Kväveoxid-en endogen hämmare av magsyrasekretion i isolerade humana gastriska körtlar

Kväveoxid-en endogen hämmare av magsyrasekretion i isolerade humana gastriska körtlar Bild Sammanfattning
Bakgrund
Endothelial kväveoxidsyntas (eNOS) har upptäckts i den glandulära delen av den humana magslemhinnan. Vidare har kväveoxid (NO) visat sig påverka gastrisk sekretion i olika djurmodeller. Den aktuella studien genomfördes för att undersöka påverkan av exogent och endogent härledd NO på histamine- och cAMP-stimulerad magsyrautsöndring i isolerade humana oxyntic körtlar.
Metoder
Oxyntic körtlar isolerades från humana gastriska biopsier och därefter pre -behandlade med NO-givare och kväveoxidsyntasinhibitorer och sedan utsatt för histamin eller dibutyryl-cAMP (db-cAMP). Den sekretoriska responsen av körtlar bestämdes som ackumulering av [ 14C] aminopyrin.
Resultat
histamine- eller db-cAMP-inducerade syrasekretionen dämpas av L-arginin, en känd källa av endogen NO , och även av den NO-donatorer natriumnitroprussid (SNP) och S-nitroso-N-acetyl-penicillamin (SNAP). Förbehandling med endera av de NOS-inhibitorer N G-nitro-L-arginin-metylester (L-NAME) eller N G-nitro-L-arginin (L-NNA) förstärkt den sekretoriska respons.
Slutsats
Våra resultat visar att NO inhiberar magsyrasekretion i isolerade humana gastriska körtlar, och att det finns endogen bildning av NO i den glandulära epitelet i närheten av parietalcellerna.
bakgrund
Kväveoxid (NO) produceras från L-arginin i en reaktion som katalyseras av enzymet kväveoxidsyntas (NOS) [1, 2]. NO är en viktig biologisk signalmolekyl som påverkar cirkulationen genom att reglera vaskulär glatt muskeltonus och modulera systemiskt blodtryck. Vidare är NO involverad i neurotransmission; Det är en kritisk faktor i det inflammatoriska svaret och immunitet [3-5]; och det har visat sig utöva positiva effekter på mucosal försvar i mag-tarmsystemet. I flera studier (för översikt, se [6]), verkade kemiskt inducerad mukosal skada som skall reduceras genom samtidig tillsats av NO och försämras genom avlägsnande av NO från magslemhinnan. En förklaring till dessa resultat kan vara att NO ökar slemhinnans blodflödet [7], och det har föreslagits att NO förstärker frisättningen av slem [8]. Det är troligt att NO även är involverat i regleringen av andra sekretoriska processer i det gastrointestinala systemet. Takeuchi och medarbetare [9] har rapporterat att NO inhiberar utsöndringen av duodenal bikarbonat, medan andra forskare har föreslagit att bikarbonat utsöndring stimuleras av NO [10, 11]. Dessutom har flera studier indikerat att NO påverkar utsöndringen av magsyra [12-16].
Djurförsök har gett motstridiga uppgifter om samspelet mellan NO och magsyrasekretion. Till exempel har studier in vitro visat att NO stimulerar utsöndringen av magsyra i mus [17, 18] och oxgroda [19]. Dessutom har liknande resultat erhållits i hundar [12]. Emellertid har andra undersökningar visat att NO hämmar magsyrasekretion i råtta [13, 14], i mag körtlar isolerade från kaniner [15], och i slemhinnan från paddor [16]. Studier av människor har lämnat data som indikerar att NO både kan hämma och öka intragastriskt pH [20, 21], men det är ännu inte känt hur denna förening deltar i utsöndring av magsyra hos människa.
I en tidigare studie fann vi morfologiska stöd som endogen NO spelar en roll i regleringen av parietalcellens funktion [22]. Även de immunohistokemiska data från denna undersökning avslöjade närvaron av endogen NOS i epitelceller i normala mänskliga oxyntic slemhinna, närmare bestämt, i både yta slemhinnor celler och endokrina celler. Dessutom observerade vi att det fanns nära kontakter mellan eNOS-positiva celler och parietalcellerna antingen på grund av eNOS-positiva celler kontaktas parietalceller via cytoplasmatiska processer eller var invaginated av en parietalcellens. Baserat på dessa upptäckter, tillsammans med de kemiska egenskaperna hos NO, drog vi slutsatsen att NO härleds från de endokrina-liknande celler kan vara en parakrin regulator av magsyrasekretion. I den aktuella studien, vårt mål var att kontrollera effekten av exogena NO på histamine- och cAMP-stimulerad magsyrautsöndring i människor, och även för att bestämma om endogent härledd NO har en funktionell effekt på mänskliga parietalceller.
Metoder
ämnen och etiskt godkännande
Tjugofyra friska män i åldrarna 22 till 31 år rekryterades som betalda frivilliga. Urvalskriterierna anges att ämnena skulle vara fri från sjukdom och borde inte ha tagit några mediciner eller indränkta alkohol minst en vecka före undersökningen. De män fastat under åtminstone sex timmar före undersökning.
Pharyngeal anestesi inducerades med lidokain spray (Xylocain ®, AstraZeneca, Södertälje, Sverige), varefter rutinen gastroskopi genomfördes med hjälp av en Olympus GIF-100 endoskop. Nypa biopsitång (Olympus FB 24K-1) användes för att ta vävnadsprover från större krökning, omedelbart distalt om fundus. I alla ämnen, dök magslemhinnan vara normal, både makroskopiskt och histologiskt. Alla försökspersoner testade negativa för Helicobacter pylori
infektion i ureasutandningstest (Diabact ® UBT 50 mg 13C-urea, Diabact AB, Uppsala, Sverige).
De experimentella förfaranden har godkänts av regional etikkommitté för mänskliga forsknings vid Universitetssjukhuset i Linköping, Sverige (ärende nr. 02-039), och alla försökspersoner gav informerat samtycke.
sekretorisk studie
Isolering och inkubation av mag körtlar sälja The aktuella experiment var baserat på en teknik som först beskrevs 1976 för användning i kaniner in vitro [23] och är nu väl etablerad för indirekt bestämning av magsyrasekretion inducerad av olika stimuli. Metoden för att isolera mag körtlar utvecklades ursprungligen för djurvävnad, men det senare förfinats så att det även skulle kunna tillämpas på små mängder av mänsklig vävnad [24]. Sälja The humana oxyntic slemhinnor biopsier som används i vår studie tvättades och lagras längre än 15 minuter i iskall syre fosfatbuffrad saltlösning (PBS). De vävnadsprover skars i mindre bitar med en sax och överfördes till syre (100% O 2) kollagenas enzymlösning (130,0 mM NaCl, 12,0 mM NaHCOs 3, 3,0 mM Na 2HPO 4, 3,0 mM K 2HPO 4, 2,0 mM MgSO 4, 1,0 mM CaCla 2, 0,1 mM N (alfa) tosyl-L-lysin klormetylketon [ ,,,0],TLCK], 10

• Ofullständig gastric metaplasi hos barn med insulinberoende diabetes mellitus och celiaki. En ultrastrukturella study
• Expression av serum MIR-20a-5p, låt-7a, och MIR-320a och deras korrelationer med pepsinogen i atrofisk gastrit och magcancer: en fall-kontroll study