características combinadas com base na expressão de MT1-MMP, CD11b + immunocytes densidade e LNR prever os resultados clínicos de recursos cancer

Combinado gástricas com base na expressão de MT1-MMP, CD11b + immunocytes densidade e LNR prever os resultados clínicos de câncer gástrico da arte abstracta
Fundo
Dada a complexidade do microambiente do tumor, nenhum marcador de células cancerosas poderia prever adequadamente os resultados clínicos de câncer gástrico (GC). O objetivo deste estudo foi avaliar o papel prognóstico de características combinadas incluindo patologia convencional, proteinase e os dados imunes em GC.
Métodos
Além dos estudos patológicos, imuno-histoquímica foi utilizada para avaliar membrana do tipo 1 metaloproteinases da matriz ( MT1-MMP) expressão e CD11b + immunocytes densidade em três microarrays de tecido GC independentes contendo 184 tecidos GC. características distintas e combinadas foram avaliadas quanto ao seu impacto na sobrevida global (OS).
Resultados
Descobrimos que fatores tradicionais, incluindo o tamanho do tumor, grau histológico, estado linfonodal, invasão serosa e estágio TNM foram associados com OS (P
< 0,05 para todos). Além disso, foram encontradas diferenças estatisticamente significativas na OS entre Proporção de linfonodos subgrupos (LNR) (P Art < 0,001), subgrupos MT1-MMP (P
= 0,015), e CD11b + imun�itos subgrupos de densidade (P
= 0,031). Mais importante ainda, o recurso combinado (positivo, baixa CD11b + immunocytes densidade MT1-MMP e de alta LNR) foi encontrado por análise multivariada a ser um fatores prognósticos independentes para OS após a exclusão de outros fatores de confusão (HR = CI 3.818 [95%: 2,223-6,557 ], P
< 0,001). Além disso, esse recurso combinado tiveram melhor desempenho em predizer os resultados clínicos após a cirurgia muito antes de recorrência tinha ocorrido (área sob a curva: [IC 95%: 0,609-0,768] 0,689, P Art < 0,001).
Conclusões
Estes resultados indicam que uma melhor informação sobre o prognóstico GC poderia ser obtido a partir de fatores clínico-patológicos combinados, as células tumorais eo microambiente do tumor.
Palavras-chave
gástrica câncer Prognosis tumor microambiente Linfonodo rácio fundo
o câncer gástrico (GC) é o quarto câncer mais comum ea terceira causa de morte por câncer em todo o mundo [1]. Um progresso considerável foi feito no diagnóstico precoce do câncer, mas não houve um avanço comparável na precisão de predição clínica desfecho [2]. Apenas a classificação TNM da União Internacional Contra o Câncer (UICC) ou o Comité Misto Americana do Câncer (AJCC) é usado em uma base de rotina, que é o instrumento mais importante para orientar a estratégia de tratamento para pacientes GC [3]. No entanto, GCs têm uma heterogeneidade significativa em seus comportamentos biológicos e tumores do mesmo estágio clínico muitas vezes mostram diferenças na resposta clínica curso e tratamento [4]. Assim, a identificação de fatores que afetam invasão e metástase, e o estabelecimento de painéis de biomarcadores para prever o potencial de malignidade e identificar diferentes grupos de risco são de uma importância primordial.
Apesar de anos de pesquisa e centenas de relatórios sobre marcadores tumorais no GC, o número clinicamente úteis marcadores é lamentavelmente pequeno [5]. Recentemente, uma nova ferramenta de prognóstico de Proporção de linfonodos (ILC), definida como o número de MLN dividido pelo número de nódulos linfáticos recuperados, foi proposto. Ele pode melhorar a precisão do prognóstico e reduzir a migração do estádio, quando comparado com o sistema de estadiamento [6, 7] UICC (2002, 6ª edição). LNR tem sido considerado como um dos melhores variáveis ​​clínico-patológicas para a previsão do prognóstico do câncer gástrico após a cirurgia curativa em estudos retrospectivos [8], o que é o sucesso na otimização de marcadores clínicos tradicionais. No entanto, a descoberta de outros chamados marcadores promissores em laboratório traduz muito lentamente em aplicabilidade clínica. Uma razão para isso é o facto de o desenvolvimento e progressão do cancro é determinada pela co-evolução entre as células tumorais e microambiente do tumor, em vez de uma única mutação [9]. Este co-evolução foi relatado por diversos estudos, os quais indicam que as interacções entre as células tumorais e do estroma tumoral criar um microambiente único e dinâmico para afectar a progressão tumoral [10]. Por isso, o rastreio de novos factores moleculares do complexo microambiente tumoral (componentes celulares e do estroma) representa uma outra abordagem essencial para identificar factores de prognóstico.
MT1-MMP é conhecido como uma metaloproteinase de matriz tipo membrana, e MT1-MMP-mediada matriz extracelular (ECM) degradação por células tumorais ou células do estroma é essencial para a invasão do cancro através de membranas basais e do estroma matriz intersticial [11]. Embora MT1-MMP mostrou significado prognóstico em vários cancros humanos, tais como câncer de mama, câncer de pâncreas e câncer colorretal [12, 13], pouco se sabe sobre o significado exato da MT1-MMP em pacientes GC. Principais contribuintes para o microambiente do tumor são a inflamação e mediadores inflamatórios [9]. Foi proposto que a tessitura imunológico podem influenciar a evolução clínica dos pacientes com câncer, ea pontuação imunológico seria importante preditor comparável a classificação TNM [14]. CD11b é expressa por um subconjunto específico de células mielóides, incluindo CD34 + progenitoras, granulócitos, monócitos, células NK e células T activadas, o que representa a imunidade inata [15, 16]. O papel da imunogenicidade do tumor e imunoterapias estão sendo discutidas [17]. Estendendo o nosso conhecimento do papel complexo de células imunes em GC poderia finalmente abrir caminho para o desenvolvimento a longo aguardado sucesso da terapêutica.
Com base nesse entendimento, investigamos papel prognóstico de proteinase celular marcador MT1-MMP e microambiente marcador imunológico CD11b + immunocytes em GC. Foi dada especial atenção ao valor prognóstico das características combinadas de MT1-MMP, CD11b + immunocytes densidade e LNR.
Métodos
Pacientes e follow-up of the prontuários de pacientes GC submetidos à cirurgia com um curativo intenção do Departamento de Oncologia, Zhongnan Hospital da Universidade de Wuhan (Wuhan, China) entre dezembro de 2002 e fevereiro de 2011 foram revisados. As principais características demográficas e clínico-patológicas estavam disponíveis. Nenhum paciente recebeu quimioterapia neoadjuvante, antes da cirurgia. estágio TNM foi determinado segundo a 7ª edição do sistema UICC /AJCC TNM [18]. Até o mais recente follow-up em 31 de Maio de 2012, o período de acompanhamento médio foi de 59,5 (intervalo: 16.8-102.3) meses. Um total de 108 (58,7%) pacientes morreram. A sobrevivência global (OS) foi definido como o intervalo entre a data da cirurgia de morte relacionada com o GC. Qualquer recorrência na cavidade abdomino-pélvica foi definida como recidiva local-regional; e recorrência via fluxo sanguíneo foi definida como metástases à distância, tais como metástases hepáticas e metástases de pulmão. consentimento informado por escrito foi obtido dos pacientes e o protocolo do estudo foi aprovado pelo comitê de ética da Zhongnan Hospital da Universidade de Wuhan. O estudo foi realizado de acordo com os padrões éticos da Declaração da Associação Médica Mundial de Helsinki.
Espécimes câncer gástrico e microarrays de tecido
Todos hematoxilina e eosina (HE) -stained lâminas foram examinadas por revisores independentes que não estavam cientes as características clínicas ou resultados clínicos. Três microarrays de tecido (TMAs) foram construídos. Resumidamente, dois núcleos foram tomadas a partir de cada tecido de tumor representativo (1,5 mm de diâmetro para cada núcleo). Em seguida, três secções TMAs com 184 tecidos tumorais foram construídos (em colaboração com Shanghai Biochip Company Ltd., Shanghai, China).
Imuno-histoquímica e avaliação dos resultados de imuno-histoquímica
Os anticorpos primários para MT1-MMP (sc101451, Santa Cruz , EUA, diluição de 1/100), CD11b + (ab52478, Abcam, Reino Unido, diluição de 1/100), o que corresponde a peroxidase de rábano (HRP) conjugado com anticorpo secundário (ab97265, ab97200, Abcam, Reino Unido, diluição 1/300), e diaminobenzidina (DAKO, Dinamarca) foram obtidos e validado para rotulagem.
Os protocolos de imuno-histoquímica foram descritos anteriormente [19]. Em suma, três secções TMAs foram deparaffinised com xileno thenrehydrated por três mudanças de álcool. A actividade da peroxidase endógena foi bloqueada por peróxido de hidrogénio a 0,3% durante 10 min. A recuperação de antígenos foi realizada por tratamento com microondas em 0,01 M de tampão Tris-EDTA (pH 9,0) durante 20 min. As lâminas foram incubadas durante 1 h com os anticorpos primários para MT1-MMP (sc101451, Santa Cruz, EUA, diluição de 1/100), CD11b + (ab52478, Abcam, Reino Unido, diluição de 1/100). Após lavagem com solução salina tamponada com Tris (TBS, pH 7,4), as secções foram incubadas com peroxidase de b o correspondente rábano (HRP) conjugado com anticorpo secundário (ab97265, ab97200, Abcam, Reino Unido, diluição 1/300) durante mais 50 min. reacção antigénio-anticorpo foi visualizada com diaminobenzidina-3,30 (DAKO, Dinamarca). Após contracoloração com hematoxilina, as secções foram desidratadas através de álcoois ascendentes ao xilol e montadas. os controlos positivos de coloração foram realizados em paralelo com secções de parafina de amígdalas humana normal. O controlo negativo foi efectuada omitindo o anticorpo primário.
As lâminas foram examinadas sob Olympus BX51 microscópio de fluorescência equipado com uma câmara Olympus DP72 (Olympus Optical Co., Ltd., Tóquio, Japão). Panorama de cada núcleo marcada foi obtida com base em 4 fotografias sob a ampliação de baixa potência (× 100) com alta resolução por software DP-BSW (Olympus Optical Co., Ltd., Tóquio, Japão). configurações idênticas foram usadas para cada fotografia, de modo a minimizar o viés de selecção. A expressão de MT1-MMP e CD11b + imunócitos densidade foram avaliados digitalmente pelo programa Image-Pro Plus v6.2 (Media Cybernetics Inc., Bethesda, MD). Para manter resultados fiáveis ​​e comparáveis, uma configuração uniforme para todas as lâminas foi aplicado para a leitura de cada coloração de anticorpos. densidade óptica integrada (IOD) de toda a coloração positiva de MT1-MMP em cada fotografia foi medida, e a sua relação para a área total de cada fotografia foi calculado como expressão MT1-MMP. CD11b + imunócitos densidade foi registada como o número de células positivas por unidade de superfície do tecido, em milímetros quadrados. pontos de corte para MT1-MMP densidade foi explorado por "a melhor abordagem de corte pelo teste de log-rank" [20]. E o valor percentil 25 foi definido como o ponto de corte para determinar os subgrupos de expressão negativa e positiva MT1-MMP neste estudo. Para o CD11b + immunocytes densidade, o ponto de corte para a definição de subgrupos (baixa e alta CD11b + immunocytes densidade) foi o valor mediano.
Análise estatística
análises estatísticas foram realizadas com o software SPSS (versão 18.0, Instituto SPSS, Chicago, IL). A χ 2 Teste de Pearson ou teste exato de Fisher foi utilizado para comparar as variáveis ​​qualitativas. A análise de Kaplan-Meier foi utilizado para análise de sobrevida e importância entre os subgrupos de pacientes foi calculado pelo teste de log rank. O modelo de regressão de Cox foi utilizado para realizar a análise multivariada. A regressão logística foi utilizado para avaliar a influência de factores de binários. curva ROC análise do receptor (ROC) foi utilizado para determinar o valor preditivo dos parâmetros. Frente e verso P Art < 0,05 foi considerado estatisticamente significativo.

Resultados principais características clínico-patológicas e achados imuno-histoquímica
Entre os 184 casos incluídos no estudo foram 132 (71,7%) do sexo masculino e 52 (28,3%) do sexo feminino, variando em idade 25-85 anos (média ± SD: 57,9 ± 12,9 anos). As principais características demográficas e clínico-patológicos foram apresentados em demografia Tabela 1.Table 1 dos pacientes e características clínico-patológicas
Itens
Valor
Idade (M ± SD, anos)
57,9 ± 12,9
Sexo
Masculino (%)
132 (71,7)
Feminino (%)
52 (28,3)
Tumor de localização
estômago distal (%)
98 (53,3)
estômago não-distal (%)
86 (46,7)
patológicos tipos
Adenocarcinoma
histológica grau 1/2
55 (29,9)
Bem /adenocarcinoma moderadamente diferenciado (%)
55 (29,9)
grau histológico 3/4
124 (67,4)
Baixo /adenocarcinoma indiferenciado (%)
102 (55,4)
carcinoma de células adenocarcinoma /anel de sinete mucinoso
22 (12,0)
Outros a (%)
5 (2,7)
Serosa invasão
Não (T0, T1, T2) (%)
27 (14,7)
Sim (T3, T4) (%)
157 (85,3)
metástases linfonodais
Não (N0) (%)
53 (28,8)
Sim (N1, N2, N3) (%)
131 (71,2)
LNR, mediana (intervalo)
0,33 (0-1)
Distante Metástase
M0 (%)
177 (96,2)
M1 (%)
7 (3,8)
estágios TNM
iniciais (níveis I, II) (%)
58 (31,5)
avançada (estágios III, IV) (%)
126 (68,5)
Cirurgia
Subtotal ressecção (%)
159 (86,4)
não Subtotal ressecção (%)
25 ( 13.6)
quimioterapia
Não (%)
35 (19,0)
Sim (%)
149 (81,0)
recorrência
Não (%)
124 ( 67,4)
Sim (%)
60 (32,6)
recorrência local b
local-regional
37 (61,7)
Distante
23 (38,3)
Clinical Status no final do seguimento
viva e sem recorrência
72 (39,1)
Morto ou vivo com recorrência
112 (60,9)
expressão MT1-MMP
negativo
46 (33,3)
positiva
138 (66,7)
CD11b + immunocytes (células /mm2)
mediano (intervalo)
257 (4-2101) of a outros incluídos adeno carcinoma in 3 (1,62%) casos, carcinóide atípico em 1 (0,54%) caso e neuroendócrino carcinoma in 1 (0,54%) case.b 60 casos recorrentes foram avaliados.
imunohistoquímica foi realizada em todos GC TMAs eo resultado de cada amostra foi obtida por análise digital de imagens baseada em (Figura 1A-1D). MT1-MMP coloração era principalmente no citoplasma ou na membrana celular de células de tumor. A maioria das células estromais foram negativas, embora coloração positiva esporádica nestas células foi também observado (Figura 1E, 1G). CD11b + imun�itos infiltrado principalmente na junção do ninho e estromal (Figura 1F, 1H) câncer. O nível de MT1-MMP densidade e CD11b + imunócitos densidade foram apresentados na Tabela 1. A 25 percentil de MT1-MMP foi densidade 0.00186 e 138 (75,0%) pacientes foram documentados como MT1-MMP positiva de acordo com os critérios de classificação acima referidos. O valor médio de CD11b immunocytes + foi de 257 células por unidade de superfície do tecido em milímetro quadrado. Figura 1 achados imuno-histológicos em TMA. (AD) Exemplo representativo de MT1-MMP (A), CD11b + imunócitos (C) coloração de uma micromatriz de tecido de GC, e a imagem correspondente digitais analisados ​​com o software de imagem, com a MT1-MMP (B) e CD11b + imunócitos (D ) representada no vermelho. (E, G) MT1-MMP coloração era principalmente no citoplasma ou na membrana celular de células tumorais (seta azul), e a maioria das células do estroma tinham coloração negativa, embora coloração positiva esporádica nestas células foi também observada (F, H). CD11b coloração mostrou que CD11b + immunocytes infiltrado principalmente na junção do ninho e estroma câncer, especialmente na frente invasiva (setas vermelhas e verdes).
Relação entre a expressão MT1-MMP, CD11b + immunocytes densidade e características clínico-patológicas
Houve 77 (55,8%) e 15 (32,6%) pacientes com alta CD11b + immunocytes densidade MT1-MMP positivo (n
= 138) e negativo (n = 46)
subgrupos, respectivamente (P
= 0,006). A probabilidade de expressão MT1-MMP foi diminuída significativamente para baixo subgrupo CD11b + immunocytes densidade ([IC 95%: 0,190-0,774] odds ratio (OR) = 0,383, P = 0,007
, regressão logística). A expressão de MT1-MMP e CD11b + imunócitos densidade foram correlacionados com as características clínico-patológico, como resumido na Tabela 2. expressão MT1-MMP foi correlacionada com a pequena dimensão do tumor (P = 0,007
), do tumor no estômago distal (P
= 0,027) e aumento do risco de recorrência (P
= 0,001), mas não correlacionada com a idade, sexo, grau histológico, invasão serosa, estado linfonodal, estadiamento TNM e locais de recorrência do tumor (P Art > 0,05 para todos). CD11b + immunocytes densidade foi correlacionada com o estado dos linfonodos (P
= 0,015), LNR (P
= 0,018) e estágio TNM (P
= 0,011), mas não correlacionada com a idade, sexo, tamanho do tumor , localização do tumor, grau histológico, invasão serosa e risco de recorrência (P Art > 0,05 para todos) .table 2 A relação entre MT1-MMP, características CD11b + immunocytes densidade e cinico-patológicos
Variáveis ​​

expressão MT1-MMP
CD11b + immunocytes densidade
negativo (n = 46
)
positiva (n = 138)

P
Low (n
= 92)
alta (n =
92)
P
N
(%)
N
(%)
N
(%)
N
(%)

Idade (anos) Art < 60
26 (56,5)
20 (43,5)
0,669
43 (43,4)
56 (56,6)
0,055
≥60
73 (52,9)
65 (47,1)
49 (57,6)
36 (42,4)
Sexo Masculino

33 (25,0 )
99 (75,0)
1.000
66 (50,0)
66 (50,0)
1.000
Feminino
13 (25,0)
39 (75,0)
26 (50,0)
26 (50,0)
tamanho do tumor (cm2) a Art < 16
12 (16,4)
61 (83,6)
0,007
35 ( 47,9)
38 (52,1)
0,404
≥16
31 (35,2)
57 (64,8)
48 (54,5)
40 (45,5)
Localização
distal
18 (18,4)
80 (81,6)
0,027
51 (52,0)
47 (48,0)
0,555
Non-distal 28 (32,6)
58 (67,4)
41 (47,7)
45 (52,3)
grau b histológica
1/2
13 (23,6)
42 (76,4)
0,845
24 (43,6)
31 (56,4)
0,376
3/4
31 (25,0)
93 (75,0)
63 (50,8)
61 (49,2)
metástases linfonodais
Sim
31 (23,7)
100 (76,3)
0,511
73 (55,7)
58 (44,3)
0,015
Sem
15 (28,3)
38 (71,7)
19 (35,8)
34 (64,2)
LNR c
≤0.33
27 (28,7 )
67 (71,3)
0,233
39 (41,5)
55 (58,5)
0,018 Art > 0,33
19 (21,1)
71 (78,9)
53 (58,9)
37 (41,1)
Serosa invasão (estádio T)
T1-2 página 4 (14,8)
23 (85,2)
0,186
10 (37,0)
17 (63,0)
0,145
T3-4
42 (26,8)
115 (73,2)
82 (52,2)
75 (47,8) TNM
(I, II)
13 (22,4)
45 (77,6)
0,583
21 (36,2)
37 (63,8)
0,011
Avançado (III, IV)
33 (26,2)
93 (73,8)
71 (56,3)
55 (43,7)
recorrência
Sim
9 (15,0 )
51 (85,0)
0,029
30 (50,0)
30 (50,0)
1.000
Sem
37 (29,8)
87 (70,2)
62 (50,0)
62 (50,0)
recorrência local d
local-regional
7 (18,9)
30 (81,1)
0.460
20 (54,1)
17 (45,9)
0,426
Distante Página 2 (8,7)
21 (91,3)
10 (43,5)
13 (56,5) of a análise foi realizada com base em 161 pacientes com dados completos do tamanho do tumor (TS) .b A análise foi realizada com base em 179 pacientes com adenocarcinoma.c gástrica A mediana do rácio de linfonodo (LNR) foi 0,33 (6 casos), e os casos de GC foram diferentes em subgrupos distintos . d 60 casos recorrentes foram incluídos.
análise de sobrevida
para 184 casos, o sistema operacional média foi de 26,8 (0.8-102.3 alcance) meses, ea taxa de sobrevivência 1, 3 e 5 anos foi de 79,3%, 50,5% e 37,4%, respectivamente (Figura 2A). Como esperado, os fatores tradicionais foram associados com o OS do paciente GC, tais como o tamanho do tumor, grau histológico, estado linfonodal, invasão serosa e estágio TNM (P Art < 0,05 para todos). Além disso, tanto a alta CD11b + imunócitos densidade e expressão negativa MT1-MMP foram correlacionados com SO melhor (P valor
foi 0,031 e 0,015, respectivamente.) (Figura 2B, 2C). A capacidade discriminação no OS foi aumentada em subgrupos LNR (P Art < 0,001) em comparação com linfonodos subgrupos de estado (P
= 0,015) (Figura 2D, 2E), e análise de ROC mostrou que, em termos de previsão risco de morte, a classificação por LNR (área sob a curva: [IC 95%: 0,579-0,739] 0,659, P Art < 0,001) tiveram melhor desempenho do que gânglios positivos numéricas (Áreas sob a curva: 0,568 [95 CI%: 0,484-0,653], P
= 0,114). Todos os resultados indicaram que MT1-MMP positivo, baixo CD11b + immunocytes densidade e alta LNR foram fatores de risco relacionados com mau prognóstico (Figura 2, Tabela 3). Figura 2 OS cumulativa de pacientes do GC. (A) OS de 184 pacientes do GC. (B) Baixo CD11b + immunocytes densidade foi relacionada à má OS. (C) Os pacientes do grupo positiva MT1-MMP foram em maior risco de morte. (D, E) Ambos linfonodos status e LNR foram correlacionados com a má OS, mas LNR poderia diferenciar melhor subgrupos de pacientes. (F) características combinadas poderia indicar OS de pacientes GC com mais precisão.
Tabela 3 Análises de fatores sobre OS
Variáveis ​​
N
N de morte (%)

Median OS (Range)
taxa de sobrevida em 5 anos (%)
teste de log-rank χ2value
P
Idade (anos) Art < 60
99
52 (52,5)
30,1 (1,5-99,5)
45,1
3.584
0,058
≥60
85
56 (65,9)
24,8 (,8-102,3)
28,6
Sexo Masculino

132
74 (56,1)
30,3 (,8-102,3)
40,0
2.114
0,146
Feminino
52
34 (65,4)
25,1 (1,3-94,8)
30,3
tamanho do tumor (cm2) a Art < 16
73
35 (47,9)
41,6 (1,1-99,5)
52,9
7,882
0,005
≥16
88
57 (64,8)
24,2 (,8-102,3)
29,2
histológica grau b
1/2
55
88 (56,1)
30,1 (1,1-102,3)
54,2
13,412 Art < 0,001
3/4
124
20 (74,1)
16,8 (0,8-74,9)
30,1
metástases em linfonodos
Sim
131
83 (63,4)
24,8 (,8-102,3)
52,9
5.895
0,015
Sem
53
25 (47,2)
34,1 (6,1 -99,5)
30,5
Serosa invasão (estádio T)
T1-2
27
7 (25,9)
58,9 (20,2-99,5)
74,9
14,742 Art < 0,001
T3-4
157
101 (64,3)
24,8 (,8-102,3)
30,8
TNM
precoce (I, II)
58
26 (44,8)
35,8 (6,1-99,5)
54,0
9,823
0,002
avançada
126
82 (65,1)
22,8 (,8-102,3)
29,2
(III, IV)
Cirurgia
SR
159
89 (56,0)
30,0 (,8-102,3)
39,8
5,902
0,015
TR /CR
25
19 (76,0)
18,0 (3,8-89,9)
21,8
quimioterapia
Sim
149
87 (49,7)
33,5 (5,3-99,5)
35,9
0,016
0,900
Sem
35
21 (60,0)
28,4 (,8-102,3 )
40,0
LNR c
≤0.33
94
41 (43,6)
38,8 (1,1-102,3)
55,1
24,881 Art < 0,001
> 0,33
90
67 (74,4)
20,1 (0,8-99,1)
18,3
MT1-MMP
negativo
46
18 (39,1)
35,7 (3,8-79,3)
54,0
5.869
0,015
positiva
138
90 (65,2)
25,4 (,8-102,3)
32,2
CD11b + immunocytes densidade
Baixa
92
62 (67,4)
25,1 (0,8-99,1)
27,6
4.655
0,031
alta
92
46 (50,0)
30,7 (1,3-102,3)
46,7
características combinadas (densidade MT1-MMP, CD11b + immunocytes densidade e LNR)
Grupo I
73
26 (35,6)
38,7 (6,1-94,1)
61,4
28,173 Art < 0,001
Grupo II
111
82 (73,9)
18.1 (0,8- 90,9)
21,1
a análise foi realizada com base em 161 pacientes com dados completos do tamanho do tumor. b A análise foi realizada com base em 179 pacientes com adenocarcinoma gástrico. c A mediana das LNR foi 0,33 (6 casos), e os casos de GC foram diferentes em subgroups.OS distintas: a sobrevida global; SR: ressecção subtotal; TR: ressecção total; CR: ressecção combinada; LNR:. Proporção de linfonodos
Como propusemos acima, recursos, combinados com base no número de fatores de risco foram exploradas para melhorar a previsão de GC prognóstico (Tabela 3). Assim, os pacientes foram divididos em dois subgrupos de acordo com o número de características de risco: grupo I, foram observadas menos de dois factores de risco; e foram observados grupo II, dois ou três factores de risco. análise combinada mostrou que o sistema operacional dos pacientes do grupo II foi significativamente menor do que os pacientes do grupo I (P Art < 0,001). (Figura 2F)
análise multivariada e análise ROC
Na análise univariada, clinico tradicional características Patológica (tais como o tamanho do tumor, estágio T, estágio TNM, métodos de cirurgia, eo estado de recorrência), expressão MT1-MMP, CD11b + immunocytes densidade e LNR foram associados com OS. Além disso, o risco de morte no grupo combinado II aumentou significativamente (P Art < 0,001).
Fatores mostrando significância na análise univariada foram integrados Cox análise multivariada de riscos proporcionais. Neste estudo, LNR, MT1-MMP, CD11b e características combinadas foram altamente correlacionadas. Portanto, dois modelos multivariados separadas foram gerados para evitar a multicolinearidade entre essas variáveis. LNR, MT1-MMP expressão e CD11b + immunocytes densidade foram fatores prognósticos independentes para OS após a exclusão de outros fatores de confusão (P Art < 0,05 para todos) Além disso, as características combinadas foram fator prognóstico independente, também (HR = 3,818 [95 % CI: 2,223-6,557], P Art < 0,001) (Tabela 4) .table 4 a análise multivariada dos fatores associados com o OS
fatores
OS
HR
IC 95%
P
Modelo tamanho 1 | Tumor: < 16 cm2vs
≥16 cm2
1.821
1.168- 2.839
0,008
Serosa invasão (estádio T):
T1-2 vs
T3-4
3.232
1,440-7,251
0,004
Lymoh nós de metástase:
No vs
Sim
1.012
0,610-1,679
0.964
tipos de cirurgia: SR vs
TR /CR
2.030
1,128-3,653
0,018
LNR: baixo (≤0.33) vs alta (> 0,33)
1.957
1,233-3,108
0,004
MT1-MMP: negativo vs
positiva
2.596
1,496-4,506
0,001
CD11b + immunocytes densidade: alta vs
Baixa
1.838
1,183-2,855
0,007
Modelo tamanho 2
Tumor: < 16 cm2vs
≥16 cm2
1.734
1,120-2,686
0,014
Serosa invasão (estádio T):
T1-2 vs
T3-4
3.013
1,360 - 6,674
0,007
Lymoh nós de metástase:
Sem vs
Sim
0,696
0,404 - 1.200
0,192
tipos cirurgia: SR vs
TR /CR
2.023
1,134-3,606
0,017
características combinadas: Grupo I vs
Grupo II
3,818
2,223-6,557 Art < 0,001
OS : sobrevida global; HR: taxa de risco; NA: não adotadas; SR: ressecção subtotal; TR: ressecção total; CR: ressecção combinada; LNR:. Proporção de linfonodos análise
ROC foi implementado para avaliar melhor o desempenho prognóstico dos quatro fatores independentes neste estudo. características combinadas seria melhor para prever os resultados clínicos de pacientes GC em comparação com outros fatores (área sob a curva: [IC 95%: 0,609-0,768] 0,689, P Art < 0,001) (Figura 3). Figura 3 a análise ROC do valor preditivo para a morte. Entre os factores de risco independentes, 4, a área sob a curva da nova característica combinada foi o maior. A característica combinada poderia ter um desempenho melhor prognóstico em pacientes GC.
Discussão
Propusemos uma análise combinada de recursos integrados do estroma do tumor como uma estratégia útil para avaliar a progressão do câncer e sobrevida do paciente em GC com base em nossos estudos voltados para a co-evolução das células tumorais e microambiente tumoral e [19, 21, 22]. Este estudo foi desenhado para explorar a viabilidade desta estratégia combinada. Além disso, um método de automatização melhorado para analisar as imagens digitalizadas foi utilizado para assegurar a reprodutibilidade e bom desempenho neste estudo. Como Fridman [23] sugeriu, tais métodos abriria o caminho para uma melhor compreensão do microambiente do tumor complexo, bem como para a avaliação de rotina dos parâmetros para o manejo clínico de pacientes com câncer. Aqui, 184 casos de GC foram incluídos para avaliar os valores de prognóstico de fatores otimizados convencionais patológicos prognósticos, fatores moleculares celulares, fatores imunes e as características combinadas. Este é o passo essencial para o estabelecimento de um sistema de prognóstico funcional integrando ambos, tumorais e estromais características clínico-patológicas em nossos estudos de séries [19, 21, 22]
de 184 casos., Os dados demográficos e características clínico-patológicas são semelhantes aos os relatados em outra grande série de população GC [24]. Os nossos resultados mostraram que a expressão de MT1-MMP foi frequentemente correlacionado com o risco aumentado de recorrência, mas a diferença na localização recaída não foi estatisticamente significativa. Esses resultados foram semelhantes aos relatório anterior [25]. MT1-MMP desempenha um papel importante na degradação de tipos I e IV colagénios para facilitar células cancerosas de espalhamento. Além disso, MT1-MMP pode promover a angiogénese e micrometástases por via vascular [26].
No que diz respeito a células imunitárias, a natureza, a densidade e localização são parâmetros importantes para avaliar exaustivamente a reacção in situ
imune e o específico papel na progressão do câncer. Neste estudo, CD11b immunocytes + foram localizados principalmente na frente invasiva. A diferença de CD11b + immunocytes densidade foi estatisticamente significativa entre metástases em linfonodos e subgrupos não-metastais. Além disso, o CD11b + imunócitos densidade foi maior do que no início de pacientes GC avançada, semelhante aos relatórios Sconocchia et ai. e Ladoire et ai. [27, 28].

• A expressão de p53, iNOS e fator de crescimento endotelial vascular em lesões pré-cancerosas e cancerosas gástricas: correlação com aspectos clínicos
• Um aumento da quinase ligada a integrina não confere vantagens de crescimento canonicamente NF-kB mediada por células cancerosas para gástricas através da activação de ERK1 /2