Un estudio de casos y controles sobre el efecto de los genotipos de la apolipoproteína E en el riesgo de cáncer gástrico y progression

Un estudio de casos y controles sobre el efecto de los genotipos de la apolipoproteína E en el riesgo de cáncer gástrico y la progresión
Resumen Antecedentes

apolipoproteína E ( ApoE) es una proteína multifuncional que juega tanto un papel clave en el metabolismo del colesterol y los triglicéridos, y en la reparación de tejidos y la inflamación. La ApoE
gen (19q13.2) tiene tres isoformas principales codificadas por ε2, e3 y e4 alelos con el alelo ε4 asociado con la hipercolesterolemia y el alelo ε2 con el efecto contrario. Una relación inversa entre los niveles de colesterol y cáncer gástrico (CG) se ha informado anteriormente, aunque la relación entre genotipos y apoE
GC no ha sido explorado hasta ahora.
Métodos
Ciento cincuenta y seis cáncer gástrico casos y 444 controles hospitalarios fueron genotipo de la apoE polimorfismo (ε2, e3, e4 alelos). La relación entre GC y los factores de riesgo putativos se midió usando las odds ratio ajustada (OR) y sus intervalos de confianza del 95% (IC) a partir de análisis de regresión logística. Se realizó un análisis de la interacción gen-ambiente. El efecto de los genotipos apoE en la supervivencia de GC se exploró mediante un análisis de Kaplan-Meier y el modelo de regresión de riesgos proporcionales de Cox.
Resultados
Los sujetos que presenten al menos un alelo ε2 apoE
tienen una disminución significativa del 60% de riesgo de CG (OR = 0,40, IC del 95%: 0,19 - 0,84) en comparación con los homocigotos e3. No hay interacción significativa surgió entre el alelo ε4 o ε2 y exposiciones ambientales, ni ε2 o alelos e4 de afectar a la mediana de supervivencia, incluso después de corregir por edad, sexo y estadio.
Conclusiones
Nuestros informes de estudios por primera vez una efecto protector del alelo ε2 contra la GC, que podrían atribuirse en parte a las mayores propiedades antioxidantes de ε2 en comparación con los e3 e4 o alelos. Teniendo en cuenta el tamaño de la muestra del estudio, se necesitan más estudios para confirmar nuestros hallazgos.
Palabras clave
El cáncer gástrico apolipoproteína E epidemiología genética polimorfismo del gen de la interacción con el medio Antecedentes
apolipoproteína E (ApoE) es una pequeña glicoproteína que juega un importante papel en la depuración de la sangre de partículas ricas en colesterol, conocido como lipoproteínas remanentes [1]. Además de su papel bien reconocido en el metabolismo lipídico, ApoE se ha demostrado estar implicado en diversos procesos fisiopatológicos, incluyendo actividades antioxidantes y inmunes, así como un efecto modulador de la angiogénesis, el crecimiento de células tumorales y la inducción de metástasis [2]. El gen estructural (19q13.2) para apoE
es polimórfico con dos polimorfismos de nucleótido único (SNP) dentro de la región de codificación que resulta en tres alelos diferentes (ε2, ε3, e4) y seis apoE
genotipos (tres homocigotos e4 /ε4, ε3 /ε3 y ε2 /ε2, y tres heterocigotos ε4 /ε3, ε3 /ε2, ε4 /ε2), cada uno que muestran diferentes capacidades de unión al receptor [3, 4]. Un meta-análisis informó de una relación casi lineal entre apoE
genotipos y los niveles de colesterol total y LDL en suero (LDL-C), cuando los seis genotipos están clasificadas de la siguiente manera: ε2 /ε2, ε2 /ε3, ε2 /ε4, ε3 /ε3, ε3 /ε4, ε4 /ε4 [5]. En general, en comparación con los individuos con el alelo ε3, los niveles de colesterol total y LDL-C tienden a ser más bajos para los que tienen el alelo ε2 y más alto para los transportistas e4 [6]. En las últimas dos décadas, se han reportado estudios transversales y prospectivos que los niveles bajos de colesterol en suero se asocian con mayor riesgo no cardiovascular, especialmente el riesgo de cáncer [7-10], por lo tanto, los sujetos con niveles de colesterol total en suero baja son más propensos a sufren de cáncer. Hasta la fecha, la razón exacta de este hallazgo sigue siendo confuso. Diferentes explicaciones pueden darse como: (i) esta asociación podría reflejar teóricamente un papel causal directa de colesterol en la etiología del cáncer, o sea debido (ii) a algunos factores de confusión que causan tanto el colesterol bajo y el cáncer, o (iii) a ' causalidad inversa ", ya que los niveles bajos de colesterol podrían ser simplemente el efecto del cáncer en lugar de la causa [11].
Para responder plenamente la cuestión de si existe una relación causal entre el bajo nivel de colesterol y el cáncer, un enfoque epidemiológico alternativa denominada" mendeliana aleatorización "se puede usar para superar el problema de la causalidad inversa y confusión. De acuerdo con este enfoque, una variación genética (por ejemplo, apoE
) que sirve como un sólido proxy para una exposición del medio ambiente modificable (por ejemplo, nivel de colesterol en suero) se puede utilizar con el fin de hacer inferencias causales de una enfermedad [12]. Benn et al. [13] Recientemente se demostró que baja el LDL-C fueron fuertemente asociada con el cáncer en un gran estudio de cohorte danesa, mientras que una reducción en el colesterol LDL causada por SNP, incluyendo apo E
, no lo era. Al adoptar el enfoque mendeliana aleatorización, Benn llegó a la conclusión de que sus resultados están de acuerdo con los emergido de una cohorte de sujetos de edad avanzada tratados con pravastatina [14] y de la Atherosclerosis Risk in Communities estudio de cohortes [15], todo sugiere una baja LDL son probablemente debido a la etapa preclínica y cáncer por sí
no causan cáncer. comentario el papel de la apoE
genotipos sobre el cáncer gástrico (CG) etiología no ha sido hasta ahora exlpored, como Benn et al. [13] asimismo que todo cáncer gastrointestinal sin centrarse específicamente en la GC. Hasta la fecha, cuatro estudios de cohortes [10, 16-18] exploraron la relación entre el nivel de colesterol sérico y el desarrollo de GC. Entre ellos, dos estudios japoneses de cohortes [10, 18] y un estudio sueco [16] informó de que los niveles bajos de colesterol en suero son factores de riesgo independientes para el desarrollo de cáncer gástrico, especialmente el histotype intestinal. No se encontró asociación, sin embargo, se informó en un gran estudio de cohorte de Finlandia [17]. Dado que la cuestión de si hipocolesterolemia es un factor predisponente para la GC o una etapa preclínica de GC no se ha resuelto completamente, nuestro estudio de casos y controles de base hospitalaria pretende superar este problema mediante la que mira directamente la relación entre genotipos y apoE
GC, así como su interacción con la posible modificación del efecto.
resultados
características generales de la población de estudio, incluyendo 156 casos y 444 controles de GC se presentan en la Tabla 1. el consumo de alcohol se asoció con un mayor riesgo de CG con OR de 1,84 (IC del 95% = 1.10 a 3.7) y 3,29 (IC del 95% = 1,36-7,98) para los bebedores moderados y pesados, respectivamente. se detectó entre las personas que fuman más de 25 paquetes-año -: Un riesgo de CG casi se duplicó (3,60 1,06 O = 1.95, 95% CI). Además, la historia familiar de cáncer gástrico resultó estar asociado con un mayor riesgo de CG (OR CI = 3,14, 95%: 1,17 a 8,44; Tabla 1). Tabla 2 muestra la distribución de los seis genotipos E apo
entre los casos y controles de GC, con el genotipo ε3 /ε2 ser menos frecuencia representado en casos (9,87%) que en los controles (15,67%). La Tabla 1 odds ratio (95 IC%) para el cáncer gástrico en función de variables seleccionadas y su distribución de frecuencias entre los 156 casos de cáncer gástrico y 444 controles Fútbol
casos controles


OR (IC del 95%) †

n (%)
n (%)
Edad (media ± DE)
67.05 ± 11.33 59.04 ± 16.00

El sexo masculino
82 (53,2)
261 (58,8)
0,50 (0,30 a 0,83)
bebedores de alcohol
0-6 g /día
60 (40,5)
251 (57,6) 1 *

7-29 g /día
71 (48,0)
163 (37,4)
1.84 (1.10- 3.07) Hotel > = 30 g /día
17 (11,5)
22 (5,0)
3.29 (1.36- 7.98)
El consumo de tabaco
Nunca
78 (50,7)
238 (54,2)
1 *
siempre
76 (49,3)
201 (45,8)
1.51 (0.94- 2.45)
pack-años de fumar
0
74 (51,7)
245 (57,0) 1 *

1-25
31 (21,7)
111 (25,8)
1.40 (0.78- 2.50) Hotel > 25 38
(26.6)
74 (17,2)
1,95 (1.06- 3.60)
ingesta de frutas y hortalizas de alta
‡
41 (27,5)
116 (27,2) 1 *

bajo
108 (72,5)
310 (72,8)
1.18 (0.70- 1.98)
carne a la parrilla
baja ^
106 (75,7)
314 (81,1 ): perfil 1 *
alto
34 (24,3)
73 (18,9)
1.25 (0.72- 2.15)
La actividad física
Cualquier
29 (18,6)
93 (20,9) 1 *

Ninguno
127 (81,4)
351 (79,1)
0,81 (0,45 1,45)
antecedentes familiares de cáncer
n
87 (62,2)
291 (71,2) 1 *

antecedentes familiares de cáncer gástrico
10 (7.1) página 14 (3.4)
3.14 (1.17- 8.44)
antecedentes familiares de cáncer de otra
43 (30,7)
104 (25,4)
1.09 (0.66- 1.81)
frecuencia del alelo ApoE
ε3
130 (85,5)
322 (80,1)
ε2 página 8 (5.3)
39 (9,7)
ε4 página 14 (9.2)
41 (10,2)
† o ajustados por edad, género , el consumo de alcohol (como variable continua), los paquetes-año de fumar, el consumo de carne a la parrilla y la historia familiy de cáncer.
* categoría de referencia.
‡ al menos tres porciones de frutas y verduras por día.
^ menos de cuatro veces /mes.
Tabla 2 Distribución de la ApoE polimorfismo entre casos de cáncer gástrico y controles
casos ‡
controles ^
Todos los casos
intestinal (n = 79) guía empresas difusa (n = 57)
n (%)
n (%) guía empresas OR (95% IC) †
OR (95% IC) †
OR (IC del 95%) †
ε3 /ε3
109 (71.71)
253 (62.94)
1 * 1 *

1 *
ε3 /ε2
15 (9,87)
63 (15.67)
0.43 (0.21 -0.91)
0,34 (0,13 - 0,92)
0,57 (0,23 - 1,40)
ε3 /ε4
27 (17,76)
75 (18.66)
0,70 (0,37 - 1,30)
0,75 (0,35 - 1,60)
0,64 (0,27 - 1,47)
ε2 /ε2
0 (0.00) página 5 (1,24)
NC
NC NC

ε2 /ε4
1 (0.66) página 5 (1,24)
1,25 (0,10 - 15.10)
2,54 (0,21 - 31.17)
NC
ε4 /ε4
0 (0.00) 1
(0,25)
NC NC

NC
ε3 /o ε2 ε2 /ε2
15 (12.10)
68 (21.18)
0,40 (0,19 - 0,84)
0,31 (0,11 - 0,83)
0,53 (0,21 - 1,30)
ε3 /ε4 ε4 o /ε4
27 (19.85)
76 (23.10)
0,68 (0,36 - 1.26)
0,71 (0,34 - 1,53)
0,62 (0,27 - 1,43).
‡ apolipoproteína genotipo se mide en 152 casos
^ apolipoproteína genotipo se mide en 402 controles
† o ajustados por edad,. .. el género, el consumo de alcohol (como variable continua), los paquetes-año de fumar, el consumo de carne a la parrilla y antecedentes familiares de cáncer gástrico
* Categoría de referencia
NC: no se puede calcular debido a las pocas muchos valores
Frecuencia de apoE.
genotipos respetan el equilibrio de Hardy-Weinberg (HWE) en el grupo control (p-valor
> 0,05, datos no mostrados). A partir del análisis multivariado, los individuos que presenten al menos un alelo ε2 apoE
tuvieron un significativo 60% menos de riesgo de CG (OR = 0,40, IC del 95%: 0,19 - 0,84) en comparación con los homocigotos para el tipo salvaje (ε3 /ε3) (Tabla 2). Cuando los resultados fueron estratificados de acuerdo a la histología del tumor, la asociación significativa entre la apoE
portadores del alelo ε2 y cáncer gástrico parece estar limitada al tipo intestinal, con una OR de 0,31 (IC del 95%: 0.11 - 0,83; Tabla 2). Los controles de calidad mostraron 100% de concordancia entre el método de polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción (RFLP) y secuenciación de ADN.
Los resultados del análisis de la interacción gen-ambiente se presentan en la Tabla 3. Sin interacción estadísticamente significativa surgió entre el alelo ε4 o ε2 (p-
valor para la interacción > 0,05), el género, la edad, el consumo de alcohol o de las frutas y hortalizas intake.Table 3 Las interacciones entre genotipos apoE y seleccionadas las variables demográficas y de estilo de vida en las variables de riesgo GC

Protectores
Controles
Cualquier e2
Casos Controles

Cualquier e4

O (IC del 95%) †
OR (IC del 95%) †
Sexo Femenino
, e3 /e3
51 ( 34.69)
96 (65.31)
1 *
51 (34.69)
96 (65.31)
1 *
Mujer, variante página 8 (27.59)
21 (72.41)
0,58 (0,20 - 1,65) página 12 (24.00)
38 (76.00)
0,55 (0,23 - 1.32)
Hombre, e3 /e3
57 (26.64)
157 (73.36)
0,48 (0,27 - 0,88)
57 (26.64)
157 (73.36)
0,49 (0,27 - 0,89)
Hombre, variante
7 (12,96)
47 (87.04)
0,49 (0,11 - 2.18) página 14 (26.92)
38 (73.08)
1,52 (0,44 - 5.27)
P valor de la interacción °
0,347 0,660

Edad Hotel < 60 años, e3 /e3
25 (17,73)
116 (82.27)
1 *
25 (17,73)
116 (82.27)
1 * Hotel < 60 años, variante página 4 (12.50): perfil 28 (87.50)
0,35 (0,07 - 1.68 ) página 7 (21.21)
26 (78.79)
0,70 (0,18 - 2,66)
≥ 60 años, e3 /e3
84 (38.01)
137 (61.99 )
2.85 (1.53 - 5.28)
84 (38.01)
137 (61.99)
2.84 (1.54 - 5.26)
≥ 60 años, variante página 11 (21.57)
40 (78.43)
1,24 (0,21 - 7,26)
20 (28.57)
50 (71.43)
0,97 (0,21 - 4.36)
valor de p para la interacción
0,807 0,964
beber alcohol
de
Nunca, e3 /e3
45 (24.06)
142 (75.94)
1 *
45 (24.06)
142 (75.94)
1 *
Nunca, variante página 5 (12.50)
35 (87.50)
0,29 (0,08 - 1,04) página 12 (18.18)
54 ( 81.82)
0,62 (0,28 - 1.37)
Ever, e3 /e3
64 (36.57)
111 (63.43)
1,59 (0,88 - 2,86)
64 ( 36.57)
111 (63.43)
1,46 (0,81 - 2,62)
Ever, variante
10 (23.26)
33 (76.74)
1,78 (0,37 - 8,50)
15 (40.54)
22 (59.46)
1,28 (0,35 - 4.66)
valor de p para la interacción
0,468 0,707

El consumo de tabaco
Nunca, e3 /e3
54 (29.03)
132 (70.97)
1 *
54 (29.03)
132 (70.97)
1 *
Nunca, variante
8 (20.51)
31 (79.49)
0,48 (0,18 - 1.28) página 13 (20.00)
52 (80.00)
0,53 (0,23 - 1.23)
Ever, e3 /e3
54 (31.40)
118 (68.60)
1,41 (0,80 - 2,50)
54 (31.40)
118 (68.60)
1.39 (0.79 - 2.45 )
Ever, variante página 7 (16.28)
36 (83.72)
0,68 (0,15 - 2.98) página 13 (36.11)
23 (63.89)
1,98 (0,59 - 6,73)
valor de p para la interacción

0,609 0,271

ingesta de frutas y hortalizas
bajo, e3 /e3
28 (29.47)
67 (70.53)
1 *
28 (29.47)
67 (70.53)
1 *
bajo, variante página 2 (9.09)
20 (90.91)
0,14 (0,02 - 0,87) página 9 (32.14) página 19 (67.86)
0,84 (0,28 - 2.49)
alta, e3 /e3
78 (31.08)
173 (68.92)
1,17 (0,61 - 2.23)
78 (31.08)
173 (68.92)
1,12 (0,59 - 2.13)
alta, variante página 11 (19.30)
46 (80.70)
2,83 (0,38 - 21.05)
16 (22.86)
54 (77.14)
0,62 (0,16 - 2.37)
valor de p para la interacción
0,309 0,487

† o ajustados por edad, sexo, consumo de alcohol (como variable continua), los paquetes-año de fumar, el consumo de carne a la parrilla y la historia familiy del cáncer gástrico.
* Categoría de referencia.
° mediante la prueba de razón de verosimilitud.
La mediana de supervivencia de gastrectomía fue de 19 meses, sin diferencias estadísticamente significativas de la apoE
portadores del alelo ε4 o ε2 (p-valor de la prueba
>log-rank; 0,05), incluso cuando el análisis se restringió a 1 año y 2 años después de la intervención quirúrgica (datos no presentados). El análisis de regresión de Cox mostró diferencias significativas según la apoE
después de ajustar por edad, sexo y estadio, incluso después de la estratificación por histotype cáncer.
Discusión
Nuestro estudio de casos y controles de 156 casos de cáncer gástrico y 444 del hospital controles basados ​​evaluados por primera vez el efecto de la apoE
genotipos y sus interacciones con los factores demográficos y de estilo de vida seleccionados en el riesgo de cáncer gástrico en una población italiana. De acuerdo con nuestros resultados, la apoE
alelo ε2 se asocia con un 60% estadísticamente significativa disminución en el riesgo para los GC en comparación con la de tipo salvaje ε3 alelo. Este efecto protector fue particularmente fuerte para la histotype intestinal. No fue posible, sin embargo, para detectar interacciones significativas entre apoE
alelos y factores de estilo de vida. Además, apoE
genotipos no parecen influir en el tiempo de supervivencia después de la intervención quirúrgica, incluso cuando el análisis se restringió a los histotypes tumorales específicos.
Antes de interpretar nuestros resultados, algunas limitaciones del estudio deben tenerse en cuenta. En primer lugar, sobre la base de la prevalencia de la apoE
alelos en la población control, este estudio tiene a priori
90% de potencia para detectar un OR de 0,40 para el efecto de la apoE
alelo ε2 (en nivel de significación del 5%). tamaño de la muestra del estudio limita la posibilidad de detectar estadísticamente significativas interacciones entre genes y medio ambiente, sin embargo, tenemos que aumentar el tamaño de la muestra con el fin de confirmar nuestros resultados. En segundo lugar, los datos sobre los niveles de colesterol en el suero no están disponibles en nuestra población de estudio, a pesar de su utilidad se limita a la vista del hecho de tales niveles son afectados por el cáncer en sí.
El efecto de apoE
genotipos ha sido previamente investigado en relación con mama, colorrectal, el tracto biliar, próstata, cáncer de cabeza y cuello, y las neoplasias malignas hematológicas [19-24], con resultados contradictorios. Un estudio de la aleatorización mendeliana publicado recientemente abordó la cuestión sin resolver sobre el papel causal de colesterol en la etiología del cáncer mediante el examen de si algunos SNPs incluyendo apoE
, todos vinculados a toda la vida reducida en plasma de LDL-C, están causalmente relacionada con un mayor riesgo de cáncer entre las dos estudios de población general daneses grandes [13]. Los resultados muestran una relación inversa entre la incidencia de cáncer o de los niveles de mortalidad y de colesterol, mientras que no se ha demostrado efecto beneficioso para la apoE
alelos. Incluso con algunas limitaciones en la cohorte seleccionado, autores concluyen que hay una falta sustancial de efecto causal de colesterol en el riesgo de cáncer, incluyendo cánceres gastrointestinales. En consecuencia, la aparente contradicción entre los resultados relativos niveles de colesterol en plasma y el riesgo de cáncer con respecto a apo E
, podría ser indicativa de una etapa preclínica cáncer que implica el aumento de la absorción de colesterol de la sangre para el crecimiento y la proliferación celular, reduciendo así la colesterolemia antes del diagnóstico de cáncer clínico.
en cuanto a cáncer de estómago, dos estudios de cohortes japoneses [10, 18] y un estudio de cohorte sueca [16] informó de una fuerte asociación inversa entre los niveles séricos de colesterol y el riesgo de cáncer gástrico. estudios japoneses, sin embargo, encontraron la asociación más fuerte mucho menos después de la exclusión de los casos incidentes de 3 años y los primeros casos avanzados, lo que sugiere el desarrollo de cáncer de estómago en sí tiende a disminuir los niveles de colesterol total. Para superar los problemas relacionados con la causalidad o la confusión por factores de estilo de vida inversa, decidimos aclarar la función de los niveles de colesterol en riesgo de CG mediante el uso de un enfoque de aleatorización mendeliana, es decir, mediante el estudio directamente el efecto de la apoE
genotipos en una gran serie de los casos y los controles de GC italianos. Nuestros resultados muestran una reducción estadísticamente significativa del 60% menos de riesgo de GC asociado con el alelo ε2.
Desde portadores ε2 tienen una colesterolemia en suero inferior a los transportistas no ε2, nuestro hallazgo contradice la observación informó anteriormente que los niveles bajos de colesterol en suero aumentan el riesgo de CG [10, 16, 18]. ApoE, sin embargo, tiene muchas otras funciones al lado de su papel bien conocido en el metabolismo de lípidos, que están potencialmente implicados en el riesgo de cáncer, ya que está implicado en la reparación de tejidos, la respuesta inflamatoria e inmune, el crecimiento celular y la angiogénesis [2], y muestra antioxidante propiedades [25]. De importancia, la proteína ApoE tiene ciertas propiedades antioxidantes, con la disminución de la actividad antioxidante en el orden ε2 > ε3 > alelos e4 [25]. Incluso si los mecanismos moleculares responsables de las propiedades antioxidantes de la apoE
no está aclarada, sin embargo, varios estudios han examinado los mecanismos mediante los cuales apoE
genotipos podrían afectar a los mediadores de estado dependiente oxidativos o biomarcadores de estrés oxidativo [26 -28]. ApoE
individuos ε2-portadora fumadores, que están expuestos a la nicotina, una fuente importante de estrés oxidativo, tienen un estado antioxidante total casi un 30% mayor en comparación con apoE
e3-portadoras, medida como la capacidad de inhibir la peroxidasa la formación mediada de los 2,2-azino-bis-3-ethylbensthiazoline-6-sulfónico (ABTS +) radical, mientras que apoE e4
sujetos muestran un 30% de aumento de LDL [26] oxida.
el estrés oxidativo es dado por un desequilibrio entre el aumento de la producción de especies reactivas del oxígeno y una disminución significativa en la capacidad de funciones antioxidantes. La producción de peróxidos y radicales libres asociada con cambios en el estado redox normal de los tejidos puede inducir efectos tóxicos, incluyendo daño oxidativo del ADN que, junto con hipoxia y acidosis, podría estar involucrado en gran medida en la patogénesis de la GC, ya que puede ser considerada la causa como así como la consecuencia de la progresión del tumor [29, 30]. Algunas pruebas mostró una amplia magnitud del estrés oxidativo en los casos de GC en comparación con individuos sanos, tal como se demuestra por los niveles elevados de productos de peroxidación de lípidos y el agotamiento de los antioxidantes enzimáticos y no enzimáticos [31, 32]. En vista de todos estos hallazgos, los resultados de nuestro estudio, que informa de un efecto protector de la apoE
alelo ε2 en GC, podrían explicarse por las mejores propiedades antioxidantes del alelo ε2 en comparación con los e3 e4 o alelos, y esto evidencia puede ser especialmente cierto para GC, cuya patogénesis está fuertemente afectada por la relacionada con el tabaquismo estrés oxidativo [33]. Si nuestro modelo es válido, es de esperar una interacción entre apoE
estado alelo ε2 y el tabaquismo, sin embargo, el poder limitado de nuestro análisis de la interacción que puede haber oscurecido.
Conclusiones
En conclusión, nuestro estudio prevé la primera vez pruebas de un posible efecto protector del alelo ε2 contra GC. Se requieren estudios adicionales para confirmar nuestros resultados y para averiguar si el efecto protector está mediada por el nivel de colesterol reducido o mejores propiedades antioxidantes.
Métodos Estudio de población

Se seleccionaron los sujetos de estudio de acuerdo a una de casos y controles diseño del estudio como se describe anteriormente [34-36]. En pocas palabras, los casos fueron pacientes con adenocarcinoma gástrico primario consecutivos, con confirmación histológica, que se sometió a una gastrectomía curativa en el Hospital Universitario "A. Gemelli" durante el período 2002-2010. Los controles fueron seleccionados a partir de pacientes libres de cáncer, con una amplia variedad de diagnósticos, admitido en el mismo hospital durante el período de tiempo idéntico.
En detalles más estrechos, alrededor del 50% de nuestra población de control está hecho de donantes de sangre mientras que la otra media está hecho de los pacientes sometidos a intervenciones quirúrgicas como la colecistectomía laparoscópica o apendicitis o una hernia inguinal y una parte más pequeña de los pacientes afectados por enfermedades crónicas como la hipertensión o la Enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) sometidos a la publicación chequeo. MyBestPlay Todos los sujetos fueron caucásicos nacidos en Italia. El tamaño de la muestra de estudio comprendió 156 casos y 444 controles, con una tasa de participación del 98% entre los casos y el 93% de los controles. Según la clasificación de Lauren, la mayoría (58,1%) de los casos de cáncer gástrico fueron intestinal [37]. Los tumores se encuentran en el antro (44,5%), en el corpus (14,8%), en el antro /corpus (21,1%), en el cardias (3,1%), tocones (5,5%), en el Fundum (1,6% ), en el cardias /corpus (6,3%) y todo el estómago (3,1%). Con base en los atypisms citológicas y arquitectónicos, así como los informes histopatológicos [38], los tumores de los pacientes se clasificaron en consecuencia: 70,0% escasamente diferenciado (G3), 27,6% moderadamente diferenciado (G2), 3,4% bien diferenciado (G1 ), mientras que el 51,7% se realizaron I-II y el 48,3% en escena III-IV.
se obtuvo el consentimiento informado por escrito de todos los sujetos de estudio, después de lo cual cada sujeto presentó una muestra de sangre venosa que se recogió en tubos con EDTA-revestido. Este estudio se realizó de acuerdo con la Declaración de Helsinki y fue aprobado por el comité de ética de la Universidad Católica del Sacro Cuore.
Genotipado
ADN fue extraído de los linfocitos de sangre periférica, y se realizó la determinación del genotipo de la apoE
utilizando los fragmentos de restricción polimorfismo de longitud (RFLP). Brevemente, 20 ng de ADN genómico amplificado utilizando cebadores de oligonucleótidos 5'-AAG TCC GAG CTG CAG GCG GCG CA-3 'y 5'-CCG CCG GCC TGG TAC ACT GCC A-3'. Las reacciones se desnaturalizaron durante 3 minutos a 95 ° C, seguido de 35 ciclos de dos etapas que consta de 10 segundos a 95 ° C después de 10 segundos a 66 ° C. Después de los ciclos se completaron una extensión final de 5 minutos a 95 ° C se realizó. Una alícuota de 10 l de cada producto de RFLP fue digerido con 5 U de Afl
III y una alícuota de 10 l separada se digirió con 5 U de Hae
II. Tanto apoE
ε2 y apoE
alelos e3 se cortaron con Afl III
para producir productos de 50 y 168 pb, mientras que el alelo ApoE ε4
permanece sin cortar en 218 pb. Usando Hae
II, tanto apoE
ε3and apoE e4 alelos producir productos de 23 y 195 pb, mientras que el alelo ε2 apoE
permanece sin cortar en 218 pb. Las seis posibles genotipos fueron asignados por el análisis de los patrones producidos por la digestión de restricción. En cuanto a los controles de calidad, también se secuenciaron 5% de las muestras, con muestras de ADN estándar para cada apoE
genotipo enviado por Seripa et al. [39]. COLECCIÓN datos
Los casos y controles fueron entrevistados por médicos entrenados utilizando un cuestionario estructurado para recopilar información sobre los datos demográficos, historia de tabaquismo, beber, hábitos dietéticos, la actividad física y la historia familiar de cáncer con una centrándose especialmente en el cáncer gástrico. Se pidió a los participantes a centrarse en el año previo al diagnóstico (para los controles del año anterior a la fecha de la entrevista) al responder a preguntas relacionadas con los hábitos de estilo de vida. El nivel de tabaquismo fue categorizado como nunca y nunca fumadores (incluyendo tanto los fumadores actuales y anteriores). paquetes-año se calcularon como ahumados años multiplicado por el número actual (o el número anterior, para los que habían dejado de fumar) de cigarrillos fumados por día, dividido por 20.
ingesta de frutas y verduras fue clasificada como alta si por lo menos tres porciones de frutas y verduras se consumen a diario, mientras que el consumo de carne a la parrilla se definió como bajo si el consumo era de menos de 4 veces /mes. Antecedentes familiares de cáncer se refirió a los padres, hermanos e hijos. Los datos relativos anterior Helicobacter pylori
infección estaban disponibles sólo para los casos de cáncer gástrico. La tasa de respuesta para completar la entrevista fue del 92% en los casos y el 97% de los controles, con la excepción de los datos relativos al consumo de carne a la parrilla (desconocido en el 10% de los casos y el 12,8% de los controles) y la historia familiar de cáncer (desconocido en 10% de los casos y el 8% de los controles). El análisis estadístico
La relación entre el cáncer gástrico y los factores de riesgo putativos se midieron utilizando los odds ratio ajustada (OR) y su intervalo de confianza del 95% (IC) derivados de logística El análisis de regresión utilizando el software STATA (versión 10.0). Los posibles factores de riesgo fueron considerados como factores de confusión si la adición de esta variable al modelo cambió el quirófano en un 10% o más, y una vez que se identificó un factor de confusión de cualquier efecto principal estimada, que se mantuvo en todos los modelos. Sobre la base de estos criterios, se controló la edad, el sexo, el alcohol y el consumo de carne a la parrilla, el tabaquismo (paquetes-año) y antecedentes familiares de cáncer gástrico. Un χ 2-prueba del equilibrio de Hardy-Weinberg (HWE) para los tres apoE
alelos se realizó entre los controles. Con el fin de examinar si el efecto de los polimorfismos seleccionados se modificó por algunas exposiciones ambientales, se realizó un análisis de regresión logística estratificado, con ajuste de los factores de confusión previamente identificados. Un análisis de la interacción gen-ambiente se llevó a cabo mediante el uso de los portadores del genotipo de tipo salvaje homocigotos (ε3 /ε3 relacionada con la apoE isoforma
ε3) como grupo de referencia. En este análisis, los genotipos se clasificaron de la siguiente manera: la presencia de al menos un alelo ApoE
ε2 o presencia de al menos un alelo ApoE ε4
(el genotipo ε2 /ε4 no se incluyó en una u otra categoría), proporcionando la otros dos. apoE
isoformas de apo e (página 2 y apo e
4): perfil En este análisis, la edad se clasifica de forma binomial (< 60 y ≥ 60 años), el tabaquismo se considera como nunca /nunca fumadores de cigarrillos y el consumo de alcohol como bebedores /no bebedores (esta última incluye las personas cuyo consumo de alcohol fue de menos de 7 g /día). Con el fin de probar la interacción entre dos variables de exposición, se utilizó la prueba de razón de verosimilitud, con los individuos homocigotos para el genotipo de tipo salvaje (ε3 /ε3) y no expuestos a las variables de interés utilizado como grupo de referencia.
General las curvas de supervivencia se calcularon por el método del producto límite de Kaplan-Meier de la fecha del diagnóstico hasta la muerte. Si un paciente no estaba muerto, la supervivencia fue censurado en el momento de la última visita. Se utilizó la prueba de log rank para evaluar las diferencias entre los subgrupos. El riesgo de muerte relacionada con isoformas de ApoE se estimó mediante el modelo de riesgos proporcionales de Cox. Las razones de riesgo (HR) se ajustaron por edad, sexo y estadio, con el genotipo de tipo salvaje (ε3 /ε3) como grupo de referencia. Además, los análisis se estratificó según histotype cáncer (intestinal /difusa)
Fuente de apoyo
Sin el apoyo financiero que se ha declarado
abreviaciones
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Odds ratio

• inmunohistoquímico coherencia entre los tumores primarios y las metástasis en los ganglios linfáticos de neuroendocrino gástrica consistencia inmunohistoquímica carcinoma
• Las alteraciones de la E-cadherina y β-catenina en el cáncer gástrico