Lineage elemzés korai és előrehaladott csöves adenokarcinóma gyomor: folyamatos vagy szakaszos?

Lineage elemzése korai és előrehaladott csőszerű adenokarcinómák a gyomor: folyamatos vagy szakaszos?
Abstract
alapon
felszámolása korai gyomor karcinóma (GC) azt gondolják, hogy hozzájárul a csökkenéséhez mortalitása GC, tekintettel arra, hogy a legtöbb a korai GC haladás, hogy a fejlett GC. Azonban a korai GC váltakozva tekinthető nyugvó változata GC, és nagyon ritkán halad a fejlett GC. A vizsgálat célja az volt, hogy tisztázza a átlapolás mértéke genetikai leszármazási közötti korai és előrehaladott csöves adenocarcinoma (kádak) a gyomor. Katalógusa módszerek katalógusa immunhisztokémiai p53 végeztünk 28 műtétileg eltávolított gyomor 13 intramucosalis és 15 invazív kádak. By chromosome- és tömbalapú összehasonlító genomi hibridizáció (CGH), genomi kópiaszámát alkotmányt összehasonlítjuk a nyálkahártya és invazív részeinek invazív kádak között, valamint a nyálkahártya részei invazív és intramucosalis kádak meg, 25 és 22 kádak, ill. TP53 katalógusa mutáció exon 5-8 vizsgáltuk 20 kádak. Katalógusa Eredmények katalógusa kromoszomális CGH kiderült, hogy 4q + és 11q + gyakoribbak voltak a fejlett és a korai kádak, illetve mivel kópiaszám változik 8 q és 17p megmutatta nincs szignifikáns különbség a korai és előrehaladott kádak. Azonban array CGH kiderült, hogy a 13 intramucosalis kádak vizsgált elvesztése MYC katalógusa (MYC katalógusa -) és nyereség TP53 katalógusa (TP53 katalógusa +) mutattunk 9 kádak és MYC
+ és /vagy TP53 katalógusa - 3-ban kimutatták kádak. A nyálkahártya minták 9 invazív kádak, 7 megmutatta MYC katalógusa - /TP53 katalógusa + és egyik sem mutatta, MYC katalógusa + és /vagy TP53 katalógusa -. A 9 származó minták invazív alkatrészek, 1 (nyálkahártya alatti daganatok) kimutatta MYC katalógusa - /TP53 katalógusa + 6 (1 a nyálkahártya alatti és 5 előrehaladott rák) kimutatta MYC katalógusa + és /vagy TP53
-. Az utóbbi 6 tumorok általában mutatott mutáns mintát (diffúz vagy null) p53 immunhisztokémiai, és 4 6 tumorok értékelhetők a TP53
szekvencia analízis kimutatta, mutációk. A teljes tömb CGH minta jelezte, hogy a nyálkahártya és az invazív alkatrészek, genetikai leszármazás találtak szakaszos 5 előrehaladott rákok és folyamatos 3 submucosalis rák.
Következtetések katalógusa genetikai leszármazási gyakran különbözött a korai és előrehaladott kádak. MYC katalógusa - /TP53 katalógusa + és MYC katalógusa + és /vagy TP53 katalógusa - lehet az aláírást a nyugvó és agresszív kádak, illetve a gyomorban. Katalógusa Háttér katalógusa Gyomorrák továbbra is a második leggyakoribb oka a rák összefüggő halálesetek világszerte, annak ellenére, hogy a közelmúltban csökkent a halálozás a fejlett országokban [1]. A gyomor carcinoma (GC) sorolják morfológiailag a 2 fő kategóriába: csöves képző típusától és a diffúz típusú [2, 3], és staging, a korai daganatok (beleértve a nyálkahártya és a nyálkahártya alatti) és előrehaladott rákok (beleértve a muscularis propria vagy mélyebb). Korai GC tekinthető egy kikeményíthető rák [4]; ez állítólag halad a fejlett GC után hosszabb-rövidebb időszakra, mint egy korai szakaszában GC [5, 6]. Japánban, a korai GC lehet aktívan kimetszett endoszkóposan sebészileg [7], elvei alapján a korai felismerés és kezelés. Másrészt, néhány patológusok azt állítják, hogy a cső alakú-képző neoplasztikus léziók, amelyek arra korlátozódnak, hogy a nyálkahártya hosszú időt vesz igénybe, hogy vagy nem tudja, hogy támadják mélyebb szövetekben. Ezáltal ezen elváltozások nevezzük dysplasia [4].
Nemrégiben egy tömeg-szűrési program neuroblasztómák Japánban [8-10] felfüggesztettük, mert egy nem folytonos genetikai Lineage között találtuk a korai és a késői-prezentáló neuroblasztómák. Negatív és késői prezentáló (≥1 év) neuroblastomák megmutatta közel-diploid sejtek elvesztése terminál 1p, míg a pozitív neuroblastomák csecsemők kimutatta közeli triploidia nélkül 1p törlés [11, 12]. Másrészről, az összehasonlító genomiális hibridizáció (CGH) -alapú elemzés azt javasolta, hogy a magas minőségű atípusos adenomatózus hyperplasia a tüdőben az igazi prekurzora bronchioloalveolaris karcinóma [13]. A gyomor, ez egy olyan probléma, hogy milyen mértékben genetikai leszármazás átfedésben van a korai és előrehaladott GC.
Diffúz típusú GC, szoktuk CGH annak bizonyítására, hogy a kromoszóma copy-szám változásokat hozott a intramucosalis pecsétgyűrű sejtes carcinoma, hogy megmutatta réteges felépítésű [14] örökölte töredéke gyengén differenciált GC előrehaladott szakaszában [15]. Jelenléte réteges szerkezete pecsétgyűrű sejtek nyálkahártya ezek részei előrehaladott rákok is javasolta, hogy pecsétgyűrű sejtes carcinoma lehet igazi előfutára gyengén differenciált GC. CGH-alapú lineage elemzés másik részhalmaza rosszul differenciált fejlett GC csöves elemek, de nem réteges szerkezete a nyálkahártya részben kiderült, hogy GC ennek részhalmaza származnak csőszerű alkatrész egy tumor és jellemeztük 17p és 8 q + [16] és inaktiválása a vad típusú TP53
mutáció és a veszteség a heterozigótaság (LOH) [17]. Annak érdekében, hogy meghatározzuk a korai szakaszban megfelelője az ilyen típusú GC, elemeztük intramucosalis csőszerű adenokarcinómák (kádak) használatával CGH. Ezek a vizsgálatok megállapították, hogy a intramucosalis kádak, nem mutattak számos kromoszóma eltérés közös fejlett GC hanem gyakran megmutatta 8q- és 17p +, amelyek kritikusan eltér a fejlett és kevéssé differenciált GC [18].
A jelen tanulmányban a másolást szám változik kromoszómák és gének vizsgálata az nyálkahártya és invazív rész másik sorozat korai és előrehaladott kádak segítségével array CGH és a kromoszóma. Ezen adatok alapján, azt bizonyította esetben folyamatos és szakaszos vonalak között intramucosalis és invazív rész egyes tumorok, és megállapította, hogy a TP53 katalógusa és MYC katalógusa jó lehet sejtvonal markerek gyomor kádak. Katalógusa módszerek
intézményi Review Board on Orvosi Etikai Shiga University of Medical Science jóváhagyó lefolytatására a kutatás azzal a feltétellel, hogy a felhasznált anyagok lehet névtelen.
tumormintákban katalógusa Ez a vizsgálat 28 műtétileg eltávolított gyomor (1. táblázat), 13 intramucosalis dézsa és 15 invazív kádak [6 nyálkahártya alatti és 9. előrehaladott rákok, hogy betört a muscularis propria, vagy mélyebb szövetekben (a csőszerű alkatrészt minden egyes tumor értékelték, hogy több mint 30%)]. Mindegyik gyomrot formaiinban fixáljuk, és paraffinba ágyaztuk. Ezeket véletlenszerűen kiválasztott anyagok diagnosztizált osztályunkon 1996 és 2008 szövettani típusú és tumorstádiumok szerint határoztuk meg a japán osztályozása gyomorrák [19] és pTNM stádium, ill. Amikor egy nyálkahártya szövettani mintát találták heterogén egy egyedi invazív tumor, az a része a legalacsonyabb fokozatú atypism vettük a nyálkahártya minta, amely képes megakadályozni a lehetősége újra invázió invazív rák sejtek a nyálkahártyát. Az invazív rák, a DNS-mintákat vettünk intramucosalis és invazív parts.Table 1 összefoglalása klinikai, hisztopatológiai és molekuláris genetikai adatok 25 cső alakú adenocarcinoma gyomor
Case No. Matton Kor /szex Matton szövettani típus * Matton Invasion ** Matton LN ** Matton Stage ** Matton CGH Matton p53 IHC

TP53mutation

M1
57/M
tub1
T1(M)
N0
IA
c/a
+
NT
M2
72/M
tub1
T1(M)
N0
IA
c/a
+
NT
M3
67/F
tub1
T1(M)
N0
IA
c/a
-
-
M4
67/M
tub1
T1(M)
N0
IA
c/a
-
-
M5
74/M
tub1
T1(M)
N0
IA
c/a
+
-
M6
65/M
tub1
T1(M)
N0
IA
c/a
+
-
M7
67/F
tub1
T1(M)
N0
IA
c/a
+
-
M8
70/F
tub1 ≫ Pap katalógusa T1 (M) hotelben N0 katalógusa IA katalógusa c /egy fiatal - -
M9 katalógusa 51 /M katalógusa tub1 > tub2
T1(M)
N0
IA
c/a
+
-
M10
52/M
tub2
T1(M)
N0
IA
c/a
+
-
M11
57/F
tub2
T1(M)
N0
IA
NT/a
-
-
M12
89/M
tub2
T1(M)
N0
IA
NT/a
+
+
M13
70/M
tub1
T1(M)
N0
IA
NT/a
-
NA
S1m
73/F
tub2
T1(SM)
N0
IA
c/a
+
-
S1i
NT /egy fiatal + -
S2m katalógusa 81 /F katalógusa pap katalógusa T1 (SM) hotelben N1 katalógusa IB katalógusa c /egy fiatal + -
S2i katalógusa NT /egy fiatal + katalógusa + katalógusa s3m katalógusa 79 /M katalógusa tub1 katalógusa T1 (SM) hotelben N0 katalógusa IA katalógusa c /egy fiatal + katalógusa + katalógusa S3i katalógusa NT /egy fiatal + katalógusa + katalógusa S4M katalógusa 63 /M katalógusa tub2 > tub1 katalógusa T1 (SM) hotelben N0 katalógusa IA katalógusa c /NT katalógusa + katalógusa NT katalógusa S5M katalógusa 75 /M katalógusa pap > tub2
T1(SM)
N1
IB
c/NT
+
NT
S6m
79/M
pap
T1(SM)
N1
IB
c/NT
+
NT
A1m
71/M
tub2
T2(SS)
N2
IIIA
c/a
null
-
A1i
NT /egy fiatal null katalógusa NA
A2m
73 /M katalógusa tub1 > tub2 katalógusa T2 (SS) hotelben N0 katalógusa IB katalógusa c /egy fiatal + -
A2I katalógusa NT /egy fiatal + katalógusa +
a3M
56 /M katalógusa pap katalógusa T2 (SS) hotelben N1 katalógusa II katalógusa c /egy fiatal + -
A3i katalógusa NT /egy fiatal + katalógusa + katalógusa A4M
81 /M katalógusa tub2 /pap katalógusa T2 (SS) hotelben N2 katalógusa IIIA katalógusa c /egy fiatal null -
a4i katalógusa NT /egy fiatal null katalógusa + katalógusa A5m katalógusa 56 /M katalógusa tub1 katalógusa T2 (MP) hotelben N0 katalógusa IB katalógusa c /NT -
NT katalógusa A5i katalógusa NT/NA
-
NA
A6m
45/F
tub2
T2(SS)
N1
IB
c/NT
+
NT
A7m
79/F
tub2
T2(MP)
N1
IB
c/NT
+/-
NT
A8m
69/M
tub1
T3(SE)
N2
IIIB
c/a
null
-
A8i
NT /egy fiatal null katalógusa NA
A9m
67 /F katalógusa tub2 katalógusa T2 (SS) hotelben N1 katalógusa II katalógusa c /egy fiatal + -
A9i katalógusa NT /egy fiatal + katalógusa + katalógusa * japán besorolása gyomorrák; ** PTNM besorolás. Oszlopában Case No, M = intramucosalis rák; S = rák járó nyálkahártya alatti; A = előrehaladott rák; m = nyálkahártya része; i = invazív része. Oszlopában CGH, c = kromoszómális CGH; a = array CGH. Oszlopában p53 immunhisztokémiai (IHC); "+" Azt jelzi, diffúzan (> 70%) pozitív sejtmagok, "-" jelzi szórványosan (< 5%) pozitív magok; "Null" jelzi, hogy nincs immunreakciót egyáltalán. Oszlopában TP53 katalógusa mutáció; "+" És "-" jelzi, jelenlétében és távollétében mutáció, illetve; NA = nem értékelhető; NT = nem tesztelt.
Immunhisztokémia
immunhisztokémiai festést végeztünk monoklonális antitestet a p53 fehérje (DO-7, 1: 100; Dako, Glostrup, Dánia). Miután antigén visszakeresése szöveti metszetek desztillált vízben 121 ° C-on 5 percig, immunreaktivitás volt kimutatható egy közvetett biotin-sztreptavidin-peroxidáz módszerrel a Histofine Kit (Nichirei, Tokió, Japán), és diaminobenzidin reakció. A metszeteket kontrasztfestést haematoxilin. Lemezeket a negatív kontroll nélkül a primer antitest, valamint a pozitív ellenőrzést párhuzamos feldolgozását.
Lézermikrodisszekciós és DNS-készítményből
Tumor sejteket nyertünk 5-um vastag szövettani metszeteken egy LMD6000 mikrodisszekciós rendszer ( Leica Microsystems, Wetzlar, Németország). Az egyes daganatok, daganatos sejteket nyertünk területek > 3 mm 2, ahol a rákos sejtek elszámolni ≥90% a teljes sejtszámot. Ezek a ráksejtek emésztünk 200 pl proteináz-K oldatot koncentrációban 200

• GASTRICHIP: D2 reszekció és hyperthermiás hasüregbe kemoterápia lokálisan előrehaladott gyomorrák: randomizált és multicentrikus fázis III study
• Idő jellemzőit az alkohol hatását, megszűnés esetén a gyomorrák kockázatát - meta-analízis