Ett fall-kontrollstudie på effekten av apolipoprotein E-genotyper på magcancer risk och progression

Ett fall-kontrollstudie på effekten av apolipoprotein E-genotyper på magcancer risk och progression Bild Sammanfattning
Bakgrund
apolipoprotein E ( ApoE) är ett multifunktionellt protein som spelar både en viktig roll i metabolismen av kolesterol och triglycerider, och i vävnadsreparation och inflammation. ApoE
genen (19q13.2) har tre viktiga isoformer som kodas av e2, e3 och e4-alleler med ε4 allelen i samband med hyperkolesterolemi och ε2 allelen med motsatt effekt. Ett omvänt förhållande mellan kolesterolnivåer och magcancer (GC) har tidigare rapporterats, även om förhållandet mellan apoE
genotyper och GC har inte undersökts hittills.
Metoder
Etthundra femtiosex magcancer fall och 444 sjukhus kontroller genotypas för apoE polymorfism (e2, e3, e4 alleler). Förhållandet mellan GC och förmodade riskfaktorer mättes med användning av de justerade oddsförhållanden (ORS) och deras 95% konfidensintervall (cis) från logistisk regressionsanalys. En gen-miljöinteraktion analys utfördes. Effekten av ApoE-genotyper på överlevnad från GC undersökas av en Kaplan-Meier analys och Cox proportionella riskregressionsmodell.
Resultat
ämnen som har minst en apoE
e2 allelen har en betydande 60% minskning av GC risk (OR = 0,40, 95% CI: 0,19-0,84) jämfört med e3 homozygoter. Ingen signifikant interaktion uppstod mellan ε4 eller ε2 allel och miljömässiga exponeringar, eller e2 eller e4-alleler påverkat medianöverlevnadstiden, även efter korrigering för ålder, kön och stadion.
Slutsatser
Våra undersökningsrapporterna för första gången en skyddande effekten av ε2 allelen mot GC, som kan delvis tillskrivas högre antioxidativa egenskaper ε2 jämfört med e3 eller e4-alleler. Med tanke på studiens urvalsstorleken är ytterligare studier krävs för att bekräfta våra resultat.
Nyckelord
Magcancer apolipoprotein E Genetisk epidemiologi Polymorfism Gen-miljöinteraktion Bakgrund
apolipoprotein E (ApoE) är en liten glykoprotein som spelar en viktig roll i blodet clearance av kolesterolrika partiklar, så kallade rest lipoproteiner [1]. Förutom sin välkänd roll i lipidmetabolismen har ApoE visats vara inblandad i flera patofysiologiska processer, inklusive antioxidanter och immun aktiviteter, liksom en modulerande effekt på angiogenes, tumörcelltillväxt och metastaser induktion [2]. Den strukturella genen (19q13.2) för apoE
är polymorf med två single nucleotide polymorphisms (SNP) inom den kodande regionen resulterade i tre olika alleler (ε2, ε3, e4) och sex apoE
genotyper (tre homozygoter e4 /ε4, ε3 /ε3 och ε2 /ε2, och tre heterozygoter ε4 /ε3, ε3 /ε2, ε4 /ε2), var och en visar olika receptorbindande förmåga [3, 4]. En meta-analys visade en nästan linjärt förhållande mellan apoE
genotyper och nivåerna av total och LDL-serumkolesterol (LDL-C) när de sex genotyperna beställs enligt följande: ε2 /ε2, ε2 /ε3, ε2 /ε4, ε3 /ε3, ε3 /ε4, ε4 /ε4 [5]. I allmänhet, jämfört med personer med ε3 allelen, nivåer av total- och LDL-C tenderar att vara lägre för dem med ε2 allelen och högre för e4-bärare [6]. Under de senaste två decennierna har tvärsnitts och prospektiva studier rapporterade att låga serumkolesterolnivåer är förknippade med högre icke-kardiovaskulär risk, särskilt cancerrisk [7-10], alltså personer med låg serum totala kolesterolnivåer är mer benägna att lider av cancer. Hittills är fortfarande oklart exakt orsaken till detta konstaterande. Olika förklaringar kan ges som: (i) denna förening skulle teoretiskt reflektera ett direkt orsaks roll av kolesterol i cancer etiologi, eller det bero (ii) några störande faktorer som orsakar både lågt kolesterol och cancer, eller (iii) att " omvänt orsakssamband ", så låga kolesterolvärden kunde helt enkelt vara effekten av cancer snarare än orsaken [11].
att till fullo svara på frågan om det finns ett orsakssamband mellan låg kolesterolnivå och cancer, en alternativ epidemiologisk metod som heter" Mendels randomisering "kan användas för att övervinna problemet med omvänd kausalitet och confounding. Enligt detta tillvägagångssätt, en genetisk variation (t.ex. apoE
) som fungerar som en robust proxy för en miljö modifierbar exponering (t ex serumkolesterolhalt) kan användas för att göra kausala slutledningar om en sjukdom [12]. Benn et al. [13] har nyligen visat att låga LDL-C robustly var associerade med cancer i en stor dansk cohortstudie, medan en minskning av LDL förorsakas av SNP, inklusive apo E
, var det inte. Genom att anta Mendels randomisering tillvägagångssätt slutsatsen Benn att hans resultat är i enlighet med de uppstått ur en kohort av äldre patienter som behandlats med pravastatin [14] och från Atherosclerosis Risk i samhällen kohortstudie [15], allt tyder på låg LDL är förmodligen på grund av till den prekliniska cancerstadiet och i sig
inte orsakar cancer.
roll apoE
genotyper på magcancer har (GC) etiologi inte exlpored hittills som Benn et al. [13] anses alla mag-tarmcancer med någon särskild inriktning på GC. Hittills har fyra kohortstudier [10, 16-18] utforskas sambandet mellan serumkolesterolhalt och utvecklingen av GC. Bland dem, två japanska kohortstudier [10, 18] och ett svenskt studie [16] rapporterade att låga serumkolesterolnivåer är oberoende riskfaktorer för att utveckla magcancer, särskilt tarm histotype. Inget samband dock rapporterades i en stor finsk kohortstudie [17]. Eftersom frågan om hypocholesterolemia är en predisponerande faktor för GC eller ett prekliniskt skede av GC är inte helt löst, syftar vår sjukhusbaserad fall-kontrollstudie för att övervinna detta problem genom att direkt titta på förhållandet mellan apoE
genotyper och GC samt deras interaktion med potentiella effekt modifierare.
Resultat
Allmänna egenskaper hos studiepopulationen, inklusive 156 GC fall och 444 kontroller presenteras i Tabell 1. Alkoholkonsumtion förknippades med en ökad GC risk med yttersta randområdena av 1,84 (95% CI = 1,10-3,07) och 3,29 (95% CI = 1,36-7,98) för måttliga och storkonsumenter, respektive. En nästan fördubblats GC risk (OR = 1,95, 95% CI: 1,06-3,60) upptäcktes bland personer röka mer än 25 pack-år. Dessutom, familjehistoria av magcancer visade sig vara förknippad med en ökad GC risk (OR = 3,14, 95% CI: 1,17-8,44; Tabell 1). Tabell 2 visar fördelningen av de sex apo
E genotyper bland GC fall och kontroller, med ε3 /ε2 genotyp är mindre ofta representerade i fall (9,87%) än i kontroller (15,67%). Tabell 1 Oddskvoter (95 % CI) för magcancer enligt utvalda variabler och deras frekvens fördelning mellan 156 gastric cancerfall och 444 kontroller
Cases
Controls
OR (95% CI) †

n (%)
n (%)
Age (medelvärde ± SD) Review 67,05 ± 11,33
59,04 ± 16,00
Man kön
82 (53,2) Review 261 (58,8) Review 0,50 (0,30-0,83) Review alkohol dricker
0-6 g /dag
60 (40,5)
251 (57,6) katalog 1 *
7-29 g /dag
71 (48,0) Review 163 (37,4) Review 1,84 (1.10- 3.07) Hotel > = 30 g /dag
17 (11,5) Review 22 (5,0) Review 3,29 (1.36- 7.98) Review Rökstatus
aldrig
78 (50,7) Review 238 (54,2)
1 *
Ever
76 (49,3) Review 201 (45,8) Review 1,51 (0.94- 2.45) Review Pack-års rökning
0
74 (51,7)
245 (57,0) katalog 1 *
1-25
31 (21,7) Review 111 (25,8) Review 1,40 (0.78- 2.50) Hotel > 25
38 (26,6) Review 74 (17,2) Review 1,95 (1.06- 3.60) Review frukt och grönsaker intag
Hög ‡
41 (27,5) Review 116 (27,2) Review 1 *
Låg
108 (72,5) Review 310 (72,8) Review 1,18 (0.70- 1,98)
grillat kött
Låg ^
106 (75,7) Review 314 (81,1 ) katalog 1 *
Hög
34 (24,3) Review 73 (18,9) Review 1,25 (0.72- 2.15) Review Fysisk aktivitet
Alla
29 (18,6)
93 (20,9) katalog 1 *
Ingen
127 (81,4) Review 351 (79,1) Review 0,81 (0.45- 1.45) Review familj historia av cancer
Nej
87 (62,2) Review 291 (71,2) katalog 1 *
Hereditet för magcancer
10 (7,1) Review 14 (3,4) Review 3,14 (1.17- 8.44)
Familj historia av andra cancer
43 (30,7) Review 104 (25,4) Review 1,09 (0.66- 1.81) Review ApoE allelfrekvens
ε3
130 (85,5) Review 322 (80,1) katalog ε2
8 (5,3)
39 (9,7) ε4
14 (9,2) Review 41 (10,2) Review † eller justeras efter ålder, kön , alkoholkonsumtion (kontinuerlig variabel), packyears av rökning, grillat köttkonsumtion och familj historia av cancer.
* referenskategori.
‡ minst tre portioner frukt och grönsaker per dag.
^ mindre än fyra gånger /månad.
Tabell 2 Fördelning av ApoE polymorfism bland magcancer fall och kontroller
Cases ‡
kontroller ^
Samtliga fall
intestinal (n = 79)
Diffus (n = 57)
n (%)
n (%)
OR (95% CI) †
OR (95% CI) †
OR (95% CI) †
ε3 /ε3
109 (71,71) Review 253 (62,94)
en *
en *
en *
ε3 /ε2
15 (9,87) Review 63 (15,67) Review 0,43 (0,21 -0,91) Review 0,34 (0,13 - 0,92) Review 0,57 (0,23-1,40) katalog ε3 /ε4
27 (17,76) Review 75 (18.66) Review 0,70 (0,37-1,30) katalog 0,75 (0,35 - 1,60)
0,64 (0,27-1,47) katalog ε2 /ε2
0 (0.00) Review 5 (1,24) katalog NC
NC
NC
ε2 /ε4
1 (0.66) Review 5 (1,24) Review 1,25 (0,10 till 15,10) katalog 2,54 (0,21 till 31,17) katalog NC
ε4 /ε4
0 (0.00) Review 1 (0,25) katalog NC
NC
NC
ε3 /ε2 eller ε2 /ε2
15 (12,10) Review 68 (21,18) Review 0,40 (0,19-0,84)
0,31 (0,11 till 0,83) katalog 0,53 (0,21-1,30) katalog ε3 /ε4 eller ε4 /ε4
27 (19,85) Review 76 (23,10) Review 0,68 (0,36-1,26)
0,71 (0,34-1,53) katalog 0,62 (0,27-1,43).
‡ Apolipoprotein genotyp mättes i 152 fall
^ Apolipoprotein genotyp mättes i 402 kontroller
† eller justeras efter ålder,. .. kön, alkoholkonsumtion (kontinuerlig variabel), packyears av rökning, grillat köttkonsumtion och familjehistoria av magcancer
* Referens kategori
NC: inte beräknings på grund av några många värden
Frekvens av apoE.
genotyper respekterade Hardy-Weinberg-jämvikt (HWE) i kontrollgruppen (p
-värdet > 0,05, data visas ej). Från multivariat analys, individer som bär åtminstone en apoE
ε2 allelen hade en signifikant 60% minskad risk för GC (OR = 0,40, 95% CI: 0,19-0,84) jämfört med dem som homozygota för vildtypen (ε3 /ε3) (tabell 2). När resultat stratifierades enligt tumörhistologi den signifikant samband mellan apoE
ε2 allel bärare och magcancer föreföll vara begränsad till tarm typ, med en OR på 0,31 (95% KI: 0,11-0,83; Tabell 2). Kvalitetskontroller visade 100% överensstämmelse mellan restriction fragment length polymorphism metod och DNA (RFLP) sekvensering.
Resultat av genen miljöinteraktionsanalys presenteras i tabell 3. Ingen statistiskt signifikant interaktion uppstod mellan ε4 eller ε2 allelen (p-
värde för interaktion > 0,05), kön, ålder, alkoholkonsumtion eller frukt och grönsaker intake.Table 3 interaktioner mellan apoE genotyper och utvalda demografiska och livsstils variabler på GC risk
variabler
Fodral

Controls
Alla e2
Fall
Controls
Alla e4

OR (95% CI) †
OR (95% CI) †
Kön
Kvinna, E3 /E3
51 ( 34,69) Review 96 (65,31) katalog 1 *
51 (34,69) Review 96 (65,31) katalog 1 *
Kvinna, variant
8 (27,59) Review 21 (72,41) Review 0,58 (0,20-1,65) Review 12 (24,00) Review 38 (76,00) Review 0,55 (0,23-1,32) katalog Man, E3 /E3
57 (26,64) Review 157 (73,36) Review 0,48 (0,27-0,88) Review 57 (26,64) Review 157 (73,36) Review 0,49 (0,27-0,89) katalog Man, variant
7 (12,96) Review 47 (87,04) Review 0,49 (0,11-2,18) Review 14 (26,92) Review 38 (73,08) Review 1,52 (0,44-5,27) Review P-värde för interaktion °
0,347
0,660
Age Hotel < 60 år, E3 /E3
25 (17,73) Review 116 (82,27) Review 1 *
25 (17,73) Review 116 (82,27) katalog 1 * Hotel < 60 år, variant
4 (12.50) Review 28 (87,50) Review 0,35 (0,07-1,68 ) Review 7 (21,21) Review 26 (78,79) Review 0,70 (0,18-2,66) katalog ≥60 år, E3 /E3
84 (38,01) Review 137 (61,99 ) Review 2,85 (1,53-5,28) Review 84 (38,01) Review 137 (61,99) Review 2,84 (1,54-5,26) katalog ≥60 år, variant
11 (21,57)
40 (78,43) Review 1,24 (0,21-7,26) Review 20 (28,57) Review 50 (71,43) Review 0,97 (0,21-4,36) Review P-värde för interaktion
0,807
0,964
alkoholdrickande Review aldrig, E3 /E3
45 (24,06) Review 142 (75,94) katalog 1 *
45 (24,06) Review 142 (75,94) katalog 1 *
aldrig variant
5 (12,50) Review 35 (87,50) Review 0,29 (0,08-1,04) Review 12 (18,18) Review 54 ( 81,82) Review 0,62 (0,28-1,37) katalog någonsin, E3 /E3
64 (36,57) Review 111 (63,43) Review 1,59 (0,88-2,86) Review 64 ( 36,57) Review 111 (63,43) Review 1,46 (0,81-2,62) katalog någonsin, variant
10 (23,26) Review 33 (76,74) Review 1,78 (0,37-8,50) katalog 15 (40,54) Review 22 (59,46) Review 1,28 (0,35-4,66) Review P-värde för interaktion
0,468
0,707
Rökstatus
aldrig, E3 /e3
54 (29,03) Review 132 (70,97) katalog 1 *
54 (29,03) Review 132 (70,97) katalog 1 *
aldrig variant
8 (20,51) Review 31 (79,49) Review 0,48 (0,18-1,28) Review 13 (20,00) Review 52 (80,00) Review 0,53 (0,23-1,23) katalog någonsin, e3 /e3
54 (31,40) Review 118 (68,60) Review 1,41 (0,80-2,50) Review 54 (31,40) Review 118 (68,60) Review 1,39 (0,79-2,45 ) Review Ever, variant
7 (16,28) Review 36 (83,72) Review 0,68 (0,15-2,98) Review 13 (36,11) Review 23 (63,89) Review 1,98 (0,59 - 6,73) Review P-värde för interaktion
0,609
0,271
frukt och grönsaker intag
Låg, E3 /E3
28 (29,47) Review 67 (70,53)
en *
28 (29,47) Review 67 (70,53) katalog 1 *
låg, variant
2 (9,09) Review 20 (90,91) Review 0,14 (0,02 - 0,87) Review 9 (32,14) Review 19 (67,86) Review 0,84 (0,28-2,49) Review Hög, E3 /E3
78 (31,08) Review 173 (68,92)
1,17 (0,61-2,23) Review 78 (31,08) Review 173 (68,92) Review 1,12 (0,59-2,13) ​​Review Hög variant
11 (19,30) Review 46 (80,70)
2,83 (0,38 till 21,05) Review 16 (22,86) Review 54 (77,14) Review 0,62 (0,16-2,37) Review P-värde för interaktion
0,309
0,487
† eller justeras efter ålder, kön, alkoholkonsumtion (kontinuerlig variabel), packyears av rökning, grillat köttkonsumtion och familj historia av magcancer.
* Referens kategori.
° genom sannolikhet förhållandetest.
Medianöverlevnadstiden överlevnads~~POS=TRUNC tiden~~POS=HEADCOMP från gastrektomi var 19 månader med några statistiska signifikanta skillnader för apoE
ε2 eller ε4 allel bärare (p-
värdet av log-rank test > 0,05), även när analysen begränsades till 1 år och 2 år efter kirurgiskt ingripande (data ej visade). Cox regressionsanalys visade ingen signifikant skillnad enligt apoE
efter justering för ålder, kön, och stadion, även efter stratifiering av cancer histotype.
Diskussion
Vårt fall-kontrollstudie av 156 gastric cancerfall och 444 sjukhus baserade kontroller utvärderades för första gången effekten av apoE
genotyper och deras interaktioner med utvalda demografiska och livsstilsfaktorer på risken för magcancer bland en italiensk befolkning. Enligt våra resultat är apoE
ε2 allel associerad med en 60% statistiskt signifikant minskad risk för GC i jämförelse med vildtypen ε3 allelen. Denna skyddande effekt var särskilt stark för tarm histotype. Vi kunde inte, dock, för att upptäcka signifikanta interaktioner mellan apoE
alleler och livsstilsfaktorer. Dessutom behöver apoE
genotyper inte förefaller påverka överlevnadstiden efter kirurgiskt ingrepp, även när analysen begränsades till de specifika tumör histotypes.
Innan tolka våra resultat, bör vissa begränsningar av studien tas i beaktande. För det första, på grund av förekomsten av ApoE
alleler i vår kontroll befolkning, har denna studie a priori
90% effekt för att detektera en eller 0,40 för effekten av apoE
ε2 allel (vid 5% signifikansnivå). Studiens urvalsstorleken begränsar möjligheten att upptäcka statistiskt signifikanta interaktioner gen-miljö, men vi måste öka provstorleken för att bekräfta våra resultat. Dels uppgifter om serumkolesterolnivåer är inte tillgängliga i vår studiepopulationen, även om deras användbarhet skulle begränsas med tanke på det faktum sådana nivåer påverkas av själva cancern.
Effekten av apoE
genotyper har tidigare undersökas i förhållande till bröst, kolorektal, gallvägarna, prostata, huvud- och halscancer, och hematologiska maligniteter [19-24], med motstridiga resultat. En nyligen publicerad Mendel randomisering studie tog upp olösta frågan om orsaks roll av kolesterol i cancer etiologi genom att undersöka om vissa SNP inklusive apoE
, alla kopplade till livslång reducerad plasma-LDL-C är ett kausalt samband med en ökad risk för cancer bland två stora danska allmänna befolkningsstudier [13]. Resultaten visar ett omvänt samband mellan cancerförekomsten eller dödlighet och kolesterolnivåer, medan ingen effekt kunde visas för apoE
alleler. Även med vissa begränsningar på den valda kohorten, Författarna drar slutsatsen att det finns en betydande brist på kausal effekt av kolesterol på cancerrisk inklusive gastrointestinal cancer. Följaktligen den uppenbara motsättningen mellan resultat avseende plasmakolesterolnivåer och cancerrisk med avseende på apo E
, kan vara ett tecken på en preklinisk cancer stadium involverar ökat upptag av kolesterol från blodet för celltillväxt och spridning, vilket sänker kolesterolemi före den kliniska cancerdiagnos.
När det gäller magsäckscancer, två japanska kohortstudier [10, 18] och ett svenskt kohortstudie [16] rapporterade en stark omvänt samband mellan serumkolesterolnivåer och risk för magcancer. Japanska studier har dock funnit föreningen betydligt mindre starkare efter uteslutning av de tidiga 3-åriga incidensfall och avancerade fall, vilket tyder utvecklingen av magsäckscancer själv tenderar att sänka den totala kolesterolnivåer. För att övervinna de problem i samband med omvända orsakssamband eller confounding av livsstilsfaktorer, bestämde vi oss för att klargöra vilken roll kolesterolnivåer på GC risk genom att använda en Mendels randomisering strategi, nämligen genom att studera direkt effekten av apoE
genotyper på en stor serie italienska GC fall och kontroller. Våra resultat visar en statistiskt signifikant 60% minskad risk för GC i samband med ε2 allelen.
Eftersom e2 bärare har en lägre serum kolesterolemi än icke e2 bärare motsäger vår upptäckt den tidigare rapporterade observationen att låga serumkolesterolnivåer ökar GC risk [10, 16, 18]. ApoE har dock många andra funktioner bredvid sin välkända roll i lipidmetabolismen, som potentiellt är involverade i cancerrisken, eftersom det är involverat i vävnadsreparation, inflammatoriska och immunsvar, celltillväxt och angiogenes [2], och visar antioxidant egenskaper [25]. Av betydelse har ApoE-protein vissa antioxidativa egenskaper, med minskande antioxidant aktivitet i ordning ε2 > ε3 > e4 alleler [25]. Även om de molekylära mekanismer som ansvarar för antioxidativa egenskaper apoE
inte klar ännu har ett antal studier undersökt de mekanismer genom vilka apoE
genotyper kunde påverka ställningen beroende mediatorer oxidativa eller biomarkörer för oxidativ stress [26 -28]. ApoE
ε2 bärare rökare individer som utsätts för nikotin, en viktig källa till oxidativ stress, har en nästan 30% högre total antioxidantstatus jämfört med apoE
e3 bärare, mätt som förmågan att hämma peroxidas medierad bildning av de 2,2-azino-bis-3-ethylbensthiazoline-6-sulfonsyra (ABTS +) radikal, medan apoE
e4-ämnen uppvisar en 30% ökad oxiderat LDL [26].
Oxidativ stress är ges av en obalans mellan ökad produktion av reaktiva syrespecies och en signifikant minskning av förmågan hos antioxidantfunktioner. Produktionen av peroxider och fria radikaler i samband med förändringar i det normala redox tillstånd av vävnader kan framkalla toxiska effekter inklusive oxidativ DNA-skador som tillsammans med hypoxi och acidos, kan vara i hög grad inblandad i patogenesen av GC, eftersom det kan anses vara orsaken som såväl som en följd av tumörprogression [29, 30]. Något bevis visade en bred omfattning av oxidativ stress i GC fall om man jämför med friska individer, vilket framgår av förhöjda halter av lipidperoxideringsprodukter och utarmning av enzymatiska och icke-enzymatiska antioxidanter [31, 32]. Mot bakgrund av dessa resultat, resultatet av vår studie, som rapporterar en skyddande effekt av apoE
ε2 allelen på GC, kan förklaras av förbättrade antioxidativa egenskaper ε2 allel jämfört med e3 eller e4-alleler, och detta bevis kan vara särskilt sant för GC, vars patogenes påverkas starkt av rökrelaterade oxidativ stress [33]. Om vår modell stämmer, kan vi förvänta oss en interaktion mellan apoE
ε2 allel och rökning, kan dock den begränsade kraften i vår interaktionsanalys har fördunklat det.
Slutsatser
Sammanfattningsvis ger vår studie för första gången bevis för en möjlig skyddande effekten av ε2 allelen mot GC. Ytterligare studier krävs för att bekräfta våra resultat och ta reda på om den skyddande effekten förmedlas genom sänkt kolesterolnivå eller bättre antioxiderande egenskaper.
Metoder
Studiepopulation sälja The försökspersoner valdes enligt en fall-kontroll studera design som tidigare beskrivits [34-36]. I korthet var fall primära magsäckscancerpatienter i följd, med histologisk bekräftelse, som genomgick en läkande gastrektomi i "A. Gemelli" undervisningssjukhus under perioden 2002-2010. Kontroller valdes från cancerfria patienter med ett brett spektrum av diagnoser, upptagna till samma sjukhus under den identiska tidsperioden.
I närmare detaljer, ca 50% av vår kontrollpopulation är gjord av blodgivare, medan den andra halvan är gjord av patienter som genomgår kirurgiska ingrepp som laparoskopisk kolecystektomi eller blindtarmsinflammation eller ljumskbråck och en mindre del av patienterna drabbas av kroniska sjukdomar som högt blodtryck eller kronisk obstruktiv lungsjukdom (KOL) genomgår regelbunden check-up.
Alla försökspersoner kaukasier född Italien. Studien provstorleken omfattade 156 fall och 444 kontroller, med deltagande på 98% bland fallen och 93% bland kontrollerna. Enligt Lauren klassificering, de flesta (58,1%) av mag cancerfall var tarm [37]. Tumörerna var belägna i antrum (44,5%), i corpus (14,8%), i antrum /corpus (21,1%), i den övre magmunnen (3,1%), stubbar (5,5%), i fundum (1,6% ), i den övre magmunnen /corpus (6,3%) och hela magen (3,1%). Baserat på de cytologiska och arkitektoniska atypisms, liksom Histo-patologisk rapporter [38], patienternas tumörer klassificeras enligt följande: 70,0% knappast differentierade (G3), 27,6% måttligt differentierade (G2), 3,4% väl differentierade (G1 ), medan 51,7% var iscensatt i-II och 48,3% iscensatt III-IV.
skrift~~POS=TRUNC informerat samtycke erhölls från alla försökspersoner, varefter varje försöksperson som tillhandahålls ett venöst blodprov som uppsamlades i EDTA-belagda rör. Denna studie genomfördes i enlighet med Helsingforsdeklarationen och godkändes av den etiska kommittén i Università Cattolica del Sacro Cuore.
Genotypning
DNA extraherades från perifera blodlymfocyter, och genotypning av apoE
utfördes med användning restriction fragment length polymorphism (RFLP). Kortfattat, 20 ng av genomiskt DNA amplifierades med användning av oligonukleotidprimrar 5'-TCC AAG GAG CTG CAG GCG GCG CA-3 'och 5'-GCC CCG GCC TGG TAC ACT GCC A-3'. Reaktionerna denaturerades under 3 minuter vid 95 ° C, följt av 35 två-stegs cykler bestående av 10 sekunder vid 95 ° C och sedan 10 sekunder vid 66 ° C. Efter cyklerna avslutades en slutlig förlängning på 5 minuter vid 95 ° C utfördes. En 10 | il alikvot av varje RFLP produkten digererades med 5 U av Afl
III och en separat 10 | il alikvot digererades med 5 U av Hae
II. Både apoE
ε2 och apoE
e3 alleler skars med Afl
III för att ge produkter med 50 och 168 bp, medan apoE
ε4 allel förblir uncut på 218 bp. Använda Hae
II, både apoE
ε3and apoE e4 alleler ger produkter av 23 och 195 bp, medan apoE
ε2 allel förblir uncut på 218 bp. De sex möjliga genotyperna tilldelades genom att analysera mönstren som produceras av restriktionsklyvning. Som för de kvalitetskontroller, var 5% av proverna också sekvenseras, med standard-DNA-prov för varje apoE
genotyp skickas av Seripa et al. [39].
Datainsamling Fodral och kontroller intervjuades av utbildad läkare med hjälp av ett strukturerat frågeformulär för att samla in information om demografiska data, rökning, dricka historia, matvanor, fysisk aktivitet och familjehistoria av cancer med en särskilt fokus på magcancer. Deltagarna ombads att fokusera på året före diagnos (för kontroller året före intervjutillfället) när de svarar på frågor om levnadsvanor. Rökning status kategoriseras som aldrig och någonsin-rökare (inklusive både nuvarande och före detta rökare). Pack-år beräknades som år rökt multiplicerat med det nuvarande antalet (eller tidigare nummer, för dem som hade slutat) rökta cigaretter per dag delat med 20.
frukt och grönsaker intag var kategoriseras som hög om minst tre portioner frukt och grönsaker konsumerades dagligen medan grillat kött intag definierades som låg om förbrukningen var mindre än 4 gånger /månad. Familj historia av cancer hänvisas till föräldrar, syskon och avkomma. Uppgifter om tidigare Helicobacter pylori
infektion fanns endast för gastric cancerfall. Svarsfrekvensen för att slutföra intervjun var 92% i de fall och 97% för kontroller, med undantag av uppgifter om grillat kött intag (okänd i 10% av fallen och 12,8% av kontrollerna) och familjehistoria av cancer (Okänt i 10% av fallen och 8% av kontrollerna).
Statistisk analys
förhållandet mellan magcancer och förmodade riskfaktorer mättes med användning av de justerade oddsförhållanden (ORS) och deras 95% konfidensintervall (Cl) härledda från logistisk regressionsanalys med hjälp STATA programvara (version 10.0). Möjliga riskfaktorer ansågs vara confounders om tillsättningen av den variabeln till modellen ändrade eller med 10% eller mer, och när en confounder någon beräknade huvudsakliga effekten identifierades, hölls den i alla modeller. Baserat på dessa kriterier, kontrollerade vi för ålder, kön, alkohol och grillat kött konsumtion, rökning (pack-år) och familjehistoria av magcancer. En χ 2-test av Hardy-Weinberg jämvikt (HWE) för tre apoE
alleler utfördes bland kontrollerna. För att undersöka om effekten av de utvalda polymorfismer ändrades av vissa miljöexponeringar, var ett stratifierat logistisk regressionsanalys, justering för confounders tidigare identifierats. En gen-miljöinteraktion analys utfördes genom att använda dem som bär homozygota vildtyp genotypen (ε3 /ε3 samband med apoE
ε3 isoform) som referensgrupp. I denna analys genotyperna kategoriseras enligt följande: närvaro av åtminstone en apoE
ε2 allel eller närvaro av åtminstone en apoE
ε4 allelen (genotyp ε2 /ε4 ingick inte i någon kategori), vilket ger . andra två apoE
isoformer (apo E
2 och apo E
4) katalog I denna analys har ålder kategoriseras binomially (< 60 och ≥ 60 år gammal), rökning ansågs som aldrig /aldrig rökare, och alkoholkonsumtion som drinkers /icke-drinkers (det senare inklusive personer vars alkoholintag var mindre än 7 g /dag). För att testa för interaktion mellan två exponeringsvariabler, var sannolikheten förhållandetest används med individerna homozygota för vildtypen genotypen (ε3 /ε3) och inte utsätts för variabler av intresse som referensgruppen.
Övergripande överlevnadskurvorna beräknades av Kaplan-Meier produktgränsmetoden från och med dagen för diagnos fram till döden. Om en patient inte var död, var överlevnad uteslöts vid tidpunkten för det senaste besöket. Log rank-test användes för att bedöma skillnader mellan undergrupper. Risken för dödsfall i samband med ApoE-isoformer uppskattades av Cox proportionella faror modell. Hazard ratio (HR) justerades för ålder, kön, och stadion, med vildtyp genotypen (ε3 /ε3) som referensgrupp. Dessutom analyser stratifierades enligt cancer histotype (intestinal /diffus) katalog källa till stöd
Ingen finansiering stöd förklaras
Förkortningar
OR:..
Oddskvot

• Immunhistokemisk överensstämmelse mellan primära tumörer och lymfkörtelmetastaser av gastric neuroendokrin carcinoma
• Förändringar av E-cadherin och β-catenin i magcancer