Eine Fall-Kontroll-Studie über die Wirkung von Apolipoprotein E Genotypen auf die Magenkrebsrisiko und progression

Eine Fall-Kontroll-Studie über die Wirkung von Apolipoprotein E Genotypen auf die Magenkrebsrisiko und Progression
Zusammenfassung
Hintergrund
Apolipoprotein E ( ApoE) ist ein multifunktionales Protein sowohl eine zentrale Rolle im Metabolismus von Cholesterin und Triglyceriden, und in der Gewebereparatur und Entzündungen spielen. Die ApoE
Gen (19q13.2) hat drei große Isoformen von ε2 codiert, ε3 und ε4 Allele mit dem ε4 Allel mit Hypercholesterinämie und ε2-Allel mit dem entgegengesetzten Effekt verbunden. Eine inverse Beziehung zwischen den Cholesterinspiegel und Magenkrebs (GC), die zuvor berichtet worden ist, obwohl die Beziehung zwischen apoE
Genotypen und GC wurde bisher nicht untersucht.
Methods
Einhundert sechsundfünfzig Magenkrebs Fälle und 444 Krankenhaus Kontrollen wurden für apoE-Polymorphismus (ε2, ε3, ε4 Allele) genotypisiert. Die Beziehung zwischen GC und mutmaßliche Risikofaktoren wurde unter Verwendung der adjustierte Odds Ratios (OR) gemessen und ihre 95% Konfidenzintervall (CI) aus logistischen Regressionsanalyse. Ein Gen-Umwelt-Interaktion Analyse wurde durchgeführt. Die Wirkung der ApoE-Genotypen auf das Überleben von GC nach einer Kaplan-Meier-Analyse und Cox erforscht wurde Modell Proportional Hazard Regression.
Ergebnisse | Themen mindestens ein ApoE
ε2-Allel haben einen signifikanten 60% igen Rückgang der GC Risiko (OR = 0,40, 95% CI: 0,19-0,84) im Vergleich mit ε3 Homozygoten. Keine signifikante Wechselwirkung zwischen dem ε4 oder ε2-Allel und Umweltbelastungen entstanden, noch ε2 oder ε4 Allele die mediane Überlebenszeit betroffen, auch nach Korrektur für Alter, Geschlecht und Stadion.
Schlussfolgerungen
Unsere Studie Berichte zum ersten Mal ein Schutzwirkung des ε2 Allel gegen GC, die zum Teil auf die höhere antioxidative Eigenschaften zugeschrieben werden könnten ε2 Vergleich zu den ε3 oder ε4 Allele. Aufgrund der Stichprobenumfang der Studie sind weitere Studien erforderlich, um unsere Ergebnisse zu bestätigen.
Schlüsselwörter Magenkrebs Apolipoprotein E Genetische Epidemiologie Polymorphism Gen-Umwelt-Interaktion Hintergrund
Apolipoprotein E (ApoE) ist ein kleines Glykoprotein, das eine wichtige spielt Rolle bei der Blut-Clearance von cholesterinreichen Teilchen, bekannt als Überbleibsel Lipoproteine ​​[1]. Neben seiner allgemein anerkannten Rolle im Lipidstoffwechsel hat ApoE in mehreren pathophysiologischen Prozessen beteiligt gezeigt werden, einschließlich Antioxidationsmittel und Immunaktivitäten, sowie eine modulierende Wirkung auf die Angiogenese, Tumorzellwachstum und Metastasierung Induktions [2]. Das Strukturgen (19q13.2) für apoE
ist polymorph mit zwei single nucleotide polymorphisms (SNPs) innerhalb der kodierenden Region, was zu drei verschiedenen Allelen (ε2, ε3, ε4) und sechs apoE
Genotypen (drei Homozygoten ε4 /ε4, ε3 /ε3 und ε2 /ε2 und drei Heterozygoten ε4 /ε3, ε3 /ε2, ε4 /ε2), die jeweils die unterschiedlichen Rezeptorbindungsfähigkeiten [3, 4]. Eine Meta-Analyse eine nahezu lineare Beziehung zwischen ApoE
Genotypen berichtet und die Höhe der Gesamt- und LDL-Serum-Cholesterin (LDL-C), wenn die sechs Genotypen bestellt werden wie folgt: ε2 /ε2, ε2 /ε3, ε2 /ε4, ε3 /ε3, ε3 /ε4, ε4 /ε4 [5]. Im allgemeinen, im Vergleich zu den Individuen mit der ε3 Allel Konzentrationen an Gesamt und LDL-C sind in der Regel für die mit dem ε2 Allel und höher für ε4 Trägern geringer sein [6]. In den letzten zwei Jahrzehnten, im Querschnitt und prospektive Studien haben berichtet, dass niedrige Cholesterinspiegel im Serum mit höheren nicht-kardiovaskulären Risiko verbunden sind, vor allem Krebsrisiko [7-10], damit Patienten mit niedrigen Serum-Cholesterinwerte sind eher leiden an Krebs. Bis heute ist der genaue Grund für diese Feststellung noch unklar. Verschiedene Erklärungen können gegeben werden, zum Beispiel: (i) diese Zuordnung theoretisch eine direkte kausale Rolle von Cholesterin in der Krebs Ätiologie widerspiegeln könnte, oder es fällig (ii) einige Störfaktoren, die sowohl niedrige Cholesterin und Krebs verursachen, oder (iii) ' Reverse Verursachung ", so niedrig Cholesterinspiegel nur um die Auswirkungen von Krebs sein könnte und nicht die Ursache [11].
komplett Zur Beantwortung der Frage, ob ein kausaler Zusammenhang zwischen niedrigen Cholesterinspiegel und Krebs vorhanden ist, eine alternative epidemiologischer Ansatz namens" Mendelian Randomisierung "kann verwendet werden, um das Problem der Rückwärts Kausalität und verwirrende zu überwinden. Gemäß diesem Ansatz wird eine genetische Variation (z.B. apoE
), die für eine umwelt modifizierbaren Belichtung (z.B. Serumcholesterinspiegel) als robust Proxy dient, kann verwendet werden, um kausalen Rückschlüsse auf eine Krankheit zu machen [12]. Benn et al. [13] haben kürzlich gezeigt, dass niedrige LDL-C robust mit Krebs in einer großen dänischen Kohortenstudie verbunden waren, während eine Reduktion des LDL durch SNPs verursacht werden, einschließlich apo E
, war es nicht. Durch die Annahme Ansatz der Mendelschen Randomisierung, Benn dem Schluss, dass seine Ergebnisse sind in Übereinstimmung mit den aus einer Kohorte von älteren Patienten mit Pravastatin behandelt entstanden [14] und von der Atherosclerosis Risk in Communities Kohortenstudie [15], die alle niedrigen LDL was darauf hindeutet, sind wahrscheinlich zur präklinischen Krebsstadium und per se
Krebs verursachen nicht.
die Rolle von apoE
Genotypen auf Magenkrebs (GC) Ätiologie wurde nicht so weit, wie Benn et al exlpored. [13] betrachtet alle Magen-Darm-Krebs ohne besonderen Schwerpunkt auf GC. Bis heute vier Kohortenstudien [10, 16-18] untersucht die Beziehung zwischen Serumcholesterinspiegel und der Entwicklung von GC. Unter ihnen sind zwei japanische Kohortenstudien [10, 18] und eine schwedische Studie [16] berichtet, dass niedrige Cholesterinspiegel im Serum für die Entwicklung von Magenkrebs unabhängige Risikofaktoren sind, vor allem die Darm histotype. jedoch kein Zusammenhang wurde in einer großen finnischen Kohortenstudie [17] berichtet. Da die Frage, ob Hypocholesterinämie eine Prädisposition für GC ist oder einer präklinischen Phase der GC nicht vollständig gelöst worden, unser Krankenhaus-Fall-Kontroll-Studie zielt darauf ab, durch die direkte Blick auf die Beziehung zwischen ApoE
Genotypen dieses Problem zu überwinden und GC sowie deren Interaktion mit potenziellen Effektmodifikatoren.
Ergebnisse | Allgemeine Eigenschaften der Studienpopulation einschließlich 156 GC Fälle und 444 Kontrollen sind in Tabelle 1. der Alkoholkonsum wurde mit einem erhöhten Risiko verbunden GC mit ORs von 1,84 (95% CI = 1,10-3,07) und 3,29 (95% CI = 1,36-7,98) für mittlere und schwere Trinker sind. Eine nahezu verdoppelt GC Risiko (OR = 1,95, 95% CI: 1,06-3,60) Rauchen mehr als 25 Packungsjahre wurde unter Individuen nachgewiesen. Darüber hinaus führte Familiengeschichte von Magenkrebs mit einer erhöhten GC Risiko in Verbindung gebracht werden (OR = 3.14, 95% CI: 1,17-8,44; Tabelle 1). Tabelle 2 zeigt die Verteilung der sechs apo
E Genotypen unter GC Fällen und Kontrollen, mit der ε3 /ε2 Genotyp geringer ist in Fällen häufig vertreten (9,87%) als bei den Kontrollen (15,67%). Tabelle 1 Odds Ratios (95 % CI) für Magenkrebs nach ausgewählten Variablen und deren Häufigkeitsverteilung unter 156 Magenkrebs-Fälle und 444 Kontrollen bei
Fälle
Kontrollen
OR (95% CI
) †

n (%)
n (%)
Alter (Mittelwert ± SD)
67.05 ± 11.33
59.04 ± 16.00
Male Geschlecht
82 (53,2)
261 (58,8)
0,50 (0,30-0,83)
Alkoholtrinker
0-6 g /Tag
60 (40,5)
251 (57,6)
1 *
7-29 g /Tag
71 (48,0)
163 (37,4)
1,84 (1.10- 3.07)
> = 30 g /Tag
17 (11,5)
22 (5,0)
3,29 (1.36- 7.98) Raucherstatus Bei
nie 78 (50,7)
238 (54,2)

1 *
76 (49,3)
201 (45,8)
1,51 (0.94- 2.45)
-Pack-Jahre des Rauchens
0
74 (51,7)
245 (57,0)
1 *
1-25
31 (21,7)
111 (25,8)
1,40 (0.78- 2.50)
> 25
38 (26.6)
74 (17.2)
1,95 (1.06- 3.60)
Obst und Gemüse Aufnahme
hoch ‡
41 (27,5)
116 (27.2)
1 *
Nieder
108 (72,5)
310 (72,8)
1,18 (0.70- 1,98)
Gegrilltes Fleisch
Nieder ^
106 (75,7)
314 (81,1 )
1 *
hoch
34 (24,3)
73 (18,9)
1,25 (0.72- 2.15)
Körperliche Aktivität Beliebig
29 (18,6)

93 (20,9)
1 *
Keine
127 (81,4)
351 (79,1)
0,81 (0,45- 1,45)
Familiengeschichte von Krebs
Nein
87 (62,2)
291 (71,2)
1 *
Familiengeschichte von Magenkrebs
10 (7,1)
14 (3.4)
3,14 (1.17- 8.44)
Familiengeschichte von anderen Krebs
43 (30,7)
104 (25,4)
1,09 (0.66- 1.81)
ApoE Allelfrequenz
ε3
130 (85,5)
322 (80,1)
ε2
8 (5,3)
39 (9.7)
ε4
14 (9.2)
41 (10.2)
† OR nach Alter angepasst, Geschlecht , Alkoholkonsum (als kontinuierliche Variable), packyears des Rauchens, Fleischkonsum und Familiengeschichte von Krebs gegrillt.
* Referenzkategorie.
‡ mindestens drei Portionen Obst und Gemüse pro Tag.
^ weniger als viermal /Monat.
Tabelle 2 Verteilung der ApoE-Polymorphismus bei Magenkrebs Fällen und Kontrollen
Fälle ‡
Kontrollen ^
Alle Fälle
Intestinale (n = 79)
Diffuse (n = 57)
n (%)
n (%)
OR (95% CI) †
OR (95% CI) †
OR (95% CI) †
ε3 /ε3
109 (71,71)
253 (62,94)
1 *
1 *
1 *
ε3 /ε2
15 (9,87)
63 (15.67)
0,43 (0,21 -0,91)
0,34 (0,13 - 0.92)
0,57 (0,23-1,40)
ε3 /ε4
27 (17.76)
75 (18.66)
0,70 (0,37-1,30)
0,75 (0,35 - 1,60)
0,64 (0,27-1,47)
ε2 /ε2
0 (0,00)
5 (1,24)
NC
NC
NC
ε2 /ε4
1 (0,66)
5 (1,24)
1,25 (0,10-15,10)
2,54 (0,21-31,17)
NC
ε4 /ε4
0 (0,00)
1 (0,25)
NC
NC
NC
ε3 /ε2 oder ε2 /ε2
15 (12.10)
68 (21,18)
0,40 (0,19-0,84)
0,31 (0,11 bis 0,83)
0,53 (0,21-1,30)
ε3 /ε4 oder ε4 /ε4
27 (19,85)
76 (23,10)
0,68 (0,36-1,26)
0,71 (0,34-1,53)
0,62 (0,27-1,43).
‡ Apolipoprotein Genotyp in 152 Fällen wurde gemessen
^ Apolipoprotein Genotyp wurde in 402 Kontrollen gemessen
† OR nach Alter angepasst. .. Geschlecht, Alkoholkonsum (als kontinuierliche Variable), packyears des Rauchens, Fleischkonsum und Familiengeschichte von Magenkrebs gegrillt
* Referenzkategorie
NC: nicht berechenbar durch wenige viele Werte
Häufigkeit von apoE.
Genotypen der Hardy-Weinberg-Gleichgewicht (HWE) in der Kontrollgruppe respektiert (p
-Wert > 0,05, Daten nicht gezeigt). Aus der multivariaten Analyse hatte Einzelpersonen mindestens ein ApoE
ε2-Allel eine signifikante 60% iges Risiko für GC verringert (OR = 0,40, 95% CI: 0,19-0,84), wenn mit den homozygot für das Wildtyp-Vergleich (ε3 /ε3) (Tabelle 2). Wenn Ergebnisse geschichtet wurden nach Tumorhistologie erschien die signifikante Assoziation zwischen apoE
ε2 Allelträgern und Magenkrebs zur intestinalen Typ beschränkt sein, mit einer OR von 0,31 (95% CI: 0,11-0,83; Tabelle 2). Die Qualitätskontrollen zeigten eine 100% ige Übereinstimmung zwischen RFLP (RFLP) und DNA-Sequenzierung.
Ergebnisse der Gen-Umwelt-Interaktion Analyse sind in Tabelle 3 dargestellt wurden keine statistisch signifikante Wechselwirkung entstanden zwischen dem ε4 oder ε2-Allel (p-
Wert für die Interaktion > 0,05), Geschlecht, Alter, Alkoholkonsum oder Obst und Gemüse intake.Table 3 Wechselwirkungen zwischen apoE-Genotypen und ausgewählten demographischen und Lifestyle-Variablen auf GC Risiko
Variablen
Hüllen
Any e2
Hüllen
Kontrollen
Any e4
<
Steuert br> OR (95% CI) †
OR (95% CI) †
Geschlecht
weiblich, e3 /e3
51 ( 34.69)
96 (65.31)
1 *
51 (34.69)
96 (65.31)
1 *
weiblich, Variante
8 (27.59)
21 (72.41)
0,58 (0,20-1,65)
12 (24.00)
38 (76.00)
0,55 (0,23-1,32)
männlich, e3 /e3
57 (26.64)
157 (73,36)
0,48 (0,27 bis 0,88)
57 (26.64)
157 (73,36)
0,49 (0,27-0,89)
männlich, Variante
7 (12.96)
47 (87,04)
0,49 (0,11-2,18)
14 (26.92) 38 (73.08)
1,52 (0,44-5,27)
P-Wert für Interaktion °
0.347
0.660
Alter
< 60 Jahren e3 /e3
25 (17.73)
116 (82,27)
1 *
25 (17.73)
116 (82,27)
1 *
< 60 Jahren Variante
4 (12.50)
28 (87.50)
0,35 (0,07-1,68 )
7 (21.21) 26 (78.79
)
0,70 (0,18-2,66)
≥60 Jahre, e3 /e3
84 (38.01)
137 (61,99 )
2,85 (1,53-5,28)
84 (38.01)
137 (61,99)
2,84 (1,54-5,26)
≥60 Jahre, Variante
11 (21.57)
40 (78.43)
1,24 (0,21-7,26)
20 (28.57) 50 (71.43)
0,97 (0,21-4,36)
P-Wert für die Interaktion
0.807
0.964
Alkohol trinken
nie, e3 /e3
45 (24.06)
142 (75,94)
1 *
45 (24.06)
142 (75,94)
1 *
nie, Variante
5 (12.50)
35 (87.50)
0,29 (0,08-1,04)
12 (18.18)
54 ( 81.82)
0,62 (0,28-1,37)
haupt, e3 /e3
64 (36,57)
111 (63,43)
1,59 (0,88-2,86)
64 ( 36.57)
111 (63,43)
1,46 (0,81-2,62)
Ever Variante
10 (23.26) 33
(76,74)
1,78 (0,37-8,50)
15 (40.54)
22 (59.46)
1,28 (0,35-4,66)
P-Wert für die Interaktion
0.468
0.707
Raucherstatus
nie, e3 /e3
54 (29.03)
132 (70,97)
1 *
54 (29.03)
132 (70,97)
1 *
nie, Variante
8 (20.51)
31 (79.49)
0,48 (0,18-1,28)
13 (20.00)
52 (80.00)
0,53 (0,23-1,23)
haupt, e3 /e3
54 (31,40)
118 (68,60)
1,41 (0,80-2,50)
54 (31,40)
118 (68,60)
1,39 (0,79-2,45 )
Ever Variante
7 (16.28)
36 (83.72)
0,68 (0,15-2,98)
13 (36.11)
23 (63.89)
1,98 (0,59 - 6,73)
P-Wert für die Interaktion Bei
0.609
0.271
Obst und Gemüse Aufnahme
Nieder, e3 /e3
28 (29.47) 67
(70.53)
1 *
28 (29.47)
67 (70.53)
1 *
Low, Variante
2 (9,09)
20 (90.91)
0,14 (0,02 - 0,87)
9 (32,14)
19 (67.86)
0,84 (0,28-2,49)
hoch, e3 /e3
78 (31,08)
173 (68.92)
1,17 (0,61-2,23)
78 (31,08)
173 (68,92)
1,12 (0,59-2,13) ​​
hoch, Variante
11 (19.30 Uhr) 46
(80.70)
2,83 (0,38-21,05)
16 (22,86)
54 (77.14)
0,62 (0,16-2,37)
P-Wert für die Interaktion
0.309
0.487
† OR angepasst nach Alter, Geschlecht, Alkoholkonsum (als kontinuierliche Variable), packyears des Rauchens, gegrillte Fleischkonsum und Familiengeschichte von Magenkrebs.
* Referenzkategorie.
° durch Likelihood Ratio Test.
Die mediane Überlebenszeit von Gastrektomie war 19 Monate ohne statistisch signifikante Unterschiede für apoE
ε2 oder ε4 Allelträgern (p
Wert von Log-Rank-Test > 0,05), selbst wenn die Analyse zu 1 Jahr und 2 Jahre nach dem chirurgischen Eingriff beschränkt war (Daten nicht gezeigt). Cox-Regressionsanalyse zeigte keinen signifikanten Unterschied nach ApoE
nach Anpassung für Alter, Geschlecht und Stadion, auch nachdem sie von Krebs histotype Stratifizierung.
Diskussion
Unser Fall-Kontroll-Studie von 156 Magenkrebs-Fälle und 444 Krankenhaus -basierte Steuerung zum ersten Mal die Wirkung von apoE
Genotypen und ihre Wechselwirkungen mit ausgewählten demographischen und Lifestyle-Faktoren auf das Risiko von Magenkrebs bei einer italienischen Bevölkerung ausgewertet. Nach unseren Ergebnissen ist das ApoE
ε2-Allel mit 60% assoziiert statistisch signifikantes Risiko für die GC verringert, wenn sie mit dem Wildtyp-Allel ε3 verglichen. Dieser schützende Effekt war besonders stark für die Darm histotype. Wir waren nicht in der Lage, jedoch signifikante Wechselwirkungen zwischen ApoE
Allele und Lifestyle-Faktoren zu erkennen. Zusätzlich ApoE
Genotypen scheinen nicht die Überlebenszeit nach dem chirurgischen Eingriff zu beeinflussen, auch wenn die Analyse auf die spezifischen Tumor Histotypen beschränkt.
Vor unserer Interpretation der Ergebnisse, einige Einschränkungen der Studie sollten berücksichtigt werden. Erstens auf Grund der Häufigkeit des ApoE-Allele
in unserer Kontrollpopulation hat diese Studie eine priori
90% Leistung ein OR von 0,40 für den Effekt des apoE
ε2 Allel nachzuweisen (at 5% Signifikanzniveau). Die Stichprobengröße der Studie wird die Möglichkeit statistisch signifikante Gen-Umwelt-Interaktionen zu erkennen, jedoch müssen wir die Stichprobengröße erhöhen, um unsere Ergebnisse zu bestätigen. Zweitens Daten auf Serumcholesterinspiegel sind in unserer Studienpopulation nicht verfügbar, obwohl ihre Nützlichkeit angesichts der Tatsache, solche Werte betroffen sind, durch die Krebs beschränkt wäre selbst.
Die Wirkung von apoE
Genotypen zuvor gewesen in Bezug auf Brust-, Darm-, der Gallenwege, Prostata-, Kopf- und Halskrebs untersucht und hämatologischen malignen Erkrankungen [19-24], mit widersprüchlichen Ergebnissen. Eine kürzlich Mendelschen Randomisierung veröffentlichte Studie befasste sich mit der ungelösten Frage über die kausale Rolle von Cholesterin in der Krebs Ätiologie durch die Untersuchung, wenn einige SNPs einschließlich ApoE
, verknüpft alle für das lebenslange reduziert Plasma-LDL-C, sind einem erhöhten Risiko für Krebs ursächlich im Zusammenhang mit unter zwei großen dänischen Bevölkerung Studien [13]. Die Ergebnisse zeigen eine inverse Beziehung zwischen Krebsinzidenz und Mortalität und Cholesterinspiegel, während keine Wirkung für die Allele
ApoE demonstriert. Auch mit einigen Einschränkungen auf der ausgewählten Kohorte schließen Autoren, dass es einen erheblichen Mangel an kausalen Effekt von Cholesterin auf das Krebsrisiko einschließlich Magen-Darm-Krebs ist. Dementsprechend könnte der scheinbare Widerspruch zwischen den Ergebnissen im Zusammenhang Plasmacholesterinspiegel und Krebsrisiko in Bezug auf apo E
, sein Hinweis auf eine Stufe präklinischen Krebs die erhöhte Aufnahme von Cholesterin aus dem Blut für das Zellwachstum und Proliferation beteiligt, so cholesterinämie Senkung vor der klinischen Diagnose Krebs.
Wie für Magenkrebs, zwei japanische Kohortenstudien [10, 18] und einer schwedischen Kohortenstudie [16] berichteten über eine starke inverse Assoziation zwischen Serum-Cholesterinspiegel und das Risiko von Magenkrebs. Japanische Studien fanden jedoch der Verband weit weniger stärker nach dem Ausschluss der frühen 3-Jahres-Neuerkrankungen und fortgeschrittenen Fällen, so die Entwicklung von Magenkrebs was darauf hindeutet, sich Gesamt-Cholesterinspiegel zu senken neigt. Um die Probleme zu überwinden im Zusammenhang mit Verursachung oder verwirrende von Lifestyle-Faktoren umkehren, haben wir uns entschlossen, die Rolle der Cholesterinspiegel auf GC Risiko zu klären, indem ein Mendel'sche Randomisierung Ansatz, nämlich durch
direkt die Wirkung des ApoE-Genotypen studieren auf einer großen Serie der italienischen GC Fällen und Kontrollen. Unsere Ergebnisse zeigen eine statistisch signifikante 60% iges Risiko für GC verringert mit dem ε2-Allel verbunden.
Da ε2 Träger haben eine niedrigere Serum cholesterinämie als Nicht ε2 Träger, unsere Feststellung widerspricht der bisher Beobachtung berichtet, dass niedrige Cholesterinspiegel im Serum GC-Risiko erhöhen [10, 16, 18]. ApoE hat jedoch viele andere Funktionen neben seiner bekannten Rolle im Fettstoffwechsel, die möglicherweise in das Krebsrisiko verbunden sind, wie es bei der Gewebereparatur, Entzündungs- und Immunantwort, das Zellwachstum und die Angiogenese beteiligt ist [2], und zeigt Antioxidans Eigenschaften [25]. Von Bedeutung hat ApoE-Protein bestimmte antioxidative Eigenschaften aufweisen, mit abnehmendem antioxidative Aktivität in der Reihenfolge ε2 > ε3 > ε4 Allele [25]. Selbst wenn die molekularen Mechanismen, die für die antioxidativen Eigenschaften von apoE
noch nicht geklärt ist, haben eine Reihe von Studien, die Mechanismen untersucht, durch die apoE
Genotypen der oxidativen zustandsabhängige Mediatoren oder Biomarker für oxidativen Stress beeinflussen könnten [26 -28]. ApoE
ε2 Träger Raucher Individuen, die gegenüber Nikotin ausgesetzt sind, eine wichtige Quelle von oxidativem Stress, weisen eine fast 30% höher gesamte antioxidative Status verglichen mit apoE
ε3 Träger, als die Fähigkeit gemessen, um die Peroxidase zu inhibieren -vermittelte Bildung der 2,2-Azinobis-3-ethylbensthiazoline-6-sulfonsäure (ABTS +) steht, während apoE
ε4 Probanden zeigen eine 30% ige LDL oxidiert erhöht [26].
Oxidativer Stress ist durch ein Ungleichgewicht zwischen einer erhöhten Produktion von reaktiven Sauerstoffspezies und einer signifikanten Abnahme der Fähigkeit des Antioxidans-Funktionen gegeben. Die Herstellung von Peroxiden und freien mit Veränderungen verbunden Radikale im normalen Redoxzustand Gewebe können toxische Wirkungen einschließlich oxidative DNA-Schädigung induzieren, die mit Hypoxie und Azidose kann stark in der Pathogenese von GC beteiligt sein, da sie die Ursache in Betracht gezogen werden kann als und die Folge der Tumorprogression [29, 30]. Einige Beweise zeigten eine große Größenordnung von oxidativem Stress in GC Fällen verglichen, wenn mit gesunden Personen, wie durch erhöhte Spiegel von Lipidperoxidationsprodukten und Abreicherung von enzymatischen und nicht-enzymatischen Antioxidationsmittel nachgewiesen [31, 32]. Angesichts all dieser Ergebnisse die Ergebnisse unserer Studie, die eine Schutzwirkung des ε2 Allel auf GC
apoE berichtet, kann durch die verbesserten Antioxidanseigenschaften von ε2 Allel im Vergleich zu den ε3 oder ε4-Allele, und dies erklärt Beweise für GC vor allem sein, deren Pathogenese stark durch das Rauchen bedingte oxidativen Stress beeinflusst wird [33]. Wenn unser Modell gilt, würden wir eine Interaktion zwischen ApoE
ε2-Allel und Raucherstatus erwarten, aber die begrenzte Kraft unserer Interaktionsanalyse haben sie verdeckt werden.
Schlussfolgerungen
Abschließend unsere Studie liefert für die ersten Mal Hinweise auf eine mögliche Schutzwirkung des ε2 Allel gegen GC. Weitere Studien sind erforderlich, um unsere Ergebnisse zu bestätigen und wenn die Schutzwirkung, um herauszufinden, durch gesenkt Cholesterinspiegel oder besser antioxidative Eigenschaften vermittelt wird.
Methoden
Studienpopulation
Die Probanden wurden nach einer Fall-Kontroll ausgewählt Studiendesign wie zuvor beschrieben [34-36]. Kurz gesagt, wurden Fälle aufeinander folgenden primären Adenokarzinom des Magens Patienten mit histologischen Bestätigung, die während der Periode 2002-2010 eine kurative Gastrektomie in der "A. Gemelli" Lehrkrankenhaus unterzog. Die Kontrollen wurden von Krebs freien Patienten, mit einer breiten Palette von Diagnosen ausgewählt, in dasselbe Krankenhaus während der gleichen Zeitperiode zugelassen.
Näher Details, etwa 50% unserer Kontrollpopulation wird von Blutspendern gemacht, während die andere Hälfte wird derzeit chirurgische Eingriffe als laparoskopische Cholezystektomie oder Blinddarmentzündung oder Leistenbruch und einen kleineren Teil der betroffenen Patienten durch chronische Krankheiten wie Bluthochdruck oder chronisch obstruktiver Lungenerkrankung (COPD) unterziehen periodische Check-up von Patienten gemacht.
wurden alle Probanden Kaukasiern geboren Italien. Die Studie Stichprobe umfasste 156 Fälle und 444 Kontrollen, mit einer Teilnahmequote von 98% bei den Fällen und 93% in der Kontrollgruppe. Nach Lauren Klassifikation, die Mehrheit (58,1%) von Magenkrebsfälle waren Darm [37]. Die Tumoren wurden im Antrum (44,5%), im Korpus (14,8%), im Antrum /Korpus (21,1%), in der Cardia (3,1%), Stümpfe (5,5%), in der Fundum (1,6% ), in der Cardia /Korpus (6,3%) und den gesamten Magen (3,1%). Basierend auf den zytologischen und architektonischen atypisms sowie die histopathologischen Berichte [38], Patienten Tumoren entsprechend klassifiziert wurden: 70,0% kaum differenziert (G3), 27,6% mäßig differenzierten (G2), 3,4% gut differenzierten (G1 ), während 51,7% wurden I-II aufgeführt und 48,3% III-IV in Szene gesetzt. eine schriftliche Einverständniserklärung
von allen Probanden erhalten wurde, wonach jede Person eine venöse Blutprobe zur Verfügung gestellt, die in EDTA-beschichtete Röhrchen gesammelt wurde. Diese Studie wurde nach der Deklaration von Helsinki durchgeführt und wurde von der Ethikkommission der Università Cattolica del Sacro Cuore.
Genotyping
DNA wurde aus den peripheren Blut-Lymphozyten und Genotypisierung von ApoE
wurde durchgeführt, extrahiert genehmigt unter Verwendung von Restriktionsfragmentlängen-Polymorphismus (RFLP). Kurz gesagt, amplifiziert von genomischer DNA 20 ng Oligonucleotid-Primer 5'-TCC AAG GAG CTG CAG GCG GCG CA-3 'und 5'-GCC CCG GCC TGG TAC ACT GCC A-3'. Die Reaktionen wurden bei 95 ° C 3 Minuten lang denaturiert, um 35 zweistufigen Zyklen gefolgt, bestehend aus 10 Sekunden bei 95 ° C, dann 10 Sekunden bei 66 ° C. Nachdem die Zyklen eine abschließende Extension von 5 Minuten bei 95 ° C abgeschlossen wurden durchgeführt. Ein 10-ul-Aliquot jedes RFLP Produkt wurde mit 5 U von Afl
III und einem separaten 10-ul-Aliquot verdaut wurde mit 5 U von Hae
II verdaut. Sowohl ApoE
ε2 und ApoE
ε3 Allele wurden mit Afl
geschnitten III Artikel 50 und 168 bp zu erhalten, während die ApoE
ε4 Allel bei 218 bp ungeschnitten bleibt. Mit Hae
II, die beide ApoE
ε3and ApoE ε4 Allele ergeben Produkte von 23 und 195 bp, während die ε2-Allel
ApoE bei 218 bp ungeschnitten bleibt. Die sechs möglichen Genotypen wurden durch die Analyse der Muster durch den Restriktionsverdau erzeugten zugeordnet. Was die Qualitätskontrolle, 5% der Proben wurden auch mit Standard-DNA-Proben für jede apoE Genotyps
sequenziert, von Seripa gesendet et al. [39].
Data Collection Hüllen und Kontrollen wurden von ausgebildeten Ärzten befragt einen strukturierten Fragebogen mit Informationen über demografische Daten zu sammeln, Rauchen, Trinken Geschichte, Ernährungsgewohnheiten, körperliche Aktivität und Familiengeschichte von Krebs mit ein speziellem Fokus auf Magenkrebs. Die Teilnehmer wurden über die Jahre auf die Diagnose vor dem Fokus gebeten (für die Kontrollen im Jahr vor dem Interview-Termin), wenn Fragen zu Lebensgewohnheiten zu beantworten. Raucherstatus wurde wie nie und immer Raucher (einschließlich der beiden aktuellen und ehemaligen Rauchern) kategorisiert. Pack-Jahre wurden als Jahre berechnet durch die aktuelle Zahl multipliziert geräuchert (oder vorherige Nummer, für diejenigen, die verlassen hatte) der Zigaretten pro Tag um 20.
Obst und Gemüse Aufnahme kategorisiert wurde als hoch, wenn mindestens drei Portionen geteilt geräuchert Obst und Gemüse wurden, wurde als niedrig definiert täglich während gegrillte Fleischkonsum verbraucht, wenn der Verbrauch von weniger als 4 mal /Monat. Familiengeschichte von Krebs zu Eltern, Geschwistern und Nachkommen bezeichnet. Die Daten zu früheren Helicobacter pylori-Infektion
waren nur für Magenkrebsfälle zur Verfügung. Die Antwortquote für den Abschluss des Interviews 92% war für die Fälle und 97% für Kontrollen, mit Ausnahme der Daten zu gegrillten Fleischkonsum (unbekannt in 10% der Fälle und 12,8% der Kontrollen) und die Familiengeschichte von Krebs im Zusammenhang (unbekannt 10% der Fälle und 8% der Kontrollen).
statistische Analyse
die Beziehung zwischen Magenkrebs und mutmaßliche Risikofaktoren wurden mit den bereinigten Odds Ratios (OR gemessen) und deren 95% Konfidenzintervall (CI) von Logistik abgeleitet Regressionsanalyse mit Stata-Software (Version 10.0). Mögliche Risikofaktoren wurden als Störfaktoren zu sein, wenn die Zugabe dieser Variablen zum Modell des OR um 10% verändert oder mehr und einmal confounder jeder geschätzten Hauptwirkung identifiziert wurde, wurde in allen Modellen gehalten. Auf der Grundlage dieser Kriterien kontrolliert wir für Alter, Geschlecht, Alkohol und gegrillten Fleischkonsum, Zigarettenrauchen (pack-Jahre) und Familiengeschichte von Magenkrebs. A χ 2-Test von Hardy-Weinberg-Gleichgewicht (HWE) für die drei ApoE
Allele wurde unter Kontrollen. Um herauszufinden, ob die Wirkung der ausgewählten Polymorphismen zu untersuchen, die von einigen Umweltfaktoren modifiziert wurde, wurde eine geschichtete logistische Regressionsanalyse durchgeführt, für die Störfaktoren zuvor identifizierten Einstellung. Ein Gen-Umwelt-Interaktion Analyse wurde unter Verwendung von denen die Durchführung der homozygote Wildtyp-Genotyp (ε3 /ε3 im Zusammenhang mit der ApoE
ε3 Isoform) als Referenzgruppe durchgeführt. Bei dieser Analyse wurden die Genotypen wie folgt kategorisiert: Vorhandensein von mindestens einem apoE
ε2 Allel oder das Vorhandensein von mindestens einem apoE
ε4-Allel (der Genotyp ε2 /ε4 nicht in beiden Kategorien enthalten), die Bereitstellung der . andere zwei apoE
Isoformen (apo E
2 und apo E
4) In dieser Analyse
wurde Alter kategorisiert binomisch (< 60 und ≥ 60 Jahre alt), war das Rauchen Status gilt als nie /nie Zigarettenraucher und Alkoholkonsum als Trinker /Nichttrinker (letztere einschließlich Personen, deren Alkoholkonsum weniger als 7 g /Tag). Um für die Interaktion zwischen zwei Belichtungsvariablen zu testen, wurde das Likelihood-Verhältnis-Test, mit den Individuen homozygot für Wildtyp-Genotyp (ε3 /ε3) und nicht ausgesetzt zu den interessierenden Variablen als Referenzgruppe verwendet.
Insgesamt Überlebenskurven wurden von der Kaplan-Meier-Produkt Limit Verfahren ab dem Zeitpunkt der Diagnose bis zum Tod berechnet. Wenn ein Patient nicht tot war, das Überleben war zum Zeitpunkt des letzten Besuches zensiert. Die Log-Rank-Test wurde verwendet, um Unterschiede zwischen den Untergruppen zu bewerten. Das Risiko des Todes zu ApoE-Isoformen im Zusammenhang wurde von Cox Proportional-Hazards-Modell geschätzt. Hazard Ratio (HR) wurden korrigiert für Alter, Geschlecht und Stadion, mit dem Wildtyp-Genotyp (ε3 /ε3) als Referenzgruppe. Darüber hinaus wurden Analysen geschichtet nach Krebs histotype (Darm /diffuse) Quelle der Unterstützung
keine finanzielle Unterstützung erklärt werden
Abkürzungen
OR:..
Odds Ratio

• Immunhistochemische Konsistenz zwischen Primärtumoren und Lymphknotenmetastasen von Magen neuroendokrinen carcinoma
• Änderungen von E-Cadherin und β-Catenin in Magen cancer