caractéristiques combinées basées sur l'expression MT1-MMP, la densité CD11b + de immunocytes et LNR prédire les résultats cliniques des caractéristiques de cancer

combinés gastriques basés sur l'expression MT1-MMP, la densité CD11b + de immunocytes et LNR prédire les résultats cliniques du cancer gastrique
Résumé de l'arrière-plan
Compte tenu de la complexité du microenvironnement de la tumeur, aucun marqueur unique à partir de cellules cancéreuses pourrait prédire adéquatement les résultats cliniques du cancer gastrique (GC). L'objectif de cette étude était d'évaluer le rôle pronostique des caractéristiques combinées, y compris la pathologie classique, protéinase et les données immunitaires en GC.
Méthodes
En plus des études pathologiques, immunohistochimie a été utilisée pour évaluer de type membrane 1 matrice métalloprotéinase ( MT1-MMP) expression et CD11b densité + de immunocytes en trois microréseaux de tissus GC indépendants contenant 184 tissus GC. Résultats de caractéristiques distinctes et combinés ont été évalués pour leur impact sur la survie globale (OS).
Nous avons trouvé que les facteurs traditionnels, y compris la taille de la tumeur, le grade histologique, l'état des ganglions lymphatiques, invasion de la séreuse et le stade TNM ont été associés à OS (P
< 0,05 pour l'ensemble). En outre, des différences statistiquement significatives dans les OS ont été trouvés parmi ratio de ganglions lymphatiques (LNR) sous-groupes (P
< 0,001), des sous-groupes MT1-MMP (P
= 0,015), et CD11b + immunocytes sous-groupes de densité (P
= 0,031). Plus important encore, la fonction combinée (MT1-MMP positif, faible CD11b + immunocytes densité et haute LNR) a été trouvé par une analyse multivariée pour être un des facteurs pronostiques indépendants pour OS après l'exclusion d'autres facteurs de confusion (HR = 3,818 [IC à 95%: 2,223 à 6,557 ], P
< 0,001). Conclusions de; En outre, cette fonctionnalité combinée avait une meilleure performance pour prédire les résultats cliniques après la chirurgie longtemps avant récidive avait eu lieu (0,001, P
<aire sous la courbe: 0,689 [0,609 à 0,768 IC à 95%]).
Ces résultats indiquent que de meilleures informations sur GC pronostic pourrait être obtenu à partir de facteurs combinés clinico-pathologiques, les cellules tumorales et le microenvironnement de la tumeur.
Mots-clés
cancer gastrique pronostic tumeur microenvironnement ganglionnaire rapport Contexte
cancer gastrique (GC) est le quatrième cancer le plus fréquent et la troisième cause de décès par cancer dans le monde [1]. Des progrès considérables ont été accomplis dans le diagnostic précoce du cancer, mais il n'y a pas eu une avance comparable dans la précision de la prédiction clinique des résultats [2]. Seule la classification TNM de l'Union Internationale Contre le Cancer (UICC) ou American Joint Committee on Cancer (AJCC) est utilisé sur une base régulière, ce qui est l'instrument le plus important pour guider la stratégie de traitement pour les patients du GC [3]. Cependant, glucocorticoïdes ont une hétérogénéité significative dans leurs comportements biologiques, et les tumeurs du même stade clinique montrent souvent des différences de cours et le traitement de la réponse clinique [4]. Ainsi, l'identification des facteurs qui influent sur l'invasion et les métastases, et mise en place de panneaux de biomarqueurs pour prédire le potentiel de malignité et d'identifier les différents groupes à risque sont d'une importance primordiale.
Malgré des années de recherche et des centaines de rapports sur les marqueurs tumoraux dans GC, le nombre cliniquement marqueurs utiles est pitoyablement petite [5]. Récemment, un nouvel outil pronostique du rapport des ganglions lymphatiques (LNR), définie comme le nombre de MLN divisé par le nombre de ganglions lymphatiques prélevés, a été proposée. Elle peut améliorer la précision de pronostic et de réduire la migration de la phase par rapport à l'UICC (2002, 6e édition) Système de mise en attente [6, 7]. LNR a été considéré comme l'une des meilleures variables clinicopathologiques pour la prédiction du pronostic du cancer gastrique après chirurgie curative dans les études rétrospectives [8], ce qui est le succès dans l'optimisation des marqueurs cliniques traditionnels. Cependant, la découverte d'autres marqueurs dits prometteurs en laboratoire se traduit plutôt lentement dans l'applicabilité clinique. Une raison à cela est le fait que le développement du cancer et à la progression est déterminée par la co-évolution entre les cellules tumorales et microenvironnement de la tumeur plutôt qu'à une seule mutation [9]. Une telle co-évolution a été rapportée dans de nombreuses études, toutes indiquent que les interactions entre les cellules tumorales et du stroma de la tumeur créer un micro-environnement unique et dynamique pour affecter la progression tumorale [10]. Par conséquent, le criblage de nouveaux facteurs moléculaires du microenvironnement tumoral complexe (composants cellulaires et stromales) représente une autre approche essentielle pour identifier les facteurs pronostiques.
MT1-MMP est connue comme une métalloprotéinase de matrice de type membrane et MT1-MMP matrice extracellulaire (ECM) la dégradation par les cellules tumorales ou des cellules stromales est essentielle pour l'invasion du cancer par les membranes basales et stromales matrice interstitielle [11]. Bien que MT1-MMP a montré une signification pronostique dans plusieurs cancers humains tels que le cancer du sein, le cancer du pancréas et le cancer colorectal [12, 13], on connaît peu sur la portée exacte de MT1-MMP chez les patients atteints de GC. Les principaux contributeurs à la microenvironnement de la tumeur sont l'inflammation et des médiateurs inflammatoires [9]. Il a été proposé que la contexture immunitaire peut influencer les résultats cliniques des patients atteints de cancer, et le score immunitaire serait important prédicteur comparable à la classification TNM [14]. CD11b est exprimée par un sous-ensemble spécifique de cellules myéloïdes, y compris les progéniteurs CD34 +, les monocytes, les granulocytes, les cellules NK et les lymphocytes T activés, ce qui représente pour l'immunité innée [15, 16]. Le rôle de l'immunogénicité de la tumeur et les immunothérapies sont en cours de discussion [17]. L'extension de notre connaissance du rôle complexe de cellules immunitaires dans GC pourrait finalement ouvrir la voie pour le développement tant attendu avec succès thérapeutique.
Basé sur cette compréhension, nous avons étudié le rôle pronostique du marqueur proteinase cellulaire MT1-MMP et le marqueur immunitaire microenvironnement CD11b + immunocytes en GC. Une attention particulière a été accordée à la valeur pronostique des caractéristiques combinées de MT1-MMP, CD11b densité + de immunocytes et LNR.
Méthodes
Les patients et le suivi
Les dossiers des patients du GC ayant subi une chirurgie curative avec un intention au département d'oncologie, Hôpital Zhongnan de l'Université de Wuhan (Wuhan, Chine) entre Décembre 2002 et Février 2011 étaient examinés. caractéristiques démographiques et clinico-pathologiques majeures étaient disponibles. Aucun patient n'a reçu une chimiothérapie néoadjuvante avant la chirurgie. stade TNM a été déterminée en fonction de la 7e édition du système UICC /AJCC TNM [18]. Par le plus récent suivi le 31 mai 2012, la médiane de suivi était de 59,5 (intervalle: 16.8-102.3) mois. Un total de 108 (58,7%) patients sont décédés. La survie globale (OS) a été défini comme étant l'intervalle entre la date de la chirurgie à la mort liée GC. Toute récidive dans la cavité abdomino-pelvienne a été défini comme une récidive locale-régionale; et la récurrence via le flux sanguin a été défini comme des métastases à distance, telles que les métastases du foie et des métastases pulmonaires. Le consentement éclairé écrit a été obtenu à partir des patients et le protocole d'étude a été approuvé par le comité d'éthique de l'hôpital Zhongnan de l'Université de Wuhan. L'étude a été réalisée selon les normes éthiques de la Déclaration de l'Association Médicale Mondiale d'Helsinki.
Spécimens de cancer gastrique et microréseaux de tissus
Tous hématoxyline et l'éosine (HE) -stained diapositives ont été examinés par des examinateurs indépendants qui ne sont pas au courant de les caractéristiques cliniques ou les résultats cliniques. Trois matrices tissulaires (TMA) ont été construits. En bref, deux carottes ont été prélevés dans chaque tissu tumoral représentant (1,5 mm de diamètre pour chaque noyau). Ensuite, trois sections AGT avec les tissus tumoraux 184 ont été construits (en collaboration avec Shanghai biopuces Company Ltd., Shanghai, Chine).
Immunohistochimie et de l'évaluation des résultats immunohistochimiques
Les anticorps primaires pour MT1-MMP (sc101451, Santa Cruz , États-Unis, la dilution 1/100), CD11b + (ab52478, Abcam, Royaume-Uni, la dilution 1/100), la peroxydase de raifort correspondante (HRP) conjugué anticorps secondaire (ab97265, ab97200, Abcam, Royaume-Uni, la dilution 1/300), et diaminobenzidine (DAKO, Danemark) ont été obtenus et validés pour l'étiquetage.
Les protocoles d'immunohistochimie ont été décrits précédemment [19]. En bref, trois sections AGT ont été déparaffinées avec du xylène thenrehydrated par trois changements de l'alcool. une activité de peroxydase endogène a été bloquée par 0,3% de peroxyde d'hydrogène pendant 10 min. La récupération d'antigène a été réalisée par un traitement par micro-ondes dans un tampon 0,01 M de Tris-EDTA (pH 9,0) pendant 20 minutes. Les lames ont été incubé pendant 1 h avec les anticorps primaires pour MT1-MMP (sc101451, Santa Cruz, Etats-Unis, la dilution 1/100), CD11b + (ab52478, Abcam, Royaume-Uni, la dilution 1/100). Après un lavage avec une solution saline tamponnée au Tris (TBS, pH 7,4), les sections ont été incubées avec b peroxydase de raifort correspondant (HRP) conjuguée à un anticorps secondaire (ab97265, ab97200, Abcam, Royaume-Uni, la dilution 1/300) pendant encore 50 min. réaction antigène-anticorps a été visualisée avec diaminobenzidine 3,30 (DAKO, Danemark). Après contre l'hématoxyline, les coupes ont été déshydratées par ordre croissant des alcools au xylène et montées. contrôles de coloration positifs ont été réalisées en parallèle avec des coupes en paraffine amygdale humaine normale. Le contrôle négatif a été réalisé en omettant l'anticorps primaire.
Les lames ont été examinées sous microscope Olympus BX51 fluorescence équipé d'un appareil photo Olympus DP72 (Olympus Optical Co., Ltd., Tokyo, Japon). Panorama de chaque noyau marqué a été obtenu sur la base de 4 photographies sous faible grossissement (x 100) avec une haute résolution par le logiciel DP-BSW (Olympus Optical Co., Ltd., Tokyo, Japon). les mêmes paramètres ont été utilisés pour chaque photographie, de façon à minimiser le biais de sélection. L'expression de MT1-MMP et CD11b densité + de immunocytes ont été numériquement évaluées par le logiciel Image-Pro Plus v6.2 (Media Cybernetics Inc, Bethesda, MD). Pour garder des résultats fiables et comparables, un cadre uniforme pour toutes les diapositives a été appliquée pour la lecture de chaque coloration d'anticorps. densité optique intégrée (IOD) de toute la coloration positive de MT1-MMP dans chaque photographie a été mesurée, et son rapport à la superficie totale de chaque photographie a été calculé comme expression MT1-MMP. Densité CD11b + de immunocytes a été enregistrée comme le nombre de cellules positives par unité de surface du tissu en millimètres carrés. seuils pour la densité MT1-MMP a été explorée par "la meilleure approche de coupure par le test du log-rank» [20]. Et la valeur de 25e percentile a été défini comme étant le point de coupure pour déterminer les MT1-MMP sous-groupes d'expression négative et positive dans cette étude. Pour la densité + de immunocytes CD11b, le point de coupure pour la définition des sous-groupes (basse et haute densité + CD11b des immunocytes) était la valeur médiane.
Analyse statistique
Les analyses statistiques ont été réalisées avec le logiciel SPSS (version 18.0, SPSS Institute, Chicago, IL). Le Pearson χ 2 essai ou test exact de Fisher a été utilisé pour comparer les variables qualitatives. L'analyse de Kaplan-Meier a été utilisée pour l'analyse de la survie et de l'importance parmi les sous-groupes de patients a été calculé par le test du log-rank. Le modèle de régression de Cox a été utilisé pour effectuer une analyse à plusieurs variables. La régression logistique a été utilisée pour évaluer l'influence des facteurs binaires. Récepteur d'exploitation courbe caractéristique (ROC) analyse a été utilisée pour déterminer la valeur prédictive des paramètres. Deux faces P
< 0,05 a été considérée comme statistiquement significative.
Principales caractéristiques clinico-pathologique Résultats et conclusions immunohistochimique
Parmi les cas 184 inclus dans cette étude étaient 132 (71,7%) des hommes et 52 (28,3%) des femmes, allant âge 25-85 ans (moyenne ± écart-type: 57,9 ± 12,9 ans). Les principales caractéristiques démographiques et clinico-pathologiques ont été présentées dans les données démographiques Tableau 1.Table 1 Patients et caractéristiques clinico-pathologiques
Articles
Valeur
Age (M ± SD, yrs)
57,9 ± 12,9
Sexe Homme (%)
132 (71,7)
Femme (%)
52 (28,3)
Tumor emplacement
estomac distal (%)
98 (53,3)
estomac non distale (%)
86 (46,7)
anatomopathologiques types
Le grade histologique de adénocarcinome 1/2
55 (29,9)
bien /adénocarcinome modérément différencié (%)
55 (29,9)
Le grade histologique 3/4
124 (67,4)
Low adénocarcinome /indifférencié (%)
102 (55,4)
carcinome adénocarcinome /chevalière mucineux
22 (12,0) Autres
un (%)
5 (2,7)
invasion Séreuse
Non (T0, T1, T2) (%)
27 (14,7)
Oui (T3, T4) (%)
157 (85,3)
métastases ganglionnaires
Non (N0) (%)
53 (28,8)
Oui (N1, N2, N3) (%)
131 (71,2)
LNR, médian (Range)
0,33 (0-1)
Distant Métastase
M0 (%)
177 (96,2)
M1 (%)
7 (3,8)
stades TNM
précoce (stades I, II) (%)
58 (31,5)
avancée (stades III, IV) (%)
126 (68,5)
Chirurgie
Sous-total résection (%)
159 (86,4)
non Total résection (%)
25 ( 13.6)
chimiothérapie No (%)
35 (19,0)
Oui (%)
149 (81,0)
Récurrence
Non (%)
124 ( 67,4)
Oui (%)
60 (32,6)
Récurrence emplacement b
local-régional 37 (61,7)
Distant
23 (38,3)
clinique situation à la fin du suivi
Vivre et sans récidive
72 (39,1)
mort ou vivant avec récidive
112 (60,9)
expression MT1-MMP
négatif
46 (33,3)
positif
138 (66,7)
CD11b + immunocytes (cellules /mm2)
médian (plage)
257 (4-2101)
a Autres inclus adénosquameux carcinome in 3 (1,62%) cas, carcinoïde atypique dans 1 (0,54%) cas, et neuroendocrine carcinome in 1 (0,54%) case.b 60 cas récurrents ont été évalués.
immunohistochimie a été effectuée dans tous les GC AGT et le résultat de chaque échantillon a été obtenu pour l'analyse numérique à base d'images-(Figure 1A-1D). MT1-MMP coloration est principalement dans le cytoplasme ou de la membrane cellulaire des cellules tumorales. La plupart des cellules stromales étaient négatifs, mais une coloration positive sporadique sur ces cellules a également été observée (figure 1F, 1G). CD11b + immunocytes principalement infiltré dans la jonction du nid du cancer et du stroma (Figure 1F, 1H). Le niveau de densité MT1-MMP et CD11b densité + de immunocytes ont été présentés dans le tableau 1. Le 25e percentile de la densité MT1-MMP était 0.00186 et 138 (75,0%) patients ont été documentés comme MT1-MMP positif selon les critères de classification mentionnés ci-dessus. La valeur médiane de CD11b + immunocytes étaient 257 cellules par unité de surface du tissu au millimètre carré. Figure 1 conclusions immunohistologiques en AGT. (AD) d'un exemple représentatif de MT1-MMP (A), CD11b + immunocytes (C) coloration d'un tissu microarray de GC, et l'image numérique correspondant analysé avec le logiciel d'image, avec MT1-MMP (B) et CD11b + immunocytes (D ) représenté en rouge. (E, G) MT1-MMP coloration est principalement dans le cytoplasme ou de la membrane cellulaire des cellules tumorales (flèche bleue), et la plupart des cellules du stroma a une coloration négative, même si une coloration positive sporadique sur ces cellules a également été observée (F, H). CD11b coloration a montré que CD11b + immunocytes infiltrés principalement dans la jonction du nid de cancer et stroma, en particulier à l'avant invasive (rouge et les flèches vertes).
Relation entre l'expression MT1-MMP, CD11b densité + de immunocytes et les caractéristiques clinico-pathologiques
Il y avait 77 (55,8%) et 15 (32,6%) patients avec une forte densité de CD11b + de immunocytes dans MT1-MMP positif (n = 138
) et négatif (n = 46
) sous-groupes, respectivement (P
= 0,006). La probabilité d'expression MT1-MMP a diminué de manière significative pour une faible sous-groupe CD11b densité + de immunocytes (odds ratio (OR) = 0,383 [IC à 95%: 0,190 à 0,774], P = 0,007
, régression logistique). L'expression de MT1-MMP et CD11b densité + de immunocytes ont été corrélées avec les caractéristiques clinico-pathologiques telles que résumées dans le tableau 2. expression MT1-MMP a été corrélée avec la petite taille de la tumeur (P
= 0,007), une tumeur au estomac distal (P
= 0,027) et un risque accru de récidive (P
= 0,001), mais pas en corrélation avec l'âge, le sexe, le grade histologique, l'invasion de la séreuse, le statut des ganglions lymphatiques, le stade TNM et les sites de récurrence de la tumeur (P
> 0,05 pour toutes). CD11b densité + de immunocytes a été corrélée avec l'état des ganglions lymphatiques (P
= 0,015), LNR (P
= 0,018) et le stade TNM (P
= 0,011), mais pas en corrélation avec l'âge, la taille de la tumeur de genre , l'emplacement de la tumeur, le grade histologique, l'invasion de la séreuse et le risque de récidive (P
> 0,05 pour l'ensemble) .Table 2 La relation entre MT1-MMP, les variables de CD11b + immunocytes densité et Cinico-pathologiques caractéristiques

expression de MT1-MMP
CD11b + immunocytes densité
négatif (n = 46
)
positif (n = 138)

faible P
(n = 92
)
High (n = 92
)
P
N
(%)
N
(%)
N
(%)
N
(%)

Age (ans)
< 60
26 (56,5)
20 (43,5)
0,669
43 (43,4)
56 (56,6)
0,055
≥60
73 (52,9)
65 (47,1)
49 (57,6)
36 (42,4)
Sexe Homme
33 (25,0 )
99 (75,0)
1.000
66 (50,0)
66 (50,0)
1.000
Femme
13 (25,0)
39 (75,0)
26 (50,0)
26 (50,0)
taille de la tumeur (cm2) un
< 16
12 (16.4)
61 (83,6)
0,007
35 ( 47.9)
38 (52.1)
0,404
≥16
31 (35,2)
57 (64,8)
48 (54,5)
40 (45,5)
Lieu
distal
18 (18,4)
80 (81,6)
0,027
51 (52,0)
47 (48,0)
0,555
non distale 28 (32,6)
58 (67,4)
41 (47,7)
45 (52,3)
histologiques de grade b
1/2
13 (23,6)
42 (76,4)
0,845
24 (43,6)
31 (56,4)
0,376
3/4
31 (25,0)
93 (75,0)
63 (50,8)
61 (49,2)
métastases ganglionnaires
Oui
31 (23,7)
100 (76,3)
0,511
73 (55,7)
58 (44,3)
0,015
No
15 (28,3)
38 (71,7)
19 (35,8)
34 (64,2)
LNR c
≤0.33
27 (28,7 )
67 (71,3)
0,233
39 (41,5)
55 (58,5)
0,018
> 0,33
19 (21.1)
71 (78,9)
53 (58,9)
37 (41.1)
invasion Séreuse (stade T)
T1-2
4 (14,8)
23 (85,2)
0,186
10 (37,0)
17 (63,0)
0,145
T3-4
42 (26,8)
115 (73,2)
82 (52,2)
75 (47,8) TNM
13 (22,4)
45 (77,6)
0,583
21 (36,2)
37 (63,8)
0,011
Avancé (III, IV)
33 (26,2)
93 (73,8)
71 (56,3)
55 (43,7)
Récurrence
Oui
9 (15,0 )
51 (85,0)
0,029
30 (50,0)
30 (50,0)
1.000
Non
37 (29,8)
87 (70,2)
62 (50,0)
62 (50,0)
Récurrence emplacement d
local-régional
7 (18,9)
30 (81,1)
0,460
20 (54,1)
17 (45,9)
0,426
Distant
2 (8.7)
21 (91,3)
10 (43,5)
13 (56,5)
une analyse a été basée effectuée sur 161 patients avec des données complètes de taille de la tumeur (TS) .b analyse a été réalisée sur la base de 179 patients atteints de adenocarcinoma.c gastrique La médiane du ratio de ganglions lymphatiques (LNR) était 0,33 (6 cas), et les cas de GC étaient différents sous-groupes distincts . d 60 cas récurrents ont été inclus.
Survival analyse
Pour 184 cas, le système d'exploitation médian était de 26,8 (intervalle 0.8-102.3) mois, et le taux de survie de 1, 3 et 5 ans était de 79,3%, 50,5% et 37,4%, respectivement (figure 2A). Comme prévu, ces facteurs traditionnels ont été associés à l'OS de patients du GC, comme la taille de la tumeur, le grade histologique, l'état des ganglions lymphatiques, invasion de la séreuse et le stade TNM (P
< 0,05 pour l'ensemble). En outre, à la fois haute CD11b + immunocytes densité et MT1-MMP expression négative ont été corrélées avec une meilleure OS (P
valeur était de 0,031 et 0,015, respectivement). (Figure 2B, 2C). La capacité de discrimination dans OS a été augmenté dans les sous-groupes LNR (P
< 0,001) par rapport aux ganglions lymphatiques sous-groupes d'état (P = 0,015
) (figure 2D, 2F), et l'analyse ROC a montré que, en termes de prédiction risque de décès, la classification par LNR (aire sous la courbe: 0,659 [IC à 95%: 0,579 à 0,739], P
< 0,001) avait de meilleures performances que la lymphe positifs noeuds numériques (zones sous la courbe: 0,568 [95 % CI: 0,484 à 0,653], P = 0,114
). Tous les résultats ont indiqué que MT1-MMP positif, faible CD11b + immunocytes densité et haute LNR ont été des facteurs de risque liés à un mauvais pronostic (figure 2, tableau 3). Figure 2 OS cumulatif des patients du GC. (A) OS de 184 patients du GC. la densité (B) Faible CD11b + a été lié à une mauvaise OS. (C) Les patients du groupe positif MT1-MMP étaient plus à risque de mort. (D, E) Les deux ganglions lymphatiques statut et LNR ont été corrélés avec une mauvaise OS, mais pourrait mieux différencier LNR sous-groupes de patients. (F) Caractéristiques combinées pourraient indiquer OS des patients du GC avec plus de précision.
Tableau 3 Analyses des facteurs concernant les OS
Variables
N
N de décès (%)

médian OS (Range)
taux de survie à 5 ans (%)

log-rank test χ2value
P
âge (ans)
< 60
99
52 (52,5)
30,1 (1,5 à 99,5)
45,1
3.584
0,058
≥60
85
56 (65,9)
24,8 (0,8 à 102,3)
28,6
Sexe Homme
132
74 (56,1)
30,3 (0,8 à 102,3)
40,0
52
34 (65,4)
25,1 (1,3 à 94,8)
30,3
taille de la tumeur
2.114
0,146
Femme (cm2) un
< 16
73
35 (47,9)
41,6 (1,1 à 99,5) 52,9

7.882
0,005
≥16
88
57 (64,8)
24,2 (0,8 à 102,3)
29,2
Le grade histologique b
1/2
55
88 (56,1)
30,1 (1,1 à 102,3)
54,2
13,412
< 0,001
3/4
124
20 (74,1)
16,8 (0,8 à 74,9)
30,1
métastases ganglionnaires
Oui
131
83 (63,4)
24,8 (0,8 à 102,3)
52,9
5,895
0,015
No
53
25 (47,2)
34.1 (6.1 -99,5)
30,5
invasion Séreuse (stade T)
T1-2
27
7 (25,9)
58,9 (20,2 à 99,5) 74,9

14,742
< 0,001
T3-4
157
101 (64,3)
24,8 (0,8 à 102,3)
30,8
TNM Early (I, II)
58
26 (44,8)
35,8 (6,1 à 99,5)
54,0
9,823
0,002
avancée
126
82 (65,1) 22,8
(0,8 à 102,3)
29,2
(III, IV)
Chirurgie
SR
159
89 (56,0)
30,0 (0,8 à 102,3)
39,8
5,902
0,015
TR /CR
25
19 (76,0)
18,0 (3,8 à 89,9)
21,8
Chimiothérapie
Oui
149
87 (49,7)
33,5 (5,3 à 99,5)
35,9
0,016
0,900
No
35
21 (60,0)
28,4 (0,8 à 102,3 )
40,0
LNR c
≤0.33
94
41 (43,6)
38,8 (1,1 à 102,3)
55,1
24,881
< 0,001
> 0,33
90
67 (74,4)
20,1 (0,8 à 99,1)
négatif de 18,3
MT1-MMP 46
18 (39,1)
35,7 (3,8 à 79,3)
54,0
5.869
0,015
positive
138
90 (65,2)
25,4 (0,8 à 102,3)
32,2
92
62 (67,4)
25,1 (0,8 à 99,1) 27,6

4.655
0,031
haut de bas de CD11b + immunocytes densité
92
46 (50,0)
30,7 (1,3 à 102,3)
46,7
caractéristiques combinées (densité MT1-MMP, CD11b densité + de immunocytes et LNR)
Groupe I
73
26 (35,6)
38,7 (6,1 à 94,1)
61,4
28,173
< 0,001
Groupe II
111
82 (73,9)
18,1 (0,8 à 90,9)
21,1
une analyse a été réalisée sur la base de 161 patients avec des données complètes de la taille de la tumeur. b L'analyse a été effectuée sur la base de 179 patients atteints d'un adénocarcinome gastrique. c La médiane de 0,33 était LNR (6 cas), et les cas de GC étaient différentes en subgroups.OS distinctes: la survie globale; SR: résection subtotale; TR: résection totale; CR: résection combinée; LNR:. Ratio de ganglions lymphatiques
Comme nous l'avons proposé ci-dessus, les caractéristiques combinées en fonction du nombre de facteurs de risque ont été explorées pour améliorer la prédiction du pronostic GC (tableau 3). Ainsi, les patients ont été divisés en deux sous-groupes en fonction du nombre de caractéristiques de risque: le groupe I, moins de deux facteurs de risque ont été observés; et du groupe II, deux ou trois facteurs de risque ont été observés. L'analyse combinée a montré que le système d'exploitation des patients du groupe II était significativement plus courte que les patients du groupe I (P
< 0,001) (Figure 2F) analyse multivariée et ROC analyse
En analyse univariée, clinico traditionnelle
. caractéristiques -pathological (telles que la taille de la tumeur, le stade T, le stade TNM, les méthodes de chirurgie, et l'état de récidive), l'expression MT1-MMP, CD11b densité + des immunocytes et LNR ont été associés à l'OS. En outre, le risque de décès dans le groupe combiné II a augmenté de façon significative (P
< 0,001).
Facteurs présentant une signification par analyse univariée ont été intégrées dans multivariée de Cox analyse des risques proportionnels. Dans cette étude, LNR, MT1-MMP, CD11b et caractéristiques combinées ont été fortement corrélées. Par conséquent, deux modèles multivariés distincts ont été générés pour éviter la multicolinéarité entre ces variables. LNR, MT1-MMP expression et CD11b densité + de immunocytes étaient des facteurs pronostiques indépendants pour OS après l'exclusion d'autres facteurs de confusion (P
< 0,05 pour l'ensemble) En outre, les caractéristiques combinées étaient facteur pronostique indépendant, trop (HR = 3,818 [95 % CI: 2,223 à 6,557], P
< 0,001) (tableau 4) .Table 4 analyses multivariées des facteurs associés aux facteurs OS
OS
95% de CI
P
Modèle taille 1
Tumor HR
: < 16 cm2vs
≥16 cm2
1.821
1.168- 2.839
0,008
invasion Séreuse (stade T):
T1-2 vs
T3-4
3.232
1,440 à 7,251
0,004
Lymoh nœuds métastases:
Non vs
Oui
1.012
0,610 à 1,679
0,964
types de chirurgie: SR vs
TR /CR
2.030
1,128 à 3,653
0,018
LNR: faible (≤0.33) vs High (> 0,33)
1.957
1,233 à 3,108
0,004
MT1-MMP: négatif vs
positive
2.596
1,496 à 4,506
0,001
CD11b densité + de immunocytes: High vs
Low
1.838
1,183 à 2,855
0,007 modèle taille 2
Tumor: < 16 cm2vs
≥16 cm2
1.734
1,120 à 2,686
0,014
invasion Séreuse (stade T):
T1-2 vs
T3-4
3.013
1,360 à 6,674
0,007
Lymoh nœuds métastases:
Non vs
Oui
0,696
0,404 - 1,200 0,192

types de chirurgie: SR vs
TR /CR
2.023
1,134 à 3,606
0.017
caractéristiques combinées: Groupe I vs
Groupe II
3.818
2,223 à 6,557
< 0,001
OS : la survie globale; HR: rapport risque; NA: non adopté; SR: résection subtotale; TR: résection totale; CR: résection combinée; LNR:. Rapport ganglionnaire
analyse ROC a été mis en œuvre afin de mieux évaluer la performance pronostique des quatre facteurs indépendants dans cette étude. caractéristiques combinées serait mieux de prédire les résultats cliniques des patients du GC par rapport à d'autres facteurs (aire sous la courbe: 0,689 [IC à 95%: 0,609 à 0,768], P
< 0,001) (Figure 3). Figure 3 analyse ROC de la valeur prédictive de la mort. Parmi les 4 facteurs pronostiques indépendants, l'aire sous la courbe de la nouvelle fonctionnalité combinée était le plus grand. Le rapport de fonctionnalité combinée pourrait avoir une meilleure performance pronostique chez les patients du GC.
Nous avons proposé une analyse combinée des caractéristiques du stroma tumoral intégrés comme une stratégie utile pour évaluer la progression du cancer et la survie des patients en GC en fonction de nos études axées sur le la co-évolution des cellules tumorales et microenvironnement tumoral et [19, 21, 22]. Cette étude a été conçue pour étudier la faisabilité de cette stratégie combinée. En outre, un procédé d'automatisation améliorée pour analyser les images numérisées a été utilisée pour assurer à la fois une reproductibilité et une bonne performance dans cette étude. Comme Fridman [23] a suggéré, ces méthodes pourraient ouvrir la voie à une meilleure compréhension du microenvironnement de la tumeur complexe, ainsi que pour l'évaluation de routine des paramètres de prise en charge clinique des patients atteints de cancer. Ici, 184 cas de GC ont été inclus pour évaluer les valeurs pronostiques des facteurs optimisés classiques pathologiques pronostiques, facteurs moléculaires cellulaires, les facteurs immunitaires et les caractéristiques combinées. Ceci est l'étape essentielle vers l'établissement d'un système de pronostic fonctionnel intégrant à la fois, les caractéristiques de la tumeur et du stroma clinico-pathologique dans nos études de séries [19, 21, 22].
De 184 cas, les données démographiques et les caractéristiques clinico-pathologiques sont similaires à ceux rapportés dans d'autres grandes séries de la population de GC [24]. Nos résultats ont montré que l'expression de MT1-MMP était souvent corrélée avec un risque accru de récidive, mais la différence dans la situation de rechute n'a pas été statistiquement significative. Ces résultats étaient similaires au rapport précédent [25]. MT1-MMP joue un rôle important dans les types I et IV collagènes pour faciliter les cellules cancéreuses d'étalement dégradant. En outre, MT1-MMP peut favoriser l'angiogenèse et micrométastases par voie vasculaire [26].
En ce qui concerne les cellules immunitaires, la nature, la densité et l'emplacement sont des paramètres importants pour évaluer globalement la réaction in situ
immunitaire et spécifique rôle dans la progression du cancer. Dans cette étude, CD11b + immunocytes étaient principalement situées à l'avant invasive. La différence de densité CD11b + de immunocytes était statistiquement significative entre les ganglions lymphatiques et les métastases sous-groupes non-metastais. En outre, la densité du CD11b + était plus élevé au début que les patients du GC avancés, semblables aux rapports de Sconocchia et al. et Ladoire et al. [27, 28]. Les candidats financés par le ministère de l'Éducation de la Chine (n ° 5052011303014), le Fonds des sciences de la National Natural Science Foundation de Chine (n ° 81171396), le Fonds des sciences pour les groupes de recherche Creative de la National Natural Science Foundation de Chine (n ° 20621502, 20921062 ), et les fonds de la recherche fondamentale pour les universités centrales du Ministère de l'éducation de la Chine (n ° 4103005).
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