Kombinerte funksjoner basert på MT1-MMP uttrykk, CD11b + immunocyttene tetthet og LNR forutsi klinisk utfall av magekreft

Kombinerte funksjoner basert på MT1-MMP uttrykk, CD11b + immunocyttene tetthet og LNR forutsi klinisk utfall av magekreft
Abstract
Bakgrunn
Gitt kompleksiteten i svulstens mikromiljø, kan ingen enkelt markør fra kreftceller tilstrekkelig forutsi den kliniske resultatene av magekreft (GC). Målet med denne studien var å evaluere den prognostiske rollen som kombinert funksjoner, inkludert konvensjonelle patologi, proteinase og immun data i GC.
Metoder
I tillegg til patologiske studier, immunhistokjemi ble brukt for å vurdere membran-type 1 matriksmetalloproteinase ( MT1-MMP) uttrykk og CD11b + immunocyttene tetthet i tre uavhengige GC microarray som inneholder 184 GC vev. Separate og kombinerte funksjoner ble evaluert for deres innvirkning på total overlevelse (OS).
Resultater
Vi fant at tradisjonelle faktorer, inkludert svulst størrelse, histologisk grad, lymfeknute status, serosa invasjon og TNM stadium var assosiert med OS (P
< 0,05 for alle). Videre ble statistisk signifikante forskjeller i OS funnet blant lymfeknute ratio (LNR) undergrupper (P
< 0,001), MT1-MMP undergrupper (P
= 0,015), og CD11b + immunocyttene tetthet undergrupper (P
= 0,031). Viktigst, ble kombinert funksjon (MT1-MMP positive, lav CD11b + immunocyttene tetthet og høy LNR) funnet ved multivariat analyse for å være en uavhengig prognostiske faktorer for OS etter utelukke andre konfunderende faktorer (HR = 3,818 [95% KI: 2,223 til 6,557 ], P
< 0,001). I tillegg har denne kombinerte funksjonen hatt bedre ytelse i å forutsi kliniske resultater etter operasjonen lenge før tilbakefall hadde skjedd (Areal under kurven: 0,689 [95% KI: 0,609 til 0,768], P
< 0,001).
Konklusjoner
Disse funnene tyder på at bedre informasjon om GC prognose kan fås fra kombinert klinisk-patologiske faktorer, tumorceller og svulsten mikromiljøet.
nøkkelord
Magekreft kreft~~POS=HEADCOMP prognose tumor mikrolymfeknute forholdet Bakgrunn
Magekreft kreft~~POS=HEADCOMP (GC) er den fjerde vanligste kreftformen og den tredje årsaken til kreftdød på verdensbasis [1]. Betydelig fremskritt er blitt gjort i tidlig diagnose av kreft, men det har ikke vært et tilsvarende sprang i nøyaktigheten av klinisk resultat forutsigelse [2]. Bare TNM klassifikasjon av International Union Against Cancer (UICC) eller amerikanske Joint Committee on Cancer (AJCC) brukes på rutinemessig basis, noe som er det viktigste virkemiddelet for å veilede behandlingsstrategi for GC pasienter [3]. Men GCer har betydelig heterogenitet i sine biologiske atferd, og svulster i samme klinisk stadium ofte viser forskjeller i klinisk forløp og behandlingsrespons [4]. Dermed identifisering av faktorer som påvirker invasjon og metastasering, og etablering av biomarkører paneler for å forutsi ondartet potensial og for å identifisere risikogrupper er av overordnet betydning.
Tross år med forskning og hundrevis av rapporter om tumor markører i GC, antall av klinisk anvendelige markører er ynkelig liten [5]. Nylig har en ny prognostisk redskap for lymfeknute-forhold (LNR), definert som antall MLN dividert med antall lymfeknuter hentede, ble foreslått. Det kan forbedre prognosen heten og redusere trinnet migreringen sammenlignet med UICC (2002, 6. utgave) staging system [6, 7]. LNR har vært ansett som en av de beste clinicopathologic variablene for prediksjon av prognose av magekreft etter kurativ kirurgi i retrospektive studier [8], som er suksess i optimalisering av tradisjonelle kliniske markører. Men oppdagelsen av andre såkalte lovende markører i laboratoriet settes heller sakte i klinisk anvendelse. En årsak til dette er det faktum at kreftutvikling og progresjon bestemmes av ko-evolusjon mellom tumorceller og tumormikromiljøet i stedet for en enkelt mutasjon [9]. Et slikt ko-evolusjon har blitt rapportert av mange studier, som alle viser at interaksjoner mellom tumorceller og tumor stromal skape et unikt og dynamisk mikromiljøet for å påvirke tumorprogresjon [10]. Derfor screening nye molekylære forhold fra komplekset tumor mikromiljøet (cellulære og stromale komponenter) representerer en annen vesentlig måte å identifisere prognostiske faktorer.
MT1-MMP er kjent som en membran-type matriks-metalloproteinase, og MT1-MMP-formidlet ekstracellulære matriks (ECM) nedbrytning av tumorceller eller stromale celler er viktig for kreft invasjon gjennom basalmembraner og stromal interstitial matrise [11]. Selv MT1-MMP har vist prognostisk betydning i flere humane kreftformer, som brystkreft, kreft i bukspyttkjertelen og endetarmskreft [12, 13], er lite kjent om nøyaktige betydningen av MT1-MMP i GC pasienter. Viktige bidragsytere til svulsten mikromiljøet er betennelser og betennelsesmediatorer [9]. Det er blitt foreslått at immun contexture kan påvirke det kliniske resultatet av kreftpasienter, og immun poeng vil være viktig prediktor sammenlignbar med TNM-klassifikasjon [14]. CD11b er uttrykt ved en spesifikk undergruppe av myeloide celler, inkludert CD34 + stamceller, monocytter, granulocytter, NK-celler og aktiverte T-celler, som utgjør de medfødt immunitet [15, 16]. Rollen av tumor immunogenisitet og immunterapi blir diskutert [17]. Utvide vår kunnskap om komplekse rollen av immunceller i GC kan til slutt bane vei for den etterlengtede vellykket utvikling av legemiddel.
Basert på denne forståelsen, undersøkte vi prognostisk rolle cellulær proteinase markør MT1-MMP og mikromiljøet immun markør CD11b + immunocyttene i GC. Spesiell oppmerksomhet ble betalt til den prognostiske verdien av de kombinerte funksjonene MT1-MMP, CD11b + immunocyttene tetthet og LNR.
Metoder
Pasienter og oppfølging
De registreringer av GC pasienter som gjennomgikk kirurgi med en kurativ hensikt ved Avdeling for kreftbehandling, Zhongnan Hospital of Wuhan University (Wuhan, Kina) mellom desember 2002 og februar 2011 ble gjennomgått. Store demografiske og klinisk-patologiske egenskaper var tilgjengelig. Ingen pasienter fikk neoadjuvant kjemoterapi før operasjonen. TNM stadium ble bestemt i henhold til den syvende utgaven UICC /AJCC TNM-systemet [18]. Ved den siste oppfølgings 31. mai 2012, median oppfølging var 59,5 (område: 16.8-102.3) måneder. Totalt 108 (58,7%) pasienter døde. Total overlevelse (OS) ble definert som intervallet fra dato for operasjonen til GC relaterte dødsfall. Enhver tilbakefall i mage--bekkenhulen ble definert som lokal-regional gjentakelse; og tilbakefall via blodstrøm ble definert som fjernmetastaser, som for eksempel levermetastaser og lungemetastaser. Skriftlig informert samtykke er innhentet fra pasienter og studieprotokollen ble godkjent av etisk komité Zhongnan Hospital of Wuhan University. Studien ble gjennomført i henhold til de etiske standardene i World Medical Association Helsinkideklarasjonen.
Magekreft prøver og microarray for
All hematoxylin og eosin (HE) -stained lysbilder ble undersøkt av uavhengige anmeldere som ikke var klar over de kliniske kjennetegn eller kliniske resultater. Tre microarray (TMA) ble konstruert. I korthet to kjerner ble tatt fra hver representative tumorvevet (1,5 mm i diameter for hver kjerne). Deretter ble tre TMA seksjoner med 184 tumorvev konstruert (i samarbeid med Shanghai biochip Company Ltd, Shanghai, Kina).
Immunohistochemistry og evaluering av immunhistokjemiske funn Bedrifter Den primære antistoffer for MT1-MMP (sc101451, Santa Cruz , USA, fortynning 1/100), CD11b + (ab52478, Abcam, Storbritannia, fortynning 1/100), tilsvarende pepperrot (HRP) konjugert sekundært antistoff (ab97265, ab97200, Abcam, Storbritannia, fortynning 1/300), og diaminobenzidin (DAKO, Danmark) ble innhentet og validert for merking.
Den immunhistokjemi protokoller ble beskrevet tidligere [19]. Kort sagt, ble tre TMA seksjoner deparaffinised med xylen thenrehydrated gjennom tre endringer av alkohol. Endogen peroksidaseaktivitet ble blokkert med 0,3% hydrogenperoksid i 10 minutter. Antigen gjenfinning ble utført ved mikrobølgebehandlingen i 0,01 M Tris-EDTA-buffer (pH 9,0) i 20 min. Slides ble inkubert i 1 time med de primære antistoffer for MT1-MMP (sc101451, Santa Cruz, USA, fortynning 1/100), CD11b + (ab52478, Abcam, Storbritannia, fortynning 1/100). Etter vasking med Tris-bufret saltoppløsning (TBS, pH 7,4) ble snittene inkubert med b den tilsvarende pepperrot-peroksidase (HRP) konjugert sekundært antistoff (ab97265, ab97200, Abcam, Storbritannia, fortynning 1/300) i ytterligere 50 min. Antigen-antistoffreaksjon ble visualisert med 3,30-diaminobenzidin (DAKO, Danmark). Etter kontra med haematoxylin, ble seksjonene dehydrert gjennom stigende alkoholer til xylen og montert. Positive flekker kontroller ble utført parallelt med parafinsnitt av normalt humant mandel. Negativ kontroll ble utført ved å utelate det primære antistoffet.
Glassene ble undersøkt under Olympus BX51 fluorescens mikroskop utstyrt med et Olympus DP72 kamera (Olympus Optical Co., Ltd., Tokyo, Japan). Panorama av hver merket kjernen ble innhentet basert på 4 bilder med lavt strømforbruk forstørrelse (× 100) med høy oppløsning av DP-BSW programvare (Olympus Optical Co., Ltd., Tokyo, Japan). Identiske innstillinger ble benyttet for hvert bilde, slik som å minimalisere det merkede bias. Den MT1-MMP uttrykk og CD11b + immunocyttene tetthet ble digitalt evaluert av Image-Pro Plus v6.2 programvare (Media Cybernetics Inc, Bethesda, MD). For å holde resultatene pålitelig og sammenlignbar, ble en enhetlig ramme for alle lysbildene søkt om lesing av hvert antistoff farging. Integrert optisk tetthet (IOD) av alle de positive farging av MT1-MMP i hvert bilde ble målt, og dets forhold til totale arealet av hvert bilde ble beregnet som MT1-MMP uttrykk. CD11b + immunocyttene tetthet ble registrert som antall positive celler per vev flateenhet i kvadratmillimeter. Cut poeng for MT1-MMP tetthet ble utforsket av "den beste cut-off tilnærming ved log-rank test" [20]. Og den 25. persentil verdien ble definert som cut-off point for å bestemme MT1-MMP negative og positive uttrykk undergrupper i denne studien. For CD11b + immunocyttene tetthet, cut-off point for definisjonen av undergrupper (lav og høy CD11b + immunocyttene tetthet) var medianverdien.
Statistisk analyse
Statistiske analyser ble utført med SPSS (versjon 18.0, SPSS Institute, Chicago, IL). The Pearson χ 2 test eller Fishers eksakte test ble brukt for å sammenligne kvalitative variabler. Kaplan-Meier analyse ble brukt for overlevelsesanalyse og betydning blant pasientenes undergrupper ble beregnet ved log rank test. Den Cox regresjonsmodell ble brukt til å utføre multivariat analyse. Logistisk regresjon ble brukt for å vurdere påvirkning av binære faktorer. Mottaker som opererer karakteristisk kurve (ROC) analyse ble anvendt for å bestemme den logiske verdi av parametrene. Tosidig P
< 0,05 ble ansett som statistisk signifikant.
Resultater
Store klinisk-patologisk funksjoner og immunhistokjemiske funn
Blant de 184 sakene som inngår i denne studien var 132 (71,7%) menn og 52 (28,3%) kvinner, som varierer i alder 25-85 år (gjennomsnitt ± SD: 57,9 ± 12,9 år). De viktigste demografiske og klinisk-patologiske egenskaper ble presentert i tabell 1.Table 1 Pasient demografi og klinisk-patologiske egenskaper
Elementer Book Verdi
Age (M ± SD, år)
57,9 ± 12,9
Kjønn
Mann (%)
132 (71,7)
Kvinne (%)
52 (28,3)
Tumor plassering
Distal magen (%)
98 (53,3)
Non-distal magen (%)
86 (46,7)
Patologiske typer
Adenocarcinoma
Histologisk klasse 1/2
55 (29,9)
Vel /moderat differensiert adenokarsinom (%)
55 (29,9)
Histologisk grad 3/4
124 (67,4)
lav /Undifferentiated adenokarsinom (%)
102 (55,4)
mucinous adenokarsinom /signet-ring cell carcinoma
22 (12,0)
Andre a (%)
5 (2,7)
serosa invasjon
Nei (T0, T1, T2) (%)
27 (14,7)
Ja (T3, T4) (%)
157 (85,3)
lymfeknutemetastaser
Nei (N0) (%)
53 (28,8)
Ja (N1, N2, N3) (%)
131 (71,2)
LNR, Median (Range)
0,33 (0-1)
fjernmetastaser
M0 (%)
177 (96,2)
M1 (%)
7 (3,8)
TNM stadier
tidlig (stadium I, II) (%)
58 (31,5)
Avansert (Stages III, IV) (%)
126 (68,5)
Surgery
Subtotal reseksjon (%)
159 (86,4)
Non-Subtotal reseksjon (%)
25 ( 13.6)
Kjemoterapi
Nei (%)
35 (19,0)
Ja (%)
149 (81,0)
Tilbakefall
Nei (%)
124 ( 67,4)
Ja (%)
60 (32,6)
Tilbakefall plassering b
Lokal-regional
37 (61,7)
Distant
23 (38,3)
Clinical status ved utgangen av oppfølgingen
live og uten tilbakefall
72 (39,1)
Død eller levende med tilbakefall
112 (60,9)
MT1-MMP uttrykk
Negative
46 (33,3)
Positive
138 (66,7)
CD11b + immunocyttene (celler /mm2)
Median (område)
257 (4-2101), en annet inkluderte adenosquamous carcinoma in 3 (1,62%) tilfeller, utypisk karsinoid i 1 (0,54%) fall og nevroendokrin carcinoma in 1 (0,54%) case.b 60 vendende tilfeller ble evaluert.
Immunohistochemistry ble utført i alt GC TMA og resultatet av hver prøve ble oppnådd for bilder basert digital analyse (figur 1A-1D). MT1-MMP-farging var hovedsakelig i cytoplasma eller på cellemembranen av tumorceller. De fleste av stromale celler var negative, selv om sporadisk positiv farging på disse celler, ble også observert (figur 1E, 1G). CD11b + immunocytter hovedsakelig infiltrert i overgangen mellom kreft reir og stromal (figur 1F, 1H). Nivået av MT1-MMP tetthet og CD11b + immunocyttene tetthet ble presentert i tabell 1. Den 25. persentil av MT1-MMP tetthet var 0,00186 og 138 (75,0%) av pasientene ble dokumentert som MT1-MMP positiv i henhold til de ovennevnte klassifiseringskriteriene. Medianverdien av CD11b + immunocyttene var 257 celler per vev overflateenhet i kvadratmillimeter. Figur 1 immunhistokjemi funn i TMA. (AD) representativt eksempel på MT1-MMP (A), CD11b + immunocytter (C) farging av en GC vev microarray, og den tilsvarende digitale bildet analyseres med bildet programvare, med MT1-MMP (B) og CD11b + immunocytter (D ) representert i rødt. (E, G) MT1-MMP-farging var hovedsakelig i cytoplasma eller på cellemembranen av tumorceller (blå pil), og de fleste av stromaceller hadde negativ farging, selv om sporadisk positiv farging på disse celler, ble også observert (F, H). CD11b farging viste at CD11b + immunocytter hovedsakelig infiltrert i overgangen mellom kreft reir og stroma, spesielt ved invasiv foran (røde og grønne piler).
Forholdet mellom MT1-MMP uttrykk, CD11b + immunocytter tetthet og klinisk-patologiske funksjoner
Det var 77 (55,8%) og 15 (32,6%) pasienter med høyt CD11b + immunocyttene tetthet i MT1-MMP positive (n
= 138) og negative (n
= 46) undergrupper, henholdsvis (P
= 0,006). Sannsynligheten for MT1-MMP uttrykk ble redusert betraktelig for lav CD11b + immunocyttene tetthet undergruppe (odds ratio (OR) = 0,383 [95% KI: 0,190 til 0,774], P
= 0,007, Logistisk regresjon). Den MT1-MMP ekspresjon og CD11b + immunocytter tetthet var korrelert med de klinisk-patologiske funksjoner som er oppsummert i tabell 2. MT1-MMP-ekspresjon ble korrelert med liten tumorstørrelse (P
= 0,007), tumor ved distal mage (P
= 0,027) og økt tilbakefall risiko (P
= 0,001), men ikke korrelert med alder, kjønn, histologisk grad, serosa invasjon, lymfeknute status, TNM stadium og en tumor tilbakefall (P
> 0,05 for alle). CD11b + immunocyttene tetthet ble korrelert med lymfeknute status (P
= 0,015), LNR (P
= 0,018) og TNM stadium (P
= 0,011), men ikke korrelert med alder, kjønn, tumorstørrelse , tumor beliggenhet, histologisk grad, serosa invasjon og tilbakefall risiko (P
> 0,05 for alle) .table 2 forholdet mellom MT1-MMP, CD11b + immunocyttene tetthet og cinico-patologiske trekk
variabler

MT1-MMP uttrykk
CD11b + immunocyttene tetthet
Negative (n
= 46)
Positiv (n = 138)

P
lav (n
= 92)
Høy (n
= 92)
P
N product: (%)
N product: (%)
N product: (%)
N product: (%)

Alder (år)
< 60
26 (56,5)
20 (43,5)
0,669
43 (43,4)
56 (56,6)
0,055
≥60
73 (52,9)
65 (47,1)
49 (57,6)
36 (42,4)
Kjønn
Mann fra 33 (25,0 )
99 (75,0)
1,000
66 (50,0)
66 (50,0)
1,000
Kvinne
13 (25,0)
39 (75,0)
26 (50,0)
26 (50,0)
Tumor størrelse (cm2) en
< 16
12 (16,4)
61 (83,6)
0,007
35 ( 47,9)
38 (52,1)
0,404
≥16
31 (35,2)
57 (64,8)
48 (54,5)
40 (45,5)
Location
distal
18 (18,4)
80 (81,6)
0,027
51 (52,0)
47 (48,0)
0,555
Non-distal
28 (32.6)
58 (67,4)
41 (47,7)
45 (52,3)
Histologisk klasse b
1/2
13 (23,6)
42 (76,4)
0,845
24 (43,6)
31 (56,4)
0,376
3/4
31 (25,0)
93 (75,0)
63 (50,8)
61 (49,2)
lymfeknutemetastaser
Ja
31 (23,7)
100 (76,3)
0,511
73 (55,7)
58 (44,3)
0,015
Ingen
15 (28,3)
38 (71,7)
19 (35,8)
34 (64,2)
LNR c
≤0.33
27 (28,7 )
67 (71,3)
0,233
39 (41,5)
55 (58,5)
0,018
> 0,33
19 (21,1)
71 (78,9)
53 (58,9)
37 (41,1)
serosa invasjon (T scenen)
T1-2
fire (14,8)
23 (85,2)
0,186
10 (37,0)
17 (63,0)
0,145
T3-4
42 (26,8)
115 (73,2)
82 (52,2)
75 (47,8)
TNM staging
Tidlig (I, II)
13 (22,4)
45 (77,6)
0,583
21 (36,2)
37 (63,8)
0,011
Advanced (III, IV)
33 (26,2)
93 (73,8)
71 (56,3)
55 (43,7)
Tilbakefall
Ja
9 (15,0 )
51 (85,0)
0,029
30 (50,0)
30 (50,0)
1,000
Ingen
37 (29,8)
87 (70,2)
62 (50,0)
62 (50,0)
Tilbakefall plassering d
Lokal-regional
7 (18,9)
30 (81,1)
0.460
20 (54,1)
17 (45,9)
0,426
Distant
2 (8,7)
21 (91,3)
10 (43,5)
13 (56,5)
en analyse ble utført basert på 161 pasienter med komplette data for tumorstørrelse (TS) .B Analysen ble utført basert på 179 pasienter med mage adenocarcinoma.c medianen for lymfeknute ratio (LNR) var 0,33 (6 tilfeller), og GC tilfellene var forskjellig i forskjellige undergrupper . d 60 vendende tilfeller ble inkludert.
Survival analyse
For 184 tilfeller, median OS var 26,8 (variasjons 0.8-102.3) måneder, og 1-, 3- og 5-yr overlevelse var 79,3%, 50,5% og 37,4%, respektivt (figur 2A). Som forventet ble de tradisjonelle faktorene forbundet med GC pasientenes OS, slik som tumor størrelse, histologisk grad, lymfeknute status, serosa invasjon og TNM stadium (P
< 0,05 for alle). I tillegg ble både høy CD11b + immunocytter tetthet og MT1-MMP negative uttrykk korrelert med bedre OS (P
verdi var 0,031 og 0,015, respektivt.) (Figur 2B, 2C). Diskrimineringen evne i OS ble økt i LNR undergrupper (P
< 0,001) sammenlignet med lymfeknuter status undergrupper (P
= 0,015) (figur 2D, 2E), og ROC-analyse viste at når det gjelder å forutsi risiko for død, klassifiseringen av LNR (Areal under kurven: 0,659 [95% KI: 0,579 til 0,739], P
< 0,001) hadde bedre ytelse enn positive lymfeknuter nummer (Områder under kurven: 0,568 [95 % KI: 0,484 til 0,653], P
= 0,114). Alle resultater indikerte at MT1-MMP positiv, lav CD11b + immunocytter tetthet og høy LNR var risikofaktorer forbundet med dårlig prognose (figur 2, tabell 3). Figur 2 Kumulativ OS av GC pasienter. (A) OS av 184 GC pasienter. (B) Lav CD11b + immunocyttene tetthet var relatert til dårlig OS. (C) Pasienter i MT1-MMP positive gruppen var høyere risiko for død. (D, E) Både lymfeknuter status og LNR var korrelert med dårlig OS, men LNR kunne bedre skille undergrupper av pasienter. (F) Kombinerte funksjoner kan indikere OS fra GC pasientene mer nøyaktig.
Tabell 3 Analyser av faktorer vedrørende OS
Variabler Book N
N død (%)

Median OS (Range)
5-års overlevelse (%)
Log-rank test χ2value
P
Alder (år)
< 60
99
52 (52,5)
30,1 (1,5 til 99,5)
45,1
3,584
0,058
≥60
85
56 (65,9)
24,8 (0,8 til 102,3)
28,6
Kjønn
Mann fra 132
74 (56,1)
30,3 (0,8 til 102,3)
40,0
2,114
0,146
Kvinne
52
34 (65,4)
25,1 (1,3 til 94,8)
30,3
Tumor størrelse (cm2) en
< 16
73
35 (47,9)
41,6 (1,1 til 99,5)
52,9
7,882
0,005
≥16
88
57 (64,8)
24,2 (0,8 til 102,3)
29,2
Histologisk klasse b
1/2
55
88 (56,1)
30,1 (1,1 til 102,3)
54,2
13,412
< 0,001
3/4
124
20 (74,1)
16,8 (0,8 til 74,9)
30,1
lymfeknuter metastaser
Ja
131
83 (63,4)
24,8 (0,8 til 102,3)
52,9
5,895
0,015
Ingen
53
25 (47,2)
34,1 (6,1 -99,5)
30,5
serosa invasjon (T scenen)
T1-2
27
7 (25,9)
58,9 (20,2 til 99,5)
74,9
14,742
< 0,001
T3-4
157
101 (64,3)
24,8 (0,8 til 102,3)
30,8
TNM
Tidlig (I, II)
58
26 (44,8)
35,8 (6,1 til 99,5)
54,0
9,823
0,002
Avansert
126
82 (65,1)
22,8 (0,8 til 102,3)
29,2 plakater (III, IV)
Surgery
SR
159
89 (56,0)
30,0 (0,8 til 102,3)
39,8
5,902
0,015
TR /CR
25
19 (76,0)
18,0 (3,8 til 89,9)
21,8
Kjemoterapi
Ja
149
87 (49,7)
33,5 (5,3 til 99,5)
35,9
0,016
0.900
Ingen
35
21 (60,0)
28,4 (0,8 til 102,3 )
40,0
LNR c
≤0.33
94
41 (43,6)
38,8 (1,1 til 102,3)
55.1
24,881
< 0,001
> 0,33
90
67 (74,4)
20,1 (0,8 til 99,1)
18,3
MT1-MMP
Negativ
46
18 (39,1)
35,7 (3,8 til 79,3)
54,0
5,869
0,015
Positive
138
90 (65,2)
25,4 (0,8 til 102,3)
32,2
CD11b + immunocyttene tetthet
lav
92
62 (67,4)
25,1 (0,8 til 99,1)
27,6
4,655
0,031
Høy
92
46 (50,0)
30,7 (1,3 til 102,3)
46,7
Kombinerte funksjoner (MT1-MMP tetthet, CD11b + immunocyttene tetthet og LNR)
Gruppe I
73
26 (35,6)
38,7 (6,1 til 94,1)
61,4
28,173
< 0,001
Gruppe II
111
82 (73,9)
18,1 (0.8- 90,9)
21,1
en analyse ble utført basert på 161 pasienter med komplette data for tumorstørrelse. b Analysen ble utført basert på 179 pasienter med adenokarsinom i ventrikkel. c Median av LNR var 0,33 (6 tilfeller), og GC tilfellene var forskjellig i forskjellige subgroups.OS: total overlevelse; SR: subtotal reseksjon; TR: total reseksjon; CR: kombinert reseksjon; LNR. Lymfeknute forholdet
Som vi foreslått ovenfor, kombinert funksjoner basert på antall risikofaktorer ble undersøkt for å bedre prediksjon av GC prognose (tabell 3). Dermed ble pasientene delt inn i to undergrupper i henhold til antall risiko funksjoner: gruppe I, ble observert mindre enn to risikofaktorer; og gruppe II, to eller tre risikofaktorer ble observert. Kombinert analyse viste at operativsystemet til pasienter i gruppe II var betydelig kortere enn pasienter i gruppe I (P
< 0,001). (Figur 2F)
Multivariatanalyse og ROC analyse
I univariat analyse, tradisjonelle clinico -pathological funksjoner (for eksempel tumor størrelse, T scenen, TNM stadium, kirurgi metoder, og tilbakefall status), MT1-MMP uttrykk, CD11b + immunocyttene tetthet og LNR var assosiert med OS. Videre dødsrisikoen i kombinert gruppe II økte signifikant (P
< 0,001).
Faktorer som viser betydningen av univariat analyse ble integrert i multivariat Cox analyse. I denne studien ble LNR, MT1-MMP, CD11b og kombinerte funksjoner høyt korrelert. Derfor ble to separate multivariate modeller generert for å unngå Multikolineæritet blant disse variablene. LNR, MT1-MMP uttrykk og CD11b + immunocyttene tetthet var uavhengige prognostiske faktorer for OS etter utelukke andre konfunderende faktorer (P
< 0,05 for alle) Videre, de kombinerte funksjonene var uavhengig prognostisk faktor, også (HR = 3,818 [95 % KI: 2,223 til 6,557], P
< 0,001) (tabell 4) .table 4 Multivariate analyser av forhold knyttet til OS
faktorer
OS
bilder HR
95% KI
P
Modell 1
Tumor størrelse: < 16 cm2vs
≥16 cm2
1,821
1.168- 2,839
0,008
serosa invasjon (T scenen):
T1-2 vs
T3-4
3,232
1,440 til 7,251
0,004
Lymoh noder metastaser:
Nei vs
Ja
1.012
0,610 til 1,679
0.964
Kirurgisk typer: SR vs
TR /CR
2.030
1,128 til 3,653
0,018
LNR: lav (≤0.33) vs Høy (> 0,33)
1,957
1,233 til 3,108
0,004
MT1-MMP: Negativ vs
Positiv
2,596
1,496 til 4,506
0,001
CD11b + immunocyttene tetthet: Høy vs
lav
1,838
1,183 til 2,855
0,007
Modell 2
Tumor størrelse: < 16 cm2vs
≥16 cm2
1,734
1,120 til 2,686
0,014
serosa invasjon (T scenen):
T1-2 vs
T3-4
3,013
1,360 til 6,674
0,007
Lymoh noder metastaser:
Nei vs
Ja
0,696
0.404 - 1.200
0,192
Surgery typer: SR vs
TR /CR
2,023
1,134 til 3,606
0,017
Combined funksjoner: gruppe I vs
Gruppe II
3,818
2,223 til 6,557
< 0,001
OS : total overlevelse; HR: hazard ratio; NA: ikke vedtatt; SR: subtotal reseksjon; TR: total reseksjon; CR: kombinert reseksjon; LNR. Lymfeknute forholdet
ROC analyse ble gjennomført for å ytterligere evaluere prognostisk resultatene av de fire uavhengige faktorer i denne studien. Kombinerte funksjoner ville være bedre å forutsi den kliniske utfall av GC pasienter sammenlignet med andre faktorer (området under kurven: 0,689 [95% KI: 0,609 til 0,768], P
< 0,001) (figur 3). Figur 3 ROC analyse av prediktiv verdi for døden. Blant de 4 uavhengige prognostiske faktorer, arealet under kurven for den nye kombinerte trekk var den største. Den kombinerte funksjonen kunne ha bedre prognostisk ytelse i GC pasienter.
Diskusjon
Vi har foreslått en kombinert analyse av integrerte stromale tumor funksjoner som en nyttig strategi for å evaluere kreft progresjon og pasient overlevelse i GC basert på våre studier fokusert på co-utviklingen av tumorceller og tumormikromiljø og [19, 21, 22]. Denne studien er designet for å utforske gjennomførbarheten av denne kombinerte strategien. I tillegg ble en forbedret automatisering metode for å analysere de digitaliserte bildene brukes både for å sikre reproduserbarhet og god ytelse i denne studien. Som Fridman [23] har foreslått, vil slike metoder bane vei for å bedre forståelsen av komplekse svulsten mikromiljøet, så vel som til den rutinemessige evaluering av parametere for klinisk behandling av kreftpasienter. Heri 184 GC saker ble tatt med for å vurdere prognostiske verdiene av optimaliserte vanlige patologiske prognostiske faktorer, cellulære molekylære faktorer, immun faktorer og de kombinerte funksjoner. Dette er avgjørende skritt mot å etablere en gjennomførbar prognostisk system integrere både klinisk-patologisk, tumor og stromale funksjoner i vår serie studier [19, 21, 22].
Av 184 tilfeller, demografi og klinisk-patologiske egenskaper er lik som er rapportert i andre store serie GC befolkningen [24]. Våre resultater viste at ekspresjon av MT1-MMP var ofte korrelert med økt risiko for tilbakefall, men forskjellen i plassering tilbakefall var ikke statistisk signifikant. Disse resultatene var lik forrige rapport [25]. MT1-MMP spiller viktig rolle i nedverdigende type I og IV kollagen til rette for kreftceller sprer seg. I tillegg kan MT1-MMP fremme angiogenese og micrometastasis via vaskulære rute [26].
Med hensyn til immunceller, naturen, tetthet og plassering er viktige parametre for å evaluere omfattende in situ
immunreaksjon og den spesifikke rolle i kreft progresjon. I denne studien ble CD11b + immunocyttene stort sett plassert i invasiv front. Forskjellen i CD11b + immunocytter tetthet var statistisk signifikante mellom lymfeknuter metastase og ikke-metastais undergrupper. Videre CD11b + immunocyttene tettheten var høyere i tidlig enn avanserte GC pasienter, tilsvarende rapporter fra Sconocchia et al. og Ladoire et al. [27, 28]. Alle forfatterne har lest og godkjent den endelige manuskriptet.

• Uttrykk av p53, induserbar nitrogenoksid syntase og vaskulær endotelial vekstfaktor i mage forstadier og kreft lesjoner: korrelasjon med kliniske
• En økning i integrin-bundet kinase ikke-kanonisk overfører NF-kB-medierte vekst fordeler overfor magecancerceller ved å aktivere ERK1 /2