Kombinerade funktioner baserade på MT1-MMP uttryck, CD11b + immunocyter densitet och LNR förutsäga kliniska resultat av mag cancer

Kombinerade funktioner baserade på MT1-MMP uttryck, CD11b + immunocyter densitet och LNR förutsäga kliniska resultat av magcancer Bild Sammanfattning
Bakgrund
med tanke på komplexiteten av tumörmikro kunde ingen enskild markör från cancerceller adekvat förutsäga kliniska resultaten av magcancer (GC). Syftet med denna studie var att utvärdera prognostiska roll kombinerade funktioner, inklusive konventionell patologi, proteinas och immun data i GC.
Metoder
Förutom patologiska studierna immunohistokemi används för att bedöma membran typ 1 matrix metalloproteinas ( MT1-MMP) uttryck och CD11b + immunocyter täthet i tre oberoende GC vävnad microarrays innehållande 184 GC vävnader. Separata och kombinerade funktioner utvärderades för deras inverkan på total överlevnad (OS).
Resultat
Vi fann att de traditionella faktorer, bland annat tumörstorlek, histologiska grad, lymfkörtel status, serosa invasion och TNM stadium var associerade med OS (P Hotel < 0,05 för alla). Dessutom har statistiskt signifikanta skillnader i OS finns bland lymfkörtel förhållande (LNR) grupper (P Hotel < 0,001), MT1-MMP grupper (P
= 0,015), och CD11b + immunocyter densitet grupper (P
= 0,031). Viktigast kombinerades funktion (MT1-MMP positiv, låg CD11b + immunocyter densitet och hög LNR) hittats av multivariat analys för att vara en oberoende prognostiska faktorer för OS efter exklusive övriga påverkande faktorer (HR = 3,818 [95% CI: 2,223-6,557 ], P
< 0,001). Dessutom har denna kombinerade funktion hade bättre prestanda i att förutsäga kliniska resultat efter operationen långt innan återfall hade inträffat (Area under kurvan: 0,689 [95% CI: 0,609-0,768], P Hotel < 0,001).
Slutsatser
Dessa fynd tyder på att bättre information om GC prognos kan erhållas från kombinerade klinisk-patologiska faktorer, tumörceller och tumörmikro.
Nyckelord
Magcancer prognos tumör~~POS=TRUNC bakgrund
Gastric cancer (GC) är den fjärde vanligaste cancerformen och den tredje orsaken till cancerdöd worldwide [1]. Betydande framsteg har gjorts när det gäller tidig diagnos av cancer, men det har inte varit en jämförbar framsteg i noggrannhet kliniska resultat förutsägelse [2]. Endast TNM klassificering av International Union Against Cancer (UICC) eller amerikanska kommittén för cancer (AJCC) används rutinmässigt, vilket är det viktigaste instrumentet för att styra behandlingsstrategi för GC patienter [3]. Emellertid GCS har signifikant heterogenitet i deras biologiska beteenden, och tumörer i samma kliniska stadiet visar ofta skillnader i kliniska förloppet och behandlingsrespons [4]. Således, identifiering av faktorer som påverkar invasion och metastasering, och upprättande av biomarkörer paneler för att förutsäga malign potential och identifiera olika riskgrupper är av största vikt.
Trots år av forskning och hundratals rapporter om tumörmarkörer i GC, antalet av kliniskt användbara markörer är ynkligt liten [5]. Nyligen har en ny prognostic verktyg av lymfkörtelförhållande (LNR), definierad som antalet MLN dividerat med antalet lymfkörtlar hämtas, föreslogs. Den kan förbättra prognosen noggrannheten och minska scenen migration jämfört med UICC (2002, 6: e utgåvan) staging systemet [6, 7]. LNR har ansetts som en av de bästa clinicopathologic variabler för att förutsäga prognosen för magcancer efter kurativ kirurgi i retrospektiva studier [8], vilket är framgången i optimering av traditionella kliniska markörer. Men upptäckten av andra så kallade lovande markörer i laboratorium översätter ganska långsamt i klinisk användbarhet. En anledning till detta är det faktum att cancerutveckling och progression bestäms av sam-evolutionen mellan tumörceller och tumörmikromiljön i stället för en enda mutation [9]. Sådant samarbete evolution har rapporterats av många studier, som alla visar att samspelet mellan tumörceller och tumör stromal skapa en unik och dynamisk mikro att påverka tumörprogression [10]. Därför screening nya molekylära faktorer från komplexet tumörmikromiljön (cellulära och stromala komponenter) representerar en annan väsentlig metod för att identifiera prognostiska faktorer.
MT1-MMP är känd som en av membrantyp matrix-metalloproteinas, och MT1-MMP-medierad extracellulär matris (ECM) nedbrytning av tumörceller eller stromaceller är väsentlig för cancerinvasion genom basalmembran och stromala interstitiella matrisen [11]. Även MT1-MMP har visat prognostisk betydelse i flera humana cancerformer, såsom bröstcancer, pankreascancer och kolorektal cancer [12, 13], lite är känt om den exakta betydelsen av MT1-MMP i GC patienter. Stora bidragsgivare till tumörmikro är inflammation och inflammatoriska mediatorer [9]. Det har föreslagits att immuncontex kan påverka det kliniska resultatet av cancerpatienterna, och immun värdering skulle viktig prediktor jämförbar med TNM klassificering [14]. CD11b uttrycks av en specifik delmängd av myeloidceller, inklusive CD34 + progenitorceller, monocyter, granulocyter, NK-celler och aktiverade T-celler, som står för medfödd immunitet [15, 16]. Rollen av tumör immunogenicitet och immunterapier diskuteras [17]. Utvidga vår kunskap om den komplexa roll av immunceller i GC kunde slutligen bana väg för den efterlängtade framgångsrik utveckling av läkemedel.
Baserat på denna förståelse, undersökte vi prognostisk roll cellulär proteinas markör MT1-MMP och mikroimmun markör CD11b + immunocyter i GC. Särskild uppmärksamhet ägnades åt prognostiska värdet av de kombinerade egenskaperna hos MT1-MMP, CD11b + immunocyter densitet och LNR.
Metoder
Patienter och uppföljning sälja The register över GC patienter som genomgick kirurgi med en läkande uppsåt vid institutionen för onkologi, Zhongnan sjukhuset i Wuhan University (Wuhan, Kina) mellan december 2002 och februari 2011 granskades. Stora demografiska och klinisk-patologiska egenskaper fanns tillgängliga. Inga patienter fick neoadjuvant kemoterapi före operationen. TNM stadium bestämdes enligt den 7: e upplagan UICC /AJCC TNM-systemet [18]. Genom den senaste uppföljningen den 31 maj 2012, var medianuppföljning 59,5 (intervall: 16.8-102.3) månader. Totalt 108 (58,7%) patienter dog. Total överlevnad (OS) definierades som intervallet från dagen för operation för att GC-relaterade dödsfall. En upprepning i abdomino-bukhålan definierades som lokal-regional återfall; och återkommer via blodflödet definierades som fjärrmetastaser, såsom levermetastaser och lungmetastaser. Skriftligt informerat samtycke erhölls från patienterna och studieprotokollet godkändes av den etiska kommittén för Zhongnan sjukhuset i Wuhan University. Studien genomfördes i enlighet med de etiska normerna i World Medical Association Helsingforsdeklarationen.
Magcancer prover och vävnads microarrays | Allt hematoxylin och eosin (HE) -stained diabilder undersöktes av oberoende granskare som inte var medvetna om kliniska egenskaper eller kliniska resultat. Tre vävnads microarrays (TMAS) konstruerades. I korthet har två kärnor tas från varje representativ tumörvävnad (1,5 mm i diameter för varje kärna). Därefter tillsattes tre TMA sektioner med 184 tumörvävnad konstruerade (i samarbete med Shanghai Biochip Company Ltd, Shanghai, Kina).
Immunohistokemi och utvärdering av immunhistokemiska fynd sälja The primära antikroppar för MT1-MMP (sc101451, Santa Cruz , USA, utspädning 1/100), CD11b + (ab52478, Abcam, Storbritannien, utspädning 1/100), motsvarande pepparrotsperoxidas (HRP) konjugerad sekundär antikropp (ab97265, ab97200, Abcam, Storbritannien, utspädning 1/300), och diaminobensidin (DAKO, Danmark) erhölls och validerats för märkning.
immunohistokemi protokoll beskrevs tidigare [19]. Kort sagt, var tre TMAS sektioner deparaffinised med xylen thenrehydrated genom tre byten av alkohol. Endogen peroxidasaktivitet blockerades med 0,3% väteperoxid under 10 min. Antigenåtervinning utfördes genom mikrovågsbehandling i 0,01 M Tris-EDTA-buffert (pH 9,0) under 20 min. Glasen inkuberades under 1 timme med de primära antikropparna för MT1-MMP (sc101451, Santa Cruz, USA, utspädning 1/100), CD11b + (ab52478, Abcam, Storbritannien, utspädning 1/100). Efter tvättning med Tris-buffrad saltlösning (TBS, pH 7,4), var sektionerna inkuberades med b motsvarande pepparrotsperoxidas (HRP) konjugerad sekundär antikropp (ab97265, ab97200, Abcam, UK, utspädning 1/300) under ytterligare 50 min. Antigen-antikroppsreaktion visualiserades med 3,30-diaminobensidin (DAKO, Danmark). Efter motfärgning med hematoxylin, snitten dehydratiserades genom stigande alkoholer till xylen och monterade. Positiv färgning kontroller utfördes parallellt med paraffinsektioner av normal human tonsill. Negativ kontroll utfördes genom utelämnande den primära antikroppen.
Objektglasen undersöktes under Olympus BX51 fluorescensmikroskop utrustat med en Olympus DP72 kamera (Olympus Optical Co., Ltd., Tokyo, Japan). Panorama av varje märkt kärna erhölls baserat på 4 fotografier under lågt effekt förstoring (× 100) med hög upplösning av DP-BSW programvara (Olympus Optical Co., Ltd., Tokyo, Japan). Identiska inställningar användes för varje fotografi, för att minimera selektionsbias. MT1-MMP uttryck och CD11b + immunocyter densitet var digitalt utvärderades från Image-Pro Plus v6.2 programvara (Media Cybernetics Inc, Bethesda, MD). För att hålla resultat tillförlitliga och jämförbara, var en enhetlig miljö för alla bilder tillämpas för avläsning av varje antikropp färgning. Integrerad optisk densitet (IOD) av alla positiv färgning av MT1-MMP i varje fotografi mättes och dess förhållande till total yta på varje fotografi beräknades som MT1-MMP uttryck. CD11b + immunocyter densitet registrerades som antalet positiva celler per vävnads ytenhet i kvadratmillimeter. Cut poäng för MT1-MMP densitet undersöktes med "den bästa cut-off strategi genom log-rank test" [20]. Och den 25: e percentilen värdet definierades som brytpunkt för att bestämma MT1-MMP negativ och positiv uttrycksgrupper i denna studie. För CD11b + immunocyter densitet, cut-off för definitionen av undergrupper (låg och hög CD11b + immunocyter densitet) var medianvärdet.
Statistisk analys
Statistiska analyser utfördes med SPSS (version 18.0, SPSS Institute, Chicago, IL). Pearson χ 2 test eller Fishers exakta test användes för att jämföra kvalitativa variabler. Kaplan-Meier-analys användes för överlevnadsanalys och betydelse bland patientgrupper beräknades genom log rank test. Cox regressionsmodell användes för att utföra multivariat analys. Logistisk regression användes för att bedöma inverkan av binära faktorer. Mottagare kurvan (ROC) analys användes för att bestämma det prediktiva värdet av parametrarna. Dubbelsidig P Hotel < 0,05 ansågs vara statistiskt signifikant.
Resultat
Större klinisk-patologiska drag och immunhistokemiska fynd sälja Bland de 184 fall som ingår i denna studie var 132 (71,7%) män och 52 (28,3%) kvinnor, varierar i ålder 25-85 år (medelvärde ± SD: 57,9 ± 12,9 år). De viktigaste demografiska och klinisk-patologiska egenskaper presenterades i tabell 1.Table 1 Patient demografi och klinisk-patologiska egenskaper
artiklar
Värde
Age (M ± SD, år)
57,9 ± 12,9
Kön
Man (%) Review 132 (71,7) Review Kvinna (%) Review 52 (28,3) Review tumörlokalisation
Distal mage (%)
98 (53,3) Review icke-distala magen (%) Review 86 (46,7) Review Patologiska typer
adenokarcinom
Histologisk klass 1/2
55 (29,9)
Tja /Måttligt differentierat adenokarcinom (%) Review 55 (29,9) Review Histologisk grad 3/4
124 (67,4) Review Låg /Odifferentierade adenokarcinom (%) Review 102 (55,4)
mucinöst adenokarcinom /klack-ring cellkarcinom
22 (12,0) Review m.fl. a (%) katalog 5 (2,7)
serosa invasion
Nej (T0, T1, T2) (%)
27 (14,7) Review Ja (T3, T4) (%) Review 157 (85,3) Review Lymfkörtel metastaser
Nej (N0) (%) Review 53 (28,8)
Ja (N1, N2, N3) (%) Review 131 (71,2) Review LNR, Median (Range) Review 0,33 (0-1) Review fjärrmetastaser
M0 (%)
177 (96,2) Review M1 (%) Review 7 (3,8) Review TNM stadier
Tidiga (stadium I, II) (%) Review 58 (31,5) Review Avancerad (Etapp III, IV) (%) Review 126 (68,5) Review kirurgi
Delsumma resektion (%) Review 159 (86,4) Review icke-Delsumma resektion (%) Review 25 ( 13,6) Review kemoterapi
Nej (%) Review 35 (19,0) Review Ja (%) Review 149 (81,0) katalog Återfall
Nej (%) Review 124 ( 67,4) Review Ja (%) Review 60 (32,6) Review Återkommande läge B
Lokal regionala
37 (61,7) Review Distant
23 (38,3) Review Clinical status vid slutet av uppföljningen
Live och utan återfall
72 (39,1) Review Dead or alive med återkommande
112 (60,9) Review MT1-MMP uttryck
Negativ
46 (33,3) Review Positiv
138 (66,7) Review CD11b + immunocyter (celler /mm2) katalog Median (intervall) katalog 257 (4-2101) Review en övriga ingår adenosquamous carcinoma in 3 (1,62%) fall, atypiska carcinoid i en (0,54%) fall, och neuroendokrin cancer i en (0,54%) case.b 60 återkommande fall utvärderades.
Immunohistokemi utfördes i alla GC TMA och resultatet av varje prov erhölls för bilder baserad digital analys (Figur 1A-1D). MT1-MMP-färgning var huvudsakligen i cytoplasman eller på cellmembranet hos tumörceller. De flesta av de stromaceller var negativa, även om sporadisk positiv färgning på dessa celler observerades också (figur 1E, 1G). CD11b + immunocyterna huvudsakligen infiltreras i skarven mellan cancer boet och stromal (figur 1F, 1H). Nivån på MT1-MMP densitet och CD11b + immunocyter densitet presenterades i Tabell 1. 25: e percentilen av MT1-MMP densitet var 0.00186 och 138 (75,0%) patienter dokumenterades som MT1-MMP positiv enligt kriterierna ovan nämnda klassificerings. Medianvärdet av CD11b + immunocyter var 257 celler per vävnads ytenhet i kvadratmillimeter. Figur 1 immunhistologisk fynd i TMA. (AD) Ett representativt exempel på MT1-MMP (A), CD11b + immunocyter (C) färgning av en GC-vävnad microarray, och motsvarande digitala bilden analyseras med bildbehandlingsprogram, med MT1-MMP (B) och CD11b + immunocyter (D ) representerade i rött. (E, G) MT1-MMP-färgning var huvudsakligen i cytoplasman eller på cellmembranet hos tumörceller (blå pil), och de flesta av stromaceller hade negativ färgning, även om sporadisk positiv färgning på dessa celler observerades också (F, H). CD11b färgning visade att CD11b + immunocyter huvudsakligen infiltreras i skarven mellan cancer boet och stroma, i synnerhet vid den invasiva fronten (röda och gröna pilar).
Förhållandet mellan MT1-MMP uttryck, CD11b + immunocyter densitet och klinisk-patologiska drag
Det fanns 77 (55,8%) och 15 (32,6%) patienter med högt CD11b + immunocyter densitet i MT1-MMP positiv (n
= 138) och negativa (n
= 46) undergrupper, respektive (P
= 0,006). Sannolikheten för MT1-MMP expression minskade signifikant för låg CD11b + immunocyter densitet grupp (oddskvot (OR) = 0,383 [95% CI: 0,190-0,774], P
= 0,007, Logistisk regression). MT1-MMP uttryck och CD11b + immunocyter densitet korrelerade med klinisk-patologiska drag som sammanfattas i tabell 2. MT1-MMP uttryck korrelerade med liten tumörstorlek (P
= 0,007), tumör vid den distala magen (P
= 0,027) och ökad återkommande risk (P
= 0,001), men inte korrelerade med ålder, kön, histologiska grad, serosa invasion, lymfkörtel status, TNM stadium och platser av tumörrecidiv (P Hotel > 0,05 för alla). CD11b + immunocyter densitet korrelerade med lymfkörtelstatus (P
= 0,015), LNR (P
= 0,018) och TNM stadium (P
= 0,011), men inte korrelerade med ålder, kön, tumörstorlek , tumörplacering, histologiska grad, serosa invasion och återkommande risk (P Hotel > 0,05 för alla) .table 2 förhållandet mellan MT1-MMP, CD11b + immunocyter densitet och cinico-patologiska funktioner
Variabler

MT1-MMP uttryck
CD11b + immunocyter densitet
Negativ (n
= 46)
Positiv (n = 138) katalog
P
Låg (n
= 92)
Hög (n
= 92)
P
N
(%)
N
(%)
N
(%)
N
(%)

Ålder (år) Hotel < 60
26 (56,5) Review 20 (43,5) katalog 0,669
43 (43,4) Review 56 (56,6)
0,055
≥60
73 (52,9) Review 65 (47,1) Review 49 (57,6) Review 36 (42,4) Review Kön
Man
33 (25,0 ) Review 99 (75,0) katalog 1,000
66 (50,0) Review 66 (50,0) katalog 1,000
Kvinna
13 (25,0) Review 39 (75,0)
26 (50,0) Review 26 (50,0) Review Tumörstorlek storlek~~POS=HEADCOMP (cm2) en Hotel < 16
12 (16,4) Review 61 (83,6) Review 0,007
35 ( 47,9) Review 38 (52,1) Review 0,404
≥16
31 (35,2) Review 57 (64,8) Review 48 (54,5) Review 40 (45,5) Review Plats
distal
18 (18,4) Review 80 (81,6) katalog 0,027
51 (52,0) Review 47 (48,0) Review 0,555
Icke distala
28 (32,6) Review 58 (67,4) Review 41 (47,7) Review 45 (52,3) Review Histologisk klass B
1/2
13 (23,6) Review 42 (76,4)
0,845
24 (43,6) Review 31 (56,4) Review 0,376
3/4
31 (25,0) Review 93 (75,0) Review 63 (50,8)
61 (49,2) Review Lymfkörtel metastaser
Ja
31 (23,7) Review 100 (76,3) Review 0,511
73 (55,7) Review 58 (44,3)
0,015
Ingen
15 (28,3) Review 38 (71,7) Review 19 (35,8) Review 34 (64,2) katalog LNR c
≤0.33
27 (28,7 ) Review 67 (71,3) katalog 0,233
39 (41,5) Review 55 (58,5) Review 0,018 Hotel > 0,33
19 (21,1) Review 71 (78,9)
53 (58,9) Review 37 (41,1) Review slemhinnorna invasion (T stadium) katalog T1-2
4 (14,8) Review 23 (85,2) Review 0,186
10 (37,0) Review 17 (63,0) katalog 0,145
T3-4
42 (26,8) Review 115 (73,2) Review 82 (52,2) Review 75 (47,8)
TNM staging
tidigt (I, II) Review 13 (22,4) Review 45 (77,6) Review 0,583
21 (36,2) Review 37 (63,8) Review 0,011
Avancerat (III, IV) Review 33 (26,2) Review 93 (73,8) Review 71 (56,3) Review 55 (43,7) katalog Återfall
Ja
9 (15,0 ) Review 51 (85,0) katalog 0,029
30 (50,0) Review 30 (50,0) katalog 1,000
Ingen
37 (29,8) Review 87 (70,2)
62 (50,0) Review 62 (50,0) Review Återkommande läge d
Lokal regionala
7 (18,9) Review 30 (81,1) Review 0.460
20 (54,1)
17 (45,9) katalog 0,426
Distant
2 (8,7) Review 21 (91,3) Review 10 (43,5) Review 13 (56,5)
en analys genomfördes baserat på 161 patienter med fullständiga data av tumörstorlek (TS) .b Analys utfördes baserat på 179 patienter med magsäcks adenocarcinoma.c medianen av lymfkörtelförhållande (LNR) var 0,33 (6 fall), och GC fall var annorlunda i olika undergrupper . d 60 återkommande fall ingick.
Överlevnadsanalys Hus Till 184 fall median OS var 26,8 (intervall 0.8-102.3) månader, och 1-, 3- och 5-års överlevnad var 79,3%, 50,5% och 37,4%, respektive (Figur 2A). Som väntat var de traditionella faktorer som är förknippade med GC patienternas OS, såsom tumörstorlek, histologiska grad, lymfkörtel status, serosa invasion och TNM stadium (P Hotel < 0,05 för alla). Dessutom har både hög CD11b + immunocyter densitet och MT1-MMP negativa uttryck korrelerade med bättre OS (P
värde var 0,031 och 0,015 respektive.) (Figur 2B, 2C). Förmågan diskriminering i OS ökades i LNR grupper (P Hotel < 0,001) jämfört med lymfkörtlar statusgrupper (P
= 0,015) (Figur 2D, 2E) och ROC-analys visade att när det gäller att förutsäga risk för dödsfall, klassificeringen av LNR (Area under kurvan: 0,659 [95% CI: 0,579-0,739], P Hotel < 0,001) hade bättre prestanda än positiv lymfkörtlar nummer (Områden under kurvan: 0,568 [95 % CI: 0,484-0,653], P
= 0,114). Alla resultat indikerade att MT1-MMP positiv, låg CD11b + immunocyter densitet och hög LNR var riskfaktorer som är förknippade dålig prognos (Figur 2, Tabell 3). Figur 2 Kumulativt OS i GC patienter. (A) OS 184 GC patienter. (B) Låg CD11b + immunocyter densitet var relaterad till dålig OS. (C) Patienter i MT1-MMP positiva gruppen var högre risk för död. (D, E) Både lymfkörtlar status och LNR var korrelerade med dålig OS, men LNR kunde bättre skilja undergrupper av patienter. (F) Kombinerade funktioner kan tyda på OS i GC patienter mer exakt.
Tabell 3 Analys av faktorer avseende OS
Variabler
N
N döds (%) Review
Median OS (Range)
5-års överlevnad (%)
log-rank test χ2value
P
Ålder (år) Hotel < 60
99
52 (52,5) Review 30,1 (1,5-99,5) Review 45,1
3,584
0,058
≥60
85
56 (65,9) Review 24,8 (0,8 till 102,3) Review 28,6
Kön
Man
132
74 (56,1) Review 30,3 (0,8 till 102,3) Review 40,0
2,114
0,146
Kvinna
52
34 (65,4) Review 25,1 (1,3-94,8) Review 30,3
Tumörstorlek storlek~~POS=HEADCOMP (cm2) en Hotel < 16
73
35 (47,9) Review 41,6 (1,1-99,5) Review 52,9
7,882
0,005
≥16
88
57 (64,8)
24,2 (0,8 till 102,3) katalog 29,2
Histologisk klass B
1/2
55
88 (56,1) Review 30,1 (1,1 till 102,3) Review 54,2
13,412 Hotel < 0,001
3/4
124
20 (74,1) Review 16,8 (0,8-74,9) Review 30,1
lymfkörtlar metastaser
Ja
131
83 (63,4) Review 24,8 (0,8 till 102,3) Review 52,9
5,895
0,015
Ingen
53
25 (47,2) Review 34,1 (6,1 -99,5) katalog 30,5
slemhinnorna invasion (T stadiet) Review T1-2
27
7 (25,9) Review 58,9 (20,2-99,5) Review 74,9
14,742
< 0,001
T3-4
157
101 (64,3) Review 24,8 (0,8 till 102,3)
30,8
TNM
Tidig (I, II)
58
26 (44,8) Review 35,8 (6,1-99,5) Review 54,0
9,823
0,002
Avancerad
126
82 (65,1) Review 22,8 (0,8 till 102,3) Review 29,2
(III, IV) katalog kirurgi
SR
159
89 (56,0) Review 30,0 (0,8 till 102,3) Review 39,8
5,902
0,015
TR /CR
25
19 (76,0) Review 18,0 (3,8-89,9) katalog 21,8
kemoterapi
Ja
149
87 (49,7) Review 33,5 (5,3-99,5) Review 35,9
0,016
0,900
Ingen
35
21 (60,0) Review 28,4 (0,8 till 102,3 ) katalog 40,0
LNR c
≤0.33
94
41 (43,6) Review 38,8 (1,1 till 102,3)
55,1 24,881 Hotel < 0,001
> 0,33
90
67 (74,4) Review 20,1 (0,8-99,1) Review 18,3
MT1-MMP
Negativ
46
18 (39,1)
35,7 (3,8-79,3) Review 54,0
5,869
0,015
Positiv
138
90 (65,2) Review 25,4 (0,8 till 102,3) Review 32,2
CD11b + immunocyter densitet
Låg
92
62 (67,4) Review 25,1 (0,8-99,1) Review 27,6
4,655
0,031
Hög
92
46 (50,0) Review 30,7 (1,3 till 102,3) Review 46,7
Kombinerade funktioner (MT1-MMP densitet, CD11b + immunocyter densitet och LNR) Review Grupp I
73
26 (35,6) Review 38,7 (6,1-94,1)
61,4 28,173 Hotel < 0,001
Grupp II
111
82 (73,9) Review 18,1 (0,8- 90,9) Review 21,1
en analys utfördes baserat på 161 patienter med fullständiga data av tumörstorlek. b Analys utfördes baserat på 179 patienter med magcancer. c Medianen av LNR var 0,33 (6 fall), och GC fall var annorlunda i olika subgroups.OS: överlevnad; SR: subtotal resektion; TR: total resektion; CR: kombinerad resektion; LNR. Lymfkörtel förhållande
Som vi föreslagit ovan, kombinerades funktioner baserade på antalet riskfaktorer undersökas för att bättre kunna förutsäga GC prognos (tabell 3). Således var patienterna delas in i två undergrupper beroende på antalet riskfaktorer: grupp I, mindre än två riskfaktorer observerades; och grupp II, två eller tre riskfaktorer observerades. Kombinerade analysen visade att OS av patienterna i grupp II var signifikant kortare än patienter i grupp I (P
< 0,001). (Figur 2F) Review Multivariate analys och ROC-analys
I univariat analys, traditionell en klinisk -pathological funktioner (såsom tumörstorlek, T-steget, TNM stadium, kirurgi metoder, och återkommande status), MT1-MMP uttryck, CD11b + immunocyter densitet och LNR var förknippade med OS. Dessutom dödsrisken i kombinerad grupp II ökade signifikant (P Hotel < 0,001).
Faktorer som visar betydelsen av univariat analys integrerades i multivariat Cox proportional hazards analys. I denna studie var LNR, MT1-MMP, CD11b och kombinerade funktioner starkt korrelerade. Därför var två separata multivariata modeller genereras för att undvika multikollinearitet bland dessa variabler. LNR, MT1-MMP uttryck och CD11b + immunocyter densitet var oberoende prognostiska faktorer för OS efter utesluta andra störfaktorer (P Hotel < 0,05 för alla) Dessutom kombinerade funktioner var oberoende prognostisk faktor, alltför (HR = 3,818 [95 % CI: 2,223-6,557], P Hotel < 0,001) (tabell 4) .table 4 multivariata analyser av faktorer som är förknippade med OS
faktorer
OS
HR
95% CI
P
Model en
Tumörstorlek storlek~~POS=HEADCOMP: < 16 cm2vs
≥16 cm2
1,821
1.168- 2,839
0,008
serosa invasion (T-steget):
T1-2 vs
T3-4
3,232
1,440-7,251
0,004
Lymoh noder metastas:
Nej vs
Ja
1,012
0,610-1,679
0,964
Kirurgi typer: SR vs
TR /CR
2,030
1,128-3,653
0,018
LNR: låg (≤0.33) vs Hög (> 0,33) katalog 1,957
1,233-3,108
0,004
MT1-MMP: Negativ vs
Positiv
2,596
1,496-4,506
0,001
CD11b + immunocyter densitet: Högt vs
Låg
1,838
1,183-2,855
0,007
Model 2 Review Tumörstorlek storlek~~POS=HEADCOMP: < 16 cm2vs
≥16 cm2
1,734
1,120-2,686
0,014
serosa invasion (T-steget):
T1-2 vs
T3-4
3,013
1,360-6,674
0,007
Lymoh noder metastaser:
Nej vs
Ja
0,696
0,404 - 1,200
0,192
Kirurgi typer: SR vs
TR /CR
2,023
1,134-3,606
0,017
Kombinerade funktioner: Grupp I vs
grupp II
3,818
2,223-6,557 Hotel < 0,001
OS : överlevnad; HR: hazard ratio; NA: inte antagit; SR: subtotal resektion; TR: total resektion; CR: kombinerad resektion; LNR. Lymfkörtel förhållande
ROC analys genomfördes för att ytterligare utvärdera prognostiska genomgång av de fyra oberoende faktorer i denna studie. Kombinerade funktioner skulle vara bättre att förutse de kliniska resultaten av GC patienter jämfört med andra faktorer (området under kurvan: 0,689 [95% CI: 0,609-0,768], P Hotel < 0,001) (Figur 3). Figur 3 ROC-analys av det prediktiva värdet för döden. Bland de 4 oberoende prognostiska faktorer, arean under kurvan för den nya kombinerade inslag var den största. Den kombinerade funktionen kunde ha bättre prognostisk prestanda i GC patienter.
Diskussion
Vi har föreslagit en kombinerad analys av integrerade tumör stromala funktioner som en användbar strategi för att utvärdera cancerutveckling och patientöverlevnad i GC baserat på våra studier fokuserade på co-evolution av tumörceller och tumörmikroomgivningen och [19, 21, 22]. Denna studie var utformad för att undersöka möjligheten att denna kombinerade strategi. Dessutom har en förbättrad automatisering metod för att analysera digitaliserade bilder som används för att säkerställa både reproducerbarhet och goda prestanda i denna studie. Som Fridman [23] föreslog skulle sådana metoder bana väg för bättre förstå komplexa tumörmikro, liksom rutinmässig utvärdering av parametrar för klinisk behandling av cancerpatienter. Häri har 184 GC fall ingår att utvärdera prognostiska värden för optimerade konventionella patologiska prognostiska faktorer, cellulära molekylära faktorer, immun faktorer och de kombinerade funktioner. Detta är viktigt steg mot att upprätta en fungerande prognostiskt system som integrerar både klinisk-patologisk, tumör- och stromala funktioner i våra studier serie [19, 21, 22].
Av 184 fall, demografi och klinisk-patologiska egenskaper liknar som rapporterats i andra stora serier av GC befolkningen [24]. Våra resultat visade att uttrycket av MT1-MMP var ofta korrelerad med ökad återfall risk, men skillnaden i återfall plats var inte statistiskt signifikant. Dessa resultat liknade tidigare rapport [25]. MT1-MMP spelar viktig roll i nedbrytning av typ I och IV kollagen för att underlätta cancerceller sprider sig. Dessutom kan MT1-MMP främja angiogenes och mikrometastas via vaskulär väg [26].
När det gäller immunceller, art, täthet och platsen är viktiga parametrar att övergripande utvärdera in situ
immunreaktion och den specifika roll i cancerutveckling. I denna studie var CD11b + immunocyter huvudsak ligger på den invasiva fronten. Skillnaden i CD11b + immunocyter densitet var statistiskt signifikant mellan lymfkörtlar metastaser och icke-metastais grupper. Dessutom CD11b + immunocyter densitet var högre i början än avancerade GC patienter liknar rapporterna från Sconocchia et al. och Ladoire et al. [27, 28].

• Expression av p53, inducerbart kväveoxidsyntas och vascular endothelial growth factor i mag precancerous och cancerous lesions: korrelation med kliniska
• En ökning av integrin-kopplade kinas icke-canonically ger NF-kB-förmedlade tillväxtfördelar till gastric cancerceller genom att aktivera ERK1 /2