Nitrogén-oxidot egy endogén inhibitora a gyomorsav-szekréció izolált humán gyomor glands

nitrogén-oxidot egy endogén inhibitora a gyomorsav-szekréció izolált humán gyomor mirigyek
Abstract
alapon
endothelialis nitrogén-oxid-szintáz (eNOS) korábban már kimutatható volt a mirigyes részét az emberi gyomor nyálkahártyáját. Továbbá a nitrogén-oxid (NO) kimutatták, hogy befolyásolja a gyomorsav szekréciót különböző állatkísérletes modellekben. A jelen vizsgálat során, hogy vizsgálja meg a befolyása a exogén és endogén úton származtatott NO hisztamin és a cAMP-stimulált gyomorsav-szekréció izolált humán corpus típusú mirigyek.
Módszerek
corpus típusú mirigyek izoláltunk humán gyomor biopsziák és ezt követően előre -kezelt NO donorok és a nitrogén-monoxid-szintáz, majd kitett hisztamin vagy dibutiril-cAMP (db-cAMP). A szekréciós válasz a mirigyek határoztuk felhalmozódása [ 14C] aminopirin.
Eredmények
A hisztamin vagy DB-cAMP-indukált savszekréciót gyengítette az L-arginin, egy ismert forrása az endogén NO , mind pedig az NO-donorok nitroprusszid-nátrium (SNP) és S-nitrozo-N-acetil-penicillamin (SNAP). Előkezelése, amelyek rendelkeznek az NOS inhibitorok N G-nitro-L-arginin-metil-észter (L-NAME) vagy N G-nitro-L-arginin (L-NNA) fokozott szekréciós választ.
Következtetés
Eredményeink azt mutatják, hogy a NO gátolja a gyomorsav-szekréció izolált humán gyomor mirigyek, és hogy van endogén képződése NO belül mirigyes hámszövet a közelében a parietális sejtekben.
alapon
Nitrogén-monoxid (NO) van előállítva L-arginin által katalizált reakció az enzim a nitrogén-oxid-szintáz (NOS) [1, 2]. NO fontos biológiai jelző molekula, amely befolyásolja a keringés szabályozása által vaszkuláris simaizom tónus és modulációs a szisztémás vérnyomást. Továbbá nem vesz részt neurotranszmisszió ez egy kritikus tényező a gyulladásos válasz és immunitás [3-5]; és kimutatták, hogy gyakoroljon pozitív hatással nyálkahártya védelem a gyomor-bél rendszerben. Több vizsgálatban (áttekintését lásd [6]), kémiailag indukált nyálkahártya-károsodás úgy tűnt, hogy csökkenthető egyidejű hozzáadásával NO és károsodott eltávolításával NO a gyomor nyálkahártyáját. Egyik magyarázata az ezeket a megállapításokat az lehet, hogy a NO növeli nyálkahártya véráramlását [7], és azt javasolták, hogy a NO növeli a kibocsátás a nyálka [8]. Valószínű, hogy a NO is részt vesz a szabályozás más szekréciós folyamatok a gyomor-bél rendszerben. Takeuchi és munkatársai [9] arról számoltak be, hogy a NO gátolja az nyombél-hidrogén-karbonát, míg más kutatók azt feltételezték, hogy hidrogén-karbonát szekrécióját serkenti NO [10, 11]. Ezen túlmenően, számos vizsgálatok azt mutatták, hogy a NO befolyásolja a gyomorsav kiválasztását [12-16].
Állatkísérletek azt szolgáltatott ellentmondó információt a kölcsönhatás a NO és a gyomorsav-szekréciót. Például in vitro vizsgálatok kimutatták, hogy a NO stimulálja a gyomorsav kiválasztását az egér [17, 18] és a kecskebéka [19]. Ezen kívül hasonló eredményeket kaptunk a kutyáknál [12]. Azonban más vizsgálatok kimutatták, hogy a NO gátolja a gyomorsav-szekréciót a patkány [13, 14], a gyomor mirigyek izolált nyúl [15], és nyálkahártyát a békák [16]. Tanulmányok Embereken szolgáltatott adatokat jelezve, hogy nem lehet egyaránt gátolja és fokozza intragasztrikus pH [20, 21], de ez még nem ismeretes, hogy ez a vegyület részt vesz a gyomorsav-szekréciót emberekben.
Egy korábbi vizsgálatban úgy találtuk, morfológiai támogatás, hogy az endogén NO szerepet játszik szabályozásában parietális sejt funkció [22]. Továbbá, a immunhisztokémiai adatok, hogy a vizsgálati jelenlétét mutatta ki endogén NOS hámsejtekben a normál humán corpus típusú nyálkahártya, pontosabban a két felületi nyálkahártya sejtek, és az endokrin sejtekben. Ezen kívül, azt tapasztaltuk, hogy nem volt szoros kapcsolat eNOS-pozitív sejtek és a parietalis sejtek vagy azért, mert az eNOS-pozitív sejtek érintkezésbe parietális sejtekben keresztül citoplazmatikus folyamatokat vagy arra invaginated egy parietális sejt. A fenti eredmények alapján, valamint a kémiai tulajdonságai nem, arra a következtetésre jutott, hogy a NO származó endokrin-szerű sejtek lehet egy parakrin szabályozója a gyomorsav-szekréciót. A jelen vizsgálatban a célunk az volt, hogy ellenőrizze a hatása az exogén NO hisztamin és a cAMP-stimulált gyomorsav-szekréciót az emberben, és azt is, hogy meghatározza, hogy az endogén módon származtatott van egy funkcionális hatás emberi parietális sejtekben.
Módszerek
Témák és etikai jóváhagyást katalógusa Huszonnégy egészséges férfiak év közötti 22-31 év vettek fizetett önkéntesek. A kiválasztási kritériumok előírta, hogy az alanyok volt mentes a betegségtől, és nem szedett gyógyszerek vagy felszívott alkohol legalább egy héttel megelőzően vizsgálatot. A férfiak böjtöltek legalább hat órával a vizsgálat előtt. Katalógusa Pharyngealis érzéstelenítés okozta lidocain spray (Xylocain ®, AstraZeneca, Södertälje, Svédország), amely után a rutin gasztroszkópia egy Olympus GIF-100 endoszkópot. Pinch biopsziacsipesszel (Olympus FB 24K-1) használják, hogy a szövetmintából a nagyobb görbület azonnal távolabbi a szemfenéki. Az összes alany a gyomor nyálkahártya úgy tűnt, hogy a normál, mind a makroszkóposan és szövettanilag. Minden vizsgált személyek negatív Helicobacter pylori fertőzés katalógusa az ureáz kilégzési teszt (Diabact ® UBT 50 mg 13C-karbamid, Diabact AB, Uppsala, Svédország).
A kísérleti eljárásokat jóváhagyta az regionális Etikai Bizottság az emberi kutatások Egyetemi Kórház, Linköping, Svédország (Fájl sz. 02-039), és valamennyi tantárgy írásos beleegyezését adta. katalógusa szekréciós tanulmány katalógusa izolálása és inkubációs gyomor- mirigyek
A jelenlegi kísérletek alapuló olyan technika, amely írták le először 1976-ban történő felhasználásra nyulak in vitro [23] és a már jól megalapozott közvetett meghatározására gyomorsav szekréció különféle stimulusok által kiváltott. A módszer a izolálására gyomor mirigyek eredetileg kifejlesztett állati szövet, de később finomítva úgy, hogy akkor is lehet alkalmazni, hogy kis mennyiségű humán szövet [24].
A humán corpus típusú nyálkahártya biopsziát használt vizsgálatunkban mostuk, és tárolt nem hosszabb, mint 15 perc alatt, jéghideg oxigénezett foszfáttal pufferolt sóoldattal (PBS). A szövet mintákat kisebb darabokra vágva egy ollóval, és átvittük oxigénezett (100% O 2) kollagenáz enzim-oldatot (130,0 mM nátrium-klorid, 12,0 mM nátrium-hidrogén 3, 3,0 mM Na 2HPO 4, 3,0 mM K 2HPO 4, 2,0 mM MgSO 4, 1,0 mM CaCI 2, 0,1 mM N (alfa) tozil-L-lizin-klór-metil-keton [ ,,,0],TLCK], 10 jiM indometacin, 10 mM glükóz, 2 mg /ml humán szérum albumin [HSA; Sigma], és 1 mg /ml kollagenáz IA típusú [Sigma]). Az elegyet helyezzük 37 ° C-os vízfürdőbe, és gyengéden kevertetjük 120 percig, ami után a legtöbb kezelt minta szétesett, így főként izolált gyomor mirigyek. Az elegyet ezt követően átszűrtük egy 200 um mesh. Az izolált mirigyek mostuk, és újraszuszpendáltuk előmelegített (37 ° C) légzési közegben (132,4 mM NaCl, 1,0 mM NaH 2PO 4, 1,2 mM MgSO 4, 5,4 mM KCI, 5,0 mM Na 2HPO 4, 1,0 mM CaCI 2, 10 uM indometacint, 10 mM glükóz, és 2 mg /ml-es HSA-t). A mirigyeket ezután átvisszük tartalmazó fiolákban friss légzőszervi médiumban, amely adtunk az alábbiak egyikét: a NOS inhibitor N G-nitro-L-arginin-metil-észter (L-NAME; 1 mmol /l) vagy ekvivalens mennyiségű annak biológiailag inaktív enantiomert N G-nitro-D-arginin-metil-észter (a D-NAME); a NOS inhibitor N G-nitro-L-arginin (L-NNA; 0,1 mmol /l); vagy a két NO donorok nitroprusszid-nátrium (SNP; 1 mmol /l) és az S-nitrozo-N-acetil-penicillamin (SNAP; 0,1 mmol /l); a szubsztrát endogén NO termelését, az L-arginin (0,1 mmol /L) [15]. Minden mirigy szuszpenziók, beleértve azokat is, amelyeket nem stimulált, inkubáltuk egy rázó vízfürdőben 37 ° C-on 30 percig, ami után adtunk hisztamin végső koncentrációja 50 umol /l vagy dibutiril-cAMP (DB-cAMP) a a végső koncentráció 1 mmol /l. Lebomlásának elkerülése érdekében ciklikus nukleotidok, adtunk 0,1 mmol /l 3-izobutil-1-methylxantine (IBMX), hogy minden stimulációt.
Meghatározása [14C] aminopirin akkumulációs arány
Egy jól bevált módszere közvetve mérésére savszekréciót által izolált gyomor mirigyek, hogy meghatározza felhalmozódása 14C-jelzett aminopirin (AP), a mirigyek magukat, és a felülúszóban centrifugálás után, majd közötti arány kiszámítására e két érték (úgynevezett AP arány) [23] . Röviden, savkiválasztás stimuláltuk 37 ° C-on 40 percig, és azután 0,5 uCi [ 14C] jelzett aminopirin adunk a fiolákba töltjük, amelyeket azután tovább inkubáljuk 37 ° C hőmérsékleten 90 percig. Ezt követően, a mirigy szuszpenziót át előzetesen kiszárított és lemért csövekbe centrifugáljuk 4000 rpm-két percig. A felülúszót eltávolítottuk, és szcintillációs fiolákba töltöttük. A pellet (mirigyek) szárítjuk 100 ° C hőmérsékleten, és a száraz tömeget meghatározzuk, és A mirigyeket később újra szuszpendáljuk 0,5 mol /l NaOH, 60 ° C-on, és szcintillációs fiolákba töltöttük. A radioaktivitást a mirigyek és a felülúszót meghatározott folyadék-szcintillációs számlálóval (1214 Rackbeta, LKB), és az AP arány segítségével számítottuk ki a következő képlet [24]:
ahol IGW van intraglandular víz mennyiség (= 2 × az száraz tömege mirigyek mg-ban).
Háttér felhalmozódása AP tartalmazza az értékeket képviselő szekréciós választ. Az AP arányok a háttér és a hisztamin-és db-cAMP-stimulált körülmények között eltérő volt a különböző egyének. Ezért minden egyes témában, mi határozza meg az AP arány stimulált mirigyek és úgy vélte, hogy az érték 100% -os, és használta, mint az egyén referenciaértéket. Minden érték alapján egyetlen elemzések. Katalógusa Statisztika katalógusa adatokat elemeztük egymintás jel vetik össze a medián értékeket MINITAB ™ Statistical Software. P-értékek 0,05-nél kisebb tekintettük szignifikánsnak.
Immunhisztokémia
izolált gyomor mirigyek öt vizsgálati alanyok helyezzük töltésű Super Frost * /Plus tárgylemezekre (Menzel-Glaser Németország), majd PBS-sel mossuk, és permeabilizáltuk 100 % -os etanollal -70 ° C-on 5 percig. Ezt követően a lemezeket szobahőmérsékleten inkubáljuk egy éjszakán át nyúl anti-NOS3 antitestet (1: 1000; Santa Cruz Biochemicals), majd alaposan mostuk PBS-ben, és inkubáltuk 1 órán biotinilezett kecske anti-nyúl másodlagos antitesttel. Diák, ahol elsődleges antitesttel hagytak ki, mint negatív kontrollok. A tárgylemezeket ezután ismét mossuk, és biotinilált antitestet való kitettség által 20 ng /ml Texas Red ® avidinnel (Vector Laboratories) 1 órán át. Követően, hogy a kezelés, a lemezeket mostuk, és lefedtük segítségével Vectashield ® rögzítő médium. A Nikon Eclipse ® E800 fluoreszcens mikroszkópot VFM EPI-fluoreszcencia mellékletet használtunk, hogy megvizsgálja és értékeli a diák. A sávszűrő hullámhossz tartományban 520-560 nm, a hosszú-pass szűrő segítségével a hullámhossz 590 nm (a kibocsátott fény) használunk, hogy szemléltesse a Texas Red ® molekulákat.
Hematoxylin és eozin festéssel
morfológiai értékelése, mirigyek fixáltuk tárgylemezre, és megfestettük Harris hematoxilin öt percig, és 0,5% eozin Y két percig. Minden lépés követte öblítés csapvízben.
Eredmények
Vizsgáltuk milyen hatással van a savszekréciót által indukált különböző stimulánsok gyomor mirigyek izolált gyomor származó biopsziák ember. Morfológiai vizsgálata a hematoxilin-eozin-festett tárgylemezeket feltárta, hogy az elkülönítési eljárás sikeresen engedett teljes mirigy készítmények és hogy parietális sejtek voltak jelen a gyomor mirigyek. Immunhisztokémiai analízis azt mutatta, hogy az izolált mirigyek tartalmazott eNOS-immunreaktív sejtek (ábra. 1), amely egyetért felhasználásával kapott eredmények más típusú nyálkahártya készítmények [22]. Kontroll kísérleteket primer antitest kizárták nem mutatott immunreaktivitást. 1. ábra Immunfluoreszcens egy izolált gyomor mirigy. Immunolocalization eNOS (nyílhegyek) egy gyomor mirigy izolált humán corpus típusú nyálkahártya alkalmazásával értük el nyúl anti-eNOS poliklonális antitest. Az eredményeket tettük láthatóvá Texas Red®-konjugált kecske anti-nyúl IgG-vel. Bár = 30 jim.
Háttér AP-felhalmozódás
Háttér AP felhalmozódás volt megfigyelhető az izolált mirigyek, a medián AP aránya 8,6 (tartomány 2,5-22,1; n = 19). Beadása után 50 jimol /l hisztamin vagy 1 mmol /l dB-cAMP, a medián AP arányok 24,7 (5,8-64,5; n = 16), és 38,2 (tartomány 7,6-47,8; n = 11) volt. A válasz mind hisztamin és a DB-cAMP meghaladta a háttér faktorral körülbelül 2-4 valamennyi készítmények (ábra. 2 és 3). 2. ábra felhalmozódása 14 C-vel jelzett aminopirinnel hisztamin-stimulált gyomorsav mirigyek. Minden érték százalékában fejezzük ki a gyomorsav-szekréció által kiváltott hisztamin (tekinthető 100%), amely külön-külön számítottuk gyomor mirigyek izolált egyes egészséges önkéntesekben. Mindegyik szimbólum az eredményeket egy egyén. a) felhalmozódása 14C-aminopirin mirigyek előkezelt az NO donor nitroprusszid-nátrium (SNP, 1 mmol /l), vagy L-arginin (0,1 mmol /l), a szubsztrát az endogén NO-termelést. Látható, hogy az SNP jelentősen csökkent AP felhalmozódás (medián = 48%; p < 0,05), ami azt jelzi, hogy a NO gátolja savkiválasztás az izolált mirigyek. Háttér 14C-aminopirinnel felhalmozódás (bg) is látható. b) felhalmozási 14C-aminopirin a gyomor mirigyek előkezelt a NOS gátló L-NNA (0,1 mmol /l) és L-NAME (1 mmol /l) volt. L-NAME okozta fokozott felhalmozódását (medián = 147%; p < 0,05), ami arra utal, hogy a sav szekréció megemelkedett, amikor az endogén NO-termelés van akadályozva, jelezve gátló szerepe az endogén NO humán gyomor mirigyek. D-NAME, amely a biológiailag inaktív sztereó-izomer az L-NAME, nem volt hatása a savszekréció, és ezért használunk kontrollként anyag.
3. ábra felhalmozódása 14 C-vel jelzett aminopirin in db- cAMP-stimulált gyomorsav mirigyek. Minden érték százalékában fejezzük ki egy értéket képviselő gyomorsav-szekréciót indukált dB-cAMP (tekinthető 100%), amely külön-külön számítottuk az egyes vizsgált alanyok. Mindegyik szimbólum az adat egy egyéni. a) előkezelés SNP (medián = 63%; p < 0,05) vagy SNAP (medián = 81%; p < 0,05), hogy engedje exogén NO hozzáadása előtt db-cAMP ösztönzése savkiválasztás csökkentette a felhalmozódása 14C-aminopirinnel a gyomor mirigyek, összehasonlítva szintje szekréció látható kezeletlen mirigyek. Ez azt jelzi, hogy a NO képes gátolni-szekréció gyomor mirigyek izolált emberre. b) kezelés L-NAME, hogy gátolják a NOS a gyomor mirigyek fokozott felhalmozódása 14C-aminopirin stimulálás után dB-cAMP (medián = 152%; p < 0,05). Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a NO gátolja db-cAMP-indukált savszekrécióra. A NO szubsztrát L-arginin csökkentette a felhalmozódása a 14C-aminopirin dB-cAMP-stimulált mirigyek (medián = 77%; p < 0,05). Háttér felhalmozódása (bg) is megjelenik. Katalógusa hatása az NO donorok és NOS inhibitorok a hisztamin-stimulálta gyomorsav elválasztást katalógusa előkezelése izolált mirigyek az exogén NO donor SNP (1 mmol /l) a hisztamin válasz medián 48% (n = 7) a válasz látható a nem előkezelt mirigyek (100%). Az ötből négy mirigy készítmények, a szubsztrát endogén NO-képződés, az L-arginin (0,1 mmol /l), csökkent az AP arány. Ez a hatás azonban nem volt statisztikailag szignifikáns (2A.). Amikor izolált mirigyeket előkezelt NOS gátló L-NAME (1 mmol /l), majd ki vannak téve, hogy a hisztamin, az AP arányt jelentősen emelkedett, a medián értéke 147% -a (n = 13). Bár egy kis számú egyén vizsgáltunk, L-NNA (0,1 mmol /l) végzett tisztítás után is hasonló eredményt; 172% -a (n = 2). Összehasonlításképpen, a kontroll kísérletekben, az L-NAME-analóg D-NAME (1 mmol /l) nem volt hatása egyáltalán hisztamin által stimulált savszekréciót (ábra. 2b).
Hatása az NO donorok és NOS inhibitorok dB -cAMP-stimulált gyomorsav-kiválasztást
Kitéve az izolált mirigyek a dB-cAMP növelte a gyomorsav kiválasztását, mint a háttér szintet. Összehasonlítva a kezeletlen mirigyek, azokat is, amelyeket előzetesen kezeljük SNP (1 mmol /l) vagy a SNAP (0,1 mmol /L) felhalmozott kevesebb AP stimulálás után dB-cAMP; 63% (n = 9) és 81% (n = 8), illetve (ábra. 3A). Továbbá, hasonló a hisztamin által stimulált szekréciót, a DB-cAMP-indukált szekréció emelték medián 152% (n = 9) a mirigyek, hogy volt előkezelve az L-NAME (1 mmol /l). Bár nincs hatása az L-arginin hisztamin által stimulált savszekréciót lehetett látni, nem volt szignifikáns hatása az L-arginin dB-cAMP-indukált szekréciót. A savszekréciót gátolni a medián 77% (n = 10) az említett előkezelt L-arginin (0,1 mmol /l) (ábra. 3b).
Megbeszélés
a módszer segítségével izolált gyomor mirigyek in vitro kiválóan alkalmas közötti interakció vizsgálata a gyomorsav-szekréciót és a különböző endokrin jeleket. Ez a technika már alaposan értékelték, főként állatkísérletek, és arról számoltak be, hogy kínálnak jó reprodukálhatóság [23]. Továbbá, egy tanulmány gyomor mirigyek izolált gyomor biopsziával vett emberre [24], azt találták, hogy mind a hisztamin és a DB-cAMP indukált szekréciós válaszok voltak reprodukálhatók, ha megismételjük mirigy készítményeket az azonos tárgyú, bár nem volt jelentős interindividuális variáció. Fellenius et al. [24] és Haglund és mtsai. [25] arról számoltak be, hogy mind a hisztamin és a DB-cAMP által stimulált gyomorsav-szekréciót izolált humán gyomor mirigyek, és ez volt megfigyelhető, mint a két-háromszorosára növeli az AP felhalmozódás képest háttér szintet. Azok az eredmények egyeznek a kapott adatok segítségével a hisztamin és a db-cAMP. Ismeretes, hogy az SNP NO szabadul fel [26], és kísérleteink SNP csökkentett gyomorsav izolált mirigyek. Ezért nem gátolja a sav szekréció izolált humán gyomor mirigyek. Néhány hatásainak SNP oka lehet citotoxikus kölcsönhatások, bár ez a hatás nem találtak egy tanulmány izolált nyúl gyomormirigyben [15]. Hogy kizárjuk annak lehetőségét, hogy a citotoxikus hatása végeztünk kiegészítő kísérleteket az NO donor SNAP, amelynek kémiai tulajdonságok, amelyek eltérnek a SNP. Ezekben a kísérletekben megfigyeltük azonos csökkenése AP felhalmozódás stimulálás után db-cAMP, ami tovább azt a következtetést, hogy a NO valójában felelős a megfigyelt eredményeket. A DB-cAMP által stimulált mirigyek, az indukált kiválasztási válasz csökkent L-arginin, egy vegyület, amely attól függ, hogy egy endogén faktor (azaz eNOS) generálni NO, bár ez a csökkenés nem volt olyan hangsúlyos, mint a csökkenés által indukált SNP és SNAP. Számos lehetséges magyarázat, hogy a megfigyelés. Ha volt már elég L-arginin a mirigyek fenntartásához NO termelés idején a kísérlet, L-arginin volt tehát hatás nélkül. Továbbá, az L-arginin lehet, hogy volt egy gyenge hatást, mert a hatást a NO történt keresztül felfelé vagy lefelé szabályozása az enzim NOS és nem befolyásolta a szubsztráthoz való hozzáférést. Ellenére, L-arginin nem csökkenti a felhalmozódása AP, bár nem annyira, mint az exogén NO donorok tette a jelen dózisokban. Ez azt jelzi, hogy egyes specifikus eljárás létrehozásáért felelős NO L-arginin izolált gyomor mirigyek. Ezek az eredmények összhangban vannak vizsgálatok kimutatták, hogy az SNP, SNAP, és az L-arginin gátolta a hisztamin által stimulált savszekréciót származó gyomor mirigyek állatokból izolált [13, 15]. L-arginin is megfigyelték, hogy csökkenti carbachol-stimulált gyomorsav-szekréció varangyok [16].
Egy korábbi tanulmány szerint a kutatócsoport [22] vizsgálata a mirigyes hámszövet egyedeinek emberi corpus típusú nyálkahártya kiderült, hogy az egyik bizonyos típusú sejtek tartalma NOS. Ezek eNOS-immunreaktív sejtek, amelyek a endokrin sejtekben, szoros kapcsolatban álltak a parietális sejtekben. Ez a két jellemzők arra utalnak, hogy a sejtek az ilyen típusú engedély Nincs, amely így lehet egy parakrin szabályozó, amely közvetlenül befolyásolja a funkció a parietális sejtekben. Ez a feltételezés lehet támogatni számos egyéb feltételeknek. Például nincs könnyen behatolnak a sejtmembránon, ami arra utalhat, intracelluláris hatás helyén. Szintén nem a meglehetősen rövid élettartama, ami azt jelenti, hogy források létrehozásához szükséges ennek oxid rendelkezésre kell állnia, közel a NO megcélzott sejt. Ebben a vizsgálatban, az esemény a eNOS a mirigyek látható, de korábban kiterjedt vizsgálatok elleni antitestek felhasználásával egyaránt nNOS és iNOS nem mutattak bármelyike ​​jelenlétének a két izoforma a mirigyes hámszövet normál humán alanyok (nem publikált megfigyelés). Hasonló a kapott eredményeket egy tanulmány izolált nyúl gasztrikus mirigyek [15], azt találtuk, hogy a NOS-inhibitorok L-NAME és L-NNA, de nem a D-NAME, amplifikált a-kiválasztást stimuláló hatása hisztamin, ami tovább jelzi, hogy a izolált emberi mirigyek használtuk szereplő enzim NOS. Mind a növekedés a AP arány, amit követően megfigyelt gátlása NOS és a csökkenés a szekréciós válaszokat, hogy mi megjegyezte mirigyek kezelt L-arginin erősíti azt a hipotézist, hogy a NO által termelt sejtek a mirigyes hámszövet és, amikor megjelent, ez zavarja a stimulált gyomorsav-szekréciót. Érdekes, hogy a említett megfigyelések arra utalnak, hogy a kibocsátás a NO tartós, függetlenül attól, hogy savszekréció serkenti, ami azt jelenti, hogy a NO funkcionál endogén inhibitora a gyomorsav-szekréciót. Ennek intenzitását gátlás valószínűleg számától függ az eNOS-t tartalmazó endokrin-szerű sejtek, amelyek jelen vannak a közelben a parietális sejtekben.
A pontos mechanizmus mögött parakrin szabályozásában gyomorsav-szekréció még nem tisztázott. Számos különböző utak a parietális sejt, amely hatással lehet az NO. Ez okozhat ADP ribozilációs G-aktin [27], így befolyásolva a citoszkeleton. Ez lényeges lehet a morfológiai változások, parietális sejtekben kiállítás alatt savszekrécióra. Ennek megfelelően, ha a NO nem egy tartós hatással egy elem, mint például a citoszkeleton, lehet, hogy szerepet játszanak a membrán újrahasznosítás hipotézis által javasolt Forte és munkatársai. [28]. Röviden, ez az elmélet arra utal, hogy a parietális sejtek mennek keresztül, a következő morfológiai eltéréseket: van egy nagy aktív szekréciós felületen a stimuláló fázis, és megjeleníti a minimális aktív szekréciós felület alatt a nyugalmi fázisban.
Mivel ismert, hogy a guanilát-cikláz általános cél az NO számos sejtrendszerekben, néhány kutató azt javasolták, hogy a NO fejti ki a hatását keresztül a ciklikus guanozin-3 ', 5'-monofoszfát (cGMP) mindkét patkány és nyúl parietalis sejtek [13, 15]. Egy folyamatban levő tanulmány laboratóriumunkban fogja megmutatni, hogy ez a helyzet az emberi parietális sejtekben. Downstream hatásai cGMP lehetnek aktiválását számos effektorok, például ion-csatornák, a protein kinázok, és foszfodiészterázok [29]. Az is valószínű, hogy az NO képes kifejteni hatását egyedül, anélkül, hogy át ható egyéb jelátviteli molekulák. Kísérleti körülmények között, NO indukálhat nitrosylation és a nitrációs celluláris fehérjék, bár ez valószínűleg nem az in vivo, mivel ez a két folyamat eredményeként gyakran maradandó károsodását életfunkciók [30]. Fennáll annak a lehetősége, hogy az elnyomása savszekréció fordul nemcsak parietális sejt szinten, de keresztül más sejttípusokban. ECL-sejtekben valószínűleg jelen a mirigyes készítmény és a patkány, ezek a sejtek képesek hisztamin válaszul a megnövekedett a cAMP intracelluláris szintjét [31]. NO képes gátolni ezt hisztamin felszabadulást [14], és ezáltal tovább hozzájárulnak a savszekréció gátlása. Annak ellenére, hogy kevéssé ismert emberi ECL sejtek és milyen hatással van a hisztamin felszabadulást vannak vizsgálatok, amelyek azt mutatják, fajok közötti különbségek más hisztamin termelő sejtek. Például patkány hízósejtek kimutatták, hogy készítsen "NO-szerű faktor", amely gátolja a hisztamin felszabadulást [32], míg vannak olyan vizsgálatok, amelyek azt jelzik, hogy az NO nem befolyásolja a hisztamin-szekréció a humán basophil [33]. Jelenleg csak akkor tudjuk létrehozni különbségek gátló válasz l-arginin, a hisztamin és a db-cAMP stimuláció.
További vizsgálatok szükségesek annak tisztázására, a NO szerepét parietális sejtek működését. Katalógusa Következtetések katalógusa megállapításai a jelen tanulmány azt sugallják, hogy az NO endogén módon termelődik az emberi corpus típusú nyálkahártya csökkentheti a stimuláló hatást a hisztamin vagy dB-cAMP a gyomorsav szekrécióra. Kaptunk egységes eredménye gyomormirigyben izolált különböző egészséges embereken, ami azt jelenti, hogy az NO szabadul specifikus sejtek a szekréciós nyálkahártya fontos fiziológiai szabályozásában szerepet a gyomorsav-elválasztást. Katalógusa nyilatkozatok katalógusa Köszönetnyilvánítás katalógusa köszönetet mondunk Ulf Hannestad elvégzéséért ureáz levegőt tesztek, Inga-Lill Andersson és Gunilla Strand segítséget a gasztroszkopikus eljárásokat és Marja Tjädermo a technikai segítségnyújtás. Ezt a munkát támogatja AstraZeneca R & D, Svédország. Katalógusa Szerzők eredeti beküldötteknek képeket
alábbiakban a linkeket a szerzők eredeti beküldötteknek képeket. 12876_2004_88_MOESM1_ESM.ppt A szerzők eredeti fájlt az 1. ábra szerinti 12876_2004_88_MOESM2_ESM.ppt A szerzők eredeti fájl 2. ábrán 12876_2004_88_MOESM3_ESM.ppt A szerzők eredeti fájl 3. ábra Érdekütközés katalógusa Nincs bejelentett. Katalógusa

• Hiányos gyomor metaplasia gyermekek inzulinfüggő diabetes mellitus és a cöliákia. Egy elektronmikroszkópos vizsgálat
• Expression szérum miR-20a-5p, let-7a, és miR-320a és korrelációk pepszinogén a sorvadásos gyomorhurut és gyomorrák: eset-kontroll vizsgálat