Kombinirane funkcije, ki temeljijo na MT1-MMP izražanja, CD11b + immunocytes gostota in LNR napovedati klinične rezultate rakom želodca

Kombinirane funkcije, ki temeljijo na MT1-MMP izražanja, CD11b + immunocytes gostota in LNR napovedati klinične rezultate raka želodca
Abstract
Ozadje PODJETJA
Glede na kompleksnost tumorja mikrookolja, bi nobena dvojno podajo iz rakavih celic ustrezno napovedati klinični rezultati raka želodca (GC). Cilj te raziskave je bil oceniti napovedni vlogo kombiniranih funkcij, vključno s konvencionalno patologije, proteinaze in imunskih podatkov v GC.
Metode
Poleg patoloških študijah so imunohistokemija uporablja za oceno membrano tipa 1 matrix metaloproteinaze ( MT1-MMP) izraz in CD11b + immunocytes gostoto v treh neodvisnih GC tkivnih mikromrež, ki vsebujejo 184 GC tkiva. Ločeni in združene lastnosti so ocenili njihov vpliv na celokupno preživetje (OS).
Rezultati
Ugotovili smo, da so tradicionalni dejavniki, vključno z velikostjo tumorja, histološki razred, status bezgavk, seroza invazije in stopnji TNM povezano z OS (P
in 0.05 za vse). Poleg tega so bile statistično značilne razlike v OS je med razmerjem bezgavko (lnr) podskupinah (P
< 0,001), MT1-MMP podskupin (P
= 0,015), in CD11b + immunocytes podskupin gostote (P
= 0,031). Najpomembneje je, da smo združili funkcijo (MT1-MMP pozitiven, nizka CD11b + immunocytes gostoto in visoko LNR) našel multivariatne analize, da je neodvisen napovedni dejavniki za OS po izločitvi druge dejavnike (HR = 3,818 [95% IZ: 2,223-6,557 ], P
< 0,001). Poleg tega je to v kombinaciji funkcija boljše rezultate pri napovedovanju kliničnih rezultatov po operaciji, še preden je prišlo do ponovitve (območje pod krivuljo: 0,689 [95% IZ: 0,609-0,768], P
< 0,001).
Sklepi
Te ugotovitve kažejo, da bi bilo mogoče boljše informacije o GC napovedjo pridobljena iz kombiniranih klinično-patoloških dejavnikov, tumorskih celic in mikrookolje tumorja.
Ključne besede
želodčnega raka prognozo tumorjev mikrookolje bezgavko razmerje Ozadje
raka želodca (GC) je četrti najpogostejši rak in tretji vzrok smrti zaradi raka na svetu [1]. Znaten napredek je bil dosežen pri zgodnjem odkrivanju raka, vendar pa ni bil primerljiv napredek pri natančnosti napovedi kliničnega izida [2]. Samo klasifikacija TNM Mednarodne unije proti raku (UICC) ali Skupni odbor ameriškega raka (AJCC) se uporablja rutinsko, ki je najpomembnejši instrument za usmerjanje strategije zdravljenja za bolnike GC [3]. Vendar GK imajo pomembno heterogenost v svojih bioloških vedenj, in tumorji isti klinični fazi pogosto kažejo razlike v klinični odziv predmeta in zdravljenje [4]. Tako je identifikacija dejavnikov, ki vplivajo na invazijo in metastaz ter vzpostavitev biomarkerjev plošč napovedati maligni potencial in za prepoznavanje različnih rizičnih skupinah, so izjemnega pomena.
Kljub letih raziskav in na stotine poročil o tumorskih označevalcev v GC, število klinično uporabne označevalci je bedno majhen [5]. V zadnjem času, je bil predlagan nov prognostični orodje razmerja bezgavkah (LNR), ki je opredeljena kot število mio deljeno s številom bezgavk pridobljenih. To lahko izboljša natančnost prognoze in zmanjšanje migracije fazi v primerjavi z UICC (2002, 6. izdaja) sistema počivališču [6, 7]. LNR je veljal za enega od najboljših clinicopathologic spremenljivk za napovedovanje prognozo raka želodca po kurativno operacijo v retrospektivnih študij [8], kar je uspeh pri optimizaciji tradicionalnih kliničnih označevalcev. Vendar pa je odkritje drugih tako imenovanih obetavnih označevalcev v laboratoriju pomeni bolj počasi v klinično uporabo. Eden izmed razlogov za to je dejstvo, da so za razvoj in napredovanje raka določena z koevolucija med tumorskih celic in tumorskega mikrookolja namesto ene same mutacije [9]. Takšno koevolucija so poročali o številnih študij, ki vse kažejo, da interakcije med tumorskih celic in tumorjev stromalnih ustvariti edinstveno in dinamično mikrookolje bi vplivalo napredovanja tumorja [10]. Zato presejanje novih molekularnih dejavnike iz kompleksnega tumorskega mikrookolja (celičnimi in stromalnimi komponente) predstavlja drugo bistveno pristop za določitev prognostičnih dejavnikov.
MT1-MMP je znan kot MMP z membrano tipa, in MT1-MMP-posredovano ekstracelularno matrico (ECM), degradacija v tumorskih celicah ali stromalnih celic je bistvenega pomena za raka invazijo skozi kletne membran in stromalni intersticijske matriko [11]. Čeprav je MT1-MMP prikazano napovedni pomen v številnih oblikah raka, kot so rak dojke, raka trebušne slinavke in debelega črevesja [12, 13], je malo znanega o natančno pomenu MT1-MMP pri bolnikih GC. Pomembno prispevata h mikrookolje tumorja sta vnetje in vnetne mediatorje [9]. Je bilo predlagano, da se imunski contexture vpliva na klinični izid bolnikov z rakom in imunski Rezultat bi bilo pomembno napovednik primerljiva s klasifikacijo TNM [14]. CD11b je izražena s posebnim podskupini mieloidnih celic, vključno z CD34 + prednikov, monociti granulociti, NK celic in aktiviranih T celic, ki predstavlja za naravne imunosti [15, 16]. Vloga tumorja imunogenosti in imunoterapije se razpravlja [17]. Razširitev naše znanje o kompleksnih vlogo imunskih celic v GC lahko končno utrl pot za dolgo pričakovano uspešen razvoj terapij.
Na podlagi tega dogovora, smo raziskovali napovedni vlogo celične proteinaze marker MT1-MMP in mikrookolje imunskega označevalec CD11b + immunocytes v GC. Posebna pozornost je bila namenjena prognostično vrednost skupnih značilnosti MT1-MMP, CD11b + immunocytes gostoto in lnr.
Metode
Bolniki in spremljanje
evidenco bolnikov GC, ki so bili operirani z zdravilno namen na oddelku za onkologijo, Zhongnan bolnišnice Wuhan University (Wuhan, Kitajska) od decembra 2002 do februarja 2011, so bili pregledani. Glavni demografski in clinico-patološke značilnosti so bile na voljo. Noben bolnik ni prejel novi dopolnilni kemoterapijo pred operacijo. TNM stopnja je bila določena v skladu s 7. izdaja sistema UICC /AJCC TNM [18]. Z najnovejšo spremljanja na 31. maja 2012, je bila mediana spremljanje je bilo 59,5 (razpon: 16.8-102.3) mesecev. Skupno 108 (58,7%) bolnikov je umrlo. Celokupno preživetje (OS) je bil opredeljen kot interval od dneva operacijo do povezanih z GC smrti. Vsaka ponovitev v abdomino-medenične votline je bila opredeljena kot lokalno-regionalne ponovitve; in ponovitev prek pretok krvi je bil opredeljen kot daljni metastaze, kot metastaz jeter in pljuč metastaz. Pisna privolitev je bila pridobljena iz bolnikov in protokol študija je odobril odbor za etiko bolnišnice Zhongnan Wuhan University. Študija je bila izvedena v skladu z etičnimi standardi Svetovnega zdravniškega združenja Helsinški deklaraciji.
Rak želodca vzorce in tkiva mikromrež
Vse hematoksilinom in eozinom (HE) -stained diapozitivi so bile pregledane s strani neodvisnih recenzentov, ki niso bili seznanjeni z klinične značilnosti ali kliničnih izidov. so bili zgrajeni trije tkiva mikromrež (TMAs). Na kratko, dve jedri vzeti iz vsake reprezentativnega tumorsko tkivo (1,5 mm premera za vsako jedro). Nato so bili zgrajeni trije TMAs odseki z 184 tumorskih tkivih (v sodelovanju z Shanghai biochip Company Ltd, Šanghaj, Kitajska).
Imunohistokemija in vrednotenje Imunohistokemične ugotovitev
primarnih protiteles za MT1-MMP (sc101451, Santa Cruz , ZDA, redčenje 1/100), CD11b + (ab52478, Abcam, Velika Britanija, redčenje 1/100), ustrezno s hrenovo peroksidazo (HRP) konjugirana sekundarna protitelesa (ab97265, ab97200, Abcam, Velika Britanija, redčenje 1/300), in diaminobenzidine (DAKO, Danska) so bili pridobljeni in potrjeni za označevanje.
imunohistokemija protokoli so bili prej [19] opisano. Skratka, so tri TMAs sekcije deparaffinised z ksilena thenrehydrated skozi tri spremembe alkohola. Endogene peroksidaze aktivnost smo blokirali z 0,3% vodikovega peroksida 10 minut. Antigen Preiskovalna izvedemo z obdelavo mikrovalovno v 0,01 M Tris-EDTA pufrom (pH 9,0) 20 minut. Ploščice smo inkubirali 1 uro s primarnimi protitelesi za MT1-MMP (sc101451, Santa Cruz, ZDA, redčenje 1/100), CD11b + (ab52478, Abcam, Velika Britanija, redčenje 1/100). Po spiranju s Tris pufrom (TBS, pH 7,4), smo sekcije inkubiranih z b ustreznim hrenovo peroksidazo (HRP) konjugiranega sekundarnega protitelesa (ab97265, ab97200, Abcam, Velika Britanija, redčenje 1/300) za nadaljnjih 50 minut. Antigen-protitelo reakcijo smo vizualizirali s 3,30-diaminobenzidine (DAKO, Danska). Po counterstaining s hematoksilinom, so odseki dehidrirani z naraščajočimi alkoholi, da ksilena in nameščen. Pozitivne kontrole barvanje so potekali vzporedno s parafinskimi oddelki normalne človeške mandeljnov. Negativna kontrola je bila izvedena z izpustitvijo primarno protitelo.
Diapozitivi so bili pregledani v skladu z Olympus BX51 fluorescenčnim mikroskopom, opremljenega z Olympus DP72 kamero (Olympus Optical Co., Ltd., Tokyo, Japonska). Panorama vsakega označenega jedra je bila pridobljena na podlagi 4 fotografije pod nizke porabe povečave (× 100) z visoko ločljivostjo, ki ga DP-BSW programske opreme (Olympus Optical Co, Ltd, Tokio, Japonska). Iste nastavitve so bile uporabljene za vsako fotografijo, tako da se zmanjša pristranskost izbora. MT1-MMP izraz in CD11b + immunocytes gostote so digitalno ocenil Image-Pro Plus V6.2 programske opreme (Media Kibernetika Inc, Bethesda, MD). Če želite, da rezultati zanesljivi in ​​primerljivi, je bila uporabljena enotna nastavitev za vse diapozitive za obravnavo vsakega obarvanje protiteles. Integrirana optična gostota (IOD) vseh pozitivnih obarvanja z dne MT1-MMP v vsaki fotografiji je bila izmerjena in njen delež v skupni površini vsaki fotografiji je bila izračunana kot MT1-MMP izražanja. CD11b gostota + immunocytes bila zabeležena kot število pozitivnih celic na tkiva enoto površine v kvadratnih milimetrih. Cut točke za MT1-MMP gostoto smo raziskali z "najboljšim presečni pristop testa log-ranga" [20]. In 25. percentil vrednost je opredeljena kot presečni točki za določitev MT1-MMP negativne in pozitivne izražanja podskupin v tej študiji. Za + immunocytes gostote CD11b, je cut-off point za določanje podskupin (nizke in visoke CD11b + immunocytes gostota) mediana vrednost.
Statistična analiza
statistične analize smo izvedli s programsko opremo SPSS (različica 18.0, SPSS inštitut, Chicago, IL). Χ 2 preizkus Pearson ali Fisherjev natančni test ni bil uporabljen za primerjavo kvalitativnih spremenljivk. Kaplan-Meier analiza je bila uporabljena za analizo preživetja in pomen pri podskupinah bolnikov je bila izračunana s testom log ranga. Cox regresijski model je bil uporabljen za izvedbo multivariatne analize. Logistična regresija je bila uporabljena za oceno vpliva binarnih dejavnikov. delujejo karakteristika analiza sprejemnik (ROC) je bila uporabljena za določitev napovedno vrednost parametrov. Dvostranski P
< 0.05 se je štelo kot statistično značilne.
Rezultati
Glavni klinično-patološke značilnosti in imunohistokemičnim ugotovitve
Med 184 primeri v tej raziskavi je bilo 132 (71,7%) moških in 52 (28,3%), ženske, in sicer v starosti od 25 do 85 yr (povprečje ± SD: 57,9 ± 12,9 yr). Glavni demografski in clinico-patološke značilnosti so predstavljene v demografiji in klinično-patološke značilnosti Tabela 1.Table 1 bolnikovih
postavk
Vrednost
Age (M ± SD, let)
57,9 ± 12,9
Spol
Moški (%)
132 (71,7)
Moški (%)
52 (28,3)
Tumor lokacija
distalni želodec (%)
98 (53,3)
Non-distalni želodec (%)
86 (46,7)
patološko vrst
adenokarcinom
histološki razred 1/2
55 (29,9)
No /zmerno diferencirani adenokarcinom (%)
55 (29,9)
histološke 3/4
124 (67,4)
nizko /Raznovrstna adenokarcinom (%)
102 (55,4)
mucinozni karcinom adenokarcinom /pečat obroč celic
22 (12,0)
drugi a (%)
5 (2,7)
korena invazije
Ne (T0, T1, T2) (%)
27 (14,7)
Da (T3, T4) (%)
157 (85,3)
limfnega vozla metastaze
Ne (N0) (%)
53 (28,8)
Da (N1, N2, N3) (%)
131 (71,2)
lnr, mediana (razpon)
0,33 (0-1)
Distant Metastasis
M0 (%)
177 (96,2)
M1 (%)
7 (3,8)
TNM faze
Zgodnje (Stages I, II) (%)
58 (31,5)
Dodatno (Faze III, IV) (%)
126 (68,5)
Surgery
Vmesni seštevek resekcijo (%)
159 (86,4)
Non-Vmesni seštevek resekcijo (%)
25 ( 13.6)
kemoterapijo
Ne (%)
35 (19,0)
Da (%)
149 (81,0)
Recidiv
Ne (%)
124 ( 67.4)
Da (%)
60 (32,6)
ponovitve lokacija b
lokalno-regionalni
37 (61,7)
Distant
23 (38,3)
Klinični stanje ob koncu spremljanje
živi in ​​brez ponovitve
72 (39,1)
mrtvi ali živi s ponovitvijo
112 (60,9)
MT1-MMP izražanja
Negativno
46 (33,3)
Pozitivni
138 (66,7)
CD11b + immunocytes (celic /mm2)
mediana (razpon)
257 (4-2101)
a drugi vključeni adenoskvamozni karcinom in 3 (1,62%) primerih, netipična karcinoidni v 1 (0,54%) velja in nevroendokrini karcinom in 1 (0,54%) case.b 60 ponavljajočih se primerih so bile ocenjene.
Imunohistokemija je bila izvedena v vseh GC TMAs in rezultat za vsak osebek je bilo pridobljeno za temelji slike digitalno analizo (slika 1A-1D). MT1-MMP obarvanje je predvsem v citoplazmi ali na celično membrano tumorskih celic. Večina stromalnih celic so bili negativni, čeprav so opazili tudi sporadični pozitivno madeži na teh celic (slika 1E, 1G). CD11b + immunocytes predvsem infiltrirali v stiku raka gnezdo in stromalnih (slika 1F, 1H). Stopnja MT1-MMP gostoto in CD11b + immunocytes gostote so bile predstavljene v tabeli 1. 25. percentil MT1-MMP gostoto bil 0.00186 in 138 (75,0%) bolnikov je bilo dokumentirano MT1-MMP pozitiven v skladu z merili navedenih klasifikacijskih. Mediana vrednost CD11b + immunocytes bilo 257 celic na tkiva enoto površine na kvadratni milimeter. Slika 1 Imunohistološka ugotovitve v TMAs. (AD) Predstavnik primer MT1-MMP (A), CD11b + immunocytes (C) obarvanje mikromrež za GC tkiva in ustrezne digitalne slike analizirajo s programsko opremo, slike, z MT1-MMP (B) in CD11b + immunocytes (D ) zastopani v rdeči barvi. (E, G) je MT1-MMP obarvanje predvsem v citoplazmi ali na celično membrano tumorskih celic (modra puščico), in večina strome celicah negativno obarvanje, čeprav smo opazili tudi sporadični pozitivno madeži na teh celicah (F, H). CD11b obarvanje pokazala, da CD11b + immunocytes predvsem infiltrirali v stiku raka gnezdo in strome, zlasti na invazivne spredaj (rdeča in zelena puščica).
Razmerje med MT1-MMP izražanja, CD11b + immunocytes gostoto in klinično-patološko funkcije
je bilo 77 (55,8%) in 15 (32,6%) bolnikov z visokim CD11b + immunocytes gostoto MT1-MMP pozitivna (n
= 138) in negativni (n
= 46) podskupine, v tem zaporedju (P
= 0,006). Verjetnost MT1-MMP izražanja je bistveno zmanjšalo za nizko podskupine CD11b + immunocytes gostote (razmerje obetov (OR) = 0,383 [95% IZ: 0,190-0,774], P
= 0,007, logistične regresije). MT1-MMP izraz in CD11b + immunocytes gostote so povezana s klinično-patološke značilnosti, kot je povzeto v tabeli 2. MT1-MMP izraz je bila povezana z majhno velikostjo tumorja (P
= 0,007), tumor na distalnem želodec (P
= 0,027) in povečano tveganje ponovitve (P
= 0,001), vendar ni povezana s starostjo, spolom, histološke zgradbe, seroza invazije, status bezgavk, stadij TNM in območij tumorja ponovitve (P
> 0,05 za vse). CD11b + immunocytes gostota je v korelaciji s statusom bezgavk (P
= 0,015), LNR (P
= 0,018) in fazi TNM (P
= 0,011), vendar ni povezana s starostjo, spolom, velikost tumorja , lokacija tumorja, histološki razred, serosa invazija in ponovitev tveganja (P
> 0,05 za vse) .table 2 razmerje med MT1-MMP, CD11b + immunocytes gostoto in cinico patoloških LASTNOSTI
spremenljivke

MT1-MMP izraz
CD11b + immunocytes gostota
Negativno (n
= 46)
pozitivna (n = 138)

P

Low (n
= 92)
Visoka (n
= 92)
P
N
(%)
N
(%)
N
(%)
N
(%)

Starost (let)
< 60
26 (56,5)
20 (43,5)
0,669
43 (43,4)
56 (56,6)
0,055
≥60
73 (52,9)
65 (47,1)
49 (57,6)
36 (42,4)
Spol
Moški
33 (25,0 )
99 (75,0)
1.000
66 (50,0)
66 (50,0)
1.000
Moški
13 (25,0)
39 (75,0)
26 (50,0)
26 (50.0)
velikosti (cm2) tumor
< 16
12 (16,4)
61 (83,6)
0.007
35 ( 47.9)
38 (52,1)
0,404
≥16
31 (35,2)
57 (64,8)
48 (54,5)
40 (45,5)
Lokacija
distalno
18 (18,4)
80 (81,6)
0,027
51 (52,0)
47 (48,0)
0,555
Non-distalni
28 (32.6)
58 (67,4)
41 (47,7)
45 (52,3)
histološke b
1/2
13 (23,6)
42 (76,4)
0,845
24 (43,6)
31 (56,4)
0,376
3/4
31 (25,0)
93 (75,0)
63 (50,8)
61 (49,2)
limfnega vozla metastaze
Da
31 (23,7)
100 (76,3)
0.511
73 (55,7)
58 (44,3)
0,015
št
15 (28,3)
38 (71,7)
19 (35,8)
34 (64,2)
LNR c
≤0.33
27 (28,7 )
67 (71,3)
0.233
39 (41,5)
55 (58,5)
0,018
> 0,33
19 (21,1)
71 (78,9)
53 (58,9)
37 (41,1)
korena invazije (fazi T)
T1-2
4 (14,8)
23 (85,2)
0,186
10 (37,0)
17 (63,0)
0,145
T3-4
42 (26,8)
115 (73,2)
82 (52,2)
75 (47,8)
TNM uprizoritev
Early (I, II)
13 (22,4)
45 (77,6)
0.583
21 (36,2)
37 (63,8)
0,011
Napredno (III, IV)
33 (26,2)
93 (73,8)
71 (56,3)
55 (43,7)
Ponavljanje
Da
9 (15,0 )
51 (85,0)
0,029
30 (50,0)
30 (50,0)
1.000
št
37 (29,8)
87 (70,2)
62 (50,0)
62 (50.0)
ponovitve lokacija d
lokalno-regionalni
7 (18,9)
30 (81,1)
0,460
20 (54,1)
17 (45,9)
0,426
Distant
2 (8.7)
21 (91,3)
10 (43,5)
13 (56,5)
analize smo izvedli na podlagi 161 bolnikih s popolnimi podatki o velikosti tumorja (TS) .b je bila analiza opravljena na podlagi 179 bolnikih z želodčno adenocarcinoma.c mediana razmerja bezgavkah (LNR) je bila 0,33 (6 primerov), in primere, GC bili različni v različnih podskupinah . d je bilo vključenih 60 ponavljajoče se primere.
preživetje analizo
V 184 primerih je bila mediana OS 26.8 (razpon 0.8-102.3) mesecev, in stopnja preživetja 1-, 3- in 5-yr je bila 79,3%, 50,5% in 37,4%, v tem zaporedju (slika 2A). Kot je bilo pričakovati, so bili ti tradicionalni dejavnike, povezane z OS GC bolnikov, kot so velikost tumorja, histološki razred, status bezgavk, seroza invazije in stopnji TNM (P
< 0,05 za vse). Poleg tega so bile tako visoke CD11b + immunocytes gostota in MT1-MMP negativni izraz povezana z boljšim OS (P
vrednost je bila 0.031 in 0.015, v tem zaporedju.) (Slika 2B, 2C). Sposobnost, diskriminacija v OS je v lnr podskupinah povečal (P
< 0,001) v primerjavi z bezgavk stanja podskupine (P
= 0,015) (slika 2D, 2E), in analizo ROC je pokazala, da je z vidika napovedovanja tveganje smrti, klasifikacija po lnr (območja pod krivuljo: 0,659 [95% iZ: 0,579-0,739], P
< 0,001) imeli boljše rezultate kot pozitivnih bezgavk številka (območja pod krivuljo: 0,568 [95 % IZ: 0,484-0,653], P
= 0,114). Vsi rezultati so pokazali, da so bili MT1-MMP pozitiven, nizka CD11b + immunocytes gostoto in visoko LNR dejavniki tveganja, povezani s slabo prognozo (slika 2, tabela 3). Slika 2 Kumulativna OS bolnikov GC. (A) OS 184 bolnikov GC. (B) Low CD11b + immunocytes gostota je bila povezana s slabim OS. (C) Bolniki v MT1-MMP pozitivne skupine so bili na večje tveganje za smrt. (D, E) Oba bezgavke status in LNR so povezana s slabim OS, ampak LNR lahko bolje razlikovati podskupine bolnikov. (F) Kombinirane funkcije bi lahko pomenilo, OS bolnikov GC bolj natančno.
Tabela 3 Analize dejavnikov v zvezi z OS
spremenljivk
N
N smrti (%)

Mediana OS (razpon)
5-letno preživetje (%)
log-rang test χ2value
P
Starost (let)
< 60
99
52 (52,5)
30,1 (1,5-99,5)
45.1
3,584
0,058
≥60
85
56 (65,9)
24.8 (,8-102,3)
28.6
Spol
Moški
132
74 (56,1)
30,3 (0,8-102,3)
40.0
2.114
0,146
ženska
52
34 (65,4)
25,1 (1,3-94,8)
30,3
velikost tumorja (cm2)
< 16
73
35 (47,9)
41,6 (1.1-99.5)
52,9
7.882
0,005
≥16
88
57 (64,8)
24,2 (0,8-102,3)
29,2
histološke b
1/2
55
88 (56,1)
30,1 (1.1-102.3)
54,2
13,412
< 0,001
3/4
124
20 (74,1)
16,8 (0,8-74,9)
30,1
bezgavk
Da
131
83 (63,4)
24,8 (0.8-102.3)
52,9
5.895
0,015
Ne
53
25 (47,2)
34.1 (6.1 -99,5)
30.5
korena invazije (fazi T)
T1-2
27
7 (25,9)
58,9 (20.2-99.5)
74,9
14.742
< 0,001
T3-4
157
101 (64,3)
24.8 (,8-102,3)
30,8
TNM
zgodaj (I, II)
58
26 (44,8)
35,8 (6.1-99.5)
54,0
9.823
0,002
Napredno
126
82 (65,1)
22,8 (0,8-102,3)
29,2
(III, IV)
Surgery
SR
159
89 (56,0)
30,0 (0.8-102.3)
39.8
5,902
0,015
TR /CR
25
19 (76,0)
18,0 (3,8-89,9)
21.8
kemoterapijo
Da
149
87 (49,7)
33,5 (5.3-99.5)
35,9
0,016
0,900
Ne
35
21 (60,0)
28.4 (,8-102,3 )
40,0
LNR c
≤0.33
94
41 (43,6)
38,8 (1,1-102,3)
55,1
24,881
< 0,001
> 0,33
90
67 (74,4)
20,1 (0,8-99,1)
18,3
MT1-MMP
Negative
46
18 (39,1)
35,7 (3,8-79,3)
54,0
5,869
0,015
Positive
138
90 (65,2)
25,4 (0,8-102,3)
32,2
CD11b + immunocytes gostota
nizka
92
62 (67,4)
25,1 (0,8-99,1)
27,6
4,655
0,031
Visoka
92
46 (50,0)
30,7 (1.3-102.3)
46,7
kombinirane funkcije (MT1-MMP gostote, CD11b + immunocytes gostote in lnr) ABB Group I
73
26 (35,6)
38,7 (6.1-94.1)
61,4
28.173
< 0,001 ABB Group II
111
82 (73,9)
18.1 (0,8- 90.9)
21.1
je bila analiza opravljena na podlagi 161 bolnikih s popolnimi podatki o velikosti tumorja. b Analiza je bila opravljena na podlagi 179 bolnikih z adenokarcinomom želodca. c Mediana lnr je bila 0,33 (6 primerov), in primeri, GC bili različni v različnih subgroups.OS: celokupno preživetje; SR: vmesni seštevek resekcijo; TR: skupno resekcijo; CR: kombinirana resekcijo; LNR. Razmerje vozlišče limfna
Kot je predlagano zgoraj, so raziskovali združene lastnosti na osnovi števila dejavnikov tveganja izboljšati napovedovanje GC prognozo (tabela 3). Tako so bili pacienti razdeljena v dve podskupini glede na število funkcij tveganja: skupino I, so opazili najmanj dva dejavnika tveganja; in so opazili skupina II, dva ali tri dejavnike tveganja. Skupna analiza je pokazala, da je bila OS bolnikov v skupini II bistveno krajši kot pri bolnikih v skupini I (P
< 0,001). (Slika 2F)
Multivariatna analiza in ROC analiza
V univariantne analizi, tradicionalna clinico -pathological značilnosti (na primer velikost tumorja, stopnjo T, stopnji TNM, metode kirurgije, in status ponovitve), MT1-MMP izražanja, CD11b + immunocytes gostote in lnr so bile povezane z OS. Poleg tega je smrt tveganje v kombinirani skupini II znatno povečal (P
< 0,001).
Dejavniki, ki prikazujejo pomen, ki ga univariatno analizo so bile vključene v multivariatno Cox analizi sorazmernih tveganj. V tej študiji so LNR, MT1-MMP, CD11b in združene lastnosti zelo povezana. Zato sta bili dve ločeni multivariatne modeli ustvarjeni, da se prepreči Multikolinearnost med temi spremenljivkami. LNR, MT1-MMP izraz in CD11b + immunocytes gostote so neodvisne napovednih dejavnikov za OS po izključitvi drugih zavajajočih dejavnikov (P
< 0,05 za vse) Poleg tega so bile združene funkcije neodvisni napovedni dejavnik, preveč (HR = 3,818 [95 % iZ: 2,223-6,557], P
< 0,001) (tabela 4) .table 4 Multivariatno analize dejavnikov, povezanih z za operacijski sistem
dejavniki
OS
HR

95% CI
P
Model velikosti 1
tumorje: < 16 cm2vs
≥16 cm2
1,821
1.168- 2,839
0.008
korena invazije (fazi T):
T1-2 vs
T3-4
3.232
1.440-7.251
0,004
Lymoh vozlišč metastaz:
Ne vs
Da
1.012
0,610-1,679
0.964
vrste kirurgije: SR vs
TR /CR
2.030
1,128-3,653
0,018
LNR: nizka (≤0.33) vs visoke (> 0,33)
1.957
1.233-3.108
0,004
MT1-MMP: Negative vs
Pozitivna
2,596
1,496-4,506
0.001
CD11b + immunocytes gostota: Visoka vs
nizko
1.838
1.183-2.855
0,007
Model velikost 2
Tumor: < 16 cm2vs
≥16 cm2
1,734
1,120-2,686
0.014
korena invazije (fazi T):
T1-2 vs
T3-4
3,013
1,360-6,674
0.007
Lymoh vozlišč metastaze:
Ne vs
Da
0,696
0,404 - 1.200
0,192
vrste kirurgije: SR vs
TR /CR
2.023
1.134 - 3.606
0.017
kombinirane lastnosti: skupina I vs
skupine II
3,818
2,223-6,557
< 0,001
OS : celokupno preživetje; HR: razmerje tveganj; NA: ni sprejet; SR: vmesni seštevek resekcijo; TR: skupno resekcijo; CR: kombinirana resekcijo; LNR. Razmerje vozlišče limfna
analizo ROC je bila izvedena za dodatno oceniti napovedni delovanje štirih neodvisnih dejavnikov v tej študiji. Kombinirani lastnosti bi bilo bolje napovedati kliničnih rezultatov bolnikov GC v primerjavi z drugimi dejavniki (površina pod krivuljo: 0,689 [95% IZ: 0,609-0,768], P
< 0,001) (Slika 3). Slika 3 ROC analiza prediktivne vrednosti za smrt. Med 4 neodvisnih napovednih dejavnikov, je bila površina pod krivuljo novega kombiniranega funkcijo ena največjih. Kombinirana funkcija bi imeli boljšo napovedno učinkovitost pri bolnikih GC.
Razprava
smo predlagali kombinirano analizo integriranih značilnosti tumorskih stromalnih kot koristno strategijo za ovrednotenje napredovanje raka in preživetje bolnikov v GC, ki temelji na naših raziskav, ki se osredotočajo na koevolucija tumorskih celic in tumorskega mikrookolja in [19, 21, 22]. Ta študija je bila zasnovana, da razišče izvedljivost te kombinirane strategije. Poleg tega je bila uporabljena izboljšana metoda avtomatizacijo analizirati digitaliziranih slik, da se zagotovi tako ponovljivost in dobre rezultate v tej študiji. Kot Fridman [23] predlagal, bi take metode utrl pot za boljše razumevanje kompleksnih tumor mikrookolje, kakor tudi za rutinsko ocenjevanje parametrov za klinično obravnavo bolnikov z rakom. Tu, je bilo vključenih 184 primerov GC da oceni napovednih vrednosti optimiziranih običajnih bolezenskih prognostičnih dejavnikov, celičnih molekularnih dejavnikov, imunskih faktorjev in kombiniranih funkcij. To je pomemben korak k vzpostavitvi izvedljiv napovedni sistem, ki vključuje tako klinično-patološko, tumorjev in stromalne funkcije v naših raziskavah serije [19, 21, 22].
Od 184 primerov, demografski in klinično-patološko podobnimi značilnostmi, tistim v drugih velikih serijah GC prebivalstva [24]. Naši rezultati so pokazali, da je bila ekspresija MT1-MMP pogosto povezana s povečanim tveganjem ponovitve, vendar je razlika v recidivno lokaciji niso bila statistično signifikantna. Ti rezultati so bili podobni prejšnjem poročilu [25]. MT1-MMP igra pomembno vlogo pri ponižujoče vrste I in IV kolagenov za olajšanje rakave celice širijo. Poleg tega lahko MT1-MMP pospešuje angiogenezo in micrometastasis preko žilnega poti [26].
Glede imunskih celic, narava, gostota in lega so pomembni parametri za celovito ocenijo situ
imunske reakcije in posebne vlogo pri napredovanju raka. V tej študiji so CD11b + immunocytes večinoma nahaja na invazivnega spredaj. Razlika v CD11b + immunocytes gostota je bila statistično značilna med bezgavk in ne metastais podskupin. Poleg tega je v CD11b + immunocytes gostota višja v začetku kot naprednih bolnikov GC, podobnih poročil Sconocchia et al. in Ladoire sod. [27, 28]. Kandidati, ki jih Ministrstvo za šolstvo Kitajske (št 5052011303014) Naložbeni, znanost sklad National Natural Science Foundation Kitajske (št 81171396), Science sklad za ustvarjalne raziskovalne skupine National Natural Science Foundation Kitajske (št 20621502, 20921062 ), in temeljne raziskovalne Sredstva za centralnih univerz Ministrstva za šolstvo Kitajske (št 4.103.005).
Avtorji "prvotna predložiti datoteke za slike
Spodaj so povezave do avtorjev prvotna predloženih spisov za slike. Vsi avtorji so prebrali in potrdil končni rokopis.

• Izražanje p53, inducibilne sintaze dušikovega oksida in žilnega endotelija rastnega faktorja v želodcu predrakavih in rakavih poškodb: korelacija s klinično features
• Povečanje-integrin povezana kinaze ni kanonično daje NF-κB-povzročeni prednosti rasti v želodcu rakavih celic z aktiviranjem ERK1 /2