En case-control studie på effekten av Apolipoprotein E genotyper på magekreftrisiko og progression

En case-control studie på effekten av Apolipoprotein E genotyper på magekreftrisiko og progresjon
Abstract
Bakgrunn
Apolipoprotein E ( ApoE) er et multifunksjonelt protein som spiller både en viktig rolle i metabolismen av kolesterol og triglyserider, og i vev reparasjon og betennelse. Den ApoE
genet (19q13.2) har tre store isoformene kodet av ε2, ε3 og ε4 alleler med ε4 allelet assosiert med hyperkolesterolemi og ε2 allel med motsatt effekt. En invers sammenheng mellom kolesterolnivå og magekreft (GC) har tidligere blitt rapportert, selv om forholdet mellom ApoE
genotyper og GC har ikke blitt utforsket så langt.
Metoder
Ett hundre og femtiseks magekreft tilfeller og 444 sykehus kontroller ble genotypet for apoE polymorfisme (ε2, ε3, ε4 alleler). Forholdet mellom GC og mulige risikofaktorer ble målt ved hjelp av de justerte odds ratio (ORS) og deres 95% konfidensintervall (CIS) fra logistisk regresjonsanalyse. Et gen-miljø interaksjon analyse ble utført. Effekten av ApoE genotyper på overlevelse fra GC ble utforsket av en Kaplan-Meier analyse og Cox proporsjonal hazard regresjonsmodellen.
Resultater
emner med minst én ApoE
ε2 allelet har en betydelig 60% reduksjon av GC risiko (OR = 0,40, 95% KI: 0,19 til 0,84) sammenlignet med ε3 homozygote. Ingen signifikant interaksjon oppstått mellom ε4 eller ε2 allel og miljømessige eksponeringer, og heller ε2 eller ε4 alleler påvirket median overlevelse ganger, selv etter korrigering for alder, kjønn og stadion.
Konklusjoner
Våre studierapportene for første gang en beskyttende effekt av ε2 allelet mot GC, som kan delvis tilskrives høyere antioksidantegenskaper av ε2 sammenlignet med ε3 eller ε4 alleler. Gitt studiens utvalgsstørrelsen, er videre studier er nødvendig for å bekrefte våre funn.
Nøkkelord
Magekreft Apolipoprotein E Genetisk epidemiologi Polymorphism Gene-miljø interaksjon Bakgrunn
Apolipoprotein E (ApoE) er en liten glykoprotein som spiller en viktig rolle i blodet clearance av kolesterolrike partikler, kjent som rest lipoproteiner [1]. Foruten sin velkjent rolle i lipidmetabolisme, har ApoE blitt vist å være involvert i en rekke patofysiologiske prosesser, herunder antioksidant og immunologiske aktiviteter, så vel som en modulerende effekt på angiogenese, tumorcellevekst og metastase induksjon [2]. Det strukturelle genet (19q13.2) for apoE
er polymorfe med to enkeltnukleotidpolymorfi (SNPs) i koderegionen som resulterer i tre ulike alleler (ε2, ε3, ε4) og seks ApoE
genotyper (tre homozygote ε4 /ε4, ε3 /ε3 og ε2 /ε2, og tre heterozygoter ε4 /ε3, ε3 /ε2, ε4 /ε2), som hver viser ulike reseptor-bindende evner [3, 4]. En meta-analyse rapporterte en nesten lineær sammenheng mellom APOE
genotyper og nivåene av total og LDL serum kolesterol (LDL-C) når de seks genotyper er organisert som følger: ε2 /ε2, ε2 /ε3, ε2 /ε4, ε3 /ε3, ε3 /ε4, ε4 /ε4 [5]. Generelt, i forhold til personer med den ε3 allelet, nivåene av totalt og LDL-C har en tendens til å være lavere for de med ε2 allelet og høyere for ε4 bærere [6]. I de siste to tiårene har tverrsnitts og prospektive studier rapporterte at lave serum kolesterol nivåer er assosiert med høyere ikke-kardiovaskulær risiko, spesielt kreftrisiko [7-10], altså, personer med lav serum total kolesterol nivåer er mer sannsynlig å lider av kreft. Til dags dato er fortsatt den eksakte årsaken til slike funn fortsatt uklart. Forskjellige forklaringer kan bli gitt som: (i) denne forbindelsen kan i teorien reflekterer en direkte kausal rolle av cholesterol i kreft etiologi, eller det være på grunn av (ii) til noen forstyrrende faktorer som forårsaker både lav kolesterol og kreft, eller (iii) for å ' revers kausalitet ", så lavt kolesterolnivå kan rett og slett være effekten av kreft i stedet for årsaken [11].
til fullt svare på spørsmålet om årsakssammenheng eksisterer mellom lavt kolesterolnivå og kreft, en alternativ epidemiologisk tilnærming kalt" mendelsk randomisering "kan brukes for å overvinne problemet med revers kausalitet og forvirrende. I henhold til denne fremgangsmåten, en genetisk variant (f.eks apoE
) som fungerer som en robust proxy for en miljømessig eksponering modifiserbare (f.eks serumkolesterolnivå) kan brukes for å lage kausale slutninger om en sykdom [12]. Benn et al. [13] har nylig vist at lavt LDL-C ble robust assosiert med kreft i en stor dansk kohortstudie, mens en reduksjon i LDL forårsaket av SNPs, inkludert apo E
, var det ikke. Ved å vedta den mendelsk Randomisering tilnærming, Benn konkluderte med at hans resultater er i samsvar med de dukket opp fra en kohort av eldre pasienter behandlet med pravastatin [14] og fra Atherosclerosis Risiko i lokalsamfunn kohortstudie [15], alt tyder på lav LDL er trolig på grunn av til preklinisk kreft stadium og per se
forårsaker ikke kreft.
rolle ApoE
genotyper på magekreft har (GC) etiologi ikke blitt exlpored så langt, som Benn et al. [13] vurdert alle gastrointestinal kreft uten noen bestemt fokus på GC. Til dags dato, fire kohortstudiene [10, 16-18] utforsket forholdet mellom serum-cholesterol-nivå og utvikling av GC. Blant dem, to japanske kohortstudier [10, 18] og en svensk studie [16] rapporterte at lave serumkolesterolnivåer er uavhengige risikofaktorer for utvikling av magekreft, spesielt tarm histotype. Ingen sammenheng, men ble rapportert i en stor finsk kohortstudie [17]. Siden spørsmålet om hypocholesterolemia er en predisponerende faktor for GC eller et preklinisk stadium av GC har ikke blitt fullt ut løst, tar sikte vår sykehusbasert case-control studie for å løse dette problemet ved direkte å se på forholdet mellom ApoE
genotyper og GC samt deres interaksjon med potensielle effekt ved.
Resultater
Generelle trekk ved studiepopulasjonen inkludert 156 GC tilfeller og 444 kontroller er presentert i tabell 1. Alkoholforbruket forbruket~~POS=HEADCOMP var assosiert med økt GC risiko med ORS av 1,84 (95% KI = 01.10 til 03.07) og henholdsvis 3,29 (95% CI = 1,36 til 7,98) for moderate og stordrikkere,. En nesten doblet GC risiko (OR = 1,95, 95% KI: 1,06 til 3,60) ble påvist mellom individer røyke mer enn 25 stk-årene. I tillegg, familiehistorie med magekreft resulterte å være forbundet med en økt GC risiko (OR = 3,14, 95% KI: 1,17 til 8,44, tabell 1). Tabell 2 viser fordelingen av de seks apo
E genotyper blant GC tilfeller og kontroller, med ε3 /ε2 genotype blir sjeldnere representert i tilfeller (9,87%) enn i kontrollgruppen (15.67%). Tabell 1 Odds ratio (95 % KI) for magekreft etter valgte variabler og deres frekvensfordeling blant 156 magekrefttilfeller og 444 kontroller Book Cases Book Controls
OR (95% CI) †

n (%)
n (%)
Alder (gjennomsnitt ± SD)
67,05 ± 11,33
59,04 ± 16,00
Mann kjønn
82 (53,2)
261 (58,8)
0,50 (0,30 til 0,83)
Alkohol drikker
0-6 g /dag
60 (40,5)
251 (57,6)
1 *
7-29 g /dag
71 (48,0)
163 (37,4)
1.84 (1.10- 3.07)
> = 30 g /dag
17 (11,5)
22 (5,0)
3,29 (1.36- 7,98)
røykestatus
aldri
78 (50,7)
238 (54,2)
1 *
Ever
76 (49,3)
201 (45,8)
1.51 (0.94- 2.45)
Pack-års røyking
0
74 (51,7)
245 (57,0)
1 *
1-25
31 (21,7)
111 (25,8)
1.40 (0.78- 2.50)
> 25
38 (26.6)
74 (17,2)
1.95 (1.06- 3.60)
Frukt og grønnsaker inntak
Høy ‡
41 (27,5)
116 (27,2)
1 *
lav
108 (72,5)
310 (72,8)
1,18 (0.70- 1,98)
Grillet kjøtt
lav ^
106 (75,7)
314 (81,1 )
1 *
Høy
34 (24,3)
73 (18,9)
1,25 (0.72- 2,15)
Fysisk aktivitet
Enhver
29 (18,6)
93 (20,9)
1 *
Ingen
127 (81,4)
351 (79,1)
0,81 (0.45- 1.45)
Familie historie av kreft
Nei
87 (62,2)
291 (71,2)
1 *
Familiehistorie med magekreft
10 (7,1)
14 (3,4)
3.14 (1.17- 8.44)
Familiehistorie med annen kreft
43 (30,7)
104 (25,4)
1.09 (0.66- 1.81)
ApoE allelfrekvens
ε3
130 (85,5)
322 (80,1)
ε2
8 (5.3)
39 (9,7)
ε4
14 (9,2)
41 (10,2)
† eller justeres etter alder, kjønn , alkoholforbruk (som kontinuerlig variabel), packyears av røyking, grillet kjøtt forbruk og familiy historie av kreft. product: * referansekategorien.
‡ minst tre porsjoner frukt og grønnsaker per dag.
^ mindre enn fire ganger /måned.
Tabell 2 Fordeling av ApoE polymorfisme mellom magekrefttilfeller og kontroller
Cases ‡
Controls ^
Alle saker
tarm~~POS=TRUNC (n = 79)
Diffus (n = 57)
n (%)
n (%)
OR (95% CI) †
OR (95% CI) †
OR (95% CI) †
ε3 /ε3
109 (71,71)
253 (62,94)
1 *
1 *
1 *
ε3 /ε2
15 (9,87)
63 (15.67)
0,43 (0,21 -0,91)
0,34 (0,13 - 0,92)
0,57 (0,23 til 1,40)
ε3 /ε4
27 (17.76)
75 (18,66)
0,70 (0,37 til 1,30)
0,75 (0,35 til 1,60)
0,64 (0,27 til 1,47)
ε2 /ε2
0 (0.00)
5 (1,24)
NC
NC
NC
ε2 /ε4
1 (0,66)
5 (1,24)
1,25 (0,10 til 15,10)
2,54 (0,21 til 31,17)
NC
ε4 /ε4
0 (0.00)
1 (0,25)
NC
NC
NC
ε3 /ε2 eller ε2 /ε2
15 (12.10)
68 (21.18)
0,40 (0,19 til 0,84)
0,31 (0,11 til 0,83)
0,53 (0,21 til 1,30)
ε3 /ε4 eller ε4 /ε4
27 (19.85)
76 (23.10)
0,68 (0,36 til 1,26)
0,71 (0,34 til 1,53)
0,62 (0,27 til 1,43).
‡ Apolipoprotein genotype ble målt i 152 tilfeller
^ Apolipoprotein genotype ble målt i 402 kontroller
† eller justeres etter alder,. .. kjønn, alkoholforbruk (som kontinuerlig variabel), packyears av røyking, grillet kjøtt forbruk og familiehistorie med magekreft product: * Referansekategori kategori~~POS=HEADCOMP
NC: ikke beregnelige på grunn av få mange verdier
Frekvens apoE.
genotyper respektert Hardy-Weinberg likevekt (HWE) i kontrollgruppen (p
-verdi > 0,05, ikke data vist). Fra den multivariate analysen, individer som bærer i det minste en apoE
ε2 allele hadde en signifikant 60% redusert risiko for GC (OR = 0,40, 95% CI: 0,19 til 0,84) sammenlignet med de som er homozygote for villtype (ε3 /ε3) (tabell 2). Når resultatene ble inndelt i henhold til tumorhistologi, er signifikant sammenheng mellom ApoE
ε2 allel bærere og magekreft så ut til å være begrenset til tarmtypen, med en OR på 0,31 (95% CI: 0,11 til 0,83, tabell 2). Kvalitetskontrollene viste 100% samsvar mellom rflp (RFLP) -metoden og DNA-sekvensering.
Resultater av genet-miljø interaksjonsanalyse er vist i tabell 3. Ingen statistisk signifikant interaksjon fremkom mellom ε4 eller ε2-allelet (p-
verdi for samhandling > 0,05), kjønn, alder, alkoholforbruk eller frukt og grønnsaker intake.Table 3 interaksjoner mellom APOE genotyper og utvalgte demografiske og livsstilsvariabler på GC risiko
variabler Book Cases <.no> Controls
Eventuelle e2
Cases
Controls
Enhver e4

OR (95% CI) †
OR (95% CI) †
Kjønn
Kvinne, e3 /e3
51 ( 34,69)
96 (65,31)
1 *
51 (34,69)
96 (65,31)
1 *
Kvinne, variant
8 (27.59)
21 (72,41)
0,58 (0,20 til 1,65)
12 (24,00)
38 (76.00)
0,55 (0,23 til 1,32)
Mann, e3 /e3
57 (26.64)
157 (73,36)
0,48 (0,27 til 0,88)
57 (26.64)
157 (73,36)
0,49 (0,27 til 0,89)
Mann, variant
7 (12.96)
47 (87,04)
0,49 (0,11 til 2,18)
14 (26,92)
38 (73,08)
1,52 (0,44 til 5,27)
P-verdi for interaksjon °
0,347
0,660
Age
< 60 år, e3 /e3
25 (17.73)
116 (82,27)
1 *
25 (17.73)
116 (82,27)
1 *
< 60 år, variant
4 (12.50)
28 (87.50)
0,35 (0,07 til 1,68 )
7 (21,21)
26 (78,79)
0,70 (0,18 til 2,66)
≥60 år, e3 /e3
84 (38.01)
137 (61,99 )
2,85 (1,53 til 5,28)
84 (38.01)
137 (61,99)
2,84 (1,54 til 5,26)
≥60 år, variant
11 (21,57)
40 (78,43)
1,24 (0,21 til 7,26)
20 (28.57)
50 (71.43)
0,97 (0,21 til 4,36)
P-verdi for samhandling
0,807
0,964
alkohol drikking
aldri, e3 /e3
45 (24,06)
142 (75,94)
1 *
45 (24,06)
142 (75,94)
1 *
aldri, variant
5 (12.50)
35 (87.50)
0,29 (0,08 til 1,04)
12 (18.18)
54 ( 81,82)
0,62 (0,28 til 1,37)
Ever, e3 /e3
64 (36,57)
111 (63,43)
1,59 (0,88 til 2,86)
64 ( 36,57)
111 (63,43)
1,46 (0,81 til 2,62)
Ever, variant
10 (23,26)
33 (76,74)
1,78 (0,37 til 8,50)
15 (40.54)
22 (59,46)
1,28 (0,35 til 4,66)
P-verdi for samhandling
0,468
0,707
røykestatus
aldri, e3 /e3
54 (29,03)
132 (70,97)
1 *
54 (29,03)
132 (70,97)
1 *
aldri, variant
8 (20.51)
31 (79,49)
0,48 (0,18 til 1,28)
13 (20,00)
52 (80.00)
0,53 (0,23 til 1,23)
Ever, e3 /e3
54 (31.40)
118 (68,60)
1,41 (0,80 til 2,50)
54 (31.40)
118 (68,60)
1,39 (0,79 til 2,45 )
Ever, variant
7 (16.28)
36 (83,72)
0,68 (0,15 til 2,98)
13 (36,11)
23 (63,89)
1,98 (0,59 - 6,73)
P-verdi for samhandling

0,609
0.271
Frukt og grønnsaker inntak
lav, e3 /e3
28 (29,47)
67 (70.53)
1 *
28 (29,47)
67 (70,53)
1 *
lav, variant
2 (9,09)
20 (90,91)
0,14 (0,02 - 0,87)
9 (32.14)
19 (67,86)
0,84 (0,28 til 2,49)
Høy, e3 /e3
78 (31.08)
173 (68,92)
1,17 (0,61 til 2,23)
78 (31.08)
173 (68,92)
1,12 (0,59 til 2,13) ​​
høy, variant
11 (19.30)
46 (80.70)
2,83 (0,38 til 21,05)
16 (22.86)
54 (77,14)
0,62 (0,16 til 2,37)
P-verdi for samhandling
0,309
0,487
† eller justeres etter alder, kjønn, alkoholforbruk (som kontinuerlig variabel), product: * Referansekategori kategori~~POS=HEADCOMP packyears av røyking, grillet kjøtt forbruk og familiy historie av magekreft..
° ved likelihood ratio test.
Median overlevelse fra gastrektomi var 19 måneder uten statistisk signifikante forskjeller for ApoE
ε2 eller ε4 allel bærere (p-
verdien av log-rank test > 0,05), selv når analysen ble begrenset til 1 år og 2 år etter kirurgisk intervensjon (data ikke vist). Cox regresjonsanalyse viste ingen signifikant forskjell i henhold til apoE
etter justering for alder, kjønn, og stadion, selv etter stratifisering av kreft histotype.
Diskusjon
Vår case-control studie av 156 mage krefttilfeller og 444 sykehus -baserte kontroller evaluert for første gang effekten av ApoE
genotyper og deres interaksjoner med utvalgte demografiske og livsstilsfaktorer på risikoen for magekreft blant en italiensk befolkning. I henhold til våre resultater, er apoE
ε2 allele assosiert med en 60% statistisk signifikant redusert risiko for GC sammenlignet med villtype-allelet ε3. Denne beskyttende effekt var spesielt sterk for tarm histotype. Vi klarte imidlertid å påvise signifikante interaksjoner mellom APOE
alleler og livsstilsfaktorer. I tillegg gjør ApoE
genotyper ikke ut til å påvirke overlevelse etter kirurgisk inngrep, selv når analysen ble begrenset til de spesifikke tumor histotypes.
Før tolke resultatene, bør noen begrensninger av studien tas i betraktning. For det første, på grunn av utbredelsen av ApoE
alleler i vår kontrollpopulasjon, har denne undersøkelsen a priori
90% styrke til å påvise en eller 0,40 for effekten av apoE
ε2 allele (i 5% signifikansnivå). utvalgsstørrelse studiens begrenser muligheten til å oppdage statistisk signifikante gen-miljø interaksjoner, men vi trenger å øke utvalgsstørrelsen for å bekrefte resultatene. For det andre data på serumkolesterolnivåer er ikke tilgjengelige i vårt studiepopulasjonen, selv om deres anvendelse ville være begrenset i lys av det faktum slike nivåer er rammet av kreft selv.
Effekten av ApoE
genotyper er tidligere blitt undersøkt i forhold til brystkreft, tykktarms, galleveier, prostata, hode og nakke kreft, og hematologiske maligniteter [19-24], med motstridende resultater. En nylig publisert mendelsk randomisering studie adressert uløste spørsmålet om årsaks rolle av kolesterol i kreft etiologi ved å undersøke om noen SNPs inkludert apoE
, alle knyttet til livslang redusert plasma LDL-C, er årsakssammenheng med en økt risiko for kreft blant to store danske generelle befolkningsstudier [13]. Resultatene viser en invers sammenheng mellom kreftforekomst eller dødelighet og kolesterolnivået, mens ingen effekt ble demonstrert for ApoE
alleler. Selv med noen begrensninger på den valgte kullet, Forfatterne konkluderer med at det er en betydelig mangel på årsaks virkning av kolesterol på kreftrisiko, inkludert gastrointestinal kreft. Følgelig den tilsynelatende motsetningen mellom resultatene knyttet plasma kolesterolnivå og kreftrisiko med hensyn til apo E
, kan være en indikasjon på et preklinisk kreft stadium involverer økt opptak av kolesterol fra blodet for cellevekst og spredning, og dermed senke cholesterolemia før den kliniske kreftdiagnose.
Som for magekreft, to japanske kohortstudier [10, 18] og en svensk kohortstudie [16] rapporterte en sterk invers sammenheng mellom serumkolesterolnivåer og risiko for magekreft. Japanske studier har imidlertid funnet foreningen langt mindre sterkere etter utelukkelse av de tidlige 3-års hendelsen saker og avanserte tilfeller, og dermed tyder utviklingen av magekreft i seg selv har en tendens til å senke kolesterolnivået. For å overvinne problemene knyttet til å reversere kausalitet eller confounding av livsstilsfaktorer, bestemte vi oss for å avklare hvilken rolle kolesterolnivå på GC risikoen ved hjelp av en mendelsk randomisering tilnærming, nemlig ved å studere direkte effekten av ApoE
genotyper på en stor serie av italienske GC saker og kontroller. Våre resultater viser en statistisk signifikant 60% redusert risiko for GC knyttet til ε2 allel.
Siden ε2 operatører har en lavere serum cholesterolemia enn ikke- ε2 bærere, våre funn motsier tidligere rapportert observasjon at lavt serumkolesterolnivåer øker GC risiko [10, 16, 18]. ApoE har imidlertid mange andre funksjoner ved siden av sin velkjente rolle i lipidmetabolisme, som potensielt er involvert i kreftrisiko, som det er involvert i vev reparasjon, inflammatoriske og immunrespons, cellevekst og angiogenese [2], og viser antioksidant egenskaper [25]. Av betydning, har ApoE protein visse antioksidative egenskaper, med avtagende antioksidantaktivitet i orden ε2 > ε3 > ε4 alleler [25]. Selv om de molekylære mekanismene som er ansvarlig for antioksidantegenskaper av apoE
er ikke avklart ennå, har en rekke studier undersøkte mekanismene gjennom hvilke ApoE
genotyper kan påvirke oksidative statusavhengige mediatorer eller biomarkører for oksidativt stress [26 -28]. ApoE
ε2-carrier røyk enkeltpersoner, som er utsatt for nikotin, en viktig kilde til oksidativt stress, har en nesten 30% høyere total antioksidant status sammenlignet med ApoE
ε3-bærere, målt som evnen til å hemme peroksidase -formidlet dannelse av 2,2-azino-bis-3-ethylbensthiazoline-6-sulfonsyre (ABTS +) radikal, mens ApoE
ε4 fag viser en 30% økning av oksidert LDL [26].
oksidativt stress er gitt av en ubalanse mellom økt produksjon av reaktive oksygenforbindelser og en betydelig reduksjon i evnen til antioksidant funksjoner. Produksjonen av peroksider og frie radikaler knyttet til endringer i den vanlige redoks-tilstanden til vev kan forårsake toksiske effekter inkludert oksidativ DNA-skade som sammen med hypoksi og acidose, kan være sterkt involvert i patogenesen av GC som det kan betraktes årsaken så vel som en konsekvens av tumorprogresjon [29, 30]. Noen bevis viste et bredt omfang av oksidativt stress i GC tilfeller hvis sammenlignet med friske individer, som demonstrert ved forhøyede nivåer av lipidperoksydasjon produkter og uttømming av enzymatiske og ikke-enzymatiske antioksidanter [31, 32]. I lys av alle disse funnene, resultatene av vår studie, som rapporterer en beskyttende effekt av apoE
ε2 allel på GC, kan forklares med de forbedrede antioksidantegenskaper av ε2 allelet sammenlignet med de ε3 eller ε4 alleler, og dette bevis kan være spesielt for GC, som patogenesen er sterkt påvirket av røykerelatert oksidativt stress [33]. Hvis vår modell gjelder, ville vi forvente en interaksjon mellom apoE
ε2 allel og røykestatus, kan imidlertid begrenset makt over vår interaksjonsanalyse har skjult det
. Konklusjoner
konklusjon, gir vår studie for første gang bevis på en mulig beskyttende effekt av ε2 allel mot GC. Videre studier er nødvendig for å bekrefte resultatene og for å finne ut om den beskyttende effekten er mediert gjennom senket kolesterolnivå eller bedre antioksidantegenskaper
. Metoder
Study befolkningen
Forsøkspersonene ble valgt i henhold til en case-control studere utforming som tidligere beskrevet [34-36]. Kort fortalt tilfellene var påfølgende primære adenokarsinom i ventrikkelen, med histologisk bekreftelse, som gjennomgikk en helbredende gastrektomi i "A. Gemelli" universitetssykehus i perioden 2002-2010. Kontrollene ble valgt ut fra kreftfrie pasienter, med et bredt spekter av diagnoser, innlagt på samme sykehus i løpet av den samme tidsperioden.
I nærmere detaljer, ca 50% av vår kontroll befolkningen består av blodgivere, mens den andre halvparten er laget av pasienter som gjennomgår kirurgiske inngrep som laparoskopisk kolecystektomi eller blindtarmbetennelse eller lyskebrokk og en mindre del av pasienter rammet av kroniske sykdommer som høyt blodtrykk eller kronisk obstruktiv lungesykdom (KOLS) gjennomgår periodisk kontroll.
Alle forsøkspersonene ble kaukasiere født i Italia. Studien utvalgsstørrelsen omfattet 156 tilfeller og 444 kontroller, med en oppslutning på 98% blant tilfellene og 93% blant kontroller. Ifølge Lauren klassifisering, de fleste (58,1%) av magekrefttilfeller var tarm [37]. Tumorene ble plassert i antrum (44,5%), i corpus (14,8%), i antrum /corpus (21,1%), i det cardia (3,1%), stubber (5,5%), i fundum (1,6% ), i det cardia /corpus (6,3%) og hele magen (3,1%). Basert på cytologiske og arkitektoniske atypisms, så vel som de Histo-patologiske rapporter [38], pasientenes tumor ble klassifisert i henhold til: 70,0% neppe differensiert (G3), 27,6% moderat differensierte (G2), 3,4% høydifferensiert (G1 ), mens 51,7% var arrangert i-II og 48,3% trinnvis III-IV.
skriftlig informert samtykke ble oppnådd fra alle forsøkspersonene, hvoretter hvert emne gitt en venøs blodprøve ble samlet i EDTA-belagte rør. Denne studien ble utført i henhold til Helsinkideklarasjonen og ble godkjent av etisk komité av Università Cattolica del Sacro Cuore.
Genotyping
DNA ble ekstrahert fra de perifere blod lymfocytter, og genotyping av apoE
ble utført bruker rflp (RFLP). I korthet ble 20 ng av genomisk DNA amplifisert ved å anvende oligonukleotidprimerer 5'-TCC AAG GAG CTG CAG GCG GCG CA-3 'og 5'-GCC CCG GCC TGG TAC ACT GCC A-3'. Reaksjoner ble denaturert i 3 minutter ved 95 ° C, etterfulgt av 35 to-trinns sykluser bestående av 10 sekunder ved 95 ° C og deretter 10 sekunder ved 66 ° C. Etter sykluser ble gjennomført en endelig forlengelse på 5 minutter ved 95 ° C ble utført. En 10 ul aliquot av hver RFLP-produkt ble spaltet med 5 U av Afl
III og en separat 10 ul aliquot ble spaltet med 5 U av Hae
II. Både apoE
ε2 og ApoE
ε3 alleler ble kuttet med Afl
III for å gi produkter av 50 og 168 bp, mens apoE
ε4 allelet forblir uklippet på 218 bp. Ved hjelp av Hae
II, både apoE
ε3and apoE ε4 alleler gi produkter av 23 og 195 bp, mens apoE
ε2 allele forblir uklippet på 218 bp. De seks mulige genotypene ble tildelt ved å analysere mønstre produsert av restriksjonskutting. Som for kvalitetskontroller, ble 5% av prøvene også sekvensert, med standard DNA-prøver for hver apoE
genotype sendt av Seripa et al. [39].
Datainnsamling
Saker og kontroller ble intervjuet av utdannede leger bruker en strukturert spørreskjema for å samle informasjon om demografiske data, røyking, drikking historie, kostvaner, fysisk aktivitet og familiens historie av kreft med en spesielt fokus på magekreft. Deltakerne ble bedt om å fokusere på det året før diagnose (for kontroller året før intervjuet dato) når du svarer på spørsmål om levevaner. Røykestatus ble kategorisert som aldri og stadig røykere (inkludert både nåværende og tidligere røykere). Pack-årene ble beregnet som år røykte multiplisert med dagens antall (eller forrige nummer, for de som hadde sluttet) sigaretter per dag delt 20.
Frukt og grønnsaker inntak ble kategorisert som høy hvis minst tre porsjoner frukt og grønnsaker ble konsumert daglig, mens grillet kjøtt inntak ble definert som lav dersom forbruket var mindre enn 4 ganger /måned. Familie historie av kreft referert til foreldre, søsken og avkom. Data om forrige Helicobacter pylori
infeksjon var bare tilgjengelig for mage krefttilfeller. Svarprosenten for å fullføre intervjuet var 92% for saker og 97% for kontroller, med unntak av data knyttet til grillet kjøtt inntak (ukjent i 10% av tilfellene, og 12,8% i kontrollgruppen) og familiens historie av kreft (ukjent i 10% av tilfellene, og 8% av kontrollene).
Statistisk analyse
forholdet mellom magekreft og mulige risikofaktorer ble målt ved hjelp av de justerte odds ratio (ORS) og deres 95% konfidensintervall (CI) som stammer fra logistikk regresjonsanalyse ved hjelp av Stata programvare (versjon 10.0). Mulige risikofaktorer ble ansett for å være confounders dersom tilsetningen av denne variabelen til modellen endret SV med 10% eller mer, og når en confounder i alle beregnede viktigste effekten ble identifisert, ble den holdt i alle modellene. Basert på disse kriteriene, vi kontrollerte for alder, kjønn, alkohol og grillet kjøtt forbruk, røyking (pakke-år) og familiehistorie med magekreft. En χ 2-test av Hardy-Weinberg likevekt (HWE) for de tre ApoE
alleler ble utført blant kontrollene. For å undersøke om effekten av de valgte polymorfismer ble endret av noen miljømessige eksponeringer, ble en lagdelt logistisk regresjonsanalyse utført, justering for confounders tidligere identifisert. Et gen-miljø interaksjon analyse ble utført ved å bruke dem som bærer homozygot villtypegenotype (ε3 /ε3 relatert til apoE
ε3 isoform) som referansegruppen. I denne analysen ble genotypene kategorisert som følger: nærvær av minst en apoE
ε2 allele eller nærvær av minst en apoE
ε4-allelet (genotypen ε2 /ε4 ble ikke inkludert i enten kategorien), gir . andre to APOE
isoformer (apo E
2 og apo E
4)
I denne analysen, alder ble kategorisert binomisk (< 60 og ≥ 60 år), røykestatus ble ansett som gang /aldri sigarett røykere, og alkoholforbruk som drinkers /ikke-drikkere (sistnevnte inkludert personer med alkoholinntaket var mindre enn 7 g /dag). For å teste for interaksjon mellom to eksponeringsvariabler, ble sannsynligheten ratio test brukt, med enkeltpersoner homozygote for villtypegenotype (ε3 /ε3) og ikke utsettes for variablene av interesse brukt som referansegruppen.
Totalt overlevelseskurver ble beregnet av Kaplan-Meier produkt grense metoden fra tidspunktet for diagnosen inntil døden. Dersom en pasient ikke var døde, overlevelse ble sensurert ved tidspunktet for den siste besøket. Den log rank test ble brukt til å vurdere forskjeller mellom undergrupper. Risikoen for å dø i forbindelse med ApoE isoformer ble estimert ved Cox proporsjonal farer modell. Hazard ratio (HR) ble justert for alder, kjønn, og stadion, med villtypegenotype (ε3 /ε3) som referansegruppen. I tillegg analyser ble stratifisert etter kreft histotype (intestinal /diffus)
kilde til støtte
Ingen økonomisk støtte til å bli erklært
Forkortelser
OR:..
Odds ratio

• Immunhistokjemisk konsistens mellom primærsvulster og lymfeknutemetastaser av mage nevroendokrine carcinoma
• Endringer av E-cadherin og β-catenin i magekreft