En case-kontrol undersøgelse af effekten af ​​apolipoprotein E genotyper på mavekræft risiko og progression

en undersøgelse af effekten af ​​apolipoprotein E genotyper på mavekræft risiko og progression
abstrakt
Baggrund
Apolipoprotein E case-kontrol ( ApoE) er en multifunktionel protein spiller både en central rolle i metabolismen af ​​kolesterol og triglycerider, og væv reparation og inflammation. Den ApoE
gen (19q13.2) har tre store isoformer kodet af e2, ε3 og ε4 alleler med ε4 allelen er forbundet med hyperkolesterolæmi og ε2 allel med den modsatte effekt. Et omvendt forhold mellem kolesterolværdier og gastrisk cancer (GC) er tidligere blevet rapporteret, at selv om forholdet mellem apoE
genotyper og GC er ikke blevet undersøgt indtil nu. Salg Metoder Salg One hundrede og seksoghalvtreds mavekræft tilfælde og 444 hospital kontroller blev genotype for apoE polymorfi (e2, ε3, ε4 alleler). Forholdet mellem GC og formodede risikofaktorer blev målt ved hjælp af de justerede odds ratio (OR) og deres konfidensintervaller 95% (CIS) fra logistisk regressionsanalyse. Et gen-miljø interaktion analyse blev udført. Virkningen af ​​de apoE genotyper på overlevelse fra GC blev udforsket af en Kaplan-Meier-analyse og Cox proportional hazard regression.
Resultater Salg Fag med mindst én apoE
e2 allel har en betydelig 60% reduktion af GC risiko (OR = 0,40, 95% CI: 0,19-0,84) i forhold til ε3 homozygoterne. Ingen signifikant interaktion opstået mellem ε4 eller ε2 allel og miljømæssige eksponeringer, eller e2 eller ε4 alleler påvirkede median overlevelse, selv efter korrektion for alder, køn og stadion.
Konklusioner
Vores undersøgelsesrapporter for første gang en beskyttende virkning af ε2 allelen mod GC, der kan delvis tilskrives de højere antioxidant egenskaber ε2 sammenlignet med ε3 eller ε4 alleler. I betragtning af undersøgelsens stikprøve størrelse, er yderligere undersøgelser nødvendige for at bekræfte vores resultater.
Nøgleord
mavekræft Apolipoprotein E Genetisk epidemiologi Polymorfi Gene-miljø interaktion Baggrund
apolipoprotein E (ApoE) er en lille glycoprotein, der spiller en stor rolle i blodet clearance af cholesterol-rig partikler, kendt som rest lipoproteiner [1]. Ud over sin velkendt rolle i lipidmetabolisme har ApoE blevet vist at være involveret i flere patofysiologiske processer, herunder antioxidant og immunaktiviteter, samt en modulerende virkning på angiogenese, tumorcellevækst og metastase [2] induktion. Det strukturelle gen (19q13.2) for apoE
er polymorf med to enkelt nukleotid polymorfier (SNP) inden den kodende region resulterer i tre forskellige alleler (ε2, ε3, ε4) og seks apoE
genotyper (tre homozygotes ε4 /ε4, ε3 /ε3 og ε2 /ε2, og tre heterozygote ε4 /ε3, ε3 /ε2, ε4 /ε2), der hver viser forskellige receptor-bindende evner [3, 4]. En metaanalyse rapporterede en næsten lineær sammenhæng mellem apoE
genotyper og niveauerne af total og LDL serum kolesterol (LDL-C), når de seks genotyper bestilles som følger: ε2 /ε2, ε2 /ε3, ε2 /ε4, ε3 /ε3, ε3 /ε4, ε4 /ε4 [5]. Generelt sammenlignet med individer med ε3 allel, niveauer af total og LDL-C tendens til at være lavere for dem med ε2 allel og højere for ε4 bærere [6]. I de seneste to årtier har tværsnits- og prospektive undersøgelser rapporteret, at lave serum kolesterol niveauer er forbundet med højere ikke-kardiovaskulær risiko, især kræft risiko [7-10], således individer med lav serum total kolesterol niveauer er mere tilbøjelige til at lider af cancer. Til dato, den nøjagtige årsag til en sådan afgørelse er stadig stadig uklart. Forskellige forklaringer kan gives som: (i) denne forening teoretisk kunne afspejle en direkte kausal rolle af kolesterol i kræft ætiologi eller det skyldes (ii) til nogle forstyrrende faktorer, der forårsager både lavt kolesterol og cancer, eller (iii) til ' omvendt årsagssammenhæng «, så lavt kolesteroltal simpelthen kunne være effekten af ​​kræft i stedet for årsagen [11].
for fuldt besvare spørgsmålet, om der foreligger en årsagssammenhæng mellem lavt kolesteroltal og kræft, en alternativ epidemiologisk metode med navnet" Mendel randomisering "kan anvendes til at overvinde problemet med omvendt kausalitet og confounding. Ifølge denne fremgangsmåde, en genetisk variation (fx apoE
), der tjener som en robust proxy for en miljømæssigt modificerbare eksponering (fx serum kolesterol-niveau), kan anvendes for at gøre kausale slutninger om en sygdom [12]. Benn et al. [13] har for nylig vist, at lav LDL-C robust blev associeret med cancer i et stort dansk kohorte studie, mens en reduktion i LDL forårsages af SNP'er, herunder apo E
, ikke var. Med vedtagelsen af ​​Mendelsk Randomisering tilgang, Benn konkluderede, at hans resultater er i overensstemmelse med dem, der fremgik af en kohorte af ældre patienter behandlet med pravastatin [14] og fra Åreforkalkning Risiko i samfund kohorte undersøgelse [15], alle tyder lav LDL skyldes sandsynligvis til den prækliniske kræft scenen og sig selv
ikke forårsager kræft.
rolle apoE
genotyper på mavekræft (GC) ætiologi er ikke blevet exlpored hidtil, da Benn et al. [13] betragtes alle gastrointestinal cancer uden specifikt fokus på GC. Til dato, fire kohorteundersøgelser [10, 16-18] udforskede forholdet mellem serumcholesterolniveau og udvikling af GC. Blandt dem, to japanske kohortestudier [10, 18] og en svensk undersøgelse [16] rapporterede, at lav serum kolesterol niveauer er uafhængige risikofaktorer for at udvikle mavekræft, især den intestinale histotype. Ingen forening, dog blev rapporteret i et stort finsk kohorte undersøgelse [17]. Da spørgsmålet om, hvorvidt hypocholesterolemia er en disponerende faktor for GC eller en præklinisk fase af GC er ikke fuldt løst, sigter vores hospital-baseret case-kontrol undersøgelse for at overvinde dette problem ved direkte at se på forholdet mellem apoE
genotyper og GC samt deres interaktion med potentielle effekt modifikatorer.
Resultater
Generelle karakteristika studiepopulation herunder 156 GC tilfælde og 444 kontroller er vist i tabel 1. Alkoholforbrug var forbundet med en øget GC risiko med yderste periferi af 1,84 (95% CI = 1,10-3,07) og 3,29 (95% CI = 1,36-7,98) for moderate og storforbrugere, hhv. En næsten fordoblet GC risiko (OR = 1,95, 95% CI: 1,06-3,60) blev påvist mellem individer ryger mere end 25 pack-år. Desuden familie historie af mavekræft resulterede at være forbundet med en øget GC risiko (OR = 3,14, 95% CI: 1,17-8,44; tabel 1). Tabel 2 viser fordelingen af ​​de seks apo
E genotyper blandt GC sager og kontroller, med ε3 /ε2 genotype er mindre hyppigt repræsenteret i tilfælde (9,87%) end i kontroller (15,67%). Tabel 1 Odds ratio (95 % CI) for mavekræft efter udvalgte variabler og deres hyppighed fordeling blandt 156 gastriske kræfttilfælde og 444 kontroller

Cases

Controls
ELLER (95% CI) †

n (%)
n (%)
Alder (gennemsnit ± SD)
67,05 ± 11,33
59.04 ± 16.00
Mand køn
82 (53,2)
261 (58,8)
0,50 (0,30-0,83)
alkohol drikker
0-6 g /dag
60 (40,5)
251 (57,6)
1 *
7-29 g /dag
71 (48,0)
163 (37,4)
1,84 (1.10- 3.07)
> = 30 g /dag
17 (11,5)
22 (5,0)
3,29 (1.36- 7,98)
Rygestatus
aldrig
78 (50,7)
238 (54,2)
1 *
Ever
76 (49,3)
201 (45,8)
1,51 (0.94- 2.45)
Pack-års rygning
0
74 (51,7)
245 (57,0)
1 *
1-25
31 (21,7)
111 (25,8)
1,40 (0.78- 2.50)
> 25
38 (26.6)
74 (17,2)
1,95 (1.06- 3.60)
Frugt og grøntsager indtag
High ‡
41 (27,5)
116 (27,2)
1 *
Low
108 (72,5)
310 (72,8)
1,18 (0.70- 1,98)
grillet kød
Low ^
106 (75,7)
314 (81,1 )
1 *
høj
34 (24,3)
73 (18,9)
1,25 (0.72- 2,15)
Fysisk aktivitet
Enhver
29 (18,6)
93 (20,9)
1 *
Ingen
127 (81,4)
351 (79,1)
0,81 (0.45- 1.45)
familie historie af kræft
Nej
87 (62.2)
291 (71,2)
1 *
familie historie mavekræft
10 (7.1)
14 (3.4)
3,14 (1.17- 8.44)
Familie historie anden cancer
43 (30.7)
104 (25,4)
1,09 (0.66- 1.81)
ApoE allel frekvens
ε3
130 (85,5)
322 (80,1)
ε2
8 (5.3)
39 (9.7)
ε4
14 (9.2)
41 (10,2)
† eller justeres efter alder, køn , alkoholforbrug (som kontinuerlig variabel), packyears af rygning, grillet kødforbrug og familiy historie af kræft.
* henvisning kategori.
‡ mindst tre portioner frugt og grønt om dagen.
^ mindre end fire gange /måned.
tabel 2 Fordeling af ApoE polymorfi blandt gastrisk kræfttilfælde og kontroller
Cases ‡
Controls ^
Alle sager
Intestinal (n = 79)
Diffuse (n = 57)
n (%)
n (%)
OR (95% CI) †
OR (95% CI) †
OR (95% CI) †
ε3 /ε3
109 (71,71)
253 (62,94)
1 *
1 *
1 *
ε3 /ε2
15 (9,87)
63 (15,67)
0,43 (0,21 -0,91)
0,34 (0,13 - 0,92)
0,57 (0,23-1,40)
ε3 /ε4
27 (17,76)
75 (18,66)
0,70 (0,37-1,30)
0,75 (0,35-1,60)
0,64 (0,27-1,47)
ε2 /ε2
0 (0.00)
5 (1,24)
NC
NC
NC
ε2 /ε4
1 (0,66)
5 (1,24)
1,25 (0,10-15,10)
2,54 (0,21-31,17)
NC
ε4 /ε4
0 (0.00)
1 (0,25)
NC
NC
NC
ε3 /ε2 eller ε2 /ε2
15 (12.10)
68 (21,18)
0,40 (0,19-0,84)
0,31 (0,11 til 0,83)
0,53 (0,21-1,30)
ε3 /ε4 eller ε4 /ε4
27 (19,85)
76 (23.10)
0,68 (0,36-1,26)
0,71 (0,34-1,53)
0,62 (0,27-1,43).
‡ Apolipoprotein genotype blev målt i 152 tilfælde
^ Apolipoprotein genotype blev målt i 402 kontroller
† eller justeres efter alder,. .. køn, alkoholforbrug (som kontinuerlig variabel), packyears af rygning, grillet kødforbrug og familie historie af mavekræft
* Henvisning kategori
NC: ikke kan beregnes på grund af nogle få mange værdier
hyppighed apoE.
genotyper respekteret Hardy-Weinberg ligevægt (HWE) i kontrolgruppen (p
-værdi > 0,05, data ikke vist). Fra den multivariate analyse, individer, der bærer mindst en apoE
ε2 allel havde en signifikant 60% nedsat risiko for GC (OR = 0,40, 95% CI 0,19 - 0,84), sammenlignet med dem, homozygot for vildtype (ε3 /ε3) (tabel 2). Når resultaterne blev stratificeret efter tumor histologi, den signifikant sammenhæng mellem apoE
ε2 allel luftfartsselskaber og mavekræft syntes at være begrænset til den intestinale type, med en OR på 0,31 (95% CI: 0,11-0,83; Tabel 2). kvalitetskontrol viste 100% overensstemmelse mellem Begrænsning polymorfisme (RFLP) metode og DNA-sekventering.
Resultater af genet-miljø interaktion analyse er vist i tabel 3. Ingen statistisk signifikant interaktion opstod mellem ε4 eller ε2 allel (p-
værdi for interaktion > 0,05), køn, alder, alkoholforbrug eller frugt og grøntsager intake.Table 3 Interaktioner mellem apoE genotyper og udvalgte demografiske og livsstil variabler på GC risiko
variabler

Cases

Controls
Eventuelle e2
Cases
Controls
Enhver e4 Vejviser
OR (95% CI) † Vejviser OR (95% CI) †
Køn
kvinde, e3 /e3
51 ( 34,69)
96 (65,31)
1 *
51 (34,69)
96 (65,31)
1 *
kvinde, variant
8 (27,59)
21 (72,41)
0,58 (0,20-1,65)
12 (24.00)
38 (76.00)
0,55 (0,23-1,32)
Male, e3 /e3
57 (26,64)
157 (73,36)
0,48 (0,27-0,88)
57 (26,64)
157 (73,36)
0,49 (0,27-0,89)
Male, variant
7 (12.96)
47 (87,04)
0,49 (0,11-2,18)
14 (26,92)
38 (73.08)
1,52 (0,44-5,27)
P-værdi for interaktion °
0,347
0.660
Age
< 60 år, e3 /e3
25 (17,73)
116 (82,27)
1 *
25 (17,73)
116 (82,27)
1 *
< 60 år, variant
4 (12,50)
28 (87.50)
0,35 (0,07-1,68 )
7 (21,21)
26 (78,79)
0,70 (0,18-2,66)
≥ 60 år, e3 /e3
84 (38.01)
137 (61,99 )
2,85 (1,53-5,28)
84 (38.01)
137 (61,99)
2,84 (1,54-5,26)
≥ 60 år, variant
11 (21,57)
40 (78,43)
1,24 (0,21-7,26)
20 (28.57)
50 (71,43)
0,97 (0,21-4,36)
P værdi for interaktion
0,807
0,964
Alkohol drikker
aldrig, e3 /e3
45 (24.06)
142 (75,94)
1 *
45 (24.06)
142 (75,94)
1 *
aldrig, variant
5 (12,50)
35 (87.50)
0,29 (0,08-1,04)
12 (18.18)
54 ( 81,82)
0,62 (0,28-1,37)
Ever, e3 /e3
64 (36,57)
111 (63,43)
1,59 (0,88-2,86)
64 ( 36,57)
111 (63,43)
1,46 (0,81-2,62)
Ever, variant
10 (23,26)
33 (76,74)
1,78 (0,37-8,50)
15 (40,54)
22 (59,46)
1,28 (0,35-4,66)
P værdi for interaktion
0,468
0,707
Rygestatus
aldrig, e3 /e3
54 (29.03)
132 (70,97)
1 *
54 (29.03)
132 (70,97)
1 *
aldrig, variant
8 (20.51)
31 (79,49)
0,48 (0,18-1,28)
13 (20.00)
52 (80.00)
0,53 (0,23-1,23)
Ever, e3 /e3
54 (31,40)
118 (68,60)
1,41 (0,80-2,50)
54 (31,40)
118 (68,60)
1,39 (0,79-2,45 )
Ever, variant
7 (16.28)
36 (83,72)
0,68 (0,15-2,98)
13 (36,11)
23 (63,89)
1,98 (0,59 - 6,73)
P værdi for interaktion
0,609
0,271
Frugt og grøntsager indtag
lav, e3 /e3
28 (29,47)
67 (70,53)
1 *
28 (29,47)
67 (70,53)
1 *
Low, variant
2 (9,09)
20 (90,91)
0,14 (0,02 - 0,87)
9 (32,14)
19 (67,86)
0,84 (0,28 - 2.49)
høj, e3 /e3
78 (31.08)
173 (68,92)
1,17 (0,61-2,23)
78 (31.08)
173 (68,92)
1,12 (0,59-2,13) ​​
høj, variant
11 (19.30)
46 (80,70)
2,83 (0,38-21,05)
16 (22,86)
54 (77,14)
0,62 (0,16-2,37)
P værdi for interaktion
0,309
0,487
† eller justeres efter alder, køn, alkoholforbrug (som kontinuerlig variabel),
* Henvisning kategori packyears af rygning, grillet kød forbrug og familiy historie mavekræft..
° ved likelihood ratio test.
Median overlevelsestid fra gastrektomi var 19 måneder med ingen statistiske signifikante forskelle for apoE
ε2 eller ε4 allel luftfartsselskaber (p Drømmeholdet værdi af log-rank test > 0,05), selv når analysen var begrænset til 1 år og 2 år efter kirurgisk indgreb (data ikke vist). Cox regressionsanalyse viste ingen signifikant forskel i henhold til apoE
efter justering for alder, køn og stadion, selv efter stratificering af kræft histotype.
Diskussion
Vores case-kontrol undersøgelse af 156 gastriske kræfttilfælde og 444 hospital -baserede kontroller evalueret for første gang effekten af ​​apoE
genotyper og deres interaktioner med udvalgte demografiske og livsstilsfaktorer på risikoen for mavekræft blandt en italiensk befolkning. Ifølge vores resultater er apoE
ε2 allel forbundet med en 60% statistisk signifikant nedsat risiko for GC sammenlignet med vildtype ε3 allel. Denne beskyttende effekt var særlig stærk for den intestinale histotype. Vi kunne ikke, dog, at opdage signifikante interaktioner mellem apoE
alleler og livsstilsfaktorer. Derudover behøver apoE
genotyper ikke ud til at påvirke overlevelsestiden efter kirurgisk indgreb, selv når analysen var begrænset til de specifikke tumor histotypes.
Før fortolke vores resultater, bør der tages hensyn til nogle begrænsninger af undersøgelsen. For det første på grundlag af forekomsten af ​​apoE
alleler i vores kontrolpopulation, denne undersøgelse har a priori
90% kraft til at detektere en OR 0,40 for effekten af ​​apoE
ε2 allel (ved 5% signifikansniveau). Undersøgelsens stikprøve begrænser muligheden for at detektere statistisk signifikante gen-miljø interaktioner, vi imidlertid nødt til at øge stikprøvestørrelsen for at bekræfte vores resultater. For det andet data om serumcholesterolniveauer er ikke tilgængelige i vores undersøgelse befolkning, selv om deres anvendelighed vil være begrænset i betragtning af, sådanne niveauer påvirkes af selve canceren.
Virkningen af ​​apoE
genotyper tidligere har været undersøges i forhold til bryst, kolorektal, galdevejene, prostata, hoved- og halscancer, og blodkræftsygdomme [19-24], med modstridende resultater. En nyligt offentliggjort Mendelsk randomisering undersøgelse rettet det uløste spørgsmål om den kausale rolle af kolesterol i kræft ætiologi ved at undersøge, om nogle SNPs herunder apoE
, alle knyttet til livslang reduceret plasma LDL-C, er kausalt relateret til en øget risiko for kræft blandt to store danske generelle befolkningsundersøgelser [13]. Resultaterne viser et omvendt forhold mellem forekomsten af ​​kræft eller dødelighed og kolesteroltal, mens ingen effekt blev påvist for apoE
alleler. Selv med nogle begrænsninger på den valgte kohorte, Forfatterne konkluderer, at der er en betydelig mangel på kausal effekt af kolesterol på kræftrisikoen herunder gastrointestinale kræftformer. Derfor den tilsyneladende modsætning mellem resultater vedrørende plasma kolesterol og kræftrisiko i forhold til apo E
, kunne være tegn på en præklinisk cancer fase involverer øget optagelse af kolesterol fra blodet for cellevækst og spredning, og dermed sænke cholesterolemia forud for den kliniske diagnose kræft.
Som for mavekræft, to japanske kohorteundersøgelser [10, 18], og en svensk kohorte undersøgelse [16] rapporterede en stærk omvendt sammenhæng mellem serum kolesterol og risiko for mavekræft. Japanske undersøgelser har imidlertid fundet foreningen langt mindre stærkere efter udelukkelse af de tidlige 3-årige indfaldende tilfælde og avancerede tilfælde, hvilket antyder udviklingen af ​​mavekræft selv tendens til at sænke totale cholesterolniveauer. For at overvinde de spørgsmål i forbindelse med omvendt årsagssammenhæng eller confounding ved livsstilsfaktorer, besluttede vi at præcisere den rolle, kolesteroltallet på GC risiko ved at bruge en Mendel randomisering tilgang, nemlig ved at studere direkte effekten af ​​apoE
genotyper på en stor serie af italienske GC sager og kontroller. Vores resultater viser en statistisk signifikant 60% nedsat risiko for GC er forbundet med ε2 allelen.
Siden e2 luftfartsselskaber har en lavere serum cholesterolemia end ikke- e2 luftfartsselskaber, vores fund modsiger tidligere rapporterede observation, at lave serum kolesterol øger GC risiko [10, 16, 18]. ApoE har imidlertid mange andre funktioner ved siden sin velkendte rolle i lipid stofskiftet, som er potentielt involveret i kræftrisiko, da den er involveret i væv reparation, inflammatorisk og immunrespons, cellevækst og angiogenese [2], og viser antioxidant egenskaber [25]. Af betydning, ApoE-protein har visse antioxidative egenskaber, med aftagende antioxidantaktivitet i rækkefølgen ε2 > ε3 > ε4 alleler [25]. Selv om de molekylære mekanismer, der er ansvarlige for de antioxidante egenskaber af apoE
ikke afklaret endnu, har en række undersøgelser undersøgt de mekanismer, hvorigennem apoE
genotyper kan påvirke oxidative status-afhængige mediatorer eller biomarkører for oxidativt stress [26 -28]. ApoE
ε2-carrier rygning enkeltpersoner, der udsættes for nikotin, en vigtig kilde til oxidativ stress, har en næsten 30% højere samlede antioxidant status i forhold til apoE
ε3-bærere, målt som evnen til at hæmme peroxidase medieret dannelse af de 2,2-azino-bis-3-ethylbensthiazoline-6-sulfonsyre (ABTS +) radikal, mens apoE
ε4 forsøgspersoner viser en 30% øget oxideret LDL [26].
Oxidativ stress er afgivet af en ubalance mellem øget produktion af reaktive oxygenarter og et signifikant fald i evnen til antioxidante funktioner. Produktionen af ​​peroxider og frie radikaler forbundet med ændringer i den normale redoxtilstand af væv kan inducere toksiske virkninger, herunder oxidative DNA-skader, sammen med hypoxi og acidose, kan være stærkt involveret i patogenesen af ​​GC, da det kan betragtes årsagen som samt konsekvensen af ​​tumorprogression [29, 30]. Nogle beviser påvist en stor størrelse af oxidativt stress i GC tilfælde, hvis sammenlignet med raske individer, som påvist ved forhøjede niveauer af lipidperoxidation produkter og udtømning af enzymatiske og ikke-enzymatiske antioxidanter [31, 32]. På baggrund af alle disse resultater, resultaterne af vores undersøgelse, som rapporterer en beskyttende effekt af apoE
ε2 allel på GC, kan forklares med de forbedrede antioxidant egenskaber af ε2 allel sammenlignet med ε3 eller ε4 alleler, og dette beviser kan især være tilfældet for GC, hvis patogenese er stærkt påvirket af rygning relateret oxidativ stress [33]. Hvis vores model gælder, ville vi forvente en vekselvirkning mellem apoE
ε2 allel og rygning status, kan dog den begrænsede magt vores interaktion analyse har tilsløret den.
Konklusioner
Afslutningsvis vores undersøgelse giver for første gang tegn på en mulig beskyttende virkning af ε2 allelen mod GC. Yderligere undersøgelser er nødvendige for at bekræfte vores resultater og til at regne ud, hvis den beskyttende effekt er medieret gennem sænket kolesterol-niveau eller bedre antioxidant egenskaber.
Metoder
Study befolkning
Undersøgelsen emner blev udvalgt efter en case-kontrol studere design som tidligere beskrevet [34-36]. Kort fortalt tilfælde var fortløbende primære gastrisk adenocarcinom patienter med histologisk bekræftelse, der gennemgik en helbredende gastrektomi i "A. Gemelli" universitetshospital i perioden 2002-2010. Kontroller blev valgt blandt kræft-fri patienter, med en bred vifte af diagnoser, indlagt på samme hospital i den samme tidsperiode. Salg In tættere detaljer, omkring 50% af vores kontrolpopulation er lavet af bloddonorer mens den anden halvdel er lavet af patienter, der gennemgår kirurgiske indgreb som laparoskopisk kolecystektomi eller blindtarmsbetændelse eller lyskebrok og en mindre del af patienterne ramt af kroniske sygdomme som forhøjet blodtryk eller kronisk obstruktiv lungesygdom (KOL) undergår periodiske check-up.
Alle forsøgspersoner blev kaukasiere født i Italien. Undersøgelsen stikprøvestørrelse omfattede 156 tilfælde og 444 kontroller, med en deltagelse på 98% blandt tilfælde og 93% blandt kontroller. Ifølge Lauren klassificering, de fleste (58,1%) af gastrisk kræfttilfælde var tarm [37]. Tumorerne blev placeret i antrum (44,5%), i corpus (14,8%), i antrum /korpus (21,1%), i Cardia (3,1%), træstubbe (5,5%), i fundum (1,6% ), i Cardia /corpus (6,3%) og hele mave (3,1%). Baseret på de cytologiske og arkitektoniske atypisms samt de histo-patologiske rapporter [38], patienternes tumorer blev klassificeret i overensstemmelse hermed: 70,0% næppe differentierede (G3), 27,6% moderat differentieret (G2), 3,4% veldifferentieret (G1 ), mens 51,7% blev iscenesat i-II og 48,3% trinvis III-IV.
skriftligt informeret samtykke blev opnået fra alle forsøgspersonerne, hvorefter hvert individ leveret en venøs blodprøve, der blev opsamlet i EDTA-rør. Denne undersøgelse blev udført i overensstemmelse med Helsinki-deklarationen og blev godkendt af den etiske komité af Università Cattolica del Sacro Cuore.
Genotypning
DNA blev ekstraheret fra de perifere blod-lymfocytter, og genotypning af apoE
blev udført hjælp restriktionsfragmentlængde-polymorfisme (RFLP). Kort beskrevet 20 ng af genomisk DNA amplificeret under anvendelse af oligonukleotidprimere 5'-TCC AAG GAG CTG CAG GCG GCG CA-3 'og 5'-GCC CCG GCC TGG TAC ACT GCC A-3'. Reaktioner blev denatureret i 3 minutter ved 95 ° C, efterfulgt af 35 totrins-cykler bestående af 10 sekunder ved 95 ° C, derefter 10 sekunder ved 66 ° C. Efter cyklusserne blev afsluttet en endelig forlængelse på 5 minutter ved 95 ° C blev udført. En 10 pi alikvot af hver RFLP-produktet blev skåret med 5 enheder af Afl
III og en separat 10 pi alikvot blev fordøjet med 5 enheder af Hae
II. Både apoE
ε2 og apoE
ε3 alleler blev skåret med Afl
III at give produkter af 50 og 168 bp, mens apoE
ε4 allel forbliver uslebne på 218 bp. Brug Hae
II, både apoE
ε3and apoE ε4 alleler giver produkter af 23 og 195 bp, mens apoE
ε2 allel forbliver uslebne på 218 bp. De seks mulige genotyper blev tildelt ved analyse af mønstre fremstillet ved restriktionsfordøjelse. Som for kvalitetskontrol, blev 5% af prøverne også sekventeret, med standard DNA-prøver for hver apoE
genotype sendt af Seripa et al. [39].
Dataindsamling
Cases og kontroller blev interviewet af uddannede læger ved hjælp af en struktureret spørgeskema at indsamle oplysninger om demografiske data, cigaretrygning, drikke historie, kostvaner, fysisk aktivitet og familie historie af kræft med en særligt fokus på mavekræft. Deltagerne blev bedt om at fokusere på året forud for diagnosen (for kontrol året forud for interviewet dato), hvor besvare spørgsmål vedrørende livsstilsvaner. Rygning status blev kategoriseret som aldrig og nogensinde-rygere (herunder både nuværende og tidligere rygere). Pack-året blev beregnet som året røget ganget med det nuværende antal (eller forrige nummer, for dem, der havde forladt) af cigaretter røget per dag divideret med 20.
Frugt og grøntsager indtag blev kategoriseret som høj, hvis mindst tre portioner af frugt og grøntsager blev indtages dagligt, mens grillet kød indtag blev defineret som lav, hvis forbruget var mindre end 4 gange /måned. Familie historie af kræft, der er nævnt forældre, søskende og afkom. Data om tidligere Helicobacter pylori
infektion var kun tilgængelig for gastriske kræfttilfælde. Svarprocenten for at fuldføre interviewet var 92% for tilfælde og 97% for kontrol, med undtagelse af data vedrørende grillet kød indtag (ukendt i 10% af tilfældene og 12,8% af kontroller) og familiens historie af kræft (ukendt i 10% af tilfældene, og 8% af kontroller).
Statistisk analyse
forholdet mellem mavekræft og formodede risikofaktorer blev målt ved hjælp af de justerede odds ratio (OR) og deres 95% konfidensinterval (CI) er afledt af logistiske regressionsanalyse ved anvendelse af STATA software (version 10.0). Mulige risikofaktorer blev betragtet som confoundere hvis tilsætningen af ​​denne variabel til modellen ændrede OR med 10% eller mere, og en gang om confounder af eventuel skønnet hovedvirkning blev identificeret, blev det holdt i alle modeller. På baggrund af disse kriterier, vi kontrollerede for alder, køn, alkohol og grillet kød forbrug, cigaretrygning (pack-år) og familiær disposition for mavekræft. En χ 2-test af Hardy-Weinberg ligevægt (HWE) for de tre apoE
alleler blev udført blandt kontroller. For at undersøge, om effekten af ​​de valgte polymorfier blev modificeret af nogle miljømæssige eksponeringer blev en stratificeret logistisk regressionsanalyse udført, justering for konfoundere tidligere identificerede. Et gen-miljø interaktion analyse blev udført ved hjælp af dem, der udfører den homozygot vildtype genotype (ε3 /ε3 relateret til apoE
ε3 isoform) som referencegruppe. I denne analyse blev genotyperne kategoriseres som følger: tilstedeværelse af mindst én apoE
ε2 allel eller tilstedeværelsen af ​​mindst én apoE
ε4 allel (genotypen ε2 /ε4 blev ikke medtaget i enten kategori), der giver . to andre apoE
isoformer (apo E
2 og apo E
4)
I denne analyse alder blev kategoriseret binomial (< 60 og ≥ 60 år gammel), rygning status blev betragtet som nogensinde /aldrig cigaret rygere, og alkohol forbrug som drinkers /ikke-drikkende (sidstnævnte inklusive individer, hvis alkoholindtagelse var mindre end 7 g /dag). For at teste for interaktion mellem to eksponering variabler, blev sandsynligheden kvotientkriteriet anvendt, med de personer homozygote for vildtype genotype (ε3 /ε3) og ikke er udsat for de variabler af interesse anvendt som referencegruppe.
Samlet overlevelseskurver blev beregnet ved Kaplan-Meier produkt grænse metode fra tidspunktet for diagnosen, indtil døden. Hvis en patient ikke var død, blev overlevelse censureret på tidspunktet for det sidste besøg. Den log rank test blev anvendt til at vurdere forskelle mellem undergrupper. Risikoen for dødsfald relateret til ApoE isoformer blev anslået Cox 'proportionale farer model ved. Hazard ratio (HR) blev justeret for alder, køn og stadion, med vildtype-genotypen (ε3 /ε3) som referencegruppe. Desuden analyser blev stratificeret efter kræft histotype (tarm /diffus)
kilde til støtte
Ingen midler støtte erklæres
Forkortelser
ELLER:..
Odds forhold

• Immunhistokemisk sammenhæng mellem primære tumorer og lymfeknudemetastaser af gastrisk neuroendokrine karcinom
• Ændringer af E-cadherin og β-catenin i gastrisk kræft