Комбинированные функции, основанные на MT1-MMP экспрессии, плотность CD11b + иммуноцитов и LNR предсказывают клинические исходы желудка особенностей cancer

Комбинированное на основе MT1-MMP экспрессии, плотность CD11b + иммуноцитов и LNR предсказывают клинические исходы рака желудка
Аннотация
Справочная информация
Учитывая сложность опухоли микросреды, ни один маркер из раковых клеток не может адекватно предсказать клинические исходы рака желудка (GC). Цель данного исследования состояла в том, чтобы оценить прогностическую роль комбинированных функций, включая традиционной патологии, протеиназы и иммунных данных в GC.
Методы
Помимо патологических исследований, иммуногистохимии использовали для оценки мембранного типа 1 матрицы металлопротеиназы ( MT1-MMP) и выражение CD11b плотности + иммуноцитов в трех независимых микрочипов GC тканей, содержащих 184 GC ткани. Отдельные и комбинированные функции были оценены для их влияния на общую выживаемость (OS).

Результаты Мы обнаружили, что традиционные факторы, включая размер опухоли, гистологической степени, состояние лимфатических узлов, серозной инвазии и стадии TNM были связаны с ОС (P
&л; 0,05 для всех). Кроме того, статистически значимые различия в OS были найдены среди отношение лимфатических узлов (ЛЯР) подгруппы (P &
л; 0,001), MT1-MMP подгруппы (P = 0,015
) и CD11b + иммуноцитов подгруппы плотности (P <бр> = 0,031). Самое главное, что в сочетании функция (MT1-MMP положительная, низкая плотность CD11b + иммуноцитов и высокая LNR) был найден многофакторного анализа, чтобы быть независимым прогностических факторов для ОС после исключения других искажающих факторов (ОР = 3,818 [95% ДИ: 2.223-6.557 ], P &
л; 0,001). Кроме того, эта особенность в сочетании имели более высокую производительность при прогнозировании клинических исходов после операции задолго до того, рецидивы имели место (площадь под кривой: 0,689 [95% ДИ: 0.609-0.768], P &
л; 0,001). Выводы

Эти результаты показывают, что более полная информация о GC прогноз может быть получен из комбинированных клинико-патологических факторов, опухолевые клетки и опухоли микроокружения.
Ключевые слова
рак желудка опухоль микросреда Погоды лимфатического узла фону
рака желудка (GC) является четвертым наиболее распространенным видом рака и третья причина смерти от рака во всем мире [1]. Значительный прогресс был достигнут в области ранней диагностики рака, но там не было сравнимым достижением в точности клинического прогнозирования исхода [2]. Только TNM классификации Международного союза по борьбе с раком (UICC) или Объединенного комитета американского рака (AJCC) используется на регулярной основе, что является наиболее важным инструментом для руководства стратегию лечения для пациентов GC [3]. Тем не менее, ГКС имеют значительную гетерогенность в их биологических поведений, и опухоли той же клинической стадии часто показывают различия в особенности клинического течения и лечения реакции [4]. Таким образом, выявление факторов, влияющих на инвазию и метастазирование, а также создание биомаркеров панелей для прогнозирования злокачественного потенциала и для выявления различных групп риска имеют первостепенное значение.
Несмотря на годы исследований и сотни отчетов о опухолевых маркеров в GC, число клинически полезные маркеры ничтожно мала [5]. В последнее время был предложен новый прогностический инструмент отношение лимфатических узлов (ЛЯР), определяется как количество MLN, деленное на количество лимфатических узлов, извлекаемых. Это может улучшить точность прогноза и уменьшить миграцию стадии по сравнению с UICC (2002, 6-е издание) постановка системы [6, 7]. LNR рассматривалась как один из лучших клиникопатологическими переменных для прогнозирования прогноза рака желудка после радикальной операции в ретроспективных исследованиях [8], что успех в оптимизации традиционных клинических маркеров. Тем не менее, обнаружение других так называемых перспективных маркеров в лаборатории транслирует довольно медленно в клиническую применимость. Одной из причин этого является тот факт, что развитие рака и прогрессирование определяется коэволюцию между опухолевыми клетками опухоли и микросреды, а не единственной мутации [9]. Такое коэволюция сообщалось многими исследованиями, все из которых показывают, что взаимодействие между опухолевыми клетками и стромальных опухолей создают уникальную и динамическую микросреду влиять на опухолевой прогрессии [10]. Таким образом, скрининг новых молекулярных факторов из сложного микросреды опухоли (клеточных и стромальных компонентов) представляет собой еще один существенный подход к идентификации прогностических факторов.
МТ1-ММР известен как матриксных металлопротеиназ мембранного типа, и МТ1-ММР-опосредованное внеклеточный матрикс (ЕСМ) деградация опухолевыми клетками или клетками стромы имеет важное значение для инвазии рака через базальные мембраны и стромы интерстициальной матрицы [11]. Хотя MT1-MMP показал прогностическое значение в ряде злокачественных опухолей человека, таких как рак молочной железы, рак поджелудочной железы и колоректального рака [12, 13], мало известно о точном значении МТ1-ММР у больных ГЦ. Основной вклад в микросреды опухоли являются воспаление и медиаторы воспаления [9]. Было высказано предположение, что иммунная сплетение может влиять на клинические результаты у пациентов с раком, и иммунный показатель будет важным прогностическим сравнима с TNM классификации [14]. CD11b выражается определенное подмножество миелоидных клеток, в том числе CD34 + клеток-предшественников, моноцитов, гранулоцитов, NK-клеток и активированных Т-клеток, что составляет врожденного иммунитета [15, 16]. Роль иммуногенности опухоли и иммунотерапии обсуждаются [17]. Расширение наших знаний о сложной роли иммунных клеток в GC может в конечном итоге проложить путь к долгожданному успешному развитию терапевтических средств.
Исходя из этого понимания, мы исследовали прогностическую роль клеточного протеиназы маркера МТ1-ММР и микроокружения иммунного маркера CD11b + иммуноцитов в GC. Особое внимание было уделено прогностической ценности комбинированных особенностей МТ1-ММР, CD11b плотности + иммуноцитов и ЛЯР.
Методы
Пациенты и последующие
Акты пациентов GC, перенесших операцию с лечебным намерение в отделении онкологии, Чжуннань больницы университета города Ухань (Wuhan, Китай) в период с декабря 2002 года по февраль 2011 года были рассмотрены. Основные демографические и клинико-патологические характеристики были доступны. Ни один из пациентов не получали неоадъювантной химиотерапии перед операцией. TNM стадия была определена в соответствии с 7-е издание системы UICC /AJCC TNM [18]. По самым последним итогам 31 мая 2012 года, средний период наблюдения составил 59,5 (диапазон: 16.8-102.3) месяцев. В общей сложности 108 (58,7%) пациентов умерли. Общая выживаемость (OS) была определена как интервал от даты операции к GC связанных смерти. Любой рецидив в брюшно-тазовой полости была определена как местного и регионального рецидива; и рецидив через кровотока определяли как отдаленными метастазами, такие как метастаз печени и метастазов в легких. Письменное информированное согласие было получено от больных и протокол исследования был одобрен этическим комитетом Чжуннань больницы университета города Ухань. Исследование было проведено в соответствии с этическими стандартами Всемирной медицинской ассоциации, Хельсинкской декларации.
Желудочной образцов рака и микрочипов ткани
Все гематоксилином и эозином (HE) -stained слайды были рассмотрены независимыми экспертами, которые не были осведомлены о клинические признаки или клинические исходы. Были построены три микрочипов ткани (TMAS). Если коротко, то два ядра были взяты из каждой репрезентативной опухолевой ткани (диаметром 1,5 мм для каждого ядра). Затем были построены три секции TMAS с 184 опухолевых тканей (в сотрудничестве с Shanghai биочипа Company Ltd., Шанхай, Китай).
Immunohistochemistry и оценка результатов иммуногистохимических
первичными антителами для МТ1-ММР (sc101451, Santa Cruz , США, разведение 1/100), CD11b + (ab52478, Abcam, Великобритания, разбавление 1/100), соответствующий пероксидазой хрена (HRP), конъюгированная вторичное антитело (ab97265, ab97200, Abcam, Великобритания, разбавление 1/300), и диаминобензидин (DAKO, Дания) были получены и проверены для маркировки.
протоколы иммуногистохимия были описаны ранее [19]. Короче говоря, три секции TMAS были deparaffinised с ксилолом thenrehydrated через три смены алкоголя. Активность эндогенной пероксидазы блокировали 0,3% перекиси водорода в течение 10 мин. Антиген поиска проводили путем микроволновой обработки в 0,01 М Трис-ЭДТА буфере (рН 9,0) в течение 20 мин. Срезы инкубировали в течение 1 ч с первичными антителами к МТ1-ММР (sc101451, Санта Круз, США, разбавление 1/100) CD11b + (ab52478, Abcam, Великобритания, разбавление 1/100). После промывания трис-солевого буферного раствора (TBS, рН 7,4), срезы инкубировали с б соответствующей пероксидазой хрена (HRP) конъюгированного вторичного антитела (ab97265, ab97200, Abcam, Великобритания, разбавление 1/300) в течение еще 50 мин. Реакция антиген-антитело визуализировали с 3,30-диаминобензидина (DAKO, Дания). После counterstaining гематоксилином срезы обезвоженной через восходящих спиртов в ксилол и установлены. Положительный контроль окрашивание проводили параллельно с парафиновых срезах нормальных человеческих миндалин. Отрицательный контроль осуществляли путем исключения первичного антитела.
Срезы исследовали под Olympus BX51 флуоресцентного микроскопа, оснащенного Olympus DP72 камерой (Olympus Optical Co., Ltd., Токио, Япония). Панорама каждого меченого ядра была получена на основе 4 фотографий под малым увеличением (× 100) с высокой разрешающей способностью по DP-BSW программного обеспечения (Olympus Optical Co., Ltd., Токио, Япония). Идентичные параметры были использованы для каждой фотографии, с тем, чтобы свести к минимуму смещение отбора. MT1-MMP экспрессии и CD11b плотности + иммуноцитов были оценены в цифровом виде изображения-Pro Plus v6.2 программного обеспечения (Media Кибернетика Inc, Bethesda, MD). Чтобы сохранить результаты надежной и сопоставимой, равномерная настройка для всех слайдов была применена для чтения каждого меченых антител. измеряли интегральную оптическую плотность (IOD) всех положительных окрашивания МТ1-ММР на каждой фотографии, и его отношение к общей площади каждой фотографии рассчитывалась как выражение МТ1-ММР. CD11b плотность + иммуноцитов был записан как количество положительных клеток на единицу поверхности ткани в квадратных миллиметрах. Срезанные точки для плотности МТ1-ММР была исследована "лучший отсечения подхода лог-рангового" [20]. И 25-й процентиль значение было определено как точка отсечки, чтобы определить отрицательные и положительные экспрессии подгруппы МТ1-ММР в данном исследовании. Для плотности + иммуноцитов CD11b, точка отсечения для определения подгрупп (низкой и высокой CD11b + иммуноцитов плотность) была медиана.
Статистический анализ
Статистический анализ проводился с помощью программного обеспечения SPSS (версия 18.0, SPSS институт, Чикаго, Иллинойс). Χ 2 Пирсона или точный критерий Фишера использовали для сравнения качественных переменных. Анализ Каплана-Мейера использовали для анализа выживаемости и значимость среди подгрупп пациентов рассчитывали с помощью теста журнала ранга. Модель регрессии Кокса использовали для проведения многофакторного анализа. Логистическая регрессия была использована для оценки влияния бинарных факторов. Приемник операционной характеристической кривой (ROC), анализ был использован для определения прогностической ценности параметров. Двусторонняя P
&л; 0,05 рассматривалось как статистически значимое.

Результаты Основные клинико-патологических признаков и иммуногистохимическое выводы
Среди 184 дел, включенных в это исследование было 132 (71,7%) мужчин и 52 (28,3%) женщин, в диапазоне возраст от 25 до 85 лет (среднее ± стандартное отклонение: 57,9 ± 12,9 лет). Были представлены основные демографические и клинико-патологические характеристики демографической ситуации Таблица 1.Table 1 пациентов и клинико-патологических характеристик
предметов

Значение

Возраст (M ± SD, лет)
57,9 ± 12,9
Гендер
Мужской (%)
132 (71,7)
женщина (%)
52 (28.3)
Опухоль местоположение
дистального желудка (%)
98 (53,3)
недистальных желудка (%) 86
(46,7)
Патологические типы
аденокарциномы
Гистологическое класса 1/2
55 (29,9) <бр> Ну /Умеренно дифференцированная аденокарцинома (%)
55 (29,9)
гистологического сорт 3/4
124 (67,4)
Low /Недифференцированный аденокарциномы (%)
102 (55,4) <бр> не коллоидный рак аденокарциномы /печатка кольцо клеток
22 (12,0)
Другие а (%)
5 (2.7)
серозной вторжения
нет (T0, T1, T2) (%)
27 (14,7)
Да (Т3, Т4) (%)
157 (85,3)
узел метастаз лимфа
нет (N0) (%) не
53 (28,8)
Да (N1, N2, N3) (%)
131 (71,2)
LNR, медиана (диапазон)
0,33 (0-1)
отдаленными метастазами
M0 (%)
177 (96,2)
M1 (%)
7 (3.8)
TNM стадии
Ранние этапы (I, II) (%)
58 (31.5)
Расширенный (стадии III, IV) (%)
126 (68,5)
хирургия
субтотальная резекция (%)
159 (86,4)
Non-субтотальная резекция (%) 25
( 13.6)
химиотерапией
Нет (%)
35 (19,0)
Да (%)
149 (81,0)
Рецидив
Нет (%)
124 ( 67,4)
Да (%)
60 (32.6)
местоположения б Повторение
Local-региональный
37 (61,7)
Distant
23 (38,3)
Клиническая состояния в конце наблюдения
жить и без рецидива
72 (39,1)
живого или мертвого с рецидивом
112 (60,9)
MT1-MMP выражение
Отрицательный <бр> 46 (33,3) Положительный

138 (66,7)
CD11b + иммуноцитов (клеток /мм2)
Медиана (диапазон)
257 (4-2101)
а другие включены adenosquamous карциному у 3 (1,62%) случаях, нетипичный карциноидная в 1 (0,54%) случай, и нейроэндокринной карциномы у 1 (0,54%) case.b 60 рецидивных случаев были оценены.
Иммуногистохимия была выполнена во всех GC и ТМА результат каждого образца было получено для изображений, ориентированного цифрового анализа (рис 1A-1D). МТ1-ММР окрашивание, главным образом, в цитоплазме или на клеточной мембране опухолевых клеток. Большинство стромальных клеток были отрицательными, хотя спорадические положительное окрашивание на этих клетках также наблюдалось (рис 1E, 1G). CD11b-иммуноцитов в основном проникла в месте соединения гнезда рака и стромы (рис 1F, 1H). Уровень плотности МТ1-ММР и CD11b плотности + иммуноцитов были представлены в таблице 1. 25-й процентиль плотности МТ1-ММР была 0,00186 и 138 (75,0%) пациентов были зарегистрированы как МТ1-ММР положительным в соответствии с вышеуказанными критериями классификации. Среднее значение CD11b + иммуноцитов было 257 клеток на единицу поверхности ткани в квадратный миллиметр. Рисунок 1 иммуногистохимического выводы в ТМА. (AD) Представитель пример МТ1-ММР (А), CD11b + иммуноцитов (C) окрашивание микрочипа GC ткани, а также соответствующего цифрового изображения анализировали с использованием программного обеспечения изображения, с МТ1-ММР (B) и CD11b-иммуноцитов (D ) представлена ​​в красном цвете. (Е, G) МТ1-ММР окрашивание, главным образом, в цитоплазме или на клеточной мембране опухолевых клеток (синяя стрелка), и большинство клеток стромы имели отрицательное окрашивание, хотя спорадические положительное окрашивание на этих клетках также наблюдалось (F, ЧАС). CD11b окрашивание показало, что CD11b + иммуноцитов в основном проникла в месте соединения гнезда рака и стромы, особенно на инвазивной фронте (красные и зеленые стрелки).
Взаимосвязь между MT1-MMP выражения, CD11b плотности + иммуноцитов и клинико-патологических особенностей
были 77 (55,8%) и 15 (32,6%) пациентов с высокой плотностью CD11b + иммуноцитов в МТ1-ММР положительная (п
= 138) и отрицательной (п
= 46) подгрупп соответственно (P
= 0,006). Вероятность экспрессии МТ1-ММР значительно снизилась за низкой подгруппы CD11b + иммуноцитов плотности (отношение шансов (OR) = 0,383 [95% ДИ: 0.190-0.774], P
= 0,007, логистической регрессии). МТ1-ММР экспрессии и CD11b плотности + иммуноцитов коррелировали с Клинико-патологических признаков, как приведены в таблице 2. МТ1-ММР экспрессия коррелирует с небольшим размером опухоли (P
= 0,007), опухоли в дистальной желудка (р <бр> = 0,027), а также повышенный риск рецидива (P
= 0,001), но не коррелировала с возрастом, полом, гистологического класса, серозной вторжения, состояние лимфатических узлов, TNM стадии и участков рецидива опухоли (P &
GТ; 0,05 для всех). CD11b плотность + иммуноцитов коррелировала со статусом лимфоузлов (P
= 0,015), LNR (P = 0,018
) и стадии TNM (P
= 0,011), но не коррелировала с возрастом, полом, размер опухоли , локализация опухоли, гистологической класса, серозной вторжение и риск рецидива (P &
GT; 0,05 для всех) .table 2 взаимосвязь между МТ1-ММР, CD11b + иммуноцитов плотность и cinico-патологическими
Переменные

MT1-MMP выражение

CD11b + иммуноцитов плотность


Отрицательные (п
= 46)

Положительный (п = 138)

P

Low (п
= 92)

High (п
= 92)

P


N
(%)

N
(%)


N
(%)

N
(%) <бр>

Возраст (лет)
&л; 60
26 (56,5) 20
(43,5)
0,669
43 (43,4) 56
(56,6)
0,055
≥60
73 (52,9) 65
(47,1)
49 (57,6) 36
(42,4)
Гендер
Мужской
33 (25,0 )
99 (75,0)
1.000
66 (50,0) 66
(50,0)
+1,000
Женский
13 (25,0) 39
(75,0) <бр> 26 (50,0) 26
(50.0)
размер опухоли (см 2) а
&л; 16
12 (16,4)
61 (83,6)
0,007
35 ( 47,9)
38 (52,1)
0,404
≥16
31 (35,2)
57 (64,8) 48
(54,5)
40 (45.5)
Расположение
дистальный
18 (18,4) 80
(81,6)
0,027
51 (52,0)
47 (48,0)
0,555
недистальных
28 (32,6)
58 (67,4) 41
(47,7)
45 (52,3)
гистологического Grade B
1/2
13 (23,6)
42 (76,4)
0,845
24 (43,6)
31 (56,4)
0,376
3/4
31 (25,0) 93
(75,0)
63 (50,8)
61 (49,2)
узел метастаз лимфа
Да
31 (23,7)
100 (76,3)
0,511
73 (55,7) 58
(44,3) <бр> 0,015
нет
15 (28,3) не
38 (71,7) 19
(35,8)
34 (64,2)
LNR гр
≤0.33
27 (28,7 )
67 (71,3)
0,233
39 (41.5) 55
(58,5)
0,018
&Гт
Результаты 71 0,33
19 (21,1) (78,9)
53 (58,9) 37
(41,1)
серозной инвазии (T стадия)
T1-2
4 (14.8)
23 (85,2)
0,186
10 (37,0) 17
(63,0)
0,145
T3-4
42 (26,8)
115 (73,2)
82 (52,2)
75 (47,8)
TNM стадирование
Ранний (I, II)
13 (22,4) 45
(77,6)
0,583
21 (36,2)
37 (63,8)
0,011
Advanced (III, IV)
33 (26,2) 93
(73,8)
71 (56,3) 55
(43,7)
Рецидив
Да
9 (15,0 )
51 (85,0)
0,029
30 (50,0) 30
(50,0)
1.000
нет
37 (29,8) не
87 (70,2) <бр> 62 (50,0) 62
(50.0)
Повторение местоположения D
Local-региональный
7 (18,9)
30 (81,1)
0,460
20 (54,1)
17 (45,9)
0,426
Distant
2 (8,7)
21 (91,3) 10
(43,5)
13 (56,5)
Анализ проводился на основе на 161 пациентов с полными данными размера опухоли (TS) .b Анализ проводился на основе 179 больных с желудочной adenocarcinoma.c медиана соотношения лимфоузлов (ЛЯР) 0,33 (6 случаев), и случаи GC были различны в разных подгруппах , d 60 рецидивирующие случаи были включены.
Survival анализ
Для 184 случаев, медиана ОВ составила 26,8 (диапазон 0.8-102.3) месяцев, и выживаемость 1-, 3- и 5-год составила 79,3%, 50,5% и 37,4%, соответственно (рис 2А). Как и следовало ожидать, эти традиционные факторы были связаны с ОС GC пациентов, таких как размер опухоли, гистологической степени, состояние лимфатических узлов, серозной инвазии и TNM стадии (P &
л; 0,05 для всех). Кроме того, как высокая плотность CD11b + иммуноцитов и отрицательное выражение МТ1-ММР коррелировали с лучшей ОС (Р значение
была 0,031 и 0,015, соответственно.) (Рис 2B, 2C). Способность дискриминации в ОС была увеличена в ЛЯР подгрупп (P &
л; 0,001) по сравнению с лимфатических узлов подгруппы состояния (P
= 0,015) (рис 2D, 2E), и анализ показал, что РПЦ, с точки зрения прогнозирования риск смерти, классификация по LNR (площадь под кривой: 0,659 [95% ДИ: 0.579-0.739], P
< 0,001) имели более высокую производительность, чем положительное число лимфатических узлов (участки под кривой: 0,568 [95 % ДИ: 0.484-0.653], P
= 0,114). Все результаты показали, что МТ1-ММР положительный, низкий CD11b + иммуноцитов плотность и высокая ЛЯР были факторы риска, связанные с плохим прогнозом (рисунок 2, таблица 3). Рисунок 2 Накопленная OS пациентов GC. (А) ОС 184 пациентов GC. (B) Низкая CD11b + иммуноцитов плотность была связана с плохой ОС. (C) Пациенты в MT1-MMP положительной группе были подвержены более высокому риску смерти. (D, E) Оба лимфатических узлов статус и LNR коррелировали с плохим ОС, но LNR мог лучше дифференцировать подгруппы пациентов. (F) Комбинированные функции может указывать OS пациентов GC более точно.
Таблица 3 Анализы факторов в отношении ОС
переменных

N

N смерти (%)

Медиана ОС (диапазон)

5-летняя выживаемость (%)

лог-рангового χ2value

P

Возраст (лет)
&л; 60
99
52 (52,5)
30.1 (1.5-99.5)
45,1
3,584
0,058
≥60
85
56 (65,9)
24,8 (0.8-102.3)
28,6
Пол Мужской

132
74 (56,1)
30,3 (0.8-102.3)
40,0
2.114
0,146
Female
52
34 (65,4)
25.1 (1.3-94.8)
30,3
размер опухоли (см 2) а
&л; 16
73
35 (47,9) 41,6 (
1.1-99.5)
52,9
7.882
0.005
≥16
88
57 (64,8) <бр> 24,2 (0.8-102.3)
29,2
гистологического Grade B
1/2
55
88 (56,1)
30.1 (1.1-102.3)
54,2
13,412
&л; 0,001
3/4
124
20 (74,1)
16.8 (0.8-74.9)
30,1
лимфоузлах метастазирование
Да
131
83 (63,4) 24,8 (
0.8-102.3)
52,9
5.895
0,015
Нет
53
25 (47,2)
34.1 (6.1 -99,5)
30,5
серозной инвазии (T стадия)
T1-2
27
7 (25,9) 58,9 (
20.2-99.5)
74,9
14.742
&л; 0,001
T3-4
157
101 (64,3)
24,8 (0.8-102.3)
30,8
TNM
ранний (I, II)
58
26 (44,8) 35,8 (
6.1-99.5)
54,0
9.823
0,002
Расширенный
126
82 (65,1) 22,8
(0.8-102.3)
29,2
(III, IV)
хирургия
SR
159
89 (56,0)
30,0 (0.8-102.3)
39,8
5,902
0,015
TR /CR
25
19 (76,0)
18.0 (3.8-89.9)
21,8
химиотерапией
Да
149
87 (49,7) 33,5 (
5.3-99.5)
35,9
0,016
0,900
Нет
35
21 (60,0)
28,4 (0.8-102.3 )
40,0
LNR с
≤0.33
94
41 (43,6)
38,8 (1.1-102.3)
55,1
24,881
&л; 0,001
> 0,33
90
67 (74,4)
20.1 (0.8-99.1)
18,3
MT1-MMP
Отрицательная
46
18 (39,1)
35.7 (3.8-79.3)
54,0
5,869 0,015

Положительный
138
90 (65,2)
25.4 (0.8-102.3)
32,2
CD11b + иммуноцитов плотности
Low
92
62 (67,4)
25.1 (0.8-99.1)
27,6
4,655
0,031
High
92
46 (50,0) 30,7 (
1.3-102.3)
46,7
Комбинированные функции (MT1-MMP плотности, плотности CD11b + иммуноцитов и Lnr)
Группа I
73
26 (35,6) 38,7 (
6.1-94.1)
61,4
28.173
&лт; 0,001
Группа II
111
82 (73,9)
18,1 (0.8- 90,9)
21.1
Анализ проводился на основе 161 пациентов с полными данными размера опухоли. б Анализ был выполнен на основании 179 пациентов с аденокарциномой желудка. с Медиана LNR 0,33 (6 случаев), а также случаи GC были различны в различных subgroups.OS: общая выживаемость; SR: субтотальная резекция; ТР: тотальная резекция; CR: комбинированная резекция; LNR:. Соотношение лимфоузел
Как мы предложили выше, объединенные функции, основанные на количестве факторов риска были изучены с целью улучшения прогнозирования GC прогноза (таблица 3). Таким образом, пациенты были разделены на две подгруппы по ряду признаков риска: группы I, наблюдались менее двух факторов риска; и наблюдались группы II, два или три фактора риска. Комбинированный анализ показал, что операционная система пациентов в группе II была значительно короче, чем у пациентов в группе I (P
≪ 0,001). (Рисунок 2F)
Многофакторный анализ и анализ ОКР
В однофакторного анализа, традиционные Клинико -pathological функции (такие как размер опухоли, Т стадии, стадии TNM, методы хирургии, и статус рецидивов), MT1-MMP экспрессии, CD11b плотности + иммуноцитов и ЛЯР были связаны с ОС. Кроме того, риск смерти в объединенной группе II значительно увеличилось (P &
л; 0,001).
Факторы, показывающие значимость путем однофакторного анализа были включены в многомерном анализе пропорциональных рисков Кокса. В этом исследовании, LNR, МТ1-ММР, CD11b и комбинированные функции были тесно взаимосвязаны. Таким образом, два отдельных многомерные модели были созданы, чтобы избежать мультиколлинеарности между этими переменными. LNR, MT1-MMP экспрессии и CD11b плотности + иммуноцитов были независимыми прогностическими факторами для ОС после исключения других сопутствующих факторов (P &
л; 0,05 для всех) Кроме того, объединенные черты были независимым прогностическим фактором, тоже (HR = 3,818 [95 % ДИ: 2.223-6.557], P &
л; 0,001) (таблица 4) .table 4 многомерный анализ факторов, связанных с ОС
факторы

OS на
HR

95% ДИ

P

модель размер 1
Опухоль: &л; 16 cm2vs
≥16 см2
1,821
1.168- 2,839
0,008
серозной инвазии (T этап):
T1-2 против
T3-4
3.232
1.440-7.251
0,004
Lymoh узлы метастазирование:
Нет против
Да
1,012
0.610-1.679
0,964
типы хирургии: SR против
TR /CR
2,030
1.128-3.653
0,018
LNR: низкий (≤0.33) против высокого (&GТ; 0,33)
1.957
1.233-3.108
0,004
МТ1-ММР: Негативная
Положительный
2,596 <бр> 1.496-4.506
0,001
CD11b + иммуноцитов плотность: высокий по сравнению
Low
1.838
1.183-2.855
0,007
Модель размер 2
Опухоль: &л; 16 cm2vs
≥16 см2
1,734
1,120 - 2,686
0,014
серозной инвазии (T этап):
T1-2 против
T3-4
3,013 <бр> 1,360 - 6,674
0,007
Lymoh узлы метастаза:
Нет против
Да
0,696
0,404 - 1,200
0,192
типы хирургии: SR против
TR /CR
2.023
1.134 - 3.606
0.017
Комбинированные функции: I группа против группы II

3,818
2,223 - 6,557
&л; 0,001
OS : Общая выживаемость; HR: отношение рисков; NA: не принимается; SR: субтотальная резекция; ТР: тотальная резекция; CR: комбинированная резекция; LNR:. Отношение лимфатических узлов
анализ ОКР был реализован для дальнейшей оценки прогностической эффективности четырех независимых факторов в данном исследовании. Комбинированные функции будет лучше прогнозировать клинические результаты пациентов GC по сравнению с другими факторами (площадь под кривой: 0,689 [95% ДИ: 0.609-0.768], P
&л; 0,001) (рисунок 3). Рисунок 3 ROC анализ прогностической ценности для смерти. Среди 4-х независимых прогностических факторов, площадь под кривой нового комбинированного признака была самой крупной. Комбинированная функция может иметь лучшую прогностическую способность у пациентов с GC.
Обсуждение
Мы предложили комбинированный анализ интегрированных функций стромальных опухолей в качестве полезной стратегии для оценки прогрессирования рака и выживаемость пациентов в GC, основываясь на наших исследованиях, ориентированных на коэволюция опухолевых клеток и опухоли микросреды и [19, 21, 22]. Данное исследование было разработано, чтобы изучить возможность такой комбинированной стратегии. Кроме того, усовершенствованный способ автоматизации для анализа оцифрованных изображений использовался для обеспечения как воспроизводимости и хорошую производительность в данном исследовании. Как Фридман [23] предложили такие методы проложит путь к лучшему пониманию сложной опухоли микросреды, а также к рутинной оценке параметров для клинического лечения онкологических больных. При этом 184 случая GC были включены, чтобы оценить прогностические значения оптимизированными обычных патологических прогностических факторов, клеточных молекулярных факторов, иммунных факторов и комбинированных функций. Это важный шаг на пути к созданию работоспособной прогностической системы интеграции обоих Клинико-патологический, опухолевые и стромальные особенности в наших исследованиях серии [19, 21, 22].
184 случаев, демографическая и клинико-патологической характеристики аналогичны о которых сообщалось в другой большой серии GC населения [24]. Наши результаты показали, что экспрессия МТ1-ММР часто коррелирует с повышенным риском рецидива, но разница в рецидиве месте не было статистически значимым. Эти результаты были аналогичны предыдущему докладу [25]. МТ1-ММР играет важную роль в деградации типов I и IV коллагены для облегчения раковых клеток расширения спектра. Кроме того, МТ1-ММР может стимулировать ангиогенез и микрометастазов с помощью сосудистого пути [26].
Что касается иммунных клеток, природа, плотность и расположение являются важными параметрами, всесторонне оценить на месте
иммунной реакции и специфические роль в прогрессии рака. В этом исследовании, CD11b + иммуноцитов были в основном расположены на инвазивной фронте. Разница в плотности CD11b + иммуноцитов было статистически значимым между лимфатических узлов и метастазов, не metastais подгрупп. Кроме того, CD11b + иммуноцитов плотность была выше в начале, чем передовые GC пациентов, подобных докладов Sconocchia и др. и Ladoire и др. [27, 28]. Все авторы прочитали и одобрили окончательный вариант рукописи.

• Экспрессия р53, адаптивные синтетазы оксида азота и фактора роста эндотелия сосудов в желудочном предраковых…
• Увеличение интегрина-сшитый киназы неканонически дает NF-kB-опосредованной преимущества роста к желудочному р…