Gecombineerde functies op basis van MT1-MMP expressie, CD11b + immunocyten dichtheid en LNR voorspellen klinische resultaten van de maag cancer

gecombineerde functies op basis van MT1-MMP expressie, CD11b + immunocyten dichtheid en LNR voorspellen klinische resultaten van maagkanker
De abstracte Achtergrond
Gezien de complexiteit van tumor micro kon geen enkele merker van kankercellen adequaat voorspellen van de klinische resultaten van maagkanker (GC). Het doel van deze studie was de prognostische rol Gecombineerd kenmerken zoals conventionele pathologie, proteïnase en immuun gegevens GC evalueren.
Methods
Naast pathologische studies, werd immunohistochemie gebruikt om te bepalen membraan-type 1 matrixmetalloproteïnase ( MT1-MMP) expressie en CD11b + immunocyten dichtheid in drie onafhankelijke GC weefsel microarrays met 184 GC weefsels. Afzonderlijke en gecombineerde functies werden geëvalueerd op hun impact op de totale overleving (OS).
Resultaten
We vonden dat de traditionele factoren, waaronder de grootte van de tumor, histologische graad, lymfeklierstatus, serosa invasie en TNM stadium werden geassocieerd met OS (P Restaurant < 0,05 voor iedereen). Bovendien statistisch significante verschillen gevonden tussen OS lymfeklier ratio (LNR) subgroepen (P
< 0,001), MT1-MMP subgroepen (P
= 0,015), en CD11b + immunocyten dichtheid subgroepen (P
= 0,031). Het belangrijkste is gebonden kenmerken (MT1-MMP positief, laag CD11b + immunocyten dichtheid en hoge LNR) bleek door multivariate analyse een onafhankelijke prognostische factoren voor OS na uitsluiting van andere verstorende factoren (HR = 3,818 [95% Cl: 2,223-6,557 ], P Restaurant < 0,001). Daarnaast is deze gecombineerde functie had betere prestaties in het voorspellen van de klinische resultaten na de operatie lang voordat recidief had voorgedaan (gebied onder de curve: 0,689 [95% BI: 0,609-0,768], P Restaurant < 0,001).
Conclusies
Deze bevindingen wijzen erop dat betere informatie over GC prognose kon worden verkregen uit gecombineerd clinico-pathologische factoren, tumorcellen en de tumor micro-omgeving.
Sleutelwoorden
Maagkanker prognose tumor micro Lymfeklier verhouding Achtergrond
Maagkanker (GC) is de vierde meest voorkomende kanker en de derde oorzaak van kanker overlijden wereldwijd [1]. Aanzienlijke vooruitgang is geboekt in de vroege diagnose van kanker, maar er is niet een vergelijkbare vooruitgang in de nauwkeurigheid van de klinische uitkomst voorspellen [2] geweest. Alleen de TNM classificatie van de International Union Against Cancer (UICC) of gemengde commissie Amerikaanse on Cancer (AJCC) wordt gebruikt op een routine-basis, dat is het belangrijkste instrument om de behandeling strategie gids voor GC patiënten [3]. Echter, GC aanzienlijke heterogeniteit in hun biologische gedrag en tumoren van hetzelfde klinische fase vaak op verschillende klinische verloop en behandelingsrespons [4]. Zo, de identificatie van de factoren die van invloed invasie en metastase, en de vestiging van biomarkers panelen om maligne potentieel te voorspellen en om verschillende risicogroepen te identificeren zijn van het grootste belang.
Ondanks jaren van onderzoek en honderden rapporten op tumormarkers in GC, het aantal van klinisch bruikbare markers is bedroevend klein [5]. Onlangs is een nieuwe prognostische instrument lymfeknoopma- ratio (LNR), gedefinieerd als het aantal MLN gedeeld door het aantal lymfklieren teruggehaald, werd voorgesteld. Het kan de prognose nauwkeurigheid te verbeteren en vermindering van de fase migratie in vergelijking met de UICC (2002, 6e editie) staging systeem [6, 7]. LNR wordt beschouwd als een van de beste clinicopathologic variabelen voor het voorspellen van de prognose van maagkanker na curatieve chirurgie in retrospectieve studies [8], hetgeen het succes in de optimalisatie van traditionele klinische markers. De ontdekking van andere zogenaamde veelbelovende merkers in laboratorium vertaalt zich tamelijk langzaam in de klinische toepasbaarheid. Een reden hiervoor is dat kankerontwikkeling en progressie wordt bepaald door de co-evolutie tussen tumorcellen en de tumor micro-omgeving in plaats van een enkele mutatie [9]. Dergelijke co-evolutie is gemeld door vele studies, die aangeven dat interacties tussen tumorcellen en stromale tumor een unieke en dynamische micro aantasten tumorprogressie [10]. Daarom screening van nieuwe moleculaire factoren uit het complex tumor micro (cellulaire en stromale componenten) is eveneens een essentieel benadering prognostische factoren identificeren.
MT1-MMP is bekend als een membraan-type matrix metalloproteinase en MT1-MMP gemedieerde extracellulaire matrix (ECM) afbraak van tumorcellen of stromale cellen is essentieel voor kankerinvasie door middel basaalmembranen en stromale interstitiële matrix [11]. Hoewel MT1-MMP prognostische betekenis heeft aangetoond in verschillende menselijke kankers, zoals borstkanker, pancreaskanker en colorectale kanker [12, 13], is weinig bekend over de juiste betekenis van MT1-MMP in GC patiënten. Belangrijke bijdrage leveren aan de tumor micro-omgeving zijn ontstekingen en ontstekingsmediatoren [9]. Voorgesteld is dat het immuunsysteem contexture het klinische verloop van de kankerpatiënten kan beïnvloeden en het immuunsysteem score zou belangrijke voorspeller vergelijkbaar TNM [14] zijn. CD11b wordt uitgedrukt door een specifieke subset van myeloïde cellen, met inbegrip van CD34 + progenitorcellen, monocyten, granulocyten, NK-cellen en geactiveerde T-cellen, goed voor de aangeboren immuniteit [15, 16]. De rol van tumorimmunogeniciteit en immuuntherapie worden besproken [17]. Uitbreiding van onze kennis van de complexe rol van immuuncellen in GC kon de weg voor de langverwachte succesvolle ontwikkeling van therapieën uiteindelijk effenen.
Basis van dit inzicht, onderzochten we prognostische rol van cellulaire proteinase marker MT1-MMP en micro immuunsysteem marker CD11b + immunocyten in GC. Speciale aandacht werd besteed aan de prognostische waarde van de gecombineerde kenmerken van MT1-MMP, CD11b + immunocyten dichtheid en LNR.
Methoden
patiënten en follow-up Ondernemingen De gegevens van GC patiënten die een operatie ondergingen met een curatieve opzet bij de afdeling Oncologie, Zhongnan Ziekenhuis van Wuhan University (Wuhan, China) tussen december 2002 en februari 2011 werden beoordeeld. Grote demografische en clinico-pathologische kenmerken beschikbaar waren. Geen patiënten kregen neo-adjuvante chemotherapie voor de operatie. TNM werd bepaald volgens de 7e editie UICC /AJCC TNM systeem [18]. Door de meest recente follow-up op 31 mei 2012, de mediane follow-up was 59,5 (uitersten: 16,8-102,3) maanden. Een totaal van 108 (58,7%) patiënten overleden. Overall overleving (OS) werd gedefinieerd als het interval tussen de datum van de operatie naar GC doodsoorzaak. Herhaling in abdominoperineale bekkenholte werd gedefinieerd als lokaal-regionaal recidief; en herhaling via de bloedstroom werd gedefinieerd als metastasen op afstand, zoals de lever en longen metastase metastase. Schriftelijke toestemming is verkregen van de patiënten en het studieprotocol werd goedgekeurd door de ethische commissie van Zhongnan Ziekenhuis van Wuhan University. De studie werd uitgevoerd volgens de ethische normen van de World Medical Association Verklaring van Helsinki.
Maagkanker exemplaren en weefsel microarrays
Alle hematoxyline en eosine (HE) -stained dia's werden onderzocht door onafhankelijke beoordelaars die niet op de hoogte waren de klinische kenmerken of klinische resultaten. Drie tissue microarrays (TMA) werden gebouwd. Kort samengevat werden twee kernen uit elke representatieve tumorweefsel (1,5 mm diameter voor elk monster). Dan, drie TMA secties met 184 tumorweefsels werden gebouwd (in samenwerking met Shanghai Biochip Company Ltd, Shanghai, China).
Immunohistochemie en evaluatie van immunohistochemische bevindingen
De primaire antilichamen voor MT1-MMP (sc101451, Santa Cruz , USA, verdunning 1/100), CD11b + (ab52478, Abcam, UK, verdunning 1/100), de bijbehorende mierikswortelperoxidase (HRP) geconjugeerd secundair antilichaam (ab97265, ab97200, Abcam, UK, verdunning 1/300) en diaminobenzidine (DAKO, Denemarken) werden verkregen en gevalideerd voor de etikettering. Ondernemingen De immunohistochemie protocollen werden eerder [19] beschreven. In het kort werden drie TMA secties deparaffinised met xyleen thenrehydrated door middel van drie veranderingen van alcohol. Endogene peroxidase activiteit werd geblokkeerd met 0,3% waterstofperoxide gedurende 10 minuten. Antigeenterugtrekking werd uitgevoerd door behandeling met microgolven in 0,01 M Tris-EDTA buffer (pH 9,0) gedurende 20 min. Dia's werden gedurende 1 uur met de primaire antilichamen voor MT1-MMP (sc101451, Santa Cruz, Verenigde Staten, verdunning 1/100), CD11b + (ab52478, Abcam, UK, verdunning 1/100). Na wassen met Tris-gebufferde zoutoplossing (TBS, pH 7,4), werden secties geïncubeerd met de corresponderende b mierikswortelperoxidase (HRP) geconjugeerd secundair antilichaam (ab97265, ab97200, Abcam, UK, verdunning 1/300) gedurende nog eens 50 min. Antigeen-antilichaam reactie werd gevisualiseerd met 3,30-diaminobenzidine (DAKO, Denemarken). Na tegenkleuring met hematoxyline werden secties gedehydrateerd door middel van oplopende alcoholen en xyleen gemonteerd. Positieve kleuring controles werden parallel uitgevoerd met paraffine secties van normale humane amandelen. Negatieve controle werd uitgevoerd door het weglaten van het primaire antilichaam. Ondernemingen De objectglaasjes werden onder Olympus BX51 fluorescentiemicroscoop uitgerust met een Olympus DP72 camera (Olympus Optical Co., Ltd., Tokyo, Japan) onderzocht. Panorama van elk gemerkt kern werd verkregen gebaseerd op 4 foto's in het kader van low-power vergroting (× 100) met een hoge resolutie van de DP-BSW software (Olympus Optical Co., Ltd., Tokyo, Japan). Dezelfde instellingen werden gebruikt voor iedere foto, teneinde de selectievertekening minimaliseren. De MT1-MMP expressie en CD11b + immunocyten dichtheid werden digitaal geëvalueerd door Image-Pro Plus v6.2 software (Media Cybernetics Inc, Bethesda, MD). Om de resultaten betrouwbaar en vergelijkbaar te houden, een uniforme omgeving voor alle dia's toegepast voor het lezen van elk antilichaam kleuring. Geïntegreerde optische dichtheid (IOD) van alle positieve kleuring van MT1-MMP in elke foto werd gemeten en de verhouding van de totale oppervlakte van elke foto werd berekend als MT1-MMP expressie. CD11b + immunocyten dichtheid werd geregistreerd als het aantal positieve cellen per weefseloppervlak eenheid in vierkante millimeters. Cut punten voor MT1-MMP dichtheid werd onderzocht door "de beste cut-off aanpak door log-rank test" [20]. En de 25e percentiel waarde werd gedefinieerd als de cut-off point op de MT1-MMP negatieve en positieve expressie subgroepen in deze studie te bepalen. Voor de CD11b + immunocyten dichtheid, de cut-off punt voor de definitie van subgroepen (lage en hoge CD11b + immunocyten dichtheid) was de mediane waarde.
Statistische analyse
Statistische analyses werden uitgevoerd met SPSS-software (versie 18.0, SPSS Institute, Chicago, IL). De Pearson χ 2-test of Fisher's exact test werd gebruikt om kwalitatieve variabelen te vergelijken. Kaplan-Meier analyse werd gebruikt om te overleven analyse en betekenis onder subgroepen van patiënten werd berekend door log rank test. De Cox regressie model werd gebruikt om de multivariate analyse uit te voeren. Logistische regressie werd gebruikt om de invloed van binaire factoren te beoordelen. Receiver operating characteristic curve analyse (ROC) werd gebruikt om de voorspellende waarde van de parameters te bepalen. Tweezijdige P Restaurant < 0,05 werd beschouwd als statistisch significant.
Resultaten
geaccepteerde klinische en pathologische kenmerken en immunohistochemische bevindingen
Van de 184 gevallen in deze studie waren 132 (71,7%) en 52 mannen (28,3%) vrouwen, variërend in leeftijd 25-85 jaar (gemiddelde ± SD: 57,9 ± 12,9 jaar). De belangrijkste demografische en clinico-pathologische kenmerken werden gepresenteerd in demografie Tabel 1.Table 1 patiënten en clinico-pathologische kenmerken
Items
Waarde
Age (M ± SD, yrs)
57,9 ± 12,9
Geslacht
Man (%)
132 (71,7)
Vrouw (%)
52 (28,3)
Tumor locatie
distale maag (%)
98 (53,3)
Non-distale maag (%)
86 (46,7)
Pathologische types
Darmkanker
histologische graad 1/2
55 (29,9)
Goed /Matig gedifferentieerd adenocarcinoom (%)
55 (29,9)
histologische graad 3/4
124 (67,4)
Laag /Onzichtbare adenocarcinoom (%)
102 (55,4)
Mucineuze adenocarcinoom /zegelring cell carcinoma
22 (12,0)
Anderen a (%)
5 (2.7)
serosa invasie verhuur No (T0, T1, T2) (%)
27 (14,7)
Ja (T3, T4) (%)
157 (85,3)
lymfekliermetastasen verhuur No (N0) (%)
53 (28,8)
Ja (N1, N2, N3) (%)
131 (71,2)
LNR, Mediaan (Range)
0,33 (0-1)
Distant metastase
M0 (%)
177 (96,2)
M1 (%)
7 (3.8)
TNM stadia
Vroege (fasen I, II) (%)
58 (31.5)
Geavanceerd (Stages III, IV) (%)
126 (68,5)
Surgery
Subtotaal resectie (%)
159 (86,4)
Non-Subtotaal resectie (%)
25 ( 13.6)
Chemotherapie verhuur No (%)
35 (19,0)
Ja (%)
149 (81,0)
Herhaling verhuur No (%)
124 ( 67,4)
Ja (%)
60 (32,6)
Herhaling locatie b
Local-regionale
37 (61,7)
Distant
23 (38,3)
Clinical de status aan het eind van de follow-up
live en zonder herhaling
72 (39,1)
Dood of levend met een recidief
112 (60,9)
MT1-MMP expressie
Negatief
46 (33,3)
Positief
138 (66,7)
CD11b + immunocyten (cellen /mm2)
mediaan (bereik)
257 (4-2101)
Anderen opgenomen adenosquamous carcinoma in 3 (1,62%) gevallen atypisch carcinoïde in 1 (0,54%) het geval, en neuro-endocriene carcinoma in 1 (0,54%) case.b 60 recidiverende gevallen werden geëvalueerd.
Immunohistochemie werd uitgevoerd in alle GC TMA's en het resultaat van elk monster werd verkregen voor-beelden gebaseerde digitale analyse (figuur 1A-1D). MT1-MMP kleuring was voornamelijk in het cytoplasma of in de celmembraan van tumorcellen. De meeste van de stromale cellen waren negatief, hoewel sporadisch positieve kleuring op deze cellen ook waargenomen (Figuur 1E, 1G). CD11b + immunocyten vooral geïnfiltreerd in de kruising van kanker nest en stromale (figuur 1F, 1H). Het niveau van MT1-MMP dichtheid en CD11b + immunocyten dichtheid gepresenteerd in Tabel 1. De 25e percentiel van MT1-MMP dichtheid was 0,00186 en 138 (75,0%) patiënten werden gedocumenteerd als MT1-MMP positieve Volgens bovenvermelde indelingscriteria. De mediane waarde van CD11b + immunocyten waren 257 cellen per weefsel oppervlakte-eenheid in vierkante millimeter. Figuur 1 Immunohistologische bevindingen in TMA's. (AD) Representatief voorbeeld van MT1-MMP (A), CD11b + immunocyten (C) kleuring van een GC tissue microarray en het bijbehorende digitale beeld geanalyseerd met software-image, met MT1-MMP (B) en CD11b + immunocyten (D ) weergegeven in rood. (E, G) MT1-MMP kleuring was voornamelijk in het cytoplasma of in de celmembraan van tumorcellen (blauwe pijl), en de meeste stromacellen had negatieve kleuring, maar sporadisch positieve kleuring op deze cellen werd ook waargenomen (F, H). CD11b kleuring toonde aan dat CD11b + immunocyten vooral geïnfiltreerd in de kruising van kanker nest en stroma, vooral bij de invasieve voorzijde (rood en groen pijlen).
Relatie tussen MT1-MMP expressie, CD11b + immunocyten dichtheid en clinico-pathologische kenmerken
Er waren 77 (55,8%) en 15 (32,6%) patiënten met een hoge CD11b + immunocyten dichtheid in MT1-MMP positieve (n
= 138) en negatieve (n = 46
) subgroepen respectievelijk (P
= 0,006). De kans dat MT1-MMP-expressie was significant verlaagd voor laag CD11b + immunocyten dichtheid subgroep (odds ratio (OR) = 0,383 [95% BI: 0,190-0,774], p = 0,007
, logistische regressie). De MT1-MMP expressie en CD11b + immunocyten dichtheid werden gecorreleerd met de klinische en pathologische kenmerken als samengevat in tabel 2. MT1-MMP expressie correleerde met kleine tumorgrootte (P
= 0,007), tumor distale maag (P
= 0,027) en een verhoogd risico recidief (P
= 0.001), maar niet gecorreleerd met de leeftijd, geslacht, histologische graad, serosa invasie, lymfeklierstatus, TNM stadium en sites terugkeer van de tumor (P Restaurant > 0,05 voor iedereen). CD11b + immunocyten dichtheid werd gecorreleerd met lymfeklierstatus (P
= 0,015), LNR (P
= 0.018) en TNM stadium (P
= 0,011), maar niet gecorreleerd met de leeftijd, geslacht, tumorgrootte , tumor locatie, histologische graad, serosa invasie en recidief risico (P Restaurant > 0,05 voor iedereen) .table 2 De relatie tussen MT1-MMP, CD11b + immunocyten dichtheid en Cinico-pathologische kenmerken
Variabelen

MT1-MMP expressie
CD11b + immunocyten dichtheid
Negatief (n
= 46)
Positief (n = 138)

P
Low (n
= 92)
Hoog (n
= 92)
P
N
(%)
N
(%)
N
(%)
N
(%)

Age (jr) Restaurant < 60
26 (56,5)
20 (43,5)
0,669
43 (43,4)
56 (56,6)
0,055
≥60
73 (52,9)
65 (47.1)
49 (57,6)
36 (42,4)
Geslacht
Man
33 (25,0 )
99 (75,0)
1.000
66 (50,0)
66 (50,0)
1.000
Vrouw
13 (25,0)
39 (75,0)
26 (50,0)
26 (50,0)
tumorgrootte (cm2) een Restaurant < 16
12 (16,4)
61 (83,6)
0.007
35 ( 47,9)
38 (52.1)
0,404
≥16
31 (35,2)
57 (64,8)
48 (54,5)
40 (45,5)
Locatie
distale
18 (18,4)
80 (81,6)
0,027
51 (52,0)
47 (48,0)
0,555
Non-distale
28 (32,6)
58 (67,4)
41 (47,7)
45 (52,3)
histologische graad b
1/2
13 (23,6)
42 (76,4)
0,845
24 (43,6)
31 (56,4)
0,376
3/4
31 (25,0)
93 (75,0)
63 (50,8)
61 (49,2)
lymfekliermetastasen
Ja
31 (23,7)
100 (76,3)
0,511
73 (55,7)
58 (44,3)
0,015 verhuur No
15 (28,3)
38 (71,7)
19 (35,8)
34 (64,2)
LNR c
≤0.33
27 (28.7 )
67 (71,3)
0,233
39 (41,5)
55 (58,5)
0,018 Restaurant > 0,33
19 (21.1)
71 (78,9)
53 (58,9)
37 (41,1)
serosa invasie (T-stadium)
T1-2 verhuur 4 (14,8)
23 (85,2)
0,186
10 (37,0)
17 (63,0)
0,145
T3-4
42 (26,8)
115 (73,2)
82 (52,2)
75 (47,8)
TNM staging
Early (I, II)
13 (22,4)
45 (77,6)
0,583
21 (36,2)
37 (63,8)
0,011
Geavanceerd (III, IV)
33 (26,2)
93 (73,8)
71 (56,3)
55 (43,7)
Herhaling
Ja
9 (15,0 )
51 (85,0)
0.029
30 (50,0)
30 (50,0)
1.000 verhuur No
37 (29,8)
87 (70,2)
62 (50,0)
62 (50,0)
Herhaling locatie d
Local-regionale
7 (18,9)
30 (81,1)
0.460
20 (54.1)
17 (45,9)
0,426
Distant Pagina 2 (8.7)
21 (91,3)
10 (43,5)
13 (56,5)
Analyse werd uitgevoerd op basis op 161 patiënten met volledige gegevens van tumorgrootte (TS) .b Analyse werd uitgevoerd op basis van 179 patiënten met maag- adenocarcinoma.c De mediaan van lymfeklier ratio (LNR) was 0,33 (6 gevallen), en GC gevallen waren verschillend in verschillende subgroepen . d 60 recurrente zaken werden opgenomen.
Survival analyse
Voor 184 gevallen was de mediane OS was 26,8 (range ,8-102,3) maanden, en de 1-, 3- en 5-jaarsoverleving bedroeg 79,3%, 50,5% en 37,4%, respectievelijk (Figuur 2A). Zoals verwacht, waren de traditionele factoren die samenhangen met OS GC patiënten, zoals grootte van de tumor, histologische graad, lymfeklierstatus, serosa invasie en TNM stadium (P Restaurant < 0,05 voor iedereen). Bovendien zijn zowel hoge CD11b + immunocyten dichtheid en MT1-MMP expressie negatief zijn gecorreleerd met een betere OS (P
waarde was 0,031 en 0,015, respectievelijk.) (Figuur 2B, 2C). Het vermogen discriminatie OS was verhoogd bij LNR subgroepen (P
< 0,001) vergeleken met lymfeklieren toestand subgroepen (P
= 0,015) (figuur 2D, 2E) en ROC analyse toonde aan dat, wat betreft het voorspellen risico van overlijden, de indeling van LNR (gebied onder de curve: 0,659 [95% BI: 0,579-0,739], P Restaurant < 0,001) heeft betere prestaties dan positieve lymfeklieren nummer (Areas under the curve: 0,568 [95 % CI: 0,484-0,653], P
= 0,114). Alle resultaten geven aan dat MT1-MMP positief, laag CD11b + immunocyten dichtheid en hoge LNR waren risicofactoren voor slechte prognose (Figuur 2, Tabel 3). Figuur 2 Cumulatieve OS GC patiënten. (A) OS van 184 GC patiënten. (B) Lage CD11b + immunocyten dichtheid werd gerelateerd aan slechte OS. (C) Patiënten in MT1-MMP positieve groep werden met een hoger risico op overlijden. (D, E) Beide lymfeklieren status en LNR werden gecorreleerd met slechte OS, maar LNR kan beter differentiëren patiëntensubgroepen. (F) Gecombineerde Kenmerken kon OS van GC patiënten nauwkeuriger aan te geven.
Tabel 3 Analyses van factoren met betrekking tot OS
Variabelen
N
N van overlijden (%)

Mediaan OS (Range)
5-jaarsoverleving (%)
Log-rank test χ2value
P
Leeftijd (jr) Restaurant < 60
99
52 (52,5)
30,1 (1,5-99,5)
45,1
3,584
0,058
≥60
85
56 (65,9)
24,8 (,8-102,3)
28,6
Geslacht
Man
132
74 (56,1)
30,3 (,8-102,3)
40,0
2.114
0,146
Female
52
34 (65,4)
25,1 (1,3-94,8)
30,3
tumorgrootte (cm2) een Restaurant < 16
73
35 (47,9)
41,6 (1,1-99,5)
52,9
7,882
0.005
≥16
88
57 (64,8)
24.2 (,8-102,3)
29,2
histologische graad b
1/2
55
88 (56,1)
30,1 (1,1-102,3)
54,2
13,412 Restaurant < 0,001
3/4
124
20 (74,1)
16,8 (0,8-74,9)
30,1
lymfeklieren metastase
Ja
131
83 (63,4)
24,8 (,8-102,3)
52,9
5,895
0.015 verhuur No
53
25 (47,2)
34,1 (6,1 -99,5)
30,5
serosa invasie (T-stadium)
T1-2
27
7 (25,9)
58,9 (20,2-99,5)
74,9
14,742 Restaurant < 0,001
T3-4
157
101 (64,3)
24,8 (,8-102,3)
30,8
TNM
Early (I, II)
58
26 (44,8)
35,8 (6,1-99,5)
54,0
9,823
0.002
Geavanceerd
126
82 (65,1) 22,8
(,8-102,3)
29,2
(III, IV)
Surgery
SR
159
89 (56,0)
30,0 (,8-102,3)
39,8
5,902
0.015
TR /CR
25 | 19 (76,0)
18,0 (3,8-89,9)
21,8
Chemotherapie
Ja
149
87 (49,7)
33,5 (5,3-99,5)
35,9
0,016
0.900 verhuur No
35
21 (60,0)
28,4 (,8-102,3 )
40,0
LNR c
≤0.33
94
41 (43,6)
38,8 (1,1-102,3)
55,1
24,881 Restaurant < 0,001
> 0,33
90
67 (74,4)
20,1 (0,8-99,1)
18,3
MT1-MMP
Negatief
46
18 (39,1)
35,7 (3,8-79,3)
54,0
5,869
0.015
Positieve
138
90 (65,2)
25,4 (,8-102,3)
32.2
CD11b + immunocyten dichtheid
Low
92
62 (67,4)
25,1 (0,8-99,1)
27,6
4,655
0,031
High
92
46 (50,0)
30,7 (1,3-102,3)
46,7
Gecombineerde functies (MT1-MMP dichtheid, CD11b + immunocyten dichtheid en LNR)
Groep I
73
26 (35,6)
38,7 (6,1-94,1)
61,4
28,173 Restaurant < 0,001
groep II
111
82 (73,9)
18.1 (0,8- 90,9)
21.1
Analyse werd uitgevoerd op basis van 161 patiënten met volledige gegevens van tumorgrootte. b Analyse werd uitgevoerd op basis van 179 patiënten met adenocarcinoom van de maag. c De mediaan van LNR was 0,33 (6 gevallen), en GC gevallen waren verschillend in verschillende subgroups.OS: totale overleving; SR: subtotaal resectie; TR: totale resectie; CR: gecombineerde resectie; LNR. Lymfeklier verhouding
Zoals hierboven voorgesteld, in combinatie functies op basis van het aantal risicofactoren werden onderzocht om voorspelling van GC prognose (tabel 3) te verbeteren. Aldus werden de patiënten ingedeeld in twee subgroepen aan het aantal risicofactoren kenmerken: I bleek slechts twee risicofactoren waargenomen; en II, twee of drie risicofactoren waargenomen. Gecombineerde analyse bleek dat het besturingssysteem van de patiënten in groep II significant korter dan patiënten in groep I (P
< 0,001). (Figuur 2F)
Multivariate analyse en ROC-analyse
in univariate analyse traditionele clinico -pathological functies (zoals grootte van de tumor, T-stadium, TNM stadium, chirurgie methoden, en herhaling status), MT1-MMP expressie, CD11b + immunocyten dichtheid en LNR werden geassocieerd met OS. Bovendien is het overlijdensrisico in gecombineerde groep II aanzienlijk toegenomen (P Restaurant < 0,001).
Factoren toont betekenis van univariate analyse werden geïntegreerd in multivariate Cox proportionele gevarenanalyse. In deze studie werden LNR, MT1-MMP, CD11b en gecombineerde functies sterk gecorreleerd. Daarom werden twee afzonderlijke multivariate modellen gegenereerd om de multicollineariteit onder die variabelen voorkomen. LNR, MT1-MMP expressie en CD11b + immunocyten dichtheid waren onafhankelijke prognostische factoren voor OS na uitsluiting van andere verstorende factoren (P Restaurant < 0,05 voor iedereen) Bovendien is de gecombineerde functies waren onafhankelijk prognostische factor, ook (HR = 3,818 [95 % CI: 2,223-6,557], P Restaurant < 0,001) (tabel 4) .table 4 Multivariate analyses van factoren die samenhangen met OS
factoren
OS
HR
95% CI
P
Model 1
Tumor size: < 16 cm2vs
≥16 cm2
1,821
1.168- 2,839
0.008
serosa invasie (T-stadium):
T1-2 vs
T3-4
3,232
1,440-7,251
0.004
Lymoh knooppunten metastase:
No vs
Ja
1.012
0,610-1,679
0,964
types chirurgie: SR versus
TR /CR
2.030
1,128-3,653
0,018
LNR: laag (≤0.33) vs High (> 0,33)
1,957
1,233-3,108
0.004
MT1-MMP: Negatief vs
Positieve
2,596
1,496-4,506
0.001
CD11b + immunocyten dichtheid: Hoog vs
Low
1,838
1,183-2,855
0.007
Model 2
Tumor grootte: < 16 cm2vs
≥16 cm2
1.734
1,120-2,686
0,014
serosa invasie (T-stadium):
T1-2 vs
T3-4
3,013
1,360-6,674
0,007
Lymoh knooppunten metastase: verhuur No vs
Ja
0,696
0,404-1,200
0,192
Surgery types: SR vs
TR /CR
2,023
1,134-3,606
0,017
gecombineerde functies: Groep I vs
groep II
3,818
2,223-6,557 Restaurant < 0,001
OS : algemeen overleven; HR: hazard ratio; NB: niet aangenomen; SR: subtotaal resectie; TR: totale resectie; CR: gecombineerde resectie; LNR. Lymfeklier verhouding
ROC-analyse werd uitgevoerd om de prognostische prestaties van de vier onafhankelijke factoren in dit onderzoek verder te evalueren. Gecombineerde functies zou beter zijn om de klinische resultaten van GC patiënten in vergelijking met andere factoren (gebied onder de curve: 0,689 [95% BI: 0,609-0,768], P Restaurant < 0,001) te voorspellen (figuur 3). Figuur 3 ROC analyse van de voorspellende waarde voor de dood. Van de 4 onafhankelijke prognostische factoren, het gebied onder de curve van de nieuwe gecombineerde functie was de grootste. De gecombineerde functie kan beter prognostische prestaties in GC patiënten.
Discussion
we een gecombineerde analyse van geïntegreerde tumor stromale functies hebben voorgesteld als een nuttige strategie om de progressie van kanker en de patiënt te overleven in GC gebaseerd op onze studies gericht op de evaluatie co-evolutie van tumorcellen en tumor micro-omgeving en [19, 21, 22]. Deze studie werd ontworpen om de haalbaarheid van deze gecombineerde strategie te verkennen. Bovendien, een verbeterde automatisering methode om de gedigitaliseerde beelden te analyseren werd gebruikt om zowel reproduceerbaarheid en goede prestaties in dit onderzoek te verzekeren. Zoals Fridman [23] heeft, zouden dergelijke werkwijzen de weg vrijmaken voor een beter begrip van de complexe tumor micro-omgeving, alsmede de routine evaluatie van parameters voor klinische behandeling van kankerpatiënten. Hierin werden 184 GC gevallen hierbij de prognostische waarde van geoptimaliseerde conventionele pathologische prognostische factoren, cellulaire moleculaire factoren, immuunfactoren en de gecombineerde functies te evalueren. Dit is de essentiële stap op weg naar een werkbare prognostische systeem integratie van zowel clinico-pathologische, tumor en stromale functies in onze reeks studies [19, 21, 22].
Van 184 gevallen, de demografie en clinico-pathologische kenmerken overeenkomen met die gerapporteerd in andere grote reeks GC bevolking [24]. Onze resultaten toonden dat de expressie van MT1-MMP werd vaak gecorreleerd met een verhoogde kans op herhaling, maar het verschil in terugval locatie was niet statistisch significant. Deze resultaten waren vergelijkbaar met eerdere rapport [25]. MT1-MMP speelt belangrijke rol bij het afbreken types I en IV collageen kankercellen verspreiden vergemakkelijken. Bovendien kan MT1-MMP angiogenese en vasculaire micrometastasen ervan via route [26].
Wat immuuncellen, de aard, spreiding en lokatie zijn belangrijke parameters voor de in situ
immuunreactie en de specifieke uitgebreid kunnen evalueren rol in de progressie van kanker. In deze studie werden CD11b + immunocyten zich meestal aan de voorzijde invasief. Het verschil in CD11b + immunocyten dichtheid was statistisch significant tussen lymfeklieren metastase en niet-metastais subgroepen. Bovendien is de CD11b + immunocyten dichtheid hoger dan begin advanced GC patiënten vergelijkbaar met de verslagen Sconocchia et al. en Ladoire et al. [27, 28]. Kandidaten Gefinancierd door het Ministerie van Onderwijs van China (Nr 5052011303014), Science Fund van de National Natural Science Foundation of China (nr 81171396), Science Fonds voor Creative Onderzoeksgroepen van de National Natural Science Foundation of China (nr 20621502, 20921062 ), en de Fundamenteel Onderzoek fondsen voor de Central Universiteiten van het ministerie van Onderwijs van China (No. 4.103.005).
Authors 'originele ingediende dossiers voor afbeeldingen
Hieronder staan ​​de links naar de auteurs oorspronkelijke ingediende dossiers voor afbeeldingen. Alle auteurs hebben gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.

• Expressie van p53 induceerbare stikstofoxidesynthase en vasculaire endotheliale groeifactor gastrische precancereuze en cancereuze letsels: correlatie met klinische kenmerken
• Een verhoging van integrine-gekoppeld kinase verleent niet-canoniek NF-KB gemedieerde groeivoordelen maagkanker cellen door activering van ERK1 /2