜgung 9 VerfÜgung 30 VerfÜgung 61-70 VerfÜgung 42 zu 18 zu 24 VerfÜgung > 70 VerfÜgung 9 VerfÜgung 6 VerfÜgung 3 VerfÜgung 0,063 VerfÜgung Sex
Weiblech VerfÜgung 41 zu 12 zu 29 VerfÜgung Männlech VerfÜgung 82 zu 33 zu 49 VerfÜgung 0,234 VerfÜgung entholl VerfÜgung T1 VerfÜgung 10 VerfÜgung 6 VerfÜgung 4 VerfÜgung T2 VerfÜgung 16 VerfÜgung 3 VerfÜgung 13 VerfÜgung T3 VerfÜgung 73 zu 26 zu 47 VerfÜgung T4 VerfÜgung 24 zu 10
14 VerfÜgung 0,001 VerfÜgung Lymph Node VerfÜgung 31 VerfÜgung N0 VerfÜgung 11 zu 20 VerfÜgung N1 VerfÜgung 43 zu 15 zu 28 VerfÜgung N2
zu 8 VerfÜgung 21 VerfÜgung N3 VerfÜgung 20 zu 11 VerfÜgung 9 VerfÜgung 0,261 VerfÜgung Pathologic TNM # Etapp VerfÜgung ech 16 VerfÜgung 7 VerfÜgung
9 VerfÜgung II VerfÜgung 21 VerfÜgung 6 VerfÜgung 15 VerfÜgung III VerfÜgung 51 zu 17 zu 34 VerfÜgung IV VerfÜgung 35 zu 15 VerfÜgung 20 VerfÜgung 0,623 VerfÜgung Histologie subtype VerfÜgung Ma ënnerscheet adenocarcinoma VerfÜgung 3 VerfÜgung 1 VerfÜgung 2 VerfÜgung Mëttelméisseg adenocarcinoma ënnerscheet VerfÜgung 27 VerfÜgung 7 VerfÜgung 20 VerfÜgung LINN ënnerscheet adenocarcinoma VerfÜgung 93 zu 37 zu 56 VerfÜgung 0,418 VerfÜgung Serum CEA Conditioun VerfÜgung positiv VerfÜgung 30 zu 11 zu 19 VerfÜgung Negativ VerfÜgung 93
zu 59 VerfÜgung 0,992 VerfÜgung Terrain VerfÜgung Jo VerfÜgung 44 zu 25 zu 19 VerfÜgung Nee VerfÜgung 79 zu 20 zu 59 VerfÜgung 0,001 VerfÜgung Modes vum Terrain VerfÜgung lokalen Terrain VerfÜgung 8 VerfÜgung 4 VerfÜgung 4 VerfÜgung postwendend misse Discours VerfÜgung 9 VerfÜgung 6 VerfÜgung 3 VerfÜgung Liewer VerfÜgung 8
5 zur VerfÜgung 3 VerfÜgung RNT VerfÜgung 6 VerfÜgung 3 VerfÜgung 3 VerfÜgung Abberzuel Siten VerfÜgung 10 VerfÜgung 5 zur VerfÜgung 5 zur VerfÜgung anerer VerfÜgung 3 VerfÜgung 2 VerfÜgung 1 VerfÜgung 0,959 VerfÜgung * Carcinoembryonic antigen VerfÜgung # TNM entholl-Node-Metastasen VerfÜgung Detektioun Empfindlechkeet vun CEA mRNA vun real-Zäit RT-Hinnen alleguer VerfÜgung CEA mRNA war zu stellare fonnt ADR -480 an SC-7901 Zell Linnen. Der ënneschter Limite vun erkennen ass eng Usammlung vun 10 entholl Zellen pro 10 7 lymphocytes. Konventionell gemaach RT-Hinnen alleguer war ugestallten der Empfindlechkeet vun den RT-Hinnen alleguer Produit ze confirméieren. VerfÜgung CEA mRNA Ausdrock am Blutt VerfÜgung CEA mRNA Ausdrock vun 9 vu 30 (30.0%) Net-Kriibs Patienten, an déi heeschen nogewise gouf Korrektioun CEA mRNA stoung et 7.5 (Rei, 0-92.5). Déi maximal Wäert vun korrigéiert CEA mRNA stoung an Patienten ouni war malignancy 92,5, also eng cutoff Wäert vun 100 war am Moment Etude benotzt. Anhand cutoff Wäert, 45 Patiente (36.6%) huet als CEA mRNA-positiv diagnostizéiert. Déi heeschen korrigéiert CEA mRNA stoung [(CEA mRNA /GAPDH mRNA) × 10 6] vun der 123 Patienten war 37,510.0 (Rei, 0-3,695,652.1) Exemplare 1 Dorënner der Verdeelung vun (CEA mRNA /GAPDH mRNA) zougedréckt × 10 6 zu dëser Grupp vu Patienten. Figur 1 D'Verdeelung vun CEA Ausdrock Niveau. D'Verhältnis heescht (CEA mRNA /GAPDH mRNA) × 106. Sou Verhältnis vun e puer Patienten null waren, mir 0,5 op der Verhältnis notéiert. VerfÜgung Bezéiung tëscht CEA mRNA Ausdrock an clinicopathologic Fonctiounen VerfÜgung CEA mRNA Ausdrock net mat hutt vergläichen Alter, Geschlecht, N Etapp, TNM Etapp, histological subtype an serum CEA Bedingung (Table 1). Allerdéngs, Patienten mat Thes Terrain hu wiesentlech méi héich Prozentsaz vun CEA mRNA positiv wéi déi ouni entholl Terrain (P VerfÜgung = 0.001) (Table 1). Nieft, och entholl Déift positiv mat CEA mRNA Ausdrock (P VerfÜgung = 0.001). VerfÜgung Bezéiung tëscht Terrain an CEA mRNA Ausdrock och soll den serum CEA VerfÜgung De Modus vun Terrain 8 lokal Terrain, 9 postwendend misse Weiderleede ëmfaasst ausser Liewer, 8 Liewer Metastasen, 6 RNT Metastasen, 3 aner Siten Metastasen an 10 Metastasen Multiple Siten. Et ass keen groussen Ënnerscheed tëschent der CEA mRNA Ausdrock an de Modus vun Terrain (Table 1). VerfÜgung onbekannt Krankheet huet an 44 vun 123 Fäll (35.8%) fonnt. Twenty-fënnef vun dëse Patienten (56.8%) waren CEA mRNA-positiv. Par contre, waren nëmmen 14 Patiente mat onbekannt Krankheet (31.8%) positiv fir preoperative serum CEA. D'Charakteristika vun CEA mRNA an serum CEA Terrain ze charakteriséieren sech 74,7% an 79,9%, respektiv. (Table 2) .Table 2 Se tëscht CEA * mRNA an serum CEA zu Terrain en VerfÜgung zu CEA mRNA
Serum CEA

Positive

Negative

Positive

Negative

Recurrence
Yes
25
19
14
30
Nee VerfÜgung 20 zu 59 zu 16 zu 63 VerfÜgung P
0,001 VerfÜgung 0,152 VerfÜgung X VerfÜgung 2 VerfÜgung 12,088 VerfÜgung 2,050
Empfindlechkeet (%) VerfÜgung 56,8 VerfÜgung 31,8 VerfÜgung Spezifizitéit (%) VerfÜgung 74,7 VerfÜgung 79,7 VerfÜgung * Carcinoembryonic antigen VerfÜgung Univariate an multivariate Analysë vun 3-Joer Krankheet-gratis Iwwerliewe
De 5-Joer war allgemeng Iwwerliewe 58,9% an 3-Joer Krankheet gratis Iwwerliewe war 63,9%. Béid univariate an multivariate analyséiert goufen benotzt Faktore ze diskutéieren Krankheeten-gratis Iwwerliewe Liewewiesen. Laut univariate Analyse, Alter, entholl Déift, goufen nodal Metastasen, histological Schouljoer, TNM Etapp, CEA mRNA komm an serum CEA komm Krankheeten-gratis Iwwerliewe (P VerfÜgung vill ze dinn = 0,031, &Si besteet; 0,001, 0,001, 0,022, &Si besteet; 0,001, 0,001, 0,045 bzw.) (Table 3). Multivariate Réckgang Analyse weisen, datt nëmmen histological Schouljoer an CEA mRNA komm waren onofhängeg Facteure fir Krankheet-gratis Iwwerliewe (P VerfÜgung = 0,047 an 0,020, respektiv, Table 4). Dräi Joer Krankheet-gratis Iwwerliewe Tariffer fir CEA mRNA-positiv Patienten goufen däitlech méi niddreg wéi fir CEA mRNA negativ Patienten (43.9% versus 74,1%, respektiv, P VerfÜgung = 0,001, Dorënner 2) .Table 3 Univariate Analyse vun disease- gratis Iwwerliewe vun Gastric carcinoma VerfÜgung Parameter
Genau-gratis Iwwerliewe, P valuea
Alter VerfÜgung &Si besteet; 59 vs. ≥59 VerfÜgung 0,031
Geschlecht VerfÜgung Männlech vs. weiblech VerfÜgung 0,433 VerfÜgung CEA mRNA VerfÜgung (+) vs. (-) VerfÜgung 0,001 VerfÜgung Serum CEA VerfÜgung (+) vs. (-) VerfÜgung 0,045 VerfÜgung Histological Schouljoer VerfÜgung Ma /mëttelméisseg vs. schlecht VerfÜgung 0,022 VerfÜgung pT VerfÜgung pTis /pT1 vs. pT2 /pT3 /pT4 VerfÜgung &Si besteet; 0,001 VerfÜgung pN
(+) vs. (-) VerfÜgung 0,001 VerfÜgung Etapp VerfÜgung 1/2 vs. 3/4 VerfÜgung &Si besteet; 0,001 VerfÜgung Adjuvant Chimiotherapie Agenten VerfÜgung CAPOX vs. mFOLFOX6 vs. ëmgedréint + DDP vs. ëmgedréint + 5Fu /CF VerfÜgung 0,850 VerfÜgung e Log-Platz Test VerfÜgung Table 4 Multivariate Analyse vun Krankheet-gratis Iwwerliewe vun gastric carcinoma VerfÜgung fir op
Charakteristiken VerfÜgung Hazard Verhältnis
95% CI
P VerfÜgung value

Unfavorable

Favorable

Age
≥59
<59
1.018
0.986-1.050
0.273
Histological grade
Poorly
Well/moderately
0.412
0.171-0.990
0.047
pT
2/3/4
Tis/1
1.673
0.100-8.690
0.947
pN
(+)
(-)
2.030
0.264-15.611
0.497
Stage
3/4
½
1.437
0.124-16.613
0.771
CEA mRNA VerfÜgung (+) VerfÜgung (-) VerfÜgung 2,243 VerfÜgung 1.138-4.424 VerfÜgung 0,020 VerfÜgung Serum CEA VerfÜgung (+) VerfÜgung (-) VerfÜgung 1,130
0.582-2.194 VerfÜgung 0,717 VerfÜgung CI, Vertrauen nolauschterer; PT, Déift vun entholl Invasioun VerfÜgung 2 Schauspiller-gratis Iwwerliewe vu Patienten Well laut CEA mRNA Ausdrock. Dräi Joer Krankheet-gratis Iwwerliewe vun CEA mRNA-positiv Patienten war wesentlech méi déif wéi déi vun CEA mRNA-negativ Patienten (43.9% versus 74,1%, respektiv; P VerfÜgung = 0.001). VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung der Halleffinale -quantitative Natur vun traditionell Hinnen alleguer Technologie huet et schwéier baseline Gentherapie Ausdrock Niveauen an normal Stoffer aus fräi Gentherapie Ausdrock Niveauen an Kriibs ze differenzéieren, domat d'Suerg fir falsch-positiv Resultater waarden [17]. An eiser Etude, war real-Zäit Hinnen alleguer vun CEA mRNA benotzt d'Méiglechkeet vun Randerscheinung Blutt als Quell fir CTC Detectioun an Cepheid vun Kriibs Terrain zu gastric carcinoma Patienten ze ermëttelen. Real-Zäit grouss CEA mRNA Analyse zu Kriibs Patienten ass oft baséiert op CEA mRNA komm gesuergt, deen e cutoff Niveau alles ass mat [13]. CEA mRNA kann an Patienten mat benign Krankheet souwéi gesond Fräiwëlleger nogewise ginn, sou de cutoff Niveaue gi meeschtens vun maximal Ausdrock an Net-malignant Patienten sech [18, 19]. Setoyama T et al. fonnt, dass sech d'maximal Wäert vun CEA mRNA zu Patienten ouni malignancy 8,6, setzen se dofir d'cutoff Wäert als 9.0 [20]. Schuster R et al. [21] benotzt och d'maximal Wäert vun gesond Fräiwëllegen Hannergrond wéi de präventive Wäert fir d'CEA mRNA Detectioun an colorectal Kriibs Patienten. An eiser Etude, déi mer och de Maximum Wäert vun korrigéiert CEA mRNA stoung an Patienten ouni malignancy wéi d'cutoff Wäert. engem cutoff Wäert vun 100 fir normalized CEA mRNA Niveauen Andeem, kann mer Kriibs Patienten aus Net-Kriibs Patienten an, also, méi Sécherheet ze hëtzen Ausdrock vun CEA mRNA als Bewaacher vun libre entholl Zellen z'ënnerscheeden. VerfÜgung Mir hunn erausfonnt, datt 10 Patienten mat T1 entholl no 6 Patienten positive CEA-mRNA Ausdrock. Mä nee Rekord vum Terrain war an der 10 Patiente fonnt. Et schéngt, datt et tëscht den CEA mRNA Ausdrock an um Terrain keng Relatioun zu T1 entholl ass. Et ass schwéier d'héich positiven Taux vun CEA-mRNA zu T1 Patienten ze erklären, mä mir fonnt, datt d'CEA mRNA Ausdrock an der 6 T1 Patienten héich war, rangéiert vun 4320 Exemplairen zu 44 600 Exemplairen. Ikeguchi M [22] gemellt, dass 12,5% vun der Etapp ech gastric carcinoma Patienten CK20 mRNA ausgedréckt a si geduecht, datt et déi eng kleng CK20 Ausdrock vun Randerscheinung wäiss Blutt Zellen entschlof war. VerfÜgung grappvoll Rapporten zurzäit hunn d'Konditioun vun CTCs zu gastric carcinoma Patiente virun Behandlung. Ikeguchi an Kaibara gemellt [23], datt se net all Kriibs Zellen zu Randerscheinung Blutt aus onbehandelt gastric carcinoma Patienten fanne kéint. D'Auteuren spekuléieren, datt Kriibs Zellen schéngen net einfach aus der Primärschoul erhéijen an Patienten mat onbehandelt gastric carcinoma dem Randerscheinung Blutt opgeholl. Par contre, Miyazono et al. VerfÜgung [24] weisen, datt de positiven Taux fir CEA mRNA vun gastric carcinoma Patienten 8,8% virun der Operatioun war. D'Präsenz vun CTCs virun Behandlung an seng Relatioun mat Medeziner Resultat bleift also ënnerschiddlech. An dëser Etude, évaluéiert mir de Medeziner Bedeitung vun CTCs am Blutt virun Exploitatioun vun real-Zäit RT-Hinnen alleguer mat Ausdrock vun CEA mRNA z'entdecken. De positiven Taux vun CEA mRNA virun all Behandlung ass 36,6%. Weider Fichier 1 weist de positive Taux vun mRNA lues aus Literatur fir ze erkennen entholl Zellen vun real-Zäit RT-Hinnen alleguer. VerfÜgung O'Sullivan et al. VerfÜgung [25] ugeholl datt preoperative erkennen micrometastasis spigelen kann entweder flüchteg Environnement vun Zellen, metastatic Potential, oder Reschtoffall Krankheet. Am Moment studéieren, hunn mir dass CTCs am Blutt festgestallt goufen, ier Behandlung a Relatioun zu Terrain. Puer Reportagen bewisen hunn, dass preoperative erkennen Kriibs Zellen vun libre eng kloer Bewaacher vun aarme Patient Iwwerliewe war, well vill Fäll mat Kriibs Zellen libre preoperatively entweder Metastasen oder wäiter Metastasen verlängert lymph Node zougedréckt, domat hätt vun esou Patienten war aarmséileg [26-28 ]. Am Moment studéieren, hunn mir dass den Ausdrock vun CEA mRNA Krankheeten Terrain vill ze dinn huet. Ausserdeem, Patienten mat positive CEA mRNA hat kuerz 3-Joer Krankheet-gratis Iwwerliewe Resultat. D'Heefegkeet vun Terrain war wiesentlech méi héich an Patienten positiv fir CEA mRNA wéi an deenen negativen. D'Empfindlechkeet vun CEA mRNA Ausdrock VerfÜgung Terrain ze soe just 56,8% ass. Nonzéng vun siwwenzeg-aacht Patienten (24.4%) mat negativen CEA mRNA Ausdrock haten entholl Terrain. Setoyama et al. VerfÜgung [20] weisen dass 8 vun 69 (11.6%) esophageal carcinoma Patienten mat negativen CEA mRNA Ausdrock entholl Réckwee haten, a 6 Patienten lymph Node Terrain haten. Een oft benotzt Erklärung vun erkennen Echec ass, dass libre Zellen sinn net homogeneously verdeelt an Net-kontinuéierlech an Circulatioun datts [29, 30]. Ausserdeem, déi ideal Bewaacher (keng illegitim Ausdrock am Blutt, héich Ausdrock vun entholl Zellen) ass nach net fonnt ginn. Dozou CEA mRNA, aner gët, dorënner cytokeratin (CA) 18 [31], Matrixentgasung metalloproteinase (MMP) -7 [32], CK 20 [33], Urokinase-Typ plasminogen activator receptor (uPAR), CK 19 an CK 7 [ ,,,0],34], hunn als potentiell lues vun CTCs probéiert ginn. Mä, soll d'entholl Zell datts relativ seelen Evenement ginn. Sou, ob Randerscheinung Blutt enger gëeegenter unzekräizen fir fréi ze erkennen micrometastases ass ass nach ëmstridden. Aner compartments wéi Réckemuerch hiirgestallt oder postwendend misse Discours sinn bekannt héich Préisser erkennen ze bidden, wahrscheinlech wéinst engem erweiderten Zuel vun entholl Zellen presentéieren [35-37]. VerfÜgung aner wichteg Fro ass falsch positiven Ausdrock vun CEA mRNA. Zwanzeg Patienten (44.4%) déi positiv CEA mRNA Ausdrock haten rauszesichen Terrain an de Suivi Rekord. Ee Grond kënnt der relativ kuerz Suivi Period ginn. VerfÜgung geff, kann dat sinn nawell eng räsonnabel well puer carcinoma datts Zellen an der Glukose verbënnt an mise metastatic Krankheet gelengt [25]. Dës libre Kriibs Zellen vläicht net ze wäit Organer befestegt an kéint net wuessen. Kuerzem, Méhes et al. VerfÜgung [38] propagéieren der Wirklechkeet vun libre Kriibs Zellen a fonnt, datt d'Majoritéit vun Broscht Kriibs Zellen an engem Zoustand vun apoptosis war libre. An der Randerscheinung Blutt vu Kriibs Patienten, war d'Existenz vun de entholl Zell-lymphocyte komplex observéiert [39]. Dës Conclusiounen weg datt macrophages oder lymphocytes hätt eng wichteg Roll an der Aféierungs- vun libre entholl Zell apoptosis an der antitumor immun Äntwert vun de Provider Leeschtung. Dës immunized macrophages kann de cytotoxic T lymphocytes vun de Provider sensitize, an der sensitized T lymphocytes kann de Reschtoffall micrometastatic Kriibs lesions vun de Patienten [23] konzentréiert. Fir dëst Hypothes klären, weider Ermëttlungen der Korrelatioun tëscht der Existenz vun libre Kriibs Zellen an de Provider immun beäntwerte sinn néideg. VerfÜgung Déi aktuell Etude war Retrospektiv Analyse, an Patienten déi adjuvant Chimiotherapie kréien soll sech net Supporter vun Zäit gesat. Generell, Patienten déi positiv lymph Node hu sech bewosst adjuvant Chimiotherapie ze kréien. Bis elo ginn et keng Norm Critèrë fir adjuvant Chimiotherapie vun gastric Kriibs an China. Eis Etude gewisen, datt d'CEA mRNA Kopie Zuel vun Randerscheinung Blutt um initial Diagnos vill mat Krankheet Terrain zu gastric adenocarcinoma Patienten verbonne war. An der Embryone vum Terrain, mir schloen dofir dass Patienten déi positiv CEA mRNA Ausdrock preoperatively hunn kréien adjuvant Chimiotherapie der radikal resection. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung An dëser Etude, war d'Empfindlechkeet vun CEA mRNA méi héich wéi déi vun serum CEA. Ausserdeem, war no multivariate Réckgang Analyse, CEA mRNA komm, eng onofhängeg Faktor fir um Terrain. Déi aktuell Etude confirméiert, datt en esou Method war virun Behandlung an Patienten mat gastric carcinoma fir fréi ze erkennen CTCs villverspriechend; Patienten mat positive CEA mRNA vläicht eng héicht Risiko Terrain hu souguer no curative resection. Allerdéngs ass eng grouss zoufälleg mèi Etude hëllt d'Roll vun CEA mRNA Detectioun an Blutt ze definéieren VerfÜgung Croix VerfÜgung RT-Hinnen alleguer:. VerfÜgung Réckproduktioun Transcriptase-Polymerase Kettereaktioun

CTCs: VerfÜgung libre entholl BTS
CEA: VerfÜgung Carcinoembryonic Antigen
CA19-9:
Glucid Antigen 19-9
TNM: VerfÜgung entholl-Node-Metastasen
AJCC: VerfÜgung American Gemeinsam Comité op Cancer
GAPDH: VerfÜgung Glyceraldehyde 3-Phosphate Dehydrogenase
MMP-7: VerfÜgung MATRIX Metalloproteinase-7 VerfÜgung
zu uPAR:. VerfÜgung urokinase-Typ Plasminogen Activator Receptor
Deklaratioune VerfÜgung Merci VerfÜgung Dës Aarbecht vun National Natural Science Foundation vu China heimat 30672408 finanzéiert gouf, lousoihong Bureau vun der Wëssenschaft an Technologie heimat 2006Z3-E0041 a Sonn Yat-sen University 985 plangen Initiatioun Fund (China). Mir Merci seet de Membere vum Personal an d'Pompjeeën vun Medical Zukunft a gi befënnt Zukunft op Sonn Yat-sen University Cancer Center fir hire Virschlag an Hëllef VerfÜgung Electronic zousätzlecht Material VerfÜgung 12967_2009_529_MOESM1_ESM.DOC Weider Fichier 1:. Data aus Literatur fir Detektioun vun entholl Zellen vun real-Zäit RT-Hinnen alleguer vun mRNA lues. Et weist den positiven Taux vun mRNA lues aus Literatur fir ze erkennen entholl Zellen vun real-Zäit RT-Hinnen alleguer. (Intrigue 58 KB) Auteuren 'original deposéiert Fichieren fir Biller VerfÜgung sinn ennen d'Linken op d'Auteuren' original deposéiert Fichieren fir Biller.

• DNA polymeraseη FAQ Ausdrock renomméierter däitscher Zeitung Behandlung Äntwert an Iwwerliewe vun metastatic Patienten gastric adenocarcinoma behandelt mat oxaliplatin-baséiert chemotherapy
• D'Efficacitéit vun ultrasonography am Placement vun engem nasogastric Rouer an Patienten mat niddereg Bewosstsinn am Noutfall dër center