Prípadová-control štúdie o vplyve apolipoproteínu E genotypy na žalúdočné rizika rakoviny a progresii

Prípadová kontrolná štúdia o účinku apolipoproteín E genotypov na žalúdočné rizika rakoviny a progresii
abstraktné
pozadia
apolipoproteínu E (ApoE) je multifunkčný proteín zohráva aj kľúčovú úlohu v metabolizme cholesterolu a triglyceridov a opravy a zápalu tkaniva. ApoE génu
(19q13.2) má tri hlavné izoformy kódované ε2, ε3 a ε4 alely s alelou ε4 spojené s hypercholesterolémiou a ε2 alely s opačným účinkom. Inverzný vzťah medzi hladinou cholesterolu a rakovina žalúdka (GC) už bolo skôr oznámené, hoci vzťah medzi ApoE
genotypov a GC nebola doteraz preskúmané.
Metódy
sto päťdesiat šesť rakoviny žalúdka kufre a 444 kontrol v nemocniciach boli genotyp pre apoE polymorfizmus (ε2, ε3, ε4 alel). Vzťah medzi GC a domnelých rizikových faktorov bola meraná pomocou upravenej miery pravdepodobnosti (ORS) a ich 95% intervaly spoľahlivosti (CIS) z logistickej regresnej analýzy. Analýza interakcie medzi génmi a prostredie bolo vykonané. Účinok genotypov apoE na prežitie z GC bola preskúmaná analýzy Kaplan-Meiera a Cox proporcionálny nebezpečenstvo regresie modelu.
Výsledky
predmetov nositeliek aspoň jednej alely ApoE
ε2 mať významný 60% pokles GC riziko (OR = 0,40, 95% CI: 0,19-0,84) v porovnaní s ε3 homozygotes. Žiadna významná interakcia sa objavili medzi ε4 alebo ε2 alely a expozície životného prostredia, ani ε2 alebo ε4 alely ovplyvnilo medián času prežívania a a to aj po korekcii na vek, pohlavie a štadióne.
Závery
našej štúdii správy za prvýkrát ochranný účinok proti ε2 alely GC, ktoré by mohli byť čiastočne pripísať na vrub vyššej antioxidačné vlastnosti ε2 v porovnaní s ε3 alebo ε4 alel. Vzhľadom k veľkosti vzorky tejto štúdie je, sú potrebné ďalšie štúdie na potvrdenie naše zistenia.
Kľúčové
Karcinóm žalúdka apolipoproteínu E Genetická epidemiológie polymorfizmus Gene-environment interakcie Pozadie
apolipoproteínu E (ApoE) je malý glykoproteín, ktorý hrá významnú role v krvnej klírensu cholesterolu častíc bohatých, známy ako zvyškové lipoproteíny [1]. Vedľa jeho dobre uznávané úlohu v metabolizme lipidov, ApoE bolo preukázané, že sa podieľa na rade patofyziologických procesov, vrátane antioxidant a imunitný aktivity, rovnako ako modulačné účinok na angiogenézu, rast nádorových buniek a metastáz indukciu [2]. Štruktúrny gén (19q13.2) pre apoE
je polymorfný dvoma jednonukleotidových polymorfizmov (Snps) v kódujúci oblasti, čo vedie troch rôznych alel (ε2, ε3, ε4) a šiestich ApoE
genotypov (tri homozygoti ε4 /ε4, ε3 /ε3 a ε2 /ε2, a tri heterozygoti ε4 /ε3, ε3 /ε2, ε4 /ε2), každý ukazujúce rôzne schopnosti receptorov viažucich [3, 4]. Meta-analýza vykázala takmer lineárny vzťah medzi ApoE
genotypy a hladiny celkového a LDL cholesterolu v sére (LDL-C), keď sa šesť genotypov objednaných takto: ε2 /ε2, ε2 /ε3, ε2 /ε4, ε3 /ε3, ε3 /ε4, ε4 /ε4 [5]. Všeobecne platí, že v porovnaní s jednotlivcami s ε3 alelou, hladiny celkového a LDL-C, majú tendenciu byť nižšie, pre tých, ktorí s ε2 alely a vyššie pre ε4 dopravcom [6]. V posledných dvoch desaťročiach, prierezové a prospektívnej štúdie uvádzajú, že nízke hladiny cholesterolu v sére sú spojené s vyšším ako kardiovaskulárneho rizika, najmä riziko rakoviny [7-10], a tým, pacienti s hladinami celkového cholesterolu v sére je nízka sú s väčšou pravdepodobnosťou trpí rakovinou. K dnešnému dňu, presný dôvod pre toto zistenie zostáva stále nejasná. Rôzne vysvetlenie môže byť podávaný ako: (i) toto spojenie by teoreticky mohlo odrážať priamu príčinnú úlohu cholesterolu v rakoviny etiológie, alebo to byť spôsobené (ii) niektorých ďalších faktorov, ktoré spôsobujú ako nízku hladinu cholesterolu a rakovinu, alebo (iii) na " reverznej príčinu ", ako nízke hladiny cholesterolu v krvi by mohla byť jednoducho dôsledkom rakoviny skôr než príčiny [11].
Aby bolo možné plne odpovedať na otázku, či existuje príčinná súvislosť medzi nízkou hladinou cholesterolu a rakoviny, alternatívne epidemiologického prístupu s názvom" Mendelian náhodnosť "môžu byť použité na prekonanie problému obrátenej kauzality a mätúce. Podľa tohto prístupu, genetické variácie (napr.,
ApoE), ktorý slúži ako robustný proxy pre ekologicky modifikovateľné expozície (napr. Sérum hladiny cholesterolu), môžu byť použité tak, aby kauzálne závery o ochorenie [12]. Benn et al. [13] v poslednej dobe ukázali, že nízke hladiny LDL-C bola robustne spojené s rakovinou vo veľkej dánskej skupinové štúdie, zatiaľ čo zníženie LDL spôsobené SNP vrátane apo E
, nebol. Prijatím prístupu mendelistická randomizáciou Benn k záveru, že jeho výsledky sú v súlade s tými, sa vynoril z kohorty starších pacientov liečených pravastatínom [14] a pred rizikom aterosklerózy u komunitách kohorta štúdie [15], to všetko naznačuje nízku hladinu LDL sú pravdepodobne dôsledkom na predklinické fáze rakoviny a samy o sebe
nespôsobujú rakovinu.
úlohu ApoE
genotypov na rakovinu žalúdka (GC), etiológie nie je doteraz exlpored, ako Benn et al. [13] považované všetky gastrointestinálne rakovinu so žiadnym osobitným zameraním na GC. K dnešnému dňu, štyri z kohorty štúdie [10, 16-18] preskúmal vzťah medzi sérového cholesterolu a vývoj GC. Medzi nimi dvaja japonskí kohortných štúdií [10, 18] a švédska štúdie [16] uvádzajú, že nízka hladina cholesterolu v sére sú nezávislé rizikové faktory vzniku rakoviny žalúdka, najmä črevnej histotype. Žiadny vzťah, však, bola hlásená vo veľkej fínskej skupinovej štúdie [17]. Pretože otázka, či hypocholesterolemia je predisponujúce faktor pre GC alebo predklinické fáze GC nebol úplne vyriešený, si kladie za cieľ naše nemocnice na báze case-control štúdie prekonať tento problém priamo pri pohľade na vzťah medzi ApoE genotypy a
GC rovnako ako ich interakcie s potenciálnymi modifikátory účinok.
Výsledky
Všeobecné charakteristiky študovanej populácie, vrátane 156 prípadov GC a 444 kontrol sú uvedené v tabuľke 1. konzumácia alkoholu bola spojená so zvýšeným rizikom GC s najvzdialenejších 1,84 (95% CI = 10.1.-7.03.) a 3,29 (95% CI = 1,36 - 7,98) za miernych a silných pijanov, resp. Bola zistená medzi jednotlivcami fajčenia viac ako 25 balení rokov -: od A takmer zdvojnásobila riziko GC (3,60 1,06 OR = 1,95, 95% CI). Okrem toho, v rodinnej anamnéze rakoviny žalúdka za následok, ktoré majú byť spojené so zvýšeným rizikom GC (OR = 3,14, 95% CI: 1,17 - 8,44; tabuľka 1). Tabuľka 2 ukazuje rozdelenie šiestich apo
E genotypov medzi prípadoch GC a kontrol s tým, že ε3 /ε2 genotyp je menej často zastúpené v prípadoch (9,87%) než u kontroly (15,67%). Tabuľka 1 Kurzy pomeroch (95 % CI) pre rakovinu žalúdka podľa vybraných veličín a ich rozdelenie frekvencií medzi 156 prípadov rakoviny žalúdka a 444 kontrol
prípady
Controls
OR (95% CI) †

n (%)
n (%)
Vek (priemer ± SD)
67,05 ± 11,33
59,04 ± 16,00
mužské pohlavie
82 (53,2)
261 (58,8)
0,50 (0.30-0.83)
alkoholu pijani
0-6 g /deň
60 (40,5)
251 (57,6)
1 *
7-29 g /deň
71 (48,0)
163 (37,4)
1,84 (1,10 3,07) Hotel > = 30 g /deň
17 (11,5)
22 (5,0)
3.29 (1.36- 7.98)
fajčenie
Nikdy
78 (50,7)
238 (54,2)
1 *
Ever
76 (49,3)
201 (45,8)
1.51 (0.94- 2.45)
zbaliť rokov fajčenia NETHRY.cz 0
74 (51,7)
245 (57,0)
1 *
1-25
31 (21,7)
111 (25,8)
1,40 (0.78- 2.50) Hotel > 25
38 (26.6)
74 (17,2)
1,95 (1.06- 3.60)
ovocia a zeleniny nasávaného
High ‡
41 (27,5)
116 (27,2)
1 *
Low
108 (72,5)
310 (72,8)
1,18 (0.70- 1,98)
Grilované mäso
Low ^
106 (75,7)
314 (81,1 )
1 *
High
34 (24,3)
73 (18,9)
1,25 (0.72- 2,15)
Pohybová aktivita
Akékoľvek
29 (18,6)
93 (20,9)
1 *
Žiadny
127 (81,4)
351 (79,1)
0,81 (0,45 1,45)
rodinná história rakoviny
Nie
87 (62,2)
291 (71,2)
1 *
rodinná história rakoviny žalúdka
10 (7,1)
14 (3.4)
3,14 (1.17- 8.44)
v rodinnej anamnéze rakoviny iného
43 (30,7)
104 (25,4)
1.09 (0.66- 1.81)
ApoE frekvencia alely
ε3
130 (85,5)
322 (80,1)
ε2
8 (5,3)
39 (9,7)
ε4
14 (9,2)
41 (10,2)
† alebo upravovať podľa veku, pohlavia , konzumácia alkoholu (ako kontinuálne premenná), packyears fajčenie, grilované spotrebu mäsa a histórii Family rakoviny.
* referencie kategórie.
‡ aspoň tri porcie ovocia a zeleniny za deň.
^ menej ako štyrikrát /mesiac.
Tabuľka 2 Distribúcia ApoE polymorfizmus medzi žalúdočných prípadov rakoviny a kontrol
púzdra ‡
Controls ^
Všetky prípady
črevnej (n = 79)
difúzna (n = 57)
n (%)
n (%)
OR (95% CI) †
OR (95% CI) †
OR (95% CI) †
ε3 /ε3
109 (71,71)
253 (62,94)
1 * 1 *
1 *
ε3 /ε2
15 (9,87)
63 (15,67)
0,43 (0,21 -0.91)
0,34 (0,13 - 0,92)
0,57 (0,23-1,40)
ε3 /ε4
27 (17,76)
75 (18,66)
0,70 (0,37 - 1,30)
0,75 (0,35 - 1,60)
0,64 (0,27-1,47)
ε2 /ε2
0 (0.00)
5 (1,24)
NC
NC
NC
ε2 /ε4
1 (0.66)
5 (1,24)
1,25 (0,10 - 15,10)
2,54 (0,21 - 31,17)
NC
ε4 /ε4
0 (0.00)
1 (0.25)
NC
NC
NC
ε3 /ε2 alebo ε2 /ε2
15 (12,10)
68 (21,18)
0,40 (0,19 - 0,84)
0,31 (0,11 - 0,83)
0,53 (0,21-1,30)
ε3 /ε4 alebo ε4 /ε4
27 (19,85)
76 (23,10)
0,68 (0,36 - 1,26)
0,71 (0,34-1,53)
0,62 (0,27 - 1,43).
‡ apolipoproteín genotyp bola meraná v 152 prípadoch
^ apolipoproteín genotyp bola meraná v 402 kontrol
† OR upravená podľa veku ,. ., pohlavie, konzumácia alkoholu (ako kontinuálne premenná), packyears fajčenie, grilované spotreba mäsa a rodinná anamnéza rakoviny žalúdka
* Referenčné kategórie
NC: nie je zistiteľné kvôli niekoľkých mnohých hodnôt
frekvencie apoE.
genotypy rešpektoval Hardy-Weinberg rovnováhy (HWE) v kontrolnej skupine (p-hodnota
> 0,05, dáta nie sú ukázaná). Z viacnásobnej analýzy jedinci nesúce aspoň jednu ApoE
ε2 alely s významným 60% zníženie rizika GC (OR = 0,40, 95% CI: 0,19 - 0,84), v porovnaní s tými, homozygotnou pre divoký typ (ε3 /ε3) (tabuľka 2). Keď boli výsledky rozložená podľa histológiu je významná súvislosť medzi ApoE
ε2 alel nosičov a rakoviny žalúdka sa zdá byť obmedzená na črevnú typu, s OR 0,31 (95% CI: 0,11 až 0,83, tabuľka 2). kontroly kvality preukázali 100% zhodu medzi metódou mnohotvárnosť dĺžky fragmentu (RFLP) a DNA sekvenovania.
Výsledky analýzy interakcie medzi génmi a prostredím sú uvedené v tabuľke 3. žiadna štatisticky významná interakcia sa objavil medzi ε4 alebo ε2 alely (p
hodnotu pre interakciu > 0,05), pohlavia, veku, konzumácia alkoholu alebo ovocím a zeleninou intake.Table 3 interakcia medzi apoE genotypy a vybrané demografické a životného štýlu premenných na GC rizikovejších
premenné
Cases
Ovládací
Akékoľvek E2
Puzdrá
Controls
Akékoľvek e4

OR (95% CI) †
OR (95% CI) †
rodovej rovnosti
Žena, e3 /e3
51 ( 34,69)
96 (65,31)
1 *
51 (34,69)
96 (65,31)
1 *
Žena, variant
8 (27,59)
21 (72,41)
0,58 (0,20-1,65)
12 (24,00)
38 (76.00)
0,55 (0,23 - 1,32)
Muž, e3 /e3
57 (26,64)
157 (73,36)
0,48 (0,27 - 0,88)
57 (26,64)
157 (73.36)
0,49 (0,27 - 0,89)
Muž, variant
7 (12,96)
47 (87,04)
0,49 (0,11-2,18)
14 (26,92)
38 (73.08)
1,52 (0,44 - 5,27)
P hodnota pre interakcie °
0,347 0,660
Age Hotel < 60 rokov, e3 /e3
25 (17,73)
116 (82,27)
1 *
25 (17,73)
116 (82,27)
1 * Hotel < 60 rokov, variant
4 (12,50)
28 (87,50)
0,35 (0,07-1,68 )
7 (21,21)
26 (78.79)
0,70 (0,18 - 2,66)
≥ 60 rokov, E3 /e3
84 (38,01)
137 (61,99 )
2,85 (1,53-5,28)
84 (38,01)
137 (61,99)
2,84 (1,54-5,26)
≥ 60 rokov, variant
11 (21,57)
40 (78,43)
1,24 (0,21-7,26)
20 (28,57)
50 (71.43)
0,97 (0,21 - 4,36)
hodnota p pre interakciu
0,807 0,964
pitie alkoholu
Nikdy, e3 /e3
45 (24,06)
142 (75,94)
1 *
45 (24,06)
142 (75,94)
1 *
Nikdy variant
5 (12,50)
35 (87,50)
0,29 (0,08-1,04)
12 (18,18)
54 ( 81,82)
0,62 (0,28-1,37)
Ever, e3 /e3
64 (36,57)
111 (63,43)
1,59 (0,88-2,86)
64 ( 36,57)
111 (63,43)
1,46 (0,81-2,62)
Ever, variant
10 (23,26)
33 (76,74)
1,78 (0,37-8,50)
15 (40,54)
22 (59.46)
1,28 (0,35 - 4,66)
hodnota p pre interakciu
0,468 0,707
Smoking status
Nikdy, e3 /e3
54 (29,03)
132 (70,97)
1 *
54 (29,03)
132 (70,97)
1 *
Nikdy, variant
8 (20,51)
31 (79,49)
0,48 (0,18-1,28)
13 (20,00)
52 (80.00)
0,53 (0,23 - 1,23)
Ever, e3 /e3
54 (31,40)
118 (68,60)
1,41 (0,80-2,50)
54 (31.40)
118 (68.60)
1,39 (0,79 - 2,45 )
Ever, variant
7 (16,28)
36 (83,72)
0,68 (0,15-2,98)
13 (36,11)
23 (63.89)
1,98 (0,59 - 6,73) P hodnota
pre interakciu
0,609 0,271
ovocia a zeleniny sacích
Low, e3 /e3
28 (29,47)
67 (70,53)
1 *
28 (29,47)
67 (70,53)
1 *
Low, variant
2 (9.09)
20 (90.91)
0,14 (0,02 - 0,87)
9 (32,14)
19 (67,86)
0,84 (0,28 - 2,49)
Vysoká, E3 /E3
78 (31,08)
173 (68,92)
1,17 (0,61-2,23)
78 (31,08)
173 (68,92)
1,12 (0,59-2,13) ​​
High, variant
11 (19,30)
46 (80,70)
2,83 (0,38 - 21,05)
16 (22,86)
54 (77.14)
0,62 (0,16 - 2,37)
hodnota p pre interakciu
0,309 0,487

† OR upravená podľa veku, pohlavia, konzumácia alkoholu (ako kontinuálne premenná), packyears fajčenie, grilované spotreba mäsa a história familia na rakovinu žalúdka.
* referenčné kategórii.
° pomerom pravdepodobnosť testu.
Stredná doba prežitia od gastrektómii bol 19 mesiacov so žiadnymi štatistickými významných rozdielov pre ApoE
ε2 alebo ε4 alel nosičov (p
hodnota log-rank testom > 0,05), aj keď sa analýza obmedzená na 1 rok a 2 roky po chirurgickom zákroku (dáta nie sú uvedené). Cox regresná analýza nepreukázala žiadny významný rozdiel v súlade s apoE
po úprave vzhľadom na vek, pohlavie a štadióne, a to aj potom, čo stratifikácia rakovinou histotype.
Diskusia
našom prípade kontrolné štúdie 156 prípadov rakoviny žalúdka a 444 nemocnice založené kontroly hodnotená prvýkrát účinku ApoE
genotypov a ich interakcie s vybranými demografické a faktory životného štýlu na riziko rakoviny žalúdka u talianskeho obyvateľstva. Podľa našich výsledkov, ApoE
ε2 alela je spojená s 60% štatisticky významné zníženie rizika pre GC v porovnaní s divokým typom ε3 alely. Tento ochranný účinok bol obzvlášť silný pre črevnú histotype. Nepodarilo sa nám však, aby zistil významné interakcie medzi ApoE
alel a faktormi životného štýlu. Navyše, apoE
genotypy nezdá sa, že vplyv na dobu prežitia po chirurgickom zákroku, a to aj keď sa analýza obmedzená na špecifické nádorové histotypes.
Pred interpretácii našich výsledkov, niektoré obmedzenia štúdie by mali byť vzaté do úvahy. Po prvé, na základe výskytu ApoE
alel v našej kontrolnej populácií, táto štúdia má priori
90% sily objaviť OR 0,40 za účinku ApoE
ε2 alely (na 5% hladina významnosti). Veľkosť vzorky Táto štúdia sa obmedzuje možnosť zisťovať štatisticky významné gén-prostredie interakcie však musíme zvýšiť veľkosť vzorky s cieľom potvrdiť naše výsledky. Po druhé, údaje o hladiny cholesterolu v sére nie sú k dispozícii v našej populácii, a to aj keď ich užitočnosť by bol obmedzený vzhľadom k tomu, tieto hodnoty sú ovplyvnené rakovinou sám.
Účinku ApoE
genotypov bolo skôr skúmané vo vzťahu k prsníka, hrubého čreva, žlčových ciest, prostaty, rakoviny hlavy a krku, a hematologické malignity [19-24], protichodné výsledky. Nedávno publikovaná Mendelian randomizácie štúdie sa zaoberala nevyriešený otázku o kauzálny úlohu cholesterolu v rakoviny etiológie tým, že skúma, či niektoré SNP vrátane apoE
, všetky spojené s celoživotnou zníženie plazmatických LDL-C, je v príčinnej súvislosti s zvýšené riziko výskytu rakoviny u dve veľké dánske všeobecné populačné štúdie [13]. Výsledky ukazujú, inverzný vzťah medzi výskytom rakoviny a úmrtnosti a cholesterolu, zatiaľ čo žiadny účinok sa preukázal u ApoE
alel. Aj s určitými obmedzeniami na zvolenom kohorty, autori k záveru, že existuje podstatný nedostatok príčinnej účinku cholesterolu na riziko rakoviny, vrátane rakoviny zažívacieho ústrojenstva. V dôsledku toho je zjavný rozpor medzi výsledkov týkajúcich plazmatické hladiny cholesterolu a riziko rakoviny vzhľadom na apo E
by mohli naznačovať predklinické fáze rakoviny zahŕňajúce zvýšený príjem cholesterolu z krvi pre rast a proliferáciu buniek, čím sa znižuje cholesterolémie pred klinickou diagnózou rakoviny.
Čo sa týka rakoviny žalúdka, dve japonské štúdie kohorty [10, 18] a švédskej kohortnú štúdiu [16] vykázala silný inverzný vzťah medzi hladinou sérového cholesterolu a rizikom vzniku rakoviny žalúdka. Japonská štúdie však zistené, že združenie oveľa menej pevnejšie po vylúčení skorých 3 roky prípadoch incidentov a pokročilých prípadoch, čo naznačuje vývoj rakoviny žalúdka samo o sebe má tendenciu znižovať celkovú hladinu cholesterolu v krvi. Na prekonanie problémov súvisiacich s reverznej príčinu alebo mätúce faktory životného štýlu, sme sa rozhodli objasniť úlohu hladiny cholesterolu o riziku GC pomocou mendelistická randomizácie prístupu, a to tým, že študuje priamo účinku ApoE
genotypov na veľké série talianskych prípadov GC a ovládacie prvky. Naše výsledky ukazujú štatisticky významné 60% zníženie rizika spojeného s GC ε2 alely.
Vzhľadom k tomu, ε2 dopravcovia majú nižšie sérové ​​cholesterolémie ako non-ε2 nosiča, nášho zistenia je v rozpore s už bolo skôr oznámené zistenie, že hladina cholesterolu v sére je nízka zvyšujú riziko GC [10, 16, 18]. ApoE má však celý rad ďalších funkcií vedľa jeho známym úlohu v metabolizme lipidov, ktoré sú potenciálne podieľajú na riziko vzniku rakoviny, ako sa podieľa na oprave tkaniva, zápalové a imunitné odpovede, rast buniek a angiogenézy [2], a ukazuje, antioxidant vlastnosti [25]. Dôležitosti, ApoE proteín má určité antioxidačné vlastnosti, so znižujúcim sa antioxidačnú aktivitu v poradí ε2 > ε3 > ε4 alely [25]. Aj v prípade, že molekulárne mechanizmy zodpovedné za antioxidačné vlastnosti apoE
nie je doteraz vyjasnené, rad štúdií skúmalo mechanizmy, ktoré by mohli ApoE
genotypy majú vplyv na mediátorov stavu závislých na oxidačný alebo biomarkery oxidačného stresu [26 -28]. ApoE
ε2 nosič fajčenia jednotlivcov, ktorí sú vystavení nikotínu, ktoré sú významným zdrojom oxidačného stresu, majú takmer o 30% vyššia celková antioxidačný stav v porovnaní s ApoE
ε3 nosičov, merané ako schopnosť inhibovať peroxidázu sprostredkovanú tvorbu z 2,2-AZIN-bis-3-ethylbensthiazoline-6-sulfónovej kyseliny (ABTS +) radikál, pričom ApoE
ε4 predmety vykazujú 30% zvýšenie oxidované LDL [26].
Oxidačný stres je daný nerovnováhou medzi zvýšenú produkciu reaktívnych foriem kyslíka a významné zníženie schopnosti antioxidačných funkcií. Výroba peroxidy a voľné radikály spojené so zmenami v normálnom redox stave tkanív môže vyvolať toxické účinky, vrátane poškodenia oxidačným DNA, ktoré spolu s hypoxiou a acidózou, môže byť značne podieľa na patogenéze GC, ako to môže byť považovaný za príčinu za rovnako ako v dôsledku progresie nádoru [29, 30]. Niektoré dôkazy ukázali, široký rozsah oxidačného stresu v prípadoch, GC v porovnaní so zdravými jedincami, ako bolo preukázané zvýšené hladiny peroxidácie lipidov produktov a vyčerpania enzymatických a neenzymatickej antioxidanty [31, 32]. S ohľadom na všetky tieto poznatky, výsledky našej štúdie, ktorá vykazuje ochranný účinok ApoE
ε2 alely na GC, možno vysvetliť zlepšeným antioxidačných vlastností ε2 alely v porovnaní s ε3 alebo ε4 alel, a to dôkaz, môže byť platí najmä pre GC, ktorých patogenéza je silne ovplyvnená súvisiacich s fajčením oxidačného stresu [33]. Ak náš model platí, očakávali by sme, že dochádza k interakcii medzi ApoE
ε2 alely a fajčenie stave, avšak s obmedzeným výkonom našej analýzy interakcie môže ju zakrytý.
Závery
Na záver, naše štúdie stanovuje, že prvýkrát dôkaz možného ochranného účinku proti ε2 alely GC. Ďalšie štúdie sa vyžadujú na potvrdenie našich výsledkov a zistiť, či je ochranný efekt sprostredkované zníženou hladinou cholesterolu alebo lepšie antioxidačnými vlastnosťami.
Metódy
populácii
boli vybrané študijné predmety podľa case-control plán štúdie ako bolo opísané skôr [34 až 36]. Stručne povedané, prípady boli po sebe idúcich primárnej pacienti adenokarcinómom žalúdka s histologického overenia, ktorá podstúpila liečebný gastrektómii v "A. Gemelli" fakultnej nemocnice v období 2002-2010. Ovládacie prvky boli vybrané z pacientov s rakovinou bez, s širokú škálu diagnóz, prijatý do rovnakej nemocnici v priebehu totožné časové obdobie.
Bližšie detaily, asi 50% nášho kontrolnej populácií je vyrobená z darcov krvi, zatiaľ čo druhá polovica je vyrobená z pacientov podstupujúcich chirurgický zákrok ako laparoskopickej cholecystektómiu alebo zápal slepého čreva alebo trieslovinové prietrže a menšiu časť chorých s chronickými chorobami, ako je hypertenzia alebo chronickej obštrukčnej choroby pľúc (CHOCHP), ktorí podstúpili Pravidelná kontrola.
Všetci pacienti boli belosi narodil v roku Talianska. Veľkosť vzorky Štúdia zahŕňala 156 prípadov a 444 kontrol, pričom miera participácie 98% u prípadov a 93% u kontroly. Podľa klasifikácie Laurena, väčšina (58,1%), žalúdočných prípadov rakoviny boli črevné [37]. Nádory boli umiestnené v dutine (44,5%), v korpuse (14,8%), v dutine /korpusu (21,1%), v kardio (3,1%), výstupky (5,5%), v fundum (1,6% ), v kardio /korpusu (6,3%) a celý žalúdka (3,1%). na cytologické a architektonických atypisms, ako aj histo-patologických správach založené [38], nádory pacientov preto boli klasifikované: 70,0% sotva rozlíšené (G3), 27,6% stredne diferencovaného (G2), 3,4% dobre diferencovaný (G1 ), zatiaľ čo 51,7% bol predstavený i-II a 48,3% predstavený III-IV.
písomný informovaný súhlas bol získaný od všetkých študovaných subjektov, po ktorom každý subjekt poskytla vzorku venóznej krvi, ktorá bola odobratá do EDTA skúmaviek povlakom. Táto štúdia bola vykonaná v súlade s Helsinskou deklaráciou a bola schválená etickou komisiou v Katolícka univerzita Najsvätejšieho Srdca.
Genotypizácia
DNA bola extrahovaná z lymfocytov periférnej krvi, a bola vykonaná genotypizácia apoE
použitím mnohotvárnosť dĺžky fragmentu (RFLP). V stručnosti, 20 ng genómovej DNA amplifikovaná s použitím oligonukleotidových primérov 5'-TCC AAG GAG CTG CAG GCG GCG CA-3 'a 5'-GCC CCG GCC TGG TAC ACT GCC A-3'. Reakcie boli denaturované počas 3 minút pri teplote 95 ° C a potom 35 dvojstupňových cyklov pozostávajúcich z 10 sekúnd pri 95 ° C, potom 10 sekúnd pri teplote 66 ° C. Po cykloch boli dokončené konečné predĺženie 5 minút pri teplote 95 ° C, bola vykonaná. 10 ul alikvotná časť každého RFLP produkt bol štiepený s 5 U AFL
III a samostatné 10 ul alikvotnej časti sa štiepi 5 U HAE
II. Obe ApoE
ε2 a apoE
ε3 alely boli znížené s AFL
III za vzniku produktov 50 a 168 bp, zatiaľ čo ApoE
ε4 alela stále nezostrihané 218 bp. Použitie Hae
II, a to ako apoE
ε3and apoE ε4 alely získanie produktov 23 a 195 bp, zatiaľ čo ApoE
ε2 alela stále nezostrihané 218 bp. Šesť možné genotypy boli priradené na základe analýzy vzory produkovanej štiepenia štiepenie. Čo sa týka kontroly kvality, 5% vzoriek boli tiež sekvenované, so štandardnými vzorkami DNA pre každý ApoE genotypu
zaslaného Seripa et al. [39].
Data Collection
Prípady a kontroly boli dopytované vyškolení lekári pomocou štruktúrovaného dotazníka pre zber informácií o demografických údajov, fajčenie cigariet, pitie histórie, stravovacie návyky, fyzická aktivita a rodinnou anamnézou rakoviny majúcich osobitný dôraz na rakovinu žalúdka. Účastníci boli požiadaní, aby sa zamerali na poslednom roku pred diagnostiku (pre kontrolu rok pred dátumom pohovoru) pri odpovedi na otázky týkajúce sa životného štýlu. Fajčiari bola kvalifikovaná ako nikdy a niekedy-fajčiari (vrátane súčasných i bývalých fajčiarov). Balenie rokov boli vypočítané ako roky údenín vynásobený aktuálnym číslom (alebo predchádzajúce číslo, pre tých, ktorí sa prestať) vyfajčených cigariet za deň deleno 20.
Ovocie a zelenina príjmu bola kvalifikovaná ako vysoké, ak aspoň troma dávkami ovocie a zelenina boli spotrebované denne, zatiaľ čo grilované mäso príjem bol definovaný ako nízka, ak je spotreba bola menšia ako 4-násobok /mesiac. Rodinná anamnéza rakoviny uvedeného rodičia, súrodenci a potomkov. Údaje týkajúce sa predchádzajúceho Helicobacter pylori
infekcii boli k dispozícii len pre žalúdočné prípadov rakoviny. Miera odpovedí na dokončenie rozhovor bol 92% prípadov a 97% u kontroly, s výnimkou údajov súvisiacich s grilovaným príjem mäsa (v 10% prípadov a 12,8% kontrol neznáme) a rodinná história rakoviny (neznáme 10% prípadov a 8% kontrol).
Štatistická analýza
vzťah medzi rakovinou žalúdka a domnelých rizikovými faktormi boli merané pomocou upravenej miery pravdepodobnosti (ORS) a ich 95% interval spoľahlivosti (CI) odvodené od logistiky regresná analýza pomocou softvéru Stata (verzia 10.0). Možné rizikové faktory boli považované za zmätočné v prípade, že pridanie tejto premennej do modelu zmenilo, alebo 10% alebo viac, a akonáhle bol identifikovaný mätúce faktor každej predpokladanej hlavný účinok, bola udržiavaná vo všetkých modeloch. Na základe týchto kritérií, kontrolovanej by sme vzhľadom na vek, pohlavie, alkohol a grilovaným spotreby mäsa, fajčenie cigariet (PACK-rokov) a rodinnou históriou rakoviny žalúdka. Χ 2-test Hardy-Weinberg rovnováhy (HWE) Pri všetkých troch ApoE
alel bol vykonaný medzi kontrolami. S cieľom preveriť, či je účinok vybraných polymorfizmov bol upravený niektorými expozíciami v oblasti životného prostredia, bola vykonaná vrstevnatý logistická regresná analýza, úprave o confounders skôr identifikovaných. Analýza interakcie gén-prostredie sa vykonáva za použitia tých, nesúci homozygotná genotyp divokého typu (ε3 /ε3 súvisiace s ApoE izoformy
ε3) ako referenčná skupina. V tejto analýze genotypy boli rozdelené do nasledujúcich kategórií: prítomnosť aspoň jedného ApoE
ε2 alely alebo za prítomnosti aspoň jednej ApoE
ε4 alely (genotyp ε2 /ε4 nebol zaradený do jednej kategórie), poskytujúce . ďalšie dva ApoE izoformy
(apo E
2 a apo E
4)
v tejto analýze, vek bol roztriedený binomicky (< 60 a vo veku 60 rokov), fajčenie stav bol považovaný za nikdy /nikdy fajčiarov cigariet a konzumácia alkoholu as pijanov /abstinenti (druhá vrátane fyzických osôb, ktorých príjem alkoholu bola menej ako 7 g /deň). Za účelom testovania interakcie medzi dvoma premennými expozície, test pomer pravdepodobnosti bola použitá, s jedincami homozygotnou pre divoký typ (genotyp ε3 /ε3) a nie je vystavené skúmaných premenných použitých ako referenčná skupina.
Celková krivky prežitia boli vypočítané podľa Kaplan-Meiera limitná produkt metódy od dátumu stanovenia diagnózy až do smrti. Ak pacient nebol mŕtvy, prežitie bol cenzurovaný pri poslednej návšteve. Log rank test bol použitý na posúdenie rozdielov medzi podskupín. Riziko úmrtí súvisiacich s ApoE izoforiem bola odhadnutá Coxovho proporcionálneho modelu nebezpečenstvo. pomer rizika (HR) boli upravené pre vek, pohlavie a štadión s divokým typom genotypu (ε3 /ε3) ako referenčnej skupiny. Okrem toho analýzy boli rozdelené podľa rakoviny histotype (črevné /difúzny)
zdrojom podpory
Žiadne finančná podpora musí byť deklarované
Skratky
OR: ..
Pomer šancí

• Imunohistochemické súlad medzi primárnych nádorov a metastáz lymfatických uzlín žalúdočné karcinóm neuroendokrinný
• Zmeny e-cadherinu a beta-kateninu v žalúdku cancer